苏教版高中生物选修一1.2《分离特定的微生物并测定其数量》实验课件 （共29张PPT）

第二节 分离特定的微生物并测定其数量 1．掌握涂抹平板法或混合平板法。 2．掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。 3．观察各种微生物形成的菌落。 微生物种类多样，也有多种代谢类型。 根瘤菌，为固氮菌，可固定空气中的氮气 假单孢杆菌，可以分解石油的超级细菌。 尿素是一种重要的农业氮肥，人类和其他哺乳动物的尿中都含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。 既然微生物有多种代谢类型，那么有没有能降解尿素的微生物呢？今天我们就试试能不能从土壤中分离出以尿素为氮源的微生物。 筛选菌株 1 统计菌落数目 2 实验中涉及的问题 3 筛选菌株 1 1、实例：DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（93 ℃）的DNA聚合酶。 原因：因为热泉温度70～80 ℃，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等； 方法：⑴抑制大多数微生物不能生长；⑵造成有利于该菌生长的环境。 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。 2、实验室中微生物的筛选原理： 培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 3、培养基选择分解尿素的微生物的原理 统计菌落数目 2 1、显微镜直接计数： 利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； 缺点 2、间接计数法（活菌计数法） ⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。 ⑵常用方法：稀释涂布平板法。 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。 计数法 直接计数法 平板计数法 比浊法 膜过滤法 实验中涉及的问题 3 1、哪些土壤中含有这种以尿素为氮源微生物多？ 2、此实验用到的选择培养基需含有哪些物质？ 3、