2027届高考生物人教版一轮复习练习微生物的培养技术及应用

**基本信息** 聚焦微生物培养技术及应用，以实验流程为主线整合无菌技术、培养基筛选、接种鉴定等核心知识，通过真题与模拟题结合强化科学思维与探究实践。 **综合设计** |模块|题量/典例|题型特征|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |基础操作|3题（如1、4）|概念辨析、操作判断|从灭菌原理到接种方法，构建操作规范体系| |实验分析|7题（如2、5、8）|图表解读、步骤评价|结合选择培养基与菌落特征，形成实验设计逻辑| |综合应用|5题（如15）|流程设计、数据计算|整合分离→鉴定→计数全流程，体现微生物培养完整应用链|

微生物的培养技术及应用 同步练习-2026-2027学年高三生物学一轮复习 一、选择题（本大题共14小题） 1 下列有关无菌技术的说法正确的项数是（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100 ℃煮沸5～6 min可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑤无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌 A.2 B.3 C.4 D.5 2 [2024天津卷]实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（　　） A.艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA B.判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C.利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D.判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 3 [2025淮安联考]微生物需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关的说法正确的是（　　） A.有的氮源可以作为细菌的能源物质 B.加入酚红指示剂的培养基，可以筛选大肠杆菌 C.大肠杆菌与分解尿素的细菌所利用的氮源相同 D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的一定是能分解尿素的细菌 4 某同学用如图所示的接种方法对样品中的微生物进行分离实验。下列相关叙述正确的是（　　） A.该接种方法是涂布平板法，菌液应进行一系列梯度稀释 B.将接种工具进行灼烧处理，冷却到50 ℃左右后再接种 C.接种后的培养基倒置后置于摇床上振荡培养 D.观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征 5 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。某兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（　　） A.①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B.②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C.③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 6 工业生产中，常利用红酵母发酵生产β-胡萝卜素。培养红酵母时，碳源种类对β-胡萝卜素的产量有一定影响，相关数据如下表。下列有关叙述错误的是（　　） 碳源种类 麦芽糖 蔗糖 淀粉 Β-胡萝卜素含量/（mg/L） 3.52 4.81 1.68 A.利用红酵母生产β-胡萝卜素时，应使用液体培养基并振荡培养 B.蔗糖为碳源可提高β-胡萝卜素产量，还可维持培养液的渗透压 C.培养过程中可使用平板划线法对红酵母进行计数，但数据会偏低 D.利用紫外线处理红酵母得到高产菌株后，用甘油管藏法长期保存 7 [2026徐州月考]植酸酶能水解饲料中的植酸磷，将其转化为可吸收的无机磷，显著提高畜禽对磷的利用率，降低饲料成本。下图表示分离、纯化和保存产植酸酶菌株的过程，下列相关叙述正确的是（　　） A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基被污染的概率 B.筛选培养基中需要加入植酸酶的底物，通过菌落特征挑出产植酸酶的菌落 C.涂布平板上长出的菌落数须为30～300时，才可以通过划线进一步纯化 D.斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株 8 [2026南京月考]某研究小组通过实验来探究某种病原微生物对四种抗生素的敏感程度。图1为部分实验器材；图2中的Ⅰ～Ⅳ是将浸有相同浓度但不同种类抗生素的四个大小相同的滤纸片，分别贴在均匀涂布了测试菌的平板上培养一段时间后的结果。下列叙述正确的是（　　） 图1 图2 A.接种测试菌的过程中，需要使用图1中器材①②③ B.图2结果Ⅱ中抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C.图2结果Ⅳ中离滤纸片越近的菌落对该抗生素的抗性越强 D.不同抗生素在平板上的扩散速度属于实验的无关变量 9 研究人员对布氏田鼠盲肠中的纤维素分解菌进行分离、鉴定，过程如图。下列说法正确的是（　　） A.①②③应在95%空气和5%氧气的气体环境中倒置培养 B.①②③中的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C.通过比较透明圈大小可知，甲、乙分解纤维素的能力相同 D.若①②③菌落数分别为20、37、39，则内容物中纤维素分解菌密度为1.6×107个/mL 10 自生固氮菌是土壤中能独立进行固氮的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。已知步骤④获得的三个平板的菌落数分别为90、95、100，对照组平板为0。下列相关叙述正确的是（　　） A.步骤②振荡20 min的目的是扩大菌种数量，属于选择培养 B.步骤④使用接种环划线接种，使用前需要灼烧灭菌 C.1 g土壤中平均自生固氮菌数约为9.5×104个 D.④所用培养基应加入碳源、无机盐、水和琼脂 11 [2025青岛模拟]随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。下列说法正确的是（　　） A.诱变选育高产菌株时，通过向培养基加入刚果红染液，选择透明圈大的即为目的菌株 B.可使用紫外线进行诱变，无需筛选即可得到产纤维素酶高的菌种 C.能在以纤维素为唯一碳源培养基中生长的菌株一定是纤维素分解菌 D.富集培养应使用液体培养基，目的是能得到更多能产纤维素酶的菌株 12 （多选）青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。下列说法正确的有（　　） A.青霉菌的这种特点是长期自然选择的结果 B.生产青霉素时，不宜使用葡萄糖作为碳源 C.青霉素能杀菌，生产青霉素的培养基无需灭菌 D.青霉菌和周围细菌之间的关系为竞争关系 13 （多选）幽门螺杆菌（能产生脲酶）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后进行分离培养。下列有关叙述正确的有（　　） A.分离纯化幽门螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基 B.鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质 C.可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用 D.对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 14 （多选）[2026南京中华中学期中]抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程。下列叙述正确的有（　　） A.有些菌株无透明圈产生是因为其不能产生抗生素 B.菌株的透明圈越大，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 C.接种测试菌3时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 D.测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 二、非选择题（本大题共1小题） 15 [2025南京月考]牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图1所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基。 图1 （1） 获得纯净的微生物培养物的关键是________，无菌技术主要包括________。 （2） 从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应以________，该培养基按功能来分应为________培养基。甲、乙两培养基的主要区别是________。 （3） 过程②所使用的接种方法是____________。可在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是_________________________________________。 （4） 刚果红可以与纤维素形成________复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图2），图中降解纤维素能力最强的菌株是________（填图中序号），原因是__________________________。 图2 （5） 在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179。则每毫升样品中含有细菌数量为_____________个。通过该方法所得细菌数量一般较实际结果________，原因是________________________________________。 ·参 考 答 案· 1 A 2 C　艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用并进行对比，R型肺炎双球菌没有荚膜（菌落表面粗糙），S型肺炎双球菌有荚膜（菌落表面光滑），该实验是通过观察培养基上形成的不同菌落特征，来判断转化是否成功的，A不符合题意；毛霉属于多细胞的真菌，由细胞形成菌丝，可根据毛霉的形态判定固体培养基是否是被毛霉污染，B不符合题意；抗生素可消灭细菌，利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株是从抑菌圈边缘菌落挑取大肠杆菌来获得目的菌株，没有依靠菌落外表形态特征做出判断，C符合题意；不同尿素降解菌降解尿素的能力不同，因此在分离出的以尿素为唯一氮源的尿素降解菌后，若要验证其中是否有不同种类降解菌，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若根据菌落周围出现红色环带的大小判定其种类，D不符合题意。 3 A　有的氮源可以作为细菌的能源物质，如有机氮也可以作为细菌的能源物质，A正确；加入酚红指示剂的培养基不能筛选大肠杆菌，B错误；大肠杆菌利用的氮源是有机氮，分解尿素的细菌利用的氮源是尿素，C错误；以尿素为唯一氮源的培养基上长出的可能是固氮菌，它可以利用空气中的N2作为氮源，D错误。 4 A 5 C　平板划线法无需稀释，A错误；由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误；所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确；由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶抑制剂，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 6 C　培养过程中可使用稀释涂布平板法对红酵母进行计数，但数据会偏低，C错误。 7 B　培养基的灭菌应在分装到培养皿之前进行，若分装后灭菌，培养皿也需灭菌，操作复杂且易污染，A错误；筛选产植酸酶的菌株时，需在培养基中加入植酸磷（植酸酶的底物），能产植酸酶的菌株可分解植酸磷利用磷元素生长，通过菌落特征（如形状、大小、颜色等）可挑选出目标菌落，B正确；涂布平板法中，菌落数在30～300之间时可用于计数，但划线法纯化菌株对涂布平板的菌落数没有此限制，只要有单菌落生长即可通过划线进一步纯化，C错误；斜面培养基保存菌株时，需置于低温（如4 ℃冰箱）环境中，常温下菌株易代谢繁殖甚至死亡，无法长期保存，D错误。 8 D　为获得长满测试菌的平板，接种测试菌的过程中，需要使用图1中的①酒精灯、③培养皿、④涂布器，A错误；图2结果中Ⅱ抑菌圈较小，说明病原微生物对该抗生素的敏感性较低，而不是较敏感，B错误；抑菌圈中的菌落是涂布接种时的菌体形成的，菌落离滤纸片的距离与对该抗生素的抗性之间并无必然联系，C错误；不同抗生素在平板上的扩散速度属于实验的无关变量，应保持相同，D正确。 9 B　分析题意，菌株是从盲肠中分离的厌氧细菌，故在平板培养时需置于厌氧环境中，A错误；筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一碳源，B正确；需要根据菌落和透明圈之间的直径作比较来判断分解能力的大小，甲、乙分解纤维素的能力不相同，C错误；若①②③菌落数分别为20（舍弃）、37、39，则平均菌落数是38，内容物中纤维素分解菌密度为C/V×M＝38/0.2×105＝1.9×107个/mL，D错误。 10 D　由题图可知，步骤②振荡20 min的目的是让样品中的微生物充分释放到无菌水中并均匀分布，A错误；由题图可知，步骤④获得的菌落分散在平板上，利用的是稀释涂布平板法，B错误；1 g土壤中平均自生固氮菌数约为（90＋95＋100）÷3÷0.1×104＝9.5×106个，C错误；该实验的目的是分离土壤中自生固氮菌和固氮能力的测定，自生固氮菌能够利用空气中的氮作为氮源，故④培养基中不需要加入氮源，D正确。 11 D　诱变选育高产菌株时，通过向培养基加入刚果红染液，应选择透明圈直径/菌落直径值最大的为目的菌株，A错误；基因突变具有不定向性和多害少利性，因此使用紫外线进行诱变需要对菌株进行筛选，B错误；能在以纤维素为唯一碳源培养基中生长的菌株可能是纤维素分解菌，也可能是一些自养型细菌，C错误。 12 ABD　青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，若用葡萄糖作为碳源，则青霉菌不会分泌青霉素，不利于生产青霉素，B正确；生产青霉素的培养基也需要灭菌，防止杂菌的污染，C错误；青霉菌和周围细菌利用相同的培养基，它们之间为竞争关系，D正确。 13 AC 14 BD　有些菌株无透明圈产生，可能是其产生的抗生素不能抑制指示菌S的生长，而非不能产生抗生素，A错误；接种测试菌3时，若接种环灼烧后未完全冷却，会导致测试菌3生长受抑制甚至死亡，而图中测试菌3有生长，因此接种环不可能未完全冷却，C错误。 15 （1） 防止杂菌污染　消毒和灭菌　（2） 纤维素为唯一碳源　选择 甲中无琼脂　（3） 稀释涂布平板法　瘤胃中的纤维素分解菌属于厌氧微生物，石蜡密封创设无氧环境，有利于瘤胃中的纤维素分解菌生长发育　（4） 红色　菌落①　降解圈直径和菌落直径比值最大　（5） 1.81×107　偏低　当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落 解析：（5） 在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179，一般取菌落数在30～300之间的平板，则平板的平均菌落数为（189＋175＋179）÷3＝181，则每毫升土壤样液中的细菌数量约为181÷0.1×104＝1.81×107个。由于当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落，所以通过该方法所得细菌数量一般较实际结果偏低。 页） 学科网（北京）股份有限公司 $