内容正文:
分离特定的微生物并测定其数量(第 1 课时)
要分离微生物,必须根据它的特点,包括营养、生理、生长条件等,采用选择培养的方法,经过一定时间的培养后,使这种微生物在群落中的数量不断增加,在通过平板稀释法等进行纯培养分离。
微生物纯种分离
将多种混杂微生物,经某种技术或方法分离成纯种的过程
纯培养(pure culture)
在适宜条件下培养纯种获得的培养物(群体)
单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,称为菌落(colony)。
菌落
一个菌落是一个纯种,也是一个纯培养;
单个微生物只在固体培养基上形成菌落;
在液体培养基中不会形成菌落
同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落
菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等。每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下,菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
微生物样品
多种混杂
某种方法
分散成单个微生物
平板
培养
单菌落
每个菌落为纯种(纯培养)
单菌落转接培养
纯种(纯培养)
微生物纯种分离的原理和方法
一、用固体培养基(营养琼脂平板)分离纯种
平板分离法:将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面,每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个菌落
项目 操作 特点 结果
涂布平板法 取一定稀释度的样品_____ 平板
↓
用无菌玻璃涂布器将样品涂布均匀 ____________________ 细菌菌落通常仅在_________生长
混合平板法 取一定稀释度的样品与熔化的培养基混合 ↓
将与样品混合后的培养基倒入无菌培养皿 ____________________________ 细菌菌落出现在_______________
涂布
先制作平板后加
入菌液
菌液与培养基混
合,共同倒平板
平板表面
平板表面和内部
二、选择培养分离
创造适于目的微生物生长条件
原理:
促使目的微生物快速生长呈优势菌
抑制非目的微生物生长
从混杂微生物中分离目的微生物
利用选择培养基进行直接分离
选择培养基
只允许特定微生物生长,而同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。
举例
a.要分离耐高温菌,可在_____条件下进