2027届高考生物一轮复习重点强化练92　微生物的选择培养和计数

**基本信息** 聚焦微生物选择培养与计数的实验原理及操作，通过情境化选择题构建“原理-操作-结果分析”的逻辑链，强化科学思维与探究实践能力。 **专项设计** |模块|题量/典例|题型特征|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |选择培养与筛选|3题（1/2/4题）|结合特定菌株筛选情境，考查选择培养基作用及筛选原理|从“环境适应→选择压力→菌株分离”的逻辑，衔接选择培养基成分与功能| |计数方法与操作|3题（3/7/10题）|围绕菌落计数实验，考查稀释涂布平板法操作及计算|遵循“梯度稀释→接种培养→菌落计数”流程，关联计数方法适用性与误差分析| |灭菌技术与无菌操作|2题（5/8题）|通过消毒灭菌方案设计，考查灭菌方法选择及操作规范|依据“对象特性→灭菌方式→效果验证”逻辑，区分灭菌与消毒的适用场景| |实验设计与结果分析|3题（6/9/11题）|结合对照实验设计，分析实验变量、结果及结论|体现“提出问题→设计方案→结果解读”的探究实践路径，强化实验变量控制思维|

重点强化练92　微生物的选择培养和计数 (分值∶55分) (第1～11题，每题5分，共55分。) 1．(2025·南充一诊)研究员从柽柳根际土壤中筛选出了某种耐盐碱促生菌，对其分别进行了耐盐碱能力测试和对植物生长发育的影响实验，发现该菌株不仅能在盐浓度为0～160 g/L、pH为7.0～11.0的条件下生长，还能显著促进拟南芥、玉米在盐碱胁迫下的生长发育。下列叙述错误的是(　　) A．筛选该促生菌株需要用高盐、碱性的选择培养基 B．该促生菌株耐盐碱能力测试的实验中自变量是盐浓度 C．筛选到的促生菌株可用稀释涂布平板法进行纯培养并计数 D．该促生菌株可以作为研究盐碱地专用微生物肥料的候选菌株 2．(2025·湖北高中协作体三模)幽门螺杆菌(含有脲酶)感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列叙述正确的是(　　) A．可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用 B．鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质 C．分离纯化幽门螺杆菌时应使用以葡萄糖为唯一氮源的培养基 D．对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 3．(2025·山东齐鲁名校联考)某同学欲检测消毒餐具中大肠杆菌的数量是否超标，进行如下操作：用蒸馏水分3～5次冲洗待检餐具内表面，制成待测样液备用；配制伊红－亚甲蓝琼脂培养基，将待测样液接种于琼脂培养基上。下列叙述错误的是(　　) A．为了确保检测的准确性，冲洗待检餐具的蒸馏水应该换成无菌水 B．生长在伊红－亚甲蓝琼脂培养基上的大肠杆菌菌落具有金属光泽 C．设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照可检验该鉴别培养基的效果 D．为便于观察菌落的颜色，应将培养基的pH调至中性或弱碱性 4．(2025·浙江名校协作体联考)木质素是一种大量存在于秸秆中的含碳有机物。木质素降解菌分泌的漆酶不仅能降解木质素，还可催化蓝色物质苯胺蓝分解成H2O和CO2。研究人员利用苯胺蓝培养基筛选高效降解木质素的菌株。下列叙述错误的是(　　) A．从秸秆还田的土壤中取样并加入无菌水制备菌悬液 B．使用涂布器将稀释的菌液接种至苯胺蓝培养基 C．挑选周围出现较大蓝色环带的菌落进行后续实验 D．产漆酶菌能在以木质素为唯一碳源的培养基中生长 5．(2026·邢台一中月考)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。在选择消毒和灭菌方法时，应根据实验的具体情况和需要，综合考虑各种因素，选择最适合的方法。同时，还应注意操作过程中的具体步骤问题。下列叙述错误的是(　　) A．微生物纯培养时，对培养基及培养用具需进行严格灭菌处理 B．在酒精灯火焰附近，不能将培养皿盖完全打开然后倒入培养基 C．玻璃器皿、金属用具可以干热灭菌，培养基一般进行湿热灭菌 D．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭，可在常温下长期保存 6．(2025·淮安一中月考)为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，某研究小组进行了如图所示的实验。下列相关操作或叙述正确的是(　　) A．固体培养基X对菜品中的细菌有选择性，属于选择培养基 B．配制培养基X应在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min C．在固体培养基X上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种细菌 D．根据菌落的特征可准确判断细菌的种类 7．(2025·常德一中月考)在中国南海科考中，中国科学家发现了拟杆菌新菌株。为研究其生物学特性，科学家设置了不同碳源的培养基进行培养(起始数相同)，结果如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．上述培养基使用平板划线法进行接种 B．除碳源外，培养基中还应加入氮源、水、无机盐等 C．当碳源为纤维素时，菌株生长状况最好 D．接种时，应在无菌环境中操作 8．(2025·河南许平洛济三模)牙刷在使用后会残留大量的细菌，科研人员比较了2.5%的碳酸氢钠溶液和沸水对牙刷的消毒效果，实验结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．培养微生物的培养基和接种工具都要先进行高压蒸汽灭菌 B．图中实际菌落数的计数方法是平板划线法 C．建议定期使用2.5%的碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒 D．将接种的培养基倒置培养24小时即可比较不同方法消毒效果的差异 9．(2025·南通一中开学考)水体中氮素的去除对清洁水体有重要意义，异养硝化细菌能将硝酸铵转化为氨，科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并研究其转化能力，结果如图。下列叙述正确的是(　　) A．进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，采用平板划线法接种并计数 B．初步筛选并培养后，一般依据菌落形状等特征来区分不同的微生物 C．分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要添加刚果红作为指示剂 D．ZW2菌株的转化能力较ZW5强，可扩大化培养用于水体净化 10．(2025·衡阳一中月考)尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数，过程如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．①～⑤系列的操作称为梯度稀释，②～⑤应加10 mL无菌水 B．接种培养基应以尿素为唯一氮源，该培养基属于鉴别培养基 C．图中所用培养基需先用干热灭菌法进行灭菌后，再调节pH D．若接种的三个平板平均菌落数为62个，则1 g土样中约有菌落6.2×107个 11．(2026·深圳阶段检测)为探究青霉素对某种细菌的选择作用，将菌液涂布在培养基平板上，①放置不含青霉素的滤纸片，②③④放置含等量青霉素的滤纸片，培养结果如图。下列叙述错误的是(　　) A．培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质 B．盖上皿盖后，应将培养皿倒置并放在适宜温度下培养 C．培养过程中青霉素会诱导该细菌产生多种方向的变异 D．若从a处附近挑取细菌，多次重复上述操作，抑菌圈直径变小 重点强化练92　微生物的选择培养和计数参考答案 (分值∶55分) (第1～11题，每题5分，共55分。) 1．(2025·南充一诊)研究员从柽柳根际土壤中筛选出了某种耐盐碱促生菌，对其分别进行了耐盐碱能力测试和对植物生长发育的影响实验，发现该菌株不仅能在盐浓度为0～160 g/L、pH为7.0～11.0的条件下生长，还能显著促进拟南芥、玉米在盐碱胁迫下的生长发育。下列叙述错误的是(　　) A．筛选该促生菌株需要用高盐、碱性的选择培养基 B．该促生菌株耐盐碱能力测试的实验中自变量是盐浓度 C．筛选到的促生菌株可用稀释涂布平板法进行纯培养并计数 D．该促生菌株可以作为研究盐碱地专用微生物肥料的候选菌株 答案　B 解析　该促生菌株耐盐碱能力测试的实验中自变量是盐浓度和pH，B错误；稀释涂布平板法的原理是在足够稀释度下将样液均匀涂布得到单个独立的菌落，故该方法可以用于纯培养，同时一个菌落一般是由一个活菌繁殖而来，该方法还可以用于计数，C正确。 2．(2025·湖北高中协作体三模)幽门螺杆菌(含有脲酶)感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列叙述正确的是(　　) A．可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用 B．鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质 C．分离纯化幽门螺杆菌时应使用以葡萄糖为唯一氮源的培养基 D．对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 答案　A 解析　为了证明选择培养基的选择作用，可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照，A正确；鉴别幽门螺杆菌需利用其脲酶分解尿素的特性。培养基中应加入尿素和酚红指示剂，尿素分解后产生氨使pH升高，酚红变红。若加入缓冲物质，会中和产生的氨，导致无法显色，B错误。幽门螺杆菌合成脲酶，可以利用尿素，所以分离纯化幽门螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基，且葡萄糖不提供氮源，C错误。对幽门螺杆菌进行分离和计数要用稀释涂布平板法，平板划线法不适合用于计数，D错误。 3．(2025·山东齐鲁名校联考)某同学欲检测消毒餐具中大肠杆菌的数量是否超标，进行如下操作：用蒸馏水分3～5次冲洗待检餐具内表面，制成待测样液备用；配制伊红－亚甲蓝琼脂培养基，将待测样液接种于琼脂培养基上。下列叙述错误的是(　　) A．为了确保检测的准确性，冲洗待检餐具的蒸馏水应该换成无菌水 B．生长在伊红－亚甲蓝琼脂培养基上的大肠杆菌菌落具有金属光泽 C．设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照可检验该鉴别培养基的效果 D．为便于观察菌落的颜色，应将培养基的pH调至中性或弱碱性 答案　C 解析　蒸馏水中可能存在大肠杆菌，对检测结果产生干扰，为了确保检测的准确性，冲洗待检餐具的蒸馏水应该换成灭菌后的无菌水，A正确；生长在伊红－亚甲蓝琼脂培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且具有金属光泽，B正确；为检验该鉴别培养基的效果，应设置接种大肠杆菌的伊红－亚甲蓝琼脂培养基作对照，C错误；大肠杆菌属于细菌，在培养细菌时，需要将培养基的pH调至中性或弱碱性，D正确。 4．(2025·浙江名校协作体联考)木质素是一种大量存在于秸秆中的含碳有机物。木质素降解菌分泌的漆酶不仅能降解木质素，还可催化蓝色物质苯胺蓝分解成H2O和CO2。研究人员利用苯胺蓝培养基筛选高效降解木质素的菌株。下列叙述错误的是(　　) A．从秸秆还田的土壤中取样并加入无菌水制备菌悬液 B．使用涂布器将稀释的菌液接种至苯胺蓝培养基 C．挑选周围出现较大蓝色环带的菌落进行后续实验 D．产漆酶菌能在以木质素为唯一碳源的培养基中生长 答案　C 解析　因为秸秆还田的土壤中通常富含降解木质素的微生物，因此从这样的土壤中取样来筛选降解菌，为了获得单菌落，需要加入一定量的无菌水制备菌悬液，A正确；研究人员利用苯胺蓝培养基筛选高效降解木质素的菌株，可以使用稀释涂布平板法，用涂布器将稀释的菌液接种至苯胺蓝培养基，能降解木质素的菌种会分泌漆酶，催化苯胺蓝分解，在该菌落的周围会产生透明圈，所以可根据是否产生透明圈及透明圈的大小筛选出高效降解木质素的菌株进行后续实验，B正确，C错误；产漆酶菌产生的漆酶可以降解木质素，为该菌生长提供碳源，所以产漆酶菌能在以木质素为唯一碳源的培养基中生长，D正确。 5．(2026·邢台一中月考)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。在选择消毒和灭菌方法时，应根据实验的具体情况和需要，综合考虑各种因素，选择最适合的方法。同时，还应注意操作过程中的具体步骤问题。下列叙述错误的是(　　) A．微生物纯培养时，对培养基及培养用具需进行严格灭菌处理 B．在酒精灯火焰附近，不能将培养皿盖完全打开然后倒入培养基 C．玻璃器皿、金属用具可以干热灭菌，培养基一般进行湿热灭菌 D．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭，可在常温下长期保存 答案　D 解析　玻璃器皿和金属用具耐高温且需保持干燥，适用干热灭菌，培养基含水分且需彻底灭菌，适用湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)，C正确；巴氏消毒法通过较低温度处理杀死部分微生物(尤其是致病菌)，但未彻底消灭所有微生物(如芽孢)，故处理后食物仍需低温保存，D错误。 6．(2025·淮安一中月考)为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，某研究小组进行了如图所示的实验。下列相关操作或叙述正确的是(　　) A．固体培养基X对菜品中的细菌有选择性，属于选择培养基 B．配制培养基X应在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min C．在固体培养基X上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种细菌 D．根据菌落的特征可准确判断细菌的种类 答案　B 解析　实验目的是研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，固体培养基X没有做任何处理，对菜品中的细菌没有选择性，A错误；为了排除微生物污染，对配制的培养基X需要采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，即在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min，B正确；在固体培养基X上接种后，还需要对微生物进行计数，因此接种细菌只能用稀释涂布平板法，不能用平板划线法，C错误；在一定的培养条件下，不同种类的微生物表现出各自稳定的菌落特征，根据菌落的形状、大小、颜色等特征，可以初步区分出不同种类微生物，但不能准确判断细菌的种类，D错误。 7．(2025·常德一中月考)在中国南海科考中，中国科学家发现了拟杆菌新菌株。为研究其生物学特性，科学家设置了不同碳源的培养基进行培养(起始数相同)，结果如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．上述培养基使用平板划线法进行接种 B．除碳源外，培养基中还应加入氮源、水、无机盐等 C．当碳源为纤维素时，菌株生长状况最好 D．接种时，应在无菌环境中操作 答案　A 解析　平板划线法不能用于计数，而稀释涂布平板法可计数，故上述培养基使用稀释涂布平板法进行接种，A错误；当碳源为纤维素时，细胞数目最多，说明当碳源为纤维素时，菌株生长状况最好，C正确。 8．(2025·河南许平洛济三模)牙刷在使用后会残留大量的细菌，科研人员比较了2.5%的碳酸氢钠溶液和沸水对牙刷的消毒效果，实验结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．培养微生物的培养基和接种工具都要先进行高压蒸汽灭菌 B．图中实际菌落数的计数方法是平板划线法 C．建议定期使用2.5%的碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒 D．将接种的培养基倒置培养24小时即可比较不同方法消毒效果的差异 答案　C 解析　培养微生物的培养基一般采用高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)，而接种工具如接种环、涂布器等采用灼烧灭菌，接种针等也可采用干热灭菌，并非都进行高压蒸汽灭菌，A错误；图中实际菌落数的计数方法是稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，B错误；将接种的培养基倒置培养 24 小时，时间可能过短，不同方法消毒效果的差异可能不明显，应培养适当时间，观察菌落生长情况来比较差异，D错误。 9．(2025·南通一中开学考)水体中氮素的去除对清洁水体有重要意义，异养硝化细菌能将硝酸铵转化为氨，科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并研究其转化能力，结果如图。下列叙述正确的是(　　) A．进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，采用平板划线法接种并计数 B．初步筛选并培养后，一般依据菌落形状等特征来区分不同的微生物 C．分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要添加刚果红作为指示剂 D．ZW2菌株的转化能力较ZW5强，可扩大化培养用于水体净化 答案　B 解析　分离微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，但平板划线法不能用于计数，故进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用稀释涂布平板法进行接种并计数，A错误；异养硝化细菌能将硝酸铵转化为氨，科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并研究其转化能力，所以分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要添加酚红作为指示剂，C错误；ZW5菌落周围的红色圈面积大，说明其降解硝酸铵产生氨的能力更强，故如果要得到目标菌，应选择ZW5菌落进一步纯化，D错误。 10．(2025·衡阳一中月考)尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数，过程如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．①～⑤系列的操作称为梯度稀释，②～⑤应加10 mL无菌水 B．接种培养基应以尿素为唯一氮源，该培养基属于鉴别培养基 C．图中所用培养基需先用干热灭菌法进行灭菌后，再调节pH D．若接种的三个平板平均菌落数为62个，则1 g土样中约有菌落6.2×107个 答案　D 解析　①～⑤系列的操作称为梯度稀释，②～⑤应加9 mL无菌水，A错误；该培养基应以尿素为唯一氮源，能分解尿素的微生物能存活，不能分解尿素的微生物不能存活，因此该培养基属于选择培养基，B错误；图中所用培养基需先调节pH，再用湿热灭菌法(高压蒸汽灭菌法)进行灭菌，C错误；对菌液进行稀释时共稀释了106倍，若接种的三个平板平均菌落数为62个，则1 g土样中约有菌落62×106＝6.2×107(个)，D正确。 11．(2026·深圳阶段检测)为探究青霉素对某种细菌的选择作用，将菌液涂布在培养基平板上，①放置不含青霉素的滤纸片，②③④放置含等量青霉素的滤纸片，培养结果如图。下列叙述错误的是(　　) A．培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质 B．盖上皿盖后，应将培养皿倒置并放在适宜温度下培养 C．培养过程中青霉素会诱导该细菌产生多种方向的变异 D．若从a处附近挑取细菌，多次重复上述操作，抑菌圈直径变小 答案　C 解析　培养基的基本成分包括碳源、氮源、水和无机盐等，这是细菌生长所必需的营养物质，A正确；变异是不定向的，在使用青霉素之前，细菌已经存在多种变异类型，青霉素只是对这些变异类型进行选择，而不是诱导细菌产生多种方向的变异，C错误；从a处附近挑取细菌，a处附近的细菌对青霉素的抗性较强，重复上述操作，经过多次选择，细菌的抗药性会增强，抑菌圈直径变小，D正确。 . 学科网（北京）股份有限公司 $