陕西榆林市靖边中学2025-2026学年高二第二学期期中考试题 生物学

靖边中学2026届高二第二学期期中考试题·生物学 参考答案、提示及评分细则 1.B泡菜腌制时装至八成满，再注入配置好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，向坛盖边沿的水槽中注 满水，以保证乳酸菌发酵所需的无氧环境，A错误；泡菜水煮沸（高温杀菌）、加盐（盐抑制杂菌的生长）、加烧 酒（酒精杀死杂菌）的目的都有抑制微生物的生长，B正确；乳酸菌呼吸作用产物为乳酸，无CO2的产生，C错 误；泡菜制作过程中，随着发酵产生乳酸的量不断增加，亚硝化细菌的代谢逐渐被抑制，亚硝酸盐的产量减 少，同时亚硝酸盐的分解增加，亚硝酸盐的含量先增加后减少，泡菜应在恰当的时间食用，D错误。 2.D微生物在液体培养基中生长时，不能形成菌落，在固体培养基中生长时才能形成菌落，A错误；琼脂是配 置固体培养基常用的凝固剂，琼脂不能为微生物提供碳源，B错误；维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，因此 要在培养乳酸菌的培养基中需添加维生素，C错误；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，应先高压蒸汽灭菌，然 后倒平板或分装试管摆斜面，D正确。 3.D应在酸碱度近中性的潮湿土壤中取样，且去除表层土壤，绝大多数细菌分布在地表3~8cm的土壤层，A 错误；筛选分解尿素的细菌时，应以尿素为唯一氮源的选择培养基培养，培养基的成分除了氮源，还有碳源、 水、无机盐等，B错误；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH上升，加入酚红指示剂后变红，C错误；应对菌落 数目处于相对稳定状态时进行观察菌落形态和统计菌落数目，D正确。 4.C预处理过程中可添加淀粉酶，促进淀粉的水解，A正确；向发酵罐中通入无菌空气和搅拌，有助于增加发 酵液中的溶氧量，且使菌体与营养物质充分接触，可以加快生成谷氨酸的速率，B正确；味精属于微生物代谢 产物，需通过分离、提纯等方法获得，C错误；小麦预处理能将淀粉分解为葡萄糖，为发酵提供原料，温度、H 可影响相关酶活性，谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌，温度、H和渗透压等可影响谷氨酸的产量，D正确。 5.B脱毒苗用病毒极少的植物分生组织组织培养产生，获得的植株病毒极少，甚至无病毒，果实产量及品质会 显著优化，A正确；四倍体草莓的花粉中有两个染色体组，基因型可能为杂合子，如AAaa,经花药(AA、Aa、 aa)离体培养得到的植株不一定为纯合子，B错误；植物组织培养技术可实现快速高效的微型繁殖，C正确；愈 伤组织细胞分裂能力强，易受外界环境条件影响，可采用诱变处理红豆杉愈伤组织细胞，并通过筛选可得到 某些新性状的植株，如抗旱、抗盐碱、抗病等，D正确。 6.B动物细胞培养一般选用幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，分裂旺盛，A正确；进行分瓶 培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将细胞分散开，B错误；℃、d瓶中的培养液属于合成培养基，通常还 需要加入血清或血浆等天然成分，天然成分中含有复杂且动物细胞增殖所必需的营养因子，C正确；将动物 细胞置于95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养，二氧化碳可维持pH相对稳定，D正确。 7.C去核卵母细胞的细胞质可以使已分化的细胞核恢复分裂，有利于细胞核全能性表达，A正确；克隆蛙的核 遗传物质与供体蛙的核遗传物质相同，但克隆蛙的质基因由去核卵母细胞提供，故克隆蛙与核供体蛙的遗传 物质有所差异，B正确；核移植时，提供细胞核的动物可以是雌性和雄性，但提供去核卵细胞的只能是雌性，C 错误；胚胎细胞的全能性更高，若将肠上皮细胞换成胚胎细胞，则核移植难度明显降低，克隆蛙的成功率会大 大提高，D正确 8.C采集到的小鼠卵母细胞需要进行成熟培养至MⅡ期后才能进行体外受精，A正确；受精卵发育为桑葚胚 的过程需经过卵裂期，细胞数量不断增加，但胚胎总体积基本不变，B正确；在囊胚期取内细胞团细胞并提高 PSTAT3基因的表达，发现内细胞团细胞会发育为桑葚样细胞，说明PSTAT3基因在内细胞团细胞中的表 达量低于桑甚胚时期细胞，C错误；囊胚期滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列，将来发育成胎膜和胎盘，D 正确。 9.A利用胚胎分割技术，同卵双胎获得较同卵多胎成功率更高，A正确；胚胎分割时需将囊胚期的内细胞团 均等分割，B错误：来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因 型完全相同的胚胎，C错误；进行性别鉴定时，应取滋养层细胞做DNA分析，D错误。 10.A限制酶是将DNA分子特定部位的磷酸二酯键断开，产生DNA片段，A错误；T4DNA连接酶可以连接 DNA片段的平末端和黏性末端，B正确；限制性内切核酸酶与DNA连接酶的作用对象相同，均为磷酸二酯 键，C正确；质粒、动植物病毒和噬菌体是作为基因工程中常用的载体，D正确。 11.B酵母菌、菠菜、菜花和猪肝等均含有DNA,均可作为实验材料进行DNA的粗提取，A正确；该实验流程 为取材→破碎细胞→获得滤液(DNA溶解在滤液中)→去除杂质→提纯→DNA鉴定，B错误；低温时DNA 酶的活性较低，过滤液沉淀过程在4℃温度下进行是为了防止DNA降解，C正确；将粗提取的DNA溶于 2mol/LNC】溶液中，加入二苯按试剂后经过沸水浴加热变成蓝色，D正确。 【高二期中考试题·生物学参考答案第1页（共2页）】 25-T-722B 12.A利用显微注射法将构建的含目的基因的基因表达载体导人到受精卵中，A错误：构建重组质粒需要将目 的基因与只在乳腺中表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，B正确；培育转基因动物成为乳腺生物反 应器，除采用基因工程技术外，还需要动物细胞培养和早期胚胎培养、胚胎移植等，C正确；由于乳腺生物反应 器需要利用动物产生的乳汁进行药物生产，故药物的生产受到转基因动物性别和年龄的限制，D正确。 13.C结合图示可以看出，如果只想获得青霉素，则可以将与酶B相关的基因切除，如果只想获得头孢霉素， 可以将与酶A相关的基因切除，A正确；在酶A的作用下，前体物质可以产生青霉素，故在含有前体物质的 生物体内导入酶A基因可能获得青霉素，B正确；青霉素可以抑制细菌的生长，但毛霉是真菌，C错误；青霉 素能杀死培养基中部分微生物，故依然需要对培养的器皿、培养基进行专门的灭菌，D正确。 14.A蛋白质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，需要构建基因表达载体，A错误：蛋白 质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，改造后的性状能遗传给子代，B正确；酶的作用 机理是降低化学反应的活化能，从而加快化学反应速率，C正确；蛋白质工程获得的是自然界没有的蛋白 质，可以改造现有蛋白质或者制造新的蛋白质，D正确。 15.B基因污染主要由转基因技术引起的，转基因技术的原理是基因重组，A正确；污染基因会随着生物的繁 殖过程不断复制，B错误；“基因污染”指的是转基因生物的外来基因可能会通过花粉等扩散到同种生物或 其他物种的现象，C正确；杂草、害虫从它的近亲中获得的抗性基因，成为超级杂草或超级害虫，这样可能破 坏生态系统的稳定性，D正确。 16.C设计试管婴儿是通过体外将卵细胞与精细胞结合而获得许多胚胎，在移植入母体进行胚胎着床前，对胚 胎的基因进行处理，把一些不良基因筛选出来，并进行切除与替换，从而减少初生婴儿因遗传因素导致的缺 陷，A正确；设计试管婴儿属于有性生殖，“克隆动物”属于无性生殖，两者原理不同，B正确；设计试管婴儿 是在早期胚胎移入母体子宫之前，对胚胎进行遗传学诊断，选出无遗传疾病的胚胎植入母体子宫，若是伴性 遗传，该技术需要考虑性别，C错误；经济、文化和伦理道德观念的不同会影响人们对转基因技术的看法也 会影响人们对设计试管婴儿的看法，D正确。 17.(除注明外，每空1分，共11分) (1)稀释涂布平板法链格孢菌当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀 释液中的一个活菌(，通过统计培养基上的菌落数能推测出样品中大概的活菌数)（合理即可，2分） (2)①A2、B2平板与A1、B平板进行相同接种操作（或A2不接种X菌，但接种无菌水，B2与B,相同接种操 作)，但不进行培养皿对扣（合理即可，3分）②挥发 (3)AC组不出现抑菌圈，BD组出现抑菌圈抑菌物质对该植物是否具有危害；抑菌物质的使用剂量；作物 种类；施用时期等（答两点且合理即可，2分） 18.(除注明外，每空1分，共11分) (1)之前植物幼嫩部位细胞的全能性较成熟组织全能性高；植物幼嫩部位病毒极少甚至无毒；植物幼嫩部位 细胞分裂能力强，秋水仙素处理后的植株幼嫩部位进行有丝分裂才会使染色体数目加倍（答两点即可，2分） (2)脱分化不需要愈伤组织防止幼苗不能适应外界环境而死亡（合理即可，2分） (3)16.00%(2分)0.4% 19.(除注明外，每空1分，共10分) (1)给小鼠注射特定抗原，然后从脾脏中分离出淋巴细胞(2分) (2)PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等(2分)需要3 (3)在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生 长（合理即可，2分） (4)阳性小鼠腹腔 20.(除注明外，每空1分，共10分) (1)DNA的半保留复制在耐高温的DNA聚合酶(Tag酶)作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA 链（合理即可，2分） (2)激活DNA聚合酶(2分) (3)146 (4)目的性强、突变概率高（能够进行定问突变）（合理即可，2分） 21.(除注明外，每空1分，共10分) (1)逆转录聚合酶链式反应(PCR)变性→复性→延伸 (2)BclI和HindⅢDNA连接 (3)Ca+(CaCl2)四环素(2分)甲、丙(2分) 【高二期中考试题·生物学参考答案第2页（共2页）】 25-T-722B靖边中学2026届高二第二学期期中考试题 生物学 考生注意： 1.本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2.答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。 3,考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对 应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答 题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 4.本卷命题范围：人教版选择性必修3。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1.早在《诗经·邯风·谷风》中就有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载。“旨蓄”是指储藏的美味食 品，也就是腌制的酸菜、泡菜等。下列相关叙述正确的是 A.为了保证泡菜坛内的无氧环境，腌制过程中应将泡菜坛装满 B.将泡菜水煮沸、加盐、加烧酒都有抑制微生物生长的目的 C.发酵初期，从坛沿水槽内放出的CO2是乳酸菌细胞呼吸产生 D.整个发酵过程中亚硝酸盐含量不断增加，故泡菜越早食用越好 2.下列有关微生物培养基的叙述，正确的是 A.细菌在液体培养基中生长繁殖后可形成菌落 B.琼脂既是固定培养基的凝固剂还能提供碳源 C.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加纤维素 D.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基应先灭菌后倒平板 3.尿素是农业生产上重要的氮肥，土壤中的细菌可将尿素分解成NH3后再转化为无机盐离子 供植物利用。酚红指示剂遇到碱性物质会变红，可利用酚红指示剂对尿素分解菌进行鉴定。 下列相关叙述正确的是 A.应在偏碱性且潮湿的土壤表层进行取样，该环境下细菌数量较多 B.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红 D.应在菌落数目处于相对稳定状态时观察菌落形态和统计菌落数目 4.味精是以粮食等为原料经发酵制成的一种调味料，发酵中所用的谷氨酸棒状杆菌（需氧型）菌种 大都从自然界筛选获得，如图是以小麦为原料生产味精的工艺流程图。下列相关叙述错误的是 小麦预处理淀粉水解配料 发酵 罐内 →味精 菌种接种斜面培养接种摇瓶培养接种 发酵 【高二期中考试题·生物学第1页（共6页）】 25-T-722B A.预处理过程可添加酶制剂促进淀粉的水解 B.向发酵罐中通入无菌空气并搅拌，可加快生成谷氨酸的速率 C.发酵结束后可采用过滤的方法将菌体分离后直接获得味精 D.发酵过程中影响谷氨酸产量的因素有温度、H和渗透压等 5.植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。 下列相关叙述错误的是 A.利用组织培养获得的脱毒草莓通常比普通草莓产量高、品质好 B.四倍体草莓经花药离体培养得到的品种一定表现为纯合子 C.可将红豆杉叶片通过植物组织培养技术实现快速高效的微型繁殖 D.可采用辐射诱变处理红豆杉愈伤组织细胞以获得突变体植株 6.如图为动物细胞培养的基本过程。下列相关叙述错误的是 6 A.a选用幼龄动物的组织细胞，因为其分裂能力强 B.在c→d过程中，可直接将细胞进行分瓶培养 C.c、d培养液中需要加入血清以补充未知营养成分 D.培养箱中维持一定量的CO2有利于维持pH相对稳定 7.核移植是动物细胞工程技术的常用技术手段。科研人员利用蛙的肠上皮细胞通过核移植方 法获得了克隆蛙。下列相关叙述错误的是 A.去核卵母细胞的细胞质有利于细胞核表达其全能性 B.克隆蛙与肠上皮细胞供体蛙的遗传物质相似，但有所差异 C.核移植时，提供细胞核和去核卵母细胞的动物性别应相同 D.制备克隆蛙时，将肠上皮细胞换成胚胎细胞，核移植难度明显降低 8.某实验室通过对小鼠进行体外受精和早期胚胎培养，在囊胚期取内细胞团细胞并提高 STAT3基因（调控胚胎发育的关键基因）的表达，发现内细胞团细胞会发育为桑葚样细胞， 该桑葚样细胞具有自然胚胎桑葚胚期细胞特性。下列相关叙述错误的是 A.采集到的小鼠卵母细胞需要进行成熟培养后才能进行体外受精 B.由受精卵发育为桑葚胚的过程需经过卵裂期，细胞数量不断增加 C.推测STA3基因在内细胞团细胞中的表达量高于桑葚胚时期细胞 D.囊胚期滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列，将来发育成胎膜和胎盘 9.采用机械方法将早期胚胎分割后移植，可以获得同卵双胎或多胎。下列相关叙述正确的是 A.日前利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎成功率更高 B.胚胎分割时，应选取原肠胚并将其均等分割后在体外培养 【高二期中考试题·生物学第2页（共6页）】 25-T-722B C.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型不同的胚胎 D.分割后的胚胎进行移植前可取透明带进行性别鉴定 10.“工欲善其事，必先利其器”，基因工程的实施也需要借助“工具”才能完成。下列相关叙述错 误的是 A.限制酶可以将DNA水解为脱氧核糖核苷酸 B.T4DNA连接酶可以连接DNA片段的平末端 C.限制性内切核酸酶与DNA连接酶的作用对象相同 D.动植物病毒和噬菌体也可以作为基因工程中的载体 11.下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是 A.酵母菌、菠菜、菜花和猪肝等均可作为实验材料进行DNA的粗提取 B.实验流程为取材→破碎细胞→获得沉淀物→去除杂质→提纯→DNA鉴定 C.过滤液沉淀过程在4℃温度下进行是为了降低酶的活性，减少DNA降解 D.DNA溶于2mol/L的NaCI溶液，沸水浴时DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 12.可利用基因工程技术使哺乳动物成为乳腺生物反应器，以生产所需要的药品。下列关于利 用乳腺生物反应器生产药用蛋白的叙述，错误的是 A.利用显微注射法将相应的日的基因直接导入受体动物受精卵内 B.需将目的基因与能在乳腺细胞中特异性表达基因的启动子等调控元件重组在一起 C.需要借助基因工程、细胞工程、早期胚胎培养和胚胎移植等技术培育出转基因动物 D.药物的生产会受到转基因动物性别和年龄的限制 13.青霉素是青霉素生产菌产生的分泌到细胞外的一种物质，是应用最广泛的一种抗生素。抗 生素能杀死细菌，代谢途径中存在如图过程。下列相关叙述错误的是 酵A,青霉素 前体物质 酶B →头孢霉素 A.可以利用基因切除的方法获得只产青霉素或头孢霉素的目的菌种 B.向含有前体物质的生物体内导入酶A基因，也可能会产生青霉素 C.可以向含有青霉素的完全培养基上接种毛霉，检测青霉素的杀菌效果 D.虽然青霉素有杀菌作用，但生产过程中依然需要进行灭菌 14.科研人员利用蛋白质工程将纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸，使纤 维素酶热稳定性得到了提高。下列相关叙述错误的是 A.对纤维素酶的改造不需要构建基因表达载体 B.改造后的纤维素酶热稳定性提高这一性状可遗传给子代 C.改造前后的纤维素酶均可以降低化学反应活化能，加速纤维素的分解 D.与基因工程相比，蛋白质工程可以改造现有蛋白质或制造新的蛋白质 15.随着转基因技术的发展，由转基因技术导致的“基因污染”日益严重。下列关于“基因污染” 的叙述，错误的是 【高二期中考试题·生物学第3页（共6页）】 25-T-722B A.“基因污染”主要是基因重组引起的 B.“基因污染”可以不断扩散，但污染基因不能增殖 C.“基因污染”可能发生在同一物种之间，也可能发生在不同物种之间 D.野草、昆虫从其近亲获得抗性基因，造成的“基因污染”可能破坏生态系统的稳定性 16.设计试管婴儿是对早期胚胎进行遗传学诊断，将符合人们需要的胚胎植入母体孕育。下列 相关叙述错误的是 A.该技术可以帮助具有基因疾病的夫妇拥有健康孩子 B.设计试管婴儿与生殖性克隆人的原理不同 C.设计试管婴儿无需考虑早期胚胎性别 D.经济、文化和伦理道德观念的不同会影响人们对设计试管婴儿的看法 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17.(11分)链格孢菌是一种常见的能感染植物的真菌，可导致葡萄、马铃薯、梨等多种植物果实 和茎叶出现黑斑病。研究人员发现胡萝卜很少出现黑斑病，推测其根部土壤中可能存在抑 制链格孢菌的微生物，并设计如下实验分离纯化该微生物用于防治黑斑病。回答下列问题： (1)称取胡萝卜根部土样制成悬液并适当稀释，用微量移液器吸取O.1L稀释液注入固体 培养基上，涂布均匀后培养，该接种方法称为 ,待长出菌落后挑取不同菌落 并分别接种于混有 菌的培养基中，筛选出目的菌(X菌)，该接种方法也可用于 微生物的计数，其原理是 (2)为探究X菌的作用原理，实验组将稀释的X菌液接种在A1平板上，B平板中央接种直 径为0.5cm的链格孢菌菌落，把两个培养皿对扣，菌株无接触，5d后观察菌株生长 情况。 ①对照组处理： 与实验组置于相同环境并将培养皿分开培养相同时间后观察菌株生长情况。 ②实验表明：X菌可通过非直接接触方式抑制链格孢菌的生长，推测X菌可能产生了某 种具有易 特性的物质抑制了链格孢菌生长。 (3)除上述原因外，研究人员认为X菌培养液中可能也存在抑制链格孢菌生长的物质。设 计了实验：将不同方式处理（处理方式如下A~D)的滤纸圆片分别放入4个长满链格孢 菌菌落的培养基上进行抑菌实验，通过观察是否出现抑菌圈（不生长细菌）进行判断，从 而得出实验结论。 A.无菌水浸泡B.新鲜X菌培养液浸泡C.煮沸后的X菌培养液浸泡D.黏附X菌 若抑菌实验结果为 ,则可支持上述观点，且该物质很可能是 蛋白质分子。若将X菌培养液提取的抑菌物质用于其它作物的黑斑病防治，还需进一 步研究的问题有： (答两点)。 18.(11分)某研究小组用不同浓度的秋水仙素溶液浸泡“云烟87”四倍体的无菌苗茎尖72h,经 组织培养获得八倍体烟草植株，实验过程如图所示，实验数据如表所示。回答下列问题： 【高二期中考试题·生物学第4页（共6页）】 25-T-722B ①接种 分化为芽 分镀疾 浓度% 总数/株 八倍体植株数量/株 检出率/% 0.0 30 0 0.00 0.1 30 3 10.00 0.2 27 3 11.11 0.4 38 8 21.05 0.8 25 4 (1)用秋水仙素处理应在①过程 (填“之前”或“之后”)，过程①一般选择植物的幼嫩 部位，原因是 (答两点)。 (2)过程②表示 ,进行该过程时 (填“需要”或“不需要”)进行光照。经过过 程②后形成的培养物为 ,过程⑤在对幼苗移植前应先打开瓶盖，让幼苗在培养 箱内生长几日，其目的是 (3)分析表格可知，在浓度为0.8%的秋水仙素处理下，八倍体植株的检出率为 (保 留两位小数)，浓度为 的秋水仙素溶液处理效果最好。 19.(10分)单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，因此在多 种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。下图为科研人员利用小鼠制备单克隆抗体 的过程。回答下列问题： ●●● ●880 细胞融合 细胞筛选 脾B淋巴细胞 0●000000→00001000 克隆化培养 骨髓瘤细胞 单抗检测获得所需细胞 (1)图中脾B淋巴细胞获得方法是 (2)诱导脾B细胞和骨髓瘤细胞融合常用的具体方法有 (答两种)。细胞融合 (填“需要”或“不需要”)无菌环境，所形成的融合细胞（仅 考虑两两融合)有 种。 (3)图中细胞筛选是从多种细胞中筛选出杂交瘤细胞，筛选过程需要用到特定的选择培养 基，该培养基能筛选出杂交瘤细胞的原因是 (4)单抗检测时可用抗原一抗体实验鉴定：取培养液滴加相应抗原，出现 (填“阳性” 或“阴性”)反应为目标细胞。获得的杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养，或注射 到 内增殖。 【高二期中考试题·生物学第5页（共6页）】 25-T-722B 20.(10分)PCR技术不仅可以扩增目的基因，还可用于定点诱变目的基因。如图是将常规上游 引物（根据目的基因序列所设计的引物）根据突变碱基所处序 常规下游引物 拟突变位点 3 列位置设计出突变上游引物，再通过PCR技术获得定点突变 3 基因的过程（图中一次PCR可以进行多次DNA复制）。回答 5'3 突变上游引物 下列问题： |第一次PCR (1)PCR技术依据的原理是 ,PCR技术通常分为 5' 3 三步，其中一步将温度设为72℃左右的日的是 3' 0 (2)进行PCR反应时通常需要在缓冲液中加入Mg+,目的是 下游大引物 3 公 5 3 (3)在进行第一次PCR时，一个DNA分子完成一次复制后形 常规上游引物第二次PCR 成的DNA含有 个突变基因，若一个DNA分子在 第一次PC过程中完成两次复制，会产生 个 DNA分子，共需要 个引物。 (4)图示技术与自然条件下的基因突变相比，其优点是 21.(10分)基因工程重组亚单位疫苗是预防新冠病毒感染和传播的一种有效方案，其原理是把 新冠病毒上负责“生产”S蛋白的那部分基因找到，构建体外重组表达载体，导入到微生物体 内，“生产”出需要的S蛋白制成疫苗。如图是在体外构建病毒S蛋白重组表达载体的实验 流程及相关限制酶的酶切位点。回答下列问题： 限制酶 BamHI Bel I Sau3A I HindⅢ 识别序列及 GGATCC T'GATCA GATC AAGCTT 切割位点 CCTAG,G ACTAG,T CTAG TTCGA A 四环素抗性基因 BamH I、 BamH I引物甲 HindⅢ 7 质粒X -Bcl I -BamH I 引物丙 引物乙Sai3AI HindⅢ 启动子 氨苄青霉素 S蛋白基因 抗性基因 图1 图2 (1)从患者肺部组织中分离并提取得到病毒RNA,通过 获得S蛋白的cDNA, 再通过 法对S蛋白的基因进行扩增，扩增的一般步骤是 (2)用图1中的质粒X和图2中的S蛋白基因构建重组质粒，应选用 两种限 制酶切割，切割后通过 酶作用获得重组质粒。 (3)转化前，用含 的溶液处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。转化后，将大肠杆菌 置于含 的培养基中培养，方便筛选出含重组质粒的大肠杆菌。为进一步鉴定筛 选出的大肠杆菌是否导入S蛋白基因，可用引物 进行扩增验证。 【高二期中考试题·生物学第6页（共6页）】 25-T-722B