河南省林州市第一中学 生物人教版（选修一 生物技术实践）5.3 血红蛋白的提取和分离 导学案

选修1课时14 血红蛋白的提取和分离 班级:__________姓名:__________设计人__________日期__________ 课前预习 · 预习案 学习目标 1 1．了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。 2．体验提取生物大分子的基本过程和方法。 自主梳理 1 1．蛋白质的分离原理： 根据蛋白质各种特性的差异分离不同种类的蛋白质，如分子的________、所带电荷的________、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等。 2．凝胶色谱法： (1)概念：也称做________，是根据________分离蛋白质的有效方法。 (2) (3)分离原理： 分离物质[来源:学科网ZXXK] 通道 路程 速度 相对分子质量较大 凝胶外部 ______ 较快 相对分子质量较小 ________ 较长 _____ 3．缓冲溶液： (1)组成：通常由1〜2种________溶解于水中配制而成。 (2)作用：抵制外界的酸和碱对________的影响而保持其稳定。 4．电泳： (1)概念：指________在电场的作用下发生________的过程。 (2)原理：电泳利用了待分离样品中各种分子________以及分子本身的________的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 (3)两种常用方法：________和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 5．血红蛋白的提取和分离： (3)________(即样品的加入和洗脱)：________。 (4)纯度鉴定：________________。 6．凝胶色谱操作： (1)凝胶色谱柱的制作。 ①取长40 cm，内径为1.6 cm的玻璃管，________。 ②选择适合封堵玻璃管口的________，中间打孔，孔径大小要能够紧密插入0. 5 mL的移液管。 ③将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴，将0. 5 mL的________头部切下5 cm长的一段，插入橡皮塞孔内，插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。 ④将尼龙网覆盖在橡皮塞的凹穴上，再用________将橡皮塞上部包好，插到玻璃管的一端。 ⑤在色谱柱下端用________头部作出口部位，连接一细的尼龙管；并用螺旋夹控制尼龙管的打开与关闭， 尼龙管的另一端放入收集器内。 ⑥柱顶部的制