精品解析：湖北省随州市曾都区第一高级中学2025-2026学年高二下学期5月阶段检测生物试题

湖北曾都一中2025至2026学年高二下5月月考生物试卷 时间：75分钟 一、单选题（每题2分，共36分） 1. 辽宁生态温室工程打造了现代农业的绿色空间，其农业生态系统的能量流动关系如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 农作物等固定太阳能是农业生态系统能量流动的重要起点 B. 食用菌作为分解者可通过分解作用从农作物秸秆中获得物质 C. 用沼渣培养食用菌不仅能充分利用物质，还提高了能量传递效率 D. 该生态温室工程减少了环境污染，并提高了当地的经济效益 2. 下图是某海洋生态系统中，生产者固定太阳能和海洋水深关系的曲线。据图分析下列叙述错误的是（ ） A. 生活在水深100m以下的生物，从生态系统的组成成分看，主要是消费者和分解者 B. 在水深20m以内的水域中，近海水域比远海水域生产者固定的太阳能多 C. 大于30米水深的海域，影响生产者固定太阳能的非生物因素主要是光照强度 D. 海洋中的经济鱼类为了获得持续的最大捕获量，每次只能捕捞K/2 3. 如图表示甲、乙两个生态系统受到相同强度的干扰和解除干扰后稳定性的变化情况，下列关于该变化过程的说法，正确的是（　　） A. 抵抗力稳定性越弱的生态系统恢复力稳定性就越强 B. 乙的恢复力稳定性更强 C. a、b点生态系统丧失了抵抗力稳定性 D. 干扰解除后，生态系统会恢复原状或被新的生态系统代替 4. 华北豹是我国特有的大型猫科动物，由于栖息地破碎化，华北豹种群数量下降，被列为国家一级保护野生动物。下列相关叙述错误的是（　　） A. 利用红外触发相机的自动拍摄技术，可调查华北豹的种群密度 B. 栖息地的改变会影响华北豹种群的环境容纳量 C. 破碎化的栖息地间建立生态廊道，有利于促进华北豹种群间的基因交流从而增加物种多样性 D. 保护华北豹最根本的措施是就地保护，如建立自然保护区 5. 某草原曾因过度放牧、屎壳郎数量锐减等原因出现严重沙化，科研人员将牧鸡引入该草原，形成牛-禽-草耦合模式，提升了生态、经济和社会效益。下列叙述错误的是（ ） A. 屎壳郎分解牛粪，牧草同化的能量有部分流入到屎壳郎 B. 牧鸡取食草原害虫，可调整生态系统中的能量流动关系 C. 鸡粪为牧草生长提供所需有机物，肥效远高于无机化肥 D. 该模式兼顾生态、经济与社会效益，遵循生态工程的整体原理 6. 醇美的红酒、鲜香的腐乳、酸甜的酸奶、朴实的馒头都是常见的发酵食品，它们不仅是“传承百万年的美味”，更是蕴藏着“极简人类吃货史”。下列叙述错误的是（ ） A. 红酒中的红色素主要来源于红葡萄皮细胞的液泡 B. 酵母、曲霉和毛霉等真核微生物参与了豆腐的发酵 C. 乳酸菌可将牛奶中的部分乳糖水解为乳酸，从而赋予其酸甜的口感 D. 传统发酵技术制作馒头时，可利用前一次发酵保留下来的面团中的酵母菌 7. 安梨有消炎、利尿、润喉、止咳、降血压、解酒等药用价值。以安梨皮渣为原料制备安梨皮渣酒和安梨皮渣醋的过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 安梨皮渣酒发酵完成后升温至30~35℃，通入无菌空气，不用接种即可制作安梨皮渣醋 B. 安梨皮渣醋发酵时，可用酸性重铬酸钾测定醋酸含量变化，且溶液灰绿色逐日加深 C. 安梨皮渣酒、安梨皮渣醋发酵所需菌种的细胞结构相同 D. 推测在安梨皮渣中加入果胶酶进行酶解可以提高果汁的出汁率 8. 某四联活菌片药理说明如下：本品中婴儿双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常菌群，直接补充可抑制肠道中某些致病菌，维持正常肠道蠕动，调整肠道菌群平衡。蜡样芽孢杆菌可在肠道中定植以消耗氧气。下列说法错误的是（　　） A. 本品可用于治疗与肠胃菌群失调相关的腹泻、便秘、功能性消化不良 B. 利用发酵工程生产双歧杆菌需要严格控制温度、pH、通入无菌空气并搅拌 C. 添加蜡样芽孢杆菌的作用是为了促进肠道厌氧菌的生长繁殖 D. 本品不能用高于40℃的热水冲服，也不能与青霉素等抗生素联合使用 9. 某酱油厂发现传统工艺中黑曲霉分泌的蛋白酶活性不足，计划通过诱变育种筛选高产菌株，已知酪蛋白（大豆的主要成分）在固体培养基中呈浑浊状，下列方案中合理的是（ ） A. 用紫外线照射黑曲霉菌悬液后涂布于含酪蛋白的选择培养基 B. 将菌种置于高蛋白质培养基中诱导菌株进行耐高蛋白突变 C. 使用γ射线照射黑曲霉菌悬液后在缺乏碳源的培养基中筛选 D. 通过比较菌落大小筛选高产菌株 10. 青钱柳是我国特有树种，叶片富含三萜类、多酚类等药用活性物质。为探究诱导青钱柳愈伤组织形成及次生代谢物积累的影响因素，研究者进行了植物细胞培养实验。实验操作涉及（ ） A. 用纤维素酶和聚乙二醇处理叶片细胞 B. 诱变处理愈伤组织以获得高产细胞 C. 用愈伤组织制备细胞悬液进行扩大培养 D. 将愈伤组织转接到生芽培养基培养 11. 高寒藏药材川西獐牙菜能有效治疗肝炎，其野生资源匮乏且难以建立快速繁殖系。紫外线照射能随机破坏染色体结构，使其发生断裂，使染色体上某些片段转移到其他染色体上。研究人员利用胡萝卜与川西獐牙菜进行体细胞杂交，流程如下图。下列分析错误的是（ ） A. 过程②中可用PEG诱导两个亲本原生质体的融合 B. 过程③杂种细胞经脱分化、再分化形成愈伤组织 C. 此种体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍 D. 此种方法存在变异的不定向性，可在③④过程中进行筛选 12. 白叶枯病是水稻严重的病害之一。现拟将某野生稻的抗白叶枯病特性转移给栽培稻，科研工作者用X射线随机破坏野生稻的染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，最终诱导处理后的野生稻细胞和栽培稻细胞融合获得再生细胞和植株。下列叙述正确的是（　　） A. 两种水稻细胞可用PEG、灭活病毒等诱导融合 B. 再生细胞中的染色体数目可能少于两亲本之和 C. 该技术和动物细胞融合技术均能形成杂种个体 D. 该技术和转基因技术均能定向改变受体细胞性状 13. 成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。研究者设计如下流程制备抗FCF20单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程可用胰蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏 B. ②过程应先用聚乙二醇或灭活病毒诱导细胞融合 C. ②③过程筛选相关细胞时都需用选择培养基 D. ④过程可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养 14. 生物经济一直是国家关注的重点行业之一，发展生物经济产业对于我国经济的转型升级具有重要意义。在2024年政府工作报告中，把生物经济中“生物制造”列为新增长引擎之一，而“生物制造”离不开生物工程。以下关于生物工程的说法正确的是（ ） A. 提取乳酸菌的单细胞蛋白并将其添加在动物饲料中可提高饲料的品质 B. 理论上，可通过基因工程和克隆技术生产出不会引起免疫排斥的猪器官 C. 利用植物细胞全能性的原理进行的细胞产物工厂化生产不受季节、天气的限制 D. 正常造血干细胞移植到病人体内可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病 15. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 16. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 基因工程的生物学原理是基因突变 B. 基因工程的常用工具酶有限制酶、DNA连接酶和运载体 C. 整个过程都在细胞外进行 D. 通过基因工程技术能够定向改造生物的遗传性状 17. 如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法正确的是（　　） A. 图示质粒分子在Sma I切割前后分别含有0或1个游离的磷酸基团 B. 培育抗除草剂作物的核心是将含bar基因的表达载体导入受体细胞 C. 可选用Pst I和EcoR I切割质粒和bar基因，确保目的基因正确插入 D. 利用PCR技术可从分子水平检测bar基因是否翻译出抗除草剂蛋白 18. 我国成功培育出的绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪明显表达出绿色荧光蛋白的特征，在紫外光源激发下其口、蹄及舌头可观察到明显的绿色荧光。如图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中荧光蛋白基因必须插入质粒的启动子与终止子之间 B. 采用胚胎分割技术对囊胚进行分割移植，可一次获得多个转基因猪 C. 过程⑤实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 与猪胚胎干细胞核移植相比，猪胎儿成纤维细胞核移植的成活率更高 二、解答题（每空2分，共64分） 19. 稻田综合种养是绿色生态的农渔（禽）发展模式，契合当下推进农药化肥减量、促进农业绿色高质量发展的要求，实现了“一水两用、一田双收、稳粮增收、粮养双赢”的良好效益。下图是稻鸭共作农田生态系统中的部分碳元素转移过程，箭头表示碳元素的传递方向。回答下列问题： （1）图中碳元素以____________（答全才给分）的形式进行转移，图中箭头指向需修改之处有：需增加的箭头是__________、需去掉的箭头是_________。 （2）若图中鸭子的食物比例由水稻、杂草：植食性昆虫=1：2，调整为3：2，那么调整后鸭子获得的能量值是原来的________倍（能量传递效率按20%计算，保留小数点后两位）。 （3）与稻鸭共作模式相比，稻单作模式下生态系统的________（填“抵抗力”或“恢复力”）稳定性更高。 （4）二化螟、稻纵卷叶螟是导致水稻减产的主要害虫。二化螟幼虫喜钻入稻茎为害，稻纵卷叶螟幼虫喜取食上表皮及叶肉。苏云金芽孢杆菌对二化螟、稻纵卷叶螟等多种害虫具有杀虫活性，可制成杀虫剂（Bt药液）。科研人员比较不同剂量的Bt药液对二化螟幼虫和稻纵卷叶螟幼虫的杀虫效果，结果如图所示。根据题干信息分析，Bt药液对_____幼虫的杀灭效果较好，另一害虫存活率相对较高的原因是___________。 （5）某同学依据生态系统原理，将稻田中的基本组分进行合理组织，设计了一个生态缸。下列关于生态缸的叙述，错误的是（　　） A. 生态缸中消费者的存在加快了该生态系统的物质循环 B. 生态缸中所有的动物和植物共同构成了一个微生态系统 C. 生态缸需要放在不通风、光线良好的地方，但要避免阳光直接照射 D. 生态缸中生物死亡、水质恶化造成生态系统进一步失衡属于正反馈调节 E. 生态缸是密闭的，外部环境对生态缸的生态平衡没有影响 20. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，食品工业生产柠檬酸时，可以红薯粉为原料经黑曲霉发酵获得，如图为黑曲霉发酵工程生产柠檬酸的简要流程图。请回答下列问题： （1）生产柠檬酸的优良菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过________育种获得。(答出一种育种方法即可) （2）据图分析，黑曲霉的代谢类型是_______，将菌种接种至A培养基的方法为_______，将该菌种由A培养基转接至B培养基的目的是_______。 （3）请从培养基营养成分的角度分析，加α-淀粉酶的作用是_______，加蛋白胨的作用是_______。 （4）有人认为柠檬酸发酵工程的生产过程中pH将不断下降，会抑制杂菌的生长，因此C培养基不需要灭菌，但相关技术人员则认为该观点不正确，请做出合理的解释：_______。 （5）在柠檬酸发酵过程中，操作人员会定时检测培养液中的黑曲霉浓度以了解发酵进程，若将稀释了100倍的培养液用血细胞计数板(1mm×1mm×0.1mm，25个中方格，每个中方格包含16个小格)通过显微镜观察计数，则理论上统计的中方格中黑曲霉平均数量应不少于_____个才能达到个/mL的预期浓度。 21. 由于猪的器官在生理形态上和人的器官非常接近，近年来应用猪的体细胞核移植技术研制人类基因疾病的动物模型，以及生产基因敲除猪用于人异种器官移植成为猪核移植相关研究的热点方向。如图为猪的体细胞核移植流程示意图，请回答下列问题： （1）研究人员在用合成培养基对猪耳部成纤维细胞进行培养时，通常需加入________________等一些天然成分。 （2）从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至________________________期才能用于体细胞核移植。除该方法外，采集卵母细胞还可采用超数排卵法，其具体做法是___________________________________。 （3）重构胚通常需培养至________________期，然后通过_________________技术送入代孕母猪体内。为提高胚胎的利用率，还可采用_____________技术对胚胎进行处理。 （4）就猪的体细胞移植技术本身来讲，虽然已经有多例体细胞克隆猪诞生，但总体的效率还是较低的，克隆猪的存活率只有1%或更低。研究表明，用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸（VPA）处理重构胚能显著提高其发育能力。从而大大提高克隆效率。若想探究VPA处理重构胚的最适浓度，其实验思路是____________________________。 22. 生长激素制剂是治疗垂体性侏儒症的特效药。人们从450升大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相当于6万具尸体全部含量。图1是通过基因工程将人的生长激素基因导入大肠杆菌中生产生长激素的过程，图2是基因工程中所用到的质粒，图3是通过PCR获取和扩增目的基因。请回答下列问题： （1）图1通过_______过程得到目的基因A后，通过③过程进行PCR扩增。图1中基因工程的核心步骤是________（填序号），基因表达载体中启动子的作用是___________。 （2）若利用图3过程获取和扩增A基因，需要选择的一对引物是________。图3中的基因表达时，_______（填“a”或“b”）链作为转录的模板链。 （3）要使A基因能正确与图2中的质粒拼接在一起，需要在所选引物的________端分别增加相应的限制酶的酶切位点。分析图2和图3，为了防止目的基因的反向连接，可在目的基因的上、下游分别添加_________（填限制酶名称）的识别序列。 （4）将目的基因导入大肠杆菌前，通常先用___________将大肠杆菌细胞处理成感受态。为鉴定导入的人生长激素基因是否成功表达，可以用__________技术进行检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 湖北曾都一中2025至2026学年高二下5月月考生物试卷 时间：75分钟 一、单选题（每题2分，共36分） 1. 辽宁生态温室工程打造了现代农业的绿色空间，其农业生态系统的能量流动关系如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 农作物等固定太阳能是农业生态系统能量流动的重要起点 B. 食用菌作为分解者可通过分解作用从农作物秸秆中获得物质 C. 用沼渣培养食用菌不仅能充分利用物质，还提高了能量传递效率 D. 该生态温室工程减少了环境污染，并提高了当地的经济效益 【答案】C 【解析】 【详解】A、生态系统的能量流动从生产者固定太阳能开始，农作物作为该系统的主要生产者，固定的太阳能是整个农业生态系统的能量源头，A正确； B、食用菌是异养型真菌，属于分解者，能够分解农作物秸秆中的有机物，从中获取物质，符合分解者的功能，B正确； C、沼渣培养食用菌实现了物质循环利用，提高了能量利用率，但不能提高营养级间的能量传递效率（传递效率固定为10%~20%），C错误； D、该模式实现废弃物资源化，减少污染、提高效益，D正确。 2. 下图是某海洋生态系统中，生产者固定太阳能和海洋水深关系的曲线。据图分析下列叙述错误的是（ ） A. 生活在水深100m以下的生物，从生态系统的组成成分看，主要是消费者和分解者 B. 在水深20m以内的水域中，近海水域比远海水域生产者固定的太阳能多 C. 大于30米水深的海域，影响生产者固定太阳能的非生物因素主要是光照强度 D. 海洋中的经济鱼类为了获得持续的最大捕获量，每次只能捕捞K/2 【答案】D 【解析】 【详解】A、由曲线可知，水深100m以下生产者固定太阳能的量接近0，说明该区域几乎没有生产者，因此生物组成以消费者和分解者为主，A正确； B、观察曲线，水深20m以内，代表近海水域的实线始终在代表远海水域的虚线上方，说明近海水域生产者固定的太阳能更多，B正确； C、水深越大，光照强度越弱，生产者光合作用可利用的光越少，固定太阳能的量随之降低，因此大于30米水深的海域，影响生产者固定太阳能的主要非生物因素是光照强度，C正确； D、根据种群增长规律，要获得经济鱼类持续的最大捕获量，应保证捕捞后剩余种群数量维持在K/2（此时种群增长速率最大，可快速恢复种群数量），D错误。 3. 如图表示甲、乙两个生态系统受到相同强度的干扰和解除干扰后稳定性的变化情况，下列关于该变化过程的说法，正确的是（　　） A. 抵抗力稳定性越弱的生态系统恢复力稳定性就越强 B. 乙的恢复力稳定性更强 C. a、b点生态系统丧失了抵抗力稳定性 D. 干扰解除后，生态系统会恢复原状或被新的生态系统代替 【答案】D 【解析】 【详解】A、抵抗力稳定性和恢复力稳定性并非绝对的反比关系，比如北极苔原生态系统，抵抗力稳定性弱，恢复力稳定性也弱，A 错误； B、图中解除干扰后，甲可以恢复到原来水平，而乙不能，因此甲的恢复力稳定性强，B错误； C、a、b点生态系统在受到干扰时，虽然稳定性有所下降，但仍然具有抵抗外界干扰的能力，并没有丧失抵抗力稳定性，C错误； D、当干扰解除后，如果干扰强度较小，生态系统会恢复原状，如果干扰强度过大，生态系统可能无法恢复原状，而被新的生态系统代替，D正确。 4. 华北豹是我国特有的大型猫科动物，由于栖息地破碎化，华北豹种群数量下降，被列为国家一级保护野生动物。下列相关叙述错误的是（　　） A. 利用红外触发相机的自动拍摄技术，可调查华北豹的种群密度 B. 栖息地的改变会影响华北豹种群的环境容纳量 C. 破碎化的栖息地间建立生态廊道，有利于促进华北豹种群间的基因交流从而增加物种多样性 D. 保护华北豹最根本的措施是就地保护，如建立自然保护区 【答案】C 【解析】 【详解】A、对于华北豹这类活动能力强、活动范围大的濒危大型动物，红外触发相机自动拍摄技术可通过识别个体统计种群数量，是调查其种群密度的常用方法，A正确； B、环境容纳量由环境资源条件决定，栖息地的食物、空间、隐蔽条件等改变，会直接影响华北豹种群的环境容纳量，B正确； C、不同破碎栖息地的华北豹属于同一物种，建立生态廊道促进种群间基因交流，可增加种群的基因多样性，不会增加物种多样性，C错误； D、就地保护是保护生物多样性最根本最有效的措施，建立自然保护区属于就地保护的典型方式，是保护华北豹的核心措施，D正确。 5. 某草原曾因过度放牧、屎壳郎数量锐减等原因出现严重沙化，科研人员将牧鸡引入该草原，形成牛-禽-草耦合模式，提升了生态、经济和社会效益。下列叙述错误的是（ ） A. 屎壳郎分解牛粪，牧草同化的能量有部分流入到屎壳郎 B. 牧鸡取食草原害虫，可调整生态系统中的能量流动关系 C. 鸡粪为牧草生长提供所需有机物，肥效远高于无机化肥 D. 该模式兼顾生态、经济与社会效益，遵循生态工程的整体原理 【答案】C 【解析】 【详解】A、牛的粪便属于牛摄入但未同化的食物残渣，其中的能量属于上一营养级牧草的同化量，屎壳郎作为分解者分解牛粪时会同化这部分能量，因此牧草同化的能量有部分流入屎壳郎，A正确； B、牧鸡取食草原害虫，可减少害虫对牧草的消耗，调整生态系统的能量流动关系，使能量持续高效地流向对人类最有益的部分，B正确； C、牧草是自养生物，通过光合作用合成自身所需有机物，不能直接吸收利用鸡粪中的有机物，鸡粪中的有机物需要被分解者分解为无机盐、二氧化碳等无机物后才能被牧草利用，且无机化肥可直接提供无机物，其肥效更快且稳定，C错误； D、生态工程的整体原理要求生态建设需兼顾自然、经济、社会三方面的整体效益，该模式同时提升了生态、经济和社会效益，符合整体原理，D正确。 6. 醇美的红酒、鲜香的腐乳、酸甜的酸奶、朴实的馒头都是常见的发酵食品，它们不仅是“传承百万年的美味”，更是蕴藏着“极简人类吃货史”。下列叙述错误的是（ ） A. 红酒中的红色素主要来源于红葡萄皮细胞的液泡 B. 酵母、曲霉和毛霉等真核微生物参与了豆腐的发酵 C. 乳酸菌可将牛奶中的部分乳糖水解为乳酸，从而赋予其酸甜的口感 D. 传统发酵技术制作馒头时，可利用前一次发酵保留下来的面团中的酵母菌 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物细胞的液泡是储存色素等物质的场所，红葡萄皮的红色素主要来源于皮细胞的液泡，发酵过程中色素进入红酒，A正确； B、豆腐发酵制作腐乳的过程中，参与的酵母、曲霉、毛霉都属于真核微生物，可分泌酶分解豆腐中的有机物，B正确； C、乳糖水解的产物是半乳糖和葡萄糖，乳酸菌通过无氧呼吸将葡萄糖等分解为乳酸，C错误； D、前一次发酵保留的面团（俗称“老面”）中含有酵母菌，可作为传统发酵制作馒头的菌种，D正确。 7. 安梨有消炎、利尿、润喉、止咳、降血压、解酒等药用价值。以安梨皮渣为原料制备安梨皮渣酒和安梨皮渣醋的过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 安梨皮渣酒发酵完成后升温至30~35℃，通入无菌空气，不用接种即可制作安梨皮渣醋 B. 安梨皮渣醋发酵时，可用酸性重铬酸钾测定醋酸含量变化，且溶液灰绿色逐日加深 C. 安梨皮渣酒、安梨皮渣醋发酵所需菌种的细胞结构相同 D. 推测在安梨皮渣中加入果胶酶进行酶解可以提高果汁的出汁率 【答案】D 【解析】 【详解】A、安梨皮渣酒发酵完成后升温至30~35℃，通入无菌空气，需要接种醋酸菌才可用于制作安梨皮渣醋，A错误； B、酸性重铬酸钾是用于鉴定酒精的，不用来鉴定醋酸，B错误； C、安梨皮渣酒的发酵需要的微生物为酵母菌，属于真核生物，安梨皮渣醋的发酵需要的微生物为醋酸菌，属于原核生物，所以安梨皮渣酒、安梨皮渣醋发酵所需菌种的细胞结构不同，C错误； D、植物细胞壁的组成成分为纤维素和果胶，所以在安梨皮渣中加入果胶酶进行酶解可以提高果汁的出汁率，D正确。 故选D。 8. 某四联活菌片药理说明如下：本品中婴儿双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常菌群，直接补充可抑制肠道中某些致病菌，维持正常肠道蠕动，调整肠道菌群平衡。蜡样芽孢杆菌可在肠道中定植以消耗氧气。下列说法错误的是（　　） A. 本品可用于治疗与肠胃菌群失调相关的腹泻、便秘、功能性消化不良 B. 利用发酵工程生产双歧杆菌需要严格控制温度、pH、通入无菌空气并搅拌 C. 添加蜡样芽孢杆菌的作用是为了促进肠道厌氧菌的生长繁殖 D. 本品不能用高于40℃的热水冲服，也不能与青霉素等抗生素联合使用 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物的数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养成分，要严格控制温度、 pH和溶解氧等发酵条件。 【详解】AC、婴儿双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常菌群，可抑制肠道中某些致病菌，蜡样芽孢杆菌消耗肠道氧气，制造无氧环境，有利于肠道菌群的生长繁殖，所以本品可用于治疗与肠胃菌群失调相关的疾病，AC正确； B、双歧杆菌是肠道正常菌群，肠道为缺氧环境，该菌很可能为厌氧菌（实际是厌氧菌），培养该菌不应通入空气，B错误； D、本品含4种活菌，过高温度会杀死细菌，青霉素能抑制细菌生长繁殖，D正确。 故选B。 9. 某酱油厂发现传统工艺中黑曲霉分泌的蛋白酶活性不足，计划通过诱变育种筛选高产菌株，已知酪蛋白（大豆的主要成分）在固体培养基中呈浑浊状，下列方案中合理的是（ ） A. 用紫外线照射黑曲霉菌悬液后涂布于含酪蛋白的选择培养基 B. 将菌种置于高蛋白质培养基中诱导菌株进行耐高蛋白突变 C. 使用γ射线照射黑曲霉菌悬液后在缺乏碳源的培养基中筛选 D. 通过比较菌落大小筛选高产菌株 【答案】A 【解析】 【分析】1、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 2、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、紫外线是常用物理诱变因素，含酪蛋白的培养基为选择培养基（如酪蛋白为唯一氮源），原菌株因蛋白酶活性不足分解酪蛋白较少，诱变育种筛选的高产菌株分泌的蛋白酶活性较高，能够大量分解酪蛋白，已知酪蛋白（大豆的主要成分）在固体培养基中呈浑浊状，大量分解后在培养基上能够形成透明圈，因此通过比较透明圈的大小可以筛选高产菌株，A正确； B、由于突变是随机的，无法通过高蛋白培养基诱导定向突变，B错误； C、若培养基缺乏碳源且酪蛋白作为唯一碳源，菌株需分解酪蛋白获取碳源。但酪蛋白主要提供氮源，且分解后的氨基酸作为碳源效率低，因此此条件不合理，C错误； D、如果不是以酪蛋白为唯一的氮源选择培养基，那么菌落大小可能与蛋白酶活性无关，无法直接筛选高产菌株，D错误。 故选A。 10. 青钱柳是我国特有树种，叶片富含三萜类、多酚类等药用活性物质。为探究诱导青钱柳愈伤组织形成及次生代谢物积累的影响因素，研究者进行了植物细胞培养实验。实验操作涉及（ ） A. 用纤维素酶和聚乙二醇处理叶片细胞 B. 诱变处理愈伤组织以获得高产细胞 C. 用愈伤组织制备细胞悬液进行扩大培养 D. 将愈伤组织转接到生芽培养基培养 【答案】C 【解析】 【详解】A、用纤维素酶和聚乙二醇处理叶片细胞，属于植物体细胞杂交技术，与愈伤组织诱导和植物细胞培养技术无关，A不符合题意； B、诱变处理愈伤组织属于诱变育种操作，目的是获得突变体，而非探究培养条件对次生代谢物的影响，B不符合题意； C、用愈伤组织制备细胞悬液进行扩大培养，可维持愈伤组织未分化状态并促进次生代谢物积累，符合实验目的，C符合题意； D、该实验是利用植物细胞培养技术探究诱导青钱柳愈伤组织形成及次生代谢物积累的影响因素，并不是为了获得完整植株，不需要进行诱导生芽的操作，D不符合题意。 故选C。 11. 高寒藏药材川西獐牙菜能有效治疗肝炎，其野生资源匮乏且难以建立快速繁殖系。紫外线照射能随机破坏染色体结构，使其发生断裂，使染色体上某些片段转移到其他染色体上。研究人员利用胡萝卜与川西獐牙菜进行体细胞杂交，流程如下图。下列分析错误的是（ ） A. 过程②中可用PEG诱导两个亲本原生质体的融合 B. 过程③杂种细胞经脱分化、再分化形成愈伤组织 C. 此种体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍 D. 此种方法存在变异的不定向性，可在③④过程中进行筛选 【答案】B 【解析】 【分析】据图分析，①表示去除植物细胞壁制备原生质体的过程，②表示原生质体融合，③是脱分化，④是再分化。 【详解】A、②是原生质体融合的过程，该过程可用PEG（聚乙二醇）诱导融合，A正确； B、过程③是杂种细胞形成愈伤组织的过程，表示脱分化，B错误； C、此种体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，C正确； D、此种方法中愈伤组织分裂旺盛，容易突变，存在变异的不定向性，可在③脱分化和④再分化过程中进行筛选，D正确。 故选B。 12. 白叶枯病是水稻严重的病害之一。现拟将某野生稻的抗白叶枯病特性转移给栽培稻，科研工作者用X射线随机破坏野生稻的染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，最终诱导处理后的野生稻细胞和栽培稻细胞融合获得再生细胞和植株。下列叙述正确的是（　　） A. 两种水稻细胞可用PEG、灭活病毒等诱导融合 B. 再生细胞中的染色体数目可能少于两亲本之和 C. 该技术和动物细胞融合技术均能形成杂种个体 D. 该技术和转基因技术均能定向改变受体细胞性状 【答案】B 【解析】 【分析】X射线随机破坏野生稻的染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除，所以该技术不能定向改变受体的性状。 植物细胞的全能性大于动物细胞的全能性。 【详解】A、灭活的病毒是动物细胞融合特有的方法，A错误； B、X射线处理可能使染色体消除，再生细胞中的染色体数目可能少于两亲本之和，B正确； C、动物细胞融合技术能获得杂交细胞，不能获得个体，C错误； D、转基因技术能定向改变受体的性状，该技术是利用X射线随机破坏野生稻的染色体结构，不能定向改变受体的性状，D错误。 故选B。 13. 成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。研究者设计如下流程制备抗FCF20单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程可用胰蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏 B. ②过程应先用聚乙二醇或灭活病毒诱导细胞融合 C. ②③过程筛选相关细胞时都需用选择培养基 D. ④过程可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养 【答案】C 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 2、两次筛选：第一次筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞)；第二次筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 4、诱导动物细胞融合的方法有：物理法(离心、 振动)、 化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。 5、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。 【详解】A、①过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏，获得分散的细胞，A正确； B、②过程属于动物细胞融合，诱导动物细胞融合的方法包括 化学法(聚乙二醇)和生物法(灭活的病毒)，B正确； C、②过程属于第一次筛选，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，③过程需要进行抗体阳性检测，无需选择培养基，C错误； D、④过程属于单克隆抗体扩增，可将细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养，从而获得大量单克隆抗体，D正确。 故选C。 14. 生物经济一直是国家关注的重点行业之一，发展生物经济产业对于我国经济的转型升级具有重要意义。在2024年政府工作报告中，把生物经济中“生物制造”列为新增长引擎之一，而“生物制造”离不开生物工程。以下关于生物工程的说法正确的是（ ） A. 提取乳酸菌的单细胞蛋白并将其添加在动物饲料中可提高饲料的品质 B. 理论上，可通过基因工程和克隆技术生产出不会引起免疫排斥的猪器官 C. 利用植物细胞全能性的原理进行的细胞产物工厂化生产不受季节、天气的限制 D. 正常造血干细胞移植到病人体内可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，A错误； B、利用基因工程方法抑制或去除抗原决定基因，使抗原无法合成而避免产生免疫排斥，再结合克隆技术，可获得不会引起免疫排斥反应的转基因克隆猪器官，B正确； C、利用植物细胞工程获得细胞产物未体现出细胞的全能性，C错误； D、神经干细胞具有分裂分化能力，可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病，D错误。 故选B。 15. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因重组是指具有不同遗传性状的雌、雄个体通过有性生殖时，控制不同性状的基因重新组合，导致后代不同于亲本类型的现象或过程。包括：（1）交叉互换；（2）自由组合；（3）肺炎双球菌的转化；（4）转基因技术。 2、单克隆抗体的制备的基本方法是：（1）用外界抗原刺激动物，使其发生免疫反应；（2）利用仙台病毒或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合；（3）经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能产生特异性抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。 【详解】A、转基因抗虫棉的原理是基因重组，但克隆羊多利的培育利用了动物细胞核的全能性，A错误； B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，但单克隆抗体的制备是利用细胞膜的流动性和细胞增殖的原理，B错误； C、人鼠细胞融合的原理是细胞膜的流动性，但早期胚胎培养只是利用了细胞增殖的原理，C错误； D、人参细胞培养和动物细胞培养的原理都是细胞增殖，D正确。 故选D。 16. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 基因工程的生物学原理是基因突变 B. 基因工程的常用工具酶有限制酶、DNA连接酶和运载体 C. 整个过程都在细胞外进行 D. 通过基因工程技术能够定向改造生物的遗传性状 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。 【详解】A、基因工程的生物学原理是基因重组，A错误； B、基因工程的常用工具酶有限制酶和DNA连接酶，B错误； C、基因工程的一部分过程发生在生物体外，也有一部分过程发生在生物体内，C错误； D、基因工程是现代生物技术的核心，能按照人们的意愿，定向创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，D正确。 故选D。 17. 如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法正确的是（　　） A. 图示质粒分子在Sma I切割前后分别含有0或1个游离的磷酸基团 B. 培育抗除草剂作物的核心是将含bar基因的表达载体导入受体细胞 C. 可选用Pst I和EcoR I切割质粒和bar基因，确保目的基因正确插入 D. 利用PCR技术可从分子水平检测bar基因是否翻译出抗除草剂蛋白 【答案】C 【解析】 【详解】A、质粒为环状DNA，Sma I切割后形成线性DNA，含2个游离磷酸基团，A错误； B、基因工程核心是构建基因表达载体，B错误； C、Pst I和EcoR I切割可避免质粒自身环化和目的基因反向连接，C正确； D、PCR检测目的基因是否导入，抗原-抗体杂交检测是否翻译，D错误。 故选C。 18. 我国成功培育出的绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪明显表达出绿色荧光蛋白的特征，在紫外光源激发下其口、蹄及舌头可观察到明显的绿色荧光。如图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中荧光蛋白基因必须插入质粒的启动子与终止子之间 B. 采用胚胎分割技术对囊胚进行分割移植，可一次获得多个转基因猪 C. 过程⑤实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 与猪胚胎干细胞核移植相比，猪胎儿成纤维细胞核移植的成活率更高 【答案】D 【解析】 【分析】1.基因表达载体的构建：过程①构建重组质粒时，目的基因（荧光蛋白基因）需插入质粒的启动子与终止子之间，启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录，终止子可终止转录，以保证目的基因正常表达。 2.核移植技术：将供体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，构建重构胚，涉及体细胞核移植（如胎儿成纤维细胞、胚胎干细胞的核移植），且胚胎干细胞分化程度低、全能性高，核移植成活率相对更高。 3.胚胎分割技术：可对囊胚进行分割移植，由于来自同一胚胎的后代具有相同遗传物质，能一次获得多个转基因猪。 4.胚胎移植：过程⑤胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，使胚胎能在受体子宫内继续发育。 【详解】A、过程①表示基因工程的核心内容：基因表达载体的构建，该过程中需将目的基因插入质粒的启动子与终止子之间，A正确； B、采用胚胎分割技术将早期胚胎分割成几份，移植到受体母猪体内，可一次获得多个转基因猪，B正确； C、胚胎移植需供、受体的生理状态相同，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确； D、猪成纤维细胞为体细胞，其分化程度比胚胎干细胞高，核移植的成活率较低，D错误。 故选D。 二、解答题（每空2分，共64分） 19. 稻田综合种养是绿色生态的农渔（禽）发展模式，契合当下推进农药化肥减量、促进农业绿色高质量发展的要求，实现了“一水两用、一田双收、稳粮增收、粮养双赢”的良好效益。下图是稻鸭共作农田生态系统中的部分碳元素转移过程，箭头表示碳元素的传递方向。回答下列问题： （1）图中碳元素以____________（答全才给分）的形式进行转移，图中箭头指向需修改之处有：需增加的箭头是__________、需去掉的箭头是_________。 （2）若图中鸭子的食物比例由水稻、杂草：植食性昆虫=1：2，调整为3：2，那么调整后鸭子获得的能量值是原来的________倍（能量传递效率按20%计算，保留小数点后两位）。 （3）与稻鸭共作模式相比，稻单作模式下生态系统的________（填“抵抗力”或“恢复力”）稳定性更高。 （4）二化螟、稻纵卷叶螟是导致水稻减产的主要害虫。二化螟幼虫喜钻入稻茎为害，稻纵卷叶螟幼虫喜取食上表皮及叶肉。苏云金芽孢杆菌对二化螟、稻纵卷叶螟等多种害虫具有杀虫活性，可制成杀虫剂（Bt药液）。科研人员比较不同剂量的Bt药液对二化螟幼虫和稻纵卷叶螟幼虫的杀虫效果，结果如图所示。根据题干信息分析，Bt药液对_____幼虫的杀灭效果较好，另一害虫存活率相对较高的原因是___________。 （5）某同学依据生态系统原理，将稻田中的基本组分进行合理组织，设计了一个生态缸。下列关于生态缸的叙述，错误的是（　　） A. 生态缸中消费者的存在加快了该生态系统的物质循环 B. 生态缸中所有的动物和植物共同构成了一个微生态系统 C. 生态缸需要放在不通风、光线良好的地方，但要避免阳光直接照射 D. 生态缸中生物死亡、水质恶化造成生态系统进一步失衡属于正反馈调节 E. 生态缸是密闭的，外部环境对生态缸的生态平衡没有影响 【答案】（1） ①. 二氧化碳、含碳有机物 ②. 增加分解者→大气 ③. 去掉植食性昆虫→水稻、杂草 （2）1.41 （3）恢复力 （4） ①. 稻纵卷叶螟 ②. 二化螟幼虫钻入稻茎为害，导致药剂不易直接接触到虫体 （5）BCE 【解析】 【小问1详解】 碳元素在生物群落和环境之间主要以二氧化碳的形式转移，在生物群落内部以含碳有机物的形式转移；图中分解者通过分解作用也会向大气中释放二氧化碳，所以应该增加分解者→大气，水稻、杂草可以被植食性昆虫取食，但植食性昆虫无法被水稻、杂草取食，所以应该去掉植食性昆虫→水稻、杂草。 【小问2详解】 当鸭子的食物比例为水稻、杂草：植食性昆虫＝1：2时，设水稻、杂草含有的能量为X，鸭含有的能量为Y，Y/3÷20%＋2Y/3÷20%÷20%＝X，可得出X＝55Y/3；当鸭子的食物比例调整为水稻、杂草：植食性昆虫＝3：2时，设水稻、杂草含有的能量为N，鸭含有的能量为M，3M/5÷20%＋2M/5÷20%÷20%＝N，可得出13M＝N；水稻、杂草含有的能量不变，即X＝N，55Y/3＝13M，M÷Y＝1.41。 【小问3详解】 与稻鸭共作模式相比，稻单作模式下的生态系统物种单一，食物网简单，自我调节能力弱，抵抗力稳定性低，恢复力稳定性高。 【小问4详解】 从曲线的变化趋势来看，相较于用Bt药液1/5、1/2推荐剂量以及推荐剂量组处理二化螟幼虫，稻纵卷叶螟幼虫存活率均在Bt药液处理后第2天时就显著下降，且第4天和第5天的存活率也显著低于二化螟幼虫，故Bt药液对稻纵卷叶螟幼虫的杀灭效果较好。二化螟幼虫钻入稻茎为害，导致药剂不易直接接触到虫体。 【小问5详解】 A、生态缸中消费者的存在加快了该生态系统的物质循环，A正确； B、生态缸中所有的生物和无机环境共同构成了一个微生态系统，B错误； C、生态缸需要放在通风、光线良好的地方，但要避免阳光直接照射，C错误； D、生态缸中生物死亡、水质恶化造成生态系统进一步失衡属于正反馈调节，D正确； E、生态缸虽然是密闭的，但外部环境也对生态缸的生态平衡有影响，E错误。 20. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，食品工业生产柠檬酸时，可以红薯粉为原料经黑曲霉发酵获得，如图为黑曲霉发酵工程生产柠檬酸的简要流程图。请回答下列问题： （1）生产柠檬酸的优良菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过________育种获得。(答出一种育种方法即可) （2）据图分析，黑曲霉的代谢类型是_______，将菌种接种至A培养基的方法为_______，将该菌种由A培养基转接至B培养基的目的是_______。 （3）请从培养基营养成分的角度分析，加α-淀粉酶的作用是_______，加蛋白胨的作用是_______。 （4）有人认为柠檬酸发酵工程的生产过程中pH将不断下降，会抑制杂菌的生长，因此C培养基不需要灭菌，但相关技术人员则认为该观点不正确，请做出合理的解释：_______。 （5）在柠檬酸发酵过程中，操作人员会定时检测培养液中的黑曲霉浓度以了解发酵进程，若将稀释了100倍的培养液用血细胞计数板(1mm×1mm×0.1mm，25个中方格，每个中方格包含16个小格)通过显微镜观察计数，则理论上统计的中方格中黑曲霉平均数量应不少于_____个才能达到个/mL的预期浓度。 【答案】（1）诱变育种、基因工程育种 （2） ①. 异养需氧型 ②. 平板划线法 ③. 扩大培养(或增加黑曲霉菌种数量) （3） ①. 将红薯中的淀粉水解产生葡萄糖，提供碳源 ②. 提供氮源、维生素 （4）培养基中初始pH为6.0，适合多种微生物(霉菌)生长，若初期有杂菌污染可能导致柠檬酸产量大大下降 （5）30 【解析】 【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【小问1详解】 优良菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种、基因工程育种获得。 【小问2详解】 分析图可知：柠檬酸发酵时需搅拌，故黑曲霉的代谢类型异养需氧型。使用平板划线法将菌种接种至A培养基，B培养基是液体培养基，将该菌种由A培养基转接至B培养基是进行菌种扩大培养，以增加黑曲霉菌种数量。 【小问3详解】 α-淀粉酶将红薯中的淀粉水解产生葡萄糖，提供碳源，蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等物质，故培养基C中蛋白胨的作用是为微生物生长提供氮源、维生素等。 【小问4详解】 分析图可知，培养初期pH为6.0，适合多种微生物(霉菌)生长，若该时期污染了杂菌，则有可能导致柠檬酸产量大大下降。 【小问5详解】 分析题意可知，使用的是长和宽均为1mm，深度为0.1mm的血细胞计数板，用血细胞计数板计数法对黑曲霉进行计数；预期密度为每毫升7.5×108个活细胞，设5个中方格的孢子数量应不少于x，则有，解得x=30。 21. 由于猪的器官在生理形态上和人的器官非常接近，近年来应用猪的体细胞核移植技术研制人类基因疾病的动物模型，以及生产基因敲除猪用于人异种器官移植成为猪核移植相关研究的热点方向。如图为猪的体细胞核移植流程示意图，请回答下列问题： （1）研究人员在用合成培养基对猪耳部成纤维细胞进行培养时，通常需加入________________等一些天然成分。 （2）从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至________________________期才能用于体细胞核移植。除该方法外，采集卵母细胞还可采用超数排卵法，其具体做法是___________________________________。 （3）重构胚通常需培养至________________期，然后通过_________________技术送入代孕母猪体内。为提高胚胎的利用率，还可采用_____________技术对胚胎进行处理。 （4）就猪的体细胞移植技术本身来讲，虽然已经有多例体细胞克隆猪诞生，但总体的效率还是较低的，克隆猪的存活率只有1%或更低。研究表明，用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸（VPA）处理重构胚能显著提高其发育能力。从而大大提高克隆效率。若想探究VPA处理重构胚的最适浓度，其实验思路是____________________________。 【答案】（1）血清 （2） ①. MII（中） ②. 给卵母细胞供体注射促性腺激素，使其排出更多的卵子 （3） ①. 桑葚胚或囊胚 ②. 胚胎移植 ③. 胚胎分割 （4）设置一系列浓度梯度的VPA溶液分别处理重构胚，一段时间后观察统计胚胎的发育情况 【解析】 【分析】胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。 【小问1详解】 动物细胞培养时，为保证细胞的正常生长，需要添加血清等天然成分。 【小问2详解】 从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至减数第二次分裂中期（MII中期）才具有受精能力；使供体细胞超数排卵的方法是：给卵母细胞供体注射促性腺激素，使其排出更多的卵子。 【小问3详解】 一般而言，重构胚通常需培养至桑葚胚或囊胚期，然后通过胚胎移植技术送入代孕母猪体内；为提高胚胎的利用率，还可采用胚胎分割技术对胚胎进行处理，该技术能得到基因型相同的多个胚胎。 【小问4详解】 分析题意，本实验目的是探究VPA处理重构胚的最适浓度，则实验的自变量是VPA溶液的浓度，因变量是重构胚的发育能力，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：设置一系列浓度梯度的VPA溶液分别处理重构胚，一段时间后观察统计胚胎的发育情况。 22. 生长激素制剂是治疗垂体性侏儒症的特效药。人们从450升大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相当于6万具尸体全部含量。图1是通过基因工程将人的生长激素基因导入大肠杆菌中生产生长激素的过程，图2是基因工程中所用到的质粒，图3是通过PCR获取和扩增目的基因。请回答下列问题： （1）图1通过_______过程得到目的基因A后，通过③过程进行PCR扩增。图1中基因工程的核心步骤是________（填序号），基因表达载体中启动子的作用是___________。 （2）若利用图3过程获取和扩增A基因，需要选择的一对引物是________。图3中的基因表达时，_______（填“a”或“b”）链作为转录的模板链。 （3）要使A基因能正确与图2中的质粒拼接在一起，需要在所选引物的________端分别增加相应的限制酶的酶切位点。分析图2和图3，为了防止目的基因的反向连接，可在目的基因的上、下游分别添加_________（填限制酶名称）的识别序列。 （4）将目的基因导入大肠杆菌前，通常先用___________将大肠杆菌细胞处理成感受态。为鉴定导入的人生长激素基因是否成功表达，可以用__________技术进行检测。 【答案】（1） ①. 逆转录/反转录 ②. ④ ③. 作为RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动目的基因转录出mRNA （2） ①. 引物2和引物3 ②. b （3） ①. 5′ ②. AluⅠ、HindⅡ （4） ①. Ca2+ ②. 抗原-抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 由RNA→DNA的过程是逆转录过程，故图1中的目的基因是由mRNA经过逆转录过程获得的；图1中基因工程的核心步骤是过程④基因表达载体的构建。启动子的作用是作为RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动目的基因转录出mRNA。 【小问2详解】 DNA分子中，游离的磷酸端是5'端，游离的羟基端是3'端，由于需要在引物的3'端延伸子链，因此选择引物2和引物3；转录过程中，mRNA的延伸方向为5′一3'，DNA中模板链的方向与之相反，因此图3中的基因表达时b链作为转录的模板链。 【小问3详解】 由于子链沿着5’→3'的方向延伸，为保证准确复制，需要在所选引物的5′端分别增加相应的限制酶的酶切位点；转录方向是向右的，所以基因A在连接图2载体时，上游应靠近启动子，下游靠近终止子，而图2中不能选EcoRI酶切割质粒，会破坏复制原点，为了防止目的基因的反向连接，所以应该在目的基因上游添加AluI酶识别序列，下游添加HindII酶识别序列。 【小问4详解】 将目的基因导入大肠杆菌前，常用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为易于吸收外源DNA的感受态细胞；检测目的基因是否成功表达出蛋白质（生长激素），常用抗原-抗体杂交技术。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $