内容正文:
课时跟踪检测(十二) 基因工程的发展及其基本工具
一、选择题
1.在基因工程中,可作为基因的“针线”的是 ( )
A.限制性内切核酸酶 B.DNA连接酶
C.DNA聚合酶 D.基因的载体
2.(2025·浦江中学月考)作为基因工程中理想的载体,应具备的条件是 ( )
①必须有一种或多种限制酶的识别序列,以便目的基因可以插入到载体上
②载体必须具备自我复制的能力,或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制
③必须带有标记基因,以便进行重组后的筛选
④必须是安全的,不会对受体细胞有害,或不能进入除受体细胞外的其他生物细胞中去
A.①③④ B.②③④
C.①②④ D.①②③④
3.(2025·余姚中学月考)有关E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用的叙述,正确的是 ( )
A.T4 DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来
B.E·coli DNA连接酶只能在双链DNA片段平末端之间进行连接
C.T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端
D.E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都不能连接磷酸二酯键
4.下列有关基因工程操作工具的叙述,正确的是 ( )
A.限制性内切核酸酶将DNA双链剪切成两条单链
B.限制性内切核酸酶的基因只存在于微生物中
C.质粒通常具有多个限制性内切核酸酶识别位点,以便与外源基因连接
D.将动物基因转入大肠杆菌等宿主细胞内只能以病毒为载体
5.下列有关基因工程工具的叙述,正确的是 ( )
A.载体的作用是携带目的基因进入受体细胞,使之稳定存在并表达
B.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为鉴定和筛选的标记基因
C.限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶
D.DNA连接酶能将游离的脱氧核苷酸连接到已有的DNA片段上
6.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶基因a,通过基因工程的方法,将耐高温淀粉酶基因a与载体结合后导入马铃薯细胞中,经培养后检测发现耐高温淀粉酶在成熟马铃薯块茎细胞中存在。结合图示分析下列有关这一过程的叙述,正确的是 ( )
A.获取耐高温淀粉酶基因a的限制酶的作用部位是图中的②
B.基因工程所用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶
C.连接耐高温淀粉酶基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的①
D.一种限制酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子
7.如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(表示切点)。下列相关分析正确的是 ( )
A.这三种限制酶切割出的DNA片段的黏性末端长度相同
B.不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同
C.能被限制酶1切割的DNA也能被限制酶3切割
D.同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等
8.(2025·义乌一中月考)下图是利用基因工程的方法生产人胰岛素的示意图。下列说法错误的是 ( )
A.原理是基因突变和基因重组
B.能够定向地改造细菌的性状
C.质粒为小型环状DNA分子
D.需要限制酶和DNA连接酶的催化
9.(2025·嘉兴一中高二检测)限制酶是一类核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列,箭头表示每一种限制酶的特定切割部位。据图判断哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补结合,其正确的末端互补序列为 ( )
A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列AATT
B.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列GATC
C.BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列GATC
D.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列AATT
10.下表为常用的限制性内切核酸酶及其识别序列和剪切位点,由此推断以下说法,错误的是 ( )
限制性内切
核酸酶名称
识别序列和
剪切位点
限制性内切
核酸酶名称
识别序列和
剪切位点
BamHⅠ
KpnⅠ
EcoRⅠ
Sau3AⅠ
HindⅡ
SmaⅠ
注:Y=C或T,R=A或G。
A.HindⅡ、SmaⅠ两种限制性内切核酸酶剪切后可能形成平末端
B.Sau3AⅠ限制性内切核酸酶的剪切位点在识别序列的外部
C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制性内切核酸酶剪切后形成相同的黏性末端
D.一种限制性内切核酸酶一定只能识别一种核苷酸序列
二、非选择题
11.下图所示为一种限制性内切核酸酶剪切DNA分子的示意图,请据图回答下列问题:
(1)这种限制性内切核酸酶的切点在图中 ,形成 个黏性末端。
(2)由图可知限制性内切核酸酶的作用特点是
。
(3)如果A突变成G,则突变最可能发生在 过程中,结果使该限制性内切核酸酶
。
课时跟踪检测(十二)
1.选B 在基因工程的操作中,DNA连接酶能将不同来源的2个DNA分子的双链通过磷酸二酯键分别连接起来,是基因工程的“针线”。
2.选D 作为基因工程中理想的载体,应具备的条件是①②③④。
3.选C E.coli DNA连接酶只能连接具有互补黏性末端的DNA片段,不能连接具有平末端的DNA片段;而T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端;E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都能连接磷酸二酯键。
4.选C 限制性内切核酸酶将一个DNA双链剪切成两个双链DNA分子片段,而不是剪切成两条单链,A错误;限制性内切核酸酶主要存在于细菌等微生物中,故限制性内切核酸酶的基因主要存在于细菌等微生物中,而不是只存在于微生物中,B错误;质粒是一种常用的载体,必须具备的条件之一是具有一种或多种限制性内切核酸酶识别位点,以便与外源基因连接,C正确;常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等,可用质粒和噬菌体作为载体,将动物基因转入大肠杆菌等宿主细胞内,D错误。
5.选A 载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达,A正确;载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因,用于筛选含有目的基因的细胞,B错误;质粒的化学本质是环状的DNA分子,不属于工具酶,C错误;DNA连接酶能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来,D错误。
6.选C 限制酶的作用部位是图中的①磷酸二酯键,A错误;基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶,没有DNA聚合酶,B错误;连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的①磷酸二酯键,C正确;一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子,D错误。
7.选B 由图可知,这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端,但长度不都相同,A错误;不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同,如限制酶1和限制酶3切割DNA所得黏性末端相同,B正确;能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割,但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割,故同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等,C、D错误。
8.选A 基因工程的原理是基因重组,A错误;基因工程能够定向地改造生物的性状,B正确;质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子,C正确;基因工程需要限制酶和DNA连接酶,D正确。
9.选B 限制酶切割出来的DNA片段末端如要互补结合,其黏性末端需互补,即一种酶切的末端正向序列与另一种酶切的末端反向序列互补。由题可知,BamHⅠ和BglⅡ酶切割出来的DNA片段末端可以互补结合,其末端互补序列是GATC。综上所述,B正确。
10.选D 若Y=C,R=G或Y=T,R=A时HindⅡ、SmaⅠ两种限制性内切核酸酶沿着中轴线切口切开,剪切后可形成平末端,A正确;Sau3AⅠ限制性内切核酸酶识别GATC序列,剪切位点在识别序列的外部,B正确;BamHⅠ和Sau3AⅠ剪切后形成相同的黏性末端,C正确;一种限制性内切核酸酶也可以识别多种核苷酸序列,如HindⅡ可以识别多种核苷酸序列,D错误。
11.解析:(1)根据图示限制性内切核酸酶剪切DNA分子产生的黏性末端可知,这种限制性内切核酸酶的切点在图中A和C之间,剪切后形成了2个黏性末端。
(2)由图可知,限制性内切核酸酶识别特定核苷酸序列(图示中为ACCGGT),并使特定部位的两个核苷酸(图中为A和C)之间的磷酸二酯键断开。
(3)A突变成G即为碱基的替换,表示基因突变,最可能发生在DNA复制的过程中;A突变成G即图示中识别序列由ACCGGT变为GCCGGT,结果会使该限制性内切核酸酶不能识别该剪切位点,无法对该位点进行剪切。
答案:(1)A和C之间 2 (2)识别特定核苷酸序列,并使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 (3)DNA复制 不能识别该剪切位点
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