精品解析：湖北省沙市中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

2025—2026学年度下学期2024级6月月考生物试卷 （时间：75分钟，满分：100分） 考试时间：2026年6月18日 一、选择题（本题共20小题，每小题2分，共40分） 1. 酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达 60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（　　） A. 大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 B. 窖池发酵过程中，酵母菌以有氧呼吸为主 C. 堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 D. 窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 2. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 3. 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 4. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 5. 酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B. 酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C. 可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D. 该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 6. 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A. X→Y→Z B. Z→Y→X C. Y→X→Z D. Z→X→Y 7. 下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（ ） A. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C. 体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D. 愈伤组织就是失去特定结构和功能的定形的组织团块 8. 五彩缤纷的月季装点着美丽的京城，其中变色月季“光谱”备受青睐。“光谱”月季变色的主要原因是光照引起花瓣细胞液泡中花青素的变化。下列利用“光谱”月季进行的实验，难以达成目的的是（ ） A. 用花瓣细胞观察质壁分离现象 B. 用花瓣大量提取叶绿素 C. 探索生长素促进其插条生根的最适浓度 D. 利用幼嫩茎段进行植物组织培养 9. 植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列叙述错误的是（ ） A. 植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理 B. 植物细胞悬浮培养体现了植物细胞的全能性 C. 为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压 D. 利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗 10. 利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　） A. XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B. 细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C. 可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D. 采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 11. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 12. 我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是（ ） A. 实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B. 实验过程中使用的培养基含有糖类 C. 类囊胚的获得利用了核移植技术 D. 可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 13. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入的血清不能采用湿热灭菌的方法灭菌 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温降低了卵母细胞发育的成熟率 14. 大口黑鲈是一种高产养殖鱼，如感染LMBV病毒会大规模减产。科研人员制备识别LMBV表面MCP蛋白的单克隆抗体，实现了对LMBV的快速检测。再将MCP基因剪切得到不同长度的片段，表达出相应蛋白（P1~P4），以确定单克隆抗体识别MCP蛋白的特定部位，结果如下表所示。下列叙述正确的是（ ） MCP基因片段 1-90bp 61-150bp 121-210bp 181-303bp MCP蛋白片段 P1 P2 P3 P4 单克隆抗体结合情况 + - - - 注：bp为碱基对，“+”表示发生特异性结合，“-”表示未发生特异性结合 A. 单克隆抗体的制备利用了细胞具有全能性的原理 B. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，均能分泌抗MCP的抗体 C. 为大量增殖杂交瘤细胞，可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏内 D. 推测MCP基因1~60bp的片段编码单克隆抗体的识别位点 15. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是（ ） A. 过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B. 研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中 C. 鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D. 离心研磨液是为了加速DNA沉淀 16. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述错误的是（ ） A. 借助基因定点突变技术进行碱基对的替换可实现水蛭素第47位氨基酸的替换 B. 改造设计水蛭素时，先确定基因碱基序列，再推断相应蛋白质功能 C. 经蛋白质工程改造得到的新型水蛭素，是自然界原本不存在的蛋白质 D. 对水蛭素进行改造优先选择改造基因，相对易于操作且改造后能够遗传 17. 抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标（　　） A. 在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子 B. 大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂 C. 转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植 D. 转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带 18. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ） A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D. 酶切片段和载体连接时，可使用E．coli连接酶或T4连接酶 19. 下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是（ ） A. 加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合 B. 细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞 C. 芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上 D. 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上 20. 制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于8个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（ ） 反应管 加入的单链DNA ① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5' ② 5'-AGAGCCAATTGGC-3' ③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5' ④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3' A. ①② B. ②③ C. ①④ D. ③④ 二、非选择题：本题共4小题，共60分。 21. 胰岛素作用于肝细胞调节血糖平衡。为探究雌激素是否对胰岛素的作用产生影响，研究者进行了相关实验。 （1）卵巢产生的雌激素通过________运输到肝细胞，作用于雌激素受体（ER），ER激活肝细胞内的下游信号。 （2）研究者构建雌激素激活肝细胞模型鼠，将肝细胞置于不含葡萄糖的培养液中，分别处理一段时间后测定培养液中葡萄糖的含量。如图1。为提高葡萄糖含量以便检测，添加了胰高血糖素进行处理，胰高血糖素提高血糖的原因是__________（答一点）。如图1处理，Ⅱ组用胰高血糖素处理，除验证胰高血糖素升高血糖的作用外，还有什么作用？______________。由实验可以得出，在降低血糖上，雌激素和胰岛素的相互作用是______________。 （3）为进一步验证上述结论，实验者进行图2所示的体内实验，有人认为实验设计不合理，即使不考虑其他激素对血糖水平的影响，也无法得出雌激素与胰岛素之间的相互关系，你认为的原因可能是________。 22. 百合具有观赏、食用和药用等多种价值，科研人员对其进行了多种育种技术研究。回答下列问题： （1）体细胞杂交育种。进行不同种百合体细胞杂交前，先用_______去除细胞壁获得原生质体，使原生质体融合，得到杂种细胞后，继续培养，常用_______（填植物激素名称）诱导愈伤组织形成和分化，获得完整的杂种植株。 （2）单倍体育种。常用________的方法来获得单倍体植株，鉴定百合单倍体植株的方法是________。 （3）基因工程育种。研究人员从野生百合中获得一个抵抗尖孢镰刀菌侵染的基因L，该基因及其上游的启动子pL和下游的终止子结构如图a。图b是一种Ti质粒的结构示意图，其中基因gus编码GUS酶，GUS酶活性可反映启动子活性。 研究病原微生物对L的启动子pL活性的影响。从图a所示结构中获取pL，首先选用_______酶切，将其与相同限制酶酶切的Ti质粒连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物胁迫，结果如图c。由此可知：三种病原微生物都能诱导pL的活性增强，其中________的诱导作用最强。 23. 在荒漠生态系统中，螨虫、跳虫等小型节肢动物对凋落物和有机碎屑的分解发挥着重要作用，这种作用主要是通过取食真菌、传播真菌孢子和捕食噬菌线虫来完成的。基于此，科研人员开展了以下两个相关实验： 实验①：分别使用杀真菌剂和杀虫剂（杀灭小型节肢动物）对荒漠灌木植物柠条的凋落物和有机碎屑进行处理，发现使用杀真菌剂后，分解作用减少了29%；使用杀虫剂后，分解作用减少了53%。 实验②：清除柠条凋落物和有机碎屑中的小型节肢动物（主要是螨虫），使得噬菌线虫（取食细菌等）数量增加、细菌数量减少，分解作用减少40%；而清除噬菌线虫和小型节肢动物，使细菌数量增加。 回答下列问题： （1）区别荒漠群落和森林群落的重要依据是__________。 （2）上述荒漠生态系统中，排除小型节肢动物后，噬菌线虫种群增长曲线呈__________形；清除线虫和小型节肢动物后，生态系统抵抗力稳定性的变化是：__________（填序号）。 ①变强②不变③变弱④无法判断 （3）根据上述材料分析，螨虫通过直接调节__________的种群大小，从而对荒漠生态系统中凋落物和有机碎屑的分解产生影响。 （4）根据上述材料，画出噬菌线虫的能量输入与输出的示意图：__________。 （5）从生态系统功能的角度，评价杀虫剂等农药对生态系统的影响：__________。 24. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为_____。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和_____对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是_____。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_____进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_____bp，则一定为正向重组质粒。 （2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。需首先将图乙的片段_____，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中一定可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为_____（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年度下学期2024级6月月考生物试卷 （时间：75分钟，满分：100分） 考试时间：2026年6月18日 一、选择题（本题共20小题，每小题2分，共40分） 1. 酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达 60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（　　） A. 大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 B. 窖池发酵过程中，酵母菌以有氧呼吸为主 C. 堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 D. 窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 【答案】A 【解析】 【详解】A、糖化过程是将酿酒原料中的淀粉分解为小分子糖，大曲提供糖化所需的微生物，说明这些微生物可分泌淀粉酶催化淀粉水解，A正确； B、窖池发酵的目的是生产酒精，酵母菌只有在无氧呼吸条件下才能产生酒精，因此窖池发酵过程中酵母菌以无氧呼吸为主，B错误； C、酿酒酵母的适宜生长温度为18~30℃，堆积培养时60℃的高温会杀死酵母菌，无法筛选酿酒酵母，该高温是用于筛选耐高温的糖化微生物，C错误； D、窖池密封不严时，氧气进入窖池，醋酸菌进行有氧呼吸将酒精转化为醋酸，使酒变酸，与乳酸无关，D错误。 2. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 （1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。 （2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。 （3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。 （4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。 （5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。 【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的乳酸菌被杀死，A错误； B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误； C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生的气体，C正确； D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。 故选C。 3. 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程：（1）定义：利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品；主要为微生物细胞本身或者其代谢产物。（2）分离、提纯产物：产品若是微生物细胞，在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥；产品若是微生物代谢物，则根据产物的性质采取 适当的提取、分离和纯化措施。 【详解】A、黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧，相同菌体密度下，菌球体越大越不利于菌体与氧气接触，柠檬酸产生速率越慢，A正确； B、菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制，发酵中期添加一定量的硫酸铵，提高铵离子浓度，菌体内可提高柠檬酸产量，B正确； C、发酵过程中pH下降导致细菌生命活动所必须的酶失活，可抑制大部分细菌的生长，C正确； D、发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行分离、纯化、浓缩、干燥等一系列操作后才能获得柠檬酸产品，D错误。 故选D。 4. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【解析】 【分析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。图中②筛选的是不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。 【详解】A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 5. 酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B. 酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C. 可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D. 该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 【答案】C 【解析】 【分析】 微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。 （2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 【详解】A、酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌和真菌，A错误； B、将含有酵母菌的培养基放置在28℃恒温培养箱中进行培养，B错误； C、稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，由此可知，可用稀释涂布平板法对酵母菌计数，C正确； D、酵母菌是真核细胞，具有高尔基体和内质网，可以对合成的蛋白质进行加工和修饰，D错误。 故选C。 6. 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A. X→Y→Z B. Z→Y→X C. Y→X→Z D. Z→X→Y 【答案】A 【解析】 【分析】由图可知，接种时，相当于在培养基表面划了一个三角形的三条边。左边那条边线是用trpY突变型菌液划线接种的，右边那个边是用trpX突变型菌液接种的，最下面那个边是用trpZ突变型菌液划线接种的。最终结果是，trpY那条接种线左下方出现了又黑又粗的明显的菌落，trpX那条接种线两头出现了明显的菌落，而trpZ那条接种线，没有长出明显的菌落，。 【详解】ABCD、添加少量色氨酸，突变体菌株可以生长，色氨酸合成途径的中间产物积累后可排出胞外，进入培养基后，通过扩散，从而给其他突变型提供代谢原料，帮助其长出明显的菌落。trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体，据图可知，trpX不能为trpY和trpZ提供原料，trpY不能为trpZ提供原料，trpZ可以为trpX、trpY的生长提供原料，推测3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z。 故选A。 7. 下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（ ） A. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C. 体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D. 愈伤组织就是失去特定结构和功能的定形的组织团块 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，去除细胞壁需用纤维素酶和果胶酶，胶原蛋白酶用于动物细胞培养时分散细胞，无法去除植物细胞壁，A错误； B、原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁，只有再生细胞壁后的杂种细胞才能进行分裂、脱分化形成愈伤组织，B正确； C、植物体细胞杂交过程中，原生质体融合时细胞核也会发生融合，最终获得的杂种植株细胞中仅含有1个融合后的细胞核，不存在2个亲本的细胞核，C错误； D、愈伤组织是高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞团，不具有定形结构，D错误。 8. 五彩缤纷的月季装点着美丽的京城，其中变色月季“光谱”备受青睐。“光谱”月季变色的主要原因是光照引起花瓣细胞液泡中花青素的变化。下列利用“光谱”月季进行的实验，难以达成目的的是（ ） A. 用花瓣细胞观察质壁分离现象 B. 用花瓣大量提取叶绿素 C. 探索生长素促进其插条生根的最适浓度 D. 利用幼嫩茎段进行植物组织培养 【答案】B 【解析】 【分析】当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，即发生了质壁分离。 【详解】A、花瓣细胞含有中央大液泡，液泡中含有花青素，因此可用花瓣细胞观察质壁分离现象，A不符合题意； B、花 瓣含花青素，而不含叶绿素，因此不能用花瓣提取叶绿素， B符合题意； C、生长素能促进月季的茎段生根，可利用月季的茎段为材料来探索生长素促进其插条生根的最适浓度，C不符合题意； D、月季的幼嫩茎段能分裂，能利用幼嫩茎段的外植体进行植物组织培养，D不符合题意。 故选B。 9. 植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列叙述错误的是（ ） A. 植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理 B. 植物细胞悬浮培养体现了植物细胞的全能性 C. 为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压 D. 利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物细胞悬浮培养时，若培养基存在杂菌，杂菌会与培养细胞竞争营养、产生有毒物质导致培养失败，因此培养基必须经过无菌处理，A正确； B、细胞全能性的核心是已经分化的细胞具有发育为完整个体的潜能，植物细胞悬浮培养仅实现了细胞的增殖，没有得到完整植株，因此没有体现植物细胞的全能性，B错误； C、适宜温度可保证细胞内酶的活性，适宜pH可保障细胞代谢正常进行，合适的渗透压可避免细胞失水或吸水涨破，因此培养基需要维持上述条件保证细胞正常生长，C正确； D、悬浮培养可快速获得大量植物细胞，直接从增殖的细胞中提取次生代谢产物，无需培育或采伐大量完整植株，可减少植物资源的消耗，D正确。 10. 利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　） A. XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B. 细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C. 可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D. 采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养需满足基本的营养条件，培养液中需有氨基酸、无机盐、糖类和维生素等，同时需要适宜的温度、pH和渗透压，还需在无菌无毒的环境下去培养。无菌：对培养液和所有的培养用具进行灭菌处理，在无菌的环境下进行操作；无毒：定期更换培养液，以便清除代谢产物。 【详解】A、悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效率，A正确； B、XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误； C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C正确； D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性，D正确； 故选B。 11. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。 【详解】A、选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体，进行超数排卵处理，A正确； B、胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行遗传学检测，B正确； C、作为受体的杜泊母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即可，但山羊和绵羊是不同的物种，具有生殖隔离，不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确； D、生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D错误。 故选D。 12. 我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是（ ） A. 实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B. 实验过程中使用的培养基含有糖类 C. 类囊胚的获得利用了核移植技术 D. 可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 【答案】C 【解析】 【分析】该过程利用胚胎干细胞创造出了类胚胎结构，并在体外培养至原肠胚时期，将类囊胚移植进雄猴体内后，成功引起了雌猴的早期妊娠反应有可能会产生新生个体，该过程属于无性生殖。 【详解】A、体外诱导食蟹猴胚胎干细胞， 形成了类似囊胚的结构(类囊胚)，证实了食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能，A正确； B、实验过程中使用的培养基需含有糖类，糖类可为细胞培养提供能源物质，B正确； C、类囊胚的获得利用了动物细胞培养技术，并没有进行核移植，C错误； D、可借助胚胎移植技术将类囊胚移植到相应的雌性受体中继续胚胎发育，从而可以用来研究类囊胚的后续发育，D正确。 故选C。 13. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入的血清不能采用湿热灭菌的方法灭菌 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温降低了卵母细胞发育的成熟率 【答案】C 【解析】 【详解】A、实验设计需遵循单一变量原则，选取发育状态一致的卵母细胞可排除无关变量对实验结果的干扰，A正确； B、血清中含有大量不耐热的活性成分（如生长因子、蛋白质类物质），湿热灭菌的高温环境会破坏这些成分，因此血清不能采用湿热灭菌，通常用过滤法除菌，B正确； C、卵母细胞是高度分化的细胞，不具备有丝分裂增殖的能力，无法通过传代培养产生大量卵细胞，采集的卵母细胞只需培养至减数第二次分裂中期即可获得成熟卵细胞，C错误； D、对比两组实验，总培养时长均为24h，经过高温处理的实验组，成熟卵母细胞的数量更少，即卵母细胞发育成熟率更低，说明高温会降低卵母细胞发育的成熟率，D正确。 14. 大口黑鲈是一种高产养殖鱼，如感染LMBV病毒会大规模减产。科研人员制备识别LMBV表面MCP蛋白的单克隆抗体，实现了对LMBV的快速检测。再将MCP基因剪切得到不同长度的片段，表达出相应蛋白（P1~P4），以确定单克隆抗体识别MCP蛋白的特定部位，结果如下表所示。下列叙述正确的是（ ） MCP基因片段 1-90bp 61-150bp 121-210bp 181-303bp MCP蛋白片段 P1 P2 P3 P4 单克隆抗体结合情况 + - - - 注：bp为碱基对，“+”表示发生特异性结合，“-”表示未发生特异性结合 A. 单克隆抗体的制备利用了细胞具有全能性的原理 B. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，均能分泌抗MCP的抗体 C. 为大量增殖杂交瘤细胞，可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏内 D. 推测MCP基因1~60bp的片段编码单克隆抗体的识别位点 【答案】D 【解析】 【详解】A、单克隆抗体的制备依据的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖，而非细胞全能性，因为该过程中细胞没有发育成完整个体和分化出各种细胞，A错误； B、选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可能有多种类型，因而这些杂交瘤细胞不都能分泌抗MCP的抗体，因此，需要进行二次筛选，筛选出能产生抗MCP的抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、杂交瘤细胞通常在体外培养液或小鼠腹腔内增殖，在小鼠脾脏中不能完成大量增殖，C错误； D、P1（1-90bp）对应的蛋白能与抗体结合，而P2（61-150bp）不能，说明抗体识别位点位于1-60bp编码的蛋白区域，D正确。 故选D。 15. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是（ ） A. 过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B. 研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中 C. 鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D. 离心研磨液是为了加速DNA沉淀 【答案】A 【解析】 【详解】A、低温可以降低DNA酶的活性，避免DNA被酶分解，过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行能够防止DNA降解，A正确； B、研磨液在4℃冰箱放置的目的是让不溶性杂质沉降，操作时需取上层含DNA的上清液，若充分摇匀会使沉淀的杂质重新混入液体，不利于后续提取，B错误； C、DNA鉴定需要沸水浴加热，高温会破坏DNA双链之间的氢键，使双螺旋结构解开，结构发生改变，C错误； D、离心研磨液的目的是使细胞碎片等不溶性杂质沉淀，DNA此时溶解在上清液中，该操作不是为了加速DNA沉淀，D错误。 16. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述错误的是（ ） A. 借助基因定点突变技术进行碱基对的替换可实现水蛭素第47位氨基酸的替换 B. 改造设计水蛭素时，先确定基因碱基序列，再推断相应蛋白质功能 C. 经蛋白质工程改造得到的新型水蛭素，是自然界原本不存在的蛋白质 D. 对水蛭素进行改造优先选择改造基因，相对易于操作且改造后能够遗传 【答案】B 【解析】 【详解】A、氨基酸的种类由mRNA上的密码子决定，密码子对应基因上的碱基序列，借助基因定点突变技术替换对应位点的碱基对，可改变该位点对应的密码子，进而实现第47位氨基酸的替换，A正确； B、蛋白质工程的操作流程是：先预期蛋白质功能，再设计预期蛋白质的结构，之后推测应有的氨基酸序列，最后确定并改造对应的基因碱基序列，B错误； C、蛋白质工程可对现有蛋白质进行定向改造，生产自然界原本不存在的蛋白质，经改造得到的新型水蛭素是人工设计改造的，自然界中原本不存在，C正确； D、基因控制蛋白质的合成，且基因能够遗传，直接改造基因比对蛋白质直接操作更简便，改造后的性状可随基因遗传给子代，因此对水蛭素改造优先选择改造基因，D正确。 17. 抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标（　　） A. 在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子 B. 大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂 C. 转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植 D. 转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带 【答案】B 【解析】 【分析】现代生物进化理论的主要内容：种群是生物进化的基本单位；突变和基因重组产生生物进化的原材料；自然选择决定生物进化的方向；隔离是新物种形成的必要条件。达尔文认为生物变异在前，选择在后，适者生存，优胜劣汰。 【详解】A 、在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子，则常规种子长成的普通植株能敏感性（不抗虫）个体提供生存空间，增加与抗虫个体的竞争，避免抗性基因频率升高过快，提高了抗虫棉的抗虫持久性，A不符合题意； B 、大面积种植转基因抗虫棉、施用杀虫剂，都会进一步选择并保存抗性强的个体，导致敏感性个体死亡，从而加快害虫种群抗性基因频率提高，不利于抗虫棉的抗虫持久性，B符合题意； CD 、将转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植以及转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带，作用机理相似：可以使敏感型个体存活，敏感性个体能与抗性强的棉铃虫进行竞争，不会导致抗性基因频率升高过快，提高了抗虫棉的抗虫持久性， CD 正确。 故选B。 18. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ） A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D. 酶切片段和载体连接时，可使用E．coli连接酶或T4连接酶 【答案】B 【解析】 【详解】A、由于引物只能引导子链从5＇到3＇，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇，A正确； B、根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的，右边的黏性末端是用CfoI切割形成的，B错误； C、用步骤①的酶对载体进行酶切，使用了NheI和CfoI进行切割，根据他们的识别位点以及原本DNA的序列，切割之后至少获得了2个片段，C正确； D、图中形成的是黏性末端，而E.coliDNA连接酶能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D正确。 故选B。 19. 下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是（ ） A. 加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合 B. 细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞 C. 芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上 D. 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上 【答案】B 【解析】 【分析】分析题干信息：Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17号染色体具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上。 【详解】A、动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二醇作诱导剂促进细胞融合，A正确； B、细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体，故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误； CD、Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17号染色体具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上，CD正确。 故选B。 20. 制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于8个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（ ） 反应管 加入的单链DNA ① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5' ② 5'-AGAGCCAATTGGC-3' ③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5' ④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3' A. ①② B. ②③ C. ①④ D. ③④ 【答案】D 【解析】 【详解】分析反应管①～④中分别加入的适量单链DNA可知，①中两条单链DNA分子之间具有互补的序列，但双链DNA区之外的3'端无模板，因此无法进行DNA合成，不能得到带有荧光标记的DNA探针；②中单链DNA分子内具有自身互补的序列，由于在本实验的温度条件下不能产生小于8个连续碱基对的双链DNA区，故一条单链DNA分子不发生自身环化，但两条链可以形成双链DNA区，由于DNA合成的链中不含碱基A，不能得到带有荧光标记的DNA探针；③中两条单链DNA分子之间具有互补的序列，且双链DNA区之外的3'端有模板和碱基T，因此进行DNA合成能得到带有荧光标记的DNA探针；④中单链DNA分子内具有自身互补的序列，一条单链DNA分子不发生自身环化，两条链可以形成双链DNA区，且双链DNA区之外的3'端有模板和碱基T，因此进行DNA合成能得到带有荧光标记的DNA探针。综上，能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有③④。 二、非选择题：本题共4小题，共60分。 21. 胰岛素作用于肝细胞调节血糖平衡。为探究雌激素是否对胰岛素的作用产生影响，研究者进行了相关实验。 （1）卵巢产生的雌激素通过________运输到肝细胞，作用于雌激素受体（ER），ER激活肝细胞内的下游信号。 （2）研究者构建雌激素激活肝细胞模型鼠，将肝细胞置于不含葡萄糖的培养液中，分别处理一段时间后测定培养液中葡萄糖的含量。如图1。为提高葡萄糖含量以便检测，添加了胰高血糖素进行处理，胰高血糖素提高血糖的原因是__________（答一点）。如图1处理，Ⅱ组用胰高血糖素处理，除验证胰高血糖素升高血糖的作用外，还有什么作用？______________。由实验可以得出，在降低血糖上，雌激素和胰岛素的相互作用是______________。 （3）为进一步验证上述结论，实验者进行图2所示的体内实验，有人认为实验设计不合理，即使不考虑其他激素对血糖水平的影响，也无法得出雌激素与胰岛素之间的相互关系，你认为的原因可能是________。 【答案】（1）血液##体液##血浆 （2） ①. 促进肝糖原分解/促进非糖物质转化 ②. 排除胰高血糖素对Ⅲ组实验结果的影响/证明胰高血糖素对雌激素的作用无影响 ③. 协同作用##雌激素促进胰岛素的降糖功能 （3）没有排除内源胰岛素的影响 【解析】 【小问1详解】 内分泌腺分泌的激素可以直接进入腺体内的毛细血管，并随血液循环输送到全身各处，激素等化学物质，是通过体液传送的方式对生命活动进行调节，因此，卵巢产生的雌激素可通过血液/体液/血浆运输到肝细胞。 【小问2详解】 ①胰高血糖素主要作用于肝，促进肝糖原分解成葡萄糖进入血液，促进非糖物质转变成糖，使血糖浓度回升到正常水平；②根据题目信息可知，为提高葡萄糖含量，添加了胰高血糖素进行处理，但本实验是探究雌激素是否对胰岛素的作用产生影响，因此为控制单一变量，Ⅱ组单用胰高血糖素处理，可排除胰高血糖素对III组实验结果的影响/证明胰高血糖素对雌激素的作用无影响；③对比图1中Ⅱ组与Ⅲ组的数据信息可以发现，Ⅲ组激活组血糖下降幅度明显大于对照组，由此可推测，雌激素能够促进胰岛素的降糖作用（或者是协同作用）。 【小问3详解】 实验动物体本身的胰岛B细胞也能合成分泌胰岛素，本实验没有排除内源胰岛素对实验结果的影响。 22. 百合具有观赏、食用和药用等多种价值，科研人员对其进行了多种育种技术研究。回答下列问题： （1）体细胞杂交育种。进行不同种百合体细胞杂交前，先用_______去除细胞壁获得原生质体，使原生质体融合，得到杂种细胞后，继续培养，常用_______（填植物激素名称）诱导愈伤组织形成和分化，获得完整的杂种植株。 （2）单倍体育种。常用________的方法来获得单倍体植株，鉴定百合单倍体植株的方法是________。 （3）基因工程育种。研究人员从野生百合中获得一个抵抗尖孢镰刀菌侵染的基因L，该基因及其上游的启动子pL和下游的终止子结构如图a。图b是一种Ti质粒的结构示意图，其中基因gus编码GUS酶，GUS酶活性可反映启动子活性。 研究病原微生物对L的启动子pL活性的影响。从图a所示结构中获取pL，首先选用_______酶切，将其与相同限制酶酶切的Ti质粒连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物胁迫，结果如图c。由此可知：三种病原微生物都能诱导pL的活性增强，其中________的诱导作用最强。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 生长素和细胞分裂素 （2） ①. 花药离体培养 ②. 利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目 （3） ①. HindⅢ、BamHⅠ ②. 交链格孢 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁主要成分为纤维素和果胶，去除细胞壁获得原生质体需要纤维素酶和果胶酶。植物组织培养中，生长素、细胞分裂素配比调控脱分化形成愈伤组织，以及再分化形成根、芽。 【小问2详解】 获得单倍体植株常用花药（或花粉）离体培养的方法，利用植物细胞的全能性，将花药中的花粉培育成单倍体植株。单倍体染色体数为正常二倍体百合的一半，直接制片镜检染色体数量即可鉴定。因为中期染色体数目清晰形态固定，故可利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目。 【小问3详解】 从图a所示结构中获取启动子pL，要保证获取的片段完整且不破坏启动子结构，应选用HindⅢ、BamHⅠ酶切，因为这两种酶的酶切位点在启动子pL的两端。 从图c可知，在三种病原微生物（尖孢镰刀菌、厚垣镰刀菌、交链格孢）中，交链格孢处理组的GUS酶活性最高，而GUS酶活性可反映启动子活性，所以交链格孢的诱导作用最强。 23. 在荒漠生态系统中，螨虫、跳虫等小型节肢动物对凋落物和有机碎屑的分解发挥着重要作用，这种作用主要是通过取食真菌、传播真菌孢子和捕食噬菌线虫来完成的。基于此，科研人员开展了以下两个相关实验： 实验①：分别使用杀真菌剂和杀虫剂（杀灭小型节肢动物）对荒漠灌木植物柠条的凋落物和有机碎屑进行处理，发现使用杀真菌剂后，分解作用减少了29%；使用杀虫剂后，分解作用减少了53%。 实验②：清除柠条凋落物和有机碎屑中的小型节肢动物（主要是螨虫），使得噬菌线虫（取食细菌等）数量增加、细菌数量减少，分解作用减少40%；而清除噬菌线虫和小型节肢动物，使细菌数量增加。 回答下列问题： （1）区别荒漠群落和森林群落的重要依据是__________。 （2）上述荒漠生态系统中，排除小型节肢动物后，噬菌线虫种群增长曲线呈__________形；清除线虫和小型节肢动物后，生态系统抵抗力稳定性的变化是：__________（填序号）。 ①变强②不变③变弱④无法判断 （3）根据上述材料分析，螨虫通过直接调节__________的种群大小，从而对荒漠生态系统中凋落物和有机碎屑的分解产生影响。 （4）根据上述材料，画出噬菌线虫的能量输入与输出的示意图：__________。 （5）从生态系统功能的角度，评价杀虫剂等农药对生态系统的影响：__________。 【答案】（1）物种组成 （2） ①. S ②. ③ （3）真菌和噬菌线虫 （4） （5）杀虫剂等农药降低了分解者多样性，阻碍了生态系统的物质循环、能量流动和信息传递（写出物质循环和能量流动即可） 【解析】 【小问1详解】 群落的物种组成是区别不同群落的重要依据，所以区别荒漠群落和森林群落的重要依据是物种组成。 【小问2详解】 在自然条件下，由于资源和空间有限，种群增长曲线一般为 “S” 形。排除小型节肢动物后，噬菌线虫由于缺少捕食者，死亡率降低，繁殖率上升，但环境资源依然有限，所以其种群增长曲线是 “S” 形。清除线虫和小型节肢动物后，生态系统的营养结构变简单，自我调节能力减弱，抵抗力稳定性降低，即③。 【小问3详解】 螨虫、跳虫等小型节肢动物对凋落物和有机碎屑的分解发挥着重要作用，这种作用主要是通过取食真菌、传播真菌孢子和捕食噬菌线虫来完成的，说明螨虫通过直接调节真菌和噬菌线虫的种群大小，从而对荒漠生态系统中凋落物和有机碎屑的分解产生影响。 【小问4详解】 噬菌线虫取食细菌等获得能量，一部分能量用于自身呼吸作用以热能形式散失，一部分能量流向下一营养级，还有一部分能量流向分解者。示意图如下： 【小问5详解】 从生态系统功能的角度，杀虫剂等农药会杀灭小型节肢动物，使生态系统的分解作用减弱，物质循环和能量流动受阻；同时可能会对其他生物造成影响，破坏生态系统的营养结构，进而影响生态系统的稳定性。 24. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为_____。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和_____对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是_____。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_____进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_____bp，则一定为正向重组质粒。 （2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。需首先将图乙的片段_____，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中一定可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为_____（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。 【答案】（1） ①. 复制原点 ②. XbaI ③. DNA聚合酶 ④. SmaI和SpeI ⑤. 550bp （2） ①. 环化 ②. 测序和序列比对 【解析】 【小问1详解】 DNA复制的起点是复制原点，因此Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为复制原点。根据SmaI限制酶识别序列可知，酶切形成的是平末端，若质粒仅用SmaI酶切，抗除草剂基因和质粒可以正向接入也可以反向接入，且无法区分，为了确定是否是正向重组质粒，因此在构建重组质粒时需要用到另一种限制酶，抗除草剂基因需要插入到启动子和终止子之间，因此不能选择BamHI，因为该限制酶会破坏终止子，因此可选择XbaI和SmaI进行酶切，XbaI酶切会形成黏性末端，需要用DNA聚合酶聚合脱氧核糖核苷酸单体将产生的黏性末端补平（可使重组质粒最小，同时PstI酶切后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶抹平，因为DNA聚合酶只能从3'延伸子链）。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌。重组的T-DNA片段上含有一个SmaI酶切位点和一个SpeI酶切位点，可以选择用SmaI和SpeI进行酶切，转录的方向是从模板的3'→5'，和质粒对应的方向相同，经过两种酶的酶切后并电泳呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为550bp，若反向接，较短的条带长度近似为200bp。 【小问2详解】 由于后续PCR难以扩增大片段DNA，所以最好选择识别序列为4个碱基的限制酶，原因是识别序列越短，酶切位点越多，切割产生的片段可能越小，更有利于后续的PCR扩增。由于引物是根据已知序列设计的，但此时需要扩增未知序列，因此可以将图乙的片段环化，这样就可以利用现有引物扩增出未知序列。为了确定未知序列是否是同一基因，需要准确比对其上的碱基序列，因此对同一个基因的操作为测序和序列比对。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $