广西钦州市大寺中学2025—2026学年高二下学期6月考试生物试卷

**基本信息** 聚焦现代生物科技，以克隆猴、抗虫棉等前沿情境为载体，考查细胞工程、基因工程等核心知识，融合科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/40分|核移植、细胞融合、微生物培养等|第3题结合实验数据表格分析细胞核全能性差异，体现科学思维| |非选择题|5题/60分|单克隆抗体制备、基因工程操作、微生物筛选计数等|第19题通过稀释涂布平板法流程考查活菌计数，第21题以克隆猴操作情境整合核移植技术，突出探究实践与生命观念|

广西钦州市大寺中学2026春季学期高二年级6月份考试生物试卷 全卷满分100分，考试用时75分钟 一、选择题（本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分;第13~16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。） 1．敲除家猪成纤维细胞核中的MSTN基因以获得瘦肉率较高的猪。下列叙述合理的是（　　） A．从卵巢中采集的卵母细胞应该立即通过显微操作去核用于核移植 B．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常无需添加血清等物质 C．移植胚胎前，可不对受体进行妊娠检查和免疫学检查 D．早期胚胎需要经过质量检测和性别鉴定后才能用于胚胎移植 2．抗虫作物会使害虫种群抗性基因频率提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，下列措施不能实现上述目标的是（     ） A．种植转入了两种不同抗虫基因的棉花 B．轮换种植含不同抗虫基因的棉花品种 C．扩大抗虫棉种植面积，并喷洒杀虫剂 D．间行种植转基因抗虫棉与普通棉花 3．为探究从冰冻多年的组织细胞中“复活”基因组的可能性，研究人员将-20℃冷冻后的实验小鼠解冻，检测发现细胞均死亡，细胞膜受损；提取不同组织细胞的细胞核，分别注入去核卵母细胞进行克隆，结果如表。下列叙述合理的是 细胞核来源 激活的重构胚数量(个) 发育至桑葚胚的比例(%) 成功构建核移植胚胎干细胞系(ntES)的比例(%) 脑 109 39.4 10.1 胰腺 85 15.3 1.2 心脏 82 6.1 0 A．利用差速离心法可从解冻组织匀浆液中获得细胞核B．细胞核注入去核卵母细胞后还需采用电融合法将两者融合 C．利用心脏来源的细胞核未能成功构建ntES，说明其没有全能性 D．利用胰腺细胞的核成功构建ntES的比例比脑低，说明此分化程度更高 4．新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是（     ） 技术(或仪器) 应用 A X射线衍射技术 DNA的复制 B 杂交瘤技术 制备单克隆抗体 C 光学显微镜 观察叶绿体的基粒 D 细胞融合技术 提高优良母畜的繁殖量 A．A B．B C．C D．D 5．“酵母菌的纯培养”实验中，下列操作不规范的是（     ） A．在火焰旁冷却接种环 B．试管棉塞放超净台上 C．接种前灼烧试管口 D．划线时轻柔而迅速 6．2018年，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩两头雌性。科学家计划利用之前保存的雄性北方白犀牛的精子，结合现代生物技术来繁育后代。下列关于该计划的叙述，合理的是（     ） A．可将保存的精子直接用于体外受精 B．应将精子培养在人工配制的获能液中使其获能后，再注入雌性生殖道进行人工授精 C．应将桑椹胚的内细胞团均等分割，以利于后续胚胎的发育 D．可将北方白犀牛的体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中，并将早期胚胎移植给代孕母体 7．动植物育种中可综合运用多种生物技术，下列生物育种技术手段中不属于克隆范畴的是（     ） A．高产奶牛体细胞核移植培育犊牛B．对桑葚胚进行胚胎分割获得同卵双胎奶牛 C．选择优良种猪体外受精培育优良仔猪D．取茎尖组织细胞培养获得脱毒的草莓 8．利用细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞器组合是（　　） A．线粒体和液泡 B．叶绿体和中心体 C．叶绿体和线粒体 D．内质网和高尔基体 9．传统发酵食品如酸奶、泡菜、果酒等深受人们喜爱。这些食品的制作都利用了微生物的（     ） A．有氧呼吸 B．无氧呼吸 C．光合作用 D．化能合成作用 10．科研人员利用基因型为S4S4QQ和S11S11qq的马铃薯品系杂交得到F1，取F1花药离体培养后再经秋水仙素处理诱导染色体加倍，最终选育出基因型为S4S4qq的纯合品系。该育种过程称为（　　） A．杂交育种 B．诱变育种 C．单倍体育种 D．多倍体育种 11．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（    ） A．菌落中的细菌数目是固定的 B．平板上的一个菌落就是一个细菌 C．通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D．平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 12．植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为（　　） A．植物细胞培养、快速繁殖、杂交+单倍体育种、体细胞杂交 B．快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交+单倍体育种 C．快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 D．植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交+单倍体育种 13．农杆菌转化法可以将目的基因导入某些植物细胞，目的基因应与农杆菌的Ti质粒构建表达载体。下列Ti质粒最符合的是（　　） A．  B．  C．   D．   14．科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GFP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为（　　） A．F1，R1 B．F2，R1 C．F1，R2 D．F2，R2 15．高中生物学实验中，下列实验操作能达到预期目的的是（　　） A．用高浓度蔗糖溶液处理叶肉细胞观察质壁分离B．用酸性重铬酸钾溶液直接检测果醋发酵后是否生成醋酸 C．探究绿叶中色素种类的实验中采用纸层析法提取色素 D．向血细胞计数板上滴加培养液后再盖上盖玻片以避免调查结果偏大 16．生产中培育草莓脱毒苗常用的方法是（    ） A．取茎尖分生组织进行组织培养 B．人工诱导基因突变 C．进行远缘植物体细胞杂交 D．花药离体培养得到单倍体植株 第II卷（非选择题） 二、综合题（共60分，请考生按要求答题） 17．肿瘤坏死因子α（TNF - α）是一种细胞因子，浓度高时会引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了抗TNF - α的单克隆抗体，用于治疗由TNF - α引发的疾病，制备流程如下图所示。已知：细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断；已免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活；小鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖，如果它的D途径被阻断，它会因不能合成DNA而死亡。回答下列问题： (1)科学家向小鼠体内注射TNF - α的目的是______；对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的_____中获取B淋巴细胞。 (2)利用特定的 _________________ 培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入 __________________ 进行培养，一段时间后收集存活细胞；在该培养基中，杂交瘤细胞通过 ______________________________ 途径合成DNA。 (3)④过程进行的是 __________________ 和抗体检测，抗体检测的目的是 ______________________________ ；若要获得大量的抗TNF - α的单克隆抗体，可对目标杂交瘤细胞进行的处理是 ____________________ （答出1点）。 18．小鼠基因W编码的蛋白质可调节脂肪代谢。研究人员将基因W转入酵母菌并使其稳定表达，实现了该蛋白的高效合成。该过程中用到末端脱氧核苷酸转移酶（TdT），该酶不需要模板，可在DNA的3´端随机添加4种脱氧核苷酸，若只提供1种脱氧核苷酸，则连续添加多个该种脱氧核苷酸，称为同聚物加尾。相关信息所示。 (1)载体上RNA聚合酶识别和结合的部位是_______，载体上与其能自我复制相关的结构是_______。 (2)研究人员选取2种限制酶切开载体，再用TdT分别对基因W和切开的载体进行同聚物加尾，然后将两者连接；若载体酶切后产生的黏性末端为5´端突出，则需先用DNA聚合酶补平后再进行同聚物加尾。因后续研究还需要用这2种限制酶将基因W从重组载体中切下，据图分析，应选取的2种限制酶为___________。 (3)基因W和载体两者的同聚物尾配对后形成的重组载体存在部分单链区，为构建完整重组载体需要的2种酶是__________，该过程中___________（填“需要”或“不需要”）添加引物，原因是_____________________________________。 (4)为检测基因W是否在酵母菌中表达出相应蛋白，在分子水平上的检测方法是__________________。 19．地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用。科研人员从森林土壤中筛选纤维素分解菌并计数，进行了如图所示操作。请回答下列有关问题： (1)防止杂菌污染是研究和应用微生物的前提之一。在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用_______法进行灭菌，对操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒。筛选时所用的培养基需添加_______作为唯一碳源。 (2)图中的接种方法是_______。用该计数方法得到的菌落数量比活菌的实际值小，原因是_______；若用显微镜计数法统计，结果比实际活菌数_______（偏大/偏小），原因是_______。 (3)可通过菌落周围的透明圈判断_______（填“甲”或“乙”）分解纤维素能力更强。对筛选出的纤维素分解菌扩大培养时，需使用_______（固体/液体）培养基。 (4)若将稀释倍数是105的菌液涂布平板，3个平板平均菌落数分别为111，120，129，则每1 mL菌液中活菌数为___个。 20．科研人员推测在植物组培过程中，E蛋白（细胞分裂素受体）通过与M基因启动子区域结合，促进M基因表达，进而促进芽的再生。为验证该推测是否正确，研究小组进行了相关实验。回答下列问题： (1)植物细胞在离体培养条件下可形成完整植株，体现出植物细胞具有______________；在植物组培过程中，向培养基中添加生长素和细胞分裂素，能启动由愈伤组织形成芽的_______过程。 (2)M基因启动子的扩增 据图分析，为了扩增M基因启动子，研究小组先用限制酶_______（填图中序号）处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ形成环状DNA；再将环状DNA用限制酶_______（填图中序号）处理得到了片段Ⅱ；根据片段Ⅱ，从引物A、B、C、D中，选择______________组合能扩增出M基因启动子。 (3)E蛋白对M基因启动子的作用 研究小组进行如图所示转基因操作，培养一段时间后，检测荧光素酶催化荧光素氧化发出的荧光，结果显示，与对照组（只导入质粒2）相比，转基因细胞荧光强度较高。 图中，质粒上甲、乙、丙处依次为______________（填选项前字母）。 a．E基因启动子b．组成型启动子c．M基因启动子d．E基因e．M基因f．荧光素酶基因 21．近年来，我国科研工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1。与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2。请回答下列问题： (1)利用________________________酶（填2种）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入含有________________________的混合气体的CO2培养箱中培养。 (2)推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是_________________________________________。 (3)通常情况下，卵母细胞要发育到_________期才适合进行核移植，早期胚胎要发育到________时才适合进行胚胎移植。 (4)图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和____________________________________，不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在________________。 参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C C A B B D C B B C 题号 11 12 13 14 15 16 答案 D A D A A A 17．(1) 刺激小鼠产生能分泌抗TNF-α抗体的B淋巴细胞 脾脏 (2) 选择 氨基蝶呤 S (3) 克隆化培养 筛选出能分泌所需抗TNF-α抗体的杂交瘤细胞 注射到小鼠腹腔内增殖，或体外条件下大规模培养 18．(1) 启动子 复制原点(2)Pst Ⅰ 、 Xho Ⅰ (3) DNA聚合酶、DNA连接酶 不需要 同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引物起始 (4)抗原-抗体杂交 19．(1)干热灭菌 纤维素 (2) 稀释涂布平板法 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 偏大 显微镜下无法区分细胞的死活，计数时包括了死细胞 (3) 甲 液体 (4)1.2×108 20．(1) 全能性 再分化(2) 1 2 B和C(3)d、c、f 21．(1) 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 95%空气和5%的CO2 (2)激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 (3)减数第二次分裂中期/MⅡ期 桑葚胚或囊胚 (4) 动物细胞融合 生殖隔离 学科网（北京）股份有限公司 $