专题十九 细胞工程-【创新大课堂】2026年高考生物五年真题分类汇编168优化重组卷

五年真题分类汇编·生物学 学校 班级 学号 姓名 密 的 禁 止 题 辟 志 塞 豆 汉槽0发合工限 股工联(5/ 接速(1/mim 0.25 mg.I.-I NAA .lng·0. MS+2.0mg·tIS-BA 0.05 mg.L-1 NAA MS+3.0mg·LlS-BA+ 双池6mim 75Mz样n敢30x+5 75 2.0202G.浙江一项)县州海中程港行粮型团全所 2.(202G·汉林青)图石一浙阳圳镇救投集限限 0.20 7.50 0.21 贸 /0.27 .70 0.25 -0.26 .(2023.党北青)文時导造运业国山一州冷限所 0.25 .0 0:25 粉 细胞工程 A.流程①的效果取决于消毒剂浓度 B.流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的 阶段 C.与流程②相比，流程③培养基中细胞分裂素 类与生长素类物质的比值更大 D.与流程③相比，提高流程④培养基的盐浓度 有利于丛生苗的生根 4.(2025·黑吉辽蒙卷)利用植物组织培养技术获 得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺 问题。下列叙述正确的是 A.细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组 织的形成 B.培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌 法灭菌 C.芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作 外植体 D.紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来 获取，植物组织培养优势明显 5.(2024·山东卷)下列关于植物愈伤组织的说法 正确的是 A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细 胞壁获得原生质体 B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成 愈伤组织 C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自 亲本的2个细胞核 D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程 属于无性繁殖 6.(2024·浙江1月)山药在生长过程中易受病毒 侵害，导致品质和产量下降。采用组织培养技 术得到脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性， 流程如图。下列操作不可行的是 外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗 A.选择芽尖作为外植体可减少病毒感染 B.培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染 C.将丛生芽切割后进行继代培养可实现快速 繁殖 D.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈 伤组织形成丛生芽 7.(2023·广东卷)人参皂苷是人参的主要活性成 分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生 愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的 产率。下列叙述错误的是 ( A.细胞融合前应去除细胞壁 B.高Ca2+一高pH溶液可促进细胞融合 C.融合的细胞即为杂交细胞 D.杂交细胞可能具有生长快速的优势 8.(2022·浙江6月)保护生物多样性是人类关注的： 问题。下列不属于生物多样性的是 A.物种多样性 B.遗传多样性 C.行为多样性 D.生态系统多样性 9.(2022·浙江1月选考)农作物秸秆的回收利用 方式很多，其中之一是将秸秆碎化后作为食用 菌的栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用， 相当于植物组织培养中固体培养基的( A.琼脂十蔗糖 B.蔗糖+激素 C.激素十无机盐 D.无机盐十琼脂 10.(2021·江苏)植物组织培养技术常用于商业 化生产，其过程一般为：无菌培养物的建立→ 培养物增殖>生根培养→试管苗移栽及鉴定。 下列相关叙述错误的是 A.为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后 才可接种培养 B.组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成， 直接形成胚状体等结构 C.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值， 有利于诱导生根 D.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗 不会出现变异 11.(2021·北京)研究者拟通过有性杂交的方法 将簇毛麦(2n=14)的优良性状导入普通小麦 (2=42)中。用簇毛麦花粉给数以千计的小 麦小花授粉，10天后只发现两个杂种幼胚，将 其离体培养，产生愈伤组织，进而获得含28条 染色体的大量杂种植株。以下表述错误的是 A.簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离 B.培养过程中幼胚细胞经过脱分化和再分化 C.杂种植株减数分裂时染色体能正常联会 D.杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株 12.(2021·福建)科研人员利用植物体细胞杂交 技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图 如下。 矮牵牛品种 愈伤 原生质 甲幼嫩叶片 组织 体甲 杂种 杂种 矮牵牛品种 愈伤 原生质 细胞 植株 乙幼嫩叶片 组织 体乙 下列叙述正确的是 ( ) A.愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B.获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C.可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合 和细胞壁再生 D.用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得 原生质体 13.(2023·新课标卷)根瘤菌与豆科植物之间是 互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根内可引 起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能 力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌，某研究小组： 174 做了如下实验：从盐碱地生长的野生草本豆科 植物中分离根瘤菌；选取该植物的茎尖为材 料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）； 在实验室中探究试管苗根瘤中所含根瘤菌的 固氮能力。回答下列问题。 (1)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培 养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物 是 (2)取豆科植物的茎尖作为外植体，通过植物 组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植 体经诱导形成试管苗的流程是：外植体①愈 ② 伤组织试管苗。其中①表示的过程是 ,②表示的过程是 由外植体最终获得完整的植株，这一过程说明 植物细胞具有全能性。细胞的全能性是指 (3)研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗 为材料，研究接种到试管苗上的根瘤菌是否具 有固氮能力，其做法是将生长在培养液中的试 管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌液， 让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管 苗分别转入 的培养液中培养，观察 两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好 于乙组，则说明 (4)若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤 菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌，用于生 产根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料，在 农业生产中使用微生物肥料的作用是 (答出 2点即可)。 4.(2021·浙江1月选考)回答下列问题： 三叶青为蔓生的藤本植物，以根入药。由于野 生三叶青对生长环境要求非常苛刻，以及生态 环境的破坏和过度的采挖，目前我国野生三叶 青已十分珍稀。 (1)为保护三叶青的 多样性和保 证药材的品质，科技工作者依据生态工程原 理，利用 技术，实现了三叶青的 林下种植。 (2)依据基因工程原理，利用发根农杆菌侵染 三叶青带伤口的叶片，叶片产生酚类化合物， 诱导发根农杆菌质粒上vr系列基因表达形 成 和限制性核酸内切酶等，进而 从质粒上复制并切割出一段可转移的DNA片 段(T一DNA)。T一DNA进人叶片细胞并整 合到染色体上，T一DNA上rol系列基因表 达，产生相应的植物激素，促使叶片细胞持续 不断地分裂形成 ,再分化形成毛 状根。 (3)剪取毛状根，转入含头孢类抗生素的固体 培养基上进行多次 培养，培养基 中添加抗生素的主要日的是 最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进 行悬浮培养，通过控制摇床的 和 温度，调节培养基成分中的 ,获 得大量毛状根，用于提取药用成分。 考向二动物细胞工程 1.(2025·山东卷)利用动物体细胞核移植技术培 育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误 的是 ( 培养 牛甲耳部的体细胞 →转基因体细胞 转基 校移植 去核 牛乙的卵母细胞 重构胚→囊胚植入牛丙的 子宫→犊牛丁 A.对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的 卵母细胞 B.卵母细胞去核应在其减数分裂I中期进行 C.培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D.可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 2.(2025·河北卷)生物工程在社会生产中的应用 日益广泛，下列相关技术和方法错误的是 A.利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和： 优良性状的保持 B.在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞 培养 C.利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细 胞融合 D.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵 用于胚胎制备 3.(2025·北京卷)动物细胞培养基一般呈淡红色。 某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄 色。由此推断使培养基呈淡红色的是 A.必需氨基酸 B.抗生素 C.酸碱指示剂 D.血清 4.(2025·黑吉辽蒙卷)下图是制备抗白细胞介 素-6（Ⅱ6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错 误的是 ( ) 骨髓瘤 细胞 ③ 多种 ①D 几了免疫小鼠 ② 某类 诱导融合细胞 淋巴细胞 ④筛选 抗L-6 分泌特定抗体 ⑤杂交瘤 单克隆抗体 的杂交瘤细胞筛选细胞 A.步骤①给小鼠注射L6后，应从脾中分离筛 选T淋巴细胞 B.步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细 胞悬液 17 C.步骤③加人灭活病毒或PEG诱导细胞融合， 体现了细胞膜的流动性 D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出 了杂交瘤细胞 5.(2024·吉林卷)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成 纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间 点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确 的是 指数增长期评台期 ②. 期 0 1 234 5 时间/d A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 D.细胞增长进人平台期可能与细胞密度过大 有关 6.(2024·浙江1月)越野跑、马拉松等运动需要 大量消耗糖、脂肪、水和无机盐等物质。运动员 到达终点时，下列各种激素水平与正常的相比， 正确的是 A.抗利尿激素水平高，胰高血糖素水平低 B.抗利尿激素水平低，甲状腺激素水平高 C.胰岛素水平高，甲状腺激素水平低 D.胰岛素水平低，胰高血糖素水平高 7.(2022·山东卷)如图 所示，将由2种不同的 抗原分别制备的单克 隆抗体分子，在体外解 。抗体1抗体2 抗体3 偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双 抗。下列说法错误的是 ( A.双抗可同时与2种抗原结合 B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使 用的2种抗原 D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产 双抗的浆细胞 8.(2021·辽宁)下列有关病毒在生物学和医学领 域应用的叙述，错误的是 A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合 B.用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体 C.基因工程中常用噬菌体转化植物细胞 D.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防 9.(2021·浙江1月选考)下图为动物成纤维细胞 的培养过程示意图。下列叙述正确的是( ①切取组织②制备细胞悬浮液③原代培养 ④传代培养 A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化 10.(2021·山东)一个抗原往往有多个不同的抗 原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生 种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统 称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注 入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分 离出多抗。下列说法正确的是 A.注人小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影 响比对多抗纯度的影响大 B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与 骨髓瘤细胞融合 C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而 多抗仍有效的情况 11.(2023·湖北卷)某病毒对动物养殖业危害十 分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为 抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病 毒，其主要技术路线如图所示 基因A 转基因 免疫 免疫的 离体培养的小 工程菌 蛋白A 小鼠 脾细胞 鼠骨髓瘤细胞 诱导融合 单克隆抗体筛选 杂交瘤细胞筛选 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，己免疫的脾细 胞（含浆细胞） (填“需要”或“不需 要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性 物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对 细胞膜的作用是 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的 选择培养基（如HAT培养基），该培养基对 和 生长具有抑制作用 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳 蛋白进行杂交，其目的是 (4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下 列属于DNA连接酶底物的是 OH OH TTT3 PP 311111111115 3111115 OHOH PP ① ② POH OH P 5'T1TTTTTTT3 5'TTTTT3 31111111115 3'LLLL1L山LLLL5 OH P POH ④ 176 2.(2023·浙江6月)獭氨酸是人体不能合成的 必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量 很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含 量。回答下列问题： (1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时， 能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖 氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式 属于 。 根据这种调节方式，在 培养基中添加 用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到 抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得 再生植株。 (2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发 展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核 移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆 奶牛。其基本流程为： ①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的 发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的 基因)，可通过检索 获取其编 码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的 目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载 体连接，构建出乳腺专一表达载体。 ②表达载体转人牛胚胎成纤维细胞(BEF)。 将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与 BEF膜发生 ,表达载体最终 进入细胞核，发生转化。 ③核移植。将转基因的BE℉作为核供体细 胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去 核后作为 。 将两种细胞进 行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合， 同时起到了 重组细胞发育的作用： ④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细 胞体外培养至 ,植人代孕母牛子 宫角，直至小牛出生。 ⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转 基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以 为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中 存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛 乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞 和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA,对总RNA 进行 处理，以去除DNA污染， 再经逆转录形成cDNA,并以此为 利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目 的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而 不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？【答案】(1)编码序列错位/基因突变氨基酸序列替换 敲除/缺失(2)32(3)子代全为野生型（短毛）野生型 :突变型（短毛：长毛）=1：1(4)野生型基因发生突变，导 致g基因丢失了启动子，无法转录出RNA:反转录没有相应！ 产物，检测不出结果抑制毛发生长 14.限制酶的作用、碱基互补配对、实验分析 【解析】(1)限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序 列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。在构建 片段甲时，将M1与M2片段分别插入质粒的I和Ⅱ、Ⅲ和V· 酶切位点之间，可保证片段甲含有启动子和终止子，从而使N! 基因能在菌株B2中表达。(2)向导RNA为核糖核苷酸序列，！ 含有碱基A、U、C、G:B1基因组DNA为脱氧核苷酸序列，含 有碱基A、T,C、G。故向导RNA与B1基因组DNA互补配对 可形成的碱基对有G-C、A-U、A-T。(3)由题中信息“利用 CRISPR/Cas9基因组编辑技术将片段甲插入B1的基因组， 得到菌株B2”可知，用引物P1和P2进行PCR验证片段甲插 入了细菌B1基因组所用的模板为菌株B2的基因组DNA。! 结合题图分析可知P4是以细菌B1基因组DNA为模板设计！ 的引物，故以菌株B2的基因组DNA为模板，以P3和P4为引物 进行PCR,不能扩增出目的条带。(4)焚烧秸秆会污染环境，利用！ 高效降解纤雏素的细菌处理秸秆可实现废物利用，减少环境： 污染。 【答案】(1)磷酸二酯键片段甲含有启动子和终止子 (2)A-U、A-T(3)菌株B2的基因组DNA无扩增产物 (4)实现废物利用，减少环境污染（合理即可给分） 15.【解析】(1)据题千信息可知，突变体是由野生型DA1基因 发生隐性突变形成的，采用农杆菌转化法将野生型DA1基因！ 转入突变体植株，若突变体表型确由隐性突变造成，由于转入： 的基因为显性基因，则转基因植株的种子大小应与野生型植 株的种子大小相近。(2)构建基因表达载体时，需要用限制性： 核酸内切酶对经过PCR扩增的DA1基因和作为运载体的Ti 质粒进行切割。为确保插入的DA1基因可以正常表达，DA11 基因（目的基因）的上下游需具备启动子和终止子。(3)①卡 那纸素抗性基因为标记基因，标记基因的作用是鉴别受体细： 胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛 选出来。用农杆菌转化T。代植株并自交，将T1代种子播种 在含有卡那舞素的培养基上，能够萌发并生长的阳性个体即 表示其基因组中插入了DA1基因（和卡那霉素抗性基因）。！ ②假设DA1基因用A表示，结合题中信息知，T1代中能在含】 有卡那霉素的培养基上生长的植株的基因型为Aa或AA或： 多位点插入，T1代阳性植株自交所得T2代种子按单株收种 并稀种于含有卡那舞素的培养基上，T1代阳性植株基因型为 Aa时，该植株上所结种子有75%能够萌发并长成幼苗，因此， 应选择阳性率约为75%的培养基中幼苗继续培养。③T2代！ 阳性植株的基因型为1/3AA、2/3Aa,将②中选出的T2代阳 性植株自交，所得的T3代种子按单株收种并播种于含有卡那 霉素的培养基上，基因型为AA的植株自交，其后代不会发生 性状分离，在含有卡那骞素的培养基上，所有种子都能够萌发！ 并生长，而基因型为A的植株自交，其后代会发生性状分离，： 在含有卡那露素的培养基上部分种子不能萌发，因此阳性率 达到100%的培养基中的幼苗为纯合子(AA),即目标转基因！ 植株。分析题图可知，野生型相关基因中不含限制性核酸内 切酶X的识别序列，不能被该酶切割，已知DA1基因的长度 为150bp,因此，野生型相关基因被限制性核酸内切酶X切割： 并电泳后得到的条带为150bp。突变型相关基因中含有限制： 性核酸内切酶X的识别序列，用该酶切割后，突变基因被切割 成100bp,50bp两种DNA片段，经电泳后得到的条带为100 bp和50bp。突变型和野生型相关基因经限制性核酸内切酶 X切割并电泳后得到的结果如图所示。 标准参照物野生型突变型 150bp 100 bp 50 bp (bp指核苷酸对) 27 【答案】(1)野生型(2)T1质粒启动子和终止子 (3)①DA1/基因（和卡那霉素抗性基因）②75③自交 100如图所示 标谁参照物野生型突变型 150bp 100bp 50 bp ■(bp指核苷酸对) 16.【解析】(1)在甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交前应检验 两种植物的原生质体是否具备形成再生植株的能力。为了便 于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融 合，若甲植物原生质体来自幼苗的根，则乙植物原生质体应来 自幼苗的叶片（注：叶片细胞中含有叶绿体，叶片细胞的原生 质体呈绿色)。(2)植物细胞壁的主要成分是纤雏素和果胶。 由于甲原生质体提供的是核基因，因此需使其细胞质失活：乙 原生质体提供的是细胞质基因，因此需使其细胞核失活。可 采用血细胞计数板对原生质体进行计数。加入过量的培养基 可降低PEG浓度，使原生质体融合终止。(3)由于将融合原 生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合后，在凝固前倒入培养基， 融合原生质体分散固定在平板中，可独立生长、分裂形成愈伤 组织，因此同一块愈伤组织所有细胞来源于一个融合原生质 体。综合分析可知，甲原生质体的细胞质失活，乙原生质体的 细胞核失活，因此，未发生融合的甲原生质体、未发生融合的 乙原生质体，以及同种融合（甲原生质体与甲原生质体融合、 乙原生质体与乙原生质体融合)的原生质体无法生长、分裂， A、B项符合题意：杂种细胞的结构和功能完整，能够进行生 长、分裂形成愈伤组织，D项符合题意。（4)愈伤组织经再分 化能形成胚状体或芽。胚状体能长出根、芽，直接发育成再生 植株。(5)提取纯化再生植株的总DNA,可作为PCR扩增的 模板。扩增序列a时所用的特异性引物是M1和M2。PCR 的扩增产物常用凝胶电泳进行鉴定。若在2个PCR扩增体 系中能分别扩增出a序列和b序列，则将2个PCR扩增体系 扩增的产物进行凝胶电泳后，可观察到1个凝胶中含a序列 对应的1个条带，1个凝胶中含b序列对应的1个条带。 【答案】(1)再生植株叶片(2)纤维素细胞质、细胞核 血细胞计数板终止原生质体融合(3)一个融合原生质体 ABD(4)再分化根和芽(5)模板M1、M2电泳1 专题十九细胞工程 考向一 1.B[植物细胞工程的应用根据表格数据分析，随着细胞千重 增加，黄酮产量也增加：随着细胞干重减少，黄酮产量也降低， 说明黄酮产量与细胞千重呈正相关，A正确。氧气的供给有利 于细胞呼吸为生命活动提供能量，对水母雪莲细胞生长、分裂和 代谢是必需的，C正确。根据表格数据分析，转速为75r/min 时，细胞的相对生长速率(0.26)最大，黄酮产量(0.32g/L)最 高，D正确。] 错误项分析黄酮属于次生代谢产物，次生代谢产物不是细胞 生存和生长所必需的，B错误。 2.【命题点】植物组织培养的过程 C[过程①是由组织块形成愈伤组织，属于脱分化过程，脱分 化过程中细胞通过有丝分裂增殖，A正确：过程②是愈伤组织 形成胚状体，属于再分化过程，再分化会形成不同种类的细胞， 进而发育成不同组织、器官，B正确：过程②（再分化形成胚状 体)和过程③（胚状体发育成试管苗）所用培养基成分、浓度不 完全相同，C错误：培养基中糖类可作为碳源，为植物细胞提供 碳元素用于合成有机物等，同时糖类能影响培养基渗透压，雏 持细胞正常形态，D正确。] 回归教材人教版选择性必修3P35菊花的组织培养 植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再 分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发 育方向。将愈伤组织接种到含有特定激素的培养基上，就可以 诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株。 3.【命题点】植物的快速繁殖 B[流程①是对外植体腋芽消毒，消毒的效果取决于消毒剂的 种类、浓度和处理时间等，A错误；由于腋芽中含有分生组织， 可以不经过脱分化形成愈伤组织的阶段，直接萌生成幼苗，B 正确：分析比较表格数据可知，与流程②相比，流程③培养基中 细胞分裂素类与生长素类物质的比值更小，C错误：据表分析，！ 与流程③相比，流程④中NAA浓度提高并添加了IBA,即提高1 生长素类物质的含量，并使用弓MS培养基降低了盐浓度，从！ 而有利于诱导丛生苗生根，D错误。] 4.【命题点】植物细胞工程 A「细胞分裂素比例高时有利于芽的分化，生长素比例高时！ 有利于根的分化，二者比例适中时有利于愈伤组织的形成，A 正确；干热灭菌法不能用于培养基灭菌，一般使用高压蒸汽灭！ 菌法（或湿热灭菌法）对培养基进行灭菌，B错误：芽原基细胞 中含有植物生长发育所需的全套遗传信息，可以用作外植体，C 错误：紫杉醇能通过细胞产物的工厂化生产来获取，且比植物！ 组织培养优势更明显，D错误。 