内容正文:
实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
导学案
【学习目标】
1. 尝试用吸附法制作固定化α-淀粉酶。
2. 应用固定化α-淀粉酶进行淀粉水解的测定。
3. 说明酶固定化的方法及制作原理。
4. 通过此实验探讨固定化酶的应用价值。
一、基础盘点:酶与固定化酶
1.酶:活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂。
2.固定化酶:将________的酶用________或________方法________,使之成为________而又有________的制剂。
3.将酶改造成固定化酶的原因是:由于酶________,且不利于________,所以要将酶改造成固定化酶。
4.酶固定化的方法有:________法、________法、________法和________法等。本实验用的是________法。
5.固定化酶作用的机理:将固定化酶________,当________时,在________的作用下________。
二、自主探究:α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验
1. 实验目的:
(1)制备 。
(2)进行 的测试。
2. 实验原理:用 法将α-淀粉酶固定在 上。一定浓度的淀粉溶液经过 后,可使淀粉水解成 。用 ( )测试,若流出物呈________色,表明有________生成。
淀粉 葡萄糖
遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色
3.本实验使用的酶及特性:本实验使用的酶是 的α-淀粉酶,其作用的最适宜pH为________,最适宜温度为________。
4. 实验设备及用品:5 mL塑料注射器、50 mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。
5.实验材料及其制备:
⑴α淀粉酶的固定化:在烧杯中将5 mg 溶于4 mL 中 (由于 ,可能有些不溶物); 再加入5g________,不时搅拌30 min;然后将上述溶液装入1支注射器中 (该注射器的下端接有________并用________封住),石英砂体积约4 mL用 倍体积的蒸馏水_______此注射器以除去 ,流速为1 mL/min。
⑵可溶性淀粉溶液:取________mg可溶性淀粉溶于100 mL________中,搅拌均匀。
⑶可溶性淀粉溶液:称取0.127 g 和0.83 g 。加蒸馏水100 mL,完全溶解后装入滴瓶中。
6. 实验步骤:
固定化α-淀粉酶,装入注射器中
↓
以0.3mL/min的流速滴加 过柱
↓
流出5mL的淀粉溶液后接收0.5mL流出液
↓
滴加 溶液,观察颜色。用水稀释____倍后再观察颜色。
↓
用_____倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化柱。放置在____℃冰箱中,几天后重复实验
7.预期实验结果:
三、我的困惑:
四、实验优化方案:
5、 最终实验结果
样品
水
淀粉溶液
淀粉滤液
KI-I2溶液
稀释1倍
结果
① 对照
+
-
-
+
-
②样品1
-
+
-
+
-
③样品2
-
-
+
+
-
④样品3
-
-
+
+
+
你的实验达到预期实验结果了吗?若没有,请分析失败原因。
六、真题感悟
1、(2013浙江自选,17)利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请回答:
⑴由于酶在水溶液中不稳定,因此常将酶固定在某种介质上制成 。
⑶紫甘薯匀浆流经α-淀粉酶柱后,取适量流出的液体,经脱色后加入KI-I2溶液,结果液体呈红色。表明该液体中含有 。
A. 淀粉 B. 糊精 C. 麦芽糖 D. 葡萄糖
2、(2014浙江自选,17)
(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验,分组见下表。
组别
固定化酶柱长度(cm)
淀