内容正文:
高2026届二轮生物基础巩固11
(基因工程)
基础填空:
1.从技术操作层面看,基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。
该技术的原理是基因重组。与杂交育种相比,基因工程育种的优点有_②③④(填以下序号)。
①操作方法简便
②目的性强,能定向改造生物性状
③育种周期短
④不受生殖隔离限制,能克服远缘杂交不亲和障碍
⑤安全性高,对生态没有威胁
2.基因工程的基本工具有限制性内切核酸酶(限削酶)、DNA连接酶、载体。
3.右图中SmaI、EcoRV酶切割DNA后,产生的是平末端;
GAATTC CCCGGG CTGCAG GATATC
EcoR I、PstI酶切割DNA后,产生的是黏性末端。
CTTAAG GGGCCC GACGTC CTATAG
用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有4个
限制酶:EcoR I Sma I Pst I
EcoR V
磷酸二酯键(化学键)被断开。常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,连接具有平
末端的DNA片段最好选择T4DNA连接酶。
4.在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过_人工改造。基因工程
中所用的质粒载体具有一些特征,如具有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能自我复制;质粒上有
一至多个限制酶切割位点,便于外源DNA插入;具有标记基因,以便于重组DNA的筛选。除了质粒
外,动植物病毒和噬菌体也可作为载体。
5.基因工程主要有四个步骤:①且的基因的筛选与获取、②基因表达载体的构建、③将且的基因
导入受体细胞一、④且的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建是核心步骤。
6.培育转基因抗虫水稻时,获取Bt抗虫蛋白基因的方法有人工合成、构建基因文库和PC技术扩增。
构建基因表达载体时,目的基因的上游必须有启动子,它是RN“聚合酶识别和结合的位点,能驱动
目的基因转录。将B抗虫蛋白基因导入水稻体细胞最常用的方法是农杆菌转化法;该方法将目的基因
插入到Ti质粒的TDNA上,通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入水稻细胞。在将重组质粒导入
农杆菌细胞前,需要用Ca+处理农杆菌。在分子水平上检测水稻细胞的染色体DNA上是否插入了Bt抗
虫蛋白基因,或检测该基因是否转录出RNA,可采用PCR技术(或核酸分子杂交)_技术;检测Bt基
因是否翻译成抗虫蛋白,可采用抗原一抗体杂交技术。从个体水平鉴定植株抗虫性状的实验思路是
向转基因植株和普通植株接种等量同种害虫,在相同且适宜条件下培养,观察并比较两组植株的受害程度。
7.PCR全称为聚合酶链式反应,该技术的原理是DNA半保留复制。该技术可以分为变性、复性
和延伸三步。反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板,2种引物、4种脱氧核苷酸
和耐高温的DNA聚合酶。缓冲液还要添加Mg+,目的是激活DNA聚合酶。
8.若待扩增的目的基因两侧相关序列如下图,利用PC技术扩增时选用的与A链结合的引物碱基序列为
5 CTTGGA3'。若B链为该基因转录的模板链,则构建基因表达载体前应将启动子插入图示目的基因的
左侧(填“左侧”或“右侧”)。PCR产物常采用琼脂糖凝胶电泳A⊙
OH
(填技术手段)来鉴定,并置于紫外灯下观察结果。
B HO AGACAA
AGGTTC⊙
判断正误:
(√)1、进行DNA的粗提取与鉴定实验时,可用鸡血红细胞代替鸡的肝细胞。
(×)2、在DNA提取液中加入体积分数为95%的酒精以便将不溶于酒精的蛋白质析出。
(√)3、若要提高PCR产物的电泳迁移速率,可适当降低琼脂糖凝胶的浓度。
(√)4、a个DNA模板分子完成20轮循环需要a×(221-2)个引物。
(X)5、PCR过程中,复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段。
(X)6、限制酶主要从原核生物中分离纯化,能切割RNA。
(×)7、可利用显微注射法将外源基因导入大肠杆菌等原核细胞,实现高效表达。
(×)8、应用PCR技术可检测转基因抗虫棉花植株中的目的基因是否存在,及其是否完全表达。
(×)9、蛋白质工程通过直接改造蛋白质的结构可获得满足人类需要的蛋白质。
(√)10、转基因植物的花粉若扩散到野生环境中,可能导致基因污染,最终降低野生种群遗传多样性。
易错再练:
1.为培育转基因抗虫棉,某科研团队用图甲的质粒及图乙DNA的片段构建重组表达载体,限制酶的切割
位点及抗虫基因部分序列如图所示,图丙为不同限制酶的识别序列,为保证高效、准确拼接,以下分析
不合理的是(B)
酶3酶2
酶1
终止子
启动子
酶4
酶2
酶3
酶1
终止子A
5
3
抗虫基因
酶4
氨苄青霉素
5'(模板链)
食抗性基因
启动孔
5'-ATGGCT…AAAACT-3'
3'-TACCGA…TTTTGA-5'(模板链)
甲
乙
5-GAATTC-3'
5-GGATCC-3
5-CCCGGG-3
5-AGATCT-3'
3'-CTTAAG—5
3-CCTAGG-5
3-GGGCCC-5
3—TCTAGA-5
酶1
酶2
酶3
酶4
丙
A.启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点
B.宜选择酶1、2切割质粒,酶1、4切割目的DNA片段
C.氨苄青霉素抗性基因和抗虫基因的模板链位于重组表达载体的不同链
D.推测抗虫基因的转录产物序列为5'-AUGGCU·AAAACU-3
2.玉米人工驯化过程中丢失了一个控制高蛋白含量的优良基因THP9基因,现利用基因工程技术将THP9基
因重新转到玉米细胞内。下列相关叙述正确的是(D)
A.若采用PCR技术对一个THP9基因进
终止子
启动子
BamH I EcoR I Mfe I
HindⅢ
BamH I
-3
行扩增,则第n代复制共需要引物2n1个
氨苄青霉素
Mfe I
引物1
引物2
抗性基因
一EcoR I
B.PCR过程中用到了缓冲液,缓冲液中
引物3
引物4
启动子
KDn I
3
-5
一般要添加Mg2*用于激活RNA聚合酶
终止子
Kpn I
THP9基因
EcoRI
◆转录方向
C.利用PCR技术获取THP9基因时应选
择引物1和引物4
EcoR I
BamH I
Kpn I
Mfe I
Hind III
D.构建重组质粒时,用MfeI、HindII切割
5'-GAATTC-3'
5'-GGATCC-3'
5'-GGTACC-3
SCAATIG-
5-AAGCTT-3
质粒,用EcoR I、HindIII切割目的基因
3'-CTTAAG-5
3-CCTAGG-5'
3-CCATGG-5
3-GTTAAC-5
3'-TTCGAA-5高2026届二轮生物基础巩固11
(基因工程)
基础填空:
1.从技术操作层面看,基因工程是在
水平上进行设计和施工的,因此又叫作
该技术的原理是
。
与杂交育种相比,基因工程育种的优点有」
(填以下序号)。
①操作方法简便
②目的性强,能定向改造生物性状
③育种周期短
④不受生殖隔离限制,能克服远缘杂交不亲和障碍
⑤安全性高,对生态没有威胁
2.基因工程的基本工具有
3.右图中
酶切割DNA后,产生的是平末端;
GAATTC
CCCGGG CTGCAG GATATO
酶切割DNA后,产生的是黏性末端。
CTTAAG
GGGCCC GACGTC CTATAG
用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有个
限制酶:EcoR I Sma I PstI
EcoR V
(化学键)被断开。常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,连接具有
平末端的DNA片段最好选择
4.在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过
基因工程
中所用的质粒载体具有一些特征,如具有
可以保证质粒在受体细胞中能自我复制:质粒上有
一至多个
位点,便于外源DNA插入;具有
以便于重组DNA的筛选。除了质粒外,
和
也可作为载体。
5.
基因工程主要有四个步骤:①
②
⑨
④
。其中
是核心步骤。
6.培育转基因抗虫水稻时,获取Bt抗虫蛋白基因的方法有人工合成、构建基因文库和
构建基因表达载体时,目的基因的上游必须有
,它是
识别和结合的位点,能驱动目的
基因转录。将B抗虫蛋白基因导入水稻体细胞最常用的方法是
;该方法将目的基因插入到
Ti质粒的
上,通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入水稻细胞。在将重组质粒导入农杆
菌细胞前,需要用
处理农杆菌。在分子水平上检测水稻细胞的染色体DNA上是否插入了Bt抗虫
蛋白基因,或检测该基因是否转录出RNA,可采用
技术:检测Bt基因是否翻译成Bt
抗虫蛋白,可采用
技术。从个体水平鉴定植株抗虫性状的实验思路是
7.PCR全称为
该技术的原理是
该技术可以分为
和
三步。反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板,2种
、4种
和
酶。缓冲液还要添加Mg+,目的是
0
8.若待扩增的目的基因两侧相关序列如下图,利用PCR技术扩增时选用的与A链结合的引物碱基序列为
5
3'。若B链为该基因转录的模板链,则构建基因表达载体前应将启动子插入图示目的基因的
(填“左侧"或“右侧")。PCR产物常采用
(填A
①
OH
技术手段)来鉴定,并置于
下观察结果。
B
HO AGACAA
AGGTTCP
判断正误:
()1、进行DNA的粗提取与鉴定实验时,可用鸡血红细胞代替鸡的肝细胞。
()2、在DNA提取液中加入体积分数为95%的酒精以便将不溶于酒精的蛋白质析出。
()3、若要提高PC产物的电泳迁移速率,可适当降低琼脂糖凝胶的浓度。
()4、a个DNA模板分子完成20轮循环需要a×(221-2)个引物。
()5、PCR过程中,复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段。
()6、限制酶主要从原核生物中分离纯化,能切割RNA。
()7、可利用显微注射法将外源基因导入大肠杆菌等原核细胞,实现高效表达。
()8、应用PC技术可检测转基因抗虫棉花植株中的目的基因是否存在,及其是否完全表达。
()9、蛋白质工程通过直接改造蛋白质的结构可获得满足人类需要的蛋白质。
()10、转基因植物的花粉若扩散到野生环境中,可能导致基因污染,最终降低野生种群遗传多样性。
易错再练:
1.为培育转基因抗虫棉,某科研团队用图甲的质粒及图乙DN的片段构建重组表达载体,限制酶的切割
位点及抗虫基因部分序列如图所示,图丙为不同限制酶的识别序列,为保证高效、准确拼接,以下分析
不合理的是()
酶3酶2
酶1
终止子
启动子
酶4
酶2
酶3
酶1
终止子A
5
3
抗虫基因
酶4
氨苄青霉素
5'(模板链)
食抗性基因
启动子
5'-ATGGCT…AAAACT-3'
3'-TACCGA…TTTTGA-5'(模板链)
甲
乙
5-GAATTC-3'
5-GGATCC-3
5-CCCGGG-3
5-AGATCT-3
3'-CTTAAG—5
3-CCTAGG-5
3-GGGCCC-5
3—TCTAGA-5
酶1
酶2
酶3
酶4
丙
A.启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点
B.宜选择酶1、2切割质粒,酶1、4切割目的DNA片段
C.氨苄青霉素抗性基因和抗虫基因的模板链位于重组表达载体的不同链
D.推测抗虫基因的转录产物序列为5'-AUGGCU·AAAACU-3
2.玉米人工驯化过程中丢失了一个控制高蛋白含量的优良基因THP9基因,现利用基因工程技术将THP9基
因重新转到玉米细胞内。下列相关叙述正确的是(
A.若采用PCR技术对一个THP9基因进
终止子
启动子
BamH I EcoR I Mfe I
HindⅢ
BamH I
5
-3
行扩增,则第n代复制共需要引物2n1个
氨苄青霉素
Mfe I
引物1
引物2
一EcoR I
B.PCR过程中用到了缓冲液,缓冲液中
抗性基因
HindⅢ
引物3
引物4
启动子
KDn I
3
-5
一般要添加Mg2*用于激活RNA聚合酶
终止子
Kpn I
THP9基因
EcoRI
◆转录方向
C.利用PCR技术获取THP9基因时应选
择引物1和引物4
EcoR I
BamH I
Kpn I
Mfe I
Hind III
D.构建重组质粒时,用MfeI、Hind切割
5'-GAATTC-3'
5'-GGATCC-3'
5'-GGTACC-3
SCAATIG-
5-AAGCTT-3
质粒,用EcoR I、HindIII切割目的基因
3'-CTTAAG-5
3-CCTAGG-5'
3-CCATGG-5
3-GTTAAC-5
3'-TTCGAA-5
高2026届二轮生物基础巩固11
(基因工程)
基础填空:
1. 从技术操作层面看,基因工程是在 水平上进行设计和施工的,因此又叫作 。
该技术的原理是 。与杂交育种相比,基因工程育种的优点有_________(填以下序号)。
①操作方法简便 ②目的性强,能定向改造生物性状 ③育种周期短
④不受生殖隔离限制,能克服远缘杂交不亲和障碍 ⑤安全性高,对生态没有威胁
2. 基因工程的基本工具有 、 、 。
3. 右图中 酶切割DNA后,产生的是平末端;
酶切割DNA后,产生的是黏性末端。
用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有 个
(化学键)被断开。常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,连接具有平末端的DNA片段最好选择 。
4. 在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过 。基因工程中所用的质粒载体具有一些特征,如具有 ,可以保证质粒在受体细胞中能自我复制;质粒上有一至多个 位点,便于外源DNA插入;具有 ,以便于重组DNA的筛选。除了质粒外,
和 也可作为载体。
5. 基因工程主要有四个步骤:① 、 ② 、
③ 、④ 。其中 是核心步骤。
6. 培育转基因抗虫水稻时,获取Bt抗虫蛋白基因的方法有人工合成、构建基因文库和 。构建基因表达载体时,目的基因的上游必须有 ,它是 识别和结合的位点,能驱动目的基因转录。将 Bt 抗虫蛋白基因导入水稻体细胞最常用的方法是 ;该方法将目的基因插入到Ti质粒的 上,通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入水稻细胞。在将重组质粒导入农杆菌细胞前,需要用 处理农杆菌。在分子水平上检测水稻细胞的染色体DNA上是否插入了Bt 抗虫蛋白基因,或检测该基因是否转录出mRNA,可采用 技术;检测Bt 基因是否翻译成Bt 抗虫蛋白,可采用_ 技术。从个体水平鉴定植株抗虫性状的实验思路是
。
7. PCR全称为 ,该技术的原理是 。该技术可以分为 、______和 三步。反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板,2种 、4种
和 酶。缓冲液还要添加Mg2+,目的是 。
8. 若待扩增的目的基因两侧相关序列如下图,利用PCR技术扩增时选用的与A链结合的引物碱基序列为5'-__________-3'。若B链为该基因转录的模板链,则构建基因表达载体前应将启动子插入图示目的基因的______(填“左侧”或“右侧”)。PCR产物常采用_____________(填技术手段)来鉴定,并置于_____________下观察结果。
判断正误:
( )1、进行DNA的粗提取与鉴定实验时,可用鸡血红细胞代替鸡的肝细胞。
( )2、在DNA提取液中加入体积分数为95%的酒精以便将不溶于酒精的蛋白质析出。
( )3、若要提高PCR产物的电泳迁移速率,可适当降低琼脂糖凝胶的浓度。
( )4、a个DNA模板分子完成20轮循环需要a×(221-2)个引物。
( )5、PCR过程中,复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段。
( )6、限制酶主要从原核生物中分离纯化,能切割RNA。
( )7、可利用显微注射法将外源基因导入大肠杆菌等原核细胞,实现高效表达。
( )8、应用PCR技术可检测转基因抗虫棉花植株中的目的基因是否存在,及其是否完全表达。
( )9、蛋白质工程通过直接改造蛋白质的结构可获得满足人类需要的蛋白质。
( )10、转基因植物的花粉若扩散到野生环境中,可能导致基因污染,最终降低野生种群遗传多样性。
易错再练:
1. 为培育转基因抗虫棉,某科研团队用图甲的质粒及图乙 DNA 的片段构建重组表达载体,限制酶的切割位点及抗虫基因部分序列如图所示,图丙为不同限制酶的识别序列,为保证高效、准确拼接,以下分析
不合理的是( )
A.启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的位点
B.宜选择酶1、2切割质粒,酶1、4切割目的 DNA 片段
C.氨苄青霉素抗性基因和抗虫基因的模板链位于重组表达载体的不同链
D.推测抗虫基因的转录产物序列为5'-AUGGCU ……AAAACU-3'
2. 玉米人工驯化过程中丢失了一个控制高蛋白含量的优良基因THP9基因,现利用基因工程技术将THP9 基因重新转到玉米细胞内。下列相关叙述正确的是( )
A.若采用PCR 技术对一个 THP9 基因进行扩增,则第n代复制共需要引物2ⁿ-1个
B.PCR 过程中用到了缓冲液,缓冲液中
一般要添加 Mg²⁺用于激活 RNA 聚合酶
C.利用PCR 技术获取 THP9 基因时应选择引物1和引物4
D.构建重组质粒时,用Mfe I 、HindⅢ切割质粒, 用 EcoR I 、HindⅢ切割目的基因
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$
高2026届二轮生物基础巩固11
(基因工程)
基础填空:
1. 从技术操作层面看,基因工程是在 DNA分子 水平上进行设计和施工的,因此又叫作 重组DNA技术 。
该技术的原理是 基因重组 。与杂交育种相比,基因工程育种的优点有_②③④__(填以下序号)。
①操作方法简便 ②目的性强,能定向改造生物性状 ③育种周期短
④不受生殖隔离限制,能克服远缘杂交不亲和障碍 ⑤安全性高,对生态没有威胁
2. 基因工程的基本工具有 限制性内切核酸酶 (限制酶) 、 DNA连接酶 、 载体 。
3. 右图中_SmaⅠ、EcoRⅤ 酶切割DNA后,产生的是平末端;
EcoRⅠ、PstⅠ 酶切割DNA后,产生的是黏性末端。
用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有 4 个
磷酸二酯键 (化学键)被断开。常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,连接具有平
末端的DNA片段最好选择 T4DNA连接酶 。
4. 在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过_人工改造_。基因工程中所用的质粒载体具有一些特征,如具有 复制原点 ,可以保证质粒在受体细胞中能自我复制;质粒上有一至多个_限制酶切割__位点,便于外源DNA插入;具有 标记基因 ,以便于重组DNA的筛选。除了质粒外, 动植物病毒 和 噬菌体 也可作为载体。
5. 基因工程主要有四个步骤:① 目的基因的筛选与获取 、 ② 基因表达载体的构建 、③ 将目的基因导入受体细胞 、④ 目的基因的检测与鉴定 。其中 基因表达载体的构建 是核心步骤。
6. 培育转基因抗虫水稻时,获取Bt抗虫蛋白基因的方法有人工合成、构建基因文库和_PCR技术扩增_。构建基因表达载体时,目的基因的上游必须有 启动子 ,它是_RNA聚合酶 _识别和结合的位点,能驱动目的基因转录。将 Bt 抗虫蛋白基因导入水稻体细胞最常用的方法是_农杆菌转化法_;该方法将目的基因插入到Ti质粒的_T-DNA_上,通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入水稻细胞。在将重组质粒导入农杆菌细胞前,需要用__Ca2+_处理农杆菌。在分子水平上检测水稻细胞的染色体DNA上是否插入了Bt 抗虫蛋白基因,或检测该基因是否转录出mRNA,可采用_PCR技术(或核酸分子杂交)_技术;检测Bt 基因是否翻译成Bt 抗虫蛋白,可采用_抗原—抗体杂交_技术。从个体水平鉴定植株抗虫性状的实验思路是向转基因植株和普通植株接种等量同种害虫,在相同且适宜条件下培养,观察并比较两组植株的受害程度。
7. PCR全称为 聚合酶链式反应 ,该技术的原理是 DNA半保留复制 。该技术可以分为_变性_、_复性_和_延伸_三步。反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板,2种 引物 、4种 脱氧核苷酸和 耐高温的DNA聚合 酶。缓冲液还要添加Mg2+,目的是_激活DNA聚合酶_。
8. 若待扩增的目的基因两侧相关序列如下图,利用PCR技术扩增时选用的与A链结合的引物碱基序列为5'-_CTTGGA_-3'。若B链为该基因转录的模板链,则构建基因表达载体前应将启动子插入图示目的基因的_左侧_(填“左侧”或“右侧”)。PCR产物常采用_琼脂糖凝胶电泳__(填技术手段)来鉴定,并置于_紫外灯__下观察结果。
判断正误:
( √ )1、进行DNA的粗提取与鉴定实验时,可用鸡血红细胞代替鸡的肝细胞。
( × )2、在DNA提取液中加入体积分数为95%的酒精以便将不溶于酒精的蛋白质析出。
( √ )3、若要提高PCR产物的电泳迁移速率,可适当降低琼脂糖凝胶的浓度。
( √ )4、a个DNA模板分子完成20轮循环需要a×(221-2)个引物。
( × )5、PCR过程中,复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段。
( × )6、限制酶主要从原核生物中分离纯化,能切割RNA。
( × )7、可利用显微注射法将外源基因导入大肠杆菌等原核细胞,实现高效表达。
( × )8、应用PCR技术可检测转基因抗虫棉花植株中的目的基因是否存在,及其是否完全表达。
( × )9、蛋白质工程通过直接改造蛋白质的结构可获得满足人类需要的蛋白质。
( √ )10、转基因植物的花粉若扩散到野生环境中,可能导致基因污染,最终降低野生种群遗传多样性。
易错再练:
1. 为培育转基因抗虫棉,某科研团队用图甲的质粒及图乙 DNA 的片段构建重组表达载体,限制酶的切割位点及抗虫基因部分序列如图所示,图丙为不同限制酶的识别序列,为保证高效、准确拼接,以下分析
不合理的是( B )
A.启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的位点
B.宜选择酶1、2切割质粒,酶1、4切割目的 DNA 片段
C.氨苄青霉素抗性基因和抗虫基因的模板链位于重组表达载体的不同链
D.推测抗虫基因的转录产物序列为5'-AUGGCU ……AAAACU-3'
2. 玉米人工驯化过程中丢失了一个控制高蛋白含量的优良基因THP9基因,现利用基因工程技术将THP9 基因重新转到玉米细胞内。下列相关叙述正确的是( D )
A.若采用PCR 技术对一个 THP9 基因进行扩增,则第n代复制共需要引物2ⁿ-1个
B.PCR 过程中用到了缓冲液,缓冲液中
一般要添加 Mg²⁺用于激活 RNA 聚合酶
C.利用PCR 技术获取 THP9 基因时应选择引物1和引物4
D.构建重组质粒时,用Mfe I 、HindⅢ切割质粒, 用 EcoR I 、HindⅢ切割目的基因
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