专题十三 考点二 细胞工程-【创新教程】2024-2026三年高考生物真题分类特训试卷

考点二细胞工程（题组一） 一、选择题 1.(2026·山东卷，14)利用微型繁殖技术扩繁某种兰花时，待愈伤组织诱导出芽后，将芽转入增 殖培养基进行扩增培养，以诱导芽的数量增加。下列说法正确的是 A.扩增培养期间不需要光照 B.接种时应将芽的形态学上端插入培养基 C.诱导出的芽在转入增殖培养基时，必须对芽进行消毒处理 D.为获得试管苗，还需将芽转接到诱导生根的培养基上培养 2.(2026·河南卷，14)植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所 整 示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为 () 生产目标 获取植株 郑 优良性状来源 获取代谢物 单株 不同植株 亲本亲缘关系 近 远 甲 乙 丙丁 A.植物细胞培养、快速繁殖、杂交十单倍体育种、体细胞杂交 留 B.快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交十单倍体育种 C.快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 痛 D.植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交十单倍体育种 3.(2026·云南卷，15)菊花的组织培养实现了从茎段到植株的转变。下列说法正确的是() A.培养基、玻璃器皿和金属器具需进行干热灭菌 B.诱导愈伤组织的培养基中，生长素与细胞分裂素的质量比大于1 C.外植体茎段先脱分化形成愈伤组织，再诱导生芽 D.愈伤组织后续分化培养过程一般不需要光照 4.(2026·陕晋青宁卷，6)研究人员将调控根尖干细胞微环境的P、W基因过表达系统导入某植 物根尖外植体，在无外源激素条件下诱导外植体形成胚状体，并最终发育为完整植株。下列叙 製 述正确的是 () 阳 A.P、W基因过表达诱导组织形成新植株需经历细胞分化 B.将流水充分冲洗后的外植体用无菌水反复冲洗进行灭菌 C.使用无激素培养基时不涉及激素对植物分化的调节作用 D.导入P、W基因过表达系统使根尖细胞具备了全能性 5.(2026·河北卷，13)植物细胞工程技术可用于马铃薯育种，下列分析错误的是 ( A.将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固体培养基上，以诱导愈伤组织 B.用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，以获得抗病新材料 C.采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获得单倍体植株 D.利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 6.(2026·浙江1月卷，10)利用转基因技术将口蹄疫病毒衣壳蛋白P1的基因导入水稻愈伤组 织，获得了多个稳定表达P1的转基因水稻株系。转基因水稻的P1激活小鼠免疫反应的能力 与大肠杆菌生产的P1相当，且给小鼠饲喂转基因水稻的P1也能激活免疫反应。下列叙述正 确的是 () A.将愈伤组织进行脱分化和再分化，获得转基因水稻植株 B.不同株系转基因水稻P1蛋白的基因表达水平相同 C.转基因水稻与大肠杆菌生产的P1蛋白分子量相等 D.转基因水稻P1蛋白具备制成口服疫苗的潜力 97 7.(2025·湖北卷，5)水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水 母雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水 母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是 ) 转速(r/min) 55 65 75 85 相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25 细胞干重(g/L) 7.50 9.70 11.4 9.50 黄酮产量(g/L) 0.20 0.27 0.32 0.25 A.黄酮产量与细胞干重呈正相关 B.黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的 C.氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的 D.转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累 8.(2025·江苏卷，4)如图所示一种植物组织培养周期，①~③表示相应过 组织块 、① 程。下列相关叙述错误的是 ( A.过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 植株 愈伤组织 B.过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞 炼移 ② C.过程②③所用培养基的成分、浓度相同 苗栽 D.培养基中糖类既能作为碳源，又与维持渗透压有关 试管苗 胚状体 9.(2025·黑吉辽蒙卷，8)利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助 ③ 于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是 A.细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B.培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C.芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D.紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 二、非选择题 10.(2025·1月浙江卷，25(2)为研究药物D对机体生理功能的影响和药物Z对细胞增殖的影 响，某同学进行以下实验并提出一个实验方案。回答下列问题。 为验证药物Z对肝癌细胞增殖有抑制作用，但对肝细胞增殖无抑制作用，根据以下材料和用 具，完善实验思路，预测实验结果。 材料和用具：若干份细胞数为N的大鼠肝癌细胞悬液和肝细胞悬液、细胞培养液、药物Z、细 胞培养瓶、CO2培养箱、显微镜等。 (说明与要求：细胞的具体计数方法不作要求，不考虑加入药物Z对培养液体积的影响，实验 条件适宜。) ①完善实验思路 ⅰ.取细胞培养瓶，分为A、B、C、D四组，分别加入细胞培养液。 ii. ii. iv. ②预测实验结果（设计一个坐标，用柱形图表示最后一次检测结果）。 98 考点二细胞工程（题组二） 一、选择题 1.(2026·安徽卷，14)动物体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有着广泛的应用前景。 下列叙述错误的是 () A.若卵母细胞去核不完全，可能会导致重构胚细胞中染色体数目改变 B.胚胎移植前，需要对核移植获得的重构胚进行遗传筛查和性别鉴定 C.胚胎移植前，需要对受体进行处理，使其生理状态适合胚胎发育 D.克隆动物的核遗传物质与供体相同，但性状与供体不完全相同 2.(2026·黑吉辽蒙卷，13)为模拟胚胎发育过程中子宫的力学环 境，科学家设计了水凝胶材料，小鼠囊胚在其内部生长，如下 ,水凝胶基质 水凝胶 (三维网状材料) 囊胚 图。下列叙述正确的是 ( 培养基- A.囊胚置于水凝胶之前，已经历了桑葚胚阶段 B.胚胎培养时，物质分子由培养基至胚胎单向转移 C.水凝胶基质硬度越大，越有利于胚胎生长 D.囊胚孵化后，与水凝胶接触的部位由滋养层变为透明带 3.(2026·陕晋青宁卷，11)将人类免疫球蛋白(1g)基因导入小鼠胚胎干细胞后，经核移植技术获 得的转基因小鼠可用于制备单克隆抗体。下列叙述正确的是 () A.核移植受体卵母细胞培养成熟的标志是排出第二极体 B.人Ig基因在小鼠胚胎干细胞不表达是因为未接受抗原刺激 C.免疫的B淋巴细胞无需克隆化培养即可与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.将选择培养基上存活的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体 4.(2026·广东卷，12)中华鲟和长江鲟均为国家重点保护动物，其性成熟时间分别约为20年和5 年。如图示我国科学家运用鱼类生殖干细胞移植技术成功繁殖中华鲟的过程，该技术显著缩 短了繁殖周期。下列分析错误的是 () 生长 1① 长江鲟仔鱼 性成熟 性腺组织 (未移除性腺) 个体 ② 8 ④1 器 胚胎发育 生殖干细胞 成功获得中华鲟后代 A.①示从供体中华鲟分离性腺组织 B.②示用胰蛋白酶处理，获取生殖干细胞 C.③示干细胞移植过程，应在无菌环境中操作 D.④示体外受精，受精卵基因组均与中华鲟的相同 5.(2025·甘肃卷，16)肿瘤坏死因子α(TNF-a)是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究 者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程 如下图。下列叙述正确的是 () 注射了TNF-a的小鼠→B淋巴细胞 融合 →② 杂交瘤细胞 ④ 单克隆抗体大规模培养 目标杂交瘤细胞 A.①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞 B.②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞 C.③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞 D.④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测 99 6.(2025·湖北卷，6)利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等 优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研 究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细 胞一XFO6。下列叙述错误的是 A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B.细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D.采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 7.(2025·河北卷，13)生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列相关技术和方法错误的是( A.利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持 B.在没有CO,的有氧环境中进行胚胎干细胞培养 C.利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 D.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备 8.(2025·陕晋青宁卷，7)科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了 羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是 ( A.为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B.为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 的 C.受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D.对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 9.(2025·江苏卷，7)梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决 此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是( ) A.采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B.人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 C.超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D.母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 些 二、非选择题 10.(2026·山东卷，25)小鼠基因W编码的蛋白质可调节脂肪代谢。研究人员将基因W转入酵 母菌并使其稳定表达，实现了该蛋白的高效合成。该过程中用到末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT),该酶不需要模板，可在DNA的3'端随机添加4种脱氧核苷酸，若只提供1种脱氧核 苷酸，则连续添加多个该种脱氧核苷酸，称为同聚物加尾。相关信息如图所示。 染色体DNA的 部分结构 3'端突出的黏性末端 基因W 同聚物加尾过程 注：限制酶识别序列及切割位点 3 -3 烯 Sal I Pst I 5'-CTGCAG-3 某种脱氧 Kpn I 5'-GGTACC-3' 载体的 Pst I Kpn I Xho I Sal I 核苷酸 TdT 部分结构 Xho I 5'-CTCGAG-3' Sal I 5'-GTCGAC-3' NNN(n)3 3'NNN(n) NNNn:n个某种脱氧核苷酸 (1)载体上RNA聚合酶识别和结合的部位是 ,载体上与其能自我复制相关的结 构是 (2)研究人员选取2种限制酶切开载体，再用TdT分别对基因W和切开的载体进行同聚物 加尾，然后将两者连接；若载体酶切后产生的黏性末端为5'端突出，则需先用DNA聚合酶补 平后再进行同聚物加尾。因后续研究还需要用这2种限制酶将基因W从重组载体中切下， 据图分析，应选取的2种限制酶为 (3)基因W和载体两者的同聚物尾配对后形成的重组载体存在部分单链区，为构建完整重组 载体需要的2种酶是 ,该过程中 (填“需要”或“不需要”) 添加引物，原因是 (4)为检测基因W是否在酵母菌中表达出相应蛋白，在分子水平上的检测方法是 100米中的淀粉分解为葡萄糖，从而为后续酒母（含酵母 菌)发酵提供底物葡萄糖，D正确。 11.B在传统发酵制作葡萄酒时，葡萄果皮上附着有多种 微生物，如酵母菌等，这些微生物参与了葡萄酒的发酵 过程，A正确；工业化生产时，酵母菌在有氧条件下进 行有氧呼吸，能大量繁殖，进行扩大培养，在无氧条件 下进行酒精发酵产生酒精，B错误；通过诱变育种（利用 物理、化学等因素诱导基因突变)或基因工程育种（定 向改造生物的基因)能够改良葡萄酒发酵菌种（如酵母 菌)的性状，比如提高发酵效率等，C正确；大规模发酵 时，发酵温度、H值、罐压及溶解氧等参数会影响微生 物的生长和代谢，进而影响发酵过程和产品质量，所以 需要监测这些参数，D正确。 12.C醋酸的发酵的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是 异养需氧型，故醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发 酵，参与的微生物是酵母菌，需要无氧呼吸产生酒精， 故是厌氧发酵，A正确；以谷物为原料酿造食醋和黄酒 时，产物中的醋酸、二氧化碳等会使pH下降，B正确： 黄酒发酵过程中，酵母菌繁殖在有氧条件下，产酒精要 在无氧条件下，繁殖越快则发酵产物酒精产率越低 C错误；传统发酵食品所用的是自然菌种，没有进行严 格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主， 往往会造成传统发酵食品的品质不一，D正确。 13.ACD根据题目信息“隐甲藻是一种好氧的异养真核 微藻，多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖”可知， 隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源，A正确： 采集海水中腐烂的叶片进行湿热灭菌后，会杀死所有 的微生物，此时接种到固体培养基上无法获得隐甲藻， B错误；根据题目信息可知，隐甲藻为真核生物，抗生素 可通过抑制细菌细胞壁合成或影响代谢过程来抑制细 菌生长，不会影响真核生物的生命活动，因此在筛选或 培养隐甲藻时，加入抗生素可有效抑制细菌杂菌，提高 隐甲藻的纯度和生长效率，C正确；根据题目信息可知， 隐甲藻为好氧生物，因此利用隐甲藻进行DHA发酵生 产时，适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加 溶氧量，以提高DHA产量，D正确。 14.C淀粉水解形成的糖类可以作为黑曲霉生存所需的 碳源，氧化分解可以为黑曲霉提供能源，A正确；通过 液体培养基的扩大培养，可以为后续的发酵罐内发酵 提供足量的黑曲霉菌种，B正确：空气一般用过滤除菌 的方式，培养基一般用高压蒸汽灭菌的方式，发酵罐可 以用高温灭菌的方式等，因此它们的灭菌方法不相同， C错误；已知利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生 产柠檬酸，说明通气、搅拌有利于溶解氧增加，有利于 发酵产物柠檬酸的积累，D正确。 15.A泡莱的风味由原料、发酵菌种类、发酵环境等因素 共同决定的，A错误；用果酒发酵制作果醋的主要菌种 是醋酸菌，醋酸菌是好氧型微生物，B正确；家庭酿制米 酒主要用的是酵母菌，在酿制米酒的过程中，首先让酵 母菌在有氧的环境进行增殖，然后在无氧的环境中进 行发酵，C正确；传统发酵食品所用的是自然菌种，没有 进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发 酵为主，D正确。 16.B果酒发酵的菌种是酵母菌，是真核生物，果醋发酵 的菌种是醋酸菌，是原核生物，两者的细胞结构不同， A错误：过程①为榨汁，果胶酶能分解细胞壁中的果 胶，添加适量果胶酶，有利于提高出汁率，B正确：过程 ②为果酒发酵，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，若 多次开盖会引入氧气抑制无氧呼吸并增加杂菌污染风 险，C错误；过程③为果醋发酵，醋酸菌利用酒精产醋过 程中不产生气体，不会产生大量气泡，也无需放气， D错误 17.B制备的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，紫外线仅 用于表面或空气消毒，无法灭菌，A错误：将土样加入 无菌水制成悬液，经梯度稀释后，取各稀释度菌液涂布 于培养基表面，分离并计数，B正确；连续划线时，每次 应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌体，若从起始 端开始无法有效分离单菌落，C错误；斜面培养基保存 菌种需置于4℃短期保存，长期保存应使用甘油管藏法 (一20℃)，室温下无法长期保存，D错误。 14 18.D以金霉素为唯一碳源的选择培养基，仅允许能利用 金霉素的微生物生长（其他无法利用金霉素的微生物 被抑制)，符合选择培养基的设计原理，A正确：逐步提 高金霉素浓度可模拟环境胁迫，筛选出耐受性更强的 菌株（类似“驯化”过程），B正确：培养基的pH需根据 目标微生物的生长需求调整（如细菌通常中性偏碱，真 菌偏酸性)，是配制培养基的基本要求，C正确：稀释涂 布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面， 而接种环用于平板划线法（分离单菌落）。用接种环涂 布无法保证菌液均匀，D错误」 19.ABD酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进 行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等，传统白 酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用 下完成的，A正确：发酵池是泥质老窖，多年反复利用 的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物， 窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过 程不易污染杂菌，B正确：从窖泥中分离的酿酒酵母扩 大培养时，需在有氧环境中进行，因为酵母菌在有氧条 件下可大量繁殖，C错误；谷物中含有大量淀粉，用谷物 原料发酵形成酒槽的过程中，有淀粉分解形成糖浆的 过程，因此，从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出 产淀粉酶的微生物，D正确。 20.D黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧， 相同菌体密度下，菌球体越大越不利于菌体与氧气接 触，柠檬酸产生速率越慢，A正确：菌体内铵离子浓度 升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制，发酵 中期添加一定量的硫酸铵，提高铵离子浓度，菌体内可 提高柠檬酸产量，B正确；发酵过程中pH下降导致细 菌生命活动所必须的酶失活，可抑制大部分细菌的生 长，C正确：发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行分 离、纯化、浓缩、干燥等一系列操作后才能获得柠檬酸 产品，D错误。 21.解析：(1)用CCL,溶液处理农杆菌，目的是制备感受态 细胞（可导入外源DNA分子的农杆菌）。感受态细胞 是指处于能吸收周围环境中DNA分子状态的细胞，这 种处理会使农杆菌细胞膜通透性增加，便于外源表达 载体的导入。从图1可知，质粒上有两个HindⅢ酶切 位点和两个EcoR I酶切位，点。用这两种酶同时酶切， 会将质粒切成4个大小不同的片段，电泳后就会出现4 条DNA条带，以此证明农杆菌成功导入了重组质粒。 (2)为了营造一个无菌环境，避免杂菌污染实验材料， 微生物接种应在超净工作台（或无菌实验室或灭菌的 操作台)的酒精灯火焰旁进行。平板划线法和稀释涂 布平板法是常用的微生物接种方法，这两种方法都可 以将菌种分散，最终获得单菌落。单菌落是由单个细 胞繁殖而来的，能保证后续培养的菌株遗传背景一致。 质粒的T-DNA区域带有腐草霉素抗性基因(ZeoR)。 当农杆菌将TDNA整合到假丝酵母基因组后，只有成 功导入该基因的重组酵母才能在含有腐草霉素的选择 培养基上存活，从而筛选出重组菌株。 (3)从图2的曲线对比可以看出：重组菌株的发酵液中 甘油峰值明显高于野生型菌株：重组菌株的甘油含量 上升速度更快，能在更短时间内达到产量高峰。若重 组菌株甘油含量显著低于野生型，除了基因突变外，还 可能是T-DNA插入导致重组菌株发生了变异，破坏了 假丝酵母自身甘油合成关键基因的功能。 答案：(1)感受态细胞/可导入外源DNA分子的农杆菌 EcoR I和HindⅢ (2)超净工作台/无菌实验室/灭菌的操作台（平板） 划线法/稀释涂布平板法单菌落腐草霉索 (3)提高发酵液中甘油的含量：缩短发酵时间T-DNA 的插入导致重组菌株发生了变异 考点二细胞工程（题组一） 1.D扩增培养是芽的增殖培养阶段，属于再分化过程，需 要光照以利于叶绿素合成和光合作用进行，A错误；接 种时应将芽的形态学下端插入培养基，便于吸收营养物 质，同时符合生长素极性运输的特点，利于生长，B错误； 诱导出的芽是无菌环境下培养获得的，转入增殖培养基 时仅需无菌操作即可，再次消毒会杀伤芽细胞，C错误： 当前仅诱导获得了芽，要得到完整试管苗，还需要将芽 转接到生长素比例相对较高的生根培养基中，诱导根的 分化，D正确。 2.A甲对应获取代谢物的生产目标，植物细胞培养可通 过体外培养植物细胞提取次生代谢产物：乙对应优良性 状仅来自单株的植株获取需求，快速繁殖属于无性繁 殖，可保持单株优良性状，短时间获得大量遗传特性一 致的植株；丙对应优良性状来自亲缘关系近的不同植 株，可先通过杂交集中优良性状，再结合单倍体育种快 速获得纯合可稳定遗传的品种；丁对应亲本亲缘关系远 的情况，体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，获 得整合两个亲本优良性状的杂种植株，B、C、D错误，A 正确。 3.C培养基需用高压蒸汽灭菌，干热灭菌会破坏培养基 的营养成分、导致水分流失，仅玻璃器皿、金属器具可采 用千热灭菌，A错误；诱导愈伤组织时，生长素与细胞分 裂素的比值适中，当二者比值大于1时更有利于诱导生 根，而非愈伤组织形成，B错误；植物组织培养过程中，外 植体茎段首先经脱分化形成愈伤组织，调整培养基激素 比例后可诱导愈伤组织分化生芽，C正确：愈伤组织诱导 阶段一般不需要光照，但后续再分化（分化）培养时需要 光照，用于诱导叶绿素合成，满足植株光合作用需求， D错误。 4.A外植体诱导形成胚状体并发育为完整植株的过程， 需要经过脱分化和再分化阶段，再分化的本质就是细胞 的选择性分化，形成不同的组织和器官，因此该过程必 然经历细胞分化，A正确；外植体不能灭菌，流水冲洗、 无菌水冲洗仅为外植体消毒的部分操作，且外植体消毒 还需酒精、次氯酸钠等消毒剂处理，B错误；无外源激素 的培养基中，植物细胞自身可合成内源激素，仍会通过 内源激素调节细胞分化过程，C错误；植物体细胞本身就 具有全能性（全能性的基础是细胞含有该物种全套遗传 物质)，导入P、W基因过表达系统只是促进了细胞全能 性的表达，D错误。 5.A原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞 壁，融合的原生质体细胞壁形成前不能确定是否融合成 功，不能用于诱导形成愈伤组织，A错误：将优良栽培品 种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，可打破生殖隔 离，获得兼具优良性状和抗病性的新材料，B正确：花粉 是减数分裂产生的配子，花粉离体培养获得的植株无论 含几个染色体组，都属于单倍体，因此采集四倍体植株 的花粉进行组织培养可获得单倍体植株，C正确：植物顶 端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，利用 茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。 6.D水稻愈伤组织是已经完成脱分化的产物，要获得转 基因水稻植株，只需对愈伤组织进行再分化（不需要再 次脱分化)。植物组织培养的流程是：外植体·脱分化 ·愈伤组织·再分化·完整植株，A错误；转基因过程 中，外源基因(P1基因)插入水稻染色体的位置是随机的 (位置效应)，不同株系的基因表达水平通常存在差异， B错误；水稻是真核生物，其细胞内的内质网和高尔基体 可对表达的P1蛋白进行糖基化等修饰；而大肠杆菌是 原核生物，缺乏这些细胞器，无法对蛋白质进行类似修 饰。因此两者生产的P1蛋白分子量可能不同，C错误： 题目明确指出“给小鼠饲喂转基因水稻的P1也能激活 免疫反应”，说明口服P]蛋白可被小鼠免疫系统识别并 引发免疫应答，具备制成口服疫苗的潜力，D正确。 7.B从图中看出，黄酮产量随着细胞干重增加而增加，减 少而减少，所以黄酮产量与细胞干重呈正相关，A正确： 黄酮属于次生代谢产物，并非细胞生存和生长所必需， B错误；氧气参与有氧呼吸，为细胞生长、分裂和代谢提 供能量，所以氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和 代谢是必需的，C正确：75r/min时相对生长速率、细胞 千重和黄酮产量均最高，所以转速为75r/min时既利于 细胞分裂，又利于黄酮的积累，D正确。 14 8.C过程①形成了愈伤组织，发生了细胞的脱分化，此时 细胞还进行有丝分裂，A正确；过程②是愈伤组织经再 分化形成胚状体的过程，故经过再分化形成不同种类的 细胞，B正确：过程②③所有培养基的成分、浓度不完全 相同，如细胞分裂素和生长素的浓度不同，C错误；培养 基中常加入蔗糖，既能作为碳源，又与雏持渗透压有关， D正确。 9,A在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例直 接影响细胞的分化方向。当二者比例适中时，促进愈伤 组织的形成：比例过高时促进生根，比例过低时促进生 芽，A正确；培养基含大量水分，需用高压蒸汽灭菌法灭 菌(121℃，15一20分钟)；千热灭菌法适用于耐高温且 千燥的物品（如玻璃器皿），不能用于培养基灭菌，B错 误：外植体可以是植物的任何活细胞、组织或器官，只要 具有全能性。芽原基细胞是分生组织的一部分，全能性 高，可作为外植体。基因选择性表达是细胞分化的基 础，不影响其作为外植体的能力，C错误；细胞产物的工 厂化生产正是通过植物组织培养技术实现的，如大量培 养红豆衫细胞，从培养液中提取紫杉醇。因此，紫衫醇 可通过此方法获取，植物组织培养的优势（如快速增殖、 大量生产细胞产物)在此体现，D错误。 10.解析：①该实验中自变量是药物Z处理的细胞类型和 是否使用药物Z,因变量是细胞的增殖情况。所以可将 细胞培养瓶分为A、B、C、D四组，分别加入细胞培养 液；A、B组加入肝癌细胞悬液，C、D组加入肝细胞悬 液；A、C组不加药物Z,B、D组加药物Z:将上述细胞培 养瓶置于C),培养箱，培养一段时间后，在显微镜下观 察并计数细胞数，记录并处理所得数据。②据题意可 知，药物Z对肝癌细胞增殖有抑制作用，但对肝细胞增 殖无抑制作用，所以CD组细胞正常增殖，而B组细胞 受到抑制，A组（肝癌细胞十无药培养液）细胞数量较 多，B组（肝癌细胞十含药培养液）细胞数量明显少于A 组，C组（肝细胞十无药培养液）和D组（肝细胞十含药 培养液)细胞数量相近且较多，大致呈现出B组柱形图 高度最低，A组较高，C、D组高度相当且高于B组低于 A组的情况： 细 B D 细胞种类 答案：①.A、B组加入肝癌细胞悬液，C、D组加入肝细胞 悬液.A、C组不加药物Z,B、D组加药物ZV.将上述 细胞培养瓶置于CO,培养箱，培养一段时间后，在显微镜 下观察并计数细胞数，记录并处理所得数据 胞个 ② 细胞种类 考点二细胞工程（题组二） 1.B若卵母细胞去核不完全，重构胚细胞中会含有卵母 细胞的核物质，导致染色体数目增加，A正确；在动物体 细胞核移植中，重构胚的核遗传物质来自供体细胞，因 此重构胚的性别是确定的，不需对重构胚进行性别鉴 定，B错误；胚胎移植前，需对受体进行同期发情处理，使 其生理状态适合胚胎发育，C正确；克隆动物的核遗传物 质与供体相同，但细胞质遗传物质来自卵母细胞，且性状 受环境影响，故性状与供体不完全相同，D正确。 2.A小鼠早期胚胎发育依次经历受精卵、桑葚胚、囊胚、 原肠胚阶段，因此囊胚置于水凝胶之前已经历了桑葚胚 阶段，A正确；胚胎培养时，物质分子是双向转移的：培 养基中的营养物质进入胚胎，胚胎代谢产生的废物排出 到培养基中，B错误；水凝胶模拟子宫的力学环境，只有 基质硬度与子宫正常力学环境相近时才有利于胚胎生 长，并非硬度越大越有利，C错误：囊胚孵化是指囊胚扩 大导致透明带破裂、胚胎从透明带中伸展出来的过程， 孵化后透明带消失，与水凝胶接触的部位是滋养层， D错误。 3.C核移植的受体卵母细胞需培养至减数第二次分裂中 期，第二极体是卵母细胞完成受精的标志之一，A错误； 人g基因在小鼠胚胎千细胞中不表达是基因选择性表 达的结果，胚胎千细胞为未分化细胞，缺乏表达Ig基因 的相关调控条件，与是否接受抗原刺激无关，B错误；单 克隆抗体制备流程中，获取免疫后的B淋巴细胞后，直 接即可与骨髓瘤细胞融合：克隆化培养是融合筛选得到 杂交瘤细胞之后的步骤，且B淋巴细胞是高度分化的细 胞，无法在融合前进行克隆化培养，因此免疫B淋巴细 胞无需克隆化培养即可融合，C正确；选择培养基上存活 的仅为杂交瘤细胞，还未经过抗体阳性检测，不一定能 产生所需的特异性抗体，需筛选出可产生目标抗体的杂 交瘤细胞后，才能注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体， D错误 4.D本技术的目的是繁殖中华鲟，生殖千细胞存在于性 腺组织中，因此①是从供体中华鲟分离性腺组织，A正 确；动物组织细胞间通过蛋白质类物质连接，用胰蛋白 酶处理可分解胞间连接物质，将性腺组织分散为单个生 殖千细胞，B正确：细胞移植操作需要在无菌环境中进 行，避免杂菌污染导致移植失败，因此③干细胞移植过 程应保持无菌环境，C正确：④表示体外受精作用，受精 卵基因组来自中华鲟和长江鲟，D错误。 5.B骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；B细胞和骨 髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合， 有些两两融合，有些多个融合，有同种核融合细胞，也有 异种核融合细胞，B正确；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融 合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大 量的，C错误：进行克隆化培养，即用培养基培养和注入 小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行， D错误。 6.B悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由 增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效 率，A正确；XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得 的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于 扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式)，B错误：流感病毒 释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病 毒（上清液），C正确：无成瘤性细胞不含癌基因，可避免 疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性， D正确 7.B植物组织培养技术可以快速繁殖植物，并且由于是 无性繁殖，能保持母本的优良性状，兰花可以利用组织 培养技术实现快速繁殖和优良性状的保持，A正确；胚 胎千细胞培养时，需要一定浓度的C)2,C),的作用是 雏持培养液的pH,所以不能在没有CO,的环境中进行 胚胎干细胞培养，B错误：诱导动物细胞融合的方法有物 理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）和生物法（如灭活 病毒)，可以利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细 胞融合，C正确：在胚胎工程中，对供体母牛注射促性腺 激素，能使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞用于 胚胎制备，D正确。 14 8.C促性腺激素可促进供体超数排卵，从而获得更多卵 子，A正确；为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致， 受体与供体需同期发情处理以保证胚胎移植后生理环 境同步，B正确；桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞 数量增加，但胚胎总体积不变，或略有减小，C错误；本实 验的自变量是是否对绵羊受精卵进行基因编辑等，其余 为无关变量，对照组与实验组的无关变量（如年龄、性 别)需保持一致，以排除千扰，D正确。 9.C采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精 子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常用于已固定 的细胞，A错误；人工授精时，精子在雌性生殖道内自然 获能，无需提前体外处理，B错误；超数排卵通过注射促 性腺激素（如FSH和LH)促进卵泡发育和排卵，C正 确；胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐 受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D错误。 10.解析：(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能 够启动下游目的基因的转录过程，是目的基因表达的 必需元件。复制原，点位于载体，可以保证载体在受体 细胞中能自我复制。 (2)要保证重组载体中基因W可以被完整切下，需要选 择两种限制酶，使得它们的识别序列在加尾后仍能被 保留。由图可知，基因W和载体上都有SlI的识别 序列和切割位，点，如果选用它会破坏W基因的结构，使 W基因失活，因此不能选用。若选用PstI和KpnI, 酶切后产生的黏性末端为3'端突出，若要重新从重组 载体上切下，PstI切割载体后要加同聚物G尾，KpnI 切割载体后要加同聚物C尾，这样在重组载体中才能 出现它们完整的识别序列而再次进行切割。若选用 XhoI,酶切后产生的黏性末端为5'端突出，可以先用 DNA聚合酶补平，若要在重组载体中才能出现它们完 整的识别序列而再次进行切割，则要加同聚物G尾。 为了将质粒和基因W连接到一起，同聚物加尾间要能 发生碱基互补配对，故应选择KpnI和XhoI (3)由于用XhoI进行切割会产生黏性末端为5'端突 出，形成单链区，需要用DNA聚合酶进行补平，此外， W基因和载体形成重组载体时，中间有缺口，补全缺口 后二者才能连接起来形成完整的重组载体，因此构建 完整重组戟体需要的2种酶：DNA聚合酶（补全单链 区)和DNA连接酶（连接缺口）。该过程不需要添加引 物，原因是：同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端， DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引 物起始」 (4)检测基因W是否表达出相应蛋白，由于基因表达的 产物是蛋白质，分子水平检测蛋白质方法是抗原一抗 体杂交。 答案：(1)启动子复制原点 (2)KpnI、XhoI (3)DNA聚合酶、DNA连接酶不需要同聚物尾配 对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该 末端延伸合成互补链，无需引物起始 (4)抗原一抗体杂交 考点三基因工程（题组一） 1.B受精卵具有发育的全能性，选用受精卵进行基因敲 除，突变的基因可随细胞分裂传递给子代个体，A正确： F。个体基因型为RR,杂交培育时，F1的基因型为RR、 RR,无法获得纯合突变体(RˉR),最早需在F中获 得，B错误；R基因编码序列缺失4个碱基，会导致移码 突变，使编码的氨基酸序列改变，纯合突变体可用于研 究R基因的功能，C正确；突变体体型变小、体色变浅， 说明R基因的功能影响多个性状，体现了一因多效， D正确。 2.B基因工程的核心是构建基因表达载体，不同来源的 启动子和基因编码序列可以重新组合，由转基因鱼生长 速率加快可知，转入的重组生长激素基因成功表达，A 正确。启动子是驱动基因转录的位，点，不同转基因鱼中 启动子活性不一定相同，因此重组生长激素基因表达水 平不一定相同，B错误。若外源基因游离在细胞质中，细 胞分裂时容易丢失；只有外源基因整合到染色体DNA 上后，才能够随染色体复制和分配，稳定遗传给子代，