江西省南昌市东湖区南昌中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

**基本信息** 以生活实践与科技前沿为情境，覆盖现代生物科技核心知识，注重科学思维与探究实践能力考查，如辣白菜发酵、iPS细胞治疗等情境融合实验分析与数据解读。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|12/36|发酵工程（题1）、基因工程（题4）、细胞工程（题11）|结合透明圈筛选（题2）、PCR引物设计（题9）考查科学思维| |多选|4/16|微生物培养（题13）、基因工程工具（题15）|通过实验操作正误判断（题13）强化探究实践| |非选择|4/48|降解菌筛选（题17）、单克隆抗体制备（题20）|以IC50值分析（题20）、菌落计数（题17）突出数据解读能力|

2025~2026学年度第二学期南昌中学三经路校区期末考试 高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 命题人：任颖 审题人：桂欣欣 一、选择题：本题共12个小题，每小题3分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．东北辣白菜是传统发酵食品，制作时常加入苹果、梨、大蒜、生姜等辅料，入坛中密封发酵。下列叙述正确的是（　　） A．装坛前，需对苹果、梨、大蒜、生姜等辅料进行消毒灭菌 B．发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸和少量CO2使pH降低 C．若发酵坛密封不严，会导致乳酸菌繁殖过快致使辣白菜酸度过高 D．发酵后期，乳酸含量积累到一定程度会反过来抑制乳酸菌的活性 2．ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种优良的天然食品防腐剂。ε-PL能抑制多种微生物的活性，且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正确的是（    ） A．土样、培养基和接种工具等均需要严格灭菌处理，以防止杂菌污染 B．步骤Ⅰ、Ⅲ的接种方法分别是涂布平板法、平板划线法 C．步骤Ⅲ中应挑选菌落③接种到固体培养基表面培养，进一步筛选出目的菌株 D．若要从丁培养基中收集ε-PL，则采用过滤、沉淀等方法将菌体分离提纯干燥 3．乳糖需经乳糖酶分解才能被人体吸收利用。缺少乳糖酶的人摄入乳糖后，易出现腹泻。科研人员筛选生产乳糖酶优良菌种的过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．对微生物进行纯培养的步骤一般为配制培养基、接种、灭菌、分离和培养 B．菌落直径与蓝色圈直径之比越小，菌落中微生物产生乳糖酶的能力越强 C．图中②接种方法只适合用于筛选微生物，不适合对微生物进行计数 D．乳糖酶属于优良菌种生产的单细胞蛋白，可以有效去除牛奶中的乳糖 注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可与无色的X-gal反应产生蓝色物质。 4．从红豆杉树皮中提取出的紫杉醇是治疗某些癌症的特效药。研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程如下图。下列叙述错误的是（    ） A．利用PCR技术获取Bapt基因时，应选用引物2和引物3 B．构建基因表达载体时，宜选用EcoR Ⅰ和Sac Ⅰ酶切 C．需先用Ca2+处理农杆菌细胞，再将基因表达载体导入 D．利用添加氨苄青霉素的培养基可初步筛选导入质粒的农杆菌 5. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。以铁皮石斛新生营养芽为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验如图所示。下列说法不正确的是（    ） A．铁皮石斛产生的生物碱属于其次生代谢产物 B．过程①诱导新生营养芽变成PLBs的关键是适宜的植物激素和营养条件 C．过程②培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值大的PLBs D．PLBs重量、光照等因素均会影响生物碱的产量 6．iPS细胞在人类疾病治疗方面有广阔的应用前景，用iPS细胞治疗镰状细胞贫血的过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．①过程往往需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得的组织 B．②过程需用Ca2+处理体细胞，以利于其吸收特定的DNA分子 C．③④过程需在含一定CO2的环境中进行，以维持培养液的pH D．用iPS细胞治疗镰状细胞贫血理论上不会发生免疫排斥反应 7．髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图。下列叙述正确的是（　　） A．制备单克隆抗体过程中需对细胞进行至少三次筛选 B．经步骤②诱导融合后的细胞都能分泌TREM2抗体 C．诱导动物细胞融合不同于诱导植物细胞融合的方法是灭活病毒诱导 D．TREM2单克隆抗体具有准确识别抗原细微差异又可无限增殖的特点 8．研究发现，采用2次克隆来制备转基因克隆动物，无论在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为2次克隆的简易流程图。下列有关叙述正确的是（    ）    A．胎羊X、Y的性状均完全取决于甲羊的遗传物质 B．制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织 C．胎羊Y细胞中线粒体DNA只来源于丙羊 D．2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度高 9．Noxa是一种促凋亡蛋白。为构建表达Noxa的工程菌，现利用PCR技术将Noxa基因连接在ClyA基因的下游，构建ClyA-Noxa融合基因，并插入P载体。两个基因及四条引物如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．为方便构建融合基因，R1和F2引物设计时需要引入一定长度的互补序列 B．为保证插入P载体的准确性，F1和R2引物设计时应引入不同的酶切位点 C．为高效准确构建含ClyA-Noxa融合基因的表达载体，需至少使用4种限制酶 D．为筛选成功转化后的工程菌，可以使用F1和R2的引物组合进行PCR鉴定 10．治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）   A．核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物 B．将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应 C．体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动 D．治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题 11. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是 A．两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B．再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C．花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D．植株N的染色体都不能正常联会配对，无法产生可育配子 12. 下列关于生物工程和技术的表述正确的是（    ） A．发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，发酵罐内要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件 B．胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本 C．PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要加指示剂且要在紫外灯下观察 D．用PCR技术扩增目的基因时，为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列 二、选择题：本题共4个小题，每小题4分，共16分。每小题有2项或2项以上选项符合题目要求，全部选对得4分，少选2分，选错0分。 13．以下生物学实验的部分操作过程，错误的是（    ） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌的纯培养 倒平板后将培养基放入高压蒸汽锅内灭菌 B 菊花的组织培养 将生长良好的愈伤组织先转接到诱导生根的培养基，长根后再转接到诱导生芽的培养基 C DNA的粗提取与鉴定 将丝状物放入2mol/L NaCl溶液再加二苯胺试剂，沸水浴中加热可观察到溶液变蓝 D DNA片段的扩增及电泳鉴定 PCR实验使用的微量离心管等在使用前不需灭菌 14. 胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是（    ） A．新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B．新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C．新的胰岛素产生过程中最困难的一步是由胰岛素分子结构推测氨基酸序列 D．若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Ca2＋处理大肠杆菌 15．下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述错误的是（    ） 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 A．一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团 B．若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高 C．用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割 D．使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 16. 利用膀胱生物反应器生产人血清白蛋白，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．操作②是对早期胚胎进行移植，移植前需对受体母猪进行超数排卵处理 B．膀胱生物反应器不受性别及发育限制，产量一定高于乳腺生物反应器 C．若操作①和操作②成功，则操作③就能从尿液中检测到人血清白蛋白 D．操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子可避免对其他组织产生影响 二、非选择题（4小题，共48分） 17．（12分）一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，设计了如图1所示的流程。请回答下列问题： (1)选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度_______的土壤用于分离目标菌株。 (2)图1中“甲”指的是_______，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度，此过程使用的培养基中应以_______（填化合物名称）为唯一碳源。 (3)将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基中加入了能与聚丙烯纤维结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，选择S/s的比值_______的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。 (4)欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用_______法。根据图2操作能计算出1g该土壤中约有_______个高效降解一次性口罩的目的菌。该结果有可能比实际活菌数要少，原因是______________。 18.（每空2分，共12分）科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①~⑤表示过程，a~f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题：    (1)图1的过程③成功的标志是___________；过程④⑤形成f需要经过___________________过程。培养基中激素___________________的浓度会影响植物细胞的发育方向。 (2)图1培育杂种植株的过程主要应用的原理是___________________；图2培育植物体B的育种方法Ⅱ称为___________。 (3)番茄是二倍体；体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。图2中幼苗A、幼苗B、植物体A、植物体B、植物体C的叶肉细胞中，染色体数目不是24的是___________。 19. （每空2分，共12分）防御素是一类富含二硫键的阳离子型多肽，广泛分布于真菌、植物与动物中，是生物免疫系统中的重要调节分子。β-防御素是一种由H基因编码的抗菌肽，抑菌谱广。长春生物科技研究所通过构建重组酵母菌进行发酵，获得了β-防御素。回答下列问题： (1)为获得β﹣防御素基因，研究者利用致病细菌的脂多糖（LPS）刺激结肠癌细胞株提高β﹣防御素的表达量，经过逆转录后，作为模板进行PCR扩增。PCR产物常采用_______来鉴定，鉴定后进行测序。测序结果与______数据库中的公开数据进行比较，进而得到正确的β﹣防御素基因。 (2)本实验选用毕赤酵母表达载体pPIC9K（如图），扩增目的基因时设计的1对引物为P1（5′ATCGAATTCATGGGAAGTCATAAACACATTAGA3′）和P2（5′TATAGCGGCCGCCTATTTCTTTCTTCGGCAGCAT3′）。 ①本实验中引物的作用是__________； ②部分限制酶识别序列及切点如下表，结合图中限制酶切点与引物，推测本实验酶切时选用的两种限制酶是________，采用双酶切法的优势是_________（答出2点即可）。 限制酶 识别序列及酶切位点 BglⅠ 5′…A↓GATCT…3′ EcoRⅠ 5′…G↓AATTC…3′ SnaBⅠ5′…TAC↓GTA…3′ SacⅠ5′…GAGAT↓C…3′ AurⅠ 5′…C↓CTAGC…3′ SalⅠ 5′…G↓TCGAC…3′ NotⅠ 5′…GC↓GGCCGC…3′ (3) 毕赤酵母表达系统发酵结束后，采取适当的______措施来获得产品。 20．（每空2分，共12分）呕吐毒素（DON）是一种由多种镰刀菌产生的真菌蛋白，常见于被污染的谷物和谷物制品中。摄入被DON污染的食物后，人们可能会出现恶心、呕吐、腹泻等症状，严重时甚至可能导致死亡。同时，DON还会对动物的生长、繁殖和免疫功能产生负面影响，给养殖业带来巨大损失。近年来，单克隆抗体技术在DON的检测中展现出巨大的潜力和优势，DON单克隆抗体制备流程如图1所示。回答下列问题: (1)B细胞和骨髓瘤细胞通过①过程进行融合，如果只考虑两两融合，形成的融合细胞共有_______（1分）种类型。第一次筛选时所用的培养基为选择培养基，能在这种培养基上生长的细胞是_______。（1分） (2)②过程为第二次筛选，所用的培养板为96孔培养板，将筛选的显阳性的细胞通过③过程进行扩大培养，进而获取单克隆抗体。获取单克隆抗体时，如果是体内培养，可以从小鼠的腹水中获取，如果是体外培养，获取的途径是_______。与常规的血清抗体相比，单克隆抗体所具备的优点是_______。 (3)实验人员将等量的纯化DON蛋白分别注射到甲、乙、丙、丁4只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠DON抗体的免疫效果，以便筛选出制备DON单克隆抗体时用于细胞融合的供体小鼠。甲、乙、丙、丁4只小鼠的血清抗体半抑制浓度（IC50）和血清抗体相对浓度如图2所示。制备DON单克隆抗体时，最适合作为细胞融合的供体小鼠是_______，依据是_______。 高二生物期末考试参考答案 一．单选题 1-5 DBBBC 6-10 BCBCA 11-12 BA 13-16 ABD ABC ACD ABC 二．非选择题 17.（12分，每空2分） (1)大（1分） (2)选择培养（或扩大培养、富集培养）（1分） 聚丙烯纤维 (3)大 (4)稀释涂布平板 6.8×107 当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落 18.（每空2分，共12分） (1)再生出细胞壁 脱分化、再分化 生长素、细胞分裂素 (2)植物细胞的全能性、细胞膜具有(一定的)流动性 单倍体育种 (3)幼苗B 19.（每空2分，共12分） (1)琼脂糖凝胶电泳 GenBank (2)使TaqDNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸或5'端引入限制酶切位点 EcoRⅠ和NotⅠ 防止载体或目的基因自身环化，防止目的基因与载体反向链接 (3)提取、分离 20.（每空2分，共12分） (1)3 杂交瘤细胞（B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞） (2)从细胞培养液中获取 能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 (3)丁 丁的血清抗体相对浓度较高，且IC50最低，即抗体灵敏度最高 高二生物期末考试参考答案 一．单选题 1-5 DBBBC 6-10 BCBCA 11-12 BA 13-16 ABD ABC ACD ABC 二．非选择题 17.（12分，每空2分） (1)大（1分） (2)选择培养（或扩大培养、富集培养）（1分） 聚丙烯纤维 (3)大 (4)稀释涂布平板 6.8×107 当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落 18.（每空2分，共12分） (1)再生出细胞壁 脱分化、再分化 生长素、细胞分裂素 (2)植物细胞的全能性、细胞膜具有(一定的)流动性 单倍体育种 (3)幼苗B 19.（每空2分，共12分） (1)琼脂糖凝胶电泳 GenBank (2)使TaqDNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸或5'端引入限制酶切位点 EcoRⅠ和NotⅠ 防止载体或目的基因自身环化，防止目的基因与载体反向链接 (3)提取、分离 20.（每空2分，共12分） (1)3 杂交瘤细胞（B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞） (2)从细胞培养液中获取 能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 (3)丁 丁的血清抗体相对浓度较高，且IC50最低，即抗体灵敏度最高 高二生物 第7页 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $