辽宁省葫芦岛市一高中2025-2026学年度下学期课外拓展训练卷（8）高二生物

市一高中2025-2026学年度下学期课外拓展训练提升卷（8） 高二生物 参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D A B B C C A B B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C A B D D ACD ABD CD AD BC 1．A 【知识点】泡菜的腌制、无菌技术 【分析】制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累。泡菜在腌制过程中会有亚硝酸盐产生。 【详解】A、竹笋中含有发酵的天然菌种，故不能对采摘后的竹笋进行灭菌，否则会杀死发酵的天然菌种，A错误； B、发酵过程中会产生乳酸，乳酸呈酸性，酸性环境会抑制大多数微生物的生长繁殖，B正确； C、制作过程使用的盐水要先煮沸灭菌后再冷却，加入坛中没过蔬菜，造成无氧环境，C正确； D、因为上一批次的发酵液中含有大量的发酵菌种，故适当加入上一批次的发酵液可加快发酵进程，D正确。 故选A。 2．D 【知识点】发酵工程的应用、发酵工程的基本环节、目的基因的检测与鉴定、PCR扩增的原理与过程 【详解】A、PCR技术可在体外大量扩增目的基因（HBsAg基因），从而增加导入的成功率，A正确； B、HBsAg基因的表达产物是蛋白质，利用抗原-抗体特异性结合的原理，可用抗HBsAg抗体进行检测，B正确； C、发酵工程中需先对菌种进行扩大培养以增加菌体数量，再转入发酵罐进行大规模生产，C正确； D、题干明确HBsAg不能被酵母菌分泌到细胞外，说明其存在于细胞内，需通过破碎细胞提取，而非直接从培养液中获取，D错误。 故选D。 3．A 【知识点】无菌技术 【详解】A、巴氏消毒法采用60-70℃处理30分钟，可杀死牛奶中病原微生物和部分非耐热菌，但无法杀死耐热的芽孢（细菌休眠体，抗逆性强），A符合题意； B、紫外线通过破坏微生物DNA结构杀灭部分微生物，常用于超净台表面和空气的消毒（非彻底灭菌），该操作能达到目的，B不符合题意； C、酒精灯充分燃烧层温度可达400℃以上，通过灼烧使接种环达到灼烧灭菌（物理灭菌法）效果，能迅速彻底杀灭微生物，C不符合题意； D、利用噬菌体（寄生于细菌的病毒）特异性裂解细菌的特性，可减少污水中的细菌数量，属于生物净化手段，D不符合题意。 故选A。 4．B 【知识点】微生物的接种方法 【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 【详解】A、据图可知，划线区域d培养后数量最多，区域a培养后数量最少，因此图甲中的划线顺序为d→c→b→a，A正确； B、平板划线时，接种前首先灼烧灭菌，然后每次划线前后都要灭菌，最后一次划线后也要灭菌，因此图示接种过程中接种环需灼烧5次，B错误； C、平板划线法仅用于分离纯化细菌，得到的菌落多数不是单个菌落形成的，无法准确计数活菌，C正确； D、完成平板划线后需要将平板倒置，防止冷凝水落到培养基上影响单菌落的形成，且需要放入恒温培养箱中培养， D正确。 故选B。 5．B 【知识点】发酵工程的应用、发酵工程的基本环节 【详解】A、发酵工程的产品包括微生物的代谢物（如抗生素）、酶以及菌体本身（如单细胞蛋白），A错误； B、发酵罐内的发酵过程是发酵工程的核心环节，需严格控制温度、pH、溶氧量等条件以优化微生物代谢，B正确； C、青霉素发酵过程中仍需通入无菌空气，因杂菌可能消耗营养或产生杂质，影响青霉素产量和质量，仅过滤不能完全灭菌，C错误； D、土霉素、头孢菌素等抗生素是微生物在生长稳定期产生的次级代谢产物，而非维持基本生命活动所必需的初生代谢产物（如氨基酸、核苷酸），D错误。 故选B。 6．C 【知识点】植物组织的培养及基本过程 【详解】A、顶端分生区附近的组织分裂能力强、病毒含量极低甚至不含病毒，全能性更容易表达，适宜作为微型繁殖的外植体，A正确； B、对外植体消毒时，70%酒精处理后需用无菌水冲洗残留酒精，再用5%次氯酸钠处理后仍需用无菌水清洗，避免消毒剂残留损伤外植体细胞，B正确； C、诱导愈伤组织的过程为脱分化阶段，该阶段不需要光照，光照会抑制脱分化过程，仅需保持适宜温度即可，C错误； D、蛭石疏松透气、保水性好，含有矿质元素，可给植物提供所需营养物质，同时可以调节基质pH，适合作为组培苗移栽的栽培基质， D正确。 故选C。 7．C 【知识点】植物细胞工程的实际应用 【详解】A、紫杉醇是小分子物质，属于次生代谢物，不是红豆杉基本生命活动所必需的物质，A错误； B、该过程属于植物细胞工程，需在无菌条件下进行，B错误； C、①过程为脱分化，该过程中已分化的细胞转变成未分化细胞，C正确； D、②③过程属于植物细胞的悬浮培养，没有经历再分化，且需要在液体培养基中培养，D错误。 故选C。 8．A 【知识点】植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术综合 【详解】A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，细胞膜中既不含纤维素，也不含果胶，所以步骤①表示获得原生质体的过程不会损伤细胞膜，A错误； B、步骤②可用聚乙二醇诱导原生质体融合，且原生质体间的结合具有随机性，可以产生马铃薯—马铃薯、马铃薯—番茄，番茄—番茄等多种结果，B正确； C、高尔基体与植物细胞细胞壁的形成有关，所以步骤③表示融合的原生质体再生出细胞壁，该过程与细胞中的高尔基体相关，C正确； D、生物体中基因的作用是相互的，且基因控制相关性状，“番茄—马铃薯 ”杂种植株未表现出理想性状的原因可能是在其生长发育过程中，两物种的基因表达会相互影响有关， D正确。 故选A。 9．B 【知识点】动物细胞培养技术、真核细胞与原核细胞 【分析】动物培养条件： （1）无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 （2）营养成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。 （3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 （4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、动物细胞培养过程中，细胞代谢产生的废物积累会毒害细胞，定期更换培养液可以清除代谢废物，同时补充细胞所需的营养物质，A正确； B、 CHO细胞可在培养液中高密度生长，相同培养条件下能承受的细胞浓度更高，因此两次分瓶之间的间隔时间更长，B错误； C、 CHO细胞自身分泌的蛋白较少，且能将外源蛋白分泌到胞外，培养液中的杂蛋白含量低，有利于后续外源蛋白的分离纯化，C正确； D、贴壁生长的CHO细胞会附着在培养瓶的壁上，收集前需用胰蛋白酶等处理，使细胞从瓶壁上脱离并分散成单个细胞，之后才能通过离心法收集，D正确。 故选B。 10．B 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【详解】A、PML蛋白单克隆抗体的制备过程，应用PML蛋白作为抗原间隔多次免疫小鼠，目的是获得更多的能产生PML蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误； B、步骤1进行细胞融合，若只考虑两两融合，能形成3种类型的融合细胞，B细胞—B细胞，瘤细胞—瘤细胞，B细胞—瘤细胞，步骤2筛选后只剩杂交瘤细胞，B正确； C、根据题意可知步骤1是诱导W细胞与骨髓瘤细胞融合，步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C错误； D、根据电泳结果可知应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体，因为孔2中的细胞能特异性产生高纯度PML蛋白单克隆抗体，D错误。 故选B。 11．C 【知识点】DNA重组技术的基本工具 【详解】A、限制酶主要来源于原核生物，具有特异性识别特定核苷酸序列的功能，A正确； B、T4DNA连接酶可催化DNA片段间形成磷酸二酯键，既能连接黏性末端也能连接平末端，B正确； C、质粒作为运载体时，常携带的是抗生素抗性基因，而非抗生素合成基因。抗性基因用于重组DNA的筛选，C错误； D、噬菌体侵染大肠杆菌，改造后的噬菌体是常用基因工程运载体，可将外源基因（包括动物基因）导入大肠杆菌等宿主细胞，D正确。 故选C。 12．A 【知识点】基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用 【详解】A、将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，可以培育出产低乳糖牛乳的奶牛，如果导入奶牛乳腺细胞，体细胞无法发育为完整个体，则不能达成预期目标，A错误； B、酵母菌作为真核生物，具备表达复杂蛋白质的机制，将胰岛素基因表达质粒转入后，可通过筛选获得工程菌，B正确； C、改造后的T细胞（如CAR-T细胞）能特异性识别癌细胞并激活免疫应答，属于细胞免疫治疗，C正确； D、植物体细胞导入目的基因后，经植物组织培养可发育为完整植株，基因表达可改变花色，D正确。 故选A。 13．B 【知识点】基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定 【分析】分析题图：图示表示将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的过程。质粒A上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因，构建基因表达载体后，破环了质粒A的四环素抗性基因，但氨苄青霉素抗性基因正常，所以导入重组质粒或普通质粒的大肠杆菌都能抗氨苄青霉素，但导入重组质粒的大肠杆菌不能抗四环素。 【详解】A、“结合”过程即表达载体的构建过程，需使用限制酶、以及DNA连接酶，A错误； B、由于将人的生长激素基因导入质粒的抗四环素基因上，破坏了抗四环素基因的完整性，导入了重组质粒的细菌也没有对四环素的抗性，在含有四环素的培养基上不能存活，能存活的是导入质粒A的细菌，B正确； C、构建过程氨苄青霉素未被破坏，无论是否导入重组质粒，均能在含有氨苄青霉素的培养基上生长，C错误； D、生长激素基因导入了细菌B，并完成表达，说明“工程菌”制备成功，D错误。 故选B。 14．D 【知识点】蛋白质工程原理及操作流程 【详解】A、图所示是利用蛋白质工程生产保存时间更久的干扰素，该过程得到的干扰素是经过改造的，与自然界中的干扰素不相同，A错误； B、由于密码子的简并性，图中③过程得到的脱氧核苷酸序列往往不是唯一的，B错误； C、蛋白质工程是通过对基因的结构进行修饰或合成来操作的，C错误； D、结构决定功能，蛋白质工程的基础是蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系，D正确。 故选D。 15．D 【知识点】电泳鉴定、DNA的粗提取及鉴定 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、PCR实验中仅枪头、蒸馏水等试剂和耗材需要高压灭菌，移液器为精密计量仪器，高压灭菌会损坏其精度，无需也不能进行高压灭菌，A错误； B、 电泳时DNA分子带负电向正极迁移，分子越大在琼脂糖凝胶中受到的孔径阻力越大，迁移速率越小，B错误； C、 DNA本身无色，电泳过程中未经过染色无法直接观察到DNA条带，实际操作中是通过指示染料（如溴酚蓝）的迁移位置判断停止时机，C错误； D、琼脂糖凝胶电泳的电压通常按照1 ~ 5V/cm的参数设置，此处的长度单位为电泳槽阳极到阴极之间的距离，因此电压大小需要根据两极间距设定，D正确。 故选D。 16．ACD 【知识点】干细胞工程、植物细胞工程的实际应用 【分析】细胞产物的工厂化生产是细胞工程在工业生产中的重要应用，指通过大规模培养动植物细胞，生产具有重要价值的细胞产物（如药物、酶、蛋白质、次生代谢物等）的过程。单细胞蛋白是指通过培养微生物（如细菌、酵母菌、真菌、藻类等）而获得的大量菌体蛋白质。 【详解】 A、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量微生物菌体，不是从菌体中提取的蛋白质，A错误； B、 含指示剂的凝胶载样缓冲液在电泳过程中可以指示电泳的进程，便于观察，将其与PCR产物混合后注入加样孔能起到相应作用，B正确； C、细胞产物的工厂化生产采用了植物细胞培养技术，利用的是愈伤组织的增殖能力，而不是植物细胞的全能性，C错误； D、造血干细胞是成体干细胞，具有组织特异性，只能用于治疗部分与血液相关的疾病，D错误。 故选ACD。 17．ABD 【知识点】细胞的全能性、动物细胞培养技术、干细胞工程 【详解】A、动物细胞培养液需含葡萄糖（而非蔗糖）作为碳源，蔗糖常用于植物组织培养；培养液成分应包含氨基酸、无机盐、维生素等，但蔗糖不是动物细胞营养源，A错误； B、细胞全能性指已分化细胞发育成完整个体的潜能，iPS细胞分化为胰岛B细胞仅形成特定细胞类型，未形成个体，故未体现全能性（体现的是分化潜能），B错误； C、移植细胞源于患者自身成纤维细胞重编程，自体移植时主要组织相容性复合体（MHC）相同，免疫排斥反应显著低于异体移植，C正确； D、该糖尿病由基因缺陷导致且具遗传倾向，治愈仅改变体细胞，未改变生殖细胞遗传物质，后代仍可能携带致病基因而患病，D错误； 故选ABD。 18．CD 【知识点】其他微生物的分离与计数、无菌技术、培养基的成分及其功能 【详解】A、培养基的灭菌通常采用湿热灭菌法，A错误； B、由于土壤中微生物种类众多，能产生抑制指示菌生长的微生物可能有多种，进而产生的抗生素种类也可能不同，B错误； C、菌落直径与透明圈直径的比值越小，其产生的抗生素抑制S菌效果越好，有些菌株无透明圈产生是因为其不能产生抗生素，C正确； D、测试菌2和5距离产生透明圈菌株的距离近，说明测试菌2、5对该菌产生的抗生素具有抗性，D正确。 19．AD 【知识点】DNA重组技术的基本工具 【分析】限制性核酸内切酶酶切，是一项基于DNA限制性核酸内切酶的基因工程技术，其基本原理是利用限制性核酸内切酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。 【详解】A、限制酶具有特异性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，所以图1中限制酶A、B识别的核苷酸序列不相同，A正确；   B、从图2的A+B酶一组结果可知，限制酶A和B切完后总共有4个片段，长度分别为 500、1500、3500、4500。而X代表的碱基对数为4500， B错误；   C、图1表示酶A和B切割时只会得到3个片段，长度应该是3500、 X、2000，从图2的A+B酶一组结果可知，限制酶A和B切完后总共有4个片段，长度分别为 500、1500、3500、4500。所以可推测Y是限制酶A的酶切位点，C错误；   D、 根据以上结论，图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、 （4500+1500）、500：正好与图2的①结果相符，故推测图2中①是限制酶A处理得到的酶切产物，D正确。 故选AD。 20．BC 【知识点】基因表达载体的构建、PCR扩增的原理与过程、遗传信息的转录 【详解】A、启动子是DNA上RNA聚合酶识别和结合的位点，mRNA中不含启动子（启动子不被转录），药用蛋白基因的mRNA经逆转录得到的cDNA仅包含编码区序列，无需去除启动子，A错误； B、乳腺生物反应器中使用的启动子A通常是乳腺特异性启动子，其特点是仅在乳腺细胞中启动下游基因的转录，使药用蛋白基因特异性在乳腺细胞中表达，B正确； C、已知mRNA的序列为5'-UUACUUCCUG··CAAGUUUCAU-3'，逆转录得到cDNA序列为5'-ATGAAACTTTG……CAGGAAGTAA-3'，由此可知与cDNA互补的另一条链的序列为5'-TTACTTCCTG··CAAGTTTCAT-3'，利用PCR技术对cDNA进行扩增，PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，且转录的方向为启动子到终止子（DNA模板链的3'→5'），并结合题意可知，要在引物5'端加上限制酶EcoRⅠ和PstⅠ的识别序列，因此两种引物分别是5'-GAATTCTTACTT-3'和5'-CTGCAGATGAAA-3'，C正确； D、构建的基因表达载体还需通过显微注射的方法导入受精卵（雌性）中，最后发育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产药用蛋白，D错误。 故选BC。 21．(1) 无氧 异养兼性厌氧型 重铬酸钾 灰绿色 (2) C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量 通入氧气、升高温度 (3) 变小 二氧化碳、醋酸 (4) 乙 在排出气体的同时可以防止杂菌污染 【知识点】果酒和果醋的制作流程及实验分析、果酒和果醋的制作原理 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】（1）酒精发酵是利用酵母菌将葡萄糖转化为酒精的过程，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，其代谢类型是异养兼性厌氧型。所以此阶段需在无氧条件下进行，起主要作用的微生物（酵母菌）的代谢类型是异养兼性厌氧型。发酵过程中，可在酸性条件下，用重铬酸钾溶液检测有无酒精的产生，若有酒精的产生，则溶液呈现灰绿色。 （2）在果酒的基础上进行醋酸发酵，是乙醇在醋酸菌的作用下转化为醋酸的过程，反应方程式为C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30−35∘C，而酵母菌酒精发酵时一般将温度控制在18−30∘C ，所以该过程改变的条件有通入氧气、温度由18−30∘C 调整为30−35∘C 。 （3）在制作果酒过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，使发酵液pH变小；在制作果醋过程中，醋酸菌产生醋酸，也会使发酵液pH变小。所以制作果酒和果醋的过程中，均会引起发酵液的pH变小。涉及到的物质分别是二氧化碳和醋酸。 （4）果酒发酵过程是无氧条件，且出气口不能没入发酵液，发酵液不能装太满，所以图中乙最合理。发酵过程中右侧排气管连接长而弯曲胶管的目的是在排出气体的同时，可以防止杂菌污染。 22．(1) 纤维素 灼烧灭菌法 (2)透明圈直径和菌落直径 (3) 6.5×10⁶ 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 (4)0.2 【知识点】微生物的培养与菌种保藏、微生物的接种方法、无菌技术、培养基的类型及其应用 【分析】稀释涂布平板法计数： （1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌； （2）操作：①设置重复组，增强实验的说服力与准确性；②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 （3）计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】（1）筛选产纤维素酶的菌株应以纤维素为唯一碳源，因此CMC培养基应以纤维素为唯一碳源。对挑取菌落的工具进行灭菌，常用的方法是灼烧灭菌法。 （2）可通过向培养基中加入刚果红染液筛选出透明圈直径与菌落直径比值大的菌落作为目的菌落，比值越大说明降解纤维素的能力越强。 （3）利用稀释涂布平板发对微生物进行计数，计算公式为每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。第四个试管的稀释倍数为104，因此原液中活菌的浓度是（58+72+65）÷3÷0.1×104=6.5×106。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的活菌数往往比实际数目低。 （4）目的菌数量=细菌初始数目×（1-致死率）×正突变率，代入数据（相应的致死率和正突变率）可知，当辐照剂量为0.2kGy时，得到的目的菌数量最多。 23．(1) 消毒 脱分化 植物细胞的全能性 (2)不断增殖 (3) 纤维素酶、果胶酶 促进原生质体融合 (4) 不同意 植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量 (5)ABD 【知识点】植物组织培养技术综合、植物体细胞杂交技术、植物细胞工程的实际应用 【分析】图中①表示外植体接种，②表示脱分化，③表示再分化，④表示再分化过程产生突变体，⑤表示去除细胞壁获得原生质体，⑥表示黄酮类化合物的提取。 【详解】（1） 用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液对外植体消毒。②表示脱分化，③表示再分化，通过②③培养获得植株乙为植物组织培养，所利用的原理是植物细胞的全能性。 （2）愈伤组织在不诱导再分化的情况下，一般处于不断增殖的状态。 （3）⑤表示去除细胞壁获得原生质体，该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。培育形成植株丁的过程中，PEG的作用是诱导原生质体融合，属于化学方法诱导原生质体融合。 （4）不同意该同学的观点，黄酮类化合物属于植物的次生代谢物，植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量。 （5）A、生长素与细胞分裂素比值高时，利于生根；该比值低时，利于生芽。过程③是再分化，需先生芽再生根，所以需要先在生长素与细胞分裂素比例低的培养基中培养，A错误； B、过程④为诱变育种，常用射线或化学物质处理的是愈伤组织，经筛选并进一步培养才能获得大量所需的突变体植株丙，B错误； C、过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，应将愈伤组织细胞在液体培养基悬浮培养，即植物组织培养，C正确； D、所得三种植株中乙和丙的遗传信息不一定与甲相同，因为植株丙是诱变育种得到的，遗传信息可能发生改变；植株丁经过植物体细胞杂交，染色体数目发生了改变，和甲不一致，所以不是同一物种，D错误。 故选ABD。 24．(1) 肺癌细胞 (2) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 既能迅速大量繁殖，又能产生抗体 (3) a 细胞核 ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病 【知识点】培养基的类型及其应用、动物细胞培养技术、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。动物细胞融合常用于制备单克隆抗体。 【详解】（1）给小鼠注射抗原的目的是小鼠产生能分泌针对肺癌细胞起作用的抗体，且抗原与抗体发生特异性结合，故小鼠注射的特定抗原应取自肺癌细胞。 （2）经过程②培养基培养后可把杂交瘤细胞筛选出来，故该培养基是起筛选作用的选择培养基。若要经选择培养基把杂交瘤细胞筛选出来，则只有杂交瘤细胞才能在该培养基中生存。杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生抗体。 （3））ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，其中抗体起特异性识别作用，据图1可知，a是单克隆抗体，b是药物。 ①据图2可知，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，药物被释放至细胞质基质中，释放出的药物再进入细胞核，最终作用于细胞核，导致癌细胞死亡。 ②ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物，就可以有效地治疗疾病，因而可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用。 25．(1) 2 引物2的5’端与引物3的5’端部分碱基序列互补 ②③ (2) 5’ NdeI、XhoI RNA聚合酶 (3) 亮氨酸和尿嘧啶缺陷型 能 不能 【知识点】目的基因的检测与鉴定、将目的基因导入受体细胞、PCR扩增的原理与过程 【分析】基因工程的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。 【详解】（1）PCR1至少需要经过2次循环才能获得①②DNA片段。这是因为第一轮循环只能得到双链长度不一的产物，第二轮循环开始产生双链等长的产物。为实现PCR1和PCR2产物的融合，在设计引物2和引物3时，需要让它们的5'端带有与对方5'端互补的序列。这样，①②③④片段中，②的3'端和③的3'端可形成部分互补的重叠区，可以互为模板，便于DNA聚合酶按5'→3'的方向延伸子链，从而形成RubA—CitS融合基因，故可用于上述融合过程的DNA片段是②和③。 （2）根据在质粒上的插入位点以及融合基因的转录方向，需要还应该在引物1和引物4的5'端分别添加限制酶NdeI、XhoI的识别序列。融合基因在表达时，RNA聚合酶会与启动子结合，催化转录过程。 （3）以质粒上的LEU2和URA3作为标记基因对受体细胞进行筛选，故应选择亮氨酸和尿嘧啶缺陷型红曲霉作为受体细胞。已知亮氨酸和尿嘧啶缺陷型红曲霉自身无法合成这亮氨酸和尿嘧啶。重组质粒上只含有亮氨酸合成基因，尿嘧啶合成基因被破坏，含重组质粒的受体细胞在缺乏亮氨酸的甲培养基上能生存，在缺乏尿嘧啶的乙培养基上不能生存。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $ 市一高中2025-2026学年度下学期课外拓展训练卷（8） 高二生物 一、单选题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。） 1．酸笋是制作食品“螺蛳粉”的灵魂，深受广大消费者喜爱。传统酸笋的制作流程与泡菜类似，下列相关叙述错误的是（    ） A．将采购的竹笋进行预处理时需要对其进行严格灭菌处理 B．发酵过程中的酸性环境会抑制大多数微生物的生长繁殖 C．制作过程使用的盐水需经煮沸冷却，加入坛中没过蔬菜 D．山泉水浸泡时适当加入上一批次的发酵液可加快发酵 2．乙肝疫苗是通过基因工程将乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的基因导入酵母菌中表达，再利用发酵工程大规模生产获得的。已知HBsAg不能被酵母菌分泌到细胞外。下列相关叙述错误的是（　　） A．为了提高转基因的成功率，可以通过PCR技术扩增基因 B．可以利用抗HBsAg抗体在分子水平上检测基因的表达产物 C．可利用酵母菌大量生产乙肝疫苗，在发酵之前需要对菌种进行扩大培养 D．发酵结束后从培养液中提取HBsAg，并对提取的HBsAg进行纯化、灭活 3．下列操作中不能达到目的的是（　　） A．用巴氏消毒法杀死牛奶中的所有微生物，包括芽孢和孢子 B．用紫外线照射杀死超净工作台表面或空气中的部分微生物 C．接种环在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，迅速彻底地灭菌 D．完成平板划线后需将平板倒置培养 4．下图表示细菌纯培养实验中的平板划线接种（图甲）及其纯培养结果（图乙），a、b、c、d是划线的四个区域。下列相关叙述错误的是（    ） A．图甲中的划线顺序为d→c→b→a B．图示接种过程中接种环需灼烧4次 C．图示接种方法不能用于活菌计数 D．蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行 5．制药产业是关系国计民生的重要产业，随着人民群众的健康需求日益增长，我国已成为全球药品消费增速最快的国家之一。发酵工程在现代生物制药中起重要作用，下列叙述正确的是（    ） A．发酵工程的产品仅包括微生物的代谢物和酶，不包括菌体本身 B．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制温度、pH等发酵条件 C．青霉素具有强效抗菌作用，因此通入青霉素发酵罐的空气无需灭菌，只需过滤除去杂质即可 D．发酵工程生产的土霉素、头孢菌素等抗生素属于生物生长和发育的初生代谢产物 6．非洲紫罗兰花色艳丽，具有极高的观赏价值，但其受粉率和结实率都极低，且繁殖周期长。利用微型繁殖技术可以高效、快速地实现非洲紫罗兰种苗的大量繁殖。如图为微型繁殖技术的流程示意图，下列有关叙述错误的是 ( ) 接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽、生根→移栽 A. 微型繁殖时宜选择非洲紫罗兰顶端分生区附近的组织作为外植体 B. 用70%酒精和5%次氯酸钠处理外植体后均需用无菌水清洗 C. 诱导愈伤组织形成的过程中 ，需要提供充足的光照并保持适宜温度 D. 用蛭石作为栽培基质可为植物提供所需的营养物质及调节pH 7．紫杉醇是一种天然的化疗药物，可以通过诱导细胞周期停滞来抑制癌细胞的增殖。天然紫杉醇主要从红豆杉的树皮和树叶中提取，但产量有限。目前科学家利用植物细胞培养技术来大量获得紫杉醇，如图所示。下列有关说法正确的是（） A．紫杉醇是一种小分子物质，是红豆杉基本生命活动所必需的物质 B．该过程属于发酵工程，需在无菌条件下对植物细胞大规模培养 C．①过程为脱分化，该过程中已分化的细胞转变成未分化细胞 D．②③过程经历了再分化，需要在固体培养基上培养 8．科学家通过植物体细胞杂交的方法，培育出第一个杂种植物：番茄一马铃薯（番茄2N=24，马铃薯4N=48）。虽然这种植株并没有像科学家预料的那样，地上结番茄，地下结马铃薯，但却为植物体细胞杂交在生产实践中的应用拉开了帷幕。如图为番茄和马铃薯体细胞杂交的示意图，下列相关说法错误的是（    ） A. 步骤①表示获得原生质体，该过程中需严格控制酶解时间，以避免损伤细胞膜 B. 步骤②可用聚乙二醇诱导原生质体融合，且原生质体间的结合具有随机性 C. 步骤③表示融合的原生质体再生出细胞壁，该过程与细胞中的高尔基体相关 D. 杂种植株未表现出理想性状的原因可能是在其生长发育过程中，两物种的基因表达会相互影响 9．中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）是一种实验室常见的细胞系，既能贴壁生长，又能悬浮生长，广泛应用于各种药物蛋白的生产。CHO细胞可以在培养液中高密度生长，能够合成外源蛋白并将其分泌到胞外，且自身的分泌蛋白比较少。下列有关叙述错误的是 ( ) A. 培养CHO细胞时，需定期更换培养液，以便清除代谢物 B. 与普通动物细胞相比，CHO细胞两次分瓶之间的间隔时间较短 C. 用CHO细胞作为受体细胞生产外源蛋白，有利于后期蛋白质的纯化 D. 用离心法收集贴壁生长的CHO细胞前，需用胰蛋白酶等处理将其分散成单个细胞 10．下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　） A．获得W细胞的操作是使用PML蛋白对小鼠进行多次注射，再提取记忆B细胞 B．步骤1进行细胞融合，若只考虑两两融合，步骤2后只剩一种类型的融合细胞 C．步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D．应选择孔1或孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 11．基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法错误的是（　　） A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定的核苷酸序列 B．DNA连接酶可以催化磷酸二酯键的形成，进而连接黏性末端或平末端 C．用作运载体的质粒上常含有抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 D．将动物基因转入大肠杆菌细胞内可以用改造后的噬菌体做运载体 12．下列生物技术操作不会达成预期目标的是（　　） A．将肠乳糖酶基因导入奶牛乳腺细胞，培育产低乳糖牛乳的奶牛 B．将胰岛素基因表达质粒转入酵母菌，筛选获得产胰岛素工程菌 C．将体外改造后能识别特定癌细胞的T细胞回输患者，进行癌症治疗 D．将花青素代谢相关基因导入植物体细胞，再经组织培养获得具有特定花色的植株 13．如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制备“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（    ） A．“结合”过程需使用限制酶、耐高温的DNA聚合酶以及DNA连接酶 B．细菌B接种在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌 C．细菌B涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只有导入了重组质粒的细菌 D．生长激素基因导入了细菌B，说明“工程菌”制备成功 14．下图所示是利用蛋白质工程生产保存时间更久的干扰素（一种糖蛋白）的核心流程，下列叙述中正确的是（　　） A．该过程得到的干扰素与自然界中的干扰素相同 B．图中③过程得到的脱氧核苷酸序列往往是唯一的 C．蛋白质工程是通过对蛋白质的结构进行修饰或合成来操作的 D．蛋白质工程的基础是蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系 15．关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验。下列说法正确的是 ( ) A. PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B. 电泳时，DNA分子越大，迁移速率越大 C. 接通电源后，观察到DNA条带迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 D. 琼脂糖凝胶电泳时，电压的大小需根据电泳槽阳极至阴极之间的距离来设定 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有1个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有错选的得0分。） 16．下列关于生物工程的叙述，错误的是（    ） A．提取酵母菌中的单细胞蛋白并将其添加在动物饲料中可提高饲料的品质 B．将含指示剂的凝胶载样缓冲液与PCR产物混合后注入加样孔可指示电泳进程 C．利用植物细胞全能性原理进行的细胞产物工厂化生产不受季节、天气的限制 D．正常造血干细胞移植到病人体内可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病 17．研究人员取某糖尿病患者（相关基因缺陷导致，具有遗传倾向）的成纤维细胞在体外将其重编程为iPS 细胞，再诱导iPS 细胞分化为胰岛B细胞后移植到该患者体内，实现了临床功能性治愈。下列叙述错误的是（    ） A．培养iPS 细胞的培养液中含有蔗糖、氨基酸、无机盐等营养成分 B．诱导iPS 细胞分化成胰岛 B细胞的过程体现了细胞的全能性 C．上述移植过程相对于异体移植可以降低患者的免疫排斥反应 D．经过上述方式治愈的患者，其后代不会再患该种糖尿病 18．抗生素是由某些微生物产生的、能抑制其他微生物增殖的物质，在临床抗感染治疗中应用广泛。科研人员从土壤中分离能产生抗生素的目的菌，并进行效果鉴定，相关实验流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．制备培养基时，需用到凝固剂、碳源等，采用干热灭菌法灭菌 B．挑选菌落时，周围有透明圈的菌落所产生的抗生素种类相同 C．菌落直径与透明圈直径的比值越小，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 D．测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 19．用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，限制酶对应切点一定切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是（　　） A．图1中限制酶A、B识别的核苷酸序列不相同 B．图1中X代表的碱基对数为5500 C．推测图1中Y是限制酶B的酶切位点 D．推测图2中①是限制酶A处理得到的酶切产物 20．研究人员利用基因工程技术制备乳腺生物反应器生产某种药用蛋白，已知该药用蛋白基因的mRNA序列为5'-UUACUUCCUG··CAAGUUUCAU-3',经逆转录得到cDNA,在其两端添加限制酶识别序列后利用PCR技术扩增，将扩增后的DNA与启动子A等元件重组构建基因表达载体，如下图所示。下列叙述正确的是（    ） A．含该药用蛋白基因的启动子，构建基因表达载体前需将其去除 B．由于启动子A具有组织特异性，该药用蛋白基因只在乳腺细胞中表达 C．PCR扩增时两种引物分别是5'-GAATTCTTACTT-3'和5'-CTGCAGATGAAA-3' D．构建的基因表达载体还需通过显微注射的方法导入雌性动物的乳腺细胞中 三、非选择题（本题共5小题，共55分） 21．贾氏贡醋是河南三门峡的传统名产，最初以柿子为主，随着工艺的发展，其原料已拓展到苹果、大枣、山楂、葡萄等多种水果，这些不同的原料在酿造的过程中被加入，使贾氏贡醋更加富有营养。贾氏贡醋正是这些原料通过糖化、酒精发酵和醋酸发酵制成。请回答下列问题： (1)贾氏贡醋在酿造过程中一般需经过酒精发酵，此阶段需在_____（填“有氧”或“无氧”）条件下进行，其中起主要作用的微生物的代谢类型是______。发酵过程中，可在酸性条件下，用______溶液检测有无酒精的产生，若有酒精的产生，则溶液呈现______色。 (2)在果酒的基础上进行的醋酸发酵过程中，发生的主要反应（写反应方程式）_________，该过程改变的条件有________（至少写出2点）。 (3)制作果酒和果醋的过程中，均会引起发酵液的pH_____（填“变大”或“变小”），其中涉及到的物质分别是________ (4)制果酒时，某兴趣小组三位同学设计的酿蓝莓酒的装置如下图所示，其中最合理的是_____瓶。发酵过程中右侧排气管连接长而弯曲胶管的目的是____________。 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管 22．黑土壤中富含由多年落叶形成的腐殖质，科研人员利用其为原料开展了筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，如图所示。回答下列问题。 (1)CMC培养基应以______为唯一碳源。对挑取菌落的工具进行灭菌，常用的方法是______。 (2)刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但并不与水解产生的纤维二糖和葡萄糖等发生该种反应。选育高产纤维素酶的菌株时，可向CMC培养基中加入刚果红，筛选出______比值大的菌落，即可获得目的菌株。 (3)筛选出的菌株可采用图2所示方法进行计数。图中三个平板中的菌落数分别为58、72、65，据此估算原液中活菌的浓度是______个/mL。该统计结果往往比实际值______（“偏大”或“偏小”），原因是______。 (4)图3是获得菌株UV—Col6过程中，⁶⁰Co—γ辐照剂量与致死率和正突变率（符合生产需要的突变菌数占诱变后活菌数的比例）的关系。实验结果表明，用⁶⁰Co—γ射线诱变处理时，辐照剂量为______（填“0.2”、“0.4”、“0.6”或“0.8”）kGy时可获得数量最多的目的菌。 23．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题： (1)进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行________处理，所用的试剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液。图中②过程称为_________，通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是________________。 (2)培养中的愈伤组织细胞一直处于 _________________的状态，可用于④诱导产生突变体。 (3)⑤过程需要用_________________酶进行处理，形成植株丁的过程中，PEG的作用是______________________。 (4)黄酮类化合物是狼爪瓦松的次生代谢物，⑥为对该产物进行工厂化生产，某同学认为细胞产物的工厂化生产主要目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗_______，请说明相应的理由：__________________。 (5)通过植物细胞工程对狼爪瓦松培养，获得药物黄酮类化合物，下列相关叙述错误的是___。 A．过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养 B．过程④常用射线或化学物质处理后即可获得大量目的植株 C．过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，应将愈伤组织细胞在液体培养基培养 D．所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同，植株丁和甲是同一物种 24．为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。回答下列问题： (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 (2)为了获得杂交瘤细胞，需要进行筛选。图1中过程②所采用的培养基属于_____；使用该培养基进行细胞培养的结果是_____。杂交瘤细胞的特点是_____。（答出2点） (3)单克隆抗体是图1ADC中的_____（填“a”或“b”）部分。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①据图2回答，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于_____（填结构名称），可导致癌细胞凋亡。 ②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为_____（答出1点）。 25．红曲是红曲霉发酵大米制成的传统食品添加剂，因含有红曲素而呈红色，常用于调味和着色。红曲发酵过程中可能会产生有毒的桔霉素，科研人员将高效合成红曲素的基因RubA和抑制桔霉素合成的基因CitS采用融合PCR技术连接为RubA—CitS融合基因，再将融合基因导入红曲霉中，用于生产颜色更红的安全红曲，相关过程如下图。回答下列问题： (1)PCR1至少需经过___________次循环才可得到①②DNA片段。为实现PCR1和PCR2产物融合，在设计引物2和引物3时需考虑___________。为保证基因融合的正常进行，①②③④片段中可用于上述融合过程的DNA片段为_____(填序号)。 (2)为保证构建的RubA—CitS融合基因能正确插入载体中，还应该在引物1和引物4的___________(填“3′”或“5′”)端分别添加限制酶___________的识别序列。融合基因在表达时，___________会与启动子结合，催化转录。 (3)结合图中信息，为便于后续筛选，将重组质粒导入受体细胞时，应选择的红曲霉类型为：___________(填“普通红曲霉”或“亮氨酸缺陷型”或“尿嘧啶缺陷型”或“亮氨酸和尿嘧啶缺陷型”)。为排除空受体细胞(未导入质粒)、导入了空质粒受体细胞的干扰，目的基因导入后，需进行筛选。制备甲、乙两种培养基，甲培养基缺乏亮氨酸，乙培养基缺乏尿嘧啶，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上___________(填“能”或“不能”)生存，在乙培养基上___________(填“能”或“不能”)生存。 高二生物提升卷 第1页 共4页 ◎ 高二生物提升卷 第2页 共4页 高二生物拓展卷 第1页 共4页 ◎ 高二生物拓展卷 第2页 共4页 学科网（北京）股份有限公司 $