5.BD「植物组织培养愈伤组织的细胞壁主要由纤维素和果 胶组成，可用纤雏素酶和果胶酶去除愈伤组织的细胞壁，不能· 用胶原蛋白酶去除植物细胞的细胞壁，A错误。融合的原生质· 体再生出细胞壁标志着原生质体融合完成，之后才能形成愈伤！ 组织，B正确。体细胞杂交获得的杂种植株细胞中只有一个细！ 胞核，C错误。通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程没有！ 生殖细胞的参与，属于无性繁殖，D正确。] 6.D[植物组织培养技术芽尖等植物顶端分生区附近的病毒 极少，甚至无病毒，故选择芽尖作为外植体可减少病毒感染，A! 可行。培养基中有大量的营养物质，容易滋生细菌，加入抗生！ 素可抑制杂菌的生长，降低杂菌污染，B可行。将丛生芽切割！ 后转移到新的培养基上继续进行扩大培养属于继代培养，使用！ 此方法可实现快速繁殖，C可行。提高生长素和细胞分裂素的· 比值可促进愈伤组织形成根，D不可行。 7.C[植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的！ 杂交，因此，在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤雏素酶和果！ 胶酶去除这层细胞壁，获得原生质体，A正确。人工诱导原生 质体融合的方法基本分为两大类一物理法和化学法，物理法 包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、！ 高C+一高pH融合法等，B正确。融合的细胞可能由一种细 胞融合而成，也可能由两种细胞融合而成（即杂交细胞），C错！ 误。杂交细胞可能具有生长快速的优势，D正确。] 8.C「生物多样性的内容有：遗传多样性、物种多样性和生态系 统多样性，A、B、D正确，C错误。 9.A[据题干的信息，“秸秆碎化后作为食用菌的栽培基质”，秸！ 秆中的纤雏素在食用菌菌丝生长过程中大量降解，提供碳源和！ 能源，这相当于植物组织培养基中添加的蔗糖；秸秆中的纤雏 素是固体，可以作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，这 相当于植物组织培养基中添加的琼脂。] 10.D[植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养！ 物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培养，所用的培！ 养基必须彻底灭菌，A正确：组织培养过程中也可无明显愈伤 组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包襄上人工种 皮，可制作成人工种子，B正确：生长素和细胞分裂素的比值 高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培养基中生！ 长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确：用同一 植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组 织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D错误。] 11,C[簇毛麦与小麦的有性杂交后代在减数分裂时染色体联会· 紊乱，不可育，故二者之间存在生殖隔离，A正确：幼胚细胞经 过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化形成胚状体或： 丛芽，从而得到完整植株，B正确：杂种植株细胞内由于没有！ 同源染色体，故减数分裂时染色体无法正常联会，C错误：杂 种植株的染色体加倍后能获得可育植株，D正确。] 12.D[愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞脱分化形成的，A错误；由！ 于基因的选择性表达和基因间的互作效应，获得的杂种植株 不一定都能表现亲本的优良性状，B错误；可用聚乙二醇诱导 原生质体甲和乙的融合，但不能诱导细胞壁的再生，C错误；： 由于植物细胞壁的成分主要是纤雏素和果胶，故可以用纤雏！ 素酶和采胶酶处理愈伤组织以获得原生质体，D正确。] 13.【解析】(1)纯培养物通常是由一个微生物生长、繁殖所形成 的单菌落，根据题中信息“从豆科植物…获得纯培养物”可！ 知，此实验中的纯培养物是根瘤菌单菌落。(2)植物组织培养！ 27 的简单过程：取外植体并消毒→脱分化（也叫去分化）形成愈 伤组织→再分化形成组织或器官→发育成一株完整的植株。 植物细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整 有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。植物细胞的全 能性是植物组织培养的理论基础。(3)若接种到试管苗上的 根瘤菌具有固氮作用，则该试管苗可以在无氮的培养液中正 常生长。(4)微生物菌肥的作用有提高作物的产量，提高土壤 肥力，改善土壤结构等。 【答案】(1)根瘤菌单菌落(2)脱分化再分化细胞经分 裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞 的潜能和特性(3)无氮接种到试管苗上的根瘤菌具有固 氮作用(4)增加土壤肥力，改善土壤结构，提高作物的产量 (答出2点即可) 14.【解析】(1)生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态 系统多样性，为保护三叶青的遗传多样性和保证药材的品质； 三叶青的林下种植，是利用间种技术。 (2)分析题意可知，从质粒上复制并割出一段可转移的 DNA片段(T一DNA),DNA复制需要DNA聚合酶，故可知 酚类化合物诱导发根农杆菌质粒上ir系列基因表达，形成 DNA聚合酶和限制性核酸内切酶等。根据植物组织培养技 术过程可知，相应植物激素可以促使叶片细胞脱分化形成愈 伤组织，再分化形成毛状根。 (3)剪取毛状根，转入含头孢类抗生素的固体培养基上进行多 次继代培养，培养基中添加抗生素的主要目的是杀灭发根农 杆菌。最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进行悬浮 培养，通过控制摇床的转速和温度，调节培养基成分中的营养 元素以及生长调节剂的种类和浓度，获得大量毛状根，用于提 取药用成分。 【答案】(1)遗传间种(2)DNA聚合酶愈伤组织(3)继 代杀灭发根农杆菌转速营养元素以及生长调节剂的种类 和浓度 考向二 1.【命题点】动物体细胞核移植技术 B[由题图可知，牛乙提供卵母细胞，故对牛乙注射促性腺激 素是为了收集更多的卵母细胞，A正确；卵母细胞去核应在其 减数分裂Ⅱ中期进行，B错误；培养牛甲的体细胞时应定期更 换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确； 可用PCR技术鉴定犊牛丁是否含有目的基因，以鉴定其是否 为转基因牛，D正确。 2.【命题点】细胞工程和胚胎工程 B[利用植物组织培养技术可实现兰花的快速繁殖和优良性 状的保持，原理是植物细胞的全能性，A正确；动物细胞培养的 气体条件为含有95%空气和5%C02的混合气体（关键点：CO2 的作用为维持培养液的PH),B错误；可用灭活病毒诱导动物 细胞的融合，C正确：可对供体母牛注射促性腺激素，使其超数 排卵，以便获得更多的卵母细胞用于胚胎制备，D正确。] 3.C[培养基颜色变化根据题中信息可知，调控pH的CO2耗 尽，培养基转为黄色，说明培养基颜色变化是由pH变化引起 的，推断使培养基呈淡红色的是酸碱指示剂，C符合题意。] 1.【命题点】制备单克隆抗体过程 ABD[步骤①注射特定抗原后，应从脾脏中分离筛选B淋巴 细胞，A错误：步骤②将动物组织分散为单个细胞过程应加入 胰蛋白酶或胶原蛋白酶（关锭，点：胃蛋白酶发挥作用时的H 较低，会损伤细胞)，B错误：步骤③为诱导细胞融合，常用灭活 病毒诱导法、PEG融合法、电融合法等，体现了细胞膜的流动 性，C正确：步骤④为第一次筛选，应用特定选择培养基进行筛 选，步骤⑤为第二次筛选，通过克隆化培养和抗体检测进行筛 选，D错误。 回归教材人教版选择性必修3P48制备单克隆抗体过程 筛选能分泌 特定抗体的 杂交瘤细胞 的 单克隆 先餐6→网 抗体A 1细胞杂交瘤 )一融合细胞饰选能分 器→ 单克隆 培养骨髓骨髓 特定抗体的 抗体B 瘤细胞瘤细胞 杂交瘤细胞 5.D「动物细胞培养动物细胞培养所需气体主要有O2和！ C○2，O2是细胞代谢所必需的。传代培养时，培养皿不能密！ 封，A错误。处于指数增长期的细胞形态和生理特性相对稳 定，适合进行传代培养，离体培养的细胞生命力比较脆弱，需要· 适应培养基的环境，传代最好在细胞生长覆盖瓶底80%一90%· 进行，选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误。题千： 显示从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤雏细胞进行贴壁培养，贴！ 壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然！ 后再用离心法收集，C错误。悬浮培养的细胞会因细胞密度过！ 大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受！ 阻，因此，细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关，D 正确。 6,D[体液调节越野跑、马拉松等运动后，运动员体内血糖大！ 量消耗，血糖含量降低，胰岛素含量降低，胰高血糖素含量上： 升，促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖；此时，机体代谢旺： 盛，甲状腺激素水平较高；同时机体大量排汗，导致细胞外液渗！ 透压升高，抗利尿激素分泌增加。综上可知，A、B、C错误，D 正确。] 7,D[根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时} 与2种抗原结合，A正确：根据抗原与抗体能够发生特异性结 合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使！ 药物发挥相应的作用，B正确；由于双抗是在两种不同的抗原！ 刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成的，因 此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来！ 进行抗原一抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确：同时注 射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化！ 成产双抗的浆细胞，D错误。】 8.C[促进动物细胞的融合除了物理方法和化学方法外，还可以！ 采用灭活的病毒，A正确：病毒作为抗原可刺激机体发生特异； 性免疫，产生抗体，用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体， B正确：基因工程中常用农杆菌转化植物细胞，农杆菌的特点！ 是其细胞内的Tⅰ质粒上的TDNA片段能够转移至受体细胞， 并整合到受体细胞的染色体上，C错误：经过灭活或减毒处理 的病毒可以作为免疫学中的疫苗，用于免疫预防，D正确。 9,C[动物细胞培养过程需要无菌操作，故步骤①的操作需要在 无菌环境中进行，A错误：动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶！ 或胶原蛋白酶处理动物组织，分散成单个细胞，制成细胞悬液，！ B错误；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，使！ 之分散成单个细胞，再分瓶培养，C正确：步骤④为传代培养过！ 程，该过程中部分细胞可能发生细胞转化，核型改变，D错误。]！ 10.D[单抗制备过程中有多次的筛选和鉴定，注入小鼠体内的抗！ 原纯度对单抗的纯度影响很小，注入小鼠体内的抗原纯度越： 高，说明抗原的种类越少，多抗的纯度就会越高，A错误；单抗 制备过程中并不是分离出浆细胞与骨髓瘤细胞融合的，而是融： 合以后进行筛选，B错误：题千信息“也可以从该小鼠的血清中 直接分离出多抗”可说明，非洲猪盘病毒衣壳蛋白72的表面： 有多种抗原决定簇，每种抗原决定簇都能刺激机体产生一种抗！ 体，所以利用该小鼠能制备出多种抗p72的单抗，C错误；非洲！ 猪瘟病毒衣壳蛋白p72是一种抗原，其表面有多种抗原决定 簇，每种抗原决定簇都能刺激机体产生一种抗体，所以p72部！ 分结构改变，会导致改变部位刺激产生的单抗失效，但未改变！ 部位刺激产生的抗体仍然能起作用，所以多抗仍有效，D正确。]！ 11.【解析】(1)一般认为，已免疫的脾细胞（含浆细胞）中已含足： 够数量的能产生特异性抗体的效应B细胞，不需要通过原代： 培养扩大细胞数量。聚乙二醇(PEG)分子能改变膜结构，使 两细胞接触，点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细 胞接触点处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作！ 用，使细胞融合。(2)淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合后，有的细！ 胞未融合，有的细胞已融合；融合细胞中有的是具有同种核的！ 细胞，有的是具有不同种核的细胞（杂交瘤细胞）。使用选择！ 培养基的目的是筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞；在该！ 培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞的！ 生长受到抑制，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。(3)将抗体 与该病毒外壳蛋白进行杂交的目的是从杂交瘤细胞中筛选出 能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。(4)在核酸中，一个核苷酸的 3'端羟基与另一个核苷酸的5'端磷酸基团发生脱水缩合，形！ 成磷酸二酯键。故④符合题意。 27 【答案】(1)不需要改变细胞膜结构（使两细胞接触点处质膜 的脂类分子发生疏散和重组)(2)未融合的（亲本）细胞融合 的具有同种核的细胞(3)筛选能分泌与该病毒外壳蛋白A特 异性结合的抗体的杂交瘤细胞(4)④单克隆抗体的制备、基因 工程 12.【解析】(1)通过抑制或减弱一开始的变化，维持物质含量稳定， 这种调节方式属于负反馈调节。人为添加一定浓度的赖氨酸类 似物，使不抗赖氨酸类似物的细胞死亡，而抗赖氨酸类似物的细 胞突变体能够存活。(2)①可通过检索生物信息数据库（或遗传 序列数据库)获取目的基因的编码序列。②脂质体由磷脂等构 成，脂质体可以与牛胚胎成纤雏细胞的细胞膜发生融合，从而使 表达载体进入细胞，最终进入细胞核，发生转化。③卵母细胞去 核后作为受体细胞。经核移植的重组细胞需利用电刺激进行胚 激活。④将重组细胞体外培养至早期囊胚后，可移植至代孕母牛 子宫角。⑤DNA水平检测的目的是，检测转基因牛中是否含有 目的基因。分析可知，可以转基因牛耳组织细胞作为阳性对照。 进行RNA水平检测时，需利用DNA酶(DNA水解酶)处理总 RNA,以去除DNA污染。RNA经逆转录形成的cDNA可作为 PCR扩增的模板，通过PCR技术可获取大量的目的基因片段。 目的基因只在转基因牛乳腺细胞中表达的原因是在构建基因表 达载体时，将目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连 接，构建出了乳腺专一表达载体，该表达载体中的特异性启动子 使目的基因仅在乳腺细胞中表达，而不会在其他细胞中表达。 【答案】(1)负反馈调节一定浓度的赖氨酸类似物(2)①生 物信息数据库/遗传序列数据库②融合③受体细胞激活 ④早期囊胚⑤转基因牛耳组织细胞DNA酶模板构建的 表达载体含乳腺特异性启动子，使日的基因仅在乳腺细胞中表达 专题二十胚胎工程 考向 1.【命题点】胚胎工程 C[若血细胞计数板的一个小格内精子数量过多，计数时会因 为重叠而数不清楚，应将采集的精液固定、稀释一定倍数后再 进行计数，A错误：人工授精时，精子可在雌性动物生殖道内获 能，无需提前进行获能处理，B错误：胚胎工程中，常用外源促 性腺激素进行超数排卵处理，C正确；母体对移植入子宫的外 来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，免疫耐受高，这是胚胎移 植的生理学基础，D错误。] 易错警示胚胎移植成功的生理基础：①同种动物的供、受体 的生殖器宫的生理变化是相同的，为供体胚胎移入受体提供相 同的生理环境：②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚 胎的收集提供了可能：③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不 发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能：④供 体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎 的遗传特性在孕育过程中不受影响。 【命题点】动物体细胞核移植、胚胎工程 C[动物体细胞核移植的基本过程是将体细胞核移植到去核 的MⅡ期卵母细胞中，形成重构胚（关靛，点：M期卵母细胞是 核移植的常用受体，其细胞质环境有利于核全能性体现)，A正 确；移植前胚胎发育率低，可能是体细胞核在去核卵母细胞中 无法恢复到分化前的功能状态，从而影响胚胎的正常发育，B 正确胚胎移植后成活率低可能与孵化失败有关，但孵化是指 透明带破裂，豚胎从其中伸展出来的过程，滋养层是沿透明带 内壁扩展和排列的细胞结构，C错误；与体细胞相比，胚胎细胞 分化程度低，因此胚胎细胞核移植的成功率通常高于体细胞核 移植的，D正确。] 【命题点】细胞工程 B[从动物体内取出组织，用胰蛋白酶等处理一段时间，将组 织分散成单个细胞。然后，用培养液将细胞制成细胞悬液，再 将细胞悬液放入培养瓶或培养皿内的初次培养，称为原代培养 （易错点：分瓶前的培养是原代培养，分瓶后的培养是传代培 养)，A错误。科学家已尝试采用多种方法来制备PS细胞，包 括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞 中或者用小分子化合物等来诱导形成PS细胞，PS细胞最初 是由成纤锥细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细 胞等也能被诱导为PS细胞，B正确。将B淋巴细胞与骨髓瘤 细胞混合，经诱导融合后的细胞有未融合的亲本细胞、融合的