甘肃省陇南市宕昌县部分学校2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

**基本信息** 以杨梅果肉细胞、脑机接口等真实情境为载体，融合细胞代谢、遗传规律及基因工程技术，考查生命观念与科学思维。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|细胞结构（如细胞膜脂质）、遗传平衡（桦尺蛾基因频率）、酶活性（姜撞奶制作）|结合生活实例（如“姜撞奶”）考查科学思维，通过同位素标记（18O追踪光合作用）强化生命观念| |非选择题|4题/52分|基因工程（Ti质粒改造）、遗传规律（拟南芥叶色遗传）、稳态调节（低钠血症）|以单克隆抗体制备、平沙绿僵菌改造等科研情境设计探究性问题，体现探究实践与态度责任|

绝密★启用前 2025-2026年宕昌第一中学、第二中学、两当第一中学 高二下学期期末考试生物试卷 注意事项： 1.全卷满分100分，考试用时75分钟。 2.答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。 3.选择题的作答：选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。 4.非选择题的作答：用签字笔直接写在答题卡上对应的答题区域内。写在非答题区域均无效。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．杨梅营养价值高，酸甜可口，其果肉细胞是特化的储存细胞，糖含量占干重的50%-70%。下列叙述正确的是(      ) A.杨梅果肉细胞中的糖类均能为生命活动提供能量 B.杨梅果肉细胞中含量最多的化合物为水 C.杨梅果实需要在低温、干燥、低氧条件下保存 D.杨梅细胞膜上有磷脂、胆固醇等脂质 2．桦尺蛾黑体对灰体为显性。工业革命前，英国某地区桦尺蛾灰体占81%，且处于遗传平衡状态，该种群黑体基因频率为(      ) A.1% B.10% C.19% D.90% 3．“姜撞奶”制作原理是生姜蛋白酶能使牛奶中酪蛋白变性从而形成凝乳。某研究小组探究温度对生姜蛋白酶活性的影响，发现40℃时牛奶凝固最佳。下列叙述错误的是(      ) A.生姜蛋白酶的化学本质是蛋白质 B.酪蛋白变性后空间结构改变 C.40℃时生姜蛋白酶酶活性最低 D.本实验的自变量是温度 4．酵母菌是兼性厌氧型生物。可从外界环境中逆浓度梯度吸收葡萄糖等营养物质，其代谢产生的酒精会及时排出细胞。下列关于酵母菌的叙述，错误的是(      ) A.酵母菌的边界是细胞膜 B.酵母菌具有生物膜系统 C.酵母菌的遗传物质主要是DNA D.酵母菌在有氧和无氧条件下产生CO2场所不同 5．下列有关酶实验的叙述合理的有几项(      ) ①利用过氧化氢和过氧化氢酶探究酶的最适温度 ②若用淀粉、蔗糖、淀粉酶验证酶专一性，可用斐林试剂检测 ③探究温度对蛋白酶活性影响的实验中，可选择双缩脲试剂检测实验结果 ④“探究pH对酶活性的影响”实验中，将酶与底物混合后保存于特定的pH缓冲液中反应一段时间 ⑤用淀粉和淀粉酶探究温度对蛋白酶活性影响的实验中，可用斐林试剂作为检测试剂 ⑥比较过氧化氢在不同条件下的分解实验中，可用常温常压组和加酶组验证“酶的高效性” A.1项 B.2项 C.3项 D.4项 6．“观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原”实验中，用显微镜观察到的结果如图所示。下列叙述错误的是(      ) A.由实验结果推知，甲图细胞壁的伸缩性大 B.与甲图细胞相比，乙图细胞的细胞液浓度较高 C.丙图细胞的体积不会持续增大 D.若选用根尖分生区细胞为材料，质壁分离现象不明显 7．3组小球藻放置于适宜光照条件下，为其提供不同比例18О的水和碳酸氢盐。一段时间后，检测光合作用产物氧气中含18О的比例与水含18О的比例，结果如下表所示。下列说法错误的是(      ) 组别 水中180的比例（%） 和中18О的比例（%） 释放的O2中180的比例（%） 1 0.85 0.41 0.84 2 0.85 0.55 0.85 3 0.85 0.61 0.85 A.18O标记的碳酸氢盐的作用是为植物提供C18O2 B.18O是稳定同位素不具有放射性，也可以用来示踪物质的运行和变化规律 C.上述过程发生在叶绿体内膜上，水光解的过程伴随有光能的吸收、传递和转化 D.释放的含180氧气与含180的水比例一致，证明了光合作用产生的氧气来自水 8．生殖颗粒是位于动物生殖细胞细胞核周围的凝聚体，主要由蛋白质和RNA组成，能调控生殖细胞的正常发育。下列叙述错误的是(      ) A.组成生殖颗粒的元素中有N和P等 B.合成生殖颗粒中的蛋白质需要RNA参与 C.生殖颗粒的组成可能与核糖体类似 D.生殖颗粒中的RNA可通过核孔自由进出细胞核 9．我国生产的转基因大豆油在商品标签上都注明“原料为转基因大豆”。这样做的目的是(      ) A.限制转基因食品的销售 B.维护消费者知情权 C.保护野生植物资源 D.鼓励消费者放心购买 10．为获取植物次生代谢产物，先将植物外植体诱导形成愈伤组织，再置于液体培养基中进行悬浮培养，以此实现细胞产物的工厂化生产。下图为愈伤组织悬浮培养过程中，细胞干重、蔗糖浓度及pH的变化曲线。下列叙述错误的是(      ) A.外植体诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化 B.培养12d后细胞干重下降，主要原因是培养液中蔗糖大量消耗，营养供应不足 C.细胞产物工厂化生产主要通过优化细胞生长条件，提升单个细胞内次生代谢产物的含量 D.悬浮培养过程中需定期更换液体培养基，避免代谢废物积累毒害细胞 11．某同学参加学校运动会3000米长跑比赛，赛前他喝了大量水以补充体液，比赛中大量出汗，比赛后又连续饮用了1500mL纯净水，随后出现手脚麻木等症状，被送往校医务室。医生初步诊断为“低钠血症”。下列叙述错误的是(      ) A.正常情况下，抗利尿激素在此过程中持续升高，促进肾小管对水重吸收 B.大量出汗导致无机盐丢失，只补水不补盐，会破坏内环境渗透压稳定 C.该同学出现的症状是细胞外液渗透压下降，使细胞吸水膨胀导致的 D.人体维持内环境稳态的能力有限，外界环境剧烈变化可能导致稳态失调 12．如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列相关叙述错误的是(      ) A.图1中的溶液a和图2中的溶液b的成分不同，溶液b是2mol·L-1的NaCl溶液 B.图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而某些蛋白质等杂质不溶于酒精 C.图2所示实验的结果是试管1不变蓝，试管2变蓝色 D.图2所示实验中设置试管1的目的是作为对照实验 13．有氧呼吸第三阶段的过程如图1所示，NADH在酶的催化作用下释放电子，电子被线粒体内膜上的复合物Ⅰ~Ⅲ传递给O2生成H2O，同时复合物利用电子给予的能量将H+泵出，构建膜两侧H+浓度梯度，ATP合成酶利用H+浓度梯度推动ATP合成，H+浓度梯度过高会抑制电子传递。x、y、z为三种物质，将三者依次加入含线粒体的离体缓冲液中会出现图2所示变化，下列叙述正确的是(      ) A.若x为ADP，y可能是葡萄糖 B.若x为NADH，y可能是ADP C.z可能是ATP合成酶抑制剂 D.z可能是复合物Ⅲ抑制剂 14．柑橘果醋的发酵工艺主要分为一次发酵法和二次发酵法两种，其中二次发酵法的发酵工艺过程如下图所示。下列说法正确的是(      ) A.酒精发酵转为醋酸发酵时，需要适当降低发酵温度并通入无菌空气 B.若醋酸菌以酒精发酵的产物作为主要碳源，其发酵过程会产生大量气泡 C.消毒过程可以杀死果醋中的大多数微生物，延长它的保存期 D.醋酸菌吸收的氧气除了参与醋酸发酵外，还在线粒体中参与有氧呼吸 15．近日，中科院团队在侵入式脑机接口临床试验取得重大突破，一位仅头颈可活动的患者，能依靠意念操控电脑、平板等设备。研究发现，患者用意念操控设备时，大脑运动皮层神经元动作电位频率明显升高，突触间隙内谷氨酸(兴奋型递质)含量也随之增加。下列叙述错误的是(      ) A.增加刺激强度，不会改变神经元动作电位的峰值 B.血浆中Na+浓度降低，会使神经元动作电位峰值下降 C.血浆中K+浓度降低，静息电位绝对值减小削弱信号传递 D.谷氨酸含量升高，提升神经元兴奋频率增强信号传递 16．下图是单克隆抗体的制备流程，其中①②③表示细胞。下列叙述正确的是(      ) A.可用胃蛋白酶处理脾脏组织获得B淋巴细胞悬液 B.①中的细胞在培养时均会出现接触抑制现象 C.②中细胞都具有无限增殖和产生所需抗体的能力 D.③可注射到小鼠腹腔后从腹水中提取单克隆抗体 二、非选择题：本题共4小题，共52分。 17．（12分）种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 (1)Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的必备元件为____________。选用图甲中的SmaⅠ对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaⅠ和______(“XbaⅠ”、“BamHⅠ”、“PstⅠ”)对Ti质粒进行完全酶切，将产生的5’端突出的黏性末端补平，补平时使用的酶是________________________。 (2)利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶SmaⅠ和____________进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为______bp，则一定为正向重组质粒。 (3)需首先将经酶切后的图乙的片段自身____________，才能利用引物P1和P2反向PCR成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为______(填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”)。 (4)通过农杆菌转化法将构建的含有野生型基因的表达载体转入突变植株，如果检测到野生型基因，______(填“能”或“不能”)确定该植株的表型为野生型，理由是____________________________________________________________。 18．（12分）拟南芥（2n=10）是雌雄同花、自花授粉植物，自然状态下多为纯合子。研究人员通过诱变获得两种稳定遗传的突变体：突变体甲叶片呈黄绿色、突变体乙为窄叶、野生型丙为深绿色宽叶。为探究叶色与叶形的遗传规律，将突变体甲、乙分别与野生型丙进行杂交实验，结果如下： 杂交实验 亲本 F1表型 F2表型及数量（株） 一 甲×丙 深绿色 深绿色（346）、黄绿色（110） 二 乙×丙 宽叶 宽叶（513）、窄叶（167） (1)杂交实验中，需要对母本进行________________________处理。根据杂交结果推测，黄绿叶是________________________性状，叶色的遗传遵循________________________定律。若杂交组合二F2中的所有宽叶个体自交，则后代宽叶中纯合子的概率为________________________。 (2)为确定控制叶色基因所在的染色体，研究人员利用分子标记（SSLP）进行基因定位。SSLP是分布于各染色体上的DNA序列，不同染色体具有各自的特异SSLP。SSLP1和SSLP2分别位于拟南芥的5号和2号染色体。在甲和丙中SSLP1和SSLP2的长度均不同。对杂交组合一中的甲、丙和F2黄绿色植株的SSLP1和SSLP2分别进行扩增，电泳检测结果如图所示。推测控制叶色的基因位于________________________染色体，判断依据是________________________。 F2中黄绿色植株 (3)进一步对叶色相关基因（A/a）进行测序并比对，基因编码链的部分比对结果如图所示。由此推测，A基因突变为a基因是碱基对________________________的结果，转录形成的mRNA中对应密码子变为________________________，进而导致色氨酸合成酶中________________________序列发生改变，叶绿素合成不足，叶片表现为黄绿色。 A基因5'-AAGAGGATTATTGCTGAGACAGGAGCGGGTCAACATGGTGTGGCTACAGCTACT-3' a基因5'-AAGAGGATTATTGCTGAGACAGGAACGGGTCAACATGGTGTGGCTACAGCTACT-3' (4)已知控制叶形的基因在1号染色体上，想要利用亲本甲、乙、丙，快速获得黄绿色窄叶植株，最简便的育种流程是________________________。 19．（14分）人乳铁蛋白（hLF）具有抗菌、调节免疫等多种生物学功能，β-乳球蛋白（BLG）是羊乳中的主要致敏原。研究人员欲利用sgBLG/Cas9基因编辑技术，在山羊中敲除BLG基因的同时，将hLF基因定点整合到BLG基因位点，以期获得能分泌含hLF且不含BLG的“人源化”羊乳。下图是该技术路线的示意图。回答下列问题： 注：sgBLG为一段RNA序列，其能准确识别图中山羊DNA特定序列，并引导Cas9蛋白对DNA切割。 (1)Cas9蛋白与限制酶在功能上的差别是______________________图中sgBLG/Cas9复合物1所识别的DNA序列为5'-TATACTGGC-3'，则该复合物中sgBLG的序列为：5'________3'。 (2)利用PCR技术对山羊hLF基因进行获取和扩增时，通常设置不加入hLF基因的对照组，其目的是检测PCR体系是否被________________污染，避免出现假阳性结果。为确保hLF基因能在山羊乳腺细胞中特异性表达，在构建表达载体时，需在hLF基因的上游添加________________________。 (3)过程①中，用于核移植的受体细胞通常应处于________________期；核移植后，需用物理或化学方法激活重构胚，其目的是________________________________。 20．（14分）平沙绿僵菌是一种昆虫病原真菌，通过分生孢子侵染蚊子，对蚊子致死率高，但引诱能力弱。利用松树长叶烯合酶基因(Tps)改造平沙绿僵菌，增强其引诱能力，据此研发“诱杀一体”的灭蚊剂。结合基因工程基本操作程序回答下列问题。 注：质粒中限制酶切割位点间碱基对长度可忽略不计；kb：千碱基对。 (1)为提高Tps基因在平沙绿僵菌中的表达效率，重新设计了长叶烯合酶编码序列，该序列与天然基因序列存在差异，但编码的氨基酸序列不变，这种获取该目的基因的方法是__________。据图中信息，用限制酶EcoRV切割pPK2质粒，然后与Tps基因连接，用______(填“E。coli”或“T4”)DNA连接酶可获得更高的连接效率。 (2)为鉴定重组质粒是否正确连接，利用限制酶切割并电泳检测，下列限制酶组合和片段大小，属于正确连接的是________________和________________。 A.BamHI/EcoRI、0.7kb+6.1kb B.BamHI/EcoRI、1.1kb+5.7kb C.HindIII/EcoRI、0.7kb+6.1kb D.HindIII/EcoRI、1.1kb+5.7kb (3)农杆菌转化后，重组质粒上的T-DNA会转移并整合到平沙绿僵菌的____________上。 (4)为筛选工程化平沙绿僵菌，用PCR技术进行鉴定。Tps基因的转录模板链部分序列为：5′-ATGTCGTTCC…AATTGGCTCC-3′，下列引物对可用于扩增该片段的是____________。 A.5′-ATGTC…-3′、5′-CCTCG…-3′ B.5′-ATGTC…-3′、5′-GGAGC…-3' C.5′-TACAG…-3′、5′-CCTCG…-3′ D.5′-TACAG…-3′、5′-GGAGC…-3′ (5)研究人员比较了等量平沙绿僵菌和工程菌培养物对蚊子的诱杀效果，如下表。 相关指标培养物 访问次数(次/小时) 停留时间(分钟/小时) 2小时感染率(%) LT50(天) 第7天死亡率(%) 平沙绿僵菌 0.9 1.1 100 5.84 62.4 工程菌 2.4 5.9 100 4.04 84.3 注：感染率：感染孢子的蚊子比例；LT50(半数致死时间)：导致50%蚊子死亡所需的平均时间。已知孢子附着量决定蚊子死亡速度，结合表中数据解释工程菌培养物使蚊子的LT50缩短且第7天死亡率更高的原因是__________________。 第 1 页 共 5 页 学科网（北京）股份有限公司 $ 答 案 1．答案：B 解析：A、细胞中的糖类并非都能为生命活动供能，如纤维素是植物细胞壁的组成成分，核糖、脱氧核糖是核酸的组成成分，均不能提供能量，A错误； B、活细胞中含量最多的化合物是水，题干中糖占干重50%-70%是去除水分后的干重比例，不影响鲜重状态下水的含量最高，B正确； C、杨梅属于新鲜水果，干燥条件下保存会导致其大量失水失去食用价值，应在低温、适宜湿度、低氧条件下保存，C错误； D、胆固醇是动物细胞膜特有的脂质成分，杨梅是植物，其细胞膜不含胆固醇，D错误。 2．答案：B 解析：原核细胞和真核细胞最核心的区别是：原核细胞没有核膜包被的细胞核，也没有染色体、线粒体、叶绿体这类结构复杂的具膜细胞器，仅含有核糖体这一种细胞器，因此真核细胞和原核细胞共有的是核糖体，B正确，ACD错误。 3．答案：C 解析：A、绝大多数酶的化学本质是蛋白质，蛋白酶属于蛋白质类酶，因此生姜蛋白酶的化学本质是蛋白质，A正确； B.蛋白质变性的实质是蛋白质的空间结构被破坏，因此酪蛋白变性后空间结构发生改变，B正确； C.由题干“40℃时牛奶凝固最佳”可知，该温度下生姜蛋白酶对酪蛋白的催化效率最高，即酶活性最高，而非最低，C错误； D.本实验的目的是探究温度对生姜蛋白酶活性的影响，自变量是实验中人为改变的变量，因此本实验的自变量为温度，D正确。 4．答案：C 解析：3.A、所有细胞的边界均为细胞膜，酵母菌的细胞壁具有全透性，无法控制物质进出，不能作为细胞边界，A正确； B.酵母菌是真核生物，由细胞膜、细胞器膜和核膜共同构成生物膜系统，B正确； C.酵母菌属于细胞生物，细胞生物的遗传物质就是DNA，“遗传物质主要是DNA”是对整个生物界的表述，不适用描述单一细胞生物的遗传物质，C错误； D.酵母菌有氧呼吸第二阶段在线粒体基质产生CO2，无氧呼吸在细胞质基质产生CO2，二者产生CO2的场所不同，D正确。 5．答案：A 解析：①过氧化氢本身受热易分解，温度升高会加快其自身分解速率，干扰酶活性的测定，不能用于探究酶的最适温度，①错误； ②淀粉和蔗糖均为非还原糖，淀粉酶只能催化淀粉水解为还原糖，还原糖可与斐林试剂水浴加热产生砖红色沉淀，蔗糖不被水解则无该现象，可用斐林试剂检测验证酶的专一性，②正确； ③蛋白酶本质为蛋白质，可与双缩脲试剂发生紫色反应，无论底物是否被分解，都会出现显色反应，无法检测实验结果，③错误； ④探究pH对酶活性的影响时，需先将酶和底物分别调至设定pH后再混合，若先混合再放缓冲液，未达到目标pH时酶已发生反应，会干扰实验结果，④错误； ⑤斐林试剂检测还原糖需要水浴加热，会改变实验的自变量（温度），影响实验结果，不能作为该实验的检测试剂，⑤错误； ⑥酶的高效性是指酶的催化效率远高于无机催化剂，需将加酶组与加无机催化剂组对比，常温常压组为空白对照，只能验证酶有催化作用，不能验证高效性，⑥错误。 综上，②正确，A正确，BCD错误。 6．答案：A 解析：A.质壁分离发生的基础是原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性，因此细胞壁的伸缩性更小，A错误； B.乙图是质壁分离状态的细胞，和甲图相比细胞失去了更多水分，细胞液中溶质不变、溶剂减少，因此细胞液浓度更高，B正确； C.植物细胞的细胞壁具有支撑和保护作用，有一定的延展性上限，细胞吸水膨胀到细胞壁的限制程度后体积就不会再持续增大，C正确； D.根尖分生区细胞是未成熟的植物细胞，没有中央大液泡，不满足质壁分离的发生条件，因此质壁分离现象不明显，D正确。 7．答案：C 解析：A.碳酸氢盐的作用是为植物提供C18O2，A正确； B.180没有放射性，为稳定同位素，放射性同位素和稳定性同位素都能示踪物质的运行和变化规律，B正确； C.光合作用产生氧气的过程为光合作用的光反应，光反应发生在叶绿体类囊体的薄膜上，C错误； D.光合作用释放的氧气中180的比率一直与水中180比率接近，而未受碳酸氢盐中180比率多少的影响，说明氧气中的氧原子来自水，D正确。 故选C。 8．答案：D 解析：A、生殖颗粒含蛋白质和RNA，蛋白质的组成元素包含N，RNA的组成元素为C、H、O、N、P，因此生殖颗粒的组成元素中有N和P等，A正确； B.蛋白质通过转录和翻译过程合成，需要mRNA作为翻译的模板、tRNA转运氨基酸、rRNA构成翻译的场所核糖体，因此合成蛋白质需要RNA参与，B正确； C.核糖体的组成成分为蛋白质和rRNA，与生殖颗粒“蛋白质+RNA”的组成类似，因此生殖颗粒的组成可能与核糖体类似，C正确； D.核孔是具有选择透过性的结构，物质不能自由进出细胞核，生殖颗粒中的RNA不可通过核孔自由进出细胞核，D错误。 9．答案：B 解析：我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。为了维护消费者对转基因产品的知情权和选择权，又最大限度地保证了转基因技术和已经上市的转基因产品的安全性，我国制定了一系列相关的法律法规，如《农业转基因生物标识管理办法》规定，转基因农产品的直接加工品，要标注“转基因××加工品（制成品）”或者“加工原料为转基因××”。B符合题意，ACD不符合题意。 故选B。 10．答案：C 解析：A.植物组织培养中，已分化的外植体脱去原有分化状态，形成无定形、疏松愈伤组织的过程，为脱分化，A正确； B.蔗糖是植物细胞悬浮培养的主要碳源和能源物质。培养12d后，培养液中蔗糖大量消耗，营养供应不足，导致细胞干重下降，B正确； C.植物细胞产物工厂化生产的核心原理是通过悬浮培养增加细胞总数量，依靠细胞数量优势提高次生代谢产物总产量，而不是提升单个细胞内次生代谢产物的含量，C错误； D.悬浮培养过程中，细胞持续代谢会产生大量废物，同时营养物质不断消耗。定期更换液体培养基，可补充营养、清除代谢废物，防止废物积累毒害细胞，D正确。 11．答案：A 解析：A、整个过程激素分泌分阶段变化：赛前大量饮水，细胞外液渗透压下降，抗利尿激素分泌减少；比赛大量出汗，渗透压升高，抗利尿激素分泌上升；赛后大量喝纯净水，渗透压再次下降，抗利尿激素分泌再度降低，并非全程持续升高，A错误； B、大量出汗同时流失水分与钠离子等无机盐，仅补充纯净水不补充盐分，细胞外液溶质减少，渗透压持续降低，破坏内环境渗透压稳态，B正确； C、低钠血症时细胞外液渗透压低于细胞内液，水分子顺渗透压差大量进入细胞，细胞吸水膨胀，引发手脚麻木等神经异常症状，C正确； D、人体调节内环境稳态的调节能力存在限度，短时间大量失水、大量补水等剧烈外界变化会超出调节限度，引发稳态失衡，D正确。 故选A。 12．答案：B 解析：A、图1操作：预冷95%酒精析出DNA，丝状物为粗提DNA；溶液a为溶解DNA的高浓度NaCl（2mol/L）；图2鉴定DNA，溶液b为稀释DNA的低浓度NaCl（0.14mol/L），二者成分浓度不同，A正确； B、DNA不溶于体积分数95%冷酒精，蛋白质等杂质可溶于酒精，利用该原理析出DNA丝状物，选项表述“DNA能溶于酒精”完全相反，B错误； C、试管1仅含NaCl溶液无DNA，加二苯胺沸水浴不变蓝；试管2含DNA，沸水浴与二苯胺试剂反应呈现蓝色，C正确； D、试管1空白对照，排除NaCl、试剂等无关变量对显色结果的干扰，D正确。 故选B。 13．答案：B 解析：A、线粒体不能直接利用葡萄糖；若缓冲液中无丙酮酸/NADH等底物，仅加ADP无法启动电子传递，耗氧与ATP应保持低水平。加入葡萄糖仍无效，无法解释y加入后双指标上升，A错误； B、加入NADH启动电子传递，但因ADP不足，ATP合成受阻→H+梯度升高→抑制电子传递(耗氧低)。加入ADP后，ATP合成恢复→H+梯度下降→电子传递加速→耗氧与ATP均上升。符合图2趋势，B正确； C、若z抑制ATP合成酶，则H+无法回流→梯度升高→抑制电子传递→耗氧量应下降。但图2中z加入后耗氧继续上升，C错误； D、复合物Ⅲ被抑制→电子传递中断→O2无法还原→耗氧量应骤降。与图2中耗氧持续上升不符，D错误。 14．答案：C 解析：A、酵母菌无氧条件下进行酒精发酵，发酵温度18～30℃；醋酸菌代谢类型是异养需氧型，发酵温度30～35℃，因此酒精发酵转为醋酸发酵时，需要适当提高发酵温度并通入无菌空气，A错误； B、当醋酸菌以酒精发酵的产物(乙醇)作为主要碳源，其发酵过程无CO2产生，不会产生大量气泡，B错误； C、消毒过程可以杀死果醋中的大多数微生物，延长它的保存期，C正确； D、醋酸菌为原核生物，不含线粒体，D错误。 故选C。 15．答案：C 解析：A、只要刺激强度达到阈值，再增加刺激强度也不会改变动作电位的峰值，A正确； B、动作电位的形成是Na+顺浓度梯度内流的结果，血浆中Na+浓度降低会使细胞膜内外Na+浓度差减小，Na+内流量减少，动作电位峰值下降，B正确； C、静息电位的形成是K+顺浓度梯度外流的结果，血浆中K+浓度降低会使细胞膜内外K+浓度差增大，K+外流量增加，静息电位绝对值增大，C错误； D、谷氨酸是兴奋型神经递质，突触间隙中谷氨酸含量升高，会提升突触后神经元兴奋的频率，进而增强信号传递，D正确。 16．答案：D 解析：A、可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理脾脏组织获得B淋巴细胞悬液，胃蛋白酶的最适pH为酸性，在动物细胞生活的中性偏碱的环境中会失活，无法分散组织获得B淋巴细胞悬液，A错误； B、①为诱导融合后得到的混合细胞，其中包含的未融合骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞均可无限增殖，培养时不会出现接触抑制现象，即①中细胞不都会出现接触抑制，B错误； C、②是经选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞，具备无限增殖的能力，但部分杂交瘤细胞不能产生特异性抗体，还需后续抗体检测筛选，因此并非②中所有细胞都能产生所需抗体，C错误； D、③是经抗体检测筛选出的既能无限增殖又能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞，可将其注射到小鼠腹腔内增殖，之后从腹水中提取单克隆抗体，D正确。 17．答案：(1)复制原点/复制起点；XbaI；DNA聚合酶 (2)SpeI；550bp (3)环化；测序和序列比对 (4)不能；该基因可能无法正常表达 解析：(1)DNA复制的起点是复制原点，因此Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的必备元件为复制原点。根据SmaI限制酶识别序列可知，酶切形成的是平末端，若质粒仅用SmaI酶切，抗除草剂基因和质粒可以正向接入也可以反向接入，且无法区分，为了确定是否是正向重组质粒，因此在构建重组质粒时需要用到另一种限制酶，抗除草剂基因需要插入到启动子和终止子之间，因此不能选择BamHI，因为该限制酶会破坏终止子，因此可选择XbaI和SmaI进行酶切，XbaI酶切会形成黏性末端，需要用DNA聚合酶聚合脱氧核糖核苷酸单体将产生的黏性末端补平(可使重组质粒最小，同时PstI酶切后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶抹平，因为DNA聚合酶只能从3'延伸子链)。 (2)利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌。重组的T-DNA片段上含有一个SmaI酶切位点和一个SpeI酶切位点，可以选择用SmaI和SpeI进行酶切，转录的方向是从模板的3'→5'，和质粒对应的方向相同，经过两种酶的酶切后并电泳呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为550bp，若反向接，较短的条带长度近似为200bp。 (3)由于引物是根据已知序列设计的，但此时需要扩增未知序列，因此可以将图乙的片段环化，这样就可以利用现有引物扩增出未知序列。为了确定未知序列是否是同一基因，需要准确比对其上的碱基序列，因此对同一个基因的操作为测序和序列比对。 (4)突变植株成功导入野生型基因，但该基因可能无法正常表达，因此不能确定该植株的表型为野生型。 18．答案：(1)去雄；隐；分离；3/5 (2)5号；所有F2黄绿色植株的SSLP1扩增产物条带均与甲的SSLP1条带一致，而SSLP2扩增产物条带既有与甲一致的，也有与丙一致的 (3)替换；ACG；氨基酸 (4)选出甲和乙杂交得到F1，F1自交得到F2，从F2中选出黄绿色窄叶植株即可 解析：（1）拟南芥是雌雄同花、自花授粉植物，杂交实验中，需要对母本进行去雄处理。根据实验一：F1全为深绿色，F2深绿色：黄绿色≈3:1，说明黄绿叶是隐性性状，叶色的遗传遵循分离定律。实验二中宽叶为显性，若宽叶和窄叶这对相对性状由等位基因B/b控制，F2宽叶中基因型为BB:Bb=1:2，自交后代中，宽叶纯合子BB占1/3+2/3×1/4=1/2，总宽叶占1/3+2/3×3/4=5/6，因此宽叶中纯合子概率为1/2÷5/6=3/5。 （2）SSLP1位于5号染色体，SSLP2位于2号染色体，F2黄绿色为隐性纯合，两个隐性基因均来自突变体甲；从电泳结果可知，所有F2黄绿色植株的SSLP1扩增产物条带均与甲的SSLP1条带一致，而SSLP2扩增产物条带既有与甲一致的，也有与丙一致的，因此控制叶色的基因位于5号染色体。 （3）对比A和a基因的编码链，仅发生1个碱基的替换（G→A），因此该突变是碱基对替换的结果。编码链的序列与mRNA序列一致（仅T换为U），突变后编码链对应位点为ACG，因此mRNA密码子变为ACG，密码子改变会导致合成的蛋白质氨基酸序列改变，使酶功能异常。 （4）黄绿色、窄叶均为隐性性状，要获得稳定遗传的黄绿色窄叶，最简便的方法是杂交育种：选出甲和乙杂交得到F1，F1自交得到F2，从F2中选出黄绿色窄叶植株即可。 19．答案：(1)限制酶可自主识别特定DNA序列并切割，而Cas9蛋白不能自主识别特定DNA序列；GCCAGUAUA (2)外源DNA；山羊乳腺蛋白基因的启动子 (3)减数分裂Ⅱ中；使重构胚完成细胞分裂和发育 解析：（1）从功能上看，限制酶可自主识别特定DNA序列并切割，而Cas9蛋白不能自主识别特定DNA序列，需要sgBLG引导才能切割特定DNA序列。根据碱基互补配对原则以及核酸链的结构特点分析，若已知sgBLG/Cas9复合物1所识别的DNA序列为5'-TATACTGGC-3'，则复合物中sgBLG的序列为3′-AUAUGACCG-5′，即5′-GCCAGUAUA-3′。 （2）由“假阳性”是指细胞实际上不含待检测基因，但在一些干扰因素作用下，检测结果显示这种基因存在，所以在利用PCR技术对山羊hLF基因进行获取和扩增时，通常需要设置一个不加入hLF基因的对照组，以便检测PCR体系是否被外源DNA污染，避免出现假阳性结果。由于实验目的是让hLF基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，所以构建基因表达载体时，需要在hLF基因的上游添加山羊乳腺蛋白基因的启动子，保证其既能在山羊乳腺细胞中特异性表达，又不会在其他细胞中表达。 （3）一般来说，在动物细胞核移植过程中，需选择处于减数分裂Ⅱ中期的细胞作为受体细胞进行核移植。核移植后，激活重构胚的目的是使重构胚完成细胞分裂和发育进程。 20．答案：(1)人工合成法；T4 (2)A；D (3)染色体DNA (4)B (5)工程菌的引诱能力更强，蚊子访问次数更多、停留时间更长，附着的孢子量更多，而孢子附着量决定蚊子死亡速度，因此致死速度更快。 解析：(1)已知目的基因编码的氨基酸序列不变，仅优化碱基序列，通过化学方法人工合成DNA片段，该方法为人工合成法；EcoRV切割产生平末端，平末端连接效率低，T4DNA连接酶可同时催化平末端、黏性末端连接，E.coliDNA连接酶仅能连接黏性末端，因此选用T4DNA连接酶提升重组质粒构建效率。 (2)质粒原始长度5.0kb，Tps基因总长0.7+1.1=1.8kb，重组质粒总长度5.0+1.8=6.8kb；BamHI、EcoRI分别切割Tps基因两端，切割重组质粒产生0.7kb、6.1kb两段；HindIII、EcoRI切割重组质粒产生1.1kb、5.7kb两段，对应选项A、D。 (3)农杆菌Ti质粒T-DNA片段的核心功能是转移并整合至受体细胞的染色体DNA上，本题受体为平沙绿僵菌真菌细胞，重组质粒T-DNA整合到真菌染色体DNA，实现目的基因稳定遗传与表达。 (4)PCR引物设计规则：上游引物与模板链5'端序列一致，下游引物与模板链3'端反向互补；模板链序列5'-ATGTCGTTCC…AATTGGCTCC-3'，上游引物5'-ATGTC…-3'，下游引物互补链序列5'-GGAGC…-3'，对应引物对B。 (5)转入Tps基因的工程菌可合成长叶烯，引诱蚊子能力大幅提升，表格数据可见工程菌蚊子访问次数、停留时间远高于野生平沙绿僵菌；蚊子停留时间更长、访问更频繁，体表附着的真菌分生孢子数量显著增多；孢子附着量直接决定蚊子死亡速度，孢子越多，真菌侵染速度越快，半数致死时间LT50缩短，七天内死亡个体数量更多，死亡率更高。 学科网（北京）股份有限公司 $