2026届高三生物一轮复习第1节重组DNA技术的基本工具默写题

该高中生物学高考复习知识清单系统梳理了基因工程专题核心内容，涵盖重组DNA技术的操作要素、工具酶（限制酶、DNA连接酶）特性、载体条件及DNA粗提取与鉴定实验技术，构建了从原理到实践的完整知识框架。 清单采用问题链引导与对比分析相结合的方式，如通过“获取目的基因需限制酶切割几次”等问题培养科学思维，对比DNA连接酶与聚合酶作用差异强化结构与功能观（生命观念），标注限制酶不切割自身DNA的原因等易错点，助力学生自主构建知识网络，教师可据此高效指导复习，提升备考针对性。

第3章 基因工程 第1节 重组DNA技术的基本工具 1.基因工程：操作对象？操作环境？操作水平？原理？目的？优点？ 操作对象：基因 操作环境：体外 操作水平：分子水平 原理：基因重组 目的：定向地改造生物的遗传性状 优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物遗传性状 2.外源基因在受体细胞中能表达的原因？ 1)不同生物的DNA分子的结构基本相同； 2)不同生物的基因在表达时都遵循“中心法则”； 3)所有生物共用一套遗传密码。 3.重组DNA技术的基本工具有哪些？工具酶有哪些？ 工具有3种：限制酶、DNA连接酶、载体 工具酶有2种：限制酶、DNA连接酶 4.限制性内切核酸酶: ①主要来源？功能？作用部位？体现了酶的什么特性？结果形成怎样的末端? 主要来源：主要从原核生物中分离纯化 功能：识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开 作用部位：磷酸二酯键 酶的特性：专一性 结果：产生黏性末端或平末端 ②限制酶能切RNA分子吗？单链DNA呢？ 不能切RNA，不能切单链DNA ③限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？ 切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 细菌本身DNA中不存在该酶的识别序列，或者识别序列被修饰（甲基化）。 ④不同限制酶切出的黏性末端一定不同吗？ 可能相同（同尾酶） ⑤获取一个目的基因需限制酶切割几次？产生几个游离的磷酸基团？ 消耗几分子水？ 切割2次（切开双链DNA的两侧），产生4个游离的磷酸基团（每切断一个磷酸二酯键，产生一个游离磷酸基团），消耗4分子水。 5.DNA连接酶: ①两种DNA连接酶的区别？ E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏性末端和平末端，但E.coliDNA连接酶连接平末端效率较低。 ②DNA连接酶与DNA聚合酶作用的相同点和不同点是什么？ 相同点：都作用于磷酸二酯键 不同点：DNA连接酶连接两个DNA片段，不需要模板； DNA聚合酶将单个游离的脱氧核苷酸加到已有核苷酸片段的3'端，需要模板。 ③DNA片段经限制酶处理后产生的相同黏性末端，再经过DNA连接酶处理后，形成的新的识别序列，能否再被所用的限制酶识别？ 若两个相同黏性末端都是由同种限制酶切割后所得，能再被所用的限制酶识别。 若两个相同黏性末端是由不同限制酶切割所得，形成的新的识别序列不能再被所用的限制酶识别。如图： 6.载体： ①将外源基因直接导入受体细胞可行吗？为什么？ 不可行，容易被受体细胞内的酶降解，难以维持稳定和表达。 ②载体的种类有哪些？ 质粒存在于哪？化学本质是？ 种类：质粒（最常用）、 噬菌体、动植物病毒等 质粒：独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外 化学本质：环状双链DNA分子，能自我复制 ③载体需具备的条件有哪些？ 1)具有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入； 2)能在受体细胞中自我复制，或整合到受体DNA上随受体DNA同步复制； 3)具有标记基因（如抗生素抗性基因），便于重组DNA分子的筛选。 ④为保证目的基因和载体定向连接需怎样操作？ 双酶切 7.DNA的粗提取与鉴定： ①实验原理？ DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA和蛋白质。 ②95％酒精的作用？ 2mol/LNaCl的作用？ 二苯胺试剂的作用及颜色变化？需要加热吗？ 95%酒精：析出DNA（去除溶于酒精的杂质） 2mol/L NaCl：溶解DNA 二苯胺试剂：鉴定DNA，无色→蓝色,需要加热（沸水浴） 1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $