精品解析：天津市五区县重点校联考2025-2026学年高二下学期7月期末生物试题

2025~2026学年度第二学期期末重点校联考高二生物 第Ⅰ卷（共50分） 一、选择题（本题共20小题，1-10题每题2分，11-20题每题3分，共50分） 1. 关于细胞学说的建立过程，下列说法正确的是（ ） A. 施莱登和施旺运用不完全归纳法提出“所有的动植物都是由细胞构成的” B. 细胞学说的建立使生物学研究进入分子水平 C. 罗伯特·胡克用自制显微镜观察到不同形态的红细胞、精子和细菌等 D. 德国科学家施莱登和施旺是细胞的发现者和命名者 2. 肺炎链球菌、支原体和流感病毒均可引发肺炎。下列叙述正确的是（ ） A. 肺炎链球菌和支原体均具有细胞膜和细胞质 B. 三者均以染色体作为遗传物质的载体 C. 流感病毒侵染宿主细胞的过程体现了细胞间信息交流 D. 三者均依赖宿主细胞的核糖体合成蛋白质 3. 如图表示某生物细胞中细胞核及其周围的结构。下列叙述不正确的是（ ） A. 细胞核是细胞遗传和代谢的控制中心 B. 内质网膜与核膜相连，可实现细胞核与细胞质之间的物质运输 C. rRNA和蛋白质在核仁中合成并组装成核糖体 D. 该细胞不可能是处于分裂间期的洋葱根尖分生区细胞 4. 阿胶对贫血、营养不良等有明显的疗效。下列分析正确的是（ ） A. 阿胶中含有Fe、Zn、Ca等微量元素，并能为人体提供多种必需氨基酸 B. 驴皮熬制出的阿胶呈凝胶状，说明驴皮细胞内含量最多的化合物是蛋白质 C. 驴的遗传物质是DNA，而原核生物遗传物质是DNA或RNA D. 驴皮细胞内的某种蛋白质含有n条肽链，由m个氨基酸参与合成，则该蛋白质至少含有m+n个氧原子 5. 脂滴是具有储存大量疏水脂肪功能的具膜细胞结构。下列推测合理的是（ ） A. 脂滴的膜一定由双层磷脂分子组成 B. 脂滴表面若附有蛋白质，其表面张力会降低 C. 苏丹Ⅲ染液可将脂滴中的脂肪染成红色 D. 脂滴中的脂肪属于固醇的一种 6. 下列关于传统发酵技术及现代发酵工程的叙述，正确的是（ ） A. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中乳酸菌产生的CO₂使发酵液溢出 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 C. 腐乳鲜美的味道主要依赖于曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸 D. 以乙醇为底物进行果醋发酵，是因为醋酸菌含有相应的酶 7. PET是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。研究人员从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的某种细菌。下列叙述正确的是（ ） A. 利用基因工程或杂交育种技术改造现有微生物以提高生物降解能力 B. 设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，判断选择培养基是否具有选择性 C. 以PET为唯一碳源的选择培养基上能生长的菌落即为目标菌 D. 发酵生产磷脂酶时，若该酶为胞外酶，可通过过滤或离心去除菌体，再从发酵液中提取 8. 植物细胞工程有着广泛的应用，下列叙述正确的是（ ） A. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可能筛选出有用的突变体 B. 外植体插入培养基前要用无水酒精和次氯酸钠进行消毒处理 C. 利用花药离体培养获得幼苗，从中选出优良性状个体，能够缩短育种年限 D. 可以用植物茎尖进行植物组织培养获得抗毒苗 9. 下列关于DNA的粗提取、扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（ ） A. 最好使用容易获得且价格便宜的猪血细胞进行DNA粗提取与鉴定实验 B. 可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来 C. 将过滤液放入4℃冰箱一段时间可抑制DNA酶的活性 D. PCR实验中使用的微量离心管、枪头等在使用前都只需进行消毒处理 10. 下列有关细胞工程和胚胎工程技术的叙述，正确的是（ ） A. 胚胎发育早期可在透明带内进行有丝分裂，细胞数量增多、细胞体积变大 B. 用体细胞核移植技术获取胚胎时，常用显微操作法对MⅡ期卵母细胞去核 C. 胚胎分割时需要严格地将内细胞团和滋养层细胞进行均分 D. 体外培养精子时，需加ATP溶液使精子达到获能状态 11. 将绿色荧光蛋白（GFP）与病毒糖蛋白（VSVG）连接后导入到相应细胞中，下图为VSVG-GFP在每个细胞结构中的驻留时间。下列说法正确的是（ ） A. 图示曲线变化可能是将VSVG-GFP导入大肠杆菌后测得的 B. VSVG可依次在内质网、高尔基体、细胞膜三种细胞器之间转移 C. 由图可知，300min时部分VSVG-GFP可能已分泌到细胞外 D. 标记染色体上的蛋白，也会出现类似的曲线变化 12. 用紫色洋葱鳞片叶表皮细胞、0.3g/mL蔗糖溶液及清水进行质壁分离及复原实验，下列叙述错误的是（ ） A. 洋葱鳞片叶内表皮细胞在0.3g/mL蔗糖溶液中也会发生质壁分离 B. 质壁分离后细胞壁和细胞膜之间充满浓度略低于0.3g/mL的蔗糖溶液 C. 滴加0.3g/mL蔗糖溶液组在质壁分离复原过程中属于实验组 D. 用KNO3溶液代替0.3g/mL蔗糖溶液，观察到的实验现象不完全相同 13. 烟草叶肉组织发育初期，胞间连丝呈管状结构，能允许相对分子质量达5万的蛋白质通过，而发育成熟后，胞间连丝呈分支状，只能允许相对分子质量小于400的物质通过。烟草花叶病毒依靠自身的p30运动蛋白，调节烟草细胞间胞间连丝的孔径，进而侵染相邻细胞。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞之间通过胞间连丝进行信息交流时不需要细胞膜上受体的参与 B. 烟草叶肉组织在发育过程中，能通过改变胞间连丝的结构来调节运输物质的速率 C. 烟草花叶病毒无细胞结构，其核酸中含A、G、C、U四种含氮碱基 D. 烟草花叶病毒p30运动蛋白突变体可能会失去侵染烟草植株的能力 14. 图中A、B代表构成细胞的元素，X、Y、Z、P分别为构成生物大分子的基本单位，I、II、III、IV、V为构成细胞的有机物，结构1和结构2为细胞中常见结构，据图判断下列说法正确的是（ ） A. IV彻底水解的产物为氨基酸，II彻底水解的产物为脱氧核苷酸 B. 结构1外部是磷脂分子的疏水端，水溶性分子或离子不能自由通过 C. 结构2主要由DNA和蛋白质构成，属于可在光学显微镜下观察到的结构 D. I中各种多糖的基本组成单位相同，结构也相同 15. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列错误的是（ ） A. ES细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能 B. 用胰蛋白酶处理，有利于获得单个胚胎干细胞 C. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析即可检测嵌合体子代鼠性别 16. 通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述错误的是（ ） A. 天冬氨酸与天冬酰胺的R基不同，该替换导致酶的空间结构改变 B. 根据新的氨基酸序列可能会逆推出不止一种对应的基因编码序列 C. 这种通过设计并合成新蛋白质的技术属于蛋白质工程 D. 若采用PCR技术实现基因定点修改酶基因，无需知晓酶的氨基酸序列 17. 研究人员开发了一种靶向PD-1（T细胞表面程序性死亡蛋白）和CTLA-4（细胞毒性T细胞相关蛋白4）的双特异性抗体BsAb，用于增强抗肿瘤免疫反应。制备过程中，先将人源化抗PD-1和抗CTLA-4的抗体基因通过特定连接序列连接，构建表达载体，再导入羊体内建立乳腺生物反应器，使产生的羊乳汁中含BsAb。下列叙述正确的是（ ） A. 构建基因表达载体时需将抗PD-1和抗CTLA-4的抗体基因与人源基因的启动子等重组在一起 B. 构建基因表达载体时需要使用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体 C. 将构建好的表达载体直接注射到羊的体细胞，就能稳定获得乳腺生物反应器 D. 欲检测羊乳汁中是否含BsAb，可采用抗原—抗体杂交技术 18. 分泌蛋白合成过程中，首先在游离核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成，当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成，并且边合成边转移到内质网腔内，如图所示。下列说法正确的是（ ） 注：SRP是位于细胞质基质中的信号识别颗粒，识别信号序列后，肽链合成暂停。 A. 新生肽链上有信号序列，游离的核糖体也不一定能附着到内质网上 B. 该肽链以囊泡的形式进入内质网腔内 C. 若细胞质基质中缺乏SRP，则新生肽链的合成将会中止 D. 用3H标记亮氨酸的羧基可追踪上述蛋白质的合成和运输过程 19. 为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因（Bapt）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞。下列说法正确的是（ ） A. PCR循环步骤中延伸所需温度最低 B. p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列 C. 农杆菌的Ti质粒整合到红豆杉细胞染色体DNA上才能表达 D. 改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取 20. 镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述正确的是（ ） A. 利用PCR扩增DNA时，反应体系中应加入2个引物 B. 若该胎儿检测结果为图乙-a，则其为镰状细胞贫血患者 C. 荧光标记序列越长，图乙-c中两个DNA条带间的距离越大 D. 用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者 第Ⅱ卷（共50分） 二、非选择题（本题共4小题，共50分） 21. 人体既可从食物中获取胆固醇，也可自身细胞合成，共同维持胆固醇含量相对稳定。胆固醇需与蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL）后在血液中完成转运。肝脏是维持机体胆固醇稳态的核心器官。下图是肝脏细胞回收血液中LDL的示意图，A~D表示相关结构，请回答下列问题。 （1）胆固醇是构成_____________的重要成分，在人体内还参与_____________的运输。 （2）胆固醇在血液中必须以LDL形式运输，原因是_________________________________。 （3）网格蛋白形成篮状笼结构，帮助膜形成A，A在细胞中沿着_____________移动。脱去包被的A与内吞体融合，内吞体中酸性的环境使得LDL及其受体蛋白的_____________发生改变，进而导致LDL与其受体分离，LDL受体再次被转运至细胞膜。 （4）溶酶体内水解酶的加工场所有_____________（填图中字母）。携带胆固醇的LDL颗粒进入细胞后，在溶酶体的作用下分解释放_____________物质。 （5）家族性高胆固醇血症（FH）是一种遗传病，LDL受体基因突变，导致患者无法从食物中获取胆固醇。研究者以体外培养的人体细胞为材料，设计如下实验，请推测相关预期（填“慢”或“快”；血清：去除了使血液凝固的物质的血浆）。 培养基 正常细胞内胆固醇合成速度 FH患者细胞胆固醇合成速度 常规细胞培养条件 慢 快 去除培养液中血清成分 _____________ 快 无血清培养基中加入LDL _____________ _____________ 22. 某生物兴趣小组使用0.3g/mL的KNO3溶液分别处理普通水稻和耐盐碱水稻的成熟细胞，结果如图1。 （1）该实验通过观察原生质体体积相对值进行比较，故所选水稻细胞必须含有的细胞器是____________。图1中Ⅱ组水稻的曲线不能无限上升是受限于_________________。 （2）A→B段，Ⅰ组水稻的吸水能力____________，此时，在细胞壁和原生质体之间充满了____________。 （3）盐地碱蓬是一种高度耐盐碱植物，其耐盐碱部分机理如图2所示，图中SOS1和NHX为两种Na+-H+逆向转运蛋白。 ①盐地碱蓬根细胞的细胞质基质与细胞液、细胞膜外的PH不同，这种差异主要由H+-ATP泵以____________方式将H+转运到____________来维持的。这种H+分布特点为图中____________蛋白运输Na+提供了动力，以减少其对细胞代谢的影响。 ②在高盐胁迫下，Na+借助通道蛋白HKT1以____________方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助（Ca+调节Na+、K+转运蛋白的功能。进而调节细胞中Na+、K+的比例。由此推测，细胞质基质中的Ca+对HKT1和AKT1的作用依次为____________（填“激活”或“抑制”）。 （4）综上，生物膜的_________________________（特性）是植物耐盐能力的基础，而生物膜具有该特性的结构基础是_________________________________。 23. 多环芳烃（PAHs）是土壤中一类持久性有机污染物，微生物降解是去除PAHs的有效方式。科研人员欲从土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图1所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： 图1 （1）实验前，实验人员应在_____________的土壤中寻找目的菌株。实验过程中获得纯净“高效降解PAHs菌株”的关键是_________________________________。 （2）过程③将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____________，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________（填“多”或“少”）。 （3）5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL，一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，每升原菌液样品中细菌数为________个。 （4）科研人员从土壤中分离到2种降解PAHs的微生物，并对两者的分解能力进行了检测，相关结果如图2所示。据图2分析，在降解PAHs方面，两种微生物中能力更强的是___________，且微生物P和微生物L在降解PAHs方面相互_____________（填“协同”或“相抗衡”）。 （5）针对图2结果显示的混合接种P、L两组 菌株降解率显著高于单独接种组，某同学提出假说：菌株P代谢产生的中间产物可作为菌株L的碳源。请补充完整验证实验思路： ①液体培养基单独培养菌株P，离心过滤除去菌体，获取无菌上清液； ②向等量含PAHs的培养液中加入上述上清液，接入_____________培养； ③设置甲、乙两组对照：甲组单独接种菌种L；乙组_____________； ④相同适宜条件培养相同时间，检测并比较各组培养液中_____________。 预期结果：若实验组降解率显著高于甲组、接近乙组，则假说成立。 24. 虾青素可由β-胡萝卜素在β-胡萝卜素酮化酶（BKT）和β-胡萝卜素羟化酶（CRTR-B）的作用下转化而来，具有抗衰老、增强免疫等功能。杜氏盐藻是单细胞浮游植物，生长快，易培养，能大量合成β-胡萝卜素。科研人员利用“无缝克隆技术”（如图1）构建含BKT基因和CRTR-B基因的表达载体（如图2、3），导入杜氏盐藻，以实现虾青素的工厂化生产，回答下列问题。 （1）获取目的基因：红球藻是天然虾青素的重要来源，提取红球藻的总DNA为模板，设计引物扩增BKT基因和CRTR-B基因，此过程需要_____________酶的催化。 （2）构建转化载体： ①PCR获取抗除草剂基因过程中，为确保基因两端具有所需同源序列，需在引物的_____________端添加对应的同源序列。若将来需要将抗除草剂基因能够从重组质粒中切除，还需要在基因两侧加入限制酶识别序列，则扩增抗除草剂基因时，设计的引物序列（5'→3'）为_____________。 A.抗除草剂基因部分序列+限制酶识别序列+同源序列 B.同源序列+抗除草剂基因部分序列+限制酶识别序列 C.同源序列+限制酶识别序列+抗除草剂基因部分序列 ②利用“无缝克隆技术”同时将BKT基因和CRTR-B基因插入质粒，形成的重组质粒对应部位如图2所示，推测此过程扩增CRTR-B基因所用的引物为_____________。 ③最终形成的重组质粒如图3所示，其中atpA启动子和psbA启动子均为杜氏盐藻叶绿体启动子，选用内源性启动子的目的是_____________，两个目的基因各自搭配独立的启动子和终止子，目的是_____________。 （3）准备受体细胞：选取初始杜氏盐藻涂布到杜氏盐藻固体培养基进行第一次培养，一段时间后，挑取生长良好的单藻落到杜氏盐藻液体培养基中继续培养。期间可取藻液滴入血细胞计数板，第二次培养的目的是_____________。大规模培养工程杜氏盐藻时，需要控制培养液的溶氧量、PH、温度等环境条件，目的是_____________。 （4）目的基因导入及相关检测：将重组质粒导入杜氏盐藻叶绿体，一段时间后，先用含_____________的培养基初筛已转化的杜氏盐藻，然后采用_____________技术检测是否成功转录出β-胡萝卜素酮化酶和β-胡萝卜素羟化酶的mRNA。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025~2026学年度第二学期期末重点校联考高二生物 第Ⅰ卷（共50分） 一、选择题（本题共20小题，1-10题每题2分，11-20题每题3分，共50分） 1. 关于细胞学说的建立过程，下列说法正确的是（ ） A. 施莱登和施旺运用不完全归纳法提出“所有的动植物都是由细胞构成的” B. 细胞学说的建立使生物学研究进入分子水平 C. 罗伯特·胡克用自制显微镜观察到不同形态的红细胞、精子和细菌等 D. 德国科学家施莱登和施旺是细胞的发现者和命名者 【答案】A 【解析】 【详解】A、施莱登和施旺仅观察了部分植物、部分动物的结构，就归纳得出“所有的动植物都是由细胞构成的”结论，该研究方法属于不完全归纳法，A正确； B、细胞学说的建立标志着生物学研究进入细胞水平，生物学研究进入分子水平的标志是DNA双螺旋结构的提出，B错误； C、罗伯特·胡克用自制显微镜观察到木栓组织的死细胞，并首次为细胞命名，观察到活的红细胞、精子和细菌等结构的科学家是列文虎克，C错误； D、细胞的发现者和命名者是罗伯特·胡克，施莱登和施旺是细胞学说的主要建立者，D错误。 2. 肺炎链球菌、支原体和流感病毒均可引发肺炎。下列叙述正确的是（ ） A. 肺炎链球菌和支原体均具有细胞膜和细胞质 B. 三者均以染色体作为遗传物质的载体 C. 流感病毒侵染宿主细胞的过程体现了细胞间信息交流 D. 三者均依赖宿主细胞的核糖体合成蛋白质 【答案】A 【解析】 【详解】A、肺炎链球菌和支原体都属于原核生物，原核生物的基本结构包含细胞膜、细胞质，无核膜包被的细胞核，A正确； B、染色体是真核生物特有的遗传物质载体，肺炎链球菌和支原体为原核生物，不存在染色体，流感病毒无细胞结构，也不含染色体，B错误； C、细胞间信息交流的参与主体均为细胞，流感病毒不具备细胞结构，其侵染宿主细胞的过程不属于细胞间的相互作用，无法体现细胞间信息交流，C错误； D、肺炎链球菌和支原体是细胞生物，自身含有核糖体，可以自主合成蛋白质，仅无细胞结构的流感病毒需要依赖宿主细胞的核糖体合成蛋白质，D错误。 3. 如图表示某生物细胞中细胞核及其周围的结构。下列叙述不正确的是（ ） A. 细胞核是细胞遗传和代谢的控制中心 B. 内质网膜与核膜相连，可实现细胞核与细胞质之间的物质运输 C. rRNA和蛋白质在核仁中合成并组装成核糖体 D. 该细胞不可能是处于分裂间期的洋葱根尖分生区细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、细胞核是遗传信息库，是细胞遗传和代谢的控制中心，A正确； B、由图可知内质网膜与核膜直接相连，该结构特点可实现细胞核与细胞质之间的物质运输，B正确； C、核仁与rRNA的合成以及核糖体的形成有关，但蛋白质的合成场所是核糖体，并非核仁，C错误； D、中心体分布在动物细胞和低等植物细胞中，洋葱是高等植物，其根尖分生区细胞无中心体，因此该细胞不可能是洋葱根尖分生区细胞，D正确。 4. 阿胶对贫血、营养不良等有明显的疗效。下列分析正确的是（ ） A. 阿胶中含有Fe、Zn、Ca等微量元素，并能为人体提供多种必需氨基酸 B. 驴皮熬制出的阿胶呈凝胶状，说明驴皮细胞内含量最多的化合物是蛋白质 C. 驴的遗传物质是DNA，而原核生物遗传物质是DNA或RNA D. 驴皮细胞内的某种蛋白质含有n条肽链，由m个氨基酸参与合成，则该蛋白质至少含有m+n个氧原子 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞中的大量元素包含C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg，Ca属于大量元素而非微量元素，A错误； B、活细胞内含量最多的化合物是水，含量最多的有机化合物是蛋白质，阿胶呈凝胶状是熬制过程中水分蒸发导致的，不能说明细胞内含量最多的化合物是蛋白质，B错误； C、原核生物是具有细胞结构的生物，所有细胞结构生物的遗传物质都是DNA，只有部分病毒的遗传物质是RNA，C错误； D、每个氨基酸至少含有1个羧基（-COOH），即至少含2个氧原子，m个氨基酸至少共有2m个氧原子；合成含n条肽链的蛋白质时，脱去的水分子数为m-n，每个水分子含1个氧原子，因此该蛋白质至少有氧原子数为2m-(m-n)=m+n，D正确。 5. 脂滴是具有储存大量疏水脂肪功能的具膜细胞结构。下列推测合理的是（ ） A. 脂滴的膜一定由双层磷脂分子组成 B. 脂滴表面若附有蛋白质，其表面张力会降低 C. 苏丹Ⅲ染液可将脂滴中的脂肪染成红色 D. 脂滴中的脂肪属于固醇的一种 【答案】B 【解析】 【详解】A、磷脂分子具有亲水头部和疏水尾部，脂滴内部储存疏水脂肪，因此脂滴的膜应为单层磷脂分子（疏水尾部朝向内侧脂肪，亲水头部朝向细胞质基质），并非双层磷脂分子，A错误； B、蛋白质具有亲水和疏水基团，脂滴表面附着蛋白质后，可降低脂滴与细胞质基质之间的界面表面张力，该推测合理，B正确； C、苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色，苏丹Ⅳ染液才将脂肪染成红色，C错误； D、脂质分为脂肪、磷脂和固醇三类，脂肪和固醇是并列关系，脂肪不属于固醇，D错误。 6. 下列关于传统发酵技术及现代发酵工程的叙述，正确的是（ ） A. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中乳酸菌产生的CO₂使发酵液溢出 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 C. 腐乳鲜美的味道主要依赖于曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸 D. 以乙醇为底物进行果醋发酵，是因为醋酸菌含有相应的酶 【答案】D 【解析】 【详解】A、乳酸菌无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生CO2，不会因CO2导致发酵液溢出，A错误； B、啤酒工业化生产中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，后发酵主要作用是改善啤酒风味，仅完成少量残留糖的发酵，B错误； C、腐乳制作的主要发酵菌种是毛霉，不是曲霉，毛霉产生的蛋白酶分解蛋白质产生小分子肽和氨基酸，是腐乳鲜美的主要来源，C错误； D、酶具有专一性，醋酸菌含有催化乙醇转化为醋酸的相关酶，因此可以乙醇为底物进行果醋发酵，D正确。 7. PET是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。研究人员从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的某种细菌。下列叙述正确的是（ ） A. 利用基因工程或杂交育种技术改造现有微生物以提高生物降解能力 B. 设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，判断选择培养基是否具有选择性 C. 以PET为唯一碳源的选择培养基上能生长的菌落即为目标菌 D. 发酵生产磷脂酶时，若该酶为胞外酶，可通过过滤或离心去除菌体，再从发酵液中提取 【答案】D 【解析】 【详解】A、杂交育种的原理是基因重组，仅适用于能进行有性生殖的生物，细菌为原核生物，无法进行有性生殖，不能用杂交育种改造，A错误； B、未接种的培养基作为空白对照，作用是检测培养基灭菌是否合格、是否被杂菌污染；若要判断选择培养基是否具有选择性，需将等量的土壤稀释液分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基和PET唯一碳源选择培养基上，比较两组的菌落数，B错误； C、以PET为唯一碳源的选择培养基上，除了能产磷脂酶、可直接利用PET的目标菌外，还可能存在利用目标菌降解PET产生的小分子有机物生长的杂菌，因此能生长的菌落不都是目标菌，C错误； D、胞外酶是分泌到细胞外的酶，主要存在于发酵液中，因此可先通过过滤或离心去除菌体，再从剩余发酵液中提取该酶，D正确。 8. 植物细胞工程有着广泛的应用，下列叙述正确的是（ ） A. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可能筛选出有用的突变体 B. 外植体插入培养基前要用无水酒精和次氯酸钠进行消毒处理 C. 利用花药离体培养获得幼苗，从中选出优良性状个体，能够缩短育种年限 D. 可以用植物茎尖进行植物组织培养获得抗毒苗 【答案】A 【解析】 【详解】A、愈伤组织细胞分裂旺盛，细胞分裂间期DNA复制时易发生基因突变，对其进行诱变处理可提高突变频率，进而有可能筛选出具备优良性状的有用突变体，A正确； B、外植体消毒使用的是体积分数70%的酒精而非无水酒精，无水酒精会导致外植体细胞快速失水死亡，无法后续进行组织培养，B错误； C、花药离体培养得到的是单倍体幼苗，通常植株弱小、高度不育，无法直接筛选出可稳定遗传的优良性状个体，需经秋水仙素诱导染色体数目加倍后再筛选，才能实现缩短育种年限的目的，C错误； D、植物茎尖的病毒极少甚至不含病毒，对其进行组织培养可获得脱毒苗（即不带病毒的植株），抗毒苗需通过基因工程导入抗病毒基因等技术才能获得，D错误。 9. 下列关于DNA的粗提取、扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（ ） A. 最好使用容易获得且价格便宜的猪血细胞进行DNA粗提取与鉴定实验 B. 可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来 C. 将过滤液放入4℃冰箱一段时间可抑制DNA酶的活性 D. PCR实验中使用的微量离心管、枪头等在使用前都只需进行消毒处理 【答案】C 【解析】 【详解】A、猪属于哺乳动物，其成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，几乎不含DNA，不适宜作为DNA粗提取与鉴定的实验材料，A错误； B、洋葱是植物细胞，存在细胞壁，置于清水中只会吸水膨胀不会破裂，无法释放DNA，需通过研磨加洗涤剂等操作破碎细胞，B错误； C、低温可抑制DNA酶的活性，将过滤液放入4℃冰箱一段时间能减少DNA被降解的可能，C正确； D、PCR实验为避免外源DNA等杂质污染，使用的微量离心管、枪头等在使用前需进行高压灭菌处理，仅消毒无法达到实验要求，D错误。 10. 下列有关细胞工程和胚胎工程技术的叙述，正确的是（ ） A. 胚胎发育早期可在透明带内进行有丝分裂，细胞数量增多、细胞体积变大 B. 用体细胞核移植技术获取胚胎时，常用显微操作法对MⅡ期卵母细胞去核 C. 胚胎分割时需要严格地将内细胞团和滋养层细胞进行均分 D. 体外培养精子时，需加ATP溶液使精子达到获能状态 【答案】B 【解析】 【详解】A、胚胎发育早期的卵裂阶段在透明带内进行有丝分裂，细胞数量增多，但胚胎总体积基本不变甚至略有减小，因此单个细胞体积变小，A错误； B、体细胞核移植的受体细胞常选择培养至MⅡ期的卵母细胞，常用显微操作法去除其细胞核，B正确； C、胚胎分割时仅需要将内细胞团均等分割，避免影响分割后胚胎的恢复和发育，滋养层细胞无需均分，C错误； D、精子获能的处理方法为培养法（用获能液培养）或化学诱导法（用肝素、钙离子载体溶液处理），加入ATP无法使精子获能，D错误。 11. 将绿色荧光蛋白（GFP）与病毒糖蛋白（VSVG）连接后导入到相应细胞中，下图为VSVG-GFP在每个细胞结构中的驻留时间。下列说法正确的是（ ） A. 图示曲线变化可能是将VSVG-GFP导入大肠杆菌后测得的 B. VSVG可依次在内质网、高尔基体、细胞膜三种细胞器之间转移 C. 由图可知，300min时部分VSVG-GFP可能已分泌到细胞外 D. 标记染色体上的蛋白，也会出现类似的曲线变化 【答案】C 【解析】 【详解】A、大肠杆菌属于原核生物，细胞内不存在内质网、高尔基体等具膜细胞器，无法出现图示的内质网、高尔基体中荧光分子的数量变化，A错误； B、细胞膜是细胞的边界，不属于细胞器，选项中“三种细胞器”的表述错误，B错误； C、300min时细胞内的荧光总分子数远低于初始值，说明部分VSVG-GFP已经被分泌到细胞外，导致细胞内荧光总量下降，C正确； D、染色体上的蛋白属于胞内蛋白，其合成和转运过程不需要依次经过内质网、高尔基体再运输到细胞膜，不会出现类似的曲线变化，D错误。 12. 用紫色洋葱鳞片叶表皮细胞、0.3g/mL蔗糖溶液及清水进行质壁分离及复原实验，下列叙述错误的是（ ） A. 洋葱鳞片叶内表皮细胞在0.3g/mL蔗糖溶液中也会发生质壁分离 B. 质壁分离后细胞壁和细胞膜之间充满浓度略低于0.3g/mL的蔗糖溶液 C. 滴加0.3g/mL蔗糖溶液组在质壁分离复原过程中属于实验组 D. 用KNO3溶液代替0.3g/mL蔗糖溶液，观察到的实验现象不完全相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、洋葱鳞片叶内表皮细胞是成熟植物细胞，具备原生质层和大液泡，在0.3g/mL蔗糖溶液中，外界溶液浓度高于细胞液浓度，细胞会失水发生质壁分离，仅因内表皮无紫色色素，观察难度更高，A正确； B、细胞壁具有全透性，蔗糖分子可自由通过，但细胞膜具有选择透过性，蔗糖无法进入细胞；质壁分离过程中细胞排出的水分会稀释细胞壁与细胞膜间隙的蔗糖溶液，因此该区域蔗糖浓度略低于0.3g/mL，B正确； C、该实验为自身对照，质壁分离复原过程中，滴加蔗糖溶液后形成的质壁分离状态是对照组，滴加清水后发生复原的组为实验组，C错误； D、用KNO₃溶液进行实验时，细胞首先渗透失水发生质壁分离，随后K+和NO₃-可通过主动运输进入细胞，使细胞液浓度升高，细胞会自动发生质壁分离复原，无需额外滴加清水，与蔗糖溶液的实验现象不完全相同，D正确。 13. 烟草叶肉组织发育初期，胞间连丝呈管状结构，能允许相对分子质量达5万的蛋白质通过，而发育成熟后，胞间连丝呈分支状，只能允许相对分子质量小于400的物质通过。烟草花叶病毒依靠自身的p30运动蛋白，调节烟草细胞间胞间连丝的孔径，进而侵染相邻细胞。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞之间通过胞间连丝进行信息交流时不需要细胞膜上受体的参与 B. 烟草叶肉组织在发育过程中，能通过改变胞间连丝的结构来调节运输物质的速率 C. 烟草花叶病毒无细胞结构，其核酸中含A、G、C、U四种含氮碱基 D. 烟草花叶病毒p30运动蛋白突变体可能会失去侵染烟草植株的能力 【答案】B 【解析】 【详解】A、高等植物通过胞间连丝进行信息交流时，携带信息的物质可直接通过通道进入相邻细胞，无需与细胞膜上的受体结合，A正确； B、烟草叶肉组织发育过程中，胞间连丝结构改变后，允许通过的物质相对分子质量上限发生变化，说明调节的是运输物质的种类（选择透过性），题干信息未体现对运输速率的调节，B错误； C、烟草花叶病毒是RNA病毒，无细胞结构，其核酸为RNA，含有A、G、C、U四种含氮碱基，C正确； D、烟草花叶病毒依靠p30运动蛋白调节胞间连丝孔径，实现相邻细胞间的侵染扩散，若p30运动蛋白发生突变，可能导致其功能异常，无法调控胞间连丝孔径，进而失去在烟草植株内扩散侵染的能力，D正确。 14. 图中A、B代表构成细胞的元素，X、Y、Z、P分别为构成生物大分子的基本单位，I、II、III、IV、V为构成细胞的有机物，结构1和结构2为细胞中常见结构，据图判断下列说法正确的是（ ） A. IV彻底水解的产物为氨基酸，II彻底水解的产物为脱氧核苷酸 B. 结构1外部是磷脂分子的疏水端，水溶性分子或离子不能自由通过 C. 结构2主要由DNA和蛋白质构成，属于可在光学显微镜下观察到的结构 D. I中各种多糖的基本组成单位相同，结构也相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、IV是蛋白质，彻底水解产物为氨基酸正确；II是DNA，脱氧核苷酸是其初步水解产物，彻底水解产物为脱氧核糖、磷酸和4种含氮碱基，A错误； B、结构1为磷脂双分子层，磷脂分子的亲水端朝向外侧，疏水端朝向内部，外部不是疏水端，B错误； C、结构2为染色体，主要由DNA和蛋白质构成，经龙胆紫等碱性染料染色后，可在光学显微镜下观察到，C正确； D、I中的多糖（淀粉、纤维素、糖原等）基本组成单位均为葡萄糖，但葡萄糖的连接方式不同，多糖的空间结构存在差异，D错误。 15. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列错误的是（ ） A. ES细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能 B. 用胰蛋白酶处理，有利于获得单个胚胎干细胞 C. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析即可检测嵌合体子代鼠性别 【答案】D 【解析】 【详解】A、ES细胞即胚胎干细胞，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内的任何一种类型细胞，A正确； B、胰蛋白酶可分解细胞间的蛋白质，使细胞分散，因此用胰蛋白酶处理胚胎干细胞聚集体，有利于获得单个胚胎干细胞，B正确； C、荧光素基因整合在灰色小鼠ES细胞的染色体上，由灰色小鼠ES细胞发育而来的组织细胞会表达荧光素，因此荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分，C正确； D、嵌合体小鼠由黄色小鼠囊胚的细胞和导入的灰色小鼠ES细胞共同发育而来，仅割取原黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析，只能反映原黄色囊胚的性别，若灰色ES细胞的性别与原黄色囊胚不同，无法准确判断嵌合体子代鼠的性别，D错误。 16. 通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述错误的是（ ） A. 天冬氨酸与天冬酰胺的R基不同，该替换导致酶的空间结构改变 B. 根据新的氨基酸序列可能会逆推出不止一种对应的基因编码序列 C. 这种通过设计并合成新蛋白质的技术属于蛋白质工程 D. 若采用PCR技术实现基因定点修改酶基因，无需知晓酶的氨基酸序列 【答案】D 【解析】 【详解】A、不同氨基酸的区别在于R基不同，氨基酸种类替换会改变蛋白质的一级结构，进而导致酶的空间结构改变，A正确； B、密码子具有简并性，即一种氨基酸可对应多种密码子，因此根据氨基酸序列逆推基因编码序列时，可得到不止一种序列，B正确； C、蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造新的蛋白质的技术，本题中对天然酶基因改造获得耐高温新酶的技术属于蛋白质工程，C正确； D、采用PCR实现基因定点修改，需要先确定需要替换的氨基酸位点，因此必须知晓酶的氨基酸序列，才能对应设计突变的基因序列和PCR引物，D错误。 17. 研究人员开发了一种靶向PD-1（T细胞表面程序性死亡蛋白）和CTLA-4（细胞毒性T细胞相关蛋白4）的双特异性抗体BsAb，用于增强抗肿瘤免疫反应。制备过程中，先将人源化抗PD-1和抗CTLA-4的抗体基因通过特定连接序列连接，构建表达载体，再导入羊体内建立乳腺生物反应器，使产生的羊乳汁中含BsAb。下列叙述正确的是（ ） A. 构建基因表达载体时需将抗PD-1和抗CTLA-4的抗体基因与人源基因的启动子等重组在一起 B. 构建基因表达载体时需要使用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体 C. 将构建好的表达载体直接注射到羊的体细胞，就能稳定获得乳腺生物反应器 D. 欲检测羊乳汁中是否含BsAb，可采用抗原—抗体杂交技术 【答案】D 【解析】 【详解】A、构建乳腺生物反应器时，需将目的基因与羊的乳腺蛋白基因的启动子重组，才能保证目的基因在羊乳腺细胞中特异性表达，无需与人源基因的启动子重组，A错误； B、基因工程的工具酶只有限制酶和DNA连接酶，载体是基因工程的运输工具，不属于工具酶，B错误； C、构建乳腺生物反应器时，需将表达载体导入羊的受精卵，再经胚胎移植等操作才能获得转基因个体，直接将表达载体注射到羊的体细胞无法稳定获得乳腺生物反应器，C错误； D、BsAb本质为蛋白质，检测目的基因是否成功表达出相应蛋白质，可采用抗原—抗体杂交技术，D正确。 18. 分泌蛋白合成过程中，首先在游离核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成，当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成，并且边合成边转移到内质网腔内，如图所示。下列说法正确的是（ ） 注：SRP是位于细胞质基质中的信号识别颗粒，识别信号序列后，肽链合成暂停。 A. 新生肽链上有信号序列，游离的核糖体也不一定能附着到内质网上 B. 该肽链以囊泡的形式进入内质网腔内 C. 若细胞质基质中缺乏SRP，则新生肽链的合成将会中止 D. 用3H标记亮氨酸的羧基可追踪上述蛋白质的合成和运输过程 【答案】A 【解析】 【详解】A、游离核糖体上合成的肽链的信号序列需要被细胞质基质的SRP识别，再与内质网上的SRP受体（DP）结合，核糖体才能附着到内质网上，若缺少SRP或SRP受体等条件，即使新生肽链有信号序列，游离核糖体也无法附着到内质网，A正确； B、由图可知，肽链是边合成边通过内质网膜上的通道直接转移到内质网腔内，不需要以囊泡的形式运输，囊泡是内质网初步加工蛋白质后，向高尔基体运输时的结构，B错误； C、题干说明SRP识别信号序列后肽链合成才会暂停，若细胞质基质缺乏SRP，肽链合成不会被暂停，会在游离核糖体中继续合成，只是无法转移到内质网，C错误； D、氨基酸脱水缩合时，一个氨基酸的羧基会脱去-OH参与生成水，若标记亮氨酸的羧基，标记物会在脱水缩合过程中进入水中，无法保留在肽链中，不能实现对蛋白质合成和运输过程的追踪，D错误。 19. 为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因（Bapt）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞。下列说法正确的是（ ） A. PCR循环步骤中延伸所需温度最低 B. p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列 C. 农杆菌的Ti质粒整合到红豆杉细胞染色体DNA上才能表达 D. 改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR的三个步骤温度为：变性90~95℃、退火（复性）55~60℃、延伸70~75℃，其中退火步骤温度最低，延伸温度高于退火温度，A错误； B、本实验要构建Bapt基因的超表达载体，实现Bapt基因的过量表达以提高紫杉醇产量，因此p1301载体上需要含有启动子、增强子等可增强Bapt基因表达的调控序列，B正确； C、农杆菌Ti质粒中仅T-DNA片段会转移并整合到红豆杉细胞染色体DNA上，并非整个Ti质粒整合，且未整合到染色体上的目的基因也可发生瞬时表达，C错误； D、紫杉醇是红豆杉的细胞代谢产物，可通过植物细胞培养技术直接培养红豆杉细胞获取，无需培养得到完整植株，D错误。 20. 镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述正确的是（ ） A. 利用PCR扩增DNA时，反应体系中应加入2个引物 B. 若该胎儿检测结果为图乙-a，则其为镰状细胞贫血患者 C. 荧光标记序列越长，图乙-c中两个DNA条带间的距离越大 D. 用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者 【答案】D 【解析】 【详解】 A、PCR扩增特定DNA片段时，反应体系需要加入2种（一对）引物，反应体系中引物是大量的，远多于2个，A错误； B、图乙-a只有下方条带，对应基因型 HbAHbA，是正常人，不是镰状细胞贫血患者，B错误； C、两个条带的距离由酶切后DNA片段本身的长度差决定，和荧光标记的杂交序列长度无关，C错误； D、若限制酶处理不充分，正常人的部分 HbAHbA片段不会被切开，会同时出现未切开的长片段和切开的短片段，表现为两条带，和携带者结果一致，会被误判为携带者，D正确。 第Ⅱ卷（共50分） 二、非选择题（本题共4小题，共50分） 21. 人体既可从食物中获取胆固醇，也可自身细胞合成，共同维持胆固醇含量相对稳定。胆固醇需与蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL）后在血液中完成转运。肝脏是维持机体胆固醇稳态的核心器官。下图是肝脏细胞回收血液中LDL的示意图，A~D表示相关结构，请回答下列问题。 （1）胆固醇是构成_____________的重要成分，在人体内还参与_____________的运输。 （2）胆固醇在血液中必须以LDL形式运输，原因是_________________________________。 （3）网格蛋白形成篮状笼结构，帮助膜形成A，A在细胞中沿着_____________移动。脱去包被的A与内吞体融合，内吞体中酸性的环境使得LDL及其受体蛋白的_____________发生改变，进而导致LDL与其受体分离，LDL受体再次被转运至细胞膜。 （4）溶酶体内水解酶的加工场所有_____________（填图中字母）。携带胆固醇的LDL颗粒进入细胞后，在溶酶体的作用下分解释放_____________物质。 （5）家族性高胆固醇血症（FH）是一种遗传病，LDL受体基因突变，导致患者无法从食物中获取胆固醇。研究者以体外培养的人体细胞为材料，设计如下实验，请推测相关预期（填“慢”或“快”；血清：去除了使血液凝固的物质的血浆）。 培养基 正常细胞内胆固醇合成速度 FH患者细胞胆固醇合成速度 常规细胞培养条件 慢 快 去除培养液中血清成分 _____________ 快 无血清培养基中加入LDL _____________ _____________ 【答案】（1） ①. 动物细胞膜 ②. 血液中脂质 （2）胆固醇属于脂质，不溶于水，需与载脂蛋白结合形成脂蛋白（如LDL）才能在血液中运输 （3） ①. 细胞骨架 ②. 空间结构 （4） ①. C、D ②. 氨基酸和胆固醇 （5） ①. 快 ②. 慢 ③. 快 【解析】 【小问1详解】 胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，同时参与人体内血液中脂质的运输。 【小问2详解】 胆固醇属于脂质，疏水不溶于水，需与载脂蛋白结合形成脂蛋白（如LDL）才能在血液中运输。 【小问3详解】 胞吞形成的囊泡（图中A）在细胞内沿细胞骨架移动；pH会影响蛋白质的空间结构，内吞体的酸性环境改变了LDL和受体蛋白的空间结构，导致二者分离，受体循环回细胞膜。 【小问4详解】 溶酶体的水解酶属于分泌蛋白，在核糖体合成后，需要内质网（图C）初步加工、高尔基体（图D）进一步加工，因此加工场所为C、D；LDL由胆固醇和蛋白质组成，经溶酶体水解后释放出氨基酸和胆固醇，供细胞利用。 【小问5详解】 根据胆固醇稳态调节规律： ①正常细胞去除血清（去除外源性LDL/胆固醇）后，无法从外界获取胆固醇，因此自身合成胆固醇的速度加快； ②无血清培养基加入LDL后，正常细胞可通过LDL受体摄取LDL获得胆固醇，细胞内胆固醇充足，因此自身合成速度减慢； ③FH患者LDL受体基因突变，无法正常摄取LDL中的胆固醇，即使添加LDL也无法获得外源性胆固醇，因此自身合成速度仍为快。 22. 某生物兴趣小组使用0.3g/mL的KNO3溶液分别处理普通水稻和耐盐碱水稻的成熟细胞，结果如图1。 （1）该实验通过观察原生质体体积相对值进行比较，故所选水稻细胞必须含有的细胞器是____________。图1中Ⅱ组水稻的曲线不能无限上升是受限于_________________。 （2）A→B段，Ⅰ组水稻的吸水能力____________，此时，在细胞壁和原生质体之间充满了____________。 （3）盐地碱蓬是一种高度耐盐碱植物，其耐盐碱部分机理如图2所示，图中SOS1和NHX为两种Na+-H+逆向转运蛋白。 ①盐地碱蓬根细胞的细胞质基质与细胞液、细胞膜外的PH不同，这种差异主要由H+-ATP泵以____________方式将H+转运到____________来维持的。这种H+分布特点为图中____________蛋白运输Na+提供了动力，以减少其对细胞代谢的影响。 ②在高盐胁迫下，Na+借助通道蛋白HKT1以____________方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助（Ca+调节Na+、K+转运蛋白的功能。进而调节细胞中Na+、K+的比例。由此推测，细胞质基质中的Ca+对HKT1和AKT1的作用依次为____________（填“激活”或“抑制”）。 （4）综上，生物膜的_________________________（特性）是植物耐盐能力的基础，而生物膜具有该特性的结构基础是_________________________________。 【答案】（1） ①. 液泡 ②. 细胞壁的伸缩性 （2） ①. 逐渐升高 ②. KNO3溶液 （3） ①. 主动运输 ②. 细胞外和液泡内 ③. SOS1和NHX ④. 协助扩散 ⑤. 抑制、激活 （4） ①. 选择透过性 ②. 细胞膜上转运蛋白的种类和数量或转运蛋白空间结构的变化 【解析】 【小问1详解】 本实验需要观察原生质体体积变化，只有含有大液泡的成熟植物细胞才能发生明显的吸水/失水，产生原生质体体积的变化；Ⅱ组水稻细胞吸收无机盐后细胞液浓度升高，持续吸水，但植物细胞壁的伸缩性限制了原生质体体积，使其不能无限增大。 【小问2详解】 A→B段Ⅰ组水稻细胞不断失水，细胞液浓度逐渐升高，因此细胞吸水能力逐渐增强；细胞壁具有全透性，原生质层具有选择透过性，因此细胞壁和原生质体之间充满外界的KNO3​溶液。 【小问3详解】 ① 由图2可知，细胞质基质H⁺浓度低于细胞外和液泡内，H⁺逆浓度梯度运输且消耗ATP，因此运输方式是主动运输，H⁺被转运到细胞外和液泡内，维持这种pH差异；H⁺顺浓度梯度回流时释放的势能，为SOS1和NHX转运Na⁺提供动力，降低细胞质Na⁺浓度。 ② Na⁺借助通道蛋白顺浓度梯度跨膜运输，不需要能量，属于协助扩散；高盐环境下Na⁺经HKT1大量进入细胞、同时抑制K⁺经AKT1进入，导致Na⁺/K⁺比例异常，因此Ca²⁺调节比例恢复正常时，会抑制HKT1减少Na⁺内流，激活AKT1促进K⁺内流。 【小问4详解】 植物耐盐依赖对不同离子的选择性跨膜运输，因此生物膜的选择透过性是耐盐能力的基础；选择透过性的结构基础是细胞膜上转运蛋白的种类和数量或转运蛋白空间结构的变化。 23. 多环芳烃（PAHs）是土壤中一类持久性有机污染物，微生物降解是去除PAHs的有效方式。科研人员欲从土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图1所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： 图1 （1）实验前，实验人员应在_____________的土壤中寻找目的菌株。实验过程中获得纯净“高效降解PAHs菌株”的关键是_________________________________。 （2）过程③将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____________，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________（填“多”或“少”）。 （3）5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL，一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，每升原菌液样品中细菌数为________个。 （4）科研人员从土壤中分离到2种降解PAHs的微生物，并对两者的分解能力进行了检测，相关结果如图2所示。据图2分析，在降解PAHs方面，两种微生物中能力更强的是___________，且微生物P和微生物L在降解PAHs方面相互_____________（填“协同”或“相抗衡”）。 （5）针对图2结果显示的混合接种P、L两组 菌株降解率显著高于单独接种组，某同学提出假说：菌株P代谢产生的中间产物可作为菌株L的碳源。请补充完整验证实验思路： ①液体培养基单独培养菌株P，离心过滤除去菌体，获取无菌上清液； ②向等量含PAHs的培养液中加入上述上清液，接入_____________培养； ③设置甲、乙两组对照：甲组单独接种菌种L；乙组_____________； ④相同适宜条件培养相同时间，检测并比较各组培养液中_____________。 预期结果：若实验组降解率显著高于甲组、接近乙组，则假说成立。 【答案】（1） ①. 多环芳烃（PAHs）污染 ②. 防止杂菌污染 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 少 （3）5.2×108 （4） ①. 微生物L ②. 协同 （5） ①. 菌株L ②. P+L混合接种 ③. PAHs剩余量（PAHs降解率） 【解析】 【小问1详解】 目的菌是降解PAHs的菌株，因此在多环芳烃（PAHs）污染的土壤中目的菌株更多，更容易筛选；微生物分离培养中，获得纯净菌株的关键是防止外来杂菌污染。 【小问2详解】 需要在固体培养基获得单菌落并统计菌落数，对应的接种方法是稀释涂布平板法；由于当多个活菌连在一起时，平板上只形成1个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌实际数目更少。 【小问3详解】 先计算平板菌落平均值：（48+50+54+56+52）/5=52，再计算每升原菌液活菌数： 52÷0.1mL × 103 × 103 = 5.2 × 108 个/L 。 【小问4详解】 由图2可知，单独培养时微生物L的PAHs降解率远高于微生物P，因此微生物L降解能力更强；混合培养的降解率显著高于两种菌单独培养，说明二者在降解PAHs上为协同关系。 【小问5详解】 实验目的是验证“菌株P代谢产生的中间产物可作为菌株L的碳源”：实验组向含PAHs的培养液加入P的无菌上清液后，接入菌株L；对照设置中，甲组单独接种L，乙组应等量P+L混合接种；最后检测并比较各组培养液中PAHs剩余量（PAHs降解率）。 24. 虾青素可由β-胡萝卜素在β-胡萝卜素酮化酶（BKT）和β-胡萝卜素羟化酶（CRTR-B）的作用下转化而来，具有抗衰老、增强免疫等功能。杜氏盐藻是单细胞浮游植物，生长快，易培养，能大量合成β-胡萝卜素。科研人员利用“无缝克隆技术”（如图1）构建含BKT基因和CRTR-B基因的表达载体（如图2、3），导入杜氏盐藻，以实现虾青素的工厂化生产，回答下列问题。 （1）获取目的基因：红球藻是天然虾青素的重要来源，提取红球藻的总DNA为模板，设计引物扩增BKT基因和CRTR-B基因，此过程需要_____________酶的催化。 （2）构建转化载体： ①PCR获取抗除草剂基因过程中，为确保基因两端具有所需同源序列，需在引物的_____________端添加对应的同源序列。若将来需要将抗除草剂基因能够从重组质粒中切除，还需要在基因两侧加入限制酶识别序列，则扩增抗除草剂基因时，设计的引物序列（5'→3'）为_____________。 A.抗除草剂基因部分序列+限制酶识别序列+同源序列 B.同源序列+抗除草剂基因部分序列+限制酶识别序列 C.同源序列+限制酶识别序列+抗除草剂基因部分序列 ②利用“无缝克隆技术”同时将BKT基因和CRTR-B基因插入质粒，形成的重组质粒对应部位如图2所示，推测此过程扩增CRTR-B基因所用的引物为_____________。 ③最终形成的重组质粒如图3所示，其中atpA启动子和psbA启动子均为杜氏盐藻叶绿体启动子，选用内源性启动子的目的是_____________，两个目的基因各自搭配独立的启动子和终止子，目的是_____________。 （3）准备受体细胞：选取初始杜氏盐藻涂布到杜氏盐藻固体培养基进行第一次培养，一段时间后，挑取生长良好的单藻落到杜氏盐藻液体培养基中继续培养。期间可取藻液滴入血细胞计数板，第二次培养的目的是_____________。大规模培养工程杜氏盐藻时，需要控制培养液的溶氧量、PH、温度等环境条件，目的是_____________。 （4）目的基因导入及相关检测：将重组质粒导入杜氏盐藻叶绿体，一段时间后，先用含_____________的培养基初筛已转化的杜氏盐藻，然后采用_____________技术检测是否成功转录出β-胡萝卜素酮化酶和β-胡萝卜素羟化酶的mRNA。 【答案】（1）耐高温的DNA聚合酶 （2） ①. 5' ②. C ③. ⑥⑧ ④. 确保目的基因正常表达 ⑤. 让两个目的基因能够独立高效地启动转录，避免共用调控元件导致表达效率降低 （3） ①. 扩大培养杜氏盐藻 ②. 保证杜氏盐藻处于最适生长状态，最大化虾青素产量 （4） ①. 除草剂 ②. PCR和抗原抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 设计特异性引物扩增其 DNA中的 BKT基因和CRTR-B 基因进行PCR扩增，该过程需要耐高温DNA聚合酶的催化. 【小问2详解】 ①根据 PCR扩增的原理，在 PCR过程中，为确保基因两端具有所需同源序列，需在5’ 端添加对应的同源序列；根据题意，若要确保抗除草剂基因能够从重组质粒中切除，则所需引物（5’一 3’）的序列应为“同源序列+限制酶识别序列+特异性扩增引物序列（抗除草剂基因部分序列）”，AB错误，C正确。 ②根据图2所示，要通过“无缝克隆法”同时将 BKT基因和CRTR-B 基因插入质粒，则要保证BKT基因一侧有一致同源序列，另一侧能带上CRTR-B 基因，因此扩增CRTR-B基因所用的引物为⑥⑧；③启动子是转录的起始信号，选用内源性启动子的目的是防止基因沉默，确保目的基因能表达；两个目的基因各自搭配独立的启动子和终止子，目的是让两个目的基因能够独立高效地启动转录，避免共用调控元件导致表达效率降低。 【小问3详解】 选取初始杜氏盐藻涂布到杜氏盐藻固体培养基进行培养的目的是纯化杜氏盐藻，挑取生长状态良好的单藻落到杜氏盐藻液体培养基中继续培养（第二次培养）的目的是扩大培养杜氏盐藻；大规模培养工程杜氏盐藻时，需要控制培养液的溶氧量、PH、温度等环境条件，目的是保证杜氏盐藻处于最适生长状态，最大化虾青素产量。 【小问4详解】 筛选已转化的杜氏盐藻的培养基是选择培养基，其中含除草剂；然后采用PCR和抗原抗体杂交技术检测是否成功转录出β-胡萝卜素酮化酶和β-胡萝卜素羟化酶的mRNA。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $