2027届高考生物人教版一轮复习课时跟踪练54　微生物的培养技术及应用

**基本信息** 聚焦微生物培养技术及应用，以“原理-操作-计数-应用”逻辑链整合知识，强化科学思维与探究实践能力 **综合设计** |模块|题量/典例|题型特征|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |微生物培养基础|1-4题|培养基成分辨析、选择培养原理|从营养需求（碳/氮源）→选择培养条件→灭菌技术，构建“成分-功能-操作”关联| |分离纯化技术|5-6题|平板划线法/稀释涂布操作正误判断|操作步骤（划线次数、稀释梯度）→单菌落形成原理→纯化效果分析| |计数与结果分析|7-10题|活菌计数、显微镜计数误差比较|计数方法（稀释涂布/直接计数）→数据计算→结果准确性影响因素| |实验设计与应用|11-12题|消毒液效果比较、缺陷型菌株筛选|实验变量控制→对照设置→结果图表解读，体现科学探究完整流程|

课时跟踪练54　微生物的培养技术及应用　 　(1-8题,每题4分) 1.(2026·河北邯郸阶段练习)下列关于微生物的选择培养和计数方法,叙述错误的是(　　) A.用营养齐全的培养基在80 ℃条件下培养耐热菌属于选择培养 B.不含氮源或碳源的培养基也能用于某些微生物的培养 C.加入抗生素且置于无氧环境下的培养基上生长的一定是厌氧微生物 D.菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度 解析:用营养齐全的培养基在80 ℃下培养耐热菌属于选择培养,因为只有耐热的细菌才能在80 ℃下存活,A正确;不含氮源的培养基可用于固氮微生物的培养,不含碳源的培养基可以用于自养型微生物的培养,B正确;加入抗生素、无氧环境下的培养基筛选出的也可能是酵母菌,酵母菌属于兼性厌氧真菌,C错误;含菌溶液的稀释倍数如果太低,多个菌落重叠,会导致无法计数,稀释倍数如果太高,则可能无法得到菌落,所以菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度,D正确。 答案:C 2.(2026·河南开学考试)分离和纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法。下列叙述错误的是(　　) A.分离和纯化微生物所用的培养基常用湿热灭菌法进行灭菌 B.用蘸有菌液的接种环划一条线后,再次蘸取菌液继续划线 C.稀释涂布平板法操作时,利用无菌水进行梯度稀释以分散菌种 D.用两种方法分别将同种霉菌接种于同一培养基上,得到的菌落特征基本一致 解析:分离和纯化微生物的培养基需严格灭菌,湿热灭菌法(如高压蒸汽灭菌)是常用方法,A正确;平板划线法中,每次划线前需灼烧接种环并冷却后从上次划线末端继续,而非重复蘸取菌液,否则无法稀释菌种,B错误;稀释涂布平板法需用无菌水进行梯度稀释,确保菌种分散且避免杂菌污染,C正确;同种微生物在同一培养基上的菌落特征由其遗传特性决定,与接种方法无关,D正确。 答案:B 3.(2026·陕西西安一模)关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验,下列说法错误的是(　　) A.取样时要选择表层土,取土样的铁铲和取样纸袋要进行灭菌处理 B.本实验中使用的平板较多,需要在各培养皿底上做好标记避免混淆 C.利用显微镜直接计数的结果通常较稀释涂布平板法进行计数的结果偏高 D.若涂布0.2 mL稀释103倍的培养液,获得菌落平均值为58,则每克土样中尿素分解菌的菌落数为2.9×105个 解析:取样时一般要铲去表层土,在距地表3~8 cm的土壤层中取样,A错误;本实验中使用的平板较多,由于菌落是涂布在培养皿底部倒置培养,需要在各培养皿底上做好标记避免混淆,B正确;利用显微镜直接计数时活菌和死菌都会被统计,而稀释涂布平板法仅能统计活菌的数目,且多个细菌可能共同形成一个菌落,因此前者的统计结果会比后者偏高,C正确;若取稀释103倍的0.2 mL培养液进行涂布,获得菌落的平均值为58,则每克土样中尿素分解菌的菌落数为58÷0.2×103=2.9×105个,即每克土样中尿素分解菌的数量为2.9×105个,D正确。 答案:A 4.(2026·吉林阶段练习)在三个培养皿中各加入等量但成分不同的大肠杆菌培养基,接种等量的大肠杆菌后培养36小时,统计大肠杆菌的菌落数(如表)。下列叙述错误的是(　　) 培养皿 培养基成分 菌落数/个 Ⅰ 琼脂、糖类 35 Ⅱ 琼脂、糖类、维生素 250 Ⅲ 琼脂、维生素 0 A.比较培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,不能说明琼脂是培养基中必需的营养成分 B.对照培养皿Ⅰ和Ⅱ,说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子 C.对照培养皿Ⅱ和Ⅲ,说明糖类是大肠杆菌需要的碳源 D.本实验使用的是固体培养基,采用的接种方法可以是平板划线法 解析:琼脂是凝固剂,不是营养成分,A正确;培养皿Ⅰ和Ⅱ的区别在于是否添加维生素,结果培养皿Ⅱ的菌落数远多于Ⅰ,说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子,B正确;培养皿Ⅱ和Ⅲ的区别在于是否添加糖类,结果培养皿Ⅲ无菌落产生,说明糖类是大肠杆菌需要的碳源,C正确;培养基含琼脂为固体培养基,本实验需要统计菌落数,应该采用稀释涂布平板法,因为平板划线法不可用于统计菌落数,D错误。 答案:D 5.(2026·云南昭通阶段练习)马铃薯种植过程中很容易受到棒形杆菌的侵染导致维管束环状腐烂。棒形杆菌主要在种薯上传播,也可在土壤中存活。如图所示,利用特定的选择培养基可以从土壤中筛选出棒形杆菌,下列说法错误的是(　　) A.如图甲所示,若培养后的棒形杆菌菌落平均数为120个,则每克土壤约含棒形杆菌菌落数为1.2×108个 B.平板划线法结果如图乙所示,则接种时接种环总共灼烧6次 C.稀释涂布平板法和平板划线法都能用于土壤中棒形杆菌的分离和计数 D.需增设未接种的选择培养基及接种后的完全培养基作对照 解析:称取1.0 g某土壤样品,转入99 mL无菌水中,稀释了100倍,而经梯度稀释后,此时相当于稀释了105倍,从③号试管取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上,重复3次,若平板培养后的菌落平均数为120个,则该样本中每克土壤约含棒形杆菌菌落数为(120÷0.1)×105=1.2×108个,A正确;平板划线法一共划线5次,则灼烧次数为6次,B正确;平板划线法不能进行微生物计数,C错误;增设未接种的选择培养基作对照的目的是判断培养基是否灭菌彻底及无菌操作是否规范;接种后的完全培养基作对照的目的是判断选择培养基是否发挥选择作用,D正确。 答案:C 6.(2026·福建福州阶段练习)为优化传统发酵食品藠头的发酵工艺,研究人员用MRS培养基从发酵液中筛选并鉴定出优良乳酸菌。初步筛选过程如下图,以下叙述正确的是(　　) ①将发酵液稀释后接种到MRS培养基 ↓ ②挑取疑似乳酸菌的单菌落接种到含碳酸钙的MRS培养基 ↓ ③筛选目标菌落后进行产酸、产气、产香味等检测 A.培养后培养基的pH会升高 B.步骤①用平板划线法进行接种 C.步骤②挑选溶钙圈较大的菌株 D.步骤③需要保持恒温和通气 解析:乳酸菌通过无氧呼吸产生乳酸,导致培养基的pH下降,A错误;步骤①将发酵液稀释后接种到MRS培养基,该过程需通过稀释涂布平板法接种以获得单菌落,而非平板划线法(无需稀释),B错误;含碳酸钙的培养基中,乳酸菌产酸会溶解碳酸钙形成透明圈(溶钙圈),溶钙圈越大说明产酸能力越强,故需挑选溶钙圈较大的菌株,C正确;乳酸菌为厌氧菌,步骤③的检测应在无氧条件下进行,无需通气,D错误。 答案:C 7.(2026·安徽马鞍山模拟)土壤中某些微生物能将全球植物每年产生的40%~60%纤维素分解利用。科研人员利用微生物培养技术对土壤中的纤维素分解菌进行分离和计数。下列叙述正确的是(　　) A.分别对土壤中该菌和细菌总数计数时,选用的稀释范围不同 B.分离土壤中该菌时,必须用稀释涂布平板法,涂布器使用前需灭菌 C.对该菌计数时,需选择培养24 h、菌落数为30~300的平板进行计数 D.可利用加入了刚果红的选择培养基对土壤中的纤维素分解菌进行筛选 解析:因为土壤中细菌总数通常比纤维素分解菌的数量多,所以在计数时,为了保证计数的准确性,分别对土壤中纤维素分解菌和细菌总数计数时,选用的稀释范围不同,A正确;分离土壤中纤维素分解菌时,常用稀释涂布平板法,但不是必须用这种方法,平板划线法也可以用于分离微生物,B错误;对该菌计数时,为了保证结果的准确性和可靠性,需选择培养一定时间(如48 h等,不一定是24 h)、菌落数为30~300的平板进行计数,C错误;利用加入了刚果红的鉴别培养基对土壤中的纤维素分解菌进行筛选,刚果红能与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,在纤维素分解菌周围会出现透明圈,从而筛选出纤维素分解菌,D错误。 答案:A 8.(2026·天津和平开学考试)下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作(A组)和计数操作(B组)过程示意图。下列有关叙述错误的是(　　) A.⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多 B.④和⑤所用培养基从物理性质分析,区别是④培养基中没有添加琼脂 C.④的培养基应以纤维素为唯一碳源,还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求 D.可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌 解析:⑨计数方法为稀释涂布平板法,只能统计活菌数,且当两个或多个细胞聚集时会形成1个菌落;而细菌计数板计数法无论活菌还是死菌都统计在内,因此稀释涂布平板法统计得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较少,A错误。④和⑤所用培养基从物理性质分析,④是液体培养基,没有添加琼脂;⑤是固体培养基,添加了琼脂,B正确。该实验是为了分离得到纤维素分解菌,④培养液中以纤维素作为唯一碳源时,只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖,从而筛选出纤维素分解菌,此外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求,C正确。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,可通过是否产生透明圈来鉴别纤维素分解菌,即可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌,D正确。 答案:A 　(9-10题,每题5分) 9．(2026·黑龙江齐齐哈尔开学考试)研究人员从柠檬的自发发酵液中分离出一株酿酒酵母菌株(NM­8)。研究表明，用NM­8发酵的柠檬酒样品含有更多的抗坏血酸、山梨醇和甘油，这对柠檬酒的顺滑度和甜度产生了积极影响。下列相关叙述错误的是(　　) A.用平板划线法分离NM­8时的接种工具是接种环 B．配制培养NM­8的培养基时，先灭菌再调节pH C．用稀释涂布平板法接种NM­8后需要倒置培养 D．纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色等进行菌种鉴定 解析：用平板划线法分离NM­8时的接种工具是接种环，A正确；配制培养基时，先调pH再灭菌，B错误；用稀释涂布平板法接种NM­8后平板要倒置培养，C正确；菌落形状、大小、颜色等是进行菌种鉴定的重要依据，因此纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色等进行菌种鉴定，D正确。 答案：B 10．(2026·河北保定阶段练习)黄曲霉毒素(C17H12O7)是霉菌产生的一类真菌毒素，是各种储备粮食中的主要污染物，对健康危害较大。部分食品制作过程中的常见微生物可降解其毒性。科研人员按照如图所示的流程分离发霉粮食中的黄曲霉毒素分解菌。下列分析错误的是(　　) A．若与定容时稀释倍数相同，则a为2.7 B．振荡可使发霉粮食中的微生物均匀分布在无菌水中 C．图示培养基一定是以黄曲霉毒素为唯一碳源 D．图示培养基的菌落中，E菌落应是目的菌落 解析：试管中每次定容时稀释倍数相同(稀释10倍)，向试管中滴加0.3 mL稀释液，故a为2.7，A正确；振荡可使发霉粮食中的微生物均匀分布在无菌水中，B正确；培养基上D菌落周围没有降解圈，说明图示培养基可能不是以黄曲霉毒素为唯一碳源，C错误；图示E菌落直径与降解圈直径比值最大，故E菌落应是目的菌落，D正确。 答案：C 11.(10分)(2024·全国甲卷)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液C杀灭细菌的效果,结果如图所示。回答下列问题。 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量,发现测得的细菌数量前者大于后者,其原因是    　 。  (2)该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,再从稀释菌液中取200 μL涂布平板,菌落计数的结果为100,据此推算细菌原液中细菌浓度为　　　　个/mL。  (3)菌落计数过程中,涂布器应先在酒精灯上灼烧,冷却后再涂布。灼烧的目的是   　 ,  冷却的目的是　 。  (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是　　　　,判断依据是   　 (答出2点即可)。  (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红—亚甲蓝培养基上生长的菌落呈　　　　色。  解析:(1)显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数。菌落计数法计数只计活菌数,还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况,故前者的数量多于后者。(2)从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,即稀释了10倍,1 mL细菌原液中细菌数量=(菌落数÷菌液体积)×稀释倍数=(100÷0.2)×10=5 000个。(3)菌落计数过程中,涂布器应先在酒精灯上灼烧,冷却后再涂布。灼烧的目的是杀死涂布器上可能存在的微生物,防止涂布器上可能存在的微生物污染,冷却的目的是防止温度过高杀死菌种。(4)A消毒液活菌数减少量最多,且杀菌时间较短,效率最高,因此A消毒液杀菌效果最好。(5)大肠杆菌在伊红—亚甲蓝培养基上生长的菌落呈深紫色。 答案:(1)前者微生物分散的活菌和死菌一起计数,后者存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌　(2)5 000　(3)杀死涂布器上可能存在的微生物,防止涂布器上可能存在的微生物污染　防止温度过高杀死菌种　(4)A　A消毒液活菌数减少量最多,且杀菌时间较短,效率最高　(5)深紫 12.(8分)(2026·四川成都开学考试)研究人员用甲基磺酸乙酯(EMS)处理大肠杆菌,使鸟嘌呤烷基化,导致G—C→A—T,从而获得了无法合成赖氨酸的营养缺陷型菌株。如图是科研人员利用影印法(将丝绒布轻轻按压在平板的菌落表面,黏附菌体。然后将粘有菌落的丝绒布按压到新的培养基上,使菌落“复印”到新平板上)初检赖氨酸缺陷型菌株的过程。回答下列问题。 (1)获得纯净的微生物培养物的关键是　　　　　　　　。某次培养由于操作不当,培养基上存在多个不同种类的微生物菌落,其中一个菌落由单一微生物繁殖形成且无杂菌污染,该菌落　　　　(填“是”或“不是”)纯培养物。  (2)平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快挥发。若水珠落入培养基可能会   　 (答出2点即可)。  (3)为了保持菌落的相对位置不变,影印法接种时需要注意　　　　　　　　　　　　。  (4)进行图示②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至　　　　培养基上,再“复印”至另一培养基。赖氨酸缺陷型菌株应在图中的菌落　　　　中挑选。  解析:(1)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。一个菌落由单一微生物繁殖形成且无杂菌污染,该菌落就是纯培养物。(2)平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快挥发。若水珠落入培养基可能会破坏形成的菌落或细胞单层;水滴可能使菌落扩散,影响分离效果或计数准确性,增加污染风险(水滴可能携带空气中的杂菌)。(3)为了保持菌落的相对位置不变,影印法接种时需要注意丝绒布不转动任何角度。(4)如果先接种完全培养基,可能丝绒布会把培养基中的赖氨酸带入基本培养基,所以进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至基本培养基上,再“复印”至另一培养基。菌落A在完全培养基生长,但是在基本培养基上缺乏赖氨酸无法生长,说明菌落A是赖氨酸缺陷型菌株。 答案:(1)防止杂菌污染　是　(2)破坏形成的菌落或细胞单层;使菌落扩散,影响分离效果或计数准确性;增加污染风险(水滴可能携带空气中的杂菌)　(3)丝绒布不转动任何角度　(4)基本　A 学科网（北京）股份有限公司 $