河南省南阳市方城县第一高级中学2026年春期高二年级第二次月考生物试题

**基本信息** 以海水稻培育、酶抑制剂探究等真实情境为载体，融合生命观念与科学思维，通过实验设计与综合应用考查探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|16题/48分|细胞结构、物质运输、酶特性、发酵工程|结合“海稻86”耐盐碱机制考查主动运输（第5-6题），通过伞藻嫁接实验辨析细胞核功能（第2题）| |解答题|5题/52分|酶活性调节、呼吸作用、基因工程、单克隆抗体|设计酶抑制剂作用机理实验（第17题），结合酵母菌呼吸装置分析代谢类型（第18题），通过限制酶选择考查基因表达载体构建（第21题）|

2026年春期高二年级第二次月考 生物试题 一、单选题（每小题3分，共48分） 1．细胞学说揭示了动植物界的统一性，细胞学说中的统一性主要是指（    ） A．所有动植物在化学元素和化合物组成上基本相同 B．所有动植物细胞都具有细胞器和细胞核结构 C．高等动植物的生命系统都包含组织、器官等结构层次 D．动植物体都由细胞发育而来，且细胞是结构与功能的基本单位 2．下列关于细胞膜和细胞核的结构与功能探索的说法，正确的是（    ） A．罗伯特森提出所有细胞膜都由蛋白质-脂质-蛋白质三层结构构成的假说 B．通过伞藻嫁接实验证明了伞藻的形态结构特点取决于假根中的细胞核 C．利用同位素标记人和小鼠细胞表面的蛋白质分子，证明细胞膜具有流动性 D．用丙酮从蛙的成熟红细胞中提取脂质，在空气-水界面铺展成单分子层，测得单分子的面积为红细胞表面积的2倍 3．核仁是一个处于动态变化的核内结构，其组成成分很不稳定，一般来说，核仁的主要成分包括rDNA、rRNA、蛋白质和一些酶类等，但会随细胞类型和生理状态的不同而存在明显的差异。下列叙述正确的是（    ） A．只有真核细胞的核糖体的形成才与核仁有关 B．细胞的遗传信息主要储存在核仁的rDNA 中 C．核仁中的蛋白质、酶类都是在核仁中合成的 D．口腔上皮细胞的核仁比唾液腺细胞的核仁大 4．某同学将初始长度和质量相同的萝卜条甲、乙放置在不同浓度的蔗糖溶液中，一段时间后，萝卜条的最终长度如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．甲的初始细胞液浓度小于乙 B．若蔗糖溶液浓度为a，则甲的吸水量多于乙 C．若蔗糖溶液浓度为d，则渗透平衡时甲的重量小于乙 D．根据图示可知，植物的细胞壁也具有一定的伸缩性 阅读下列材料，回答下列问题： 1986年，湛江海边发现了第一株耐盐碱的野生海水稻——“海稻86”，但存在产量低、米质差等缺点。2016年，袁隆平院士团队利用杂交育种等技术，培育出高产海水稻。高产海水稻与传统耐盐碱水稻相比，具备更为优良的耐盐碱性，如图表示海水稻根细胞的相关生理过程。阅读材料完成下列小题： 5．下列关于海水稻叙述错误的是（　　） A．高产海水稻培育过程主要依据是基因重组的原理 B．缺氧时，海水稻根细胞累积的乳酸会导致减产 C．海水稻植株的生长发育以细胞增殖、分化为基础 D．海水稻根部成熟区细胞的细胞液浓度比传统耐盐碱稻高 6．下列关于海水稻耐盐碱机制的叙述，错误的是（　　） A．Na+进入液泡需要载体蛋白的协助及消耗能量 B．SOS1和NHX对Na+进行转运，该过程不受氧气浓度的影响 C．H2O可以通过自由扩散和易化扩散（协助扩散）两种方式进入海水稻细胞 D．细胞通过主动转运将细胞质基质中的H+运输到细胞外，以中和盐碱地过多的碱 7．为探究酶的特性，某同学设计了如下表所示的实验方案。下列叙述正确的是（　　） 步骤 甲组 乙组 丙组 ① 加入3mL淀粉溶液 加入3mL淀粉溶液 加入3mL蔗糖溶液 ② 加入1mL新鲜唾液 A B ③ 37℃恒温水浴，然后各加入1mL斐林试剂，再60℃水浴加热 A．若A中加入1mL蒸馏水，则甲乙两组可探究酶的高效性 B．若B中加入1mL蔗糖酶，则甲丙两组说明淀粉酶具有专一性 C．若A中加入1mL煮沸的唾液，则甲乙两组可探究酶的作用需要适宜的pH D．若A中加入1mL蔗糖酶，且③步骤改用碘液，则甲乙组可探究酶的专一性 8．细胞中的许多代谢活动与 ATP 密切相关。下列叙述正确的是（    ） A．ATP 水解可产生构成RNA 的基本单位,ATP 中的“A”代表碱基A B．某些载体蛋白具有 ATP 酶活性，ATP水解产生的磷酸基团可与其结合 C．ATP 的合成通常伴随着细胞中的吸能反应，ATP 的水解则伴随着细胞中的放能反应 D．ATP 在细胞中的含量和转化速率均与细胞代谢速率呈正相关 9．先向A、B瓶中加入等量不含碳源的培养液，再将等量的丧失繁殖能力的酵母菌分别加入A、B瓶中，其他处理如表。横管中部放入有色液滴（横管部分足够长），当液滴不再移动时停止实验。下列说法正确的是（　　） A（mmol） B（mmol） 氧气 60 0 氮气 0 60 葡萄糖 10 10 注：无氧呼吸分解葡萄糖的速度更快 A．液滴先向左移动再向右移动 B．可在B中添加重铬酸钾实时检测酒精 C．A侧呼吸作用产生的[H]中能量全部转化为ATP中的能量和热能 D．将实验中的酵母菌替换为乳酸菌可得到相似的实验结果 10．“舌尖上的中国”节目中提到，中国人的老祖宗用一些坛坛罐罐，加上敏锐的直觉，与微生物携手让食物转化出了新风味并对营养进行了升华。下列与发酵相关的叙述，正确的是（    ） A．米酒具有甜味是因为微生物可将大米中的淀粉氧化分解成单糖等 B．发酵用的坛坛罐罐都应有盖且密封性强，可避免O2进入坛内影响发酵过程 C．泡菜制作过程中，乳酸菌细胞呼吸产生乳酸，不产生CO2，故泡菜坛应尽量装满 D．制作腐乳时，原料豆腐的发酵不是纯种发酵，主要菌种属于真核生物 11．关于微生物培养技术，下列叙述正确的是（　　） A．土壤中有众多微生物，可用无氮培养基筛选出硝化细菌 B．微生物纯培养操作过程中应先灭菌再调pH，然后再接种 C．培养基分装到培养皿后可能被污染，需再次进行灭菌处理 D．用细菌计数板可以对细菌等较小细胞进行观察和计数 12．植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。如图表示植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（　　） A．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同 B．A途径中发生的可遗传变异主要有基因突变和基因重组，该方法属于无性生殖 C．B途径是单倍体育种，与杂交育种相比该育种方法可以明显缩短育种年限 D．E途径体现了植物细胞全能性，且次生代谢物是植物生长所必需的 13．近年来，我国科学家利用基因编辑技术改变了小鼠卵母细胞中基因的甲基化水平，获得了许多新性状的小鼠，下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（    ） A．基因编辑技术改变了卵细胞中基因的甲基化水平，会改变基因的碱基序列 B．胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精完成的标志 C．①过程中细胞增殖方式为有丝分裂，培养液中需通入5%的CO2刺激细胞呼吸 D．进行②过程时通常选择发育到桑葚胚或囊胚阶段的早期胚胎 14．番茄在较低温运输或储存时会被冻坏。科学家利用基因工程技术将抗冻基因AFPs插入表达载体（Ti质粒）后，通过农杆菌转化法导入番茄幼苗。下列叙述错误的是（　　） A．用PCR扩增基因AFPs时添加的两种引物的碱基间不能互补配对 B．构建重组Ti质粒时，需要将基因AFPs插入Ti质粒的T-DNA区域 C．当农杆菌感染番茄细胞时，T-DNA会转移并整合到其染色体DNA上 D．可通过抗原—抗体杂交技术检测农杆菌细胞中是否表达出抗冻蛋白 15．下面有关DNA相关实验的描述正确的有（　　） ①新鲜的洋葱、香蕉、菠菜、鸡血、猪肝都是提取DNA的理想实验材料 ②DNA粗提取实验中洋葱研磨液可直接放入塑料离心管进行离心以便加速DNA沉淀 ③在DNA粗提取实验中，向白色丝状物中直接加入二苯胺试剂进行DNA的鉴定 ④PCR实验中，微量离心管、枪头和移液器等在使用前均须消毒处理 ⑤DNA电泳鉴定实验中，具有相同碱基数量的环状DNA和链状DNA迁移速率不同 ⑥DNA电泳鉴定实验中，凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 ⑦DNA电泳鉴定实验中，DNA的迁移速率与其分子量（大小）成正比 A．1项 B．2项 C．3项 D．4项 16．一种天然蛋白t-PA能有效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药，而注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其副作用。据此，先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造获得t-PA改良基因，再通过基因工程的方法最终获得性能优异的改良t-PA蛋白。下列说法正确的是（    ） A．上述对t-PA基因进行改造的过程利用了基因突变的原理 B．构建重组质粒时需要选用限制酶Xma Ⅰ和Nhe Ⅰ切割质粒 C．使用T4DNA连接酶不能将t-PA改良基因与质粒pCLY11连接 D．含重组质粒的受体细胞在含新霉素的培养基上能存活且呈蓝色 二、解答题（共52分） 17．脂肪酶广泛应用于洗涤剂、食品、医药等众多工业领域。科研人员进行了相关实验研究酶的作用机理及影响酶活性的因素（图1中a~f表示不同物质）。据图回答下列问题： (1)图1模型中表示脂肪的是________（填小写字母），该模型体现了酶的特性是________。 (2)图2表示在酶和无机催化剂作用下，脂肪水解的能量变化，其中表示酶的反应曲线是________，AB段的含义是_______。 (3)酶的抑制剂能降低酶活性，不同抑制剂的作用机理如图3所示。柚皮素能抑制脂肪酶活性，为探究其作用机制，将脂肪酶均分为两组，每组分为若干份，实验组加入一定量_______，对照组加入________。相同且适宜条件下将两组酶溶液均与等量不同浓度的脂肪混合，检测脂肪分解速率。若柚皮素抑制酶活性的作用机理如图3中模型A，在图4中画出对应曲线_______。 (4)高温降低酶活性的机理与________（填“模型A”或“模型B”）类似，判断依据是_______。 18．为研究酵母菌的呼吸方式，某生物小组制作了如图甲乙中a~f所示装置，图丙是真核细胞内呼吸作用过程的图解，图丁表示酵母菌在不同氧气浓度下的氧气吸收量和无氧呼吸过程中二氧化碳的释放量，（呼吸底物是葡萄糖），请据图回答问题： (1)酵母菌进行有氧呼吸的过程可用图丙中的__________表示（用标号表示）；如果将d装置内的酵母菌换成乳酸菌，并与b连接，能不能观察到b中出现浑浊的现象？________，其原因是_________。 (2)图乙中，如果e的液滴左移，f的液滴右移，则可证明酵母菌的呼吸方式是__________。 (3)图丙是酵母菌的呼吸过程，产生物质E的过程的酶存在于细胞的________，物质F可用酸性的___________试剂检测，颜色变化为______。其中释放能量最多的过程是________（填序号） (4)图丁中乙曲线所代表的呼吸过程的化学反应式是__________。 19．据史书记载，杜康是春秋时用粮食酿酒的鼻祖，杜康酒是中国历史名酒，有“贡酒”“仙酒”之誉。某同学为了解酿酒酵母菌的特性，进行了一些研究。请回答下列问题： (1)粮食酿酒是酵母菌在_____条件下，利用葡萄糖产生酒精的过程。 (2)为确定发酵初期发酵液中酵母菌的数量，可采用显微镜计数法，此时应该使用_____（填写“血细胞计数板”或“细菌计数板”）进行计数。也可以使用稀释涂布平板法进行计数，用该方法统计的数据往往会比实际值_____（填偏小或偏大），原因是_____。 (3)酿酒过程中，容器密封不严，温度略高会导致酒变酸，在变酸的酒表面观察到的菌膜形成的原因是_____；这种菌在氧气充足，缺少糖源时，可直接将_____。 (4)发酵工程的产品包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，发酵过程中__________是发酵工程的中心环节。发酵工程中的啤酒生产包括_____和_____两个阶段。 (5)为研究甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒的效果，研究人员进行了有关实验，结果如图所示，甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒效果最差的是_____。6～7d，丁组酒精度不再上升的原因有_____（答出一点）。 20．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 (1)单克隆抗体涉及细胞工程中的_____、_____技术。 (2)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 (3)步骤①常用方法包括______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_____发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 (4)从该小鼠_____得到B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，得到多种细胞，再用特定的选择培养基可筛选得到杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。鼠淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，鼠骨髓瘤细胞中只有D途径。根据上述原理，设计实验从培养基中筛选出杂交瘤细胞。请简要写出实验设计思路：_____。步骤③需要对经过选择培养得到的杂交瘤细胞进行_____和_____，经多次筛选获得符合要求的杂交瘤细胞。 (5)研究发现，抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。据图1和下图2分析，ADC依靠_____填“a”或“b”）最终作用于乳腺癌细胞的_____，导致细胞凋亡。 21．某真菌的W基因可编码一种高效降解纤维素的酶，已知图中W基因转录方向为从左往右，为使细菌产生该酶，以图中质粒为载体，进行转基因。 限制酶 BamH I EcoR I Mfe I Kpn I Hind Ⅲ 识别序列和切割位点 G↓GATCC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT (1)从真菌中获取相应基因后通过PCR技术扩增W基因序列，扩增结果用_____检测，检测结果显示有多个条带，试从引物设计的角度分析原因__________。一个DNA经过5轮循环后，得到的子代DNA分子中，同时含有2种引物的DNA分子所占的比例为_______，引物的作用是_______。 (2)基因工程的核心步骤是___________，这一步骤应使用限制酶________切割图中质粒，使用限制酶__________切割图中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。 (3)W基因转录时应以________链为模板，形成的mRNA的序列为5′-UGAACGCUA……（中间序列）…GUCGACUCG-3′。则用于PCR扩增的引物中应有的序列为_________。 A．5′-TGAACGCTA… B．5′-CGAGTCGAC… C．5′-ACTTGCGAT… D．5′-GCTCAGCTG… 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 生物参考答案 1．D 【详解】A、动植物在化学元素和化合物组成上的统一性属于生物界物质统一性的范畴，但并非细胞学说提出的内容，A错误； B、并非所有动植物细胞都具备细胞核（如哺乳动物成熟红细胞无细胞核），且该表述不属于细胞学说的内容，B错误； C、生命系统的结构层次相关内容不属于细胞学说的研究范畴，不是细胞学说提出的统一性的内涵，C错误； D、细胞学说的核心内容之一为：一切动植物都由细胞发育而来，细胞是动植物结构和功能的基本单位，这正是细胞学说揭示的动植物界统一性的核心体现，D正确。 2．A 【分析】膜主要由蛋白质分子和磷脂分子构成，磷脂双分子层是膜的基本支架是，蛋白质分子以不同的方式镶嵌在磷脂双分子层中：有的镶在磷脂双分子层表 面，有的部分或全部嵌入磷脂双分子层中，有的贯穿于整个磷脂双分子层。糖被通常位于细胞膜的外侧，通常与蛋白质结合结合形成糖蛋白，或与脂质结合形成糖脂，与细胞间的信息传递、细胞表面的识别等功能有关。糖被通常位于细胞膜的外侧，通常与蛋白质结合结合形成糖蛋白，或与脂质结合形成糖脂，与细胞间的信息传递、细胞表面的识别等功能有关。 【详解】A、罗伯特森在电镜下观察到细胞膜清晰的暗-亮-暗三层结构，提出所有细胞膜都由蛋白质-脂质-蛋白质三层结构构成的假说，A正确； B、通过伞藻嫁接实验证明了伞藻的形态结构特点取决于假根，还需要通过核移植实验才能充分证明伞藻的形态结构特点取决于假根中的细胞核，B错误； C、利用发绿色荧光蛋白的染料标记人和小鼠细胞表面的蛋白质分子，证明细胞膜具有流动性，C错误； D、蛙的红细胞有细胞膜、多种细胞器膜和核膜，故用丙酮从鸡的红细胞中提取脂质，在空气—水界面上铺展成单分子层的面积大于红细胞表面积的2倍，D错误。 故选A。 3．A 【分析】细胞核包括核膜（将细胞核内物质与细胞质分开）、染色质（主要由DNA和蛋白质组成）、核仁（与某种RNA（rRNA）的合成以及核糖体的形成有关）、核孔（核膜上的核孔的功能是实现核质之间频繁的物质交换和信息交流）。核糖体是合成蛋白质的场所。 【详解】A、只有真核细胞才有细胞核，才具有核仁，其核糖体的形成才与核仁有关，A正确； B、细胞的遗传信息主要储存在染色体的DNA 中，B错误； C、核仁中的蛋白质、蛋白质性质的酶类是在细胞质中的核糖体上合成，C错误； D、口腔上皮细胞分泌功能比唾液腺细胞弱，所以其核仁比唾液腺细胞的核仁小，D错误。 故选A。 4．B 【分析】成熟的植物细胞具有中央大液泡，细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质称为原生质层，当细胞液浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩，由于原生质层比细胞壁的收缩性大，原生质层与细胞壁逐渐分离，称为质壁分离。 【详解】A、根据图示可知，当萝卜条处于初始长度时，细胞液浓度和外界溶液浓度相等，乙对应浓度为c，甲对应浓度为b，因此甲的初始纸胞液浓度小于乙的，A正确； B、当蔗糖溶液浓度为a时，细胞吸水，由于甲的细胞液浓度小于乙，因此甲的吸水量少于乙，B错误； C、蒸糖溶液浓度为d时，细胞失水，甲的失水量多于乙，渗透平衡时甲萝卜条的重量小于乙，C正确； D、萝卜条的长度会发生变化，说明细胞壁也具有一定的伸缩性，D正确。 故选B。 5．B 6．B 【详解】5．A、高产海水稻利用杂交育种等技术培育出来的，依据了基因重组的原理，A正确； B、水稻根细胞在缺氧时进行无氧呼吸，产生酒精和二氧化碳，而不是乳酸，B错误； C、多细胞生物的生长发育以细胞增殖、分化为基础，海水稻植株是多细胞生物，C正确； D、海水稻具备更为优良的耐盐碱性，根部成熟区细胞的细胞液浓度比传统盐碱稻高，这样才能更好地从盐碱地中吸收水分，D正确。 故选B。 6．A、从图中可以看出，Na+进入液泡是逆浓度梯度进行的，属于主动运输，需要载体蛋白的协助及消耗能量，A正确； B、由图可知，SOS1和NHX对Na+进行转运是逆浓度梯度进行的，该过程是主动运输，两者的直接动力是H+浓度差，但H+的运输需要消耗ATP，ATP的能量主要由有氧呼吸提供，所以受氧气浓度的影响，B错误； C、H2O进入细胞的方式有自由扩散（扩散）和协助扩散（易化扩散），C正确； D、从图中可知，细胞通过主动转运将细胞质基质中的H+运输到细胞外，以中和盐碱地过多的碱，D正确。 故选B。 7．D 【详解】A、若A中加入1mL蒸馏水，则甲组（淀粉溶液+新鲜唾液）与乙组（淀粉溶液+蒸馏水）对比，蒸馏水无催化作用，仅能证明酶有催化作用，但未设置无机催化剂对照，无法探究酶的高效性，A错误； B、甲组（淀粉+淀粉酶）与丙组（蔗糖+蔗糖酶）的变量包括底物和酶种类，无法单一验证淀粉酶的专一性，B错误； C、若A中加入1mL煮沸的唾液，煮沸使酶变性失活，甲组（活性酶）与乙组（失活酶）对比可探究温度对酶活性的影响，但未改变pH，无法探究酶作用需要适宜的pH，C错误； D、若A中加入1mL蔗糖酶，且③步骤改用碘液，则甲组（淀粉溶液+淀粉酶）淀粉被水解，碘液不变蓝；乙组（淀粉溶液+蔗糖酶）淀粉未被水解，碘液变蓝。说明淀粉酶专一催化淀粉，蔗糖酶不催化淀粉，可探究酶的专一性，D正确。 故选D。 8．B 【分析】ATP是腺苷三磷酸的英文名称缩写。ATP分子的结构可以简写成A-P～P～P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基团。由于两个相邻的磷酸基团都带有负电荷而相互排斥等原因，使得这种化学键不稳定，末端磷酸基团有一种离开ATP而与其他分子结合的趋势，也就是具有较高的转移势能。ATP和ADP之间可以相互转化，是时刻不停地发生并且处于动态平衡中。 【详解】A、ATP水解可产生构成RNA的基本单位（腺嘌呤核糖核苷酸），ATP中的“A”代表腺苷（碱基A+核糖），A错误； B、某些载体蛋白具有ATP酶活性，ATP水解产生的磷酸基团可与其结合，B正确； C、ATP的合成通常伴随着细胞中的放能反应，ATP的水解则伴随着细胞中的吸能反应，C错误； D、ATP在细胞中的含量比较稳定，其转化速率与细胞代谢速率呈正相关，D错误。 故选B。 9．A 【详解】A、实验开始时A瓶中氧气充足酵母菌进行有氧呼吸，消耗氧气的同时产生等量的二氧化碳，此时瓶内气压不变，B瓶中没有氧气存在，酵母菌进行无氧呼吸，不消耗氧气但产生二氧化碳，此时瓶内气压升高，因此液滴向左移动；无氧呼吸分解葡萄糖的速度更快，B瓶中的葡萄糖先被耗尽，呼吸作用停止，瓶内气压不再发生变化，而A瓶中葡萄糖并没有耗尽，氧气不充足时，酵母菌也会进行无氧呼吸，此时瓶内气压升高，液滴向右移动。故实验过程中液滴先向左移动再向右移动，A正确； B、实验中B瓶是密闭体系，无法在B中“实时”检测，否则会破坏实验装置的气密性，且重铬酸钾检测酒精需要酸性条件（如加入浓硫酸），加酸会杀死酵母菌，影响实验结果，而在B中添加酸性重铬酸钾时，葡萄糖也能与酸性重铬酸钾反应发生颜色变化，一般实验中需要耗尽溶液中的葡萄糖后才能检测酒精，B错误； C、实验过程中，A侧进行无氧呼吸时，产生的[H]中能量一部分存在于酒精中，C错误； D、乳酸菌是厌氧菌，只能在无氧条件下进行无氧呼吸，且不产生二氧化碳（乳酸菌无氧呼吸产生乳酸），因此液滴不会移动，与酵母菌的实验结果不同，D错误。 10．D 【详解】A、米酒的甜味来自淀粉在微生物产生的淀粉酶作用下的水解产物（单糖等），氧化分解是细胞呼吸分解有机物释放能量的过程，不会积累甜味单糖，A错误； B、部分发酵过程为需氧发酵（如果醋发酵、腐乳前期发酵），需要氧气参与，B错误； C、泡菜制作时虽乳酸菌无氧呼吸仅产乳酸无CO2生成，但泡菜坛不能装满，需预留少量空间避免发酵液溢出，C错误； D、腐乳发酵由毛霉、酵母菌等多种微生物共同参与，不属于纯种发酵，其中主要发酵菌种为毛霉，毛霉属于真菌，是真核生物，D正确。 11．D 【详解】A、无氮培养基用于筛选可自主固氮的微生物，硝化细菌无固氮能力，无法在无氮培养基上生存，不能用该培养基筛选硝化细菌，A错误； B、微生物培养基配制的正确流程为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→接种，若先灭菌再调pH会引入杂菌，B错误； C、培养基需先经高压蒸汽灭菌后再分装到灭菌后的培养皿中，分装后再次灭菌会破坏培养基中的营养成分，C错误； D、细菌计数板是显微直接计数的常用工具，可对细菌等体积较小的细胞进行观察和计数，D正确。 12．C 【详解】A、通过植物组织培养（如A途径）得到的植株体细胞染色体数与原植株相同；通过单倍体育种（B途径），先得到单倍体，其染色体数是原植株的一半，再经染色体加倍后与原植株相同；植物体细胞杂交（F途径）得到的植株体细胞中的染色体数是两融合细胞染色体数之和，与原植株不同，所以上述应用得到的植株体细胞中的染色体数并不都相同，A错误； B、A途径是植物组织培养进行快速繁殖，该过程主要是有丝分裂，有丝分裂过程中可能发生基因突变，但不会发生基因重组（基因重组一般发生在减数分裂过程中），所以A途径中发生的可遗传变异主要是基因突变，B错误； C、B途径是通过花药离体培养获得单倍体幼苗，再经染色体加倍得到纯合子，属于单倍体育种，该育种方法与杂交育种相比可以明显缩短育种年限，C正确； D、E途径是通过植物组织培养获得愈伤组织，再提取次生代谢产物，没有发育成完整植株，因此没有体现细胞全能性；次生代谢物（如生物碱、萜类等）不是植物生长发育必需的物质，主要用于防御、通讯等功能，而初生代谢产物才是生物生长和生存所必需的，E 途径得到的是次生代谢产物，D错误。 13．D 【详解】A、基因的甲基化是在 DNA 碱基上添加甲基基团，不会改变基因的碱基序列，只是影响基因的表达，A错误； B、胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志，B错误； C、①过程是早期胚胎培养，细胞增殖方式为有丝分裂，培养液中通入 5% 的 CO2是为了维持培养液的 pH，不是刺激细胞呼吸，C错误； D、②过程是胚胎移植，通常选择发育到桑葚胚或囊胚阶段的早期胚胎进行移植，这个阶段的胚胎细胞分化程度低，移植成功率高，D正确。 14．D 【详解】A、PCR扩增目的基因时，若两种引物的碱基互补配对，会导致引物之间结合形成引物二聚体，无法与模板DNA结合完成扩增，因此两种引物碱基间不能互补配对，A正确； B、Ti质粒的T-DNA（可转移DNA）具备转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特性，因此构建重组Ti质粒时，必须将目的基因AFPs插入T-DNA区域，B正确； C、农杆菌感染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA会转移到受体植物细胞内，并且整合到受体细胞的染色体DNA上，这是农杆菌转化法的核心原理，C正确； D、本实验的目的是让抗冻基因在番茄细胞内表达，应通过抗原—抗体杂交技术检测番茄细胞中是否表达出抗冻蛋白，检测农杆菌细胞内是否表达抗冻蛋白无意义，D错误。 15．B 【详解】① 新鲜洋葱、香蕉、幼嫩菠菜的组织细胞DNA含量较高，鸡血（鸟类红细胞有细胞核，DNA丰富）、猪肝（肝细胞含大量细胞核）也属于DNA含量高的材料，均适合作为提取DNA的实验材料，①正确； ② 洋葱研磨后可以直接将研磨液倒入塑料离心管中，在 1500r/min的转速下离心5min，再取上清液 放人烧杯中，②错误； ③ 二苯胺鉴定DNA需要将白色丝状物先溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后还需沸水浴加热才能出现显色反应，不能直接加试剂鉴定，③错误； ④ PCR实验中微量离心管、枪头需要高压蒸汽灭菌，移液器不需要消毒处理，仅需使用无菌枪头即可，④错误； ⑤ 碱基数量相同的DNA，迁移速率受构型影响：环状DNA迁移速率>链状DNA>开环环状DNA，因此二者迁移速率不同，⑤正确； ⑥ DNA电泳鉴定实验中，配制琼脂糖时加入的核酸染料能嵌入DNA的碱基对中，在紫外灯照射下可发出荧光，便于观察电泳的DNA条带，⑥错误； ⑦ DNA电泳时，DNA分子量越大，在凝胶中受到的阻力越大，迁移速率越慢，二者成反比，⑦错误。 综上正确的叙述有①⑤共2项，故选B。 16．A 【详解】A、蛋白质工程中，我们通过人工定点突变（比如 PCR 定点诱变）对天然基因的碱基序列进行改造，这本质上是定向的基因突变，因此该过程利用了基因突变的原理，A正确； B、根据碱基互补配对原则，t-PA基因的左端黏性末端为CCGG-，为XmaⅠ酶切得到，t-PA基因的右端黏性末端为GATC-，为BglⅡ酶切得到，质粒需要用相同的酶进行酶切以得到与目的基因相同的黏性末端，因此质粒需选用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割质粒pCLY11，B错误； C、T4DNA连接酶能连接黏性末端，还可以连接平末端，使用T4DNA连接酶能将t-PA改良基因与质粒pCLY11连接，C错误； D、t-PA能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，成功转入重组质粒的受体细胞在培养基上会出现具有抗性的白色菌落，D错误。 17．(1) d 酶具有专一性 (2) ① 与无机催化剂相比，酶所降低的化学反应的活化能 (3) 柚皮素 等量蒸馏水 (4) 模型B 高温改变酶的空间结构使酶活性降低；模型B中抑制剂与酶结合，使酶的空间结构发生改变，二者作用机理类似 【分析】1、酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物，其中大部分是蛋白质、少量是RNA。 2、酶的特性。①高效性：酶的催化效率大约是无机催化剂的107～1013倍；②专一性：每一种酶只能催化一种或者一类化学反应；③酶的作用条件较温和：在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高；温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低。 【详解】（1）由图1可知，反应前后没有改变的是a，d在a的作用下，生成e、f，则a为脂肪酶，d脂肪，脂肪水解为甘油和脂肪酸，e和f是甘油和脂肪酸，a与d特异性结合并催化d分解，体现了酶的专一性。 （2）图2显示了在酶和无机催化剂作用下的脂肪水解反应的能量变化，①②对照酶降低活化能的作用更显著，催化效率更高，故①为酶的反应曲线；AB段的含义是与无机催化剂相比，酶能够更多的降低化学反应活化能。 （3）由图3可知，模型A中抑制剂与底物竞争酶的活性部位，模型A对酶促反应速率的影响可随底物浓度的增大而减小，说明模型A中的抑制剂为竞争性抑制剂；而模型B通过与酶结合，改变酶的结构，为非竞争性抑制剂。若要探究柚皮素的作用机理，可通过观察增加底物的量后酶促反应速率是否改变来做出判断。若柚皮素的作用机理如图3中的模型A，则随脂肪浓度的升高，柚皮素的作用逐渐减小甚至消失，化学反应速率会增加，最终和没有抑制剂的相等，如图 （4）高温在降低酶活性方面的机理与非竞争性抑制剂类似，即模型B，因为二者都是通过破坏酶的空间结构影响酶活性，且不可逆。 18．(1) ①②③ 不能 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，不产生CO2 (2)有氧呼吸和无氧呼吸 (3) 细胞质基质和线粒体（基质） 重铬酸钾 橙色变成灰绿色 ③ (4)C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量 【分析】图甲中，连接c→a→b，给装置通空气，b中石灰水变浑浊，说明酵母菌在有氧条件下进行细胞呼吸；连接d→b，装置密闭，b中石灰水变浑浊，说明酵母菌在无氧条件下进行细胞呼吸。图乙中，e装置中NaOH溶液的作用是吸收二氧化碳，因此烧瓶中气体量的变化为氧气量的变化；f中蒸馏水不能吸收气体，其中的气体变化可以表示无氧呼吸释放的二氧化碳量。图丙中：①表示细胞呼吸的第一阶段；②表示有氧呼吸的第二阶段；③表示有氧呼吸的第三阶段；④⑤表示无氧呼吸的第二阶段；A为丙酮酸，B为乳酸，C为NADH，D为氧气，E为CO2，F为酒精。丁图中曲线乙表示有氧呼吸，曲线甲表示无氧呼吸。 【详解】（1）有氧呼吸第一阶段（①）：葡萄糖分解成丙酮酸、NADH和少量ATP，有氧呼吸第二阶段（②）：丙酮酸和水反应生成二氧化碳、NADH和少量ATP，有氧呼吸第三阶段（③）：NADH和氧气反应生成水和大量ATP。丙图中有氧呼吸的过程能用①②③表示。乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，不产生CO2，如果将d装置内的酵母菌换成乳酸菌，并与b连接，b中不会出现浑浊的现象。 （2）图乙中，如果e的液滴左移，说明酵母菌进行有氧呼吸消耗氧气，f的液滴右移，说明酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，因此可证明酵母菌的呼吸方式是有氧呼吸和无氧呼吸。 （3）图丙是酵母菌的呼吸过程，物质E表示二氧化碳，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳发生在细胞质基质中，有氧呼吸产生二氧化碳发生在线粒体基质中，因此产生物质E的过程的酶存在于细胞的细胞质基质和线粒体（基质），物质F为酒精，酒精可用酸性的重铬酸钾试剂检测，由橙色变成灰绿色。其中释放能量最多的是③，即有氧呼吸的第三阶段。 （4）丁图中曲线乙表示有氧呼吸，C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量。 19．(1)无氧 (2) 血细胞计数板 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (3) 醋酸菌在液面大量繁殖 乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸 (4) 发酵罐中发酵 主发酵 后发酵 (5) 丙 酒精度较高，对细胞有毒害作用或杜康酒中的葡萄糖已经耗尽，无法提供能源物质 【详解】（1）粮食酿酒是酵母菌在无氧条件下，经过无氧呼吸利用葡萄糖产生酒精的过程，该过程中还会有二氧化碳的产生。 （2）为确定发酵初期发酵液中酵母菌的数量，可采用显微镜计数法，此时应该使用“血细胞计数板”进行计数，这里不选用细菌计数板的原因是酵母菌细胞较大，不适合用细菌计数板。此外也可以使用稀释涂布平板法进行计数，用该方法统计的数据往往会比实际值偏小，主要是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因而统计的活菌数目偏小。 （3）酿酒过程中，容器密封不严，温度略高会导致酒变酸，此时的环境条件适宜醋酸菌的生长，可见，在变酸的酒表面观察到的菌膜形成的原因是醋酸菌在液面大量繁殖；这种菌在氧气充足，缺少糖源时，可直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸。 （4）发酵工程的产品包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，在发酵过程中需要严格控制发酵条件，如溶解氧、pH和发酵液的含量等。发酵工程中的啤酒生产包括主发酵和后发酵，其中前者主要是酵母菌经过无氧呼吸产生酒精的过程。 （5）为研究甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒的效果，研究人员进行了有关实验，结果如图所示，甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒效果最差的是丙，因为在相同的条件下，其菌液中酒精的含量最低。6～7d，丁组酒精度不再上升的原因是培养液中酒精度较高，对细胞有毒害作用，也可能是杜康酒中的葡萄糖已经耗尽，无法提供能源物质。 20．(1) 动物细胞培养技术 动物细胞融合 (2)人的乳腺癌细胞 (3) PEG/聚乙二醇 细胞膜上的糖蛋白 (4) 脾脏 在正常的动物细胞培养液中加入适量氨基蝶呤，培养融合细胞一段时间，其它条件相同且适宜。最后存活下来的且能增殖的细胞就是杂交瘤细胞 克隆化培养 抗体检测 (5) b 细胞核 【详解】（1）单克隆抗体制备首先要将能产生特定抗体的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，这一过程运用了 动物细胞融合技术。融合后的杂交瘤细胞需要在体外进行培养，以获得大量的单克隆抗体，这涉及到 动物细胞培养技术。 （2）要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择人的乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。 （3）分析图1可知，①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG处理，诱导细胞融合；病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （4）脾脏是免疫器官，是免疫细胞聚集的场所，因此需要从该小鼠脾脏得到B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，得到多种细胞，再用特定的选择培养基可筛选得到杂交瘤细胞。 已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。鼠淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，鼠骨髓瘤细胞中只有D途径。因此，为了通过培养基筛选出杂交瘤细胞，则需要设法抑制骨髓瘤细胞的D途径，进而使杂交瘤细胞利用B淋巴细胞的S途径进行DNA复制，进而实现无限增殖，因此在筛选杂交瘤细胞时，制备的选择培养基中需要添加氨基蝶呤，进而阻断D途径，具体实验思路为：在正常的动物细胞培养液中加入适量氨基蝶呤，培养融合细胞一段时间，其它条件相同且适宜。最后存活下来的且能增殖的细胞就是杂交瘤细胞（此时的杂交瘤细胞利用S途径进行DNA复制，进而实现无限增殖）。③过程为第二次筛选，需要对经过选择培养得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选获得符合要求的杂交瘤细胞。 （5）由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物b进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。 21．(1) 电泳 引物特异性不高，在模板上有非特异结合位点 15/16 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 (2) 基因表达载体的构建 Mfe I、Hind Ⅲ EcoR I、Hind Ⅲ (3) 乙 AB 【详解】（1）扩增完成后,可以通过电泳分析来检测PCR产物；检测结果显示有多个条带，从引物设计的角度分析可能的原因是引物特异性不高，在模板上有非特异性结合位点。一个DNA经过5轮循环后，共产生25=32个子代DNA分子。根据DNA半保留复制特点，其中同时含有2种引物的DNA分子有32 - 2 = 30个，所占比例为30/32 = 15/16。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。 （2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。根据题图信息“图中W基因转录方向是从左往右”、“质粒启动子到终止子方向为顺时针”，故重组质粒的启动子应在W基因左侧，终止子应在W基因右侧，W基因右侧只能用Hind Ⅲ切割，W基因左侧有BamH I、Kpn I、EcoR I三种酶切位点，结合质粒情况及切割位点识别序列，应使用限制酶Mfe I、Hind Ⅲ切割图中质粒，使用限制酶EcoR I（切割出的黏性末端与MfeI相同）、Hind Ⅲ切割图中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒，因为限制酶Mfe I和限制酶EcoR I切割露出相同的黏性末端。 （3）W基因转录方向是从左向右，mRNA链的合成方向为5'→3'，与乙链从左向右3'→5'互补，故W基因转录的模板链是乙链。引物与模板链的3'端结合，mRNA也与模板链结合，因此左引物与mRNA序列相似，不同的是引物是一段DNA，因此将mRNA中的U替换成T即是引物序列，即5'-TGAACGCTA-3'，与A相同，右引物为5'--CGAGTCGAC…，AB正确，CD错误。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $