内容正文:
第一节 微生物的分离和培养
1.了解有关培养基的基础知识;
2.掌握无菌操作技术;
3.了解纯化大肠杆菌的基础知识。
19世纪中期,法国的酿造业在生产过程中,出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。
微生物是结构简单、形体微小,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
今天我们就以大肠杆菌为例学习微生物的培养与分离。
微生物
1
培养基
2
无菌技术
3
微生物
1
1.特点:结构都相当简单,个体多数十分微小,通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构,且体内一般不含有叶绿素,不能进行光合作用。
2.微生物包括五类
病 毒
细 菌
放线菌
真 菌
原生动物
培养基
2
培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
固体培养基 液体培养基 半固体培养基
1.培养基的类型
成分区别:琼脂
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方
细菌喜荤,霉菌喜素
大肠杆菌配方
酵母提取物:0.25g 蛋白胨:0.5g
Nacl:0.5g 琼脂:1g 水:50ml
3.培养基内所含的基本物质
①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐
②其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
4.培养基的用途
液体培养基:增菌、工业生产
固体培养基:纯化(分离),
鉴定、活菌计数、
保藏菌种
半固体培养基:动力检测
无菌技术
3
1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键!
(1)消毒定义:
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
(2)灭菌的定义:
是指杀灭病原微生物的方法。
是指杀灭或清除环境中一切微生物(包括芽胞、孢子)的方法
a.灼烧灭菌
3.常用灭菌的方法
b.干热灭菌:
160-170℃ 下加热1-2h。
c.高压蒸气灭菌:
100kPa、121℃ 下维持15-30min.
配制培养基
包器材
灭菌
菌种扩增
倒平板
接种、划线
培养
观察记录
实验操作
配