2026届高三生物一轮复习第1节重组DNA技术的基本工具默写题

第3章 基因工程

第1节 重组DNA技术的基本工具

1.基因工程：操作对象？操作环境？操作水平？原理？目的？优点？

操作对象：基因      操作环境：体外     操作水平：分子水平     原理：基因重组    

目的：定向地改造生物的遗传性状      优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物遗传性状

2.外源基因在受体细胞中能表达的原因？

1)不同生物的DNA分子的结构基本相同；

2)不同生物的基因在表达时都遵循“中心法则”；

3)所有生物共用一套遗传密码。

3.重组DNA技术的基本工具有哪些？工具酶有哪些？

工具有3种：限制酶、DNA连接酶、载体    工具酶有2种：限制酶、DNA连接酶

4.限制性内切核酸酶:

①主要来源？功能？作用部位？体现了酶的什么特性？结果形成怎样的末端?

主要来源：主要从原核生物中分离纯化

功能：识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开

作用部位：磷酸二酯键      酶的特性：专一性     结果：产生黏性末端或平末端

②限制酶能切RNA分子吗？单链DNA呢？

不能切RNA，不能切单链DNA

③限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？

切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。

细菌本身DNA中不存在该酶的识别序列，或者识别序列被修饰（甲基化）。

④不同限制酶切出的黏性末端一定不同吗？

可能相同（同尾酶）

⑤获取一个目的基因需限制酶切割几次？产生几个游离的磷酸基团？ 消耗几分子水？

切割2次（切开双链DNA的两侧），产生4个游离的磷酸基团（每切断一个磷酸二酯键，产生一个游离磷酸基团），消耗4分子水。

5.DNA连接酶:

①两种DNA连接酶的区别？

E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏性末端和平末端，但E.coliDNA连接酶连接平末端效率较低。

②DNA连接酶与DNA聚合酶作用的相同点和不同点是什么？

相同点：都作用于磷酸二酯键

不同点：DNA连接酶连接两个DNA片段，不需要模板；

DNA聚合酶将单个游离的脱氧核苷酸加到已有核苷酸片段的3'端，需要模板。

③DNA片段经限制酶处理后产生的相同黏性末端，再经过DNA连接酶处理后，形成的新的识别序列，能否再被所用的限制酶识别？

若两个相同黏性末端都是由同种限制酶切割后所得，能再被所用的限制酶识别。

  若两个相同黏性末端是由不同限制酶切割所得，形成的新的识别序列不能再被所用的限制酶识别。如图：

6.载体：

①将外源基因直接导入受体细胞可行吗？为什么？

不可行，容易被受体细胞内的酶降解，难以维持稳定和表达。