专题19 细胞工程-【创新大课堂】高考生物五年（2022-2026年）真题分类汇编168优化重组卷

专题十九 考向一植物细胞工程 1.(2026·陕晋宁青卷)研究人员将调控根尖干细 胞微环境的P、W基因过表达系统导入某植物 根尖外植体，在无外源激素条件下诱导外植体 形成胚状体，并最终发育为完整植株。下列叙 述正确的是 ( T A.P、W基因过表达诱导组织形成新植株需经 历细胞分化 B.将流水充分冲洗后的外植体用无菌水反复冲 洗进行灭菌 C.使用无激素培养基时不涉及激素对植物分化 1 的调节作用 训 D.导入P、W基因过表达系统使根尖细胞具备 了全能性 2.(2026·河南卷)利用细胞融合技术将小鼠骨髓 瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞 器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞 器组合是 量 A.线粒体和液泡 B.叶绿体和中心体 C.叶绿体和线粒体 D.内质网和高尔基体 3.(2026·河南卷)植物细胞工程在生产实践中有 着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。 甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为( 亦 生产目标 获取植株 优良性状来源 取代谢物 单株 不同植株 亲本亲缘关系 近 远 甲 丙 A.植物细胞培养、快速繁殖、杂交十单倍体育 种、体细胞杂交 B.快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交 十单倍体育种 细胞工程 C.快速繁殖、杂交十单倍体育种、植物细胞培 养、体细胞杂交 D.植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交 十单倍体育种 4.(2026·云南卷)生物学实验常用到不同体积分 数的酒精。下列说法错误的是 ( ) A.用95%的酒精洗去苏丹Ⅲ染色后花生子叶 薄片上的浮色 B.用无水乙醇提取绿叶中的色素 C.用95%的酒精冲洗经卡诺氏液浸泡的根尖 D.用70%的酒精对植物组织培养的外植体进 行消毒 5.(2026·云南卷)菊花的组织培养实现了从茎段 到植株的转变。下列说法正确的是 ( ) A.培养基、玻璃器皿和金属器具需进行干热 灭菌 B.诱导愈伤组织的培养基中，生长素与细胞分 裂素的质量比大于1 C.外植体茎段先脱分化形成愈伤组织，再诱导 生芽 D.愈伤组织后续分化培养过程一般不需要光照 6.(2026·黑吉辽蒙卷)下列关于菊花愈伤组织诱 导及培养的叙述，正确的是 ( ) A.诱导愈伤组织形成及后期培养，全程需光照 B.为防止植物激素高温失活，培养基可不灭菌 C.用幼嫩的茎段作外植体能诱导形成愈伤组织 D.生长素与细胞分裂素的比例不影响愈伤组 织细胞分化方向 7.(2026·山东卷)利用微型繁殖技术扩繁某种兰 花时，待愈伤组织诱导出芽后，将芽转入增殖培 养基进行扩增培养，以诱导芽的数量增加。下 列说法正确的是 A.扩增培养期间不需要光照 B.接种时应将芽的形态学上端插入培养基 C.诱导出的芽在转入增殖培养基时，必须对芽 进行消毒处理 D.为获得试管苗，还需将芽转接到诱导生根的 培养基上培养 8.(2026·河北卷)植物细胞工程技术可用于马铃 薯育种，下列分析错误的是 ( A.将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固 体培养基上，以诱导愈伤组织 B.用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细 胞杂交，以获得抗病新材料 C.采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获 得单倍体植株 D.利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 9.(2025·湖北卷)水母雪莲是我国的一种名贵药 材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母 雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材 资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母 雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表 所示。下列叙述错误的是 ( 转速(r/min) 55 65 75 85 相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25 细胞干重(g/L) 7.50 9.70 11.4 9.50 黄酮产量(g/L) 0.20 0.27 0.32 0.25 A.黄酮产量与细胞干重呈正相关 B.黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的 C.氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代 谢是必需的 D.转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于 黄酮的积累 10.(2025·江苏卷)图示一种植物组织培养周期， ①③表示相应过程。下列相关叙述错误的 是 ( 组织块 ① 植株 愈伤组织 试管苗 胚状体 174 A.过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 B.过程②经细胞的再分化形成不同种类的 细胞 C.过程②③所用培养基的成分、浓度相同 D.培养基中糖类既能作为碳源，又与维持渗 透压有关 1.(2025·浙江1月)某研究小组进行微型月季 的快速繁殖研究，结果如表所示。下列叙述正 确的是 流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋 75%乙醇浸泡30s+5%NaC1O 芽消毒 浸泡6min ②诱导出丛 MS+3.0mg·L16-BA+ 生苗 0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的 MS+2.0mg·L16-BA+ 扩增 0.1mg·L1NAA ④丛生苗的 之MS+0.25mg·L1IBA十 生根 0.25mg·L-1NAA 注：丛生苗为丛状生长的幼苗，BA(哚丁 酸)为生长素类物质 A.流程①的效果取决于消毒剂浓度 B.流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的 阶段 C.与流程②相比，流程③培养基中细胞分裂素 类与生长素类物质的比值更大 D.与流程③相比，提高流程④培养基的盐浓 度有利于丛生苗的生根 2.(2025·黑吉辽蒙卷)利用植物组织培养技术 获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短 缺问题。下列叙述正确的是 () A.细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组 织的形成 B.培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌 法灭菌 C.芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作 外植体 D.紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来 获取，植物组织培养优势明显 13.(2024·山东卷)下列关于植物愈伤组织的说 法正确的是 ( A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细 胞壁获得原生质体 B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形 成愈伤组织 C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来 自亲本的2个细胞核 D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程 属于无性繁殖 14.(2024·浙江1月)山药在生长过程中易受病 毒侵害，导致品质和产量下降。采用组织培养 技术得到脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特 性，流程如图。下列操作不可行的是( 外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗 A.选择芽尖作为外植体可减少病毒感染 B.培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染 C.将丛生芽切割后进行继代培养可实现快速！ 繁殖 D.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈！ 伤组织形成丛生芽 15.(2023·广东卷)人参皂苷是人参的主要活性 成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根： 产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂 苷的产率。下列叙述错误的是 A.细胞融合前应去除细胞壁 B.高Ca2+一高pH溶液可促进细胞融合 C.融合的细胞即为杂交细胞 D.杂交细胞可能具有生长快速的优势 16.(2022·浙江6月)保护生物多样性是人类关注 的问题。下列不属于生物多样性的是 ( A.物种多样性 B.遗传多样性 C.行为多样性 D.生态系统多样性 17.(2022·淅浙江1月选考)农作物秸秆的回收利用： 方式很多，其中之一是将秸秆碎化后作为食用： 菌的栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用，： 相当于植物组织培养中固体培养基的( 17S A.琼脂十蔗糖 B.蔗糖+激素 C.激素十无机盐 D.无机盐十琼脂 8.(2023·新课标卷)根瘤菌与豆科植物之间是 互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根内可引 起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能 力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌，某研究小组 做了如下实验：从盐碱地生长的野生草本豆科 植物中分离根瘤菌；选取该植物的茎尖为材 料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）； 在实验室中探究试管苗根瘤中所含根瘤菌的 固氮能力。回答下列问题。 (1)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培 养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物 是 (2)取豆科植物的茎尖作为外植体，通过植物 组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植 体经诱导形成试管苗的流程是：外植体①愈 伤组织②试管苗。其中①表示的过程是 ,②表示的过程是 由外植体最终获得完整的植株，这一过程说明 植物细胞具有全能性。细胞的全能性是指 (3)研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗 为材料，研究接种到试管苗上的根瘤菌是否具 有固氮能力，其做法是将生长在培养液中的试 管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌液， 让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管 苗分别转人 的培养液中培养，观察 两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好 于乙组，则说明 (4)若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤 菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌，用于生 产根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料，在 农业生产中使用微生物肥料的作用是 (答出 2点即可)。 考向二动物细胞工程 1.(2026·陕晋宁青卷)将人类免疫球蛋白(1g)基 因导入小鼠胚胎干细胞后，经核移植技术获得 的转基因小鼠可用于制备单克隆抗体。下列叙 述正确的是 A.核移植受体卵母细胞培养成熟的标志是排 出第二极体 B.人g基因在小鼠胚胎干细胞不表达是因为 未接受抗原刺激 C.免疫的B淋巴细胞无需克隆化培养即可与： 小鼠骨髓瘤细胞融合 D.将选择培养基上存活的杂交瘤细胞注入小 鼠腹腔培养获得单克隆抗体 2.（2026·黑吉辽蒙卷)人端粒酶催化亚基： (hTERT)能维持端粒DNA序列长度。将间充 质干细胞分为两组并进行贴壁培养：a组导入： 空载体；b组导入ATERT基因并持续表达。下！ 列叙述错误的是 ( A.细胞培养过程中，培养液需要定期更换 B.传代培养时，可用纤维素酶处理使贴壁细胞： 分散 C.a组细胞端粒DNA序列会随分裂次数增加 而逐渐缩短 D.与a组细胞相比，b组细胞可分裂的次数会 明显增加 3.(2026·湖南卷)大规模生产治疗性单克隆抗体 时，常采用悬浮细胞表达系统。下列叙述错误 的是 A.该类抗体在细胞中的翻译起始于游离在细 胞质基质中的核糖体 B.该类抗体在细胞的内质网和高尔基体中修饰 加工 C.悬浮细胞在培养过程中出现增殖能力下降的 原因是接触抑制 D.一种治疗性单克隆抗体一般只能与一种抗： 原结合 17 4.(2025·山东卷)利用动物体细胞核移植技术培 育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误 的是 牛甲耳部的体细胞 培养转基因体细胞 转基因 核移植 牛乙的卵母细胞去核重构胚→囊胚植入牛丙的 子宫→犊牛丁 A.对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的 卵母细胞 B.卵母细胞去核应在其减数分裂I中期进行 C.培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D.可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 5.(2025·河北卷)生物工程在社会生产中的应用 日益广泛，下列相关技术和方法错误的是 A.利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和 优良性状的保持 B.在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞 培养 C.利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细 胞融合 D.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵 用于胚胎制备 6.(2025·北京卷)动物细胞培养基一般呈淡红色。 某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄 色。由此推断使培养基呈淡红色的是 ) A.必需氨基酸 B.抗生素 C.酸碱指示剂 D.血清 7.(2025·黑吉辽蒙卷)下图是制备抗白细胞介 素-6(IⅡ6)单克隆抗体的示意图。下列叙述错 误的是 骨髓瘤 细胞 ③ 多种 某类 诱导融合细胞 淋巴细胞 ④筛选 抗L-6 分泌特定抗体⑤朵交瘤 单克隆抗体 的杂交瘤细胞筛选细胞 A.步骤①给小鼠注射L6后，应从脾中分离筛 选T淋巴细胞 B.步骤②在脾组织中加人胃蛋白酶，制成单细 胞悬液 C.步骤③加人灭活病毒或PEG诱导细胞融合， 体现了细胞膜的流动性 D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出 T 了杂交瘤细胞 8.(2024·吉林卷)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成 纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间 点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确 的是 指数增长期平台期 10 班 104 期 23 5 时间/d A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 量 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大 有关 9.(2024·浙江1月)越野跑、马拉松等运动需要 大量消耗糖、脂肪、水和无机盐等物质。运动员 超 到达终点时，下列各种激素水平与正常的相比， 正确的是 ( A.抗利尿激素水平高，胰高血糖素水平低 B.抗利尿激素水平低，甲状腺激素水平高 C.胰岛素水平高，甲状腺激素水平低 蝶 D.胰岛素水平低，胰高血糖素水平高 10.(2022·山东卷)如图 最 所示，将由2种不同 的抗原分别制备的单 抗体1 抗体2 抗体3 克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制 备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误 的是 177 A.双抗可同时与2种抗原结合 B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使 用的2种抗原 D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产 双抗的浆细胞 1.(2023·湖北卷)某病毒对动物养殖业危害十 分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为 抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病 毒，其主要技术路线如图所示。 基因A 转基因 免疫免疫的 离体培养的小 工程菌 蛋白A 小鼠脾细胞 鼠骨髓瘤细胞 诱导融合 单克隆抗体筛选← 杂交瘤细胞筛选 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细 胞（含浆细胞） (填“需要”或“不需 要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性 物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对 细胞膜的作用是 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的 选择培养基（如HAT培养基），该培养基对 和 生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳 蛋白进行杂交，其目的是 (4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下 列属于DNA连接酶底物的是 OHOH PP S'TTTTT3' S'TH3 3'⊥LLl5 311S OH OH PP ⑦ ② POH OH P S'TTTTTTTT3 5'THT3 3山4L山53L山5 OH P POH ③ ④ 12.(2023·浙江6月)赖氨酸是人体不能合成的 必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量 很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含 量。回答下列问题： (1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时， 能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖 氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式 属于 。 根据这种调节方式，在 培养基中添加 用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到 抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得 再生植株。 (2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发 展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核 移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆 奶牛。其基本流程为： ①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的 发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的 基因)，可通过检索 获取其编 码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的 目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载 体连接，构建出乳腺专一表达载体。 ②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞(BEF)。 将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与 BEF膜发生 ,表达载体最终 进入细胞核，发生转化。 178 ③核移植。将转基因的BEF作为核供体细 胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去 核后作为 将两种细胞进 行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合， 同时起到了 重组细胞发 育的作用。 ④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细 胞体外培养至 ,植人代孕母牛子 宫角，直至小牛出生。 ⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转 基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以 为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中 存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛 乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞 和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA,对总RNA 进行 处理，以去除DNA污染， 再经逆转录形成cDNA,并以此为 利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目 的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而 不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？质体呈绿色)。(2)植物细胞壁的主要成分是纤雏素和果胶。！ 由于甲原生质体提供的是核基因，因此需使其细胞质失活：乙 原生质体提供的是细胞质基因，因此需使其细胞核失活。可！ 采用血细胞计数板对原生质体进行计数。加入过量的培养基 可降低PEG浓度，使原生质体融合终止。(3)由于将融合原： 生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合后，在凝固前倒入培养基，！ 融合原生质体分散固定在平板中，可独立生长、分裂形成愈伤 组织，因此同一块愈伤组织所有细胞来源于一个融合原生质！ 体。综合分析可知，甲原生质体的细胞质失活，乙原生质体的！ 细胞核失活，因此，未发生融合的甲原生质体、未发生融合的！ 乙原生质体，以及同种龄合（甲原生质你与甲原生质休融合 乙原生质体与乙原生质体融合)的原生质体无法生长，分裂，！ A、B项符合题意：杂种细胞的结构和功能完整，能够进行生 长、分裂形成愈伤组织，D项符合题意。(4)愈伤组织经再分！ 化能形成胚状体或芽。胚状体能长出根、芽，直接发育成再生 植株。(5)提取纯化再生植株的总DNA,可作为PCR扩增的1 模板。扩增序列a时所用的特异性引物是M1和M2。PCR! 的扩增产物常用凝胶电泳进行鉴定。若在2个PCR扩增体· 系中能分别扩增出a序列和b序列，则将2个PCR扩增体系： 扩增的产物进行凝胶电泳后，可观察到1个凝胶中含a序列！ 对应的1个条带，1个凝胶中含b序列对应的1个条带。 【答案】(1)再生植株叶片(2)纤维素细胞质、细胞核 血细胞计数板终止原生质体融合(3)一个融合原生质体 ABD(4)再分化根和芽(5)模板M1、M2电泳1 专题十九细胞工程 考向一 1.A2.B3.A4.A5.C6.C7.D8.A9.B10.C 11.B12.A13.BD14.D15.C16.C17.A 18.【解折】()芜培养物通常是由一个微生物生长，警殖所形成 的单菌落，根据题中信息“从豆科植物……获得纯培养物”可！ 知，此实验中的纯培养物是根痛茵单菌落。(2)植物组织培养 的简单过程：取外植体并消毒→脱分化（也叫去分化）形成愈！ 伤组织→再分化形成组织或器官→发育成一株完整的植林。！ 植物细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整！ 有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。植物细胞的全： 能性是植物组织培养的理论基础。(3)若接种到试管苗上的 根瘤菌具有固氮作用，剥该试管苗可以在无氮的培养液中正！ 常生长。(4)微生物菌肥的作用有提高作物的产量，提高土壤· 肥力，改善土壤结构等。 【答案】(1)根瘤菌单菌落(2)脱分化再分化细胞经分！ 裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞 的潜能和特性(3)无氮接种到试管苗上的根瘤菌具有固！ 氮作用(4)增加土壤肥力，改善土壤结构，提高作物的产量： (答出2点即可) 考向二 1.C2.B3.C4.B5.B6.C7.ABD8.D9.D。10.D 11.【解析】(1)一殷认为，已免疫的脾细胞（含浆细胞）中已含足1 够数量的能产生特异性抗体的效应B细胞，不需要通过原代 培养扩大细胞数量。聚乙二醇(PEG)分子能改变膜结构，使· 两细胞接触，点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细 胞接触，点处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作！ 用，使细胞融合。(2)淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合后，有的细1 胞未融合，有的细胞已融合：融合细胞中有的是具有同种核的！ 细胞，有的是具有不同种核的细胞（杂交瘤细胞）。使用远择 培养基的目的是筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞：在该： 22 培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞的 生长受到抑制，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。(3)将抗体 与该病毒外壳蛋白进行杂交的目的是从杂交瘤细胞中筛远出 能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。(4)在核酸中，一个核苷酸的 3'端羟基与另一个核苷酸的5'端磷酸基团发生脱水缩合，形 成磷酸二酯键。故④符合题意。 【答案】(1)不需要改变细胞膜结构（使两细胞接触点处质膜 的脂类分子发生疏散和重组)(2)未融合的（亲本）细胞融合 的具有同种核的细胞(3)筛选能分泌与该病毒外壳蛋白A特 异性结合的抗体的杂交瘤细胞(4)④单克隆抗体的制备、基因 工程 2.【解析】(1)通过抑制或减弱一开始的变化，雏持物质含量稳定， 这种调节方式属于负反馈调节。人为添加一定浓度的赖氨酸类 似物，使不抗赖氨酸类似物的细胞死亡，而抗赖氨酸类似物的细 胞突变体能够存活。(2)①可通过检索生物信息数据库（或遗传 序列数据库)获取目的基因的编码序列。②脂质体由磷脂等构 成，脂质体可以与牛胚胎成纤维细胞的细胞膜发生融合，从而使 表达载体进入细胞，最终进入细胞核，发生转化。③卵母细胞去 核后作为受体细胞。经核移植的重组细胞需利用电刺激进行胚 激活。④将重组细胞体外培养至早期爱胚后，可移植至代孕母牛 子宫角。⑤DNA水平检测的目的是，检测转基因牛中是否含有 目的基因。分析可知，可以转基因牛耳组织细胞作为阳性对照。 进行RNA水平检测时，需利用DNA酶(DNA水解酶)处理总 RNA,以去除DNA污染。RNA经逆转录形成的cDNA可作为 PCR扩增的模板，通过PCR技术可获取大量的目的基因片段。 目的基因只在转基因牛乳腺细胞中表达的原因是在构建基因表 达载体时，将目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连 接，构建出了乳腺专一表达载体，该表达载体中的特异性启动子 使目的基因仅在乳腺细胞中表达，而不会在其他细胞中表达。 【答案】(1)负反馈调节一定浓度的赖氨酸类似物(2)①生 物信息数据库/遗传序列数据库②融合③受体细胞激活 ④早期囊胚⑤转基因牛耳组织细胞DNA酶模板构建的 表达载体含乳腺特异性启动子，使目的基因仅在乳腺细胞中表达 专题二十胚胎工程 考向 1.B2.A3.B4.C5.C6.B7.C8.D9.A10.D 11.C12.D13.C 4.【解析】(1)精液可以冷冻保存，使用前再将特液解冻离心分 离。刚排出的特子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后 才能受精，故在体外受精前要对精子进行获能处理。通常采 用的体外获能方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法是将 特子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化 学药物诱导精子获能。卵母细胞需要培养到减数第二次分裂 中期(MⅡ中期)才能具备与精子受粉的能力。 (2)进行早期胚胎培养的培养液中，除了无机盐、激素、血清 外，还含有雏生素、氨基酸、核苷酸等。 (3)由题千信息“以…非繁殖期受体母羊为材料”可知，在进行 胚胎移植前，需对母羊进行发情处理，主要的操作步骤见答案。 【答案】(1)液氮冷冻保存刚排出的精子必须在雌性生殖 道内发生相应生理变化后才能受精肝素或钙离子载体 A23187MⅡ中期(2)维生素、氨基酸、核苷酸(3)第一步 对非繁殖期的受体母羊用激素处理，使其发情：第二步，将质 量好的囊胚移植到受体母羊的子宫：第三步，一段时间后，对 受体母羊进行是否妊娠的检查；第四步，一段时间后，受体母 羊生产胚胎移植的小羊。