课时数智作业55 重组DNA技术的基本工具-【高考DNA解码】2026年高考生物一轮总复习学生用书word（单选版）

课时数智作业(五十五)　重组DNA技术的基本工具 1．(2024·广东实验中学期中)在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”“分子缝合针”和“分子运输车”，下列关于这三种工具的叙述，不正确的是(　　) A．“分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开 DNA 的磷酸二酯键 B．“分子缝合针”指的是 DNA 聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键 C．“分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体等 D．“分子手术刀”主要来自原核生物，它一般不会切割该生物自己的 DNA 2．(2024·广东肇庆期中)限制酶MunⅠ和限制酶 EcoRⅠ的识别序列及其切割位点分别为—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示某一目的基因片段与质粒拼接形成重组质粒的过程，下列叙述错误的是(　　) A．用限制酶 EcoRⅠ切割目的基因，同时用限制酶 MunⅠ切割质粒 B．构建重组质粒时，会形成不止一种脱氧核苷酸序列(考虑DNA片段两两连接) C．将重组质粒同时用以上2种限制酶切割则会再形成1种长度的 DNA 片段 D．标记基因一般是抗生素基因或荧光标记基因，便于目的基因的筛选 3．(2024·四川成都列五中学月考)研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是(　　) A．使用Hind Ⅲ和XbaⅠ进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B．目的基因X与质粒连接可使用E.coli DNA连接酶 C．Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D．含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 4．(2024·广东佛山期中)“DNA的粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定；某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如表所示。下列叙述错误的是(　　) 去杂质 方式 沉淀质 量(g) DNA浓度 (ng/μL) OD260/OD280 二苯胺 鉴定 离心 0.068 81.5 1.53 蓝色 4 ℃冰 箱静置 0.1028 336.4 1.41 注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低。 A．猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料 B．对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀 C．离心法可以获得更高纯度的DNA D．离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA 5．(2024·湖北武汉期末)某植物的野生型和突变型植株杂交，F1均为野生型，F1自交所得F2中绝大部分植株与野生型相似(包括野生型、介于野生型与突变型之间的“过渡类型”)，以＋表示，少部分植株与突变型相似，以P表示。研究发现，两表型相关基因的碱基序列一致，长度均为2.4 kb，将此片段用限制酶PstⅠ完全酶切结果如下图。下列叙述错误的是(　　) A．据题意推测，限制酶PstⅠ可能对甲基化敏感 B．2.2 kb和0.9 kb条带是“过渡类型”的酶切产物 C．图2中P的①②位点可能均发生了甲基化 D．该植株的表观遗传现象是可以稳定遗传的 6．(2023·湖北卷)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体(重组质粒)，并转化到受体菌中。下列叙述错误的是(　　) A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落 7．(2024·广东佛山三模)图1表示基因工程中用到的质粒，其中PstⅠ是目的基因插入位点，AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性基因。图2表示筛选出导入重组质粒的受体菌的方法(四环素和氨苄青霉素在高温下不稳定易失效)。下列说法正确的是(　　) A．构建重组DNA分子用到的工具酶有限制酶和质粒 B．图2所用培养基应加入抗生素并调好pH后再灭菌处理 C．图2中利用绒布接种的方法为稀释涂布平板法 D．原板上的甲、乙菌落中，甲菌落是成功导入重组质粒的受体菌 8．(14分)(2024·广东湛江期末)限制酶是基因工程的基本工具之一。同尾酶指来源各异，识别的靶序列也不相同，但产生相同的黏性末端的限制酶，在基因工程中应用较为广泛。几种常见的限制酶的切割位点如表所示。回答下列问题： 限制酶 BamHⅠ SalⅠ BglⅡ XhoⅠ 识别 序列 及切 割位 点 (1)表中两组同尾酶分别是__________________和__________________。表中限制酶切割出的为黏性末端，若限制酶切割出的为平末端，则用________________(填“E.coli DNA连接酶”“T4 DNA连接酶”或“E.coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶”)效率更高。 (2)某限制酶的识别序列及切割位点为↓GATC，某DNA分子上有4个该限制酶的识别位点，用该限制酶切割该DNA分子，会生成4个片段。若用BamHⅠ切割该DNA分子会生成2个片段，则该DNA分子为________(填“环”或“链”)状结构。若用2种酶同时处理该DNA分子，则会生成______个片段。 (3)限制酶的切割位点是____________(填化学键名称)。在基因工程中，与使用一种限制酶相比，同时使用2种同尾酶进行切割的优点有________________________________(写出1个)。 5 / 5 学科网（北京）股份有限公司 $$ 课时数智作业(五十五) 1．B　[“分子手术刀”是限制性内切核酸酶(限制酶)，能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割使磷酸二酯键断裂，A正确；“分子缝合针”是DNA连接酶，能将具有相同末端的DNA片段连接起来，B错误；基因工程中的“分子运输车”即载体，有质粒、动植物病毒、噬菌体等，其中质粒是基因工程中最常用的载体，C正确；“分子手术刀”主要来自原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA，可能是该生物不含有该序列或者含有该序列，但被修饰了的，D正确。] 2．D　[由题图可知，目的基因两侧都是限制酶EcoRⅠ的切割位点，因此应选用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子，质粒中含有限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的切割位点，但EcoRⅠ的切割位点位于标记基因中，用其切割会破坏标记基因，因此为保证重组质粒表达载体的准确构建，应选用限制酶MunⅠ切割质粒，A正确；构建重组质粒时，考虑DNA片段两两连接，会形成不止一种脱氧核苷酸序列，B正确；限制酶MunⅠ切割质粒后与目的基因连接形成重组质粒，连接处形成—CAATTC—和—GAATTG—的新序列，都不能被 2 种限制酶识别、切割，但EcoRⅠ能识别标记基因的相应序列并切割， 使环状重组质粒断裂形成1种长度的DNA片段，C正确；标记基因一般是抗生素抗性基因或荧光标记基因，便于目的基因的筛选，D错误。] 3．C　[分析题图可知，使用Hind Ⅲ和XbaⅠ进行酶切会产生不同的黏性末端，故能避免基因X与质粒反向连接，A正确；目的基因X与质粒用Hind Ⅲ和XbaⅠ酶切会产生黏性末端，E．coli DNA连接酶可连接黏性末端，故目的基因X与质粒连接可使用E．coli DNA 连接酶，B正确；用Ca2+处理大肠杆菌，能提高细胞膜的通透性，使细胞处于一种能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态，有利于重组质粒导入受体细胞，C错误；分析题图可知，重组质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，故含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长，D正确。] 4．B　[DNA的粗提取与鉴定的实验中，应选择富含DNA的材料，猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料，A正确；离心研磨液的目的是加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA，B错误，C正确；离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA，D正确。] 5．D　[据题意可知，突变型与野生型基因长度相同，突变型基因序列不能被限制酶PstⅠ酶切，由此推测，限制酶PstⅠ可能对甲基化敏感，A正确；据题图可知，野生型基因序列酶切产物是1.5 kb和0.7 kb，因此2.2 kb和0.9 kb条带是“过渡类型”的酶切产物，B正确；突变型基因序列不能够被限制酶PstⅠ酶切，图2中P的①②位点可能均发生了甲基化，C正确；根据题意无法判断该植株的表观遗传现象是否可以稳定遗传的，D错误。] 6．D　[若用HindⅢ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，转录的产物可能不同，A正确；若用PvuⅠ酶切，重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因(TetR)，因此在含Tet(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因，B正确；DNA凝胶电泳技术可以分离不同大小的DNA片段，重组质粒的大小与质粒不同，能够鉴定重组质粒构建成功与否，C正确；SphⅠ的酶切位点位于四环素抗性基因中，若用SphⅠ酶切，会破坏四环素抗性基因，重组质粒中只含氨苄青霉素抗性基因(AmpR)，因此携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)的培养基中能形成菌落，在含Tet的培养基中不能形成菌落，D错误。] 7．D　[构建重组DNA分子用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶，质粒为载体，A错误；由于四环素和氨苄青霉素在高温下不稳定易失效，因此应在灭菌后再加入抗生素，B错误；图2中利用绒布接种的方法为影印法，不改变菌落的位置，C错误；原板上的甲、乙菌落中，甲菌落在含四环素的培养基上能生存，在含氨苄青霉素的培养基上不能生存，说明甲菌落中质粒的氨苄青霉素抗性基因被破坏，说明其是成功导入重组质粒的受体菌，D正确。] 8．(每空2分，共14分)(1)BamHⅠ、BglⅡ　SalⅠ、XhoⅠ　T4 DNA连接酶　(2)环　4　(3)磷酸二酯键　一定程度上防止重组质粒再次被切割 1/3 学科网（北京）股份有限公司 $$