2027届高考生物一轮复习重点强化练91　微生物的基本培养技术

**基本信息** 聚焦微生物培养核心技术，以实验操作与原理结合为特色，通过情境化选择题系统覆盖培养基制备、无菌操作、分离纯化等关键能力，体现科学思维与探究实践素养。 **专项设计** |模块|题量/典例|题型特征|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |培养基制备与灭菌|3题（1、3、5）|结合配方分析功能，考查pH调节、灭菌方法|从营养成分到灭菌技术，构建"成分-条件-灭菌"逻辑链| |无菌操作技术|2题（2、4）|围绕消毒灭菌细节，辨析操作正误|以"防杂菌污染"为核心，串联消毒与灭菌技术差异| |微生物分离纯化|3题（7、10、11）|通过划线/涂布操作，分析单菌落形成|从接种方法到纯化原理，体现"稀释-分离-鉴定"流程| |特定微生物培养|3题（6、8、9）|针对功能菌（蛭弧菌、尿素分解菌等），考查选择培养|结合微生物代谢特性，建立"营养需求-培养条件-鉴别方法"关联|

重点强化练91　微生物的基本培养技术 (分值∶55分) (第1～11题，每题5分，共55分。) 1．(2025·潍坊一中月考)做微生物的纯培养实验时，既要配制适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列叙述正确的是(　　) A．培养基上获得的菌落是由单个微生物繁殖形成的 B．培养霉菌时，一般需将培养基的pH调至酸性 C．不含氮源的培养基不能用于微生物培养 D．配制好的培养基采用干热灭菌，以防止杂菌污染 2．(2025·淮安一中月考)获得纯净微生物培养物的关键是防止外来杂菌入侵。下列关于无菌操作的叙述，错误的是(　　) A．超净工作台在使用前进行紫外线照射以杀死物体表面或空气中的微生物 B．无菌技术还应包括避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触 C．牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味 D．灼烧灭菌的对象可以是金属用具和玻璃器皿，在酒精灯火焰充分燃烧层进行 3．(2026·湖南九校联考)根腐病是一种真菌引起的疾病，该病会造成根部腐烂，吸收水分和养分的功能逐渐减弱，最后全株死亡，主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌，流程大致如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列叙述正确的是(　　) A．为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置 B．倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性 C．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100 kPa、121 ℃，15～30 min D．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 4．(2025·镇江阶段检测)防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键。下列叙述错误的是(　　) A．利用微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解，可实现生物消毒 B．利用紫外线对超净工作台进行消毒前，喷洒消毒液可加强消毒效果 C．利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌时，应在160 ℃的热空气中维持1～2 h D．利用酒精灯对金属用具进行灼烧灭菌时，应在酒精灯火焰充分燃烧层进行 5．(2025·黄石一中月考)如表表示培养大肠杆菌的某培养基配方(生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽)，下列叙述正确的是(　　) 成分 蛋白胨 葡萄糖 KH2PO4 伊红 亚甲基蓝 蒸馏水 琼脂 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 100 mL 15 g A.从用途分析该培养基属于鉴别培养基 B．培养基中的蛋白胨只能提供氮源，不能提供维生素 C．应在该培养基灭菌后将pH调节至中性或弱碱性 D．在培养基冷却至50 ℃左右倒平板后，立即将平板倒过来放置 6．(2026·珠海模拟)蛭弧菌能使污水中的嗜水气单胞菌(异养型)裂解，将其接种在长满嗜水气单胞菌的平板上会出现噬菌斑。某兴趣小组将嗜水气单胞菌接种到固体培养基上，培养形成薄层，再接种采集的污水用以分离蛭弧菌。下列叙述错误的是(　　) A．可用湿热灭菌法对培养基进行灭菌 B．可用稀释涂布平板法接种嗜水气单胞菌 C．出现噬菌斑一定是蛭弧菌作用的结果 D．需要在该固体培养基中添加有机碳源 7．(2026·湖北恩施期中)某同学为了在实验室富集某种大豆根瘤菌，通过查阅资料，配制了含有如表所示成分的培养基。下列叙述错误的是(　　) 成分 甘露醇 KH2PO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O 浓度(质量分数) 1% 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% A.该培养基不需要添加氮源，可以达到富集目的 B．该培养基还需要添加琼脂，便于将菌种接种到固体培养基上 C．灭菌后待培养基冷却至50 ℃左右时，需要在酒精灯火焰附近倒平板 D．平板上一个菌落就是一个大豆根瘤菌 8．为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3次 B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50 ℃左右开始倒平板操作 C．可在该培养基上生存并使酚红指示剂变红的菌落可能是固氮菌形成的 D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率 9．(2025·庆阳三模)牛奶中富含多种营养物质，但牛奶也是多种病原体的传播载体，比如牛奶中可能存在溶血性链球菌，该细菌是一种好氧或兼性厌氧菌。溶血性链球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为定性检测鲜牛奶中是否存在溶血性链球菌，操作流程如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．可将接种环放在酒精灯火焰的外焰部分进行灼烧灭菌 B．振荡培养有利于微生物的生长繁殖 C．在血平板上的接种方法是稀释涂布平板法 D．一般需要将7.5%NaCl肉汤培养基调至中性或弱碱性 10．(2025·成都淮口中学月考)如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列叙述错误的是(　　) A．该操作步骤是接种，方法是平板划线法 B．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端 C．该接种方法适用于细菌的计数 D．图中细菌密度最小的是5处末端 11．(2025·南京六校联合体联考)将两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌(菌株a和b)进行如图所示实验。下列叙述正确的是(　　) A．实验中接种至基本培养基的方法是平板划线法 B．基本培养基上出现的少量菌落一定是单菌落 C．基本培养基中包含菌株a和b的特殊营养物质 D．菌株a和b需要的特殊营养物质有所不同 重点强化练91　微生物的基本培养技术参考答案 (分值∶55分) (第1～11题，每题5分，共55分。) 1．(2025·潍坊一中月考)做微生物的纯培养实验时，既要配制适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列叙述正确的是(　　) A．培养基上获得的菌落是由单个微生物繁殖形成的 B．培养霉菌时，一般需将培养基的pH调至酸性 C．不含氮源的培养基不能用于微生物培养 D．配制好的培养基采用干热灭菌，以防止杂菌污染 答案　B 解析　微生物的纯培养实验中，培养基上经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，但是有的菌落可能由两个或多个细胞连在一起繁殖形成一个菌落，A错误；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，不含氮源的培养基可以用于固氮微生物的培养，C错误；配制好的培养基可以采用高压蒸汽灭菌，其目的是防止杂菌污染培养基，这是获得纯净的微生物培养物的关键，D错误。 2．(2025·淮安一中月考)获得纯净微生物培养物的关键是防止外来杂菌入侵。下列关于无菌操作的叙述，错误的是(　　) A．超净工作台在使用前进行紫外线照射以杀死物体表面或空气中的微生物 B．无菌技术还应包括避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触 C．牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味 D．灼烧灭菌的对象可以是金属用具和玻璃器皿，在酒精灯火焰充分燃烧层进行 答案　C 解析　牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破坏牛奶的营养成分，C错误。 3．(2026·湖南九校联考)根腐病是一种真菌引起的疾病，该病会造成根部腐烂，吸收水分和养分的功能逐渐减弱，最后全株死亡，主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌，流程大致如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列叙述正确的是(　　) A．为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置 B．倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性 C．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100 kPa、121 ℃，15～30 min D．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 答案　C 解析　灭菌后的培养基需冷却至50 ℃左右再倒入培养皿，A错误；真菌适宜在酸性环境中生长，而中性或弱碱性培养基常用于培养细菌，要分离真菌，需将pH调至酸性，且应在灭菌前进行，B错误；高压蒸汽灭菌的标准条件为100 kPa、121 ℃、灭菌15～30 min，可有效杀灭包括芽孢在内的微生物，C正确；连续划线时，应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌种，获得单菌落，D错误。 4．(2025·镇江阶段检测)防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键。下列叙述错误的是(　　) A．利用微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解，可实现生物消毒 B．利用紫外线对超净工作台进行消毒前，喷洒消毒液可加强消毒效果 C．利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌时，应在160 ℃的热空气中维持1～2 h D．利用酒精灯对金属用具进行灼烧灭菌时，应在酒精灯火焰充分燃烧层进行 答案　C 解析　有的微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解，因此可以使用这些微生物进行生物消毒，如净化污水、污泥，A正确；用紫外线照射30 min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒消毒液，可以加强消毒效果，B正确；培养基应该用高压蒸汽灭菌，C错误；接种环等金属用具一般利用灼烧灭菌，即直接在酒精灯火焰充分燃烧层灼烧，D正确。 5．(2025·黄石一中月考)如表表示培养大肠杆菌的某培养基配方(生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽)，下列叙述正确的是(　　) 成分 蛋白胨 葡萄糖 KH2PO4 伊红 亚甲基蓝 蒸馏水 琼脂 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 100 mL 15 g A.从用途分析该培养基属于鉴别培养基 B．培养基中的蛋白胨只能提供氮源，不能提供维生素 C．应在该培养基灭菌后将pH调节至中性或弱碱性 D．在培养基冷却至50 ℃左右倒平板后，立即将平板倒过来放置 答案　A 解析　从用途分析该培养基属于鉴别培养基，因为其中加入了伊红和亚甲基蓝，可以鉴别大肠杆菌，A正确；培养基中的蛋白胨不仅能提供氮源，还能提供碳源和维生素，B错误；由于该培养基用于培养细菌，所以pH应调节至中性或弱碱性，且需要在灭菌前进行，C错误；在培养基冷却至50 ℃左右倒平板后，待平板冷凝后倒过来放置，D错误。 6．(2026·珠海模拟)蛭弧菌能使污水中的嗜水气单胞菌(异养型)裂解，将其接种在长满嗜水气单胞菌的平板上会出现噬菌斑。某兴趣小组将嗜水气单胞菌接种到固体培养基上，培养形成薄层，再接种采集的污水用以分离蛭弧菌。下列叙述错误的是(　　) A．可用湿热灭菌法对培养基进行灭菌 B．可用稀释涂布平板法接种嗜水气单胞菌 C．出现噬菌斑一定是蛭弧菌作用的结果 D．需要在该固体培养基中添加有机碳源 答案　C 解析　运用稀释涂布平板法可将嗜水气单胞菌均匀接种到固体培养基上，从而获得单菌落，B正确；除了蛭弧菌能使嗜水气单胞菌裂解形成噬菌斑外，其他能裂解嗜水气单胞菌的微生物也可能导致噬菌斑的出现，所以出现噬菌斑不一定是蛭弧菌作用的结果，C错误；嗜水气单胞菌是异养型生物，需要在培养基中添加有机碳源作为其碳源和能源物质，D正确。 7．(2026·湖北恩施期中)某同学为了在实验室富集某种大豆根瘤菌，通过查阅资料，配制了含有如表所示成分的培养基。下列叙述错误的是(　　) 成分 甘露醇 KH2PO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O 浓度(质量分数) 1% 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% A.该培养基不需要添加氮源，可以达到富集目的 B．该培养基还需要添加琼脂，便于将菌种接种到固体培养基上 C．灭菌后待培养基冷却至50 ℃左右时，需要在酒精灯火焰附近倒平板 D．平板上一个菌落就是一个大豆根瘤菌 答案　D 解析　根瘤菌为固氮菌，可利用空气中的氮气作为氮源，该培养基缺少氮源，可用于筛选和富集固氮菌，A正确；琼脂通常作为固体培养基的促凝剂，故该培养基还需要添加琼脂，便于将菌种接种到固体培养基上，B正确；平板上一个菌落是由单个微生物细胞繁殖到一定程度，形成的子细胞集团，D错误。 8．为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3次 B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50 ℃左右开始倒平板操作 C．可在该培养基上生存并使酚红指示剂变红的菌落可能是固氮菌形成的 D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率 答案　B 解析　要获得图示培养结果，需要用平板划线法进行接种，划线区域有三个，因此接种过程中接种环需要灼烧4次，A错误；固氮菌能利用空气中的N2为氮源，将N2转化为NH3，但不能分解尿素生成碱性物质，因此也不能使酚红指示剂变红，C错误；用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率，但不能分离出目的菌，D错误。 9．(2025·庆阳三模)牛奶中富含多种营养物质，但牛奶也是多种病原体的传播载体，比如牛奶中可能存在溶血性链球菌，该细菌是一种好氧或兼性厌氧菌。溶血性链球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为定性检测鲜牛奶中是否存在溶血性链球菌，操作流程如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．可将接种环放在酒精灯火焰的外焰部分进行灼烧灭菌 B．振荡培养有利于微生物的生长繁殖 C．在血平板上的接种方法是稀释涂布平板法 D．一般需要将7.5%NaCl肉汤培养基调至中性或弱碱性 答案　C 解析　酒精灯外焰层为充分燃烧层，将接种环放在酒精灯火焰的外焰部分进行灼烧灭菌，A正确；振荡培养是在一定转速下的摇床上进行培养，振荡培养可使微生物与营养物质充分接触并提高培养液中的氧气含量，有利于微生物的生长繁殖，B正确；据图中平板中的线条可知，接种至血平板所用的方法为平板划线法，C错误；培养对象为细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，D正确。 10．(2025·成都淮口中学月考)如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列叙述错误的是(　　) A．该操作步骤是接种，方法是平板划线法 B．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端 C．该接种方法适用于细菌的计数 D．图中细菌密度最小的是5处末端 答案　C 解析　除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端，目的是将聚集的菌种逐渐稀释，从而得到单菌落，B正确；平板划线法只能用于微生物的分离、培养，不能用于计数，C错误；图中5为最后一次划线，图中细菌密度最小的是5处末端，D正确。 11．(2025·南京六校联合体联考)将两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌(菌株a和b)进行如图所示实验。下列叙述正确的是(　　) A．实验中接种至基本培养基的方法是平板划线法 B．基本培养基上出现的少量菌落一定是单菌落 C．基本培养基中包含菌株a和b的特殊营养物质 D．菌株a和b需要的特殊营养物质有所不同 答案　D 解析　根据菌株a和菌株b混合后菌落的分布情况可知，接种至基本培养基的方法是稀释涂布平板法，A错误；基本培养基出现的少量菌落不一定都为单菌落，也有可能是重叠的菌落，B错误；单独培养菌株a和b时，培养基中均无法生长菌落，而当a和b共同培养时，培养基中有少量菌落产生，因此培养基中无法提供它们单独生长的特殊营养物质，C错误；a单独培养和b单独培养均不能生长，a和b混合培养能生长，说明它们能够相互提供对方所需的特殊营养物质，因此它们所需的特殊营养物质有所不同，D正确。 . 学科网（北京）股份有限公司 $