内容正文:
第二课时 获取目的基因和构建重组DNA分子
第四章
2021
内容索引
01
02
课前篇 自主预习
课堂篇 探究学习
素养目标
课前篇 自主预习
一、获取目的基因
1.基因工程的基本操作步骤
2.基因的结构
3.获取目的基因的方法
4.PCR技术
【微思考】 用PCR可以扩增mRNA吗?
提示 不能。PCR的原理是DNA的半保留复制,只可用于扩增DNA。
自我检测
1.获取目的基因是基因工程操作的第一步。判断下列关于获取目的基因方法描述的正误。
(1)化学合成法合成目的基因成本较高,适合合成序列较长的基因。( )
(2)由于基因的选择性表达,不同组织细胞的cDNA文库是不同的。( )
(3)PCR需要耐高温的Taq DNA聚合酶、解旋酶、4种脱氧核苷三磷酸和DNA模板,除此之外,还需要引物等基本条件。( )
×
√
×
(4)PCR的每一个循环都包括变性、退火、延伸三个步骤,延伸后的产物又可以作为下一个循环的模板。( )
(5)PCR过程中,温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应。( )
(6)用PCR扩增目的基因时,不必知道基因的全部序列。( )
√
×
√
2.下列有关PCR技术的说法,错误的是( )
A.PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术
B.PCR技术的原理是DNA半保留复制
C.利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列
D.PCR扩增中需要解旋酶解开双链DNA
答案 D
解析 PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,其原理是DNA半保留复制,A、B两项正确;利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物,C项正确;PCR扩增中,双链DNA受热变性后解旋为2条DNA单链,不需要解旋酶解开双链DNA,D项错误。
二、活动:PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定
1.PCR扩增DNA片段
2.琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物
【微思考】 本实验能不能达到对DNA片段进行提纯的目的?如何实现?
提示 能。观察到电泳结果后,可将含有目的DNA条带的凝胶用刀片切割下来,回收凝胶中的DNA,从而达到提纯的目的。
自我检测
1.PCR产物可利用电泳技术来鉴定,该技术是分离、鉴定、纯化核酸和蛋白质的常用方法。判断下列有关