精品解析：广西钦州市大寺中学2025—2026学年高二下学期6月考试生物试卷

广西钦州市大寺中学2026春季学期高二年级6月份考试 生物试卷 全卷满分100分，考试用时75分钟 一、选择题(本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。) 1. 敲除家猪成纤维细胞核中的MSTN基因以获得瘦肉率较高的猪。下列叙述合理的是（　　） A. 从卵巢中采集的卵母细胞应该立即通过显微操作去核用于核移植 B. 细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常无需添加血清等物质 C. 移植胚胎前，可不对受体进行妊娠检查和免疫学检查 D. 早期胚胎需要经过质量检测和性别鉴定后才能用于胚胎移植 2. 抗虫作物会使害虫种群抗性基因频率提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，下列措施不能实现上述目标的是（ ） A. 种植转入了两种不同抗虫基因的棉花 B. 轮换种植含不同抗虫基因的棉花品种 C. 扩大抗虫棉种植面积，并喷洒杀虫剂 D. 间行种植转基因抗虫棉与普通棉花 3. 为探究从冰冻多年的组织细胞中“复活”基因组的可能性，研究人员将-20℃冷冻后的实验小鼠解冻，检测发现细胞均死亡，细胞膜受损；提取不同组织细胞的细胞核，分别注入去核卵母细胞进行克隆，结果如表。下列叙述合理的是（　　） 细胞核来源 激活的重构胚数量(个) 发育至桑葚胚的比例(%) 成功构建核移植胚胎干细胞系(ntES)的比例(%) 脑 109 39.4 10.1 胰腺 85 15.3 1.2 心脏 82 6.1 0 A. 利用差速离心法可从解冻组织匀浆液中获得细胞核 B. 细胞核注入去核卵母细胞后还需采用电融合法将两者融合 C. 利用心脏来源的细胞核未能成功构建ntES，说明其没有全能性 D. 利用胰腺细胞的核成功构建ntES的比例比脑低，说明此分化程度更高 4. 新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是（ ） 技术(或仪器) 应用 A X射线衍射技术 DNA的复制 B 杂交瘤技术 制备单克隆抗体 C 光学显微镜 观察叶绿体的基粒 D 细胞融合技术 提高优良母畜的繁殖量 A. A B. B C. C D. D 5. “酵母菌的纯培养”实验中，下列操作不规范的是（ ） A. 在火焰旁冷却接种环 B. 试管棉塞放超净台上 C. 接种前灼烧试管口 D. 划线时轻柔而迅速 6. 2018年，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩两头雌性。科学家计划利用之前保存的雄性北方白犀牛的精子，结合现代生物技术来繁育后代。下列关于该计划的叙述，合理的是（ ） A. 可将保存的精子直接用于体外受精 B. 应将精子培养在人工配制的获能液中使其获能后，再注入雌性生殖道进行人工授精 C. 应将桑椹胚的内细胞团均等分割，以利于后续胚胎的发育 D. 可将北方白犀牛的体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中，并将早期胚胎移植给代孕母体 7. 动植物育种中可综合运用多种生物技术，下列生物育种技术手段中不属于克隆范畴的是（ ） A. 高产奶牛体细胞核移植培育犊牛 B. 对桑葚胚进行胚胎分割获得同卵双胎奶牛 C. 选择优良种猪体外受精培育优良仔猪 D. 取茎尖组织细胞培养获得脱毒的草莓 8. 利用细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞器组合是（　　） A. 线粒体和液泡 B. 叶绿体和中心体 C. 叶绿体和线粒体 D. 内质网和高尔基体 9. 传统发酵食品如酸奶、泡菜、果酒等深受人们喜爱。这些食品的制作都利用了微生物的（ ） A. 有氧呼吸 B. 无氧呼吸 C. 光合作用 D. 化能合成作用 10. 科研人员利用基因型为S4S4QQ和S11S11qq的马铃薯品系杂交得到F1，取F1花药离体培养后再经秋水仙素处理诱导染色体加倍，最终选育出基因型为S4S4qq的纯合品系。该育种过程称为（　　） A. 杂交育种 B. 诱变育种 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种 11. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ） A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 12. 植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为（　　） A. 植物细胞培养、快速繁殖、杂交+单倍体育种、体细胞杂交 B. 快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交+单倍体育种 C. 快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 D. 植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交+单倍体育种 13. 农杆菌转化法可以将目的基因导入某些植物细胞，目的基因应与农杆菌的Ti质粒构建表达载体。下列Ti质粒最符合的是（　　） A. B. C. D. 14. 科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GFP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为（　　） A. F1，R1 B. F2，R1 C. F1，R2 D. F2，R2 15. 高中生物学实验中，下列实验操作能达到预期目的的是（　　） A. 用高浓度蔗糖溶液处理叶肉细胞观察质壁分离 B. 用酸性重铬酸钾溶液直接检测果醋发酵后是否生成醋酸 C. 探究绿叶中色素种类的实验中采用纸层析法提取色素 D. 向血细胞计数板上滴加培养液后再盖上盖玻片以避免调查结果偏大 16. 生产中培育草莓脱毒苗常用的方法是（ ） A. 取茎尖分生组织进行组织培养 B. 人工诱导基因突变 C. 进行远缘植物体细胞杂交 D. 花药离体培养得到单倍体植株 第II卷(非选择题) 二、综合题(共60分，请考生按要求答题) 17. 肿瘤坏死因子α（TNF - α）是一种细胞因子，浓度高时会引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了抗TNF - α的单克隆抗体，用于治疗由TNF - α引发的疾病，制备流程如下图所示。已知：细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断；已免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活；小鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖，如果它的D途径被阻断，它会因不能合成DNA而死亡。回答下列问题： （1）科学家向小鼠体内注射TNF - α的目的是____________；对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的____________中获取B淋巴细胞。 （2）利用特定的 ______________________________ 培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入 ______________________________ 进行培养，一段时间后收集存活细胞；在该培养基中，杂交瘤细胞通过 ______________________________ 途径合成DNA。 （3）④过程进行的是 ______________________________ 和抗体检测，抗体检测的目的是 ______________________________ ；若要获得大量的抗TNF - α的单克隆抗体，可对目标杂交瘤细胞进行的处理是 ______________________________ （答出1点）。 18. 小鼠基因W编码的蛋白质可调节脂肪代谢。研究人员将基因W转入酵母菌并使其稳定表达，实现了该蛋白的高效合成。该过程中用到末端脱氧核苷酸转移酶（TdT），该酶不需要模板，可在DNA的3´端随机添加4种脱氧核苷酸，若只提供1种脱氧核苷酸，则连续添加多个该种脱氧核苷酸，称为同聚物加尾。相关信息所示。 （1）载体上RNA聚合酶识别和结合的部位是_______，载体上与其能自我复制相关的结构是_______。 （2）研究人员选取2种限制酶切开载体，再用TdT分别对基因W和切开的载体进行同聚物加尾，然后将两者连接；若载体酶切后产生的黏性末端为5´端突出，则需先用DNA聚合酶补平后再进行同聚物加尾。因后续研究还需要用这2种限制酶将基因W从重组载体中切下，据图分析，应选取的2种限制酶为___________。 （3）基因W和载体两者的同聚物尾配对后形成的重组载体存在部分单链区，为构建完整重组载体需要的2种酶是_______________________________，该过程中___________（填“需要”或“不需要”）添加引物，原因是___________________________________________________________________________________。 （4）为检测基因W是否在酵母菌中表达出相应蛋白，在分子水平上的检测方法是__________________。 19. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用。科研人员从森林土壤中筛选纤维素分解菌并计数，进行了如图所示操作。请回答下列有关问题： （1）防止杂菌污染是研究和应用微生物的前提之一。在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用_______法进行灭菌，对操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒。筛选时所用的培养基需添加_______作为唯一碳源。 （2）图中的接种方法是_______。用该计数方法得到的菌落数量比活菌的实际值小，原因是_______；若用显微镜计数法统计，结果比实际活菌数_______（偏大/偏小），原因是_______。 （3）可通过菌落周围的透明圈判断_______（填“甲”或“乙”）分解纤维素能力更强。对筛选出的纤维素分解菌扩大培养时，需使用_______（固体/液体）培养基。 （4）若将稀释倍数是105的菌液涂布平板，3个平板平均菌落数分别为111，120，129，则每1 mL菌液中活菌数为_______个。 20. 科研人员推测在植物组培过程中，E蛋白（细胞分裂素受体）通过与M基因启动子区域结合，促进M基因表达，进而促进芽的再生。为验证该推测是否正确，研究小组进行了相关实验。回答下列问题： （1）植物细胞在离体培养条件下可形成完整植株，体现出植物细胞具有______________；在植物组培过程中，向培养基中添加生长素和细胞分裂素，能启动由愈伤组织形成芽的_______过程。 （2）M基因启动子的扩增 据图分析，为了扩增M基因启动子，研究小组先用限制酶_______（填图中序号）处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ形成环状DNA；再将环状DNA用限制酶_______（填图中序号）处理得到了片段Ⅱ；根据片段Ⅱ，从引物A、B、C、D中，选择______________组合能扩增出M基因启动子。 （3）E蛋白对M基因启动子的作用 研究小组进行如图所示转基因操作，培养一段时间后，检测荧光素酶催化荧光素氧化发出的荧光，结果显示，与对照组（只导入质粒2）相比，转基因细胞荧光强度较高。 图中，质粒上甲、乙、丙处依次为______________（填选项前字母）。 a．E基因启动子b．组成型启动子c．M基因启动子d．E基因e．M基因f．荧光素酶基因 21. 近年来，我国科研工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1。与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2。请回答下列问题： （1）利用________________________酶（填2种）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入含有________________________的混合气体的CO2培养箱中培养。 （2）推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是____________________________________________________________________。 （3）通常情况下，卵母细胞要发育到____________________________________期才适合进行核移植，早期胚胎要发育到____________________________________时才适合进行胚胎移植。 （4）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和____________________________________，不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 广西钦州市大寺中学2026春季学期高二年级6月份考试 生物试卷 全卷满分100分，考试用时75分钟 一、选择题(本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。) 1. 敲除家猪成纤维细胞核中的MSTN基因以获得瘦肉率较高的猪。下列叙述合理的是（　　） A. 从卵巢中采集的卵母细胞应该立即通过显微操作去核用于核移植 B. 细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常无需添加血清等物质 C. 移植胚胎前，可不对受体进行妊娠检查和免疫学检查 D. 早期胚胎需要经过质量检测和性别鉴定后才能用于胚胎移植 【答案】C 【解析】 【详解】A、从卵巢中采集的卵母细胞尚未发育成熟，需体外培养至减数第二次分裂中期才具备支持细胞核全能性表达的能力，才能进行去核操作用于核移植，不能立即去核，A错误； B、由于人们对细胞所需的全部营养物质尚未完全研究清楚，动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等天然物质，补充合成培养基中缺乏的未知营养成分，B错误； C、受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，是胚胎移植的生理学基础之一，因此移植前无需进行免疫学检查；且妊娠检查是胚胎移植后判断是否成功受孕的操作，不属于移植前的操作，C正确； D、本实验目的是获得敲除MSTN基因的高瘦肉率猪，无需筛选特定性别，不需要进行性别鉴定，仅需对早期胚胎进行质量检测合格即可移植，D错误。 2. 抗虫作物会使害虫种群抗性基因频率提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，下列措施不能实现上述目标的是（ ） A. 种植转入了两种不同抗虫基因的棉花 B. 轮换种植含不同抗虫基因的棉花品种 C. 扩大抗虫棉种植面积，并喷洒杀虫剂 D. 间行种植转基因抗虫棉与普通棉花 【答案】C 【解析】 【详解】A、转入两种不同抗虫基因的棉花，害虫需同时具备对应两种抗虫基因的抗性才能存活，大幅降低了抗性害虫的存活概率，可减缓抗性基因频率上升，能实现目标，A不符合题意； B、轮换种植含不同抗虫基因的棉花品种，对害虫的选择压力交替变化，避免单一抗性基因被持续定向选择，可减缓抗性基因频率上升，能实现目标，B不符合题意； C、扩大抗虫棉种植面积同时喷洒杀虫剂，会对害虫形成双重定向选择，无抗性的害虫大量死亡，抗性害虫的生存优势显著提升，会加快害虫种群抗性基因频率上升，无法保持抗虫效果，不能实现目标，C符合题意； D、间行种植转基因抗虫棉与普通棉花，普通棉花区域可作为无抗性害虫的“避难所”，使无抗性害虫也能存活，避免仅抗性害虫被保留，抗性害虫和无抗性的害虫可进行基因交流，进而可减缓抗性基因频率上升，能实现目标，D不符合题意。 3. 为探究从冰冻多年的组织细胞中“复活”基因组的可能性，研究人员将-20℃冷冻后的实验小鼠解冻，检测发现细胞均死亡，细胞膜受损；提取不同组织细胞的细胞核，分别注入去核卵母细胞进行克隆，结果如表。下列叙述合理的是（　　） 细胞核来源 激活的重构胚数量(个) 发育至桑葚胚的比例(%) 成功构建核移植胚胎干细胞系(ntES)的比例(%) 脑 109 39.4 10.1 胰腺 85 15.3 1.2 心脏 82 6.1 0 A. 利用差速离心法可从解冻组织匀浆液中获得细胞核 B. 细胞核注入去核卵母细胞后还需采用电融合法将两者融合 C. 利用心脏来源的细胞核未能成功构建ntES，说明其没有全能性 D. 利用胰腺细胞的核成功构建ntES的比例比脑低，说明此分化程度更高 【答案】A 【解析】 【详解】A、差速离心法通过控制不同的离心速率，可将质量不同的细胞组分分离，细胞核质量大，会在较低转速下最先沉淀，因此可从解冻组织匀浆液中获得细胞核，A正确； B、电融合法是用于诱导供体细胞与去核卵母细胞的细胞膜融合的操作，若已经直接将提取的细胞核注入去核卵母细胞的细胞质中，无需再进行电融合，只需进行激活处理即可，B错误； C、细胞核全能性是指细胞核含有发育为完整个体的全套遗传物质，具有发育成完整个体的潜能，利用心脏来源的细胞核未成功构建ntES是受当前实验条件限制，不能说明其细胞核本身不具有全能性，C错误； D、核移植的成功比例受冷冻对不同组织细胞核的损伤程度、操作误差等多种因素影响，不能仅根据成功率更低就直接判定胰腺细胞分化程度更高，且神经细胞属于高度分化的终末细胞，分化程度高于多数胰腺细胞，D错误。 4. 新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是（ ） 技术(或仪器) 应用 A X射线衍射技术 DNA的复制 B 杂交瘤技术 制备单克隆抗体 C 光学显微镜 观察叶绿体的基粒 D 细胞融合技术 提高优良母畜的繁殖量 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【详解】A、富兰克林和威尔金斯应用X射线衍射技术获得了高质量的DNA衍射图谱，与DNA的复制无关，A错误； B、通过杂交瘤技术可获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生抗体，可用来制备单克隆抗体，B正确； C、利用光学显微镜只能观察叶绿体的形态，无法观察叶绿体的基粒，C错误； D、通过细胞融合技术不能提高优良母畜的繁殖量，提高优良母畜繁殖量依靠胚胎移植、超数排卵等技术，D错误。 5. “酵母菌的纯培养”实验中，下列操作不规范的是（ ） A. 在火焰旁冷却接种环 B. 试管棉塞放超净台上 C. 接种前灼烧试管口 D. 划线时轻柔而迅速 【答案】B 【解析】 【详解】A、接种环灼烧灭菌后需在酒精灯火焰旁的无菌区冷却，既可以避免高温烫死待接种的酵母菌，也能防止接种环被环境杂菌污染，操作规范，A不符合题意； B、试管棉塞放在超净台台面上时，会被台面上可能存在的杂菌污染，后续塞回试管时会造成培养基、菌种污染，正确操作应将棉塞夹在手指缝隙中，该操作不规范，B符合题意； C、接种前灼烧试管口可以杀灭试管口附着的杂菌，避免杂菌侵入试管内部污染培养物，属于标准无菌操作，C不符合题意； D、划线时动作轻柔可防止划破固体培养基表面影响菌落分离，动作迅速可减少培养物和空气的接触时间，降低杂菌污染概率，操作规范，D不符合题意。 6. 2018年，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩两头雌性。科学家计划利用之前保存的雄性北方白犀牛的精子，结合现代生物技术来繁育后代。下列关于该计划的叙述，合理的是（ ） A. 可将保存的精子直接用于体外受精 B. 应将精子培养在人工配制的获能液中使其获能后，再注入雌性生殖道进行人工授精 C. 应将桑椹胚的内细胞团均等分割，以利于后续胚胎的发育 D. 可将北方白犀牛的体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中，并将早期胚胎移植给代孕母体 【答案】D 【解析】 【详解】A、只有获能的精子才能完成受精过程，保存的精子未经过获能处理，无法直接用于体外受精，A错误； B、人工授精时，精子可在雌性生殖道内自然完成获能，无需提前在体外获能液中培养；且仅剩的两头雌性是该物种仅存的个体，直接作为受孕母体存在极高的物种灭绝风险，操作不合理，B错误； C、内细胞团是囊胚阶段才分化形成的结构，桑椹胚阶段细胞未发生分化，不存在内细胞团，胚胎分割时需要均等分割的是囊胚的内细胞团，C错误； D、MⅡ期卵母细胞的细胞质中含有调控动物细胞核全能性表达的物质，将北方白犀牛的体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中可构建重构胚，培养至早期胚胎后移植给亲缘关系接近的代孕母体即可完成发育，D正确。 7. 动植物育种中可综合运用多种生物技术，下列生物育种技术手段中不属于克隆范畴的是（ ） A. 高产奶牛体细胞核移植培育犊牛 B. 对桑葚胚进行胚胎分割获得同卵双胎奶牛 C. 选择优良种猪体外受精培育优良仔猪 D. 取茎尖组织细胞培养获得脱毒的草莓 【答案】C 【解析】 【详解】A、克隆是指无性生殖，不经过两性生殖细胞结合，直接由体细胞或无性繁殖器官产生新个体。高产奶牛体细胞核移植培育犊牛，属于动物体细胞核移植技术，是无性生殖，属于克隆，A不符合题意； B、对桑葚胚进行胚胎分割获得同卵双胎奶牛，是无性繁殖，属于克隆，B不符合题意； C、选择优良种猪体外受精培育优良仔猪，经过精子和卵细胞的结合，是有性生殖，不属于克隆，C符合题意； D、取茎尖组织细胞培养获得脱毒草莓，属于植物组织培养技术，是无性生殖，属于克隆，D不符合题意。 8. 利用细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞器组合是（　　） A. 线粒体和液泡 B. 叶绿体和中心体 C. 叶绿体和线粒体 D. 内质网和高尔基体 【答案】B 【解析】 【详解】A、线粒体是动物细胞和植物细胞共有的细胞器，无法证明细胞中含有小鼠骨髓瘤细胞的成分，A错误； B、叶绿体是烟草叶肉细胞特有的细胞器，小鼠骨髓瘤细胞不含叶绿体；中心体是动物细胞特有的细胞器，烟草是高等植物，细胞不含中心体，若融合细胞同时含有这两种细胞器，即可证明是两种细胞融合得到的杂种细胞，B正确； C、线粒体是两种细胞共有的细胞器，仅能通过叶绿体证明含有烟草叶肉细胞的成分，无法证明含有小鼠骨髓瘤细胞的成分，C错误； D、内质网和高尔基体是动物细胞和植物细胞共有的细胞器，无法区分两种细胞的成分，D错误。 9. 传统发酵食品如酸奶、泡菜、果酒等深受人们喜爱。这些食品的制作都利用了微生物的（ ） A. 有氧呼吸 B. 无氧呼吸 C. 光合作用 D. 化能合成作用 【答案】B 【解析】 【详解】酸奶、泡菜制作利用乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，果酒制作利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，参与发酵的乳酸菌、酵母菌均为异养生物，无法进行光合作用和化能合成作用，B符合题意，ACD不符合题意。 10. 科研人员利用基因型为S4S4QQ和S11S11qq的马铃薯品系杂交得到F1，取F1花药离体培养后再经秋水仙素处理诱导染色体加倍，最终选育出基因型为S4S4qq的纯合品系。该育种过程称为（　　） A. 杂交育种 B. 诱变育种 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种 【答案】C 【解析】 【详解】题干中先杂交得到F1，再取F1花药进行离体培养获得单倍体，经秋水仙素处理诱导染色体加倍后选育得到纯合品系，完全符合单倍体育种的流程，C正确，ABD错误。 11. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ） A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、菌落是单个或多个细菌繁殖形成的子细胞群体，菌落中的细菌数目受培养时间、菌种类型等因素影响，并不固定，A错误； B、单个细菌肉眼不可见，平板上的一个菌落是由单个或少数细菌繁殖形成的大量子细胞的集合，不是一个细菌，B错误； C、若两个或多个活菌连在一起，涂布后只会形成一个菌落，因此统计的菌落数通常低于活菌的实际数目，二者并不相同，C错误； D、当稀释度足够高时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可通过统计菌落数推测活菌数，D正确。 12. 植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为（　　） A. 植物细胞培养、快速繁殖、杂交+单倍体育种、体细胞杂交 B. 快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交+单倍体育种 C. 快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 D. 植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交+单倍体育种 【答案】A 【解析】 【详解】甲对应获取代谢物的生产目标，植物细胞培养可通过体外培养植物细胞提取次生代谢产物；乙对应优良性状仅来自单株的植株获取需求，快速繁殖属于无性繁殖，可保持单株优良性状，短时间获得大量遗传特性一致的植株；丙对应优良性状来自亲缘关系近的不同植株，可先通过杂交集中优良性状，再结合单倍体育种快速获得纯合可稳定遗传的品种；丁对应亲本亲缘关系远的情况，体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，获得整合两个亲本优良性状的杂种植株，B、C、D错误，A正确。 13. 农杆菌转化法可以将目的基因导入某些植物细胞，目的基因应与农杆菌的Ti质粒构建表达载体。下列Ti质粒最符合的是（　　） A. B. C. D. 【答案】D 【解析】 【详解】农杆菌转化法中，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA区域，且要用限制酶切割，酶切位点应在T-DNA内，同时为避免自身环化等，最好用两种不同限制酶。A、B中酶切位点不在T-DNA理想位置或单一酶切，C是同一种酶切，易自身环化，D用两种酶切且位点在T-DNA内，符合要求，D正确，ABC错误。 故选D。 14. 科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GFP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为（　　） A. F1，R1 B. F2，R1 C. F1，R2 D. F2，R2 【答案】A 【解析】 【详解】结合图1和图2推测，P-GFP融合基因电泳后的DNA片段较大，未插入GFP基因则电泳后的DNA片段较小，5个品系细胞中有的只扩增出小片段或大片段，有的两种片段均有，应选择图1中的引物组合是F1、R1，A正确，BCD错误。 故选A。 15. 高中生物学实验中，下列实验操作能达到预期目的的是（　　） A. 用高浓度蔗糖溶液处理叶肉细胞观察质壁分离 B. 用酸性重铬酸钾溶液直接检测果醋发酵后是否生成醋酸 C. 探究绿叶中色素种类的实验中采用纸层析法提取色素 D. 向血细胞计数板上滴加培养液后再盖上盖玻片以避免调查结果偏大 【答案】A 【解析】 【详解】A、高浓度蔗糖溶液会导致叶肉细胞快速失水，发生质壁分离，因此能够观察到质壁分离现象，A正确； B、酸性重铬酸钾用于检测酒精（在酸性条件下与酒精反应呈灰绿色），而检测醋酸需用pH试纸或酸碱指示剂，直接使用酸性重铬酸钾无法检测醋酸，B错误； C、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素，纸层析法是用于分离绿叶中的色素，C错误； D、采用抽样检测的方法对酵母菌等微生物进行计数，应先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入计数室。若先滴加培养液后盖盖玻片，可能导致细胞堆积或溢出，使计数结果偏大，D错误。 故选A。 16. 生产中培育草莓脱毒苗常用的方法是（ ） A. 取茎尖分生组织进行组织培养 B. 人工诱导基因突变 C. 进行远缘植物体细胞杂交 D. 花药离体培养得到单倍体植株 【答案】A 【解析】 【分析】马铃薯、草莓和香蕉等通常是用无性繁殖的方式进行繁殖的，它们感染的病毒很容易传给后代。病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。科学家就发现植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。 【详解】A．茎尖分生组织细胞分裂旺盛，病毒极少甚至无病毒，通过植物组织培养技术可培育出脱毒苗，A正确； B．人工诱导基因突变属于诱变育种，目的是创造新性状，与脱除病毒无关，B错误； C．远缘植物体细胞杂交用于克服生殖隔离，获得杂种细胞，与脱毒无关，C错误； D．花药离体培养得到单倍体植株属于单倍体育种，用于快速获得纯合子，植株弱小且仍可能携带病毒，D错误。 故选A。 第II卷(非选择题) 二、综合题(共60分，请考生按要求答题) 17. 肿瘤坏死因子α（TNF - α）是一种细胞因子，浓度高时会引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了抗TNF - α的单克隆抗体，用于治疗由TNF - α引发的疾病，制备流程如下图所示。已知：细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断；已免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活；小鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖，如果它的D途径被阻断，它会因不能合成DNA而死亡。回答下列问题： （1）科学家向小鼠体内注射TNF - α的目的是____________；对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的____________中获取B淋巴细胞。 （2）利用特定的 ______________________________ 培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入 ______________________________ 进行培养，一段时间后收集存活细胞；在该培养基中，杂交瘤细胞通过 ______________________________ 途径合成DNA。 （3）④过程进行的是 ______________________________ 和抗体检测，抗体检测的目的是 ______________________________ ；若要获得大量的抗TNF - α的单克隆抗体，可对目标杂交瘤细胞进行的处理是 ______________________________ （答出1点）。 【答案】（1） ①. 刺激小鼠产生能分泌抗TNF-α抗体的B淋巴细胞 ②. 脾脏 （2） ①. 选择 ②. 氨基蝶呤 ③. S （3） ①. 克隆化培养 ②. 筛选出能分泌所需抗TNF-α抗体的杂交瘤细胞 ③. 注射到小鼠腹腔内增殖，或体外条件下大规模培养 【解析】 【小问1详解】 依据题干信息可知，TNF-α在本实验中属于抗原，所以向小鼠体内注射TNF - α 的目的是刺激小鼠产生能分泌抗TNF-α抗体的B淋巴细胞；对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞。 【小问2详解】 融合后需要用选择培养基（HAT培养基）筛选杂交瘤细胞，根据题干信息：D途径可被氨基蝶呤阻断，未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞只有D途径，D被阻断后无法合成DNA会死亡；未融合的B细胞不能长期增殖；只有杂交瘤细胞可以利用B淋巴细胞带来的S途径合成DNA，因此在培养基中加入氨基蝶呤，只有杂交瘤细胞可以存活，杂交瘤细胞通过S途径合成DNA。 【小问3详解】 得到杂交瘤细胞后，需要经过克隆化培养和抗体检测，抗体检测的目的是筛选出能分泌特异性抗TNF-α抗体的杂交瘤细胞；大量获得单克隆抗体有两种常用方法：将目标杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，从腹水中提取抗体；或对杂交瘤细胞进行体外大规模培养，从培养液中提取抗体。 18. 小鼠基因W编码的蛋白质可调节脂肪代谢。研究人员将基因W转入酵母菌并使其稳定表达，实现了该蛋白的高效合成。该过程中用到末端脱氧核苷酸转移酶（TdT），该酶不需要模板，可在DNA的3´端随机添加4种脱氧核苷酸，若只提供1种脱氧核苷酸，则连续添加多个该种脱氧核苷酸，称为同聚物加尾。相关信息所示。 （1）载体上RNA聚合酶识别和结合的部位是_______，载体上与其能自我复制相关的结构是_______。 （2）研究人员选取2种限制酶切开载体，再用TdT分别对基因W和切开的载体进行同聚物加尾，然后将两者连接；若载体酶切后产生的黏性末端为5´端突出，则需先用DNA聚合酶补平后再进行同聚物加尾。因后续研究还需要用这2种限制酶将基因W从重组载体中切下，据图分析，应选取的2种限制酶为___________。 （3）基因W和载体两者的同聚物尾配对后形成的重组载体存在部分单链区，为构建完整重组载体需要的2种酶是_______________________________，该过程中___________（填“需要”或“不需要”）添加引物，原因是___________________________________________________________________________________。 （4）为检测基因W是否在酵母菌中表达出相应蛋白，在分子水平上的检测方法是__________________。 【答案】（1） ①. 启动子 ②. 复制原点 （2）Pst Ⅰ 、 Xho Ⅰ  （3） ①. DNA聚合酶、DNA连接酶 ②. 不需要 ③. 同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引物起始 （4）抗原-抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能够启动下游目的基因的转录过程，是目的基因表达的必需元件。复制原点位于载体，可以保证载体在受体细胞中能自我复制。 【小问2详解】 要保证重组载体中基因W可以被完整切下，需要选择两种限制酶，使得它们的识别序列在加尾后仍能被保留。 由图可知，基因W和载体上都有Sal Ⅰ的识别序列和切割位点，如果选用它会破坏W基因的结构，使W基因失活，因此不能选用。若选用Pst Ⅰ和Kpn Ⅰ ，酶切后产生的黏性末端为3´端突出，若要重新从重组载体上切下，Pst Ⅰ切割载体后要加同聚物G尾，Kpn Ⅰ切割载体后要加同聚物C尾，这样在重组载体中才能出现它们完整的识别序列而再次进行切割。若选用Xho Ⅰ，酶切后产生的黏性末端为5´端突出，可以先用DNA聚合酶补平，若要在重组载体中出现其完整的识别序列而再次进行切割，则要加同聚物G尾。载体在加尾时，只能加入一种脱氧核苷酸，否则会随机连接，这样载体两端只能加G尾。同理，目的基因的两端只能加互补的C尾。为了将质粒和基因W连接到一起，同聚物加尾间要能发生碱基互补配对，故应选择Pst Ⅰ 、 Xho Ⅰ 。 【小问3详解】 由于用Xho Ⅰ进行切割会产生黏性末端为5´端突出，形成单链区，需要用DNA聚合酶进行补平，此外，W基因和载体形成重组载体时，中间有缺口，补全缺口后二者才能连接起来形成完整的重组载体，因此构建完整重组载体需要的2种酶：DNA聚合酶（补全单链区）和DNA连接酶（连接缺口）。该过程不需要添加引物，原因是：同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引物起始。 【小问4详解】 检测基因W是否表达出相应蛋白，由于基因表达的产物是蛋白质，分子水平检测蛋白质方法是抗原-抗体杂交。 19. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用。科研人员从森林土壤中筛选纤维素分解菌并计数，进行了如图所示操作。请回答下列有关问题： （1）防止杂菌污染是研究和应用微生物的前提之一。在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用_______法进行灭菌，对操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒。筛选时所用的培养基需添加_______作为唯一碳源。 （2）图中的接种方法是_______。用该计数方法得到的菌落数量比活菌的实际值小，原因是_______；若用显微镜计数法统计，结果比实际活菌数_______（偏大/偏小），原因是_______。 （3）可通过菌落周围的透明圈判断_______（填“甲”或“乙”）分解纤维素能力更强。对筛选出的纤维素分解菌扩大培养时，需使用_______（固体/液体）培养基。 （4）若将稀释倍数是105的菌液涂布平板，3个平板平均菌落数分别为111，120，129，则每1 mL菌液中活菌数为_______个。 【答案】（1） ①. 干热灭菌    ②. 纤维素 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落  ③. 偏大 ④. 显微镜下无法区分细胞的死活，计数时包括了死细胞 （3） ①. 甲 ②. 液体  （4）1.2×108  【解析】 【小问1详解】 在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌，对操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒。因为要筛选纤维素分解菌，所以筛选时所用的培养基需添加纤维素作为唯一碳源。 【小问2详解】 图中的接种方法是稀释涂布平板法。用该计数方法得到的菌落数量比活菌的实际值小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；若用显微镜计数法统计，由于显微镜计数法无法区分细胞的死活，计数时包括了死细胞，所以结果比实际活菌数偏大。 【小问3详解】 甲菌落的透明圈直径与菌落直径的比值大于乙，说明甲菌落分解纤维素的能力更强。对筛选出的纤维素分解菌扩大培养时，需使用液体培养基。 【小问4详解】 若将稀释倍数是105的菌液涂布平板，3个平板平均菌落数分别为111、120、129，则每1mL菌液中活菌数为（111+120+129）÷3÷0.1×105=1.2×108个。 20. 科研人员推测在植物组培过程中，E蛋白（细胞分裂素受体）通过与M基因启动子区域结合，促进M基因表达，进而促进芽的再生。为验证该推测是否正确，研究小组进行了相关实验。回答下列问题： （1）植物细胞在离体培养条件下可形成完整植株，体现出植物细胞具有______________；在植物组培过程中，向培养基中添加生长素和细胞分裂素，能启动由愈伤组织形成芽的_______过程。 （2）M基因启动子的扩增 据图分析，为了扩增M基因启动子，研究小组先用限制酶_______（填图中序号）处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ形成环状DNA；再将环状DNA用限制酶_______（填图中序号）处理得到了片段Ⅱ；根据片段Ⅱ，从引物A、B、C、D中，选择______________组合能扩增出M基因启动子。 （3）E蛋白对M基因启动子的作用 研究小组进行如图所示转基因操作，培养一段时间后，检测荧光素酶催化荧光素氧化发出的荧光，结果显示，与对照组（只导入质粒2）相比，转基因细胞荧光强度较高。 图中，质粒上甲、乙、丙处依次为______________（填选项前字母）。 a．E基因启动子b．组成型启动子c．M基因启动子d．E基因e．M基因f．荧光素酶基因 【答案】（1） ①. 全能性 ②. 再分化 （2） ①. 1 ②. 2 ③. B和C （3）d、c、f 【解析】 【小问1详解】 植物细胞在离体培养条件下可形成完整植株，其原理是植物细胞的全能性；在植物组培过程中，向培养基中添加生长素和细胞分裂素，能启动由愈伤组织形成芽的再分化过程，且生长素和细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向。 【小问2详解】 据图分析，为了扩增M基因启动子，研究小组先用限制酶1和DNA连接酶处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ形成环状DNA；结合图示可知，再将环状DNA用限制酶2处理得到了片段Ⅱ，因为限制酶2所在的片段碱基序列已知，可用来设计引物，由于扩增的部位是M基因的启动子，且子链延伸的方向为5’→3’，因此，根据片段Ⅱ，从引物A、B、C、D中，可选择B和C组合能扩增出M基因启动子。 【小问3详解】 该研究的目的是探究E蛋白对M基因启动子的作用，根据目的可知，需要先表达出E蛋白，而后再设计上M基因的启动子，由于检测的结果是转基因细胞荧光强度高，因此相应的甲应该是E基因，乙应该为M基因的启动子，丙应该是荧光素酶基因，即甲、乙、丙对应的依次为d、c、f。 21. 近年来，我国科研工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1。与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2。请回答下列问题： （1）利用________________________酶（填2种）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入含有________________________的混合气体的CO2培养箱中培养。 （2）推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是____________________________________________________________________。 （3）通常情况下，卵母细胞要发育到____________________________________期才适合进行核移植，早期胚胎要发育到____________________________________时才适合进行胚胎移植。 （4）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和____________________________________，不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在________________。 【答案】（1） ①. 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 ②. 95%空气和5%的CO2 （2）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 （3） ①. 减数第二次分裂中期##MⅡ期 ②. 桑葚胚或囊胚 （4） ①. 动物细胞融合 ②. 生殖隔离 【解析】 【小问1详解】 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织可分散成单个细胞，故利用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。动物细胞培养过程中，CO2培养箱中培养的气体条件是95%空气和5%的CO2。 【小问2详解】 结合图可知，注入的神秘浓度比的药物的作用是激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程。 【小问3详解】 卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时，细胞已经成熟，具备受精能力，故卵母细胞要发育到减数第二次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到桑葚胚或囊胚时才适合进行胚胎移植。 【小问4详解】 图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和动物细胞融合（孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞融合）。由题干可知，大鼠和小鼠是两个远亲物种，二者之间存在生殖隔离，自然状态下无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育，因此不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $