湖北省沙市中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

**基本信息** 以白酒酿造、单克隆抗体制备等真实科研生产情境为载体，覆盖微生物工程、基因工程等模块，通过分层设问考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|20/40|发酵技术（如泡菜制作）、细胞工程（如植物悬浮培养）|情境时代性（如MDCK细胞疫苗生产）| |非选择题|4/60|生态系统功能（如荒漠分解者作用）、基因工程操作（如Ti质粒构建）|综合探究（如24题重组载体构建与检测）|

2025—2026学年度下学期2024级 6月月考生物试卷 命题人：汤云焉 审题人：李萍 （时间：75分钟，满分：100分） 考试时间：2026年6月18日 一、选择题（本题共20小题，每小题2分，共40分） 1．酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（ ） A．堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 B．大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 C．窖池发酵过程中，酵母菌主要进行有氧呼吸 D．窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 2．以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸菌被杀死 B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 3．在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A．相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B．发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C．发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D．发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 4．养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 5．酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（ ） A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 6．酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A．X→Y→Z B．Z→Y→X C．Y→X→Z D．Z→X→Y 7．下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．愈伤组织就是失去特定结构和功能的定形的组织团块 8．五彩缤纷的月季装点着美丽的京城，其中变色月季“光谱”备受青睐。“光谱”月季变色的主要原因是光照引起花瓣细胞液泡中花青素的变化。下列利用“光谱”月季进行的实验，难以达成目的的是（ ） A．用花瓣细胞观察质壁分离现象 B．用花瓣大量提取叶绿素 C．探索生长素促进其插条生根的最适浓度 D．利用幼嫩茎段进行植物组织培养 9．植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列叙述错误的是（ ） A．植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理 B．植物细胞悬浮培养体现了植物细胞的全能性 C．为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压 D．利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗 10．利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06．下列叙述错误的是（　　） A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 11．波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D．生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 12．科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是（ ） A．实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B．实验过程中使用的培养基含有糖类 C．类囊胚的获得利用了核移植技术 D．可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 13．从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A．选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B．体外培养卵母细胞时通常加入的血清不能采用湿热灭菌的方法灭菌 C．对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D．体外培养时高温降低了卵母细胞发育的成熟率 MCP 基因片段 1-90bp 61-150bp 121-210bp 181-303bp MCP 蛋白片段 P1 P2 P3 P4 单克隆抗体结合情况 + - - - 14．大口黑鲈是一种高产养殖鱼，如感染 LMBV 病毒会大规模减产。科研人员制备识别 LMBV 表面 MCP 蛋白的单克隆抗体，实现了对 LMBV 的快速检测。再将 MCP 基因剪切得到不同长度的片段，表达出相应蛋白（P1~P4），以确定单克隆抗体识别 MCP 蛋白的特定部位，结果如下表所示。下列叙述正确的是（ ） 注：bp 为碱基对，“+”表示发生特异性结合，“-”表示未发生特异性结合 A．单克隆抗体的制备利用了细胞具有全能性的原理 B．选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，均能分泌抗 MCP 的抗体 C．为大量增殖杂交瘤细胞，可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏内 D．推测 MCP 基因 1~60bp 的片段编码单克隆抗体的识别位点 15．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是（　　） A．过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B．研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中 C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D．离心研磨液是为了加速DNA沉淀 16．水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述错误的是（       ） A．借助基因定点突变技术进行碱基对的替换可实现水蛭素第47位氨基酸的替换 B．改造设计水蛭素时，先确定基因碱基序列，再推断相应蛋白质功能 C．经蛋白质工程改造得到的新型水蛭素，是自然界原本不存在的蛋白质 D．对水蛭素进行改造优先选择改造基因，相对易于操作且改造后能够遗传 17．抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标（　　） A．在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子 B．大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂 C．转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植 D．转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带 18．某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ） A．其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B．步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C．用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D．酶切片段和载体连接时，可使用E．coli DNA连接酶或T4DNA连接酶 19．右图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是（ ） A. 加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合 B. 细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞 C. 芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上 D. 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上 20．制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于8个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（　　） 反应管 加入的单链DNA ① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5' ② 5'-AGAGCCAATTGGC-3' ③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5' ④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3' A．①② B．②③ C．①④ D．③④ 二、非选择题：本题共4小题，共60分。 21．胰岛素作用于肝细胞调节血糖平衡。为探究雌激素是否对胰岛素的作用产生影响，研究者进行了相关实验。 （1）卵巢产生的雌激素通过________运输到肝细胞，作用于雌激素受体（ER），ER激活肝细胞内的下游信号。 （2）研究者构建雌激素激活肝细胞模型鼠，将肝细胞置于不含葡萄糖的培养液中，分别处理一段时间后测定培养液中葡萄糖的含量。如图1。为提高葡萄糖含量以便检测，添加了胰高血糖素进行处理，胰高血糖素提高血糖的原因是__________（答一点）。如图1处理，Ⅱ组用胰高血糖素处理，除验证胰高血糖素升高血糖的作用外，还有什么作用？______________。由实验可以得出，在降低血糖上，雌激素和胰岛素的相互作用是______________。 （3）为进一步验证上述结论，实验者进行图2所示的体内实验，有人认为实验设计不合理，即使不考虑其他激素对血糖水平的影响，也无法得出雌激素与胰岛素之间的相互关系，你认为的原因可能是________。 22．百合具有观赏、食用和药用等多种价值，科研人员对其进行了多种育种技术研究。回答下列问题： （1）体细胞杂交育种。进行不同种百合体细胞杂交前，先用_______去除细胞壁获得原生质体，使原生质体融合，得到杂种细胞后，继续培养，常用_______（填植物激素名称）诱导愈伤组织形成和分化，获得完整的杂种植株。 （2）单倍体育种。常用________的方法来获得单倍体植株，鉴定百合单倍体植株的方法是________。 （3）基因工程育种。研究人员从野生百合中获得一个抵抗尖孢镰刀菌侵染的基因L，该基因及其上游的启动子pL和下游的终止子结构如图a。图b是一种Ti质粒的结构示意图，其中基因gus编码GUS酶，GUS酶活性可反映启动子活性。 研究病原微生物对L的启动子pL活性的影响。从图a所示结构中获取pL，首先选用_______酶切，将其与相同限制酶酶切的Ti质粒连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物胁迫，结果如图c。由此可知：三种病原微生物都能诱导pL的活性增强，其中________的诱导作用最强。 23．在荒漠生态系统中，螨虫、跳虫等小型节肢动物对凋落物和有机碎屑的分解发挥着重要作用，这种作用主要是通过取食真菌、传播真菌孢子和捕食噬菌线虫来完成的。基于此，科研人员开展了以下两个相关实验： 实验①：分别使用杀真菌剂和杀虫剂（杀灭小型节肢动物）对荒漠灌木植物柠条的凋落物和有机碎屑进行处理，发现使用杀真菌剂后，分解作用减少了29%；使用杀虫剂后，分解作用减少了53%。 实验②：清除柠条凋落物和有机碎屑中的小型节肢动物（主要是螨虫），使得噬菌线虫（取食细菌等）数量增加、细菌数量减少，分解作用减少40%；而清除噬菌线虫和小型节肢动物，使细菌数量增加。 回答下列问题： （1）区别荒漠群落和森林群落的重要依据是__________。 （2）上述荒漠生态系统中，排除小型节肢动物后，噬菌线虫种群增长曲线呈__________形；清除线虫和小型节肢动物后，生态系统抵抗力稳定性的变化是：__________（填序号）。 ①变强 ②不变 ③变弱 ④无法判断 （3）根据上述材料分析，螨虫通过直接调节__________的种群大小，从而对荒漠生态系统中凋落物和有机碎屑的分解产生影响。 （4）根据上述材料，画出噬菌线虫的能量输入与输出的示意图：__________。 （5）从生态系统功能的角度，评价杀虫剂等农药对生态系统的影响：__________。 24． 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为_____。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和_____对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是_____。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_____进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_____bp，则一定为正向重组质粒。 （2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。需首先将图乙的片段_____，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中一定可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为_____（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。 高二年级6月月考生物答案 1-5 BCDCC 6-10 ABBBB 11-15 DCCDA 16-20 BBBBD 21．（12分，除标注外，每空2分） （1）血液/体液/血浆 （2分） （2）①促进肝糖原分解/促进非糖物质转化（2分） ②排除胰高血糖素对Ⅲ组实验结果的影响/证明胰高血糖素对雌激素的作用无影响 （2分） ③协同作用/雌激素促进胰岛素的降糖功能 （2分） （3）没有排除内源胰岛素的影响（4分） 22．（16分，除标注外，每空2分） （1）纤维素酶和果胶酶（2分） 生长素和细胞分裂素 （2分） （2）花药离体培养 （2分） 利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目 （4分） （3）① HindⅢ、BamHⅠ （4分） ② 交链格孢（2分） 23．（16分，除标注外，每空2分） （1）物种组成（2分） （2）S （2分） ③ （2分） （3）真菌和噬菌线虫 （2分） （4）（4分） （5）杀虫剂等农药降低了分解者多样性，阻碍了生态系统的物质循环、能量流动和信息传递（写出物质循环和能量流动既可）（4分） 24．（16分，除标注外，每空2分） （1）复制原点（2分） ② XbaI （4分） ③ DNA聚合酶 （2分） ④ SmaI和SpeI （2分） ⑤ 550bp （2分） （2）② 环化（2分） ③ 测序和序列比对 （2分） 1 学科网（北京）股份有限公司 $