精品解析：甘肃省庆阳市华池县第一中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

华池一中2025-2026学年度第二学期高二年级期末考试生物学试卷 （考试时间为75分钟） 本试卷分为第Ⅰ卷（选择题）、第Ⅱ卷（非选择题）两部分。试卷满分100分。答卷前，请务必将自己的姓名、考生号、班级、考场号、座位号填写在“答题卡”上，并在规定位置粘贴考试用条形码。答题时，务必将答案涂写在“答题卡”上，答案答在试卷上无效。考试结束后，将本试卷和“答题卡”一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题（本大题共16小题，每小题3分，共48分。每小题给出的四个选项中，只有一个最符合题意） 1. 明代冯时任在《酒中》记载：“每至桑落时，取其寒暄得所，以井水酿酒甚佳”意思是每到桑叶飘落的季节，井水的温度最适宜酿酒，所酿造的酒品质最好。有关桑叶酒的酿制，下列说法错误的是（　　） A. 用密闭容器进行桑叶酒发酵时，需定期放气 B. 采用井水酿制，主要是因井水温度有利于微生物发酵 C. 酿制中期起泡现象是微生物有氧呼吸产生的CO2释放形成的 D. 桑叶酒发酵时，可用重铬酸钾测定酒精含量的变化 【答案】C 【解析】 【分析】果酒制作利用了酵母菌的无氧呼吸，在无氧条件下，酵母菌可以把葡萄糖分解为酒精和二氧化碳。 【详解】A、酿酒时酵母菌无氧呼吸产生CO2，需定期放气，A正确； B、井水温度较高，采用井水酿制，主要是因井水温度有利于微生物发酵，B正确； C、酿制中期起泡现象是微生物无氧呼吸产生的CO2释放形成的，C错误； D、桑叶酒发酵时产生酒精，酸性重铬酸钾遇酒精变成灰绿色，可根据颜色深浅测定酒精含量的变化，D正确。 故选C。 2. 下列关于果酒、泡菜和果醋发酵的叙述，错误的是（　　） A. 制作果醋、泡菜时所用的主要菌种均不具有以核膜为界限的细胞核 B. 果酒、果醋和泡菜发酵中都只利用了微生物的无氧呼吸 C. 果酒发酵的温度比果醋发酵的温度稍低 D. 果酒、果醋和泡菜发酵过程，发酵液的pH均会下降 【答案】B 【解析】 【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃~25℃，pH最好是弱酸性。 2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃~35℃。 3、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。 【详解】A、制作果醋、泡菜时所用的主要菌种分别是醋酸菌和乳酸菌，二者为原核生物，均不具有以核膜为界限的细胞核，A正确； B、果醋制作所需菌种为醋酸菌，醋酸菌呼吸类型为有氧呼吸，因此果醋发酵利用了微生物的有氧呼吸，B错误； C、酒精发酵的最佳温度是在18℃~25℃，果醋发酵的最佳温度是在30℃~35℃，因此果酒发酵的温度比果醋发酵的温度稍低，C正确； D、果醋制作过程中会产生醋酸，发酵液pH逐渐降低；果酒制作过程中产生二氧化碳，发酵液pH也逐渐降低；泡菜制作过程中会产生乳酸，发酵液pH逐渐降低，D正确。 故选B。 3. 在实验室进行微生物的培养过程中，无菌技术发挥了重要的作用。下列关于无菌技术的说法，正确的是（ ） A. 配制培养基、倒平板、接种都需要在酒精灯火焰旁进行 B. 配制好选择培养基后将其分装到培养皿中，再进行湿热灭菌 C. 煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 D. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可加强对超净工作台的消毒效果 【答案】D 【解析】 【分析】微生物实验室的培养的关键是无菌操作，无菌操作主要包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 【详解】A、在酒精灯火焰附近进行接种或倒平板，目的是造成一个无菌环境，避免操作过程中受到杂菌的污染，倒平板、接种都需要在酒精灯火焰旁进行，而配制培养基无需，因为配制完成之后还需要利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，A错误； B、配制好选择培养基后先进行湿热灭菌，再将其分装到培养皿中，B错误； C、煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢、孢子，C错误； D、可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可加强对超净工作台的消毒效果，D正确。 故选D。 4. 下列与土壤中尿素分解菌的分离与计数相关的叙述，正确的是（ ） A. 尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH下降 B. 对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平板划线法进行接种 C. 统计尿素分解菌的数目时应该选择菌落数多的培养基进行计数 D. 可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染 【答案】D 【解析】 【分析】1、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 ２、统计菌落数目的方法： （1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。 （2）间接计数法（活菌计数法） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】A、尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH上升，A错误； B、对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用吸水涂布平板法和显微镜计数法，平板划线法不能用于菌落计数，B错误； C、统计尿素分解菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，C错误； D、可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染，D正确。 故选D。 【点睛】 5. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，下列有关啤酒工业化生产流程说法错误的是（ ） A. 焙烤过程加热会杀死种子但不使淀粉酶失活 B. 酵母菌的繁殖和代谢物的生成都在后发酵阶段完成 C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酵母菌体本身 D. 发酵的温度和时间不同会影响啤酒的口味 【答案】B 【解析】 【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，A正确； B、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，B错误； C、发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酵母菌体本身，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，C正确； D、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，D正确。 故选B。 6. 下图为细胞工程的示意图，相关说法错误的是（　　） A. 若C为受精卵，它将在卵巢内进行卵裂。胚胎发育早期，胚胎总体积不变，细胞数目增多 B. 若A、B分别为来自优质奶牛的卵母细胞和精子，则A细胞需在体外培养至MⅡ期才能受精 C. 若A、B为动物细胞，诱导它们融合形成C可用PEG融合法，该法利用了细胞膜具有流动性 D. 若A、B为植物原生质体，诱导它们融合形成C的方法可用高Ca2+—高PH融合法、离心法 【答案】A 【解析】 【分析】诱导植物原生质体融合，采用的方法一般包括物理法（离心法、电融合法）、化学法（聚乙二醇融合法、高 Ca²⁺—高pH等）；诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法。 【详解】A、若 C 为受精卵，哺乳动物的受精卵通常在输卵管内进行卵裂（而非卵巢内）。胚胎发育早期（卵裂期），细胞通过有丝分裂增殖，细胞数目增多，但胚胎总体积基本不变或略有缩小，A错误； B、动物体细胞核移植或体外受精中，卵母细胞需在体外培养至 MⅡ 期（减数第二次分裂中期） 才具备受精能力或核移植受体的条件，B正确； C、动物细胞融合的方法包括 PEG 融合法（聚乙二醇融合法）、电融合法、灭活病毒诱导法等。PEG 融合法的原理是利用 PEG 破坏细胞膜表面张力，使细胞膜发生融合，依赖细胞膜的流动性，C正确； D、植物原生质体融合的物理方法包括离心法、振动法、电融合法；化学方法包括高 Ca²⁺— 高 pH 融合法、PEG 融合法等，D正确。 故选A。 7. 胚胎工程技术为现代畜牧业提供了快速繁育优良品种的途径。下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精时，需将获能处理的精子与MI期的卵母细胞进行受精 B. 高等动物早期胚胎发育顺序为受精卵→囊胚→桑葚胚→原肠胚 C. 早期胚胎发育的卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加 D. 进行胚胎分割时，可选择发育正常的桑葚胚并将其内细胞团均等分割 【答案】C 【解析】 【详解】A、体外受精时，需要将获能处理的精子与处于MⅡ期的卵母细胞进行受精，A错误； B、高等动物早期胚胎发育的顺序为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚，B错误； C、早期胚胎发育的卵裂期，细胞会进行有丝分裂，细胞数量增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略有缩小，C正确； D、进行胚胎分割时，应选择发育正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚进行分割时需要将内细胞团均等分割，而桑葚胚没有内细胞团，D错误。 8. 白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为 20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本， 经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。下列说法正确的是（　　） A. 白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在生殖隔离 B. “白菜—甘蓝”杂种幼苗的染色体可用甲基绿染色 C. 人工诱导产生四倍体“白菜—甘蓝”，这种变异属于基因突变 D. 雌蕊离体培养获得“白菜—甘蓝”杂种幼苗不能说明植物细胞具有全能性 【答案】A 【解析】 【分析】如果通过直接有性杂交产生白菜-甘蓝，体细胞染色体数目为19，属于异源二倍体，由于异源二倍体没有同源染色体，通过减数分裂产生有效配子的可能性很小，所以一般是不育的，但也可能产生有效配子，所以偶尔会出现可育的现象．偶尔会出现可育现象的另一个原因是，异源二倍体可能某种原因出现染色体自然加倍，成为异源四倍体。 【详解】A、白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在生殖隔离，A正确； B、染色染染色体用碱性染料，如龙胆紫，B错误； C、可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”，这种变异属于染色体变异，C错误； D、将雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性，D错误。 故选A。 【点睛】 9. 某病毒S蛋白含有多种抗原决定簇。科研人员利用该病毒康复者血清中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得了能分泌抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞，用于制备抗S蛋白的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ） A. 康复者血清中的B淋巴细胞在体外培养条件下不能大量增殖 B. 可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 体外培养杂交瘤细胞时通入5%CO2的主要作用是维持培养液pH D. 经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体 【答案】D 【解析】 【详解】A、康复者血清中的B淋巴细胞是已高度分化的细胞，不具备分裂能力，无法在体外长期增殖，A正确； B、灭活病毒是诱导动物细胞融合的常用方法，适用于B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，B正确； C、动物细胞培养时，5%CO₂的作用是维持培养液的pH（通过碳酸氢盐缓冲系统），C正确； D、选择培养基筛选出的杂交瘤细胞是包含多种类型的杂交瘤细胞，需进一步通过抗体检测和克隆化培养才能获得单一细胞株，D错误。 故选D。 10. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述正确的是（　　） A. 愈伤组织细胞分化时可能会发生突变或基因重组 B. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 C. 常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 D. 融合的细胞即为杂交细胞，都能提高人参皂苷的产率 【答案】B 【解析】 【详解】A、愈伤组织细胞分化过程中细胞进行有丝分裂，基因重组仅发生在减数分裂过程中，该过程可能发生突变但不会发生基因重组，A错误； B、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，用纤维素酶和果胶酶处理可去除细胞壁获得原生质体，B正确； C、灭活的仙台病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，不能用于诱导植物原生质体融合，诱导植物原生质体融合可采用PEG融合法、电融合法等，C错误； D、细胞融合后会产生人参-人参融合细胞、胡萝卜-胡萝卜融合细胞、人参-胡萝卜杂交细胞三种类型，需筛选出人参-胡萝卜杂交细胞，才能产生人参皂苷，D错误。 11. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. 每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍 B. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 D. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用 【答案】D 【解析】 【分析】 1、PCR技术是体外快速扩增DNA的技术，每个循环都包括变性、复性和延伸3个步骤。 2、PCR不需要解旋酶，需要耐高温的DNA聚合酶。 【详解】A、PCR过程中，DNA呈指数形式扩增，故每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍，A正确； B、PCR反应过程中需要3个不同的温度范围，变性在90℃以上，复性在50℃左右，延伸在72℃左右，B正确； C、PCR反应过程中包含高温变性，反应过程中加入的酶为耐高温的DNA聚合酶，否则难以扩增DNA，C正确； D、模板DNA能在每一次扩增中重复使用，但引物不能重复使用，D错误。 故选D。 12. 以下关于农杆菌转化法的叙述错误的是（ ） A. 若用Ti质粒作载体，目的基因的插入位置应该在T－DNA片段内 B. 将重组Ti质粒导入农杆菌中时，可以用钙离子处理细菌 C. 农杆菌能将重组Ti质粒转移到被侵染的植物细胞内，并将其整合到染色体上 D. 能在植物细胞中检测到目的基因，还不能说明转化成功 【答案】C 【解析】 【分析】农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。 【详解】A、若用Ti质粒作为载体，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，这样可以保证目的基因随T-DNA整合到受体细胞的染色体DNA上，A正确； B、将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用钙离子处理细菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中的DNA分子的生理状态，B正确； C、农杆菌能将重组Ti质粒中的T-DNA转移到被侵染的植物细胞内，并将其整合到染色体上，C错误； D、目的基因成功导入还不能说明该基因工程项目获得成功，只有转基因植株具有相关的特性才能说明基因工程项目获得成功，D正确。 故选C。 13. 如图表示用限制酶切割质粒和目的基因后，构建的重组质粒（Tetr表示四环素抗性基因），下列叙述正确的是（ ） A. 启动子能驱动目的基因在受体细胞中进行自我复制 B. 切割目的基因和质粒时，一定要用相同限制酶进行处理 C. PCR技术能用于扩增目的基因和检测目的基因是否导入了受体细胞 D. 用含四环素的培养基进行筛选，能生长的一定是含有重组质粒的细胞 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 【详解】A、启动子是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动目的基因的转录，A错误； B、切割目的基因和质粒时，有时也可以用两种不同的限制酶（同尾酶），只要切割后能产生相同的黏性末端即可，B错误； C、基因工程中为获取和扩增目的基因以及检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上，也可采用PCR技术，C正确； D、仅含有质粒的细胞和含有重组质粒的细胞均有四环素抗性基因，在该培养基上均能生长，D错误。 故选C。 14. 下列有关PCR过程的叙述正确的是（ ） A. 变性过程中破坏的是DNA分子内的磷酸二酯键 B. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸等 C. 复性过程中引物与DNA模板链的结合依据碱基互补配对原则完成 D. PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度相同 【答案】C 【解析】 【分析】PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。PCR每个循环包括变性、复性、延伸三个步骤，每一次循环后目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增。 【详解】A、DNA变性过程中破坏的是DNA分子内的氢键，A错误； B、延伸过程中需要耐高温的DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸等，B错误； C、复性过程中，引物按照碱基互补配对原则与DNA模板链结合，C正确； D、PCR与细胞内DNA复制时所需要酶的最适温度不同，D错误。 故选C。 15. 限制性内切核酸酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键断开，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，会断开的化学键是（　　） A. 碱基G与A之间的化学键 B. 碱基G与脱氧核糖之间的化学键 C. 碱基T与A之间的化学键 D. 磷酸与脱氧核糖之间的化学键 【答案】D 【解析】 【分析】限制性内切酶是基因工程中常用的工具酶，被称为切割DNA的分子手术刀，它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的化学键断开，从而使其露出黏性末端或平末端。 【详解】一种能对GAATTC专一识别的限制酶，它能打断鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸之间的化学键，而一条链中相邻两个核苷酸之间是磷酸基团与脱氧核糖之间形成的化学键，即磷酸二酯键，ABC错误，D正确。 故选D。 16. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、毒品类、病毒类和生化毒剂类等 B. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 C. 我国政府禁止生殖性克隆人的实验，同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题 D. 反对设计试管婴儿的原因之一是可能会有人滥用此技术选择婴儿的性别 【答案】A 【解析】 【分析】生物技术安全性问题包括食物安全、生物安全、环境安全三个方面；伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议。 【详解】A、生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标，以达到战争目的一类武器，毒品不属于生物武器的类型，A错误； B、严格选择转基因植物的目的基因，可避免产生对人类有害的物质，减少人们对转基因食物安全的担忧，B正确； C、我国政府禁止生殖性克隆人，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，C正确； D、试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，D正确。 故选A。 第Ⅱ卷 二、非选择题（本大题共5小题，共52分。） 17. 某研究小组欲制作桑葚果酒和果醋，基本流程如下图所示。回答下列问题： （1）制作桑葚果酒和果醋的菌种分别是______，二者在代谢类型上的主要区别是______。 （2）冲洗桑葚时，不能反复冲洗的原因是______，桑葚果酒经发酵而得，呈现宝石红色，其中红色素存在于桑葚果实细胞的______（细胞器）中。若要提高桑葚果酒的产量，应严格控制的条件有______。 （3）进行酒精发酵时，桑葚汁不能装满发酵装置的原因是______。酒精发酵完成后，可用______（填试剂名称）检测酒精。进一步发酵制作果醋，鉴定桑葚果醋的方法，除了尝、闻之外，还可以通过观察菌膜和检测比较______。 【答案】（1） ①. 酵母菌、醋酸菌 ②. 前者是异养兼性厌氧型，后者是异养需氧型 （2） ①. 酒精发酵的菌种分布于桑葚的表面 ②. 液泡 ③. 适宜的温度、通气量等 （3） ①. 发酵装置中的空气（或O2）为酵母菌的有氧呼吸提供原料，有助于其大量繁殖，且防止发酵过程中发酵液溢出 ②. （酸性）重铬酸钾溶液 ③. 发酵前、后的pH 【解析】 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。 【小问1详解】 制作桑葚果酒和果醋的菌种分别是酵母菌、醋酸菌，前者是异养兼性厌氧型，后者是异养需氧型，二者在结构上的区别是，前者为真核生物，后者为原核生物。 【小问2详解】 冲洗桑葚时，不能反复冲洗，这样不会破坏附着在果实中的酵母菌，因为这是果酒发酵的菌种，桑葚果酒经发酵而得，呈现宝石红色，其中红色素存在于桑葚果实细胞的液泡中，即液泡中的色素与花和果实的颜色有关。若要提高桑葚果酒的产量，应严格控制的条件有适宜的温度、通气量等，因为果酒发酵需要无氧环境，且需要18～30℃的温度范围 【小问3详解】 进行酒精发酵时，桑葚汁不能装满发酵装置的原因主要有两点，一是发酵装置中的空气（或O2）为酵母菌的有氧呼吸提供原料，有助于为其大量繁殖提供能量，二是防止发酵过程中发酵液溢出。酒精发酵完成后，可用（酸性）重铬酸钾溶液检测酒精，若呈现灰绿色，说明有酒精存在。进一步发酵制作果醋，鉴定桑葚果醋的方法，除了尝、闻之外，还可以通过观察菌膜和检测比较发酵前、后的pH，因为果醋呈酸性。 18. 2017年11月27日，世界上首例体细胞克隆猴“中中”诞生；12月5日，第二例克隆猴“华华”诞生。我国科学家攻克了与人类相近的灵长类动物猕猴的体细胞克隆的难题。获得克隆猴的流程如图所示，据图回答问题： (1)“中中”“华华”的性状与_____(填“核供体”“卵母细胞供体”或“代孕”)动物的性状基本无关。 (2)欲获得单个雌猕猴体细胞，可用_____酶处理动物组织块。过程①表示去除卵母细胞的细胞核，该过程一般要将卵母细胞培养至_____期再进行，目前常用的去核方法是_____。将卵母细胞作为受体细胞的原因是_________________________(答出两点即可)。 (3)与克隆羊多莉培养成功一样，“中中”和“华华”克隆猕猴的成功证明了__________________。 【答案】 ①. 代孕 ②. 胰蛋白酶或胶原蛋白 ③. 减数第二次分裂中 ④. 显微操作去核法 ⑤. ①此类细胞体积大，易于操作；②可为重组细胞早期发育提供较充足的营养；③卵母细胞的细胞质中存在激发动物体细胞的细胞核全能性表达的物质(答出两点即可) ⑥. 动物已分化体细胞的细胞核具有全能性 【解析】 【分析】 分析图解可知，图示过程为克隆动物的培育过程，图中①表示去除供体细胞的细胞核，A为细胞融合，②为将早期胚胎再移植到代孕个体中。 【详解】（1）“中中”“华华”的核遗传物质在于提供细胞核的供体，细胞质中的遗传物质来源于雌猕猴的体细胞，故其性状与代孕动物的性状基本无关。 （2）欲获得单个雌猕猴体细胞，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块。过程①表示去除卵母细胞的细胞核，该过程般要将卵母细胞培养至减数第二次分裂中期再进行，目前常用的去核方法是显微操作去核法。将卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞体积大，易于操作；可为重组细胞早期发育提供较充足的营养；卵母细胞的细胞质中存在激发动物体细胞的细胞核全能性表达的物质。 （3）与克隆羊多莉培养成功一样，“中中”和“华华”克隆猕猴的成功证明了动物已分化体细胞的细胞核具有全能性。 【点睛】本题考查了胚胎工程的有关知识，要求学生掌握细胞核移植技术的过程，识记选MⅡ期卵母细胞的优点，并结合图示信息准确答题。 19. 育种工作者利用番茄（2N）和马铃薯（4N）进行体细胞杂交，获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄、地下结马铃薯的“超级作物”。 （1）材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用到植物细胞融合和___________________技术，后者的理论基础是_________________________________________。 （2）图中①步骤所示植物细胞用___________________和___________________除去细胞壁。 （3）图中②过程细胞两两融合时，可出现3种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有___________________和___________________两类激素。 （4）由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④___________________和⑤___________________过程。其中⑤过程必须给予光照，其原因是叶绿体能利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。 （5）利用马铃薯和番茄的___________________进行离体培养得到单倍体植株，然后取单倍体植株细胞进行体细胞杂交，再用___________________处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。 【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 植物细胞全能性 （2） ①. 纤维素酶 ②. 果胶酶 （3） ①. 细胞分裂素 ②. 生长素 （4） ①. 脱分化 ②. 再分化 （5） ①. 花药 ②. 秋水仙素 【解析】 【分析】据图示可知：过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体，过程②通过物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融合，过程③是再生细胞壁形成杂种细胞，过程④是脱分化过程形成愈伤组织，过程⑤是再分化生成完整植株。 【小问1详解】 植物体细胞杂交最终得到杂种植株，要应用到原生质体融合技术和植物组织培养技术；其中后者的理论基础是植物细胞全能性。 【小问2详解】 细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此步骤①除去细胞壁时，为分离出有活力的原生质体，利用酶的专一性，即用纤维素酶和果胶酶可以特异性地去除细胞壁。 【小问3详解】 植物组织培养过程中需要使用的激素主要是生长素和细胞分裂素。 【小问4详解】 由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④脱分化和⑤再分化过程。 【小问5详解】 利用马铃薯和番茄的花药离体培养，得到两种植物的单倍体植株，然后取这两种单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，再用秋水仙素处理，也可得到可育的“番茄-马铃薯”杂种植株。 【点睛】本题结合实验流程，考查植物体细胞杂交技术的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。 20. 2019年底，新冠肺炎在我国大面积流行。病原体为一种新型RNA冠状病毒，即2019-nCoV。科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原，拟利用基因工程研制新冠病毒重组蛋白疫苗用于接种预防。图1表示病毒S蛋白的基因，图2表示取自真菌细胞的质粒PcMV及其上部分限制酶切位点，图3表示疫苗制作的简要操作流程。 （1）图3中步骤①所需要的酶和原料是_____。步骤②需要的酶是限制酶和_____。 （2）现在科研人员已经可以根据需要在目的基因两端添加需要的限制酶切割位点序列，但是一般不在目的基因的两端添加同一种酶切位点，原因是防止目的基因（S蛋白基因）自身连接或反向连接在质粒上。若选择两种酶且位点序列添加在S蛋白基因的左右两端（考虑转录的方向）应分别选择_____。 （3）PcMV质粒上氨苄青霉素抗性基因的作用是_____。 （4）为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行_____杂交实验，进行检测。 【答案】（1） ①. 逆转录酶和四种脱氧核苷酸 ②. DNA连接酶 （2）Apa I和Sol I （3）筛选和检测表达载体是否导入受体细胞 （4）抗原-抗体 【解析】 【小问1详解】 据图可知①表示逆转录过程，需要的酶是逆转录酶，原料是四种脱氧核苷酸；步骤②表示构建基因表达载体，需要限制酶（切割目的基因和运载体）和DNA连接酶（连接切割好的目的基因和运载体）。 【小问2详解】 由图1可以看出S蛋白基因上包含EcoR I和Acc I两种限制酶的切割位点，因此不能选择这两种酶切割目的基因和质粒，否则目的基因的完整性将被破坏，不能表达；目的基因两端若添加同一种酶切位点的序列，则会切出相同的粘性末端，易导致目的基因的自身连接也会导致目的基因反向连接在质粒上；限制酶的选择应在启动子和终止子之间，且靠近启动子的位点在前，另外还要考虑不破坏标记基因、复制位点以及保持目的基因的完整性，因此应该选择将Apa I的酶切序列加在目的基因左端，将 Sol I的酶切序列加在目的基因右端。 【小问3详解】 氨苄青霉素抗性基因作为质粒上的标记基因，可用于筛选和检测表达载体是否导入受体细胞。 【小问4详解】 S 蛋白是合成的疫苗，作为抗原发挥作用刺激机体产生抗体和免疫细胞，因此可以采用抗原-抗体杂交技术检测S蛋白是否与新冠病毒表面的S蛋白抗原特性一致，而相应抗体的获取，需要从康复患者的血清中。 21. 下图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程，绿色荧光蛋白基因有820个碱基对（bp），质粒有5369个碱基对（bp）。请据图回答问题： （1）基因工程的核心步骤是_________，该过程需要的基本工具包括：____________。过程①②用相同的两种限制酶切割，与单一酶相比，优势是______________。 （2）过程②目的基因的扩增可通过PCR技术实现，PCR扩增目的基因的原理是：_____________________，进行PCR时除提供DNA母链、4种脱氧核苷酸外，还需要________________（至少填两个）等基本条件。PCR可呈指数形式扩增目的基因，每个循环一般可分为_____________三步。 （3）已知图中质粒经BamHI、HindIII双酶切后进行电泳，若出现一条长度为5150bp的DNA条带，则重组质粒长度为____________的DNA片段条带。 （4）若想获得发绿色荧光的小鼠，可将重组质粒用________法导入小鼠的__________（细胞）中。 （5）若想获得发绿色荧光的植物，最常用___________方法将重组质粒导入植物体细胞。 【答案】（1） ①. 基因表达载体的构建 ②. 限制酶 DNA连接酶 运载体 ③. 可避免目的基因自身环化，使目的基因定向插入运载体中 （2） ①. DNA的半保留复制 ②. 耐高温的DNA聚合酶; 人工合成的引物 ③. 变性 、复性和延伸 （3）5970 （4） ①. 显微注射法 ②. 受精卵 （5）农杆菌转化法 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术或PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术或PCR技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 为保证目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传下去，以及正常表达，需要通过构建基因表达载体，使重组DNA分子上具有启动子、终止子、复制原点、目的基因以及标记基因，因此构建基因表达载体是基因工程的核心步骤；该过程需要使用相同的限制酶切割目的基因与质粒，以产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶使目的基因和质粒通过磷酸二酯键连接为重组DNA分子，因此该过程需要限制酶、DNA连接酶和转运体（载体）；在切割、连接目的基因和质粒时，使用两种酶相较于使用一种酶，使用两种酶具有可避免目的基因自身环化，使目的基因定向插入运载体中的优势。 【小问2详解】 PCR是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术；利用PCR技术扩增DNA时，除需要模板DNA分子、4种脱氧核苷酸、还需要Taq酶和人工合成的引物。扩增时，每个循环一般需要经过“变性、退火、延伸”三个过程。 【小问3详解】 绿色荧光蛋白基因有820个碱基对，质粒有5369个碱基对，质粒经BamHⅠ、HindⅢ酶切后进行电泳，出现了一条长度为5150bp的DNA条带，说明5150bp的DNA条带是原质粒中切去部分片段的质粒，故重组质粒的长度=5150+820=5970kb。 【小问4详解】 因为已分化的动物细胞细胞核具有全能性，因此利用基因工程培养转基因动物个体，需要利用显微注射法将重组质粒导入小鼠的受精卵中。 【小问5详解】 若基因工程中受体细胞为植物细胞，则可用花粉管通道法和农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，其中最常用的方法为农杆菌转化法。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 华池一中2025-2026学年度第二学期高二年级期末考试生物学试卷 （考试时间为75分钟） 本试卷分为第Ⅰ卷（选择题）、第Ⅱ卷（非选择题）两部分。试卷满分100分。答卷前，请务必将自己的姓名、考生号、班级、考场号、座位号填写在“答题卡”上，并在规定位置粘贴考试用条形码。答题时，务必将答案涂写在“答题卡”上，答案答在试卷上无效。考试结束后，将本试卷和“答题卡”一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题（本大题共16小题，每小题3分，共48分。每小题给出的四个选项中，只有一个最符合题意） 1. 明代冯时任在《酒中》记载：“每至桑落时，取其寒暄得所，以井水酿酒甚佳”意思是每到桑叶飘落的季节，井水的温度最适宜酿酒，所酿造的酒品质最好。有关桑叶酒的酿制，下列说法错误的是（　　） A. 用密闭容器进行桑叶酒发酵时，需定期放气 B. 采用井水酿制，主要是因井水温度有利于微生物发酵 C. 酿制中期起泡现象是微生物有氧呼吸产生的CO2释放形成的 D. 桑叶酒发酵时，可用重铬酸钾测定酒精含量的变化 2. 下列关于果酒、泡菜和果醋发酵的叙述，错误的是（　　） A. 制作果醋、泡菜时所用的主要菌种均不具有以核膜为界限的细胞核 B. 果酒、果醋和泡菜发酵中都只利用了微生物的无氧呼吸 C. 果酒发酵的温度比果醋发酵的温度稍低 D. 果酒、果醋和泡菜发酵过程，发酵液的pH均会下降 3. 在实验室进行微生物的培养过程中，无菌技术发挥了重要的作用。下列关于无菌技术的说法，正确的是（ ） A. 配制培养基、倒平板、接种都需要在酒精灯火焰旁进行 B. 配制好选择培养基后将其分装到培养皿中，再进行湿热灭菌 C. 煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 D. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可加强对超净工作台的消毒效果 4. 下列与土壤中尿素分解菌的分离与计数相关的叙述，正确的是（ ） A. 尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH下降 B. 对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平板划线法进行接种 C. 统计尿素分解菌的数目时应该选择菌落数多的培养基进行计数 D. 可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染 5. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，下列有关啤酒工业化生产流程说法错误的是（ ） A. 焙烤过程加热会杀死种子但不使淀粉酶失活 B. 酵母菌的繁殖和代谢物的生成都在后发酵阶段完成 C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酵母菌体本身 D. 发酵的温度和时间不同会影响啤酒的口味 6. 下图为细胞工程的示意图，相关说法错误的是（　　） A. 若C为受精卵，它将在卵巢内进行卵裂。胚胎发育早期，胚胎总体积不变，细胞数目增多 B. 若A、B分别为来自优质奶牛的卵母细胞和精子，则A细胞需在体外培养至MⅡ期才能受精 C. 若A、B为动物细胞，诱导它们融合形成C可用PEG融合法，该法利用了细胞膜具有流动性 D. 若A、B为植物原生质体，诱导它们融合形成C的方法可用高Ca2+—高PH融合法、离心法 7. 胚胎工程技术为现代畜牧业提供了快速繁育优良品种的途径。下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精时，需将获能处理的精子与MI期的卵母细胞进行受精 B. 高等动物早期胚胎发育顺序为受精卵→囊胚→桑葚胚→原肠胚 C. 早期胚胎发育的卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加 D. 进行胚胎分割时，可选择发育正常的桑葚胚并将其内细胞团均等分割 8. 白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为 20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本， 经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。下列说法正确的是（　　） A. 白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在生殖隔离 B. “白菜—甘蓝”杂种幼苗的染色体可用甲基绿染色 C. 人工诱导产生四倍体“白菜—甘蓝”，这种变异属于基因突变 D. 雌蕊离体培养获得“白菜—甘蓝”杂种幼苗不能说明植物细胞具有全能性 9. 某病毒S蛋白含有多种抗原决定簇。科研人员利用该病毒康复者血清中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得了能分泌抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞，用于制备抗S蛋白的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ） A. 康复者血清中的B淋巴细胞在体外培养条件下不能大量增殖 B. 可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 体外培养杂交瘤细胞时通入5%CO2的主要作用是维持培养液pH D. 经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体 10. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述正确的是（　　） A. 愈伤组织细胞分化时可能会发生突变或基因重组 B. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 C. 常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 D. 融合的细胞即为杂交细胞，都能提高人参皂苷的产率 11. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. 每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍 B. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 D. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用 12. 以下关于农杆菌转化法的叙述错误的是（ ） A. 若用Ti质粒作载体，目的基因的插入位置应该在T－DNA片段内 B. 将重组Ti质粒导入农杆菌中时，可以用钙离子处理细菌 C. 农杆菌能将重组Ti质粒转移到被侵染的植物细胞内，并将其整合到染色体上 D. 能在植物细胞中检测到目的基因，还不能说明转化成功 13. 如图表示用限制酶切割质粒和目的基因后，构建的重组质粒（Tetr表示四环素抗性基因），下列叙述正确的是（ ） A. 启动子能驱动目的基因在受体细胞中进行自我复制 B. 切割目的基因和质粒时，一定要用相同限制酶进行处理 C. PCR技术能用于扩增目的基因和检测目的基因是否导入了受体细胞 D. 用含四环素的培养基进行筛选，能生长的一定是含有重组质粒的细胞 14. 下列有关PCR过程的叙述正确的是（ ） A. 变性过程中破坏的是DNA分子内的磷酸二酯键 B. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸等 C. 复性过程中引物与DNA模板链的结合依据碱基互补配对原则完成 D. PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度相同 15. 限制性内切核酸酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键断开，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，会断开的化学键是（　　） A. 碱基G与A之间的化学键 B. 碱基G与脱氧核糖之间的化学键 C. 碱基T与A之间的化学键 D. 磷酸与脱氧核糖之间的化学键 16. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、毒品类、病毒类和生化毒剂类等 B. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 C. 我国政府禁止生殖性克隆人的实验，同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题 D. 反对设计试管婴儿的原因之一是可能会有人滥用此技术选择婴儿的性别 第Ⅱ卷 二、非选择题（本大题共5小题，共52分。） 17. 某研究小组欲制作桑葚果酒和果醋，基本流程如下图所示。回答下列问题： （1）制作桑葚果酒和果醋的菌种分别是______，二者在代谢类型上的主要区别是______。 （2）冲洗桑葚时，不能反复冲洗的原因是______，桑葚果酒经发酵而得，呈现宝石红色，其中红色素存在于桑葚果实细胞的______（细胞器）中。若要提高桑葚果酒的产量，应严格控制的条件有______。 （3）进行酒精发酵时，桑葚汁不能装满发酵装置的原因是______。酒精发酵完成后，可用______（填试剂名称）检测酒精。进一步发酵制作果醋，鉴定桑葚果醋的方法，除了尝、闻之外，还可以通过观察菌膜和检测比较______。 18. 2017年11月27日，世界上首例体细胞克隆猴“中中”诞生；12月5日，第二例克隆猴“华华”诞生。我国科学家攻克了与人类相近的灵长类动物猕猴的体细胞克隆的难题。获得克隆猴的流程如图所示，据图回答问题： (1)“中中”“华华”的性状与_____(填“核供体”“卵母细胞供体”或“代孕”)动物的性状基本无关。 (2)欲获得单个雌猕猴体细胞，可用_____酶处理动物组织块。过程①表示去除卵母细胞的细胞核，该过程一般要将卵母细胞培养至_____期再进行，目前常用的去核方法是_____。将卵母细胞作为受体细胞的原因是_________________________(答出两点即可)。 (3)与克隆羊多莉培养成功一样，“中中”和“华华”克隆猕猴的成功证明了__________________。 19. 育种工作者利用番茄（2N）和马铃薯（4N）进行体细胞杂交，获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄、地下结马铃薯的“超级作物”。 （1）材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用到植物细胞融合和___________________技术，后者的理论基础是_________________________________________。 （2）图中①步骤所示植物细胞用___________________和___________________除去细胞壁。 （3）图中②过程细胞两两融合时，可出现3种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有___________________和___________________两类激素。 （4）由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④___________________和⑤___________________过程。其中⑤过程必须给予光照，其原因是叶绿体能利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。 （5）利用马铃薯和番茄的___________________进行离体培养得到单倍体植株，然后取单倍体植株细胞进行体细胞杂交，再用___________________处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。 20. 2019年底，新冠肺炎在我国大面积流行。病原体为一种新型RNA冠状病毒，即2019-nCoV。科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原，拟利用基因工程研制新冠病毒重组蛋白疫苗用于接种预防。图1表示病毒S蛋白的基因，图2表示取自真菌细胞的质粒PcMV及其上部分限制酶切位点，图3表示疫苗制作的简要操作流程。 （1）图3中步骤①所需要的酶和原料是_____。步骤②需要的酶是限制酶和_____。 （2）现在科研人员已经可以根据需要在目的基因两端添加需要的限制酶切割位点序列，但是一般不在目的基因的两端添加同一种酶切位点，原因是防止目的基因（S蛋白基因）自身连接或反向连接在质粒上。若选择两种酶且位点序列添加在S蛋白基因的左右两端（考虑转录的方向）应分别选择_____。 （3）PcMV质粒上氨苄青霉素抗性基因的作用是_____。 （4）为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行_____杂交实验，进行检测。 21. 下图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程，绿色荧光蛋白基因有820个碱基对（bp），质粒有5369个碱基对（bp）。请据图回答问题： （1）基因工程的核心步骤是_________，该过程需要的基本工具包括：____________。过程①②用相同的两种限制酶切割，与单一酶相比，优势是______________。 （2）过程②目的基因的扩增可通过PCR技术实现，PCR扩增目的基因的原理是：_____________________，进行PCR时除提供DNA母链、4种脱氧核苷酸外，还需要________________（至少填两个）等基本条件。PCR可呈指数形式扩增目的基因，每个循环一般可分为_____________三步。 （3）已知图中质粒经BamHI、HindIII双酶切后进行电泳，若出现一条长度为5150bp的DNA条带，则重组质粒长度为____________的DNA片段条带。 （4）若想获得发绿色荧光的小鼠，可将重组质粒用________法导入小鼠的__________（细胞）中。 （5）若想获得发绿色荧光的植物，最常用___________方法将重组质粒导入植物体细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $