精品解析：辽宁省葫芦岛市普通高中2025-2026学年高二下学期期末考试生物试题

葫芦岛市普通高中2025-2026学年下学期期末考试 高二生物 时间：75分钟 满分：100分 注意事项： 1.答卷前，考生须在答题卡和试题卷上规定的位置，准确填写本人姓名、准考证号，并核对条形码上的信息。确认无误后，将条形码粘贴在答题卡上相应位置。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上各题目规定答题区域内，超出答题区域书写或写在本试卷上的答案无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列各组元素中，大量参与组成线粒体内膜的是（ ） A. O、P、N B. C、N、Si C. S、P、Ca D. N、P、Na 2. 某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能够正常生长和分裂的细胞。下列结构中，这种细胞一定含有的是（　　） A. 线粒体 B. 中心体 C. 核糖体 D. 溶酶体 3. 我国科学家在北方燕山山脉中发现了距今16.3亿年的化石，取名为“壮丽青山藻”，下列事实或证据支持“壮丽青山藻”为真核生物的是（ ） A. 遗传物质为DNA B. 具有多细胞结构和复杂形态 C. 能进行光合作用 D. 直径大小与巨型蓝细菌相似 4. 基因工程技术的实施必须具备的四个必要条件是（　　） A. 目的基因、DNA聚合酶、载体、受体细胞 B. 工具酶、目的基因、载体、受体细胞 C. 模板DNA、信使RNA、质粒、标记基因 D. 重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶 5. 下列关于生物技术的安全性和伦理问题的论述，不符合我国相关法律法规和伦理准则的是（ ） A. 我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散 B. 我国禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆的相关研究 C. 转基因农作物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险 D. 若基因工程的目的基因来源于自然界，则不存在安全问题 6. 下列关于发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵 B. 发酵工程中所用菌种大多是单一菌种 C. 发酵时需要对发酵条件进行严格的控制 D. 用于发酵工程的菌种只能从自然界中筛选 7. 下列关于蛋白质的叙述，错误的是（ ） A. 功能复杂的生物膜上，膜蛋白的种类和数量较丰富 B. 组成蛋白质的基本单位的结构差异取决于R基的不同 C. 含Fe的氨基酸脱水缩合形成的血红蛋白参与O2运输 D. 某种核酸可与蛋白质结合形成细胞核的重要结构之一 8. 我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后，为了构建重组DNA分子，在此过程中DNA连接酶作用的位点及相应的化学键为（ ） A. a、磷酸二酯键 B. b、氢键 C. a、氢键 D. b、磷酸二酯键 9. 在相同的放大倍数下，统计视野中的细胞数目，然后滴加相同浓度的蔗糖溶液，记录五种植物细胞从滴加蔗糖液到发生“初始质壁分离”的平均时间如图。下列说法错误的是（ ） A. 5种材料中红花檵木的细胞体积最小 B. 该实验的各组材料之间形成相互对照 C. 依据实验结果推测红花檵木细胞液浓度最大 D. 5种材料中山茶细胞发生质壁分离的速度最慢 10. 下列有关微生物的实验室培养的相关叙述，正确的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手可以达到灭菌的目的 B. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 C. 培养霉菌时，一般要将培养基调至中性或弱碱性 D. 配制培养基时，应先调节pH，再进行灭菌处理 11. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 新鲜的洋葱、香蕉、鸡肝、猪血都可作为实验材料 B. DNA不溶于95%的冷酒精，溶于2mol/L的NaCl溶液 C. 过滤液沉淀过程在4℃温度下进行是为了防止DNA降解 D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 12. 某同学结合教材实验，尝试在家制作泡菜。下列叙述不正确的是（ ） 选项 操作 作用 A 加入陈泡菜水 提供乳酸菌 B 盐水浓度应尽可能高 充分抑制杂菌的生长 C 泡菜坛装八成满 防止杂菌代谢产生的CO2使发酵液溢出 D 向坛盖边沿水槽注满水的形成 保持发酵所需环境 A. A B. B C. C D. D 13. 利用AI（人工智能）破解蛋白质结构和功能之谜，建立蛋白质数据库，并在此基础上进行蛋白质结构设计和优化，例如通过AI高精度生成蛋白质的氨基酸序列，推动蛋白质工程的发展。关于该技术的实施，下列说法错误的是（ ） A. 可以通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 B. AI预测新型蛋白质的结构与功能的原理是中心法则 C. AI可通过改变氨基酸序列设计符合预期功能的蛋白质 D. 蛋白质工程的设计思路和天然蛋白质合成的过程有差异 14. 某生物技术公司利用一只雄性爪哇野牛的冷冻皮肤细胞，克隆出了爪哇野牛。如图是克隆技术的部分过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 皮肤细胞所处的周期不同，诱导融合成重构胚的概率相同 B. 卵母细胞去核的唯一方法是将细胞核从卵母细胞中吸出 C. 融合后形成的重构胚可以直接进行细胞的分裂和分化 D. 事实上即使是克隆技术也无法克隆出一模一样的动物 15. 将滤纸浸润在土豆滤液（含过氧化氢酶）中，之后晾干并剪成相同大小的圆形，随后在最适温度下把圆形滤纸片浸润在不同浓度的过氧化氢溶液中，记录其上浮的时间并计算反应速率，结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 各组的反应温度、过氧化氢溶液体积需保持一致 B. 一定范围内，过氧化氢浓度越高，反应速率越快 C. 实验中滤纸片上浮时间越长，酶促反应速率越快 D. 若提高实验温度，则滤纸片上浮的时间可能变长 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16. 关于细胞以3H标记的葡萄糖为原料进行无氧呼吸和有氧呼吸的过程，下列说法正确的是（ ） A. 无氧呼吸的两个阶段均产生少量的ATP B. 有氧呼吸的前两个阶段均需要O2作为原料 C. 线粒体基质中的丙酮酸和NADH会出现放射性 D. 葡萄糖经无氧呼吸释放的能量大部分以热能散失 17. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同 B. 使用合成培养基时，通常需要加入动物血清等一些天然成分 C. 动物细胞培养所需的气体条件是95%空气加5%二氧化碳 D. 贴壁生长的动物细胞，在培养瓶中会出现接触抑制现象 18. 植物组织培养的基本过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ） A. 图示过程需要相应激素调节 B. 图示过程培育出的个体都是纯合子 C. 图示过程中含有细胞的分裂和分化 D. 图示愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 19. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法正确的是（ ） A. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B. PCR过程在第3次循环结束后可以得到两端都含引物的目的基因 C. 若用限制酶从该DNA片段中直接切取蛛丝蛋白基因，则会破坏2个磷酸二酯键 D. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 20. 研究人员将人源iPS细胞诱导分化为肾单位祖细胞，导入敲除了肾脏发育关键基因的猪囊胚中，再将嵌合囊胚移植到代孕母猪子宫内，培育出的嵌合体猪的肾脏主要由人源细胞构成，可用于移植医疗，过程如下图。下列说法正确的是（ ） A. 该技术培育的人源肾脏完全不必考虑肾移植个体之间的遗传差异 B. 过程②需要将荧光蛋白标记的人源肾单位祖细胞植入囊胚的内细胞团中 C. 过程③操作之前需要对代孕母猪进行同期发情和超数排卵处理 D. 推测荧光标记的意义是区分人源细胞与猪源细胞，并提高嵌合胚胎发育的速度 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 研究发现，拟南芥的ABC家族转运蛋白ABCG16可介导植物细胞内茉莉酸向外转运，该过程依赖ATP供能和ABCG16构象的变化。科学家通过超微玻璃电极构建人工纳米通道，实现了对不同电荷、亲（疏）水性分子的选择性跨膜运输。回答下列问题： （1）ABCG16介导的茉莉酸跨膜运输方式为___________，判断依据是___________。该运输方式与自由扩散相比，最显著的优势是___________。 （2）人工纳米通道可通过调节内壁的亲（疏）水性和电荷实现对不同分子的选择性运输，体现了生物膜（或人工膜）具有___________的功能特性。若人工纳米通道处于“亲水、正电”状态，更易转运___________（填“带负电的水溶性分子”或“带正电的脂溶性分子”）。 （3）针对砷吸收相关基因C缺失和过量表达的拟南芥，研究者检测了其根细胞中砷的含量，结果如图。由此推测，蛋白C可______（填“增强”或“减弱”）根对砷的吸收。进一步研究表明，砷激活的蛋白C可使F磷酸化、磷酸化的F诱导细胞膜内陷、形成含有蛋白F的囊泡。由此判断，激活的蛋白C可使细胞膜上转运蛋白F的数量______，造成根对砷吸收量的改变。 22. 小麦是我国重要的粮食作物，为获得优质的小麦品种，科学家开展了多项研究。回答下列问题。 （1）在小麦植物细胞类囊体的薄膜上进行的是光合作用的______阶段。______中进行光合作用第二阶段的化学反应，对于光照条件的要求是______。 （2）研究人员还研究了不同O2浓度条件下，小麦植株净光合速率随光照强度变化情况（如图1）。由图1可知，AC段限制小麦植株光合速率的环境因素主要有______。B点时，小麦叶肉细胞的光合速率______（填“大于”“小于”或“等于”）呼吸速率。 （3）进一步研究发现，在强光条件下，小麦叶绿体中的Rubisco酶（简称R酶）既可催化C5与CO2反应，又可催化C5与O2反应。在高浓度O₂、低浓度CO₂条件下，小麦细胞中O2与CO2竞争性结合C5，O2与C5结合后经一系列反应释放CO2的过程称为光呼吸，相关过程如图2所示。 ①R酶是一种双功能性酶，______（填“具有”或“不具有”）专一性。“光呼吸”与“需氧呼吸”相比较，它们的主要相同点有______。 a．需在光下进行 b．需要酶催化 c．需要O2 d．产生CO2 ②据图分析较强的“光呼吸”会导致小麦叶绿体中C5含量_______（填“增加”或“减少”）。 ③高温干旱的环境下，叶肉细胞的光呼吸作用更强，其原因是_______。 23. 科研人员尝试从自然发酵的臭鳜鱼中分离优质的清酒乳（酸）杆菌，实验流程如图： （1）步骤②需充分振荡20min的目的是________，避免影响后续取菌液。 （2）步骤③④分离纯化微生物的方法叫________。步骤③操作后取0.1mL样品液滴加到步骤④所用的培养基表面，用_______使之分布均匀。理论上，步骤④所用MRS培养基上生长的菌落为纯培养物，原因是_______，但仍需进一步鉴定。进一步鉴定时，步骤⑤所用MRS培养基的接种方法为_______。 （3）从物理性质上看，步骤④⑤所用的MRS培养基属于________培养基，实验中对培养基进行严格灭菌是把配制好的培养基放入________中。步骤④⑤所用的MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂，其中为微生物提供氮源的主要成分有________。 （4）⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现________。 24. 细胞工程是一门综合性的生物工程，请根据以下信息回答问题： Ⅰ.如图是制备单克隆抗体A的流程图 （1）制备单克隆抗体的第一步用特定的抗原对小鼠进行________，图中细胞Ⅰ和骨髓瘤细胞在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是还可用________诱导融合。 （2）图中，细胞Ⅰ的名称为_______；第一次、第二次筛选的目的分别是________、________。 Ⅱ.分别以某种植物的绿色叶片和茎尖为材料，利用植物组织培养技术可以快速大量繁殖该植物。回答下列有关植物细胞工程的问题： （3）以该植物的绿色叶片和茎尖作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，上述技术依据的原理是_______。绿色叶片和茎尖相比，利用_______进行组织培养更容易获得试管苗。 （4）诱导愈伤组织期间一般______光照。与诱导生芽过程相比，诱导生根的培养基中细胞分裂素与生长素的比值______（填“较低”或“较高”）。 25. 人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA．以转基因绵羊作为乳腺生物反应器生产HSA的过程如图所示。回答下列问题： （1）构建基因表达载体常采用双酶切法切割目的基因和质粒，双酶切法的两个优点是______、______。据上图分析，应选择限制酶______切割HSA基因。选择限制酶______切割质粒。限制酶主要来源于原核生物，在原核生物防止外源DNA入侵的机制中发挥重要作用，结合限制酶的作用原理，推测原核生物限制酶不会破坏自身DNA分子的原因可能是______（答出1点）。 （2）A过程是通过______法将重组质粒导入绵羊胎儿成纤维细胞；B过程采用______技术获得重组细胞；C过程采用的技术为______，其实质是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 葫芦岛市普通高中2025-2026学年下学期期末考试 高二生物 时间：75分钟 满分：100分 注意事项： 1.答卷前，考生须在答题卡和试题卷上规定的位置，准确填写本人姓名、准考证号，并核对条形码上的信息。确认无误后，将条形码粘贴在答题卡上相应位置。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上各题目规定答题区域内，超出答题区域书写或写在本试卷上的答案无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列各组元素中，大量参与组成线粒体内膜的是（ ） A. O、P、N B. C、N、Si C. S、P、Ca D. N、P、Na 【答案】A 【解析】 【分析】线粒体内膜属于生物膜，其主要成分是磷脂和蛋白质，蛋白质是由C、H、O、N等元素组成，磷脂的组成元素为C、H、O、N、P。 【详解】线粒体内膜属于生物膜，生物膜主要由磷脂和蛋白质组成，蛋白质是由C、H、O、N等元素组成，磷脂的组成元素为C、H、O、N、P，二者均不含Si、Ca、Na，A正确，BCD错误。 故选A。 2. 某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能够正常生长和分裂的细胞。下列结构中，这种细胞一定含有的是（　　） A. 线粒体 B. 中心体 C. 核糖体 D. 溶酶体 【答案】C 【解析】 【分析】原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体；原核细胞只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。 【详解】某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能够正常生长和分裂的细胞，导入的合成的必需基因具体作用未知的前提下，由于支原体属于原核生物，一定含有核糖体一种细胞器，C正确。 故选C。 3. 我国科学家在北方燕山山脉中发现了距今16.3亿年的化石，取名为“壮丽青山藻”，下列事实或证据支持“壮丽青山藻”为真核生物的是（ ） A. 遗传物质为DNA B. 具有多细胞结构和复杂形态 C. 能进行光合作用 D. 直径大小与巨型蓝细菌相似 【答案】B 【解析】 【详解】A、有细胞结构的生物，其遗传物质都是DNA，A不符合题意； B、原核生物是单细胞生物，真核生物既有单细胞生物也有多细胞生物，具有多细胞结构和复杂形态的生物为真核生物，B符合题意； C、一些原核生物也能进行光合作用，C不符合题意； D、蓝细菌属于原核生物，直径大小与巨型蓝细菌相似，不能说明“壮丽青山藻”为真核生物，D不符合题意。 4. 基因工程技术的实施必须具备的四个必要条件是（　　） A. 目的基因、DNA聚合酶、载体、受体细胞 B. 工具酶、目的基因、载体、受体细胞 C. 模板DNA、信使RNA、质粒、标记基因 D. 重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶 【答案】B 【解析】 【详解】基因工程的核心要素是：工具酶（如限制性内切酶、DNA 连接酶）、目的基因（待导入的外源基因）、载体（运载目的基因的 “交通工具”，如质粒）、受体细胞（接收并表达目的基因的宿主细胞），B正确，ACD错误。 故选B。 5. 下列关于生物技术的安全性和伦理问题的论述，不符合我国相关法律法规和伦理准则的是（ ） A. 我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散 B. 我国禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆的相关研究 C. 转基因农作物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险 D. 若基因工程的目的基因来源于自然界，则不存在安全问题 【答案】D 【解析】 【详解】A、我国对待生物武器的态度是：在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，A正确； B、克隆人违背人的伦理道德，严重威胁着人类社会的稳定，我国禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆的相关研究，B正确； C、转基因农作物的培育和种植可能带来基因污染、影响物种多样性等生态风险，因此需要提前评估考量，C正确； D、若基因工程的目的基因来源于自然界，也可能存在安全问题，D错误。 6. 下列关于发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵 B. 发酵工程中所用菌种大多是单一菌种 C. 发酵时需要对发酵条件进行严格的控制 D. 用于发酵工程的菌种只能从自然界中筛选 【答案】D 【解析】 【详解】A、发酵罐内的发酵过程是发酵工程的中心环节，该环节需要严格调控温度、pH、溶氧等条件，保证发酵效率和产量，A正确； B、传统发酵是利用自然环境中的混合菌种进行发酵，发酵工程为保证产品品质稳定，通常使用经过纯化的单一菌种，B正确； C、发酵时需要对发酵条件进行严格的控制，以保证发酵过程的顺利进行，C正确； D、用于发酵工程的菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，D错误。 7. 下列关于蛋白质的叙述，错误的是（ ） A. 功能复杂的生物膜上，膜蛋白的种类和数量较丰富 B. 组成蛋白质的基本单位的结构差异取决于R基的不同 C. 含Fe的氨基酸脱水缩合形成的血红蛋白参与O2运输 D. 某种核酸可与蛋白质结合形成细胞核的重要结构之一 【答案】C 【解析】 【详解】A、生物膜功能的复杂程度与膜蛋白的种类和数量密切相关，例如线粒体内膜含有丰富的酶和载体蛋白，A正确； B、组成蛋白质的基本单位是氨基酸，氨基酸的结构差异取决于R基的不同（如亮氨酸含疏水R基，赖氨酸含亲水R基），B正确； C、血红蛋白中的Fe存在于血红素辅基中，并非氨基酸的组成成分。氨基酸脱水缩合形成肽链后，再与含Fe的血红素结合形成血红蛋白，C错误； D、细胞核中染色质由DNA（核酸）和蛋白质结合形成，核仁中也可能存在RNA与蛋白质的复合结构，D正确。 8. 我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后，为了构建重组DNA分子，在此过程中DNA连接酶作用的位点及相应的化学键为（ ） A. a、磷酸二酯键 B. b、氢键 C. a、氢键 D. b、磷酸二酯键 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶的作用是断开或连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；图中a为磷酸二酯键是限制酶、DNA连接酶的作用位点；b为氢键，是解旋酶的作用位点。 【详解】AC、a为磷酸二酯键，是DNA连接酶的作用位点，A正确，C错误； BD、b为氢键，是解旋酶的作用位点，BD错误。 故选A。 9. 在相同的放大倍数下，统计视野中的细胞数目，然后滴加相同浓度的蔗糖溶液，记录五种植物细胞从滴加蔗糖液到发生“初始质壁分离”的平均时间如图。下列说法错误的是（ ） A. 5种材料中红花檵木的细胞体积最小 B. 该实验的各组材料之间形成相互对照 C. 依据实验结果推测红花檵木细胞液浓度最大 D. 5种材料中山茶细胞发生质壁分离的速度最慢 【答案】C 【解析】 【分析】分析柱形图：质壁分离的细胞平均数：红花槛木＞诸葛菜＞紫玉兰＞茶梅＞山茶；质壁分离的平均时间：山茶＞茶梅＞紫玉兰＞诸葛菜＞红花槛木。 【详解】A、根据实验数据可知，视野中记录到的红花檵木的平均数最多，由此推知其细胞体积最小，A正确； B、该实验中的各组材料之间相互对照，每组既是实验组也是对照组，B正确； C、红花檵木质壁分离的平均时间最短，故质壁分离的速度最快，细胞液浓度最小，C错误； D、各组实验中山茶细胞质壁分离的平均时间最长，故质壁分离的速度最慢，D正确。 故选C。 10. 下列有关微生物的实验室培养的相关叙述，正确的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手可以达到灭菌的目的 B. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 C. 培养霉菌时，一般要将培养基调至中性或弱碱性 D. 配制培养基时，应先调节pH，再进行灭菌处理 【答案】D 【解析】 【详解】A、免洗酒精凝胶擦手属于消毒，只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子 ），无法达到灭菌（杀灭全部微生物，包括芽孢和孢子）的目的，A错误； B、接种后未长出菌落的培养基可能含有杂菌等，不能直接丢弃，需要进行灭菌处理后再丢弃，防止污染环境，B错误。 C、不同微生物对培养基中的pH的要求不同，培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，因为霉菌是真菌，需要将培养基调至酸性，C错误； D、配制培养基的过程中，为了防止调pH时造成对培养基的污染，应先调节pH，再进行灭菌处理，D正确。 11. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 新鲜的洋葱、香蕉、鸡肝、猪血都可作为实验材料 B. DNA不溶于95%的冷酒精，溶于2mol/L的NaCl溶液 C. 过滤液沉淀过程在4℃温度下进行是为了防止DNA降解 D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 【答案】A 【解析】 【详解】A、新鲜洋葱、香蕉的植物细胞，鸡肝的肝细胞均含有细胞核，存在大量DNA，都适合作为该实验的材料，但猪的成熟红细胞没有细胞核和细胞器，不含DNA，不能作为实验材料，A错误； B、DNA不溶于95％的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液，而溶于2mol/L的NaCl溶液，B正确； C、低温可抑制DNA酶的活性，4℃条件下进行过滤液沉淀操作，能降低DNA被降解的概率，C正确； D、DNA遇二苯胺试剂的显色反应需要沸水浴加热的条件，沸水浴冷却后呈蓝色，D正确。 12. 某同学结合教材实验，尝试在家制作泡菜。下列叙述不正确的是（ ） 选项 操作 作用 A 加入陈泡菜水 提供乳酸菌 B 盐水浓度应尽可能高 充分抑制杂菌的生长 C 泡菜坛装八成满 防止杂菌代谢产生的CO2使发酵液溢出 D 向坛盖边沿水槽注满水的形成 保持发酵所需环境 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【详解】A、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，加入陈泡菜水目的是提供乳酸菌，A正确； B、盐水浓度过高不仅会影响泡菜口味，更会抑制乳酸菌的生长代谢，无法正常完成发酵，因此盐水浓度不能过高，B错误； C、发酵过程中酵母菌等杂菌代谢会产生CO2，泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出，C正确； D、向坛盖边沿水槽注满水可隔绝空气，创造乳酸菌发酵所需的无氧环境，D正确。 13. 利用AI（人工智能）破解蛋白质结构和功能之谜，建立蛋白质数据库，并在此基础上进行蛋白质结构设计和优化，例如通过AI高精度生成蛋白质的氨基酸序列，推动蛋白质工程的发展。关于该技术的实施，下列说法错误的是（ ） A. 可以通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 B. AI预测新型蛋白质的结构与功能的原理是中心法则 C. AI可通过改变氨基酸序列设计符合预期功能的蛋白质 D. 蛋白质工程的设计思路和天然蛋白质合成的过程有差异 【答案】B 【解析】 【详解】A、蛋白质工程的核心操作是改造或合成目的基因，再通过基因表达获得所需蛋白质，因此AI设计的蛋白质可以通过该方式获取，A正确； B、中心法则的内容是遗传信息的流动规律，包括DNA复制、转录、翻译、逆转录、RNA复制过程。AI预测蛋白质的结构与功能是基于已有的蛋白质序列、结构、功能的相关大数据进行机器学习分析，原理并非中心法则，B错误； C、蛋白质工程的目标是获得符合预期功能的蛋白质，可通过改造对应的基因进而改变蛋白质的氨基酸序列实现，AI生成氨基酸序列的技术可辅助该过程，C正确； D、蛋白质工程的设计思路是先设计预期的蛋白质结构，再推导出应有的氨基酸序列及对应的基因序列，而天然蛋白质的合成遵循中心法则（DNA→RNA→蛋白质），两者过程相反，因此设计思路存在差异，D正确。 14. 某生物技术公司利用一只雄性爪哇野牛的冷冻皮肤细胞，克隆出了爪哇野牛。如图是克隆技术的部分过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 皮肤细胞所处的周期不同，诱导融合成重构胚的概率相同 B. 卵母细胞去核的唯一方法是将细胞核从卵母细胞中吸出 C. 融合后形成的重构胚可以直接进行细胞的分裂和分化 D. 事实上即使是克隆技术也无法克隆出一模一样的动物 【答案】D 【解析】 【详解】A、皮肤细胞所处的周期不同，诱导融合成重构胚的概率是不同的，A错误； B、去核的方式有很多种，可以是将细胞核从卵母细胞中吸出，形成无核细胞，也可以采用紫外线照射的方法让DNA变性，也可用化学法处理，B错误； C、重构胚形成后还需激活才可以发育成克隆动物，C错误； D、因为有细胞质基因的控制以及环境的影响，克隆技术也无法克隆出一模一样的动物，D正确。 15. 将滤纸浸润在土豆滤液（含过氧化氢酶）中，之后晾干并剪成相同大小的圆形，随后在最适温度下把圆形滤纸片浸润在不同浓度的过氧化氢溶液中，记录其上浮的时间并计算反应速率，结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 各组的反应温度、过氧化氢溶液体积需保持一致 B. 一定范围内，过氧化氢浓度越高，反应速率越快 C. 实验中滤纸片上浮时间越长，酶促反应速率越快 D. 若提高实验温度，则滤纸片上浮的时间可能变长 【答案】C 【解析】 【详解】A、各组的反应温度、过氧化氢溶液体积属于无关变量，为了保证实验结果是由过氧化氢浓度这一自变量引起的，无关变量需保持一致，A正确； B、从图中可以看出，在一定范围内，随着过氧化氢浓度的升高，反应速率加快，B正确； C、实验中滤纸片上浮是因为过氧化氢分解产生氧气使滤纸片受到浮力而上浮，滤纸片上浮时间越长，说明产生相同量氧气所需时间越长，酶促反应速率越慢，C错误； D、该实验是在最适温度下进行的，若提高实验温度，酶的活性可能降低，反应速率减慢，滤纸片上浮的时间可能变长，D正确。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16. 关于细胞以3H标记的葡萄糖为原料进行无氧呼吸和有氧呼吸的过程，下列说法正确的是（ ） A. 无氧呼吸的两个阶段均产生少量的ATP B. 有氧呼吸的前两个阶段均需要O2作为原料 C. 线粒体基质中的丙酮酸和NADH会出现放射性 D. 葡萄糖经无氧呼吸释放的能量大部分以热能散失 【答案】CD 【解析】 【详解】A、无氧呼吸仅第一阶段释放少量能量并产生少量ATP，第二阶段不产生ATP，A错误； B、有氧呼吸第二阶段不需要O2，有氧呼吸的第三阶段需要O2作为原料，B错误； C、葡萄糖的分解首先在细胞质基质中进行，第一阶段生成丙酮酸和NADH（均含3H），随后丙酮酸进入线粒体基质参与第二阶段反应会生成NADH，因此，线粒体基质中会出现放射性的丙酮酸和NADH，C正确； D、葡萄糖经无氧呼吸释放的能量大部分以热能散失，少部分储存在ATP中，D正确。 故选CD。 17. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同 B. 使用合成培养基时，通常需要加入动物血清等一些天然成分 C. 动物细胞培养所需的气体条件是95%空气加5%二氧化碳 D. 贴壁生长的动物细胞，在培养瓶中会出现接触抑制现象 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，而植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，两者原理不同，A错误； B、用合成培养基进行动物细胞培养时通常需要加入动物血清等天然成分，以满足动物细胞正常生长的需求，B正确； C、动物细胞培养的气体条件为95%空气（提供氧气）和5%二氧化碳（维持培养液pH），C正确； D、贴壁生长的动物细胞，在培养瓶中会出现接触抑制现象，此时细胞通常会停止分裂，D正确。 18. 植物组织培养的基本过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ） A. 图示过程需要相应激素调节 B. 图示过程培育出的个体都是纯合子 C. 图示过程中含有细胞的分裂和分化 D. 图示愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、植物组织培养过程中，脱分化和再分化需要生长素、细胞分裂素等激素调节，A正确； B、植物组织培养是无性生殖，培育出的个体遗传物质与外植体相同，外植体若为杂合子，培育出的个体也是杂合子，不是都为纯合子，B错误； C、植物组织培养有细胞分裂（脱分化、再分化过程中细胞分裂 ）和细胞分化（再分化形成不同组织器官），C正确； D、愈伤组织经再分化形成完整植株无生殖细胞结合，保持遗传一致性，属于无性繁殖，D正确。 19. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法正确的是（ ） A. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B. PCR过程在第3次循环结束后可以得到两端都含引物的目的基因 C. 若用限制酶从该DNA片段中直接切取蛛丝蛋白基因，则会破坏2个磷酸二酯键 D. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 【答案】BD 【解析】 【详解】A、据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5'端，羟基为DNA的3'端，由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，所以在PCR扩增中引物与DNA模板链的3'端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物③，A错误； B、PCR过程中，以引物为起点进行DNA链的延伸。在第1次循环后，得到的两个DNA分子只有一端含引物；第2次循环后得到的4个DNA分子中不存在两端都含引物的目的基因；第3次循环结束后可以得到两端都含引物的目的基因，B正确； C、若用限制酶从该DNA片段中直接切取蛛丝蛋白基因，则会破坏4个磷酸二酯键，C错误； D、为了使蛛丝蛋白基因在羊的乳腺中特异性表达，科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，这样启动子可以启动蛛丝蛋白基因在乳腺细胞中表达，D正确。 20. 研究人员将人源iPS细胞诱导分化为肾单位祖细胞，导入敲除了肾脏发育关键基因的猪囊胚中，再将嵌合囊胚移植到代孕母猪子宫内，培育出的嵌合体猪的肾脏主要由人源细胞构成，可用于移植医疗，过程如下图。下列说法正确的是（ ） A. 该技术培育的人源肾脏完全不必考虑肾移植个体之间的遗传差异 B. 过程②需要将荧光蛋白标记的人源肾单位祖细胞植入囊胚的内细胞团中 C. 过程③操作之前需要对代孕母猪进行同期发情和超数排卵处理 D. 推测荧光标记的意义是区分人源细胞与猪源细胞，并提高嵌合胚胎发育的速度 【答案】B 【解析】 【详解】A、该方法获得的肾脏可能含有囊胚的细胞发育的部分，因此培育的人源肾脏依然需要考虑肾移植个体之间的遗传差异，A错误； B、囊胚的内细胞团将来发育为胎儿的各种组织器官，要让人源肾单位祖细胞发育形成肾脏，需要将其植入囊胚的内细胞团中，B正确； C、过程③为胚胎移植，胚胎移植前需要对代孕母猪进行同期发情处理，使子宫环境适宜胚胎着床即可，不需要进行超数排卵处理（代孕母体不提供卵母细胞），C错误； D、荧光标记仅起到示踪作用，用于区分人源细胞和猪源细胞，不能提高嵌合胚胎的发育速度，D错误。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 研究发现，拟南芥的ABC家族转运蛋白ABCG16可介导植物细胞内茉莉酸向外转运，该过程依赖ATP供能和ABCG16构象的变化。科学家通过超微玻璃电极构建人工纳米通道，实现了对不同电荷、亲（疏）水性分子的选择性跨膜运输。回答下列问题： （1）ABCG16介导的茉莉酸跨膜运输方式为___________，判断依据是___________。该运输方式与自由扩散相比，最显著的优势是___________。 （2）人工纳米通道可通过调节内壁的亲（疏）水性和电荷实现对不同分子的选择性运输，体现了生物膜（或人工膜）具有___________的功能特性。若人工纳米通道处于“亲水、正电”状态，更易转运___________（填“带负电的水溶性分子”或“带正电的脂溶性分子”）。 （3）针对砷吸收相关基因C缺失和过量表达的拟南芥，研究者检测了其根细胞中砷的含量，结果如图。由此推测，蛋白C可______（填“增强”或“减弱”）根对砷的吸收。进一步研究表明，砷激活的蛋白C可使F磷酸化、磷酸化的F诱导细胞膜内陷、形成含有蛋白F的囊泡。由此判断，激活的蛋白C可使细胞膜上转运蛋白F的数量______，造成根对砷吸收量的改变。 【答案】（1） ①. 主动运输 ②. 该过程依赖ATP供能，且需要ABCG16转运蛋白介导 ③. 可以逆浓度梯度选择性运输物质 （2） ①. 选择透过性 ②. 带负电的水溶性分子 （3） ①. 减弱 ②. 减少 【解析】 【小问1详解】 题目明确指出ABCG16介导的茉莉酸跨膜运输依赖ATP供能，且需要ABCG16转运蛋白介导，因此该过程为主动运输方式。自由扩散是顺浓度梯度进行，不需要载体和能量，只能被动运输物质，运输速率受浓度差限制。主动运输最突出的优势是可以逆浓度梯度运输物质，能够根据细胞生命活动的需求，主动摄取或排出特定物质；同时因为有转运蛋白的介导，还具备选择性运输特定物质的能力。 【小问2详解】 生物膜（或人工膜）的选择透过性，指的是膜能够允许特定的物质通过，而阻止其他物质通过的特性。人工纳米通道通过调节内壁的亲疏水性和电荷，实现对不同电荷、亲（疏）水性分子的选择性运输，这正是选择透过性的直接体现。运输的难易程度与通道特性和分子特性的匹配度相关：通道内壁亲水的特性，会更利于水溶性分子通过，而不利于脂溶性分子；通道带正电，会通过静电吸引作用，更易结合并转运带负电的分子。综上，“亲水、正电”的人工纳米通道更易转运带负电的水溶性分子。 【小问3详解】 从图中可以看出，与野生型相比，C缺失突变体根细胞中砷浓度相对值较高，C过量表达植株根细胞中砷浓度相对值较低，由此推测，蛋白C可减弱根对砷的吸收。砷激活的蛋白C可使F磷酸化，磷酸化的F诱导细胞膜内陷，形成含有蛋白F的囊泡，这会使细胞膜上转运蛋白F的数量减少，从而造成根对砷吸收量的改变。 22. 小麦是我国重要的粮食作物，为获得优质的小麦品种，科学家开展了多项研究。回答下列问题。 （1）在小麦植物细胞类囊体的薄膜上进行的是光合作用的______阶段。______中进行光合作用第二阶段的化学反应，对于光照条件的要求是______。 （2）研究人员还研究了不同O2浓度条件下，小麦植株净光合速率随光照强度变化情况（如图1）。由图1可知，AC段限制小麦植株光合速率的环境因素主要有______。B点时，小麦叶肉细胞的光合速率______（填“大于”“小于”或“等于”）呼吸速率。 （3）进一步研究发现，在强光条件下，小麦叶绿体中的Rubisco酶（简称R酶）既可催化C5与CO2反应，又可催化C5与O2反应。在高浓度O₂、低浓度CO₂条件下，小麦细胞中O2与CO2竞争性结合C5，O2与C5结合后经一系列反应释放CO2的过程称为光呼吸，相关过程如图2所示。 ①R酶是一种双功能性酶，______（填“具有”或“不具有”）专一性。“光呼吸”与“需氧呼吸”相比较，它们的主要相同点有______。 a．需在光下进行 b．需要酶催化 c．需要O2 d．产生CO2 ②据图分析较强的“光呼吸”会导致小麦叶绿体中C5含量_______（填“增加”或“减少”）。 ③高温干旱的环境下，叶肉细胞的光呼吸作用更强，其原因是_______。 【答案】（1） ①. 光反应 ②. 叶绿体基质 ③. 不直接依赖光（或不需要光） （2） ①. 光照强度、O₂浓度 ②. 大于 （3） ①. 具有 ②. bcd ③. 减少 ④. 高温干旱导致植物气孔关闭，胞间CO2浓度减小，O2所占比例相对增大，从而促进光呼吸过程 【解析】 【小问1详解】 光合作用的过程十分复杂，它包括一系列化学反应。在类囊体的薄膜上进行的是光合作用的光反应阶段。叶绿体的基质中进行光合作用第二阶段的化学反应，该过程包括二氧化碳的固定和C3的还原，对于光照条件的要求是不直接依赖光，即暗反应的进行未必一定需要光。 【小问2详解】 由图1可知，曲线AC段随光照增强而上升，表明此时光照强度是主要限制因素，且不同氧气浓度的净光合速率也不同，说明O2浓度也是限制因素；B点为光补偿点，整株植物的光合速率=呼吸速率，但叶肉细胞的光合速率需大于自身呼吸速率以补偿非光合细胞的消耗。 【小问3详解】 ①R酶可催化C5与CO2或O2反应，但不能催化其他反应，仍可说明该酶具有专一性；“光呼吸”与“需氧呼吸”相比较，；两者均需酶催化（b），都需要消耗O2（c），均可释放CO2（d），但光呼吸需光，需氧呼吸不需光，故选bcd。 ②分析题意，光呼吸消耗C5，导致其含量减少。 ③由题意可知，在高O2浓度、低CO2浓度条件下，小麦细胞中O2与CO2竞争性结合C5，高温干旱导致植物气孔关闭，胞间CO2浓度减小，O2所占比例相对增大，从而促进光呼吸过程，故高温干旱的环境下，叶肉细胞的光呼吸作用更强。 23. 科研人员尝试从自然发酵的臭鳜鱼中分离优质的清酒乳（酸）杆菌，实验流程如图： （1）步骤②需充分振荡20min的目的是________，避免影响后续取菌液。 （2）步骤③④分离纯化微生物的方法叫________。步骤③操作后取0.1mL样品液滴加到步骤④所用的培养基表面，用_______使之分布均匀。理论上，步骤④所用MRS培养基上生长的菌落为纯培养物，原因是_______，但仍需进一步鉴定。进一步鉴定时，步骤⑤所用MRS培养基的接种方法为_______。 （3）从物理性质上看，步骤④⑤所用的MRS培养基属于________培养基，实验中对培养基进行严格灭菌是把配制好的培养基放入________中。步骤④⑤所用的MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂，其中为微生物提供氮源的主要成分有________。 （4）⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现________。 【答案】（1）让菌种均匀分布于悬液中 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 涂布器 ③. 纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，而菌落一般是由单个微生物繁殖形成的微生物群体，属于纯培养物 ④. 平板划线法 （3） ①. 固体 ②. 高压蒸汽灭菌锅 ③. 胰蛋白胨、牛肉膏 （4）溶钙圈 【解析】 【小问1详解】 步骤②振荡处理样品，目的是充分打散鱼膜组织，让附着在鱼膜上的目标菌株充分扩散到无菌生理盐水，得到浓度均匀的菌悬液。如果菌体聚集、分布不均，后续梯度稀释取样时菌液浓度偏差大，会影响分离计数。 【小问2详解】 步骤③梯度稀释、步骤④涂布平板，该分离纯化微生物的方法为稀释涂布平板法；取 0.1mL 稀释样品液滴加到固体培养基表面后，需使用涂布器将菌液均匀涂抹，使菌体分散；纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，而菌落一般是由单个微生物繁殖形成的微生物群体，属于纯培养物，理论上平板上单个菌落由单个活菌增殖形成，因此单菌落属于纯培养物，但仍需进一步鉴定菌种；步骤⑤多次划线纯化菌种，采用的接种方法是平板划线法。 【小问3详解】 步骤④⑤的 MRS 培养基添加琼脂作为凝固剂，从物理性质划分属于固体培养基；配制完成的培养基需要放入高压蒸汽灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌，彻底杀灭全部微生物及其芽孢；培养基组分中，胰蛋白胨、牛肉膏含有大量含氮有机物，是为微生物提供氮源的主要成分。 【小问4详解】 由于乳酸能够溶解碳酸钙，所以⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现溶钙圈。 24. 细胞工程是一门综合性的生物工程，请根据以下信息回答问题： Ⅰ.如图是制备单克隆抗体A的流程图 （1）制备单克隆抗体的第一步用特定的抗原对小鼠进行________，图中细胞Ⅰ和骨髓瘤细胞在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是还可用________诱导融合。 （2）图中，细胞Ⅰ的名称为_______；第一次、第二次筛选的目的分别是________、________。 Ⅱ.分别以某种植物的绿色叶片和茎尖为材料，利用植物组织培养技术可以快速大量繁殖该植物。回答下列有关植物细胞工程的问题： （3）以该植物的绿色叶片和茎尖作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，上述技术依据的原理是_______。绿色叶片和茎尖相比，利用_______进行组织培养更容易获得试管苗。 （4）诱导愈伤组织期间一般______光照。与诱导生芽过程相比，诱导生根的培养基中细胞分裂素与生长素的比值______（填“较低”或“较高”）。 【答案】（1） ①. 免疫 ②. 灭活的病毒 （2） ①. （已免疫的/多种）B淋巴细胞 ②. 获得杂交瘤细胞 ③. 获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 （3） ①. 植物细胞具有全能性 ②. 茎尖 （4） ①. 不需要 ②. 较低 【解析】 【小问1详解】 制备单克隆抗体的第一步用特定的抗原对小鼠进行免疫反应，将抗原A注射到小鼠体内，发挥抗原的作用，能诱发与A特异性结合的抗体，多次注射特定的A抗原能刺激小鼠产生更多特异性的B细胞。图中细胞Ⅰ和骨髓瘤细胞在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是还可用灭活病毒诱导法诱导融合。 【小问2详解】 图中细胞Ⅰ是给小鼠注射抗原A之后，从小鼠脾中获取的B淋巴细胞。第一次筛选：在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞（B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；第二次筛选：经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，需经克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术叫植物组织培养技术，依据的原理是离体的植物细胞具有全能性，绿色叶片属于高度分化的细胞，细胞全能性低于茎尖细胞，茎尖分化程度比绿色叶片低，且茎尖分裂增殖能力更强，因此利用茎尖进行组织培养更容易获得试管苗。 【小问4详解】 植物组织培养中，诱导愈伤组织时，细胞脱分化，一般不需要光照（愈伤组织无叶绿体，不进行光合作用）。诱导生芽需细胞分裂素比例高，诱导生根需生长素比例高，故诱导生根培养基中细胞分裂素与生长素比值较低。 25. 人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA．以转基因绵羊作为乳腺生物反应器生产HSA的过程如图所示。回答下列问题： （1）构建基因表达载体常采用双酶切法切割目的基因和质粒，双酶切法的两个优点是______、______。据上图分析，应选择限制酶______切割HSA基因。选择限制酶______切割质粒。限制酶主要来源于原核生物，在原核生物防止外源DNA入侵的机制中发挥重要作用，结合限制酶的作用原理，推测原核生物限制酶不会破坏自身DNA分子的原因可能是______（答出1点）。 （2）A过程是通过______法将重组质粒导入绵羊胎儿成纤维细胞；B过程采用______技术获得重组细胞；C过程采用的技术为______，其实质是______。 【答案】（1） ①. 避免目的基因和质粒的环化 ②. 避免目的基因和质粒进行反向连接 ③. BamHI、EcoRI ④. Sau3AI、EcoRI ⑤. 自身不存在限制酶识别序列；自身识别序列经过修饰 （2） ①. 显微注射 ②. 核移植 ③. 胚胎移植 ④. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【解析】 【小问1详解】 构建基因表达载体常采用双酶切法切割目的基因和质粒，选用双酶切法，可有效避免目的基因和质粒反向连接和自身环化。用Sau3AI切割目的基因会破坏目的基因，为了防止目的基因与质粒间的任意连接，应该选择Sau3AI、EcoRI切割质粒，Sau3AI和BamHI切割产生的黏性末端相同，故采用BamHI、EcoRI切割目的基因。根据限制酶的作用原理，推测原核生物的限制酶不会破坏自身DNA分子的原因可能是自身不存在限制酶识别序列或自身识别序列经过修饰导致限制酶无法识别。 【小问2详解】 A过程表示将基因表达载体导入受体细胞的过程，导入动物细胞时常用显微注射法。B过程采用核移植技术获得重组细胞。C过程采用的技术为胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $