精品解析：河北唐山市迁安市第四高级中学2025-2026年度高二年级第二学期期中考试生物学试题

2025—2026年度高二年级第二学期期中考试生物学试题 考生须知 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 在用传统发酵技术制作发酵食品过程中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ） ①传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 ②果酒发酵和果醋发酵过程中，发酵液的pH都会下降 ③制作腐乳和酱油都有微生物产生蛋白酶将蛋白质分解成肽和氨基酸的过程 ④制作传统泡菜时，需用体积分数为70%的酒精对泡菜坛和蔬菜等原料进行消毒 ⑤向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水，为了防止杂菌污染 A. ①②③ B. ②③④ C. ①②⑤ D. ①②④⑤ 【答案】A 【解析】 【分析】１、制作果酒的酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，有氧条件下酵母菌有氧呼吸，大量繁殖，无氧条件下发酵产生酒精。 ２、制作果醋的醋酸菌的代谢类型是异养需养型，发酵过程一直要通入无菌空气。 ３、腐乳是用豆腐发酵制成，多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 【详解】①传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，通常是家庭或作坊式的，①正确； ②果酒制作过程中产生的二氧化碳和果醋制作过程中产生的醋酸都会导致发酵液中的pH下降，②正确； ③制作腐乳和酱油过程中都有利用霉菌产生的蛋白酶将原材料中的蛋白质分解成小分子的短肽和氨基酸，③正确； ④制作传统泡菜时，不需要对蔬菜进行消毒，④错误； ⑤向泡莱坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环境，并不是为了防止杂菌污染，⑤错误。 综上，①②③正确，④⑤错误，A正确，BCD错误。 故选A。 2. A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ） A. 实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理 B. 四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好 C. 滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强 D. 接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养 【答案】C 【解析】 【分析】实验室常用的灭菌方法： ①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。 ②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。 ③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。 【详解】A、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术，可以对培养皿进行灭菌处理，A正确； B、据抑菌圈的大小，抗生素D的抑菌圈最小，治疗Sau感染引起的肺炎效果最差；而抗生素A抑菌圈最大，则治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，B正确； C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远，药性变弱，说明菌落抗药性越弱，C错误； D、接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养，防止冷凝水滴落引发杂菌污染，D正确。 故选C。 3. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更丰富，产量和质量明显提高。下列说法正确的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B. 发酵工程的产品只包括微生物的代谢物和酶 C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径。 D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 【答案】C 【解析】 【详解】A、发酵工程和传统发酵技术均利用微生物进行发酵，二者最大区别是发酵工程可通过无菌操作实现纯种发酵，且能精准控制发酵条件，A错误； B、发酵工程的产品包括微生物代谢物、酶以及微生物菌体本身，B错误； C、发酵环节中，温度、pH、溶解氧等发酵条件变化会影响微生物酶的活性，既会影响微生物的生长繁殖，也会改变微生物的代谢途径，进而得到不同代谢产物，C正确； D、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。 4. 下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述，正确的是（　　） A. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开 B. 限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越小 C. 序列—C↓ATG—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同 D. DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接 【答案】C 【解析】 【详解】A、限制酶切割DNA双链时，1个切口会断开2个磷酸二酯键（两条链各1个），获得1个外源基因需要2个切口，共断开4个磷酸二酯键，A错误； B、限制酶识别序列越短，序列在DNA中随机出现的概率越高（识别n个碱基的序列出现概率为1/4n），B错误； C、序列—C↓ATG—切割后露出的黏性末端碱基数为3个，序列—G↓GATCC—切割后露出的黏性末端碱基数为4个，二者黏性末端碱基数不同，C正确； D．DNA连接酶包括E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶，其中E·coli DNA连接酶主要催化黏性末端连接，D错误。 5. 甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（　　） A. 需用几丁质酶和果胶酶来降解甘薯细胞壁 B. 为防止原生质体失水，需使用低渗缓冲液 C. M1具有两个物种的所有性状，且染色体数目为2N=120 D. 在培育M1时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此需用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁，而非几丁质酶，A错误； B、原生质体在低渗溶液中会因渗透吸水而涨破，需使用等渗缓冲液维持渗透压平衡，B错误； C、体细胞杂交后，杂种细胞的染色体数为两亲本之和（90+30=120），但由于基因选择性表达或存在不亲和性，杂种植株的性状可能不完全包含两个物种的所有性状，C错误； D、MS培养基是植物组织培养的常用基础培养基，体细胞杂交后的杂种细胞需在MS培养基中诱导脱分化和再分化，D正确。 故选D。 6. 图示一种植物组织培养周期，①~③表示相应过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 B. 过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞 C. 过程②③所用培养基的成分、浓度相同 D. 培养基中糖类既能作为碳源，又与维持渗透压有关 【答案】C 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。 【详解】A、过程①形成了愈伤组织，发生了细胞的脱分化，此时细胞还进行有丝分裂，A正确； B、过程②是愈伤组织经再分化形成胚状体的过程，故经过再分化形成不同种类的细胞，B正确； C、过程②③所有培养基的成分、浓度不完全相同，如细胞分裂素和生长素的浓度不同，C错误； D、培养基中常加入蔗糖，既能作为碳源，又与维持渗透压有关，D正确。 故选C。 7. 假设世界上最后一头野驴刚刚死亡，以下使它“复生”的方案中最可行的是（　　） A. 将野驴的每个基因逐个导入家驴的受精卵中，培育出新个体 B. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养培育出新个体 C. 将野驴的体细胞与家驴的去核卵母细胞融合，经孕育培育出新个体 D. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育出新个体 【答案】C 【解析】 【详解】A、将野驴的每个基因逐个导入家驴的受精卵中，培育出新个体，因为受精卵中有家驴的遗传物质，因此并不是野驴的复生，况且工程太大，不具有可行性，A错误； B、动物体细胞全能性受限制，仅依靠组织培养技术无法直接由体细胞培育出新个体，不具有可行性，B错误； C、将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的去核卵细胞中形成重组细胞，通过早期胚胎培养技术获得早期胚胎，而后经过胚胎移植实现野驴的复生，该思路可行性强，C正确； D、动物体细胞全能性受限制，利用动物细胞融合技术将野驴的体细胞两两融合，也无法经组织培养产生新个体，若能成功其中的染色体数目与野驴体细胞中的染色体也不同，不具有可行性，D错误。 8. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图为治疗性克隆的过程，有关叙述错误的是（ ） A. 细胞A常采用去核的卵母细胞 B. 动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体 C. 胚胎干细胞分化为不同细胞的过程中发生了基因的选择性表达 D. 该治疗过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示表示治疗性克隆的过程，该过程利用了动物细胞核移植技术，该技术体现了动物细胞核的全能性。 【详解】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确； B、动物细胞的培养需提供95%空气（有利于细胞呼吸，进行正常代谢活动）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确； C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，C正确； D、该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，D错误。 故选D。 9. 以下关于基因表达载体组成的说法正确的是（　　） A. 基因表达载体通常采用抗生素合成基因作为标记基因 B. 终止子在基因的上游，它控制着转录的结束 C. 基因表达载体中启动子的作用是驱动基因转录出mRNA D. 基因表达载体的组成应包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等 【答案】C 【解析】 【分析】基因表达载体的组成应包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等，启动子位于基因的上游，它控制转录的开始，终止子位于基因的下游，它控制着转录的结束。 【详解】A、基因表达载体通常采用抗生素抗性基因作为标记基因，以方便筛选重组质粒，A错误； B、终止子位于基因的下游，它控制着转录的结束，B错误； C、启动子位于基因的上游，它是RNA聚合酶识别和结合部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，C正确； D、基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因等，终止密码子位于mRNA上，D错误。 故选C。 10. 利用PCR方法克隆水通道蛋白的基因P。基因P的部分序列如下图，请从①―④中选择扩增P基因的合适引物组合（ ） 5'-GAAGTCCTCT--------------ACGACGAACC-3' 3'-CTTCAGGAGA--------------TGCTGCTTGG-5' ①5'-GAAGTCCTCT-3'②3'-TGCTGCTTGG-5'③3'-CTTCAGGAGA-5'④5'-ACGACGAACC-3' A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ②④ 【答案】A 【解析】 【分析】利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA复制，PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3＇端通过碱基互补配对结合。 【详解】在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的， PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，故引物分别为①②，不是③④，A符合题意。 故选A。 11. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的是（　　） A. PCR扩增过程中双链DNA 解旋是通过酶解旋实现的 B. 在凝胶中DNA 分子的迁移速率只与凝胶的浓度、DNA 分子的大小有关 C. PCR反应体系中需加入适量 ATP 溶液来驱动子链延伸 D. PCR扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器。一次PCR一般要经历30次循环。 【详解】A、进行PCR扩增反应，PCR扩增过程中高温使双链DNA解旋，A错误； B、在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小、构象、凝胶的浓度等有关，B错误； C、PCR反应通过控制温度使DNA复制在体外反复进行，不需要加ATP，C错误； D、不同大小的DNA片段在琼脂糖凝胶中的移动速率不同，PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定，D正确。 故选D。 12. 华西牛是我国具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种。科研人员在生产中采取胚胎工程的手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述正确的是（ ） A. 采集的华西牛精子需要进行获能处理后，获能是指获得ATP B. 可以选择发育良好的囊胚或桑葚胚进行分割，获得同卵双胎或多胎 C. 受体母牛需性状优良且有较强的繁殖力，胚胎移植前需进行同期发情处理 D. 移植胚胎前需对代孕母牛进行免疫排斥反应检测 【答案】B 【解析】 【详解】A、精子获能是指精子在雌性生殖道内获得受精能力的过程，并非指获得ATP，A错误； B、胚胎分割通常选择发育良好的桑葚胚或囊胚阶段，因这两个时期细胞分化程度低，分割后易成功发育为完整个体，B正确； C、受体母牛只需健康且生理状态与供体同步，无需性状优良（遗传信息由供体胚胎决定），但需同期发情处理以保证子宫环境同步，C错误； D、正常情况下，代孕母牛不会对外来胚胎发生免疫排斥，故无需进行免疫排斥反应检测，D错误。 故选B。 13. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料 B. 利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 【答案】B 【解析】 【分析】PCR的原理是DNA复制，DNA的单体是脱氧核糖核苷酸。琼脂糖凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果。 【详解】A、PCR的原理是DNA复制，DNA的单体是脱氧核糖核苷酸，配制PCR反应体系时，加入4种脱氧核糖核苷酸的等量混合液作为扩增原料，A错误； B、琼脂糖凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确； C、将配制的酵母培养基高压灭菌并冷却到不烫手（50℃左右）后，在酒精灯火焰旁倒平板，C错误； D、将接种环烧红，待冷却后（避免菌种被烫死），蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落，D错误。 故选B。 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 14. 研究人员用花椰菜(BB，2n=18)根与黑芥(CC，2n=16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述不正确的是（　　） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞，有可能是两个花椰菜原生质体融合或两个黑芥原生质体融合等，A错误； B、杂种细胞经过培养形成再生植株N，这证明了杂种细胞仍具有全能性，B正确； C、花椰菜和黑芥是不同物种，它们之间存在生殖隔离。原生质体能融合不能证明不存在生殖隔离，C错误； D、植株N（BBCC）的B组和C组都存在同源染色体，在减数分裂时能正常联会配对，能产生可育配子，D错误。 15. 植物细胞壁中存在大量不能被动物消化的多聚糖类物质；研究人员通过生物工程技术培育出含多聚糖水解酶基因猪，主要流程如下图，①～⑤表示操作过程。下列有关说法正确的是（　　） A. 在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达 B. 用蛋白酶合成抑制剂激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程 C. 从卵巢中采集的卵母细胞需培养到MⅡ期后用显微操作技术去除核膜包裹的细胞核 D. ④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、诱导型启动子的转录活性可受特定诱导物调控，在基因表达载体中构建该启动子后，可通过添加对应诱导物激活下游多聚糖水解酶基因的表达，A正确； B、重构胚的激活常用：电刺激、化学物质（如钙离子载体）、蛋白酶合成抑制剂（如环己酰亚胺）等促使其完成分裂发育的作用，B正确； C、MⅡ期卵母细胞处于减数第二次分裂中期，核膜已经解体，不存在核膜包裹的细胞核，此时去核操作去除的是纺锤体-染色体复合物，C错误； D、④为胚胎移植过程，该过程的实质就是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 16. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述不正确的是（　　） A. 应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C. 步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、PML蛋白单克隆抗体的制备过程，应用PML蛋白作为抗原间隔多次免疫小鼠，目的是获得更多的能产生PML蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误； B、W细胞是先用PML蛋白免疫而获得相应的B淋巴细胞，后通过筛选提取能产生单一抗体的B淋巴细胞，B错误； C、根据题意可知步骤1是诱导W细胞与骨髓瘤细胞融合，步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C错误； D、根据电泳结果可知应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体，因为孔2中的细胞能特异性产生抗PML蛋白的抗体，D正确。 17. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示(“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极)。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（　　） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量一定相同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 【答案】CD 【解析】 【详解】A、配制琼脂糖凝胶时选用适当缓冲溶液，可维持电泳过程中体系的pH稳定，保证核酸分子正常泳动，A正确； B、电泳时，样品向+极移动，说明在该实验条件下甲、乙两种 DNA 分子均带负电荷，符合核酸分子在电泳中的带电特性，B正确； C、电泳中，DNA分子的迁移速率与分子大小、电荷的多少等多种因素有关。甲、乙电泳条带位置虽然相同，但影响DNA分子的迁移速率的因素很多，所以碱基对的数量可能不同，C错误； D、甲只有限制酶R的一个酶切位点，若被酶R完全酶切，只会得到2种DNA片段（2个条带），这两个条带的碱基数量比甲要少，电泳跑的距离要比甲更远，所以据图推测样品4才是甲被酶R完全酶切后的产物，D错误。 18. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述正确的是（　　） A. 反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 B. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 C. 转基因产品具有优良的品质，实验室培育的转基因产品可直接上市推广 D. α-淀粉酶基因与目的基因同时转入植物中能防止转基因花粉的传播 【答案】ABD 【解析】 【分析】 【详解】A、设计试管婴儿技术若被滥用，会出现人为选择性设计婴儿性别、特定性状等违背伦理道德的情况，这是反对设计试管婴儿的重要原因之一，A正确； B、生物武器传染性强、危害范围大，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的核心内容之一，B正确； C、实验室培育的转基因产品必须经过多轮严格的安全性评价、获得相关审批后才能上市推广，不可直接上市，C错误； D、将α-淀粉酶基因与目的基因共同转入植物后，可调控α-淀粉酶在花粉中特异性表达，水解花粉中的淀粉使花粉失去活性，进而避免转基因花粉扩散造成基因污染，D正确。 三、非选择题：本题共5题，共59分。 19. 醋酸菌是一类生活在富含有机质土壤表层的细菌。筛选、鉴别醋酸菌的培养基常用米曲汁乙醇培养基（米曲汁中富含蛋白质），该培养基的配方如下表。已知当微生物产生的物质能够与培养基中特定成分（如米曲汁乙醇培养基中的碳酸钙）发生反应时，会使得原本不透明的培养基区域变得透明；醋酸会与碳酸钙反应生成醋酸钙和碳酸；大多数细菌在体积分数大于5%的乙醇中会被杀死。回答下列问题： 组分 体积分数为8%的乙醇 碳酸钙 琼脂 米曲汁 含量 40mL 15g 10g 定容至1000mL （1）从物理性质看，米曲汁乙醇培养基为_______培养基，该培养基中能为醋酸菌提供碳源的物质是_______，土壤中微生物数量繁多，种类庞杂，该培养基能筛选出醋酸菌的原因是_______。 （2）某实验小组将富集液进行梯度稀释，分别取104、105和106倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，结果各平板的菌落数分别为（39、42、37），（276、291、283），（6、11、9）。三组中适合用于计数的两组为________倍数的稀释液；该方法统计的菌落数量比实际活菌数目_______（填“多”或“少”）。为增加实验的信度，应再增设空白对照组，对照组的设计是________。 （3）根据米曲汁乙醇培养基平板上菌落周围的透明圈可初步判断该菌落为醋酸菌，原因是_______。为进一步鉴别醋酸菌，可挑选菌落丰厚、边缘整齐、透明圈大的菌落，接种到液体米曲汁乙醇培养基中培养并进行产醋酸实验。 （4）为了进一步挑选出耐酸的醋酸菌，需将（3）中获得的菌种接种于含_______的培养基进行筛选。当氧气充足、_______时，醋酸菌能将_______，再将其转变为醋酸。 【答案】（1） ①. 固体 ②. （体积分数为8%的)乙醇（和米曲汁） ③. 体积分数为8%的乙醇具有抑菌作用(大多数细菌在体积分数为8%的乙醇中会被杀死），而醋酸菌能利用乙醇（合理即可） （2） ①. 104、105 ②. 少 ③. 取一空白培养基，接种0.1mL无菌水(或不接种），置于相同条件下培养相同时间（合 理即可） （3）醋酸菌发酵产生醋酸，醋酸与碳酸钙反应生成醋酸钙和碳酸，在菌落周围形成透明圈 （4） ①. 高浓度醋酸(或乙醇、рH为酸性） ②. 缺少糖源 ③. 乙醇转变为乙醛 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 分析题意，该培养基含有琼脂，故属于固体培养基；该培养基中能为醋酸菌提供碳源的物质是乙醇和米曲汁（米曲汁含蛋白质，分解后可提供碳源）；由于体积分数为8%的乙醇具有抑菌作用(大多数细菌在体积分数为8%的乙醇中会被杀死），而醋酸菌能利用乙醇，故该培养基能筛选出醋酸菌。 【小问2详解】 稀释涂布平板法应选择菌落数在30-300之间的进行计数，故应选择10⁴和10⁵倍数的稀释液；由于多个连在一起的活菌可能形成单一菌落，故该方法统计的菌落数量比实际活菌数目少；为增加实验的信度，应再增设空白对照组，对照组的设计是取一空白培养基，接种0.1mL无菌水(或不接种），置于相同条件下培养相同时间，用于验证培养基是否灭菌彻底。 【小问3详解】 由于醋酸菌发酵产生醋酸，醋酸与碳酸钙反应生成醋酸钙和碳酸，在菌落周围形成透明圈，故根据米曲汁乙醇培养基平板上菌落周围的透明圈可初步判断该菌落为醋酸菌。 【小问4详解】 微生物培养时应提供其适宜的环境，为了进一步挑选出耐酸的醋酸菌，需将（3）中获得的菌种接种于含为了进一步挑选出耐酸的醋酸菌，需将（3）中获得的菌种接种于含的培养基进行筛选；果醋发酵时，当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇转变为乙醛，再将其转变为醋酸。 20. 美国新希望生殖医学中心张进团队于2016年10月19日在美国生殖医学学会会议上正式宣布，世界首个细胞核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。下图是该男婴的培育过程示意图，请据图回答问题： （1）上述“三亲婴儿”的核DNA由_____提供，质DNA由_____提供。由此可见，“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代_____（填“细胞核或细胞质”）遗传病的发生。 （2）为获取更多的卵细胞，需要对女性注射_____激素。过程③的体外进行时需要对精子进行_____处理。 （3）过程④是_____，需将受精卵移入发育培养液继续培养。以检查受精状况和受精卵的发育能力。 （4）过程⑤是_____技术，取_____ 的滋养层细胞可以对移植前的胚胎进行性别鉴定可采用的鉴定方法是_____法。 【答案】（1） ①. 母亲甲和父亲丙 ②. 捐献者乙 ③. 细胞质 （2） ①. 促性腺激素 ②. 获能 （3）早期胚胎培养 （4） ①. 胚胎移植 ②. 囊胚期 ③. DNA分析法或染色体鉴定法 【解析】 【分析】1、分析图解：图中过程①表示将两个卵母细胞进行细胞核移植，过程②表示将重组卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，过程③表示体外受精，④表示早期胚胎培养，⑤表示胚胎移植。因此根据图示可以得出，“三亲婴儿”的三亲分别为捐赠者乙（提供细胞质基因）、母亲甲（提供一半细胞核基因）、父亲丙（提供一半细胞核基因）。 2、表示动物细胞培养过程，该过程需要的条件有：①无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物。②营养物质。③适宜的温度和pH。④一定的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【小问1详解】 看图可知：上述“三亲婴儿”的核DNA由母亲甲和父亲丙提供，质DNA由捐献者乙提供。由此可见，由于细胞质基因不是直接来自亲本，因此“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代细胞质遗传病的发生。 【小问2详解】 为获取更多的卵细胞，需要对女性注射促性腺激素，可得到设想的结果，并且可以避免性激素的副作用，精子获得后不具有受精能力，过程③在体外进行时需要对精子在体外进行精子获能处理，才能与卵细胞受精。 【小问3详解】 观察图中信息可知，过程④是早期胚胎培养，需将受精卵移入发育培养液继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。 【小问4详解】 过程⑤是胚胎移植技术，对胚胎进行性别鉴定应取囊胚期的内细胞团滋养层，利用染色体分析法或DNA分析法。 21. 癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白，临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症下图是CEA单克隆抗体的制备过程示意图，回答下列有关问题： （1）制备CEA的单克隆抗体时，首先将_____注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应。B过程是动物细胞融合，该过程常用的方法_____（至少回答两点） （2）经过多次筛选，最终获得的杂交瘤细胞具有_____的特点。 （3）在动物细胞培养过程中，在使用合成培养基时通常需加入_____等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2用于细胞有氧呼吸，CO2的作用是_____。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_____。 （4）CEA单克隆抗体具主要优点是_____。CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后，可以使抗癌药物定向作用于癌细胞，该过程所利用的免疫学原理为_____。 【答案】（1） ①. 癌胚抗原（CEA） ②. 电激、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒等 （2）既能产生CEA抗体，又能无限增殖 （3） ①. 血清、血浆 ②. 维持培养液pH ③. 接触抑制 （4） ①. 特异性强、灵敏度高、可大量制备等 ②. 抗原和抗体的特异性结合 【解析】 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【小问1详解】 要制备CEA的单克隆抗体，首先需要获得产生该抗体的B淋巴细胞。因此将癌胚抗原(CEA)注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠脾脏中获取B淋巴细胞。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，常用的诱导因素有电激、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒等。 【小问2详解】 由于融合过程中可能存在B淋巴细胞之间融合和骨髓瘤细胞之间融合，融合过程具有随机性，需要对获得的细胞进行筛选。经过多次筛选，最终获得的杂交瘤细胞既能产生CEA抗体，又能无限增殖。 【小问3详解】 在动物细胞体外培养过程中在使用合成培养基时通常需加入血清、血浆等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2用于细胞有氧呼吸，CO2的作用是维持培养液pH。在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 【小问4详解】 与传统的血清抗体相比,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点。CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后，可以使抗癌药物定向作用于癌细胞，这是基于抗原和抗体的特异性结合的原理。 22. 如图表示培养克隆牛的流程。为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，流程中将Kdm4d（组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白去甲基化）的mRNA注入重构胚。回答下列问题： （1）体外培养牛乳腺细胞需要提供的条件是______、______、营养和气体环境，其中，在使用合成培养基进行细胞培养时，通常需要加入血清等天然成分，其作用是______。 （2）从B牛采集来的卵母细胞需要在体外培养至______期，才能进行去核操作，“去核”其实是去除______。 （3）胚胎移植过程中，需要对代孕母牛C进行同期发情处理的目的是______。为使胚胎移植能得到多个后代，可采用胚胎分割技术将______或囊胚进行分割，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____。进行胚胎移植的优势是_______。 （4）注入的Kdm4d的mRNA可以_______（填“降低”或“提高”）组蛋白的甲基化水平，使细胞发生表观遗传水平的变异，从而激活被抑制基因的表达。 【答案】（1） ①. 无毒、无菌的环境（合理即可） ②. 适宜的温度、pH和渗透压（可与前一空互换） ③. 补充未知成分，利于动物细胞生长 （分裂) （2） ①. MII（或MII中） ②. 纺锤丝-染色体复合物 （3） ①. 为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境 ②. 桑葚胚 ③. 内细胞团均等分割 ④. 可以充分发挥雌性优良个体 的繁殖潜力（合理即可） （4）降低 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【小问1详解】 细胞培养需要在恒定的温度（通常为36.5±0.5℃）、pH（7.2-7.4）和渗透压条件下进行，以模拟体内的生理环境，此外细胞培养过程中必须保持无菌，以防止微生物污染，影响细胞生长；使用合成培养基进行细胞培养时，通常需要加入血清等天然成分，其作用是补充未知成分，利于动物细胞生长 （分裂)。 【小问2详解】 卵母细胞在体外培养至成熟期（MII期）后，才能进行去核操作，以确保其具备受精和发育的能力；去核操作实际上是去除纺锤丝-染色体复合物，以便将供体细胞的核移植进去，形成重构胚。 【小问3详解】 通过激素处理，使代孕母牛与供体母牛的生理状态同步，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境；为了获得多个后代，可以将桑葚胚或囊胚进行分割；在分割囊胚时，需要注意将内细胞团均等分割，以确保每个分割后的胚胎都能正常发育；进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体 的繁殖潜力。 【小问4详解】 分析题意，Kdm4d是一种组蛋白去甲基化酶，能够催化组蛋白去甲基化，从而降低组蛋白的甲基化水平。 23. 外泌体是一种大小为30～100nm的细胞外膜囊泡，尤其在癌症的诊断及治疗等领域发挥重要作用。研究人员构建了含有近红外荧光蛋白iRFP682基因和外泌体标记蛋白CD63基因的表达载体。载体构建过程中用到的限制酶的切割位点及部分过程如图所示(Amp表示氨苄青霉素抗性基因)。请回答下列问题： （1）为将CD63-iRFP682基因与质粒进行准确和高效地连接，对CD63-iRFP682基因、质粒分别用___________、___________酶进行切割，破坏的化学键是___________；与只用一种限制酶酶切相比，采用双酶切的目的在于避免___________。基因表达载体中启动子的功能是___________。 （2）若将该基因片段扩增6次，则消耗___________个引物分子。 （3）将构建好的基因表达载体通过___________方法导入癌细胞。检测该基因表达载体是否成功导入受体细胞的便捷方法是___________。 （4）将目的基因导入大肠杆菌，提取其体内蛋白质注入兔子体内，进一步提取兔子体内的抗体，再与提取的转基因癌细胞外泌体中的蛋白质进行杂交，然后进行电泳。若CD63-iRFP682基因在癌细胞内表达，电泳结果会出现特异性条带，此过程依据的原理是___________。 【答案】（1） ①. BamHI、EcoRI ②. BglⅡ、EcoRI ③. 磷酸二酯键 ④. 含目的基因的DNA片段或质粒的自身环化以及错误(反向)连接 ⑤. 与RNA聚合酶结合，驱动转录 （2）126 （3） ①. 显微注射 ②. 在近红外灯下观察细胞是否出现荧光 （4）抗原-抗体杂交(或抗原抗体特异性结合) 【解析】 【小问1详解】 Not I位于目的基因内部，用Not I会破坏目的基因，不能选，为了避免目的基因及质粒自连，选用不同的黏性末端的酶来切目的基因和质粒，故切割质粒的酶只能选为Bgl Ⅱ和EcoR I。由于BamH I和Bgl Ⅱ产生的黏性末端相同，不能选Bgl Ⅱ，因此选用BamH I和EcoR I来切割目的基因。限制酶切割DNA断裂的化学键是磷酸二酯键；双酶切可以产生不同的粘性末端，相比单酶切，可避免含目的基因的DNA片段或质粒的自身环化以及错误(反向)连接，以实现目的基因的定向连接。启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，功能是驱动基因转录出mRNA。 【小问2详解】 采用PCR技术扩增CBHⅡ基因时需要根据CBHⅡ基因两端的碱基（核苷酸）序列设计2种引物，假设DNA复制6轮，子代DNA共有2n+1条链，因亲代DNA的两条母链不需要引物，故需要引物2n+1-2=27-2=126个。 【小问3详解】 将重组基因表达载体导入动物细胞（癌细胞）的常用方法是显微注射法；含有近红外荧光蛋白iRFP682基因能表达出红外荧光蛋白，因此检测该基因表达载体是否成功导入受体细胞的便捷方法是在近红外灯下观察家细胞是否出现红色荧光。 【小问4详解】 若CD63-iRFP682基因在癌细胞内表达，会形成相应的蛋白质，该蛋白质作为抗原注入兔子体内，会使兔子分泌相应的抗体，而该抗体会与该蛋白质发生抗原-抗体结合反应，形成特异性条带。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026年度高二年级第二学期期中考试生物学试题 考生须知 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 在用传统发酵技术制作发酵食品过程中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ） ①传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 ②果酒发酵和果醋发酵过程中，发酵液的pH都会下降 ③制作腐乳和酱油都有微生物产生蛋白酶将蛋白质分解成肽和氨基酸的过程 ④制作传统泡菜时，需用体积分数为70%的酒精对泡菜坛和蔬菜等原料进行消毒 ⑤向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水，为了防止杂菌污染 A. ①②③ B. ②③④ C. ①②⑤ D. ①②④⑤ 2. A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ） A. 实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理 B. 四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好 C. 滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强 D. 接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养 3. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更丰富，产量和质量明显提高。下列说法正确的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B. 发酵工程的产品只包括微生物的代谢物和酶 C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径。 D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 4. 下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述，正确的是（　　） A. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开 B. 限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越小 C. 序列—C↓ATG—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同 D. DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接 5. 甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（　　） A. 需用几丁质酶和果胶酶来降解甘薯细胞壁 B. 为防止原生质体失水，需使用低渗缓冲液 C. M1具有两个物种的所有性状，且染色体数目为2N=120 D. 在培育M1时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础 6. 图示一种植物组织培养周期，①~③表示相应过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 B. 过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞 C. 过程②③所用培养基的成分、浓度相同 D. 培养基中糖类既能作为碳源，又与维持渗透压有关 7. 假设世界上最后一头野驴刚刚死亡，以下使它“复生”的方案中最可行的是（　　） A. 将野驴的每个基因逐个导入家驴的受精卵中，培育出新个体 B. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养培育出新个体 C. 将野驴的体细胞与家驴的去核卵母细胞融合，经孕育培育出新个体 D. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育出新个体 8. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图为治疗性克隆的过程，有关叙述错误的是（ ） A. 细胞A常采用去核的卵母细胞 B. 动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体 C. 胚胎干细胞分化为不同细胞的过程中发生了基因的选择性表达 D. 该治疗过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 9. 以下关于基因表达载体组成的说法正确的是（　　） A. 基因表达载体通常采用抗生素合成基因作为标记基因 B. 终止子在基因的上游，它控制着转录的结束 C. 基因表达载体中启动子的作用是驱动基因转录出mRNA D. 基因表达载体的组成应包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等 10. 利用PCR方法克隆水通道蛋白的基因P。基因P的部分序列如下图，请从①―④中选择扩增P基因的合适引物组合（ ） 5'-GAAGTCCTCT--------------ACGACGAACC-3' 3'-CTTCAGGAGA--------------TGCTGCTTGG-5' ①5'-GAAGTCCTCT-3'②3'-TGCTGCTTGG-5'③3'-CTTCAGGAGA-5'④5'-ACGACGAACC-3' A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ②④ 11. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的是（　　） A. PCR扩增过程中双链DNA 解旋是通过酶解旋实现的 B. 在凝胶中DNA 分子的迁移速率只与凝胶的浓度、DNA 分子的大小有关 C. PCR反应体系中需加入适量 ATP 溶液来驱动子链延伸 D. PCR扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定 12. 华西牛是我国具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种。科研人员在生产中采取胚胎工程的手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述正确的是（ ） A. 采集的华西牛精子需要进行获能处理后，获能是指获得ATP B. 可以选择发育良好的囊胚或桑葚胚进行分割，获得同卵双胎或多胎 C. 受体母牛需性状优良且有较强的繁殖力，胚胎移植前需进行同期发情处理 D. 移植胚胎前需对代孕母牛进行免疫排斥反应检测 13. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料 B. 利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 14. 研究人员用花椰菜(BB，2n=18)根与黑芥(CC，2n=16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述不正确的是（　　） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 15. 植物细胞壁中存在大量不能被动物消化的多聚糖类物质；研究人员通过生物工程技术培育出含多聚糖水解酶基因猪，主要流程如下图，①～⑤表示操作过程。下列有关说法正确的是（　　） A. 在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达 B. 用蛋白酶合成抑制剂激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程 C. 从卵巢中采集的卵母细胞需培养到MⅡ期后用显微操作技术去除核膜包裹的细胞核 D. ④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 16. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述不正确的是（　　） A. 应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C. 步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 17. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示(“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极)。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（　　） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量一定相同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 18. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述正确的是（　　） A. 反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 B. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 C. 转基因产品具有优良的品质，实验室培育的转基因产品可直接上市推广 D. α-淀粉酶基因与目的基因同时转入植物中能防止转基因花粉的传播 三、非选择题：本题共5题，共59分。 19. 醋酸菌是一类生活在富含有机质土壤表层的细菌。筛选、鉴别醋酸菌的培养基常用米曲汁乙醇培养基（米曲汁中富含蛋白质），该培养基的配方如下表。已知当微生物产生的物质能够与培养基中特定成分（如米曲汁乙醇培养基中的碳酸钙）发生反应时，会使得原本不透明的培养基区域变得透明；醋酸会与碳酸钙反应生成醋酸钙和碳酸；大多数细菌在体积分数大于5%的乙醇中会被杀死。回答下列问题： 组分 体积分数为8%的乙醇 碳酸钙 琼脂 米曲汁 含量 40mL 15g 10g 定容至1000mL （1）从物理性质看，米曲汁乙醇培养基为_______培养基，该培养基中能为醋酸菌提供碳源的物质是_______，土壤中微生物数量繁多，种类庞杂，该培养基能筛选出醋酸菌的原因是_______。 （2）某实验小组将富集液进行梯度稀释，分别取104、105和106倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，结果各平板的菌落数分别为（39、42、37），（276、291、283），（6、11、9）。三组中适合用于计数的两组为________倍数的稀释液；该方法统计的菌落数量比实际活菌数目_______（填“多”或“少”）。为增加实验的信度，应再增设空白对照组，对照组的设计是________。 （3）根据米曲汁乙醇培养基平板上菌落周围的透明圈可初步判断该菌落为醋酸菌，原因是_______。为进一步鉴别醋酸菌，可挑选菌落丰厚、边缘整齐、透明圈大的菌落，接种到液体米曲汁乙醇培养基中培养并进行产醋酸实验。 （4）为了进一步挑选出耐酸的醋酸菌，需将（3）中获得的菌种接种于含_______的培养基进行筛选。当氧气充足、_______时，醋酸菌能将_______，再将其转变为醋酸。 20. 美国新希望生殖医学中心张进团队于2016年10月19日在美国生殖医学学会会议上正式宣布，世界首个细胞核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。下图是该男婴的培育过程示意图，请据图回答问题： （1）上述“三亲婴儿”的核DNA由_____提供，质DNA由_____提供。由此可见，“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代_____（填“细胞核或细胞质”）遗传病的发生。 （2）为获取更多的卵细胞，需要对女性注射_____激素。过程③的体外进行时需要对精子进行_____处理。 （3）过程④是_____，需将受精卵移入发育培养液继续培养。以检查受精状况和受精卵的发育能力。 （4）过程⑤是_____技术，取_____ 的滋养层细胞可以对移植前的胚胎进行性别鉴定可采用的鉴定方法是_____法。 21. 癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白，临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症下图是CEA单克隆抗体的制备过程示意图，回答下列有关问题： （1）制备CEA的单克隆抗体时，首先将_____注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应。B过程是动物细胞融合，该过程常用的方法_____（至少回答两点） （2）经过多次筛选，最终获得的杂交瘤细胞具有_____的特点。 （3）在动物细胞培养过程中，在使用合成培养基时通常需加入_____等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2用于细胞有氧呼吸，CO2的作用是_____。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_____。 （4）CEA单克隆抗体具主要优点是_____。CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后，可以使抗癌药物定向作用于癌细胞，该过程所利用的免疫学原理为_____。 22. 如图表示培养克隆牛的流程。为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，流程中将Kdm4d（组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白去甲基化）的mRNA注入重构胚。回答下列问题： （1）体外培养牛乳腺细胞需要提供的条件是______、______、营养和气体环境，其中，在使用合成培养基进行细胞培养时，通常需要加入血清等天然成分，其作用是______。 （2）从B牛采集来的卵母细胞需要在体外培养至______期，才能进行去核操作，“去核”其实是去除______。 （3）胚胎移植过程中，需要对代孕母牛C进行同期发情处理的目的是______。为使胚胎移植能得到多个后代，可采用胚胎分割技术将______或囊胚进行分割，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____。进行胚胎移植的优势是_______。 （4）注入的Kdm4d的mRNA可以_______（填“降低”或“提高”）组蛋白的甲基化水平，使细胞发生表观遗传水平的变异，从而激活被抑制基因的表达。 23. 外泌体是一种大小为30～100nm的细胞外膜囊泡，尤其在癌症的诊断及治疗等领域发挥重要作用。研究人员构建了含有近红外荧光蛋白iRFP682基因和外泌体标记蛋白CD63基因的表达载体。载体构建过程中用到的限制酶的切割位点及部分过程如图所示(Amp表示氨苄青霉素抗性基因)。请回答下列问题： （1）为将CD63-iRFP682基因与质粒进行准确和高效地连接，对CD63-iRFP682基因、质粒分别用___________、___________酶进行切割，破坏的化学键是___________；与只用一种限制酶酶切相比，采用双酶切的目的在于避免___________。基因表达载体中启动子的功能是___________。 （2）若将该基因片段扩增6次，则消耗___________个引物分子。 （3）将构建好的基因表达载体通过___________方法导入癌细胞。检测该基因表达载体是否成功导入受体细胞的便捷方法是___________。 （4）将目的基因导入大肠杆菌，提取其体内蛋白质注入兔子体内，进一步提取兔子体内的抗体，再与提取的转基因癌细胞外泌体中的蛋白质进行杂交，然后进行电泳。若CD63-iRFP682基因在癌细胞内表达，电泳结果会出现特异性条带，此过程依据的原理是___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $