1.2微生物的培养技术及应用练习题2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

**基本信息** 聚焦微生物培养技术，通过基础辨析、情境应用、综合探究三层设计，实现从概念理解到实验操作的知识巩固，适配新授课分层教学需求。 **分层设计** |层次|知识覆盖|设计特色| |----|----------|----------| |基础层|单一操作原理（如稀释涂布平板法、培养基成分）|以选择题辨析核心概念（如第1-4题考查培养技术原理）| |进阶层|情境化应用（如古代酿酒、菌株分离）|结合实例考查操作逻辑（如第5题古代酿酒技术分析）| |综合层|实验流程与数据处理（如筛选流程、活菌计数）|通过填空整合实验步骤与计算（如第11题高产菌株筛选与计数）|

2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修三 1.2微生物的培养技术及应用 练习题 一、选择题 1 . 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（        ） A．菌落中的细菌数目是固定的 B．平板上的一个菌落就是一个活菌 C．通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D．平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 2 . 某同学从土壤中分离得到混杂多种微生物的菌样，欲采用平板划线法纯化目标细菌，下列相关叙述正确的是（        ） A．划线前将接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌，划线结束后不需要再灼烧 B．每次划线都从上一次划线的末端开始，是为了将菌种逐步稀释以便获得单菌落 C．在划线的各个区域中，菌落数量最多的是最后划线的区域 D．平板划线法既可用于微生物分离，也可用于统计活菌的数目 3 . 海南热带雨林是全球生物多样性热点地区之一，科研人员从五指山热带雨林土壤中分离出能分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是（       ） A．选择的培养基应以纤维素为唯一碳源 B．鉴定纤维素分解菌时常用刚果红染色法 C．培养过程中需将pH调至中性偏碱 D．振荡培养有利于微生物与营养物质充分接触 4 . 下列有关培养基配制原则的表述，错误的是（        ） A．微生物培养基一般含有碳源、氮源、无机盐和水等营养物质 B．为微生物生长提供氮源的物质也可能为微生物提供碳源 C．增加培养基中各种营养物质的浓度能够提高微生物的数量 D．配制培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌处理 5 . 《礼记·月令》中记载“秫稻必齐，曲糵必时，湛炽必洁，水泉必香……”，这是对先秦酿酒技术的总结。其中“曲糵”指酒曲，含有多种微生物；“湛炽必洁”强调用具洁净。下列分析错误的是（       ） A．“秫稻必齐”要求原料颗粒饱满，且无霉变，以防止杂菌污染 B．“曲糵必时”本质上是控制微生物生长的温度、湿度等环境条件 C．“湛炽必洁”是利用高温杀死器具上的杂菌，与现代发酵工程中的灭菌原理相同 D．“水泉必香”强调酿酒用水的质量，优质水能为微生物提供必需的无机盐和微量元素 6 .  香菇是一种异养型真菌，其营养体是一种丝状菌丝体。香菇试管种（母种）的制作是香菇人工栽培的关键环节，通常是在PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）上接种香菇菌丝后置于适宜条件下培养，获得纯化菌丝体。下列叙述错误的是（        ） A．对香菇菌丝进行纯化培养时，可采用平板划线法使菌丝分散，从而便于计数 B．PDA培养基进行高压蒸汽灭菌时，通常在121℃条件下维持15～30分钟 C．培养基中的马铃薯和葡萄糖均可为香菇菌丝的生长提供碳源 D．配制PDA培养基时加入琼脂，其主要目的是作为凝固剂以获得固体培养基 7 .  植酸磷是植物或饲料中磷的主要储存形式，由于动物体内缺少分解植酸磷的植酸酶，导致植酸磷在动物体内的利用率很低，造成磷的浪费。科研人员从土壤中分离了五种能产生植酸酶的细菌菌株，培养它们的培养基中能出现分解植酸磷的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述正确的是（        ） A．从土壤取样和土样稀释的过程均不需要进行无菌操作 B．同一稀释度下，稀释涂布平板法与细菌计数板统计的菌落数相同 C．平板上生长的a菌株是产植酸酶的理想菌株，应对其扩大培养 D．若平板中平均菌落数为150个，则1g土壤中含有细菌1.5×108个 8 . 某兴趣小组按下图所示步骤开展了“土壤中尿素分解菌的分离与计数”实验，相关叙述正确的是（        ） A．步骤①应从酸性土壤中取样，土样及器具需进行灭菌处理 B．步骤②③所用的培养基均以尿素为唯一碳源 C．步骤④的梯度稀释中，可用同一支灭菌移液管依次完成各试管的稀释操作 D．步骤⑥应每隔一段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果 二、填空题 9. 某研究小组欲测定土壤中某细菌的数量，按下图流程进行相关实验。回答下列问题： (1)图示实验所采用的接种方法是_______________________，该方法可以用于统计细菌的数量，其原理是___________________________________________________________________________________________。 (2)图中5号试管的稀释倍数为____________倍，若接种量为0.1 mL，则每克土壤样品中的活菌数为____________个。 (3)实验中所使用的接种工具是____________，对该接种工具采用____________法进行灭菌。 (4)若要进一步鉴定该细菌的种类，可以肉眼观察细菌在固体培养基上所形成菌落的___________________（答出2点）等特征来进行初步判断。某些细菌能分解尿素，其原因是________________________________________________________________________________________，筛选这些细菌时，培养基中应以____________作为唯一氮源。 10. 养殖场粪便堆肥沤肥是重要的农家肥来源，某些微生物能使粪便中的氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选出能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，实验小组的相关实验流程如下，据此回答下列问题： (1)过程①通过________________法将畜禽粪便样品接种到__________（填“选择”或“鉴别”）培养基上，筛选出利用氨氮化合物的微生物。 (2)过程②筛选出的菌落在a、b培养基上的生长情况为       。 A．a、b中均能生长 B．a中能生长，b中不能生长 C．a中不能生长，b中能生长 (3)过程③可通过向上清液中添加_________并检测其活性来区分菌种甲和乙。 (4)综合分析，将菌种_____添加在养殖场粪便中，可以更有效地降低堆肥沤肥过程中产生的NH3对禽畜健康的影响，理由是 ________________________________。 11. 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8，并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。 (1)要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入_____________，配制好的培养基通常采用的灭菌方法是___________________，挑取a培养基平板上的菌落进一步纯化时，下列图示中正确的操作示意图为___________________。 A.              B.              C.  (2)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是___________________（填序号）。 ①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶；③实验操作者的双手；④操作空间；⑤接种用具 (3)b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，菌落直径/透明圈直径的比值___________（填“大”或“小”）的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。 (4)He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选，若取某一时刻的发酵样液，在三种稀释度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到如图数据，推测样液中菌体的数量为________________个/mL。 答案 一、选择题 1 答案：D A 解析：单个菌落细菌数量不固定，稀释度不同菌落菌体数量差异大，错误。 B 解析：一个菌落可能由 2 个及以上连在一起活菌形成，不是一定一个活菌，错误。 C 解析：统计值偏小，多个活菌连在一起只计一个菌落，和实际活菌数不相等，错误。 D 解析：理想状态下单个菌落大多来自稀释液中单个活菌，因此可通过菌落数推算活菌总量，正确。 2 答案：B A 解析：划线前后接种环均需灼烧灭菌，划线后灼烧杀灭残留菌种防止污染环境，错误。 B 解析：每次从上一段末端划线，逐步降低菌种浓度，最终得到单菌落，是平板划线核心操作，正确。 C 解析：最先划线区域菌种浓度最高，菌落最多；最后划线区域菌落最少，错误。 D 解析：平板划线只能分离纯化微生物，无法精确统计活菌数量，错误。 3 答案：C A 解析：分离纤维素分解菌，培养基仅提供纤维素作碳源，不能利用纤维素的微生物无法存活，正确。 B 解析：刚果红可与纤维素形成红色复合物，分解纤维素区域出现透明圈，用于鉴定，正确。 C 解析：分解纤维素的细菌为异养细菌，适宜 pH 中性偏酸；中性偏碱适合放线菌，错误。 D 解析：振荡培养增加溶氧，菌体与营养充分接触，提升繁殖速率，正确。 4 答案：C A 解析：基础培养基标配碳源、氮源、无机盐、水，满足微生物基本营养需求，正确。 B 解析：蛋白胨、牛肉膏既含氮也含碳，可同时作碳源、氮源，正确。 C 解析：营养浓度过高会造成细胞渗透失水，抑制微生物生长，并非越高数量越多，错误。 D 解析：先调 pH 再高压灭菌，灭菌后调 pH 会引入杂菌，正确。 5 答案：C A 解析：霉变原料携带大量杂菌，饱满无霉变原料减少杂菌污染，正确。 B 解析：曲糵发酵依靠适宜温湿度，“必时” 即把控发酵环境条件，正确。 C 解析：“湛炽” 仅简单清洗热水擦拭，属于消毒；现代灭菌是高压蒸汽等彻底杀灭所有微生物，二者原理强度不同，错误。 D 解析：洁净泉水含微量元素、无机盐，供给微生物生长所需无机营养，正确。 6 答案：A A 解析：平板划线仅用于纯化分离菌丝，菌丝交织无法形成单菌落，不能计数，错误。 B 解析：真菌培养基高压蒸汽灭菌标准条件 121℃、15~30 min，正确。 C 解析：马铃薯淀粉、葡萄糖均为含碳有机物，可作为香菇碳源，正确。 D 解析：琼脂常温凝固，不被微生物分解，固体培养基专用凝固剂，正确。 7 答案：D A 解析：土壤取样、稀释全程无菌操作，外源杂菌会干扰实验结果，错误。 B 解析：稀释涂布统计活菌，计数板统计总菌（含死菌），数值一定不同，错误。 C 解析：e 菌落透明圈最大，分解植酸磷能力最强，才是理想菌株；a 透明圈极小，产酶弱，错误。 D 解析：稀释总倍数 = 100×10×10×10=10⁴，涂布 0.1 mL，150÷0.1×10⁴=1.5×10⁸ 个 /g，计算正确，正确。 8 答案：D A 解析：尿素分解菌适宜中性土壤；土样只需无菌保存，不能灭菌，灭菌会杀死目标菌，错误。 B 解析：尿素仅作唯一氮源，碳源为葡萄糖等有机物，不是唯一碳源，错误。 C 解析：梯度稀释每支试管需更换新移液管，残留高浓度菌液会稀释倍数失真，错误。 D 解析：多次统计至菌落数稳定，避免部分菌落延迟生长造成计数偏小，正确。 二、填空题 9 (1) 稀释涂布平板法；当稀释度适宜时，单个活菌长成单菌落，统计菌落数可推算活菌数量 (2) 10⁶；菌落数 ÷0.1×10⁶ (3) 涂布器；灼烧灭菌 (4) 形状、大小；可合成脲酶分解尿素；尿素 10 (1) 稀释涂布平板；选择 (2) A (3) 脲酶 (4) 乙；菌种乙可利用氨氮，减少尿素分解产生 NH₃ 11 (1) 琼脂；高压蒸汽灭菌；A (2)①②⑤ (3) 小 (4) 2.1×10⁷ 学科网（北京）股份有限公司 $