精品解析：河北省玉田县第一中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

玉田县第一中学2025—2026学年度高二年级第二学期期中考试 生 物 本试卷共8页，44小题，满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在题卡上，写在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共40小题，1-20每小题1分；21-40每小题2分，共60分。在在每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。 1. 以下发酵食品与发酵条件或发酵过程的变化对应关系正确的是（　　） A. 腐乳与泡菜：持续无氧发酵 B. 泡菜与果醋：pH下降 C. 酸奶与果酒：密封并定期放气 D. 果酒和果醋：发酵温度相同 【答案】B 【解析】 【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。 2、醋酸菌好氧性细菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 3、豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。 【详解】A、腐乳制作初期需有氧条件促进毛霉等霉菌的生长，后期腌制才处于无氧环境，而泡菜全程无氧发酵。因此腐乳并非持续无氧，A错误； B、包菜（泡菜）发酵中乳酸菌产乳酸，果醋发酵中醋酸菌产醋酸，两者均导致pH下降，B正确； C、酸奶制作需密封但无需放气（乳酸菌不产气体），果酒发酵需密封且定期放气（酵母菌产CO₂），C错误； D、果酒发酵（酵母菌最适20℃）与果醋发酵（醋酸菌最适30-35℃）温度不同，D错误。 故选B。 2. 我国利用传统发酵技术制作腐乳、泡菜的历史悠久，极大丰富了人们的饮食。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 家庭制作泡菜和腐乳通常利用天然菌种进行发酵 B. 发酵过程中，原料中有机物的总量和种类会不断减少 C. 制作泡菜时，亚硝酸盐的含量会先上升后下降 D. 制作腐乳时，利用毛霉等微生物产生的蛋白酶 【答案】B 【解析】 【详解】A、家庭制作泡菜和腐乳无需人工接种纯化菌种，通常利用原料表面、空气中天然存在的菌种进行发酵，A正确； B、发酵过程中微生物会通过呼吸作用消耗原料中的有机物，因此有机物总量减少；但微生物代谢会将大分子有机物分解为多种小分子中间产物、代谢产物，有机物种类会增加，并非总量和种类都不断减少，B错误； C、制作泡菜初期，硝酸还原菌等杂菌繁殖，将硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐含量上升；随着发酵进行，乳酸积累抑制杂菌活性，亚硝酸盐被逐步分解，含量下降，因此亚硝酸盐含量先上升后下降，C正确； D、腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，是腐乳制作的核心原理之一，D正确。 3. 某兴趣小组在实验室进行丝状真菌发酵产酶实验，相关操作不正确的是（　　） A. 制备培养基的过程中，先灭菌再调节pH B. 接种时先将接种环灼烧灭菌，冷却后挑取丝状真菌的孢子 C. 接种后，将培养皿倒置放入恒温培养箱中培养 D. 实验结束后对含有真菌的培养基进行灭菌处理 【答案】A 【解析】 【分析】获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的污染。无菌操作主要包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基进行灭菌。③为避免周围环境中的微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 【详解】A、制备培养基的过程中，先调节pH后灭菌，避免杂菌污染，A错误； B、接种环使用前需灼烧灭菌，冷却后挑取孢子可避免高温杀死菌种，B正确； C、接种后，培养皿倒置培养可防止冷凝水滴落污染培养基，C正确； D、实验结束后对含有真菌的培养基进行灭菌处理，以防止微生物扩散污染环境，D正确。 故选A。 4. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产生后代，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ） A. 精子获能处理 B. 卵母细胞培养 C. 早期胚胎移植 D. 胚胎干细胞核移植 【答案】D 【解析】 【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法；②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 【详解】科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产生后代，该过程包括体外受精，需要将精子进行获能处理，然后与培养成熟的卵母细胞进行受精作用形成受精卵，受精卵在体外进行早期胚胎培养，最后通过早期胚胎移植技术移植到代孕母的子宫中，此过程不涉及的操作是胚胎干细胞核移植，D错误，ABC错误。 故选D。 5. 水产养殖引发的水质富营养化会导致水体中病原菌大量繁殖，研究者检测了植物提取物H的抑菌效果，如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 实验所用的菌体应选自富营养化的水体 B. 采用稀释涂布平板法或平板划线法接种 C. 应增加已知抗菌药物组作为实验组 D. 透明圈直径与H的抑菌能力呈负相关 【答案】A 【解析】 【分析】本题围绕植物提取物 H 对水产养殖中水体病原菌的抑菌效果实验展开，考查微生物实验设计与结果分析，命题意图是理解实验选材、接种方法、对照设置及结果解读，培养科学探究与思维能力。 【详解】A、实验目的是检测植物提取物 H 对水产养殖富营养化水体中病原菌的抑菌效果，故菌体应选自富营养化水体 ，保证实验相关性，A正确； B、该实验需定量检测抑菌效果，主要是看抑菌圈的大小，需要把菌落均匀涂抹在培养基上，应采用稀释涂布平板法，B错误； C、应增加不加植物提取物 H 的对照组（如加无菌水），而非已知抗菌药物组（实验目的是测 H 的效果），C错误 ； D、透明圈直径越大，说明 H 抑菌能力越强，二者呈正相关 ，D错误 。 故选A。 6. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述错误的是（　　） A. 获得Mc的生物技术属于核移植 B. Mc表皮中有两种基因型的细胞 C. 注射入的细胞会分化成Mc的多种组织 D. 将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎发育的过程：①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑葚胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）﹔④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。 【详解】A、内细胞团是已经分化的细胞组成，获得Mc的生物技术并未利用核移植技术，A错误； B、接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B正确； C、内细胞团能发育成胎儿的各种组织，注射的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成Mc的多种组织，C正确； D、利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠，D正确。 故选A。 7. 关于动物细胞培养，下列叙述正确的是（ ） A. 获得的动物组织需用胃蛋白酶分散细胞 B. 培养过程中需密闭培养瓶以保证无菌环境 C. 培养期间需通入5%的CO2以刺激细胞呼吸 D. 所培养的细胞一般悬浮生长或贴壁生长 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶的最适pH为酸性，该环境下胃蛋白酶会失活，分散动物组织细胞应使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A错误； B、培养过程中需要为细胞提供O₂以维持细胞呼吸，不能密闭培养瓶，无菌环境通过无菌操作、培养基添加抗生素等措施实现，B错误； C、培养期间通入5%的CO2的作用是维持培养液的pH稳定，并非刺激细胞呼吸，C错误； D、动物细胞培养时，多数细胞具有贴壁生长的特性，少数细胞可悬浮生长，因此所培养的细胞一般悬浮生长或贴壁生长，D正确。 8. 我国科学家成功培育出世界首例体细胞克隆猴“中中”“华华”，攻克了灵长类动物克隆的技术难题，过程如下图。下列叙述不正确的是（　　） A. 采集的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期后再显微操作去核 B. 重构胚形成后需进一步激活才可继续完成分裂和发育进程 C. 克隆猴的诞生体现出动物细胞的细胞核具有全能性 D. 胚胎移植前需要使用免疫抑制剂处理代孕猴 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术：（1）概念：将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。（2）原理：动物细胞核的全能性。（3）生殖方式：无性生殖。 【详解】A、核移植的受体细胞一般为卵母细胞，将采集的卵母细胞在体外培养到MⅡ期，再通过显微操作去核，A正确； B、重构胚形成后，需用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）进一步激活后才可继续完成分裂和发育进程，B正确； C、克隆猴的诞生利用了动物细胞核移植技术，体现出动物细胞的细胞核具有全能性，C正确； D、代孕猴用相关激素进行同期发情处理，对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，无需再用免疫抑制剂处理，D错误。 故选D。 9. PCR是生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。下列有关PCR与人体细胞内DNA分子复制的叙述，不正确的是（　　） A. 都需要引物提供延伸起始的3’末端 B. DNA聚合酶催化的最适温度不同 C. 复制过程都是边解旋边复制 D. 复制方式都是半保留复制 【答案】C 【解析】 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、PCR和体内复制均需引物提供3’末端作为延伸起点，因为聚合酶只能结合到3’末端，A正确； B、体内DNA聚合酶最适温度约37℃，而PCR中Taq酶最适温度约72℃，B正确； C、体内DNA复制边解旋边复制，而PCR通过高温完全解旋后再复制，C错误； D、两者均以原DNA链为模板，新链与母链结合，为半保留复制，D正确。 故选C。 10. 板蓝根和油菜是两个物种，研究者利用植物体细胞杂交技术培育了携带板蓝根染色体的新品种油菜。相关叙述错误的是（ ） A. 板蓝根和油菜之间存在生殖隔离 B. 体细胞杂交之前，必须先对母本去雄 C. 融合后得到的杂种细胞需诱导成愈伤组织 D. 培育新品种油菜的过程能体现植物细胞的全能性 【答案】B 【解析】 【详解】A、板蓝根和油菜属于不同物种，不同物种之间存在生殖隔离，A正确； B、植物体细胞杂交技术通过细胞融合实现，属于无性生殖范畴，无需对母本去雄（去雄是防止自花传粉的有性杂交步骤），B错误； C、杂种细胞需在培养基中经脱分化形成愈伤组织，再通过再分化发育成完整植株，C正确； D、杂种细胞最终发育为完整植株，体现了植物细胞的全能性，D正确。 故选B。 11. 为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如下表所示。下列分析正确的是（ ） 菌株 秸秆总重（g） 秸秆残重（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 A. 从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基中的唯一氮源是纤维素 B. 如果将上述实验中的温度条件调整至25℃，效果会更明显 C. 实验中需要设置一个不接种纤维素分解菌的空白对照实验 D. 实验完成后，用于筛选的培养基可以直接进行丢弃处理 【答案】C 【解析】 【分析】图表分析：在相同条件下，C组纤维素降解率最高，秸秆失重最多，说明其被分解的最多，即C组纤维素分解菌纤维素酶的活力最高。 【详解】A、纤维素不含氮，可为纤维素分解菌提供碳源，因此从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基中的唯一碳源是纤维素，A错误； B、本实验的温度是37℃，但根据实验设计不能确定最适温度，因此将上述实验中的温度条件调整至25℃，效果不一定会更明显，B错误； C、实验中需要设置一个不接种纤维素分解菌的空白对照实验，以检验培养基灭菌是否彻底，C正确； D、实验完成后，用于筛选的培养基需要经过灭菌后才能丢弃处理，避免污染环境和旁人，D错误。 故选C。 12. 随着对发酵原理的认识，微生物纯培养技术及密闭式发酵罐的建立，人们能够在严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品，相关叙述正确的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵 B. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 啤酒的工业化生产过程中，通过焙烤可实现麦芽的无菌化 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。 【详解】A、发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A正确； B、单细胞蛋白是指微生物菌体，并不是从微生物细胞中提取的蛋白质，B错误； C、由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，C错误； D、啤酒的工业化生产过程中，通过焙烤可加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活，D错误。 故选A。 13. 下列关于菊花植物组织培养的叙述正确的是（ ） A. 培养基中生长素与细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化 B. 诱导愈伤组织阶段为了使细胞获得能量应给予适当的光照 C. 离体的菊花茎段必须经过严格灭菌后才能接种到培养基中 D. 利用菊花茎段培育形成的试管苗可直接移栽入土进一步培养 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物组织培养中生长素与细胞分裂素的比值调控分化方向，比值高时有利于根的分化，比值低时有利于芽的分化，比值适中时促进愈伤组织形成，A正确； B、诱导愈伤组织阶段细胞未分化出叶绿体，无法进行光合作用，营养来源于培养基，且该阶段需避光处理，光照会抑制愈伤组织形成或诱导其提前分化，B错误； C、离体菊花茎段是外植体，仅需消毒处理即可，严格灭菌会杀死外植体的活细胞，导致培养失败，C错误； D、试管苗需要先经过炼苗处理（先打开封口膜在培养环境放置数日，再移栽到消毒的蛭石等基质中培养，长势稳定后再入土），不能直接移栽入土，D错误。 14. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（ ） A. 快速繁殖铁皮石斛的过程中，可以改良植物的遗传特性 B. 细胞产物的工厂化生产是利用植物细胞培养技术获得次生代谢物 C. 利用花药离体培养获得的玉米幼苗，可直接获得稳定遗传的个体 D. 利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗具有抗病毒的特点 【答案】B 【解析】 【详解】A、快速繁殖铁皮石斛采用植物组织培养技术，属于无性生殖，子代遗传物质与亲本一致，无法改良植物的遗传特性，A错误； B、细胞产物的工厂化生产的核心是利用植物细胞培养技术大量增殖细胞，从中提取所需的次生代谢产物（如紫草素、紫杉醇等），符合技术应用原理，B正确； C、花药离体培养获得的玉米幼苗是单倍体，高度不育，需经秋水仙素等处理使染色体加倍后，才能获得稳定遗传的纯合个体，C错误； D、植物顶端分生组织病毒极少甚至无病毒，经培养获得的脱毒苗仅不含或少含病毒，本身不具备抗病毒的遗传特性，D错误。 15. 青蒿素是从黄花蒿中提取的代谢物。研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中不合成青蒿素，而再分化形成的芽和苗中均能检测到青蒿素。相关分析最合理的是（　　） A. 青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构 B. 芽和苗通过光合作用产生ATP为青蒿素合成提供能量 C. 生长素与细胞分裂素的比例不会影响青蒿素产量 D. 培养基中添加高浓度蔗糖有利于提高青蒿素产量 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，愈伤组织中不合成青蒿素，青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构，A正确； B、青蒿素合成所需的能量来自细胞呼吸，愈伤组织也可以进行细胞呼吸提供ATP，B错误； C、生长素与细胞分裂素的比例会影响细胞的分化，影响青蒿素产量，C错误； D、培养基中添加高浓度蔗糖会导致植物细胞失水，过高可能会导致死亡，不利于提高青蒿素产量，D错误。 故选A。 16. 将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L1-GFP融合基因，再将融合基因与质粒连接构建下图所示表达载体。图中限制酶E1～E处理产生的黏性末端均不相同。相关叙述不正确的是（ ） A. 构建L1-GFP融合基因需要用到E1、E2、E4三种酶 B. E1、E4双酶切确保L1-GFP融合基因与载体的正确连接 C. GFP可用于检测受体细胞中目的基因是否表达 D. 将表达载体转入羊的乳腺细胞中可培育乳汁中含L1蛋白的转基因羊 【答案】D 【解析】 【分析】基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等。根据题意，将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L-GFP融合基因，其中绿色荧光蛋白（GFP）基因属于标记基因，用于筛选和鉴定。 【详解】A、构建L1-GFP融合基因需要先用内切酶处理获得L1基因和GFP基因，并将二者连接，故需要用到E1、E2、E4三种酶，A正确； B、图中限制酶E1~E4处理产生的黏性末端均不相同，E1、E4双酶切可以有效减少载体自身连接和融合基因自身连接，保证L1-GFP融合基因与载体准确连接，B正确； C、绿色荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达情况，C正确； D、为了获得L1蛋白，可将表达载体转入受精卵中而不是乳腺细胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的转基因羊，D错误。 故选D。 17. DMF（一种含碳有机物）是一种优良的工业溶剂和有机合成材料，它广泛应用于制革、医药、农药等多个生产行业。含DMF的废水毒性大，会对环境造成严重危害，某实验小组筛选分离得到能够高效降解DMF的细菌，用于DMF的降解。相关叙述正确的是（ ） A. 分离高效降解DMF的菌株所用的培养基可以是液体培养基 B. 可采用平板划线法或稀释涂布平板法对细菌进行分离并计数 C. 利用平板划线法接种时，灼烧接种环的次数等于划线次数 D. 利用显微镜进行直接计数时，统计的结果往往大于实际活菌数 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、对微生物的分离采用固体培养基，液体培养基可以用于微生物的扩大培养，A错误； B、可采用平板划线法或稀释涂布平板法对细菌进行分离，后者还可用于微生物的计数，B错误； C、利用平板划线法接种时，由于接种前需要对接种环灭菌，因此灼烧接种环的次数比划线次数多一次，C错误； D、利用显微镜对细菌进行直接计数时，由于不能区分死菌和活菌，因此统计的结果往往大于实际活菌数，D正确。 故选D。 18. 下列关于接种、培养并分离酵母菌实验的叙述不正确的是（ ） A. 将接种环灼烧灭菌后，先在玻璃器皿的内壁上降温再挑取菌种 B. 为了防止污染，接种前要将接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C. 倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 D. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落 【答案】C 【解析】 【详解】A、接种环灼烧灭菌后温度极高，直接挑取菌种会烫死酵母菌，因此需先在玻璃器皿内壁降温再挑取菌种，A不符合题意； B、接种前将接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌，可杀死接种环上的杂菌，避免杂菌污染培养基，B不符合题意； C、倒平板时，若将培养皿盖完全打开放到一边，空气中的杂菌会落入培养基造成污染，正确操作是将培养皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙进行倒平板，C符合题意； D、平板划线时，连续划线可使聚集的菌种随划线次数增加逐步被稀释，最终可获得由单个活菌繁殖形成的单菌落，是平板划线法的目的，D不符合题意。 19. 实验可利用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数，下列叙述不正确的是（ ） A. 实验需用涂布器将菌液涂布于固体培养基表面 B. 通过统计平板上的菌落数推测出样品中的活菌数，菌落数为30-300个的平板合适 C. 涂布平板的所有操作都不需要在酒精灯火焰附近进行 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 【答案】C 【解析】 【分析】用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。 【详解】A、用稀释涂布平板法进行接种时，需用涂布器将菌液涂布于固体培养基表面，A正确； B、通过统计平板上的菌落数推测出样品中的活菌数，计数时选择菌落数为30−300的平板，B正确； C、涂布平板的所有操作需要在酒精灯火焰附近进行，C错误； D、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌，D正确。 故选C。 20. 《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程，“以糯米或粳米等蒸熟，酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列相关叙述错误的是（ ） A. 糯米或粳米中所含物质可为微生物提供碳源和氮源 B. 利用酵母菌发酵的“七日”中一开始就有大量酒精产生 C. “入甑蒸令汽上”充分利用了酒精易挥发的特点 D. “酸坏”是醋酸菌将乙醇变为乙酸，温度应为30~35℃ 【答案】B 【解析】 【分析】参与酒的制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。有氧条件下，已母菌进行有氧呼吸大量繁殖，此时糖类被分解为二氧化碳和水，在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。 【详解】A、糯米或粳米中所含物质淀粉、蛋白质等可为微生物提供碳源和氮源，A正确； B、酵母菌发酵的“七日”中，前期主要是有氧呼吸，该过程产生水，后期才开始无氧呼吸产生酒精，因此水和酒精不是同时产生的，B错误； C、“入甑蒸令汽上”充分利用了酒精易挥发的特点，C正确； D、“酸坏”是醋酸菌将乙醇变为乙酸，醋酸菌是好氧菌若密封不严，醋酸菌将乙醇变为乙酸温度应为30~35℃，D正确。 故选B。 21. 山西老陈醋作为传统发酵食醋的代表之，其酿制过程一般包括制曲、淀粉糖化、酒精发酵、醋酸发酵四个阶段。下列叙述错误的是（ ） A. 酿制过程中的发酵微生物均为原核生物 B. 大曲中某些微生物可促进淀粉糖化过程 C. 酒精发酵后需要提高温度进行醋酸发酵 D. 通气条件下醋酸杆菌将酒精转变为醋酸 【答案】A 【解析】 【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。 【详解】A、山西老陈醋制作过程中涉及酒精发酵，发挥作用的微生物是酵母菌，属于真核生物，A错误； B、由于制作过程中有淀粉糖化的过程，因此大曲中某些微生物可促进淀粉糖化过程 ，B正确； C、酒精发酵的最适温度为28℃，醋酸发酵的最适温度为30-35℃，所以酒精发酵后需要提高温度进行醋酸发酵 ，C正确； D、醋酸菌是需氧型微生物，所以通气条件下醋酸杆菌将酒精转变为醋酸 ，D正确。 故选A。 22. 自然发酵法酿造酱油时，先将浸泡的大豆蒸煮、冷却后与面粉混合，铺摊在空气流通处，使米曲霉等霉菌大量生长繁殖（制曲）。制曲后，混合质量分数20%的盐水制成酱醅，置于大缸内，在太阳下曝晒，定期翻酱。发酵结束后，收集液体经灭菌、分装制成酱油。下列叙述错误的是（　　） A. 参与酿造酱油的米曲霉等霉菌是需氧型微生物 B. 大豆、面粉为酿造酱油的微生物提供碳源、氮源 C. 抑制酱醅中的有害微生物主要依靠阳光中紫外线 D. 自然环境中的多种微生物赋予酱油特殊的风味 【答案】C 【解析】 【详解】A、制曲阶段将原料铺摊在空气流通的环境，保证氧气充足，说明参与酿造的米曲霉等霉菌是需氧型微生物，A正确； B、大豆富含蛋白质，可为微生物提供氮源、碳源，面粉富含淀粉，可为微生物提供碳源，二者能为发酵微生物提供所需的营养物质，B正确； C、酱醅中添加了质量分数20%的高浓度盐水，高渗环境会导致有害微生物失水死亡，是抑制有害微生物的主要因素；紫外线穿透力极弱，仅能杀灭表层少量微生物，不是主要抑菌因素，C错误； D、自然发酵为非纯种发酵，自然环境中的多种微生物共同参与发酵，不同微生物的代谢产物存在差异，共同赋予酱油特殊的风味，D正确。 23. 活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料，常用于棉、麻等染色。现欲从染料废水堆积池的污泥中获得能分解活性黑5的假单胞杆菌菌株，流程如下图。下列说法不正确的是（　　） A. 从染料废水堆积池污泥中取样的原因是此处目的菌存在的可能性大 B. 培养基Ⅰ、Ⅱ均以活性黑5为唯一氮源，属于选择培养基 C. 在培养基Ⅰ、Ⅱ中都利用稀释涂布平板法进行接种，获得单菌落 D. 逐渐提高培养液中活性黑5浓度有助于获得具高效分解能力的目的菌 【答案】C 【解析】 【详解】A、用染料废水堆积池的污泥作为样品更容易筛选出能分解活性黑5的假单胞杆菌。因为染料废水堆积池的污泥中可能存在大量适应了染料环境且能够分解活性黑5的微生物，在这样的环境中筛选目标微生物的成功率更高，A正确； B、培养基Ⅰ和Ⅱ都是以活性黑5为唯一氮源的选择培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，B正确； C、根据图示可以看出，培养基Ⅰ、Ⅱ中都可获得单菌落，前者的接种方法是稀释涂布平板法，后者的接种方法是划线法，C错误； D、不断升高培养液中活性黑5的浓度，相当于对假单胞杆菌进行浓度梯度驯化。在这种选择压力下，能够适应高浓度活性黑5环境并具有较强分解能力的假单胞杆菌会被保留下来，经过多代筛选和驯化，有利于获得具高效分解能力的目的菌，D正确。 故选C。 24. 在某靶向膜蛋白抗体药物的研发过程中，利用脂质体将含有膜蛋白胞外段基因的病毒颗粒导入到宿主动物细胞进行增殖，最终获得膜蛋白胞外段，以此作为抗原对小鼠进行免疫，进而制备相应的单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. 含膜蛋白胞外段基因的病毒颗粒需被包裹在脂质体内部 B. 对贴壁生长的动物细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶处理 C. 经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外培养时可持续分泌单克隆抗体 D. 将抗膜蛋白单克隆抗体与药物偶联，可以用来靶向治疗某些疾病 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、重组慢病毒颗粒与辅助质粒导入病毒包装细胞需要依赖膜融合，故含膜蛋白胞外段基因的病毒颗粒被包在脂质体双分子层中，即脂质体内部，A正确； B、动物细胞培养传代培养时需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁生长的细胞，使之脱落，B正确； C、经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力，无法通过培养获得单克隆抗体，C错误； D、单克隆抗体本身不能杀伤肿瘤细胞，能利用其特异性帮助药物作用于病变细胞，起到靶向治疗的作用，D正确。 故选C。 25. 青霉素是青霉菌分泌的一种抗生素。随着高产菌种的选育，发酵技术的发展，青霉素已经步入产业化生产的道路。下列叙述不正确的是（ ） A. 经过不断诱变、筛选获得生产用高产青霉菌株 B. 用过滤、沉淀等方法将青霉菌体分离、干燥即可获得青霉素 C. 发酵过程要随时检测培养液微生物数量、产物浓度、溶氧等 D. 发酵工程所用培养基和设备必须严格控制无菌 【答案】B 【解析】 【详解】A、生产用高产青霉菌株是利用诱变育种的原理，经过多次诱变处理后不断筛选获得的，A正确； B、青霉素是青霉菌分泌到细胞外的次级代谢产物，需要从发酵液中经过提取、分离纯化等步骤才能获得，仅过滤沉淀分离青霉菌体并干燥无法得到青霉素，B错误； C、发酵过程中需要随时检测培养液微生物数量、产物浓度、溶氧等参数，以便及时调整发酵条件，保证生产效率，C正确； D、若存在杂菌污染，会出现杂菌与青霉菌竞争营养、分解青霉素等问题，因此发酵所用培养基和设备必须严格灭菌、控制无菌环境，D正确。 26. 百岁兰是一种裸子植物，被誉为植物界的“活化石”。为研发高效的百岁兰叶片愈伤组织诱导体系，探究避光与昼夜节律（每天16h光照和8h黑暗）条件对诱导百岁兰叶片愈伤组织的影响，结果见下图。相关叙述错误的是（ ） A. 培养基中需要加入适宜比例的生长素和细胞分裂素 B. 愈伤组织形成经过已分化细胞变成未分化细胞过程 C. 百岁兰叶片经诱导形成的愈伤组织不具有全能性 D. 与避光相比，昼夜节律下百岁兰愈伤组织生长得更好 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养时，生长素与细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，二者的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素与细胞分裂素比例升高，利于根的分化、抑制芽的形成；生长素与细胞分裂素比例降低，利于芽的分化、抑制根的形成。 【详解】A、实验所用的培养基通常为固体培养基，生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成，A正确； B、外植体经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织形成经过已分化细胞变成未分化细胞过程，B正确； C、百岁兰叶片经诱导形成的愈伤组织能发育成完整植株，具有全能性，C错误； D、分析曲线图可知：昼夜节律处理下比避光条件下百岁兰脱分化的速率更快，愈伤组织生长更好，D正确。 故选C。 27. 白叶枯病是水稻最严重的病害之一，疣粒野生稻具有高度抗病性。利用疣粒野生稻与栽培稻进行体细胞杂交培育抗病植株（如下图）。对获得的72株杂种植株鉴定，发现24株染色体数目在27~38条之间，40株表现抗病。下列叙述不正确的是（ ） A. ①用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B. ②可用聚乙二醇、灭活病毒等方法处理，获得融合细胞 C. 杂种植株形成说明两种细胞融合后分裂能力恢复 D. 杂种植株细胞中染色体的丢失可能与X射线照射有关 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植株的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展现出独特的优势。原理：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、①为获得原生质体，可纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得，A正确； B、②获得融合细胞，灭活病毒诱导法用于动物细胞融合，B错误； C、由题可知，X射线处理及碘乙酰胺处理后的原生质体均不能进行细胞分裂，故杂种植株形成说明两种细胞融合后分裂能力恢复，C正确； D、X射线照射可能会导致疣粒野原生质体中染色体丢失，从而导致融合细胞形成的杂种植株细胞中染色体的丢失，D正确。 故选B。 28. 某同学计划分离土壤中能水解纤维素的微生物并观察其菌落。下列关于此实验的叙述，正确的是（ ） A. 选择培养的培养基以纤维素作为唯一氮源，并加入琼脂作凝固剂 B. 用平板划线法在酚红培养基接种，根据透明圈大小筛选出纤维素分解菌 C. 培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从电源插上开始计时 D. 把滤纸埋在土壤中，一段时间后从已腐烂的滤纸上筛选目的菌 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、分析题意，本实验目的是分离土壤中能水解纤维素的微生物并观察其菌落，故要用以纤维素（元素组成是CHO）为唯一碳源的选择培养基，A错误； B、当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，B错误； C、根据高压蒸汽灭菌的操作规范，灭菌时间应从达到设定的温度或压力值时开始计时，C错误； D、滤纸的主要成分是纤维素，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌，可以通过此操作获得能够分解纤维素的微生物，D正确。 故选D。 29. 紫杉醇存在于红豆杉属植物体内，具有较强抗癌作用。为保护野生红豆杉资源，科研人员用图示方法提取紫杉醇。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①需要调控细胞分裂素和生长素的比例 B. 过程①②每天都需要在光照条件下进行 C. 过程②③需要转接到生根培养基上培养 D. 过程①②③体现出红豆杉细胞具有全能性 【答案】A 【解析】 【详解】A、过程①为脱分化，植物组织培养中脱分化阶段需要调控细胞分裂素和生长素的比例，二者比例适中时可促进愈伤组织形成，A正确； B、过程①脱分化阶段需要避光处理，光照会诱导维管组织分化，不利于愈伤组织形成，不需要每天光照，B错误； C、生根培养基用于诱导愈伤组织分化出根，本题目的是获得大量高产细胞提取紫杉醇，不需要诱导生根，②③无需转接至生根培养基，C错误； D、细胞全能性的体现以分化细胞发育成完整个体为标志，本实验仅培养到细胞群阶段，未获得完整植株，不能体现细胞全能性，D错误。 30. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养需要放在CO2培养箱中进行，故①过程需在CO2培养箱中进行，A正确； B、研究者对动物细胞培养所需的营养物质尚未研究清楚，故培养动物细胞需要在培养基中加入血清，①过程通常需在培养基中加入血清，B正确； C、动物细胞培养的原理是细胞增殖（有丝分裂），分析题图可知，①②过程有细胞分裂也有细胞分化，C正确； D、题图可知，UPC的子代细胞会自发聚集于中心并分支最终形成集合管，而NPC的子代细胞围绕着集合管的外围分布最终形成了肾单位，可见NPC和UPC的子代细胞不是随机分布而是有规律分布，D错误。 故选D。 31. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如下图所示。 以下说法错误的是（ ） A. 过程实质是基因的选择性表达 B. 过程可用聚乙二醇诱导细胞融合 C. 培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液 D. 可将丁细胞注射到小鼠脾脏中提取单克隆抗体 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠洋注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获得已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨骼瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、过程②将多能干细胞诱导其分化产生不同细胞的过程，是基因选择性表达的过程，A正确； B、过程③两细胞融合成杂交细胞的过程，可用聚乙二醇诱导细胞融合，B正确； C、培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液，防止代谢产物积累对自身造成危害，C正确； D、经过筛选过的丁细胞注射到小鼠腹腔中，从腹水中提取单克隆抗体，D错误。 故选D。 32. 基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法正确的是（　　） A. 大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B. 用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C. 含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用植物组织培养技术 D. 将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入乳腺细胞后可获得乳腺生物反应器 【答案】C 【解析】 【详解】A、限制酶的化学本质是蛋白质，基本组成单位是氨基酸，大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，A错误； B、质粒是独立于细胞拟核或细胞核DNA之外的环状DNA分子，不仅原核细胞中有质粒，酵母菌等真核生物中也存在质粒，B错误； C、花粉管通道法中，含目的基因的DNA进入胚囊后可转化受精卵或早期胚细胞，这类细胞可直接发育为完整植株，无需额外进行植物组织培养，C正确； D、制备乳腺生物反应器时，需将重组载体导入动物受精卵，使其发育为完整个体，雌性个体的乳腺才能特异性表达药用蛋白，仅导入高度分化的乳腺细胞无法获得能稳定生产药用蛋白的动物个体，D错误。 33. 在生产实践中，不需要运用多项生物工程技术的是（ ） A. 单克隆抗体的制备 B. 人胰岛素工业化生产 C. 转基因抗虫棉的培育 D. 用尿素鉴别尿素分解菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、单克隆抗体的制备需要用到动物细胞融合、动物细胞培养等多项动物细胞工程技术，A不符合题意； B、人胰岛素工业化生产需要先通过基因工程构建可合成人胰岛素的工程菌，再通过发酵工程大规模培养生产，运用了多项生物工程技术，B不符合题意； C、转基因抗虫棉的培育需要先通过基因工程将抗虫基因导入棉花受体细胞，再通过植物组织培养技术将受体细胞培育为完整植株，运用了多项生物工程技术，C不符合题意； D、用尿素鉴别尿素分解菌仅需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行微生物的培养与鉴别，属于单一的微生物培养技术，不需要运用多项生物工程技术，D符合题意。 34. 第三次全国大熊猫野外种群调查显示，全国野生大熊猫不足1600只，为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，下列相关叙述正确的是（　　） A. 卵（母）细胞质具有调控细胞核基因表达的作用 B. 图中用激素处理可使供体和代孕受体同期发情 C. 图中的熊猫甲与亲代雌性大熊猫的性状基本相同 D. 熊猫乙和熊猫丙的基因型和表型一定都相同 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。 【详解】A、克隆熊猫培育利用了动物细胞核移植技术，成功的部分原因是卵细胞质具有调控细胞核基因表达的作用，A正确； B、分析题图可知，图中用激素处理可促进供体熊猫超数排卵，B错误； C、据图可知，熊猫甲的细胞核中的遗传物质来自雌性和雄性大熊猫，细胞质遗传物质来自雌性大熊猫，故其性状由亲本雌性大熊猫和雄性大熊猫共同决定，C错误； D、熊猫乙和熊猫丙是利用胚胎分割获得的胚胎，经胚胎移植获得的，遗传物质相同，但环境因素对其性状表现也有一定的影响，故二者表型未必完全一致，D错误。 故选A。 35. CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，作用机制如图。单链向导RNA（sgRNA）能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。下列相关分析不正确的是（　　） A. 对不同目的基因编辑时，需使用不同的sgRNA B. Cas9可催化脱氧核苷酸链上特定氢键的水解 C. sgRNA过短可能因不能准确识别造成错误编辑 D. 基因编辑技术可实现对特定基因的定点插入、敲除或替换 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、分析题意，单链向导RNA（sgRNA）能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置剪切DNA，由此可知，对不同目的基因编辑时，需使用不同的sgRNA，A正确； B、Cas9蛋白可催化脱氧核苷酸链上磷酸二酯键的水解，B错误； C、sgRNA过短会影响碱基的特异性配对，可能因不能准确识别，造成错误编辑，C正确； D、CRISPR/Cas9基因编辑技术工作原理为向导RNA引导CaS9蛋白到一个特定的基因位点并剪切DNA，可实现对特定基因的定点插入、敲除或替换，D正确。 故选B。 36. 利用农杆菌的Ti质粒作为载体进行转基因操作获得转基因水稻。下列叙述正确的是（　　） A. Ti质粒是一种环状DNA分子，属于农杆菌的拟核DNA B. 目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA C. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到水稻细胞的染色体DNA上 D. 利用农杆菌转化法将重组质粒导入水稻细胞是培育转基因水稻的核心步骤 【答案】C 【解析】 【分析】农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而 对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染 植物细胞后，能将 Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上 。根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞。 根据受体植物的不同，所用的具体转化方法有所区别 。例如 ，可以将新鲜的从叶片上取下的圆 形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞， 并再生成植株 ；可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等。 【详解】A、Ti质粒是农杆菌的质粒，属于细胞质中的环状DNA，而拟核DNA是细菌的主要遗传物质，位于拟核区，两者不同，A错误； B、目的基因需插入T-DNA片段内，因为T-DNA能转移至植物细胞并整合到染色体DNA中。若插入T-DNA外，可能导致目的基因无法转移，B错误； C、农杆菌感染植物时，Ti质粒上的T-DNA会转移并整合到植物细胞的染色体DNA中，这是农杆菌转化法的关键机制，C正确； D、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，而非将重组质粒导入受体细胞，D错误。 故选C。 37. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的相关叙述，不正确的是（　　） A. 利用DNA在酒精中溶解度较大的特性提取DNA B. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 C. PCR扩增目的基因时，变性是温度最高的环节 D. 凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象有关 【答案】A 【解析】 【详解】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【分析】A、DNA在较高浓度的盐溶液中溶解度较大，而在低浓度盐溶液中溶解度降低；当加入体积分数为95%的冷酒精时，DNA因溶解度更低而析出。选项A描述“利用DNA在酒精中溶解度较大的特性”错误，应为“溶解度较低”，A错误； B、二苯胺试剂与DNA在沸水浴条件下反应生成蓝色物质，此描述符合实验现象，B正确； C、PCR扩增中，变性步骤需高温（约95℃）使DNA双链解开，温度高于退火和延伸阶段，C正确； D、在凝胶电泳中，DNA分子迁移速率与其分子大小（小分子迁移快）和构象（如线状、环状等）有关，D正确。 故选A。 38. MDCK细胞是从犬肾脏组织中分离培育建立的细胞系，MDCK细胞对流感病毒易感。下列关于利用悬浮培养技术培养MDCK细胞的相关叙述，不正确的是（　　） A. 悬浮培养MDCK细胞可有效避免贴壁生长与接触抑制现象 B. 培养MDCK细胞时，需要为其创造95%空气和5%CO2的气体环境 C. 培养MDCK细胞时，为减少杂菌污染需定期更换培养液 D. MDCK细胞可用于流感病毒的扩增及特性等研究 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、悬浮培养的细胞在液体培养基中自由生长，无需贴附于固定表面，因此可避免贴壁生长及接触抑制现象，A正确； B、动物细胞培养通常需要5%CO₂的气体环境以维持培养液pH，而氧气浓度与空气相近（约21%），选项B中“95%空气”指正常空气比例，与5%CO₂共同构成气体环境，B正确； C、定期更换培养液的主要目的是补充营养物质并清除代谢废物，而非减少杂菌污染（污染需通过无菌操作和抗生素预防），C错误； D、MDCK细胞对流感病毒易感，可作为宿主细胞用于病毒扩增及特性研究，D正确。 故选C。 39. 科学家以水稻（2n=24）和稗草（2n=54）为材料，利用植物体细胞杂交技术获得了具有稗草抗逆性（如耐盐、抗除草剂）的水稻，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 获得原生质体时，需要在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B. 原生质体融合前需用胰蛋白酶处理，以获得有活力的原生质体 C. 可以用离心、聚乙二醇或灭活病毒诱导两种原生质体融合 D. 该技术打破水稻与稗草之间的物种界限，实现了远缘杂交育种 【答案】D 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术是将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。该技术能克服远缘杂交不亲和的障碍，为培育新品种提供了新途径。 【详解】A、植物细胞壁主要成分为纤维素和果胶，需用纤维素酶和果胶酶去除。但原生质体无细胞壁保护，在低渗溶液中会因吸水破裂，因此需在等渗或适宜的高渗溶液中处理， A错误； B、胰蛋白酶的作用是分解动物细胞间的蛋白质，使动物细胞分散，而植物原生质体制备无需胰蛋白酶，B错误； C、灭活病毒是动物细胞融合的诱导方法，不适用于植物原生质体融合，原生质体融合的诱导方法包括，物理法：离心、振动、电融合等；化学法：聚乙二醇（PEG）融合法，C错误； D、水稻和稗草属于不同物种，存在生殖隔离（远缘杂交不亲和），植物体细胞杂交技术通过融合二者的原生质体，直接获得杂种细胞并培育成植株，打破了物种界限，实现了远缘杂交育种， D正确。 故选D。 40. 脱氧核苷三磷酸（dNTP）3'-C上的-OH脱O后转化为双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）。在PCR反应体系中加入模板、4种dNTP、1种32P标记的ddNTP和1种引物及其它所需材料，经扩增后获得不同长度的DNA片段混合物。分别利用如图所示4种32P标记的ddNTP进行PCR后，将产物点样在变性凝胶上进行电泳分离，通过放射性自显影检测，就可以读出DNA的核苷酸序列。下图为某待测DNA片段的电泳检测结果，下列说法错误的是（ ） A. PCR反应体系中的退火温度适当升高可以提高PCR特异性 B. 连接到核苷酸链上的ddNTP因3'-C上没有-OH而导致DNA延伸中断 C. 该DNA片段的待测碱基序列为5'-TTGGCTGCAA-3' D. 该PCR过程中待测DNA片段只有1条链作为模板 【答案】C 【解析】 【分析】在合适的条件下，当DNA模板、引物及脱氧核苷三磷酸（dNTP）存在时，耐高温的DNA聚合酶能够催化DNA链的合成。ddNTP是双脱氧核苷三磷酸，其3'-C位上连的是脱氧后的羟基。在一般情况下，3'-C位上-OH作为下一个dNTP连接的位点，因此失去氧原子的ddNTP不能与下一个dNTP连接，从而终止DNA链的延伸。 【详解】A、升高退火温度可增加引物与模板结合的特异性，从而提高PCR特异性，A正确； B、ddNTP为双脱氧核苷三磷酸，只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长的原因是3'-C上不是-OH，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键，B正确； C、当ddNTP结合时，DNA合成终止，因此DNA合成链可能随机停止在任何碱基处，根据四种碱基的条带位置反向推出DNA序列。PCR扩增时，由5'端向3'端延伸，则根据电泳图及点样点的位置可知，该DNA片段的待测碱基序列为3'-TTGGCTGCAA-5'，C错误； D、该PCR过程中待测DNA片段如果有两条链做模板，四种碱基的条带位置可能会有四条，图示都少于四条，故只有1条链作为模板，与引物结合后，在DNA聚合酶作用下子链沿从5′端向3′端方向进行延伸反应，D正确。 故选C。 二、非选择题：本题共4题，共40分。 41. 石油烃（主要含有C、H元素）是石油中的主要成分，研究人员从被石油污染的土壤中分离可高效降解石油烃的菌株的部分过程如图所示，①~③表示不同过程。 （1）图中需要在无菌环境下进行的操作有_______（填序号）。③的培养基中添加石油烃的作用是_______。 （2）图示分离获得单菌落的方法是_______。若③的平板上统计的菌落数为112个，则10g土壤中石油烃降解菌的数目约为_______个。该数值往往比活菌的实际值小，原因是_______。 （3）为检测不同菌株降解石油烃的能力，挑取③的不同菌落分别接种到含有等量石油烃的培养液中。培养一段时间后，检测_______。经检测，菌株BS3为降解石油烃能力最强的菌株，为将其用于环境治理，研究人员进行相关实验，结果如图所示。据图分析可得出的结论有_______。 【答案】（1） ①. ①②③     ②. 作为唯一碳源筛选降解石油烃的菌株 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 1.12×108  ③. 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （3） ①. 石油烃的剩余量   ②. 石油烃浓度在 0~0.6 g/L 时，BS3 菌株生长量随石油烃浓度升高而增加； 石油烃浓度高于 0.6 g/L 后，BS3 菌株生长量随浓度升高而降低； 0.6 g/L 是最适合 BS3 菌株生长的石油烃浓度； 高浓度石油烃（如 1.5 g/L）会抑制 BS3 菌株的生长。 【解析】 【小问1详解】 由图可知，①②为系列稀释、③为涂布与培养，整个微生物分离与计数过程都必须在无菌环境下操作，以防止杂菌污染，保证实验结果的准确性。只有能利用石油烃作为碳源的细菌才能在该培养基上生长繁殖，因此③的培养基中添加石油烃的作用是作为唯一碳源筛选降解石油烃的菌株。 【小问2详解】 图中通过梯度稀释后取菌液进行培养，在平板上得到单个菌落，是典型的稀释涂布平板法操作。由图可知土壤悬浮液总稀释倍数为104。1克土壤中的活菌数=112÷0.1×104=1.12×107个。10g土壤中的活菌数=1.12×107×10=1.12×108个。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致统计的菌落数少于实际的活菌数。因此该数值往往比活菌的实际值小。 【小问3详解】 菌株降解石油烃的能力越强，培养液中石油烃的剩余量就越少，因此可以通过检测石油烃的剩余量来评估降解能力。分析图可知，0 ~ 0.6 g/L 区间：随石油烃浓度升高，BS3 生长量持续上升；石油烃在此浓度范围内对 BS3 生长起促进作用，浓度越高促进效果越强； 0.6 g/L 为最适浓度：该浓度下 BS3 生长量达到峰值，最利于 BS3 增殖、降解石油烃； 0.6 ~ 1.5 g/L 区间：石油烃浓度继续升高，BS3 生长量逐步下降；高浓度石油烃对 BS3 产生抑制； 1.5 g/L 高浓度组：BS3 生长量显著低于空白对照组（0 g/L），说明过高浓度石油烃会严重抑制 BS3 菌株生长。 42. 我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型。其中BMAL1基因敲除猴的基本构建流程如图所示。回答下列相关问题： （1）为了让母猴超数排卵，以便采集更多的卵母细胞，需要给它注射_______，采集卵母细胞后，在体外培养到_______期才去核，去除的“核”实际上是指_______。 （2）除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、_______和化学物质处理等方法去核。 （3）一次核移植技术后，需要获得更多的基因敲除猴，可在囊胚期对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_______。若想要对移植前胚胎进行性别鉴定，应选择囊胚期的_______细胞。 （4）将早期胚胎移植到代孕母猴子宫内，为了使代孕母猴生理状况更适合完成该操作，要对代孕母猴进行_______处理，以提高成功率。由此可见，胚胎移植的实质是_______。 （5）不考虑基因突变，利用A6的成纤维细胞进行克隆获得的多只第二代基因敲除猴，与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是_______（写出1点即可）。 【答案】（1） ①. 外源促性腺激素        ②. MⅡ（减数分裂Ⅱ中期） ③. 纺锤体-染色体复合物  （2）紫外光照射 （3） ①. 内细胞团均等分割   ②. 滋养层     （4） ①. 同期发情 ②. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 （5）遗传背景相同 【解析】 【小问1详解】 超数排卵通常注射外源促性腺激素，这样能使供体母猴排出更多卵子。 采集的卵母细胞要在体外培养到MⅡ（减数分裂Ⅱ中期）才具备受精能力，去核操作也在此阶段。 “核”实际上是指纺锤体 - 染色体复合物，它与细胞核紧密相关。 【小问2详解】 体细胞核移植去核方法除显微操作、梯度离心、化学物质处理外，还有紫外光照射去核法。 【小问3详解】 分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，不均等分割会影响胚胎发育。若要对移植胚胎进行性别鉴定，应选择囊胚期的滋养层细胞，因为滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘等结构，不会影响胚胎发育，且可以从中获取用于性别鉴定的细胞。 【小问4详解】 将早期胚胎移植到代孕母猴子宫内，为使代孕母猴生理状况适合胚胎发育，要进行同期发情处理，让供、受体生殖器官的生理变化相同，为胚胎移入受体提供相同的生理环境。由此可见，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 【小问5详解】 与第一代BMAL1基因敲除模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是遗传背景相同，这样可以排除遗传背景差异对实验结果的干扰，使实验结果更准确地反映出研究因素的影响。 43. 叶盘转化法是Horsch 等人于1985年发展起来的一种转化法，以培育转基因 耐盐毛白杨为例，操作程序是先将毛白杨叶子表面进行消毒，再用消毒过的打孔器从 叶子上取下圆形小片，即叶盘。然后进行下列操作，请回答： （1）毛白杨叶盘与重组农杆菌共培养以进行遗传转化：农杆菌能够介导转化的原因是_________。 （2）脱分化和筛选培养：叶盘接种在含卡那霉素的培养基上，卡那霉素的作用是 _______， 作为运载体的Ti 质粒应含有 _____________基因，运载体上的__________是 RNA 聚 合酶识别和结合的位点。 （3）获得抗性植株：叶盘周围长出愈伤组织后分别转移到诱导“生芽”和“生根”的培养 基中，此过程培养基中加入的植物激素主要是________。 （4）耐盐基因的检测与鉴定： ①分子水平：可采用______ 的方法来检测转基因毛白杨提取液中有无相应的耐盐蛋白。 ②个体水平：请设计个体水平检测方案 ______________________________ 。 【答案】（1）含有的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上 （2） ①. 筛选出被重组农杆菌感染的叶盘 ②. 卡那霉素抗性基因 ③. 启动子 （3）生长素和细胞分裂素 （4） ①. 抗原—抗体杂交 ②. 将转基因毛白杨种植在盐碱地中观察其生长状况 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： (1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； (2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； (3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 【小问1详解】 农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆茵细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)转移到受体的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【小问2详解】 脱分化和筛选培养：叶盘接种在含卡那霉素的培养基上，若含有目的基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒成功导入了叶盘且正确表达，则被重组农杆菌感染的叶盘培养在含有卡那霉素的培养基上生长。故卡那霉素的主要作用是筛选出被重组农杆菌感染的叶盘。运载体需要有抗性基因卡那霉素抗性基因、启动子、终止子，复制原点等结构。其中启动子是RNA 聚合酶识别和结合的位点。 【小问3详解】 植物组织培养过程中需要加入植物激素，其中最主要的是生长素和细胞分裂素。他们是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。 【小问4详解】 耐盐基因进入细胞后，可以通过抗原—抗体杂交方法来检测转基因毛白杨提取液中有无相应的耐盐蛋白。还需要进行个体生物学水平检测，将转基因毛白杨种植在盐碱地中观察其生长状况来检测耐盐基因是否赋予了毛白杨耐盐特性。 【点睛】本题主要考查考生对基因工程等方面基础知识及植物组织培养应用的理解，难度较大。 44. 胶原蛋白在维持器官、组织、细胞形态和功能等方面发挥着关键性作用，传统提取方法得到的胶原蛋白成分复杂，还可能携带动物病毒等。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如图所示。回答下列问题： 注：BamHI、HindⅢ、EcoRI为限制酶，tsr为硫链丝菌素抗性基因，ori为复制原点 已知Hind Ⅲ的识别序列及切割位点为5′-A↓AGCTT-3′；EcoR Ⅰ的识别序列及切割位点为5′-G↓AATTC-3′；BamH Ⅰ的识别序列及切割位点为5′-G↓GATCC-3′。 （1）图中①过程需要使用_______酶，该过程得到的DNA片段_______（填“含有”或“不含有”）启动子序列。 （2）②过程需要使用的限制酶为_______。已知kit部分基因（如下所示）且基因上并无质粒中相关限制酶识别序列，为使基因与质粒成功连接，利用PCR技术扩增kit基因时需要设计一对引物，这对引物的序列分别是_______、_______（从引物5′端开始书写，只写前12个碱基即可） 5′-CGGGATCCA……AGAATTCCG-3′ 3′-GCCCTAGGT……TCTTAAGGC-5′（模板链） （3）双酶切kit基因与质粒pET-28a（+）长度为170bp的片段进行置换，构建重组质粒pET-28a（+）-kit，上述两种质粒经Hind Ⅲ切割后片段长度如表所示（每种片段各1个）。由此判定kit基因长度为_______；该基因上有_______个Hind Ⅲ切割位点，依据是_______。 质粒类型 pET-28a（+） pET-28a（+）-kit 经Hind Ⅲ酶切片段 1000bp、2550bp 1050bp、2500bp、1500bp 【答案】（1） ①. 逆转录 ②. 不含有 （2） ①. BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ ②. 5' -GAATTCCGGGAT-3' ③. 5' -GGATCCCGGAAT-3' （3） ①. 1670bp ②. 2##二##两 ③. pET-28a（+）原有的2个Hind Ⅲ位点被目的基因置换了1个后，得到的环状的pET-28a（+）-kit仍然被Hind Ⅲ切割成3段 【解析】 【小问1详解】 由题图可知，过程①由mRNA生成基因 kit（即DNA），因此代表逆转录过程，需要用到逆转录酶。该过程得到的DNA片段的碱基序列与mRNA一一对应，只有编码序列，不含有启动子序列。 【小问2详解】 由于ori复制原点中含有限制酶Hind Ⅲ的识别序列，因此不能用限制酶Hind Ⅲ来切割质粒，否则会破坏复制原点，只能用限制酶BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ对质粒pET-28a(+)进行双酶切来构建基因表达载体，这样可以防止目的基因与质粒的自身环化以及任意连接；同时要在 kit 基因两端也连上限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列，由于DNA聚合酶只能从引物的3'端连接脱氧核苷酸延伸子链，因此必须将限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列连接至引物的5'端，这样经过PCR和双酶切后，才能保证 kit 基因以正确的方向与运载体连接。根据目的基因的模板链，基因上游引物添加EcoRⅠ识别序列，引物序列为5' -GAATTCCGGGAT-3'，下游引物添加BamHⅠ识别序列，引物序列为5' -GGATCCCGGAAT-3'。 【小问3详解】 观察质粒 pET-28a(+) 图可知，在该质粒上有两个HindⅢ的识别序列，一个在启动子和终止子之间，一个在复制原点ori中，因此用HindⅢ切割质粒 pET-28a(+)后，可得到两个片段，通过表格可知，这两个片段长度分别为1000bp和2550bp，说明质粒pET-28a(+) 总长度是1000bp+2550bp=3550bp；利用双酶切法将 kit 基因与质粒 pET-28a(+) 长度为170bp片段进行置换后，形成的重组质粒 pET-28a（+）-kit 能被HindⅢ切割成三个片段，长度分别是1050bp、2500bp、150bp，说明置换后的kit 基因上含有两个HindⅢ的识别序列，再加上复制原点ori中的一个HindⅢ的识别序列，共三个HindⅢ的识别序列，经HindⅢ酶切后才能将重组质粒pET-28a（+）-kit 切成3段。利用这三段的长度可计算出重组质粒 pET-28a（+）-kit 的总长度为1050bp+2500bp+1500bp=5050bp，由于kit 基因与长度为170bp片段进行置换，设kit 基因长度为n，可列出等式：3550+n-170=5050bp，故可计算出kit 基因长度为n=1670bp。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 玉田县第一中学2025—2026学年度高二年级第二学期期中考试 生 物 本试卷共8页，44小题，满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在题卡上，写在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共40小题，1-20每小题1分；21-40每小题2分，共60分。在在每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。 1. 以下发酵食品与发酵条件或发酵过程的变化对应关系正确的是（　　） A. 腐乳与泡菜：持续无氧发酵 B. 泡菜与果醋：pH下降 C. 酸奶与果酒：密封并定期放气 D. 果酒和果醋：发酵温度相同 2. 我国利用传统发酵技术制作腐乳、泡菜的历史悠久，极大丰富了人们的饮食。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 家庭制作泡菜和腐乳通常利用天然菌种进行发酵 B. 发酵过程中，原料中有机物的总量和种类会不断减少 C. 制作泡菜时，亚硝酸盐的含量会先上升后下降 D. 制作腐乳时，利用毛霉等微生物产生的蛋白酶 3. 某兴趣小组在实验室进行丝状真菌发酵产酶实验，相关操作不正确的是（　　） A. 制备培养基的过程中，先灭菌再调节pH B. 接种时先将接种环灼烧灭菌，冷却后挑取丝状真菌的孢子 C. 接种后，将培养皿倒置放入恒温培养箱中培养 D. 实验结束后对含有真菌的培养基进行灭菌处理 4. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产生后代，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ） A. 精子获能处理 B. 卵母细胞培养 C. 早期胚胎移植 D. 胚胎干细胞核移植 5. 水产养殖引发的水质富营养化会导致水体中病原菌大量繁殖，研究者检测了植物提取物H的抑菌效果，如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 实验所用的菌体应选自富营养化的水体 B. 采用稀释涂布平板法或平板划线法接种 C. 应增加已知抗菌药物组作为实验组 D. 透明圈直径与H的抑菌能力呈负相关 6. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述错误的是（　　） A. 获得Mc的生物技术属于核移植 B. Mc表皮中有两种基因型的细胞 C. 注射入的细胞会分化成Mc的多种组织 D. 将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠 7. 关于动物细胞培养，下列叙述正确的是（ ） A. 获得的动物组织需用胃蛋白酶分散细胞 B. 培养过程中需密闭培养瓶以保证无菌环境 C. 培养期间需通入5%的CO2以刺激细胞呼吸 D. 所培养的细胞一般悬浮生长或贴壁生长 8. 我国科学家成功培育出世界首例体细胞克隆猴“中中”“华华”，攻克了灵长类动物克隆的技术难题，过程如下图。下列叙述不正确的是（　　） A. 采集的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期后再显微操作去核 B. 重构胚形成后需进一步激活才可继续完成分裂和发育进程 C. 克隆猴的诞生体现出动物细胞的细胞核具有全能性 D. 胚胎移植前需要使用免疫抑制剂处理代孕猴 9. PCR是生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。下列有关PCR与人体细胞内DNA分子复制的叙述，不正确的是（　　） A. 都需要引物提供延伸起始的3’末端 B. DNA聚合酶催化的最适温度不同 C. 复制过程都是边解旋边复制 D. 复制方式都是半保留复制 10. 板蓝根和油菜是两个物种，研究者利用植物体细胞杂交技术培育了携带板蓝根染色体的新品种油菜。相关叙述错误的是（ ） A. 板蓝根和油菜之间存在生殖隔离 B. 体细胞杂交之前，必须先对母本去雄 C. 融合后得到的杂种细胞需诱导成愈伤组织 D. 培育新品种油菜的过程能体现植物细胞的全能性 11. 为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如下表所示。下列分析正确的是（ ） 菌株 秸秆总重（g） 秸秆残重（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 A. 从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基中的唯一氮源是纤维素 B. 如果将上述实验中的温度条件调整至25℃，效果会更明显 C. 实验中需要设置一个不接种纤维素分解菌的空白对照实验 D. 实验完成后，用于筛选的培养基可以直接进行丢弃处理 12. 随着对发酵原理的认识，微生物纯培养技术及密闭式发酵罐的建立，人们能够在严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品，相关叙述正确的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵 B. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 啤酒的工业化生产过程中，通过焙烤可实现麦芽的无菌化 13. 下列关于菊花植物组织培养的叙述正确的是（ ） A. 培养基中生长素与细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化 B. 诱导愈伤组织阶段为了使细胞获得能量应给予适当的光照 C. 离体的菊花茎段必须经过严格灭菌后才能接种到培养基中 D. 利用菊花茎段培育形成的试管苗可直接移栽入土进一步培养 14. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（ ） A. 快速繁殖铁皮石斛的过程中，可以改良植物的遗传特性 B. 细胞产物的工厂化生产是利用植物细胞培养技术获得次生代谢物 C. 利用花药离体培养获得的玉米幼苗，可直接获得稳定遗传的个体 D. 利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗具有抗病毒的特点 15. 青蒿素是从黄花蒿中提取的代谢物。研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中不合成青蒿素，而再分化形成的芽和苗中均能检测到青蒿素。相关分析最合理的是（　　） A. 青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构 B. 芽和苗通过光合作用产生ATP为青蒿素合成提供能量 C. 生长素与细胞分裂素的比例不会影响青蒿素产量 D. 培养基中添加高浓度蔗糖有利于提高青蒿素产量 16. 将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L1-GFP融合基因，再将融合基因与质粒连接构建下图所示表达载体。图中限制酶E1～E处理产生的黏性末端均不相同。相关叙述不正确的是（ ） A. 构建L1-GFP融合基因需要用到E1、E2、E4三种酶 B. E1、E4双酶切确保L1-GFP融合基因与载体的正确连接 C. GFP可用于检测受体细胞中目的基因是否表达 D. 将表达载体转入羊的乳腺细胞中可培育乳汁中含L1蛋白的转基因羊 17. DMF（一种含碳有机物）是一种优良的工业溶剂和有机合成材料，它广泛应用于制革、医药、农药等多个生产行业。含DMF的废水毒性大，会对环境造成严重危害，某实验小组筛选分离得到能够高效降解DMF的细菌，用于DMF的降解。相关叙述正确的是（ ） A. 分离高效降解DMF的菌株所用的培养基可以是液体培养基 B. 可采用平板划线法或稀释涂布平板法对细菌进行分离并计数 C. 利用平板划线法接种时，灼烧接种环的次数等于划线次数 D. 利用显微镜进行直接计数时，统计的结果往往大于实际活菌数 18. 下列关于接种、培养并分离酵母菌实验的叙述不正确的是（ ） A. 将接种环灼烧灭菌后，先在玻璃器皿的内壁上降温再挑取菌种 B. 为了防止污染，接种前要将接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C. 倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 D. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落 19. 实验可利用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数，下列叙述不正确的是（ ） A. 实验需用涂布器将菌液涂布于固体培养基表面 B. 通过统计平板上的菌落数推测出样品中的活菌数，菌落数为30-300个的平板合适 C. 涂布平板的所有操作都不需要在酒精灯火焰附近进行 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 20. 《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程，“以糯米或粳米等蒸熟，酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列相关叙述错误的是（ ） A. 糯米或粳米中所含物质可为微生物提供碳源和氮源 B. 利用酵母菌发酵的“七日”中一开始就有大量酒精产生 C. “入甑蒸令汽上”充分利用了酒精易挥发的特点 D. “酸坏”是醋酸菌将乙醇变为乙酸，温度应为30~35℃ 21. 山西老陈醋作为传统发酵食醋的代表之，其酿制过程一般包括制曲、淀粉糖化、酒精发酵、醋酸发酵四个阶段。下列叙述错误的是（ ） A. 酿制过程中的发酵微生物均为原核生物 B. 大曲中某些微生物可促进淀粉糖化过程 C. 酒精发酵后需要提高温度进行醋酸发酵 D. 通气条件下醋酸杆菌将酒精转变为醋酸 22. 自然发酵法酿造酱油时，先将浸泡的大豆蒸煮、冷却后与面粉混合，铺摊在空气流通处，使米曲霉等霉菌大量生长繁殖（制曲）。制曲后，混合质量分数20%的盐水制成酱醅，置于大缸内，在太阳下曝晒，定期翻酱。发酵结束后，收集液体经灭菌、分装制成酱油。下列叙述错误的是（　　） A. 参与酿造酱油的米曲霉等霉菌是需氧型微生物 B. 大豆、面粉为酿造酱油的微生物提供碳源、氮源 C. 抑制酱醅中的有害微生物主要依靠阳光中紫外线 D. 自然环境中的多种微生物赋予酱油特殊的风味 23. 活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料，常用于棉、麻等染色。现欲从染料废水堆积池的污泥中获得能分解活性黑5的假单胞杆菌菌株，流程如下图。下列说法不正确的是（　　） A. 从染料废水堆积池污泥中取样的原因是此处目的菌存在的可能性大 B. 培养基Ⅰ、Ⅱ均以活性黑5为唯一氮源，属于选择培养基 C. 在培养基Ⅰ、Ⅱ中都利用稀释涂布平板法进行接种，获得单菌落 D. 逐渐提高培养液中活性黑5浓度有助于获得具高效分解能力的目的菌 24. 在某靶向膜蛋白抗体药物的研发过程中，利用脂质体将含有膜蛋白胞外段基因的病毒颗粒导入到宿主动物细胞进行增殖，最终获得膜蛋白胞外段，以此作为抗原对小鼠进行免疫，进而制备相应的单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. 含膜蛋白胞外段基因的病毒颗粒需被包裹在脂质体内部 B. 对贴壁生长的动物细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶处理 C. 经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外培养时可持续分泌单克隆抗体 D. 将抗膜蛋白单克隆抗体与药物偶联，可以用来靶向治疗某些疾病 25. 青霉素是青霉菌分泌的一种抗生素。随着高产菌种的选育，发酵技术的发展，青霉素已经步入产业化生产的道路。下列叙述不正确的是（ ） A. 经过不断诱变、筛选获得生产用高产青霉菌株 B. 用过滤、沉淀等方法将青霉菌体分离、干燥即可获得青霉素 C. 发酵过程要随时检测培养液微生物数量、产物浓度、溶氧等 D. 发酵工程所用培养基和设备必须严格控制无菌 26. 百岁兰是一种裸子植物，被誉为植物界的“活化石”。为研发高效的百岁兰叶片愈伤组织诱导体系，探究避光与昼夜节律（每天16h光照和8h黑暗）条件对诱导百岁兰叶片愈伤组织的影响，结果见下图。相关叙述错误的是（ ） A. 培养基中需要加入适宜比例的生长素和细胞分裂素 B. 愈伤组织形成经过已分化细胞变成未分化细胞过程 C. 百岁兰叶片经诱导形成的愈伤组织不具有全能性 D. 与避光相比，昼夜节律下百岁兰愈伤组织生长得更好 27. 白叶枯病是水稻最严重的病害之一，疣粒野生稻具有高度抗病性。利用疣粒野生稻与栽培稻进行体细胞杂交培育抗病植株（如下图）。对获得的72株杂种植株鉴定，发现24株染色体数目在27~38条之间，40株表现抗病。下列叙述不正确的是（ ） A. ①用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B. ②可用聚乙二醇、灭活病毒等方法处理，获得融合细胞 C. 杂种植株形成说明两种细胞融合后分裂能力恢复 D. 杂种植株细胞中染色体的丢失可能与X射线照射有关 28. 某同学计划分离土壤中能水解纤维素的微生物并观察其菌落。下列关于此实验的叙述，正确的是（ ） A. 选择培养的培养基以纤维素作为唯一氮源，并加入琼脂作凝固剂 B. 用平板划线法在酚红培养基接种，根据透明圈大小筛选出纤维素分解菌 C. 培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从电源插上开始计时 D. 把滤纸埋在土壤中，一段时间后从已腐烂的滤纸上筛选目的菌 29. 紫杉醇存在于红豆杉属植物体内，具有较强抗癌作用。为保护野生红豆杉资源，科研人员用图示方法提取紫杉醇。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①需要调控细胞分裂素和生长素的比例 B. 过程①②每天都需要在光照条件下进行 C. 过程②③需要转接到生根培养基上培养 D. 过程①②③体现出红豆杉细胞具有全能性 30. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 31. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如下图所示。 以下说法错误的是（ ） A. 过程实质是基因的选择性表达 B. 过程可用聚乙二醇诱导细胞融合 C. 培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液 D. 可将丁细胞注射到小鼠脾脏中提取单克隆抗体 32. 基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法正确的是（　　） A. 大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B. 用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C. 含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用植物组织培养技术 D. 将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入乳腺细胞后可获得乳腺生物反应器 33. 在生产实践中，不需要运用多项生物工程技术的是（ ） A. 单克隆抗体的制备 B. 人胰岛素工业化生产 C. 转基因抗虫棉的培育 D. 用尿素鉴别尿素分解菌 34. 第三次全国大熊猫野外种群调查显示，全国野生大熊猫不足1600只，为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，下列相关叙述正确的是（　　） A. 卵（母）细胞质具有调控细胞核基因表达的作用 B. 图中用激素处理可使供体和代孕受体同期发情 C. 图中的熊猫甲与亲代雌性大熊猫的性状基本相同 D. 熊猫乙和熊猫丙的基因型和表型一定都相同 35. CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，作用机制如图。单链向导RNA（sgRNA）能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。下列相关分析不正确的是（　　） A. 对不同目的基因编辑时，需使用不同的sgRNA B. Cas9可催化脱氧核苷酸链上特定氢键的水解 C. sgRNA过短可能因不能准确识别造成错误编辑 D. 基因编辑技术可实现对特定基因的定点插入、敲除或替换 36. 利用农杆菌的Ti质粒作为载体进行转基因操作获得转基因水稻。下列叙述正确的是（　　） A. Ti质粒是一种环状DNA分子，属于农杆菌的拟核DNA B. 目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA C. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到水稻细胞的染色体DNA上 D. 利用农杆菌转化法将重组质粒导入水稻细胞是培育转基因水稻的核心步骤 37. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的相关叙述，不正确的是（　　） A. 利用DNA在酒精中溶解度较大的特性提取DNA B. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 C. PCR扩增目的基因时，变性是温度最高的环节 D. 凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象有关 38. MDCK细胞是从犬肾脏组织中分离培育建立的细胞系，MDCK细胞对流感病毒易感。下列关于利用悬浮培养技术培养MDCK细胞的相关叙述，不正确的是（　　） A. 悬浮培养MDCK细胞可有效避免贴壁生长与接触抑制现象 B. 培养MDCK细胞时，需要为其创造95%空气和5%CO2的气体环境 C. 培养MDCK细胞时，为减少杂菌污染需定期更换培养液 D. MDCK细胞可用于流感病毒的扩增及特性等研究 39. 科学家以水稻（2n=24）和稗草（2n=54）为材料，利用植物体细胞杂交技术获得了具有稗草抗逆性（如耐盐、抗除草剂）的水稻，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 获得原生质体时，需要在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B. 原生质体融合前需用胰蛋白酶处理，以获得有活力的原生质体 C. 可以用离心、聚乙二醇或灭活病毒诱导两种原生质体融合 D. 该技术打破水稻与稗草之间的物种界限，实现了远缘杂交育种 40. 脱氧核苷三磷酸（dNTP）3'-C上的-OH脱O后转化为双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）。在PCR反应体系中加入模板、4种dNTP、1种32P标记的ddNTP和1种引物及其它所需材料，经扩增后获得不同长度的DNA片段混合物。分别利用如图所示4种32P标记的ddNTP进行PCR后，将产物点样在变性凝胶上进行电泳分离，通过放射性自显影检测，就可以读出DNA的核苷酸序列。下图为某待测DNA片段的电泳检测结果，下列说法错误的是（ ） A. PCR反应体系中的退火温度适当升高可以提高PCR特异性 B. 连接到核苷酸链上的ddNTP因3'-C上没有-OH而导致DNA延伸中断 C. 该DNA片段的待测碱基序列为5'-TTGGCTGCAA-3' D. 该PCR过程中待测DNA片段只有1条链作为模板 二、非选择题：本题共4题，共40分。 41. 石油烃（主要含有C、H元素）是石油中的主要成分，研究人员从被石油污染的土壤中分离可高效降解石油烃的菌株的部分过程如图所示，①~③表示不同过程。 （1）图中需要在无菌环境下进行的操作有_______（填序号）。③的培养基中添加石油烃的作用是_______。 （2）图示分离获得单菌落的方法是_______。若③的平板上统计的菌落数为112个，则10g土壤中石油烃降解菌的数目约为_______个。该数值往往比活菌的实际值小，原因是_______。 （3）为检测不同菌株降解石油烃的能力，挑取③的不同菌落分别接种到含有等量石油烃的培养液中。培养一段时间后，检测_______。经检测，菌株BS3为降解石油烃能力最强的菌株，为将其用于环境治理，研究人员进行相关实验，结果如图所示。据图分析可得出的结论有_______。 42. 我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型。其中BMAL1基因敲除猴的基本构建流程如图所示。回答下列相关问题： （1）为了让母猴超数排卵，以便采集更多的卵母细胞，需要给它注射_______，采集卵母细胞后，在体外培养到_______期才去核，去除的“核”实际上是指_______。 （2）除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、_______和化学物质处理等方法去核。 （3）一次核移植技术后，需要获得更多的基因敲除猴，可在囊胚期对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_______。若想要对移植前胚胎进行性别鉴定，应选择囊胚期的_______细胞。 （4）将早期胚胎移植到代孕母猴子宫内，为了使代孕母猴生理状况更适合完成该操作，要对代孕母猴进行_______处理，以提高成功率。由此可见，胚胎移植的实质是_______。 （5）不考虑基因突变，利用A6的成纤维细胞进行克隆获得的多只第二代基因敲除猴，与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是_______（写出1点即可）。 43. 叶盘转化法是Horsch 等人于1985年发展起来的一种转化法，以培育转基因 耐盐毛白杨为例，操作程序是先将毛白杨叶子表面进行消毒，再用消毒过的打孔器从 叶子上取下圆形小片，即叶盘。然后进行下列操作，请回答： （1）毛白杨叶盘与重组农杆菌共培养以进行遗传转化：农杆菌能够介导转化的原因是_________。 （2）脱分化和筛选培养：叶盘接种在含卡那霉素的培养基上，卡那霉素的作用是 _______， 作为运载体的Ti 质粒应含有 _____________基因，运载体上的__________是 RNA 聚 合酶识别和结合的位点。 （3）获得抗性植株：叶盘周围长出愈伤组织后分别转移到诱导“生芽”和“生根”的培养 基中，此过程培养基中加入的植物激素主要是________。 （4）耐盐基因的检测与鉴定： ①分子水平：可采用______ 的方法来检测转基因毛白杨提取液中有无相应的耐盐蛋白。 ②个体水平：请设计个体水平检测方案 ______________________________ 。 44. 胶原蛋白在维持器官、组织、细胞形态和功能等方面发挥着关键性作用，传统提取方法得到的胶原蛋白成分复杂，还可能携带动物病毒等。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如图所示。回答下列问题： 注：BamHI、HindⅢ、EcoRI为限制酶，tsr为硫链丝菌素抗性基因，ori为复制原点 已知Hind Ⅲ的识别序列及切割位点为5′-A↓AGCTT-3′；EcoR Ⅰ的识别序列及切割位点为5′-G↓AATTC-3′；BamH Ⅰ的识别序列及切割位点为5′-G↓GATCC-3′。 （1）图中①过程需要使用_______酶，该过程得到的DNA片段_______（填“含有”或“不含有”）启动子序列。 （2）②过程需要使用的限制酶为_______。已知kit部分基因（如下所示）且基因上并无质粒中相关限制酶识别序列，为使基因与质粒成功连接，利用PCR技术扩增kit基因时需要设计一对引物，这对引物的序列分别是_______、_______（从引物5′端开始书写，只写前12个碱基即可） 5′-CGGGATCCA……AGAATTCCG-3′ 3′-GCCCTAGGT……TCTTAAGGC-5′（模板链） （3）双酶切kit基因与质粒pET-28a（+）长度为170bp的片段进行置换，构建重组质粒pET-28a（+）-kit，上述两种质粒经Hind Ⅲ切割后片段长度如表所示（每种片段各1个）。由此判定kit基因长度为_______；该基因上有_______个Hind Ⅲ切割位点，依据是_______。 质粒类型 pET-28a（+） pET-28a（+）-kit 经Hind Ⅲ酶切片段 1000bp、2550bp 1050bp、2500bp、1500bp 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $