精品解析：辽宁省丹东市第一中学2025—2026学年高二下学期期中考试生物试题

2024级高二下学期期中考试 生物试题 考试时间：75分钟 满分：100分 一、单项选择题：共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求 1. 食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（ ） A. 醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵 B. 食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C. 以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有pH下降和气体产生 D. 使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 【答案】B 【解析】 【详解】A、醋酸发酵的菌种为好氧型的醋酸菌，发酵过程需要持续通入氧气，属于好氧发酵；酒精发酵依靠酵母菌的无氧呼吸产生酒精，属于厌氧发酵，A正确； B、发酵产物产率与微生物的代谢方向有关，若微生物繁殖过快，会消耗大量营养物质用于自身生长繁殖，反而会减少发酵产物的积累，并非繁殖越快产物产率越高，B错误； C、以谷物为原料发酵时，酵母菌无氧呼吸会产生CO2气体，同时发酵过程产生的醋酸、乳酸等酸性物质会使体系pH下降，C正确； D、天然混合菌种的种类、比例受发酵环境影响较大，不同批次的菌种组成存在差异，因此容易造成传统发酵食品的品质不一，D正确。 2. 幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（ ） A. 配制鉴别幽门螺杆菌的培养基应采用干热灭菌法进行灭菌 B. 若空白对照组长出了菌落，则应将实验组的菌落数减去空白对照组的菌落数 C. 对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 D. 分离纯化幽门螺杆菌时可以使用以尿素为唯一氮源的培养基 【答案】D 【解析】 【详解】A、培养基的灭菌应使用高压蒸汽灭菌法，干热灭菌法适用于玻璃器皿、金属用具等耐高温且需保持干燥的物品，若用干热灭菌法处理培养基会破坏培养基成分、导致水分散失，A错误； B、若空白对照组长出菌落，说明培养基被污染或操作过程存在杂菌污染，本次实验结果无效，需重新进行实验，不能直接用实验组菌落数减去空白组菌落数，B错误； C、稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数，平板划线法只能用于分离纯化微生物，无法对微生物进行计数，C错误； D、幽门螺杆菌含有脲酶，可分解尿素获得氮源，使用以尿素为唯一氮源的选择培养基时，不能利用尿素的微生物无法生长，可实现幽门螺杆菌的分离纯化，D正确。 3. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白，用来生产微生物饲料 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成 C. 主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在高温，密闭的环境下储存一段时间后进行发酵 D. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件 【答案】B 【解析】 【详解】A、单细胞蛋白是微生物菌体本身，不需要从微生物细胞中提取，可直接作为微生物饲料，A错误； B、啤酒生产的主发酵阶段，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，酒精的产生和积累主要在该阶段完成，B正确； C、主发酵结束后的后发酵需要在低温、密闭环境下进行，高温会导致酵母菌失活，破坏酒的品质，C错误； D、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，菌种选育是发酵工程的前提步骤，D错误。 4. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（ ） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 【答案】D 【解析】 【详解】A、原生质体融合时会出现同种原生质体融合的情况（如花椰菜原生质体之间融合、黑芥原生质体之间融合），此类融合细胞不是杂种细胞，只有不同物种原生质体融合得到的细胞才是杂种细胞，还需要筛选获得，A错误； B、联会是同源染色体两两配对的现象，B组的同源染色体在B组内配对、C组的同源染色体在C组内配对，二者本身不存在跨组联会的现象，植株N仅缺失1条染色体，减数分裂时仍有可能产生可育配子，B错误； C、生殖隔离的定义是自然状态下物种间不能交配，或交配后不能产生可育后代，原生质体融合是人为诱导的技术操作，不能说明两种植物自然状态下不存在生殖隔离，C错误； D、细胞全能性是指细胞经分裂、分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，杂种细胞经组织培养发育为完整的再生植株N，证明杂种细胞具有全能性，D正确。 5. 下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 B. 动物细胞培养需要CO₂，CO₂的主要作用是刺激细胞呼吸 C. iPS细胞可在适当诱导条件下定向分化，iPS细胞类似胚胎干细胞 D. 人体内的干细胞有ES细胞、成体干细胞、iPS细胞三类 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶的最适pH为酸性，在该培养条件下会失活，分散细胞需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A错误； B、动物细胞培养时添加一定浓度的CO₂，作用是维持培养液的pH稳定，B错误； C、iPS细胞（诱导多能干细胞）分化程度低，具有类似胚胎干细胞的发育全能性，可在适当诱导条件下定向分化为特定组织细胞，C正确； D、iPS细胞是通过体外技术诱导普通体细胞重编程得到的，不属于人体内天然存在的干细胞，D错误。 6. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 B. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 C. 用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、诱导动物细胞融合需使用灭活的病毒，有活性的病毒会侵染损伤细胞，无法实现诱导融合的目的，A错误； B、结合题图，重构胚中在加入Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，B错误； C、获得重构胚后，需要用电刺激、Ca2+载体等物理或化学方法激活重构胚，才能使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞为iPS细胞，并未发生突变，D错误。 7. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得的早期胚胎，经胚胎移植给受体甲后可以产生后代。下列叙述正确的是（　　） A. 经胚胎移植产生的后代，其遗传特性都与受体甲保持一致 B. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的生殖方式都属于无性生殖 C. 不同方法获得的早期胚胎，都需要MⅡ期的去核卵母细胞 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【答案】D 【解析】 【详解】A、经胚胎移植产生的后代，遗传物质来自提供胚胎的供体，受体甲仅为胚胎发育提供子宫孕育环境，不提供遗传物质，因此后代遗传特性与供体保持一致，与受体甲无关，A错误； B、体外受精过程经过了两性生殖细胞的结合，属于有性生殖，仅核移植获得后代的生殖方式属于无性生殖，B错误； C、只有核移植技术需要将供体细胞核导入MⅡ期的去核卵母细胞中构建重组细胞，体外受精、转基因技术获得早期胚胎不需要该操作，C错误； D、胚胎移植前需对供体和受体进行同期发情处理，保证二者生理环境相同，胚胎移植的实质就是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 8. 下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是（ ） A. 在透明带内的卵裂过程，细胞数目不断增多，但胚胎总体积基本不变 B. 孵化是指原肠胚细胞突破卵细胞的过程 C. 胚胎分割时通常分离内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 D. 囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 【答案】A 【解析】 【详解】A、卵裂过程发生在透明带内，细胞通过有丝分裂数目不断增多，但每个细胞体积逐渐减小，胚胎总体积基本不变甚至略有减小，A正确； B、孵化是指囊胚期胚胎突破透明带的过程，并非原肠胚突破卵细胞，B错误； C、胚胎分割鉴定性别时，需分离滋养层细胞做DNA分析，内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，若取用会影响胚胎后续发育，C错误； D、囊胚期细胞开始出现分化，分为内细胞团和滋养层，其中滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，透明带会在孵化过程中破裂消失，不会发育为胎盘和胎膜，D错误。 9. 实验中常用碱裂解法提取质粒DNA，在碱性条件下，拟核DNA与质粒DNA均会变性；在中性条件下，质粒DNA可以复性，而拟核DNA不能复性并会聚集成不可溶的网状聚合物，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 碱性试剂2可使细胞膜中的某些蛋白质变性 B. 大肠杆菌中拟核DNA的主要载体为染色体 C. DNA不溶于酒精，用冷酒精处理可使DNA析出 D. 质粒DNA的变性和复性涉及氢键的断裂与形成 【答案】B 【解析】 【分析】DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。 【详解】A、碱性试剂2可裂解大肠杆菌，可推测能使细胞膜中的某些蛋白质变性，A正确； B、大肠杆菌属于原核生物，不含染色体，B错误； C、DNA不溶于酒精，用冷酒精处理可使DNA析出，可以将蛋白质和DNA进一步分离，C正确； D、质粒DNA是双链环状DNA分子，其变性和复性涉及氢键的断裂与形成，D正确。 故选B。 10. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖熔化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解 C. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶 D. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 【答案】B 【解析】 【详解】A、琼脂糖熔化，稍冷却后，加入适量的核酸染料，而非立即加入，A错误； B、DNA酶的活性依赖二价金属阳离子作为辅因子，EDTA可螯合二价阳离子，进而抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解，B正确； C、PCR反应缓冲液中用于激活DNA聚合酶的是Mg2+，不是Ca2+，C错误； D、凝胶载样缓冲液中的指示剂（如溴酚蓝）仅能指示电泳的迁移进程，避免样品跑出凝胶，无法指示DNA分子的具体位置，DNA位置需要借助核酸染料染色后在紫外灯下观察，D错误。 11. 基因PCR定点突变是蛋白质工程的重要技术，该技术需要设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过PCR将突变位点引入到产物中。重叠延伸PCR是发展最早的定点突变技术，其操作流程如下图所示。下列分析错误的是（ ） A. 步骤⑤中如果完成6轮循环一共需要消耗63个引物1 B. 蛋白质工程可以创造新的、自然界中不存在的蛋白质 C. 步骤④使用DNA聚合酶可对杂交分子甲和乙进行延伸 D. 应将引物1、2与引物3、4置于两个独立的反应体系中 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR过程中，引物的消耗数量为2n+1－2（n为循环数），初始模板不消耗引物，6轮循环后，总产物数为27－2=126个，因此消耗的引物1数量为126÷2=63个，A正确； B、蛋白质工程是通过改造基因来设计具有新功能的蛋白质，能够创造自然界中原本不存在的蛋白质，B正确； C、DNA聚合酶可以从3'端起始延伸，补全缺口得到完整的双链突变DNA，步骤④使用DNA聚合酶可对分子乙进行延伸，甲不可延伸，C错误； D、引物1、2用于扩增含突变位点的上游片段，引物3、4用于扩增含突变位点的下游片段。若将四组引物置于同一反应体系，会导致引物交叉结合、干扰PCR产物的特异性，因此需在两个独立的反应体系中分别扩增上下游片段，D正确。 12. 对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。下列有关蛋白质工程的说法，正确的是（ ） A. 基本思路首先是推测氨基酸序列，再设计预期蛋白质的结构 B. 需要在分子水平对蛋白质中的氨基酸进行操作 C. 需充分考虑蛋白质的空间结构，确保改造后能正确折叠 D. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质工程的基本流程是先预期蛋白质功能，再设计预期蛋白质的结构，之后才推测对应的氨基酸序列，A错误； B、蛋白质工程的操作对象是基因，是通过改造或合成基因来实现对蛋白质的改造，并非直接对蛋白质的氨基酸进行操作，B错误； C、蛋白质的功能由其空间结构决定，改造过程中必须充分考虑蛋白质的空间结构，保证改造后蛋白质能正确折叠，才能发挥预期功能，C正确； D、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，其核心技术依然是基因工程技术，没有完全摆脱基因工程，D错误。 13. 下列关于生物技术的安全性与伦理问题的说法，正确的是（　　） A. 可导入α-淀粉酶基因使花粉失去活性，防止基因污染 B. 只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用 C. 治疗性克隆主要用于治疗疾病，不存在伦理问题 D. 为维持人类和平，可在一定程度上发展生物武器 【答案】A 【解析】 【详解】A、导入α-淀粉酶基因使花粉失去活性，可避免外源基因通过花粉扩散到其他近缘物种，能有效防止基因污染，A正确； B、转基因技术本身是中性的，若有证据表明特定转基因产品有害，应禁止该有害产品的应用，而非完全禁止转基因技术的应用，需通过合理监管实现转基因技术的趋利避害，B错误； C、治疗性克隆操作涉及人类胚胎的使用等问题，目前仍存在伦理争议，并非不存在伦理问题，C错误； D、生物武器传染性强、危害范围广、防控难度大，国际公约及我国均明确规定任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，D错误。 14. Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因，筛选Bt基因后可以利用PCR技术对其进行大量扩增，下图为抗虫棉的培育过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. Bt基因的筛选与获取是基因工程的核心步骤 B. 以上导入目的基因的方法是农杆菌转化法，农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可转移 C. 如果把目的基因整合到线粒体DNA或叶绿体DNA上，可能导致后代目的基因丢失 D. 检测目的基因是否成功表达所用的分子水平上的方法可以为抗原—抗体杂交 【答案】A 【解析】 【详解】A、基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，也就是将Bt基因转入Ti质粒上，A错误； B、由题图中“转入农杆菌”可知，导入目的基因采用的是农杆菌转化法，农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可以转移到棉花细胞染色体上，B正确； C、线粒体DNA和叶绿体DNA都不能保证稳定遗传给下一代，所以若将目的基因整合到线粒体DNA或叶绿体DNA上，则有可能导致后代丢失目的基因，C正确； D、在分子水平上检测目的基因是否成功表达，主要检测其是否已转录出相应的mRNA以及是否成功翻译出抗虫蛋白，其中，可采用抗原─抗体杂交的方法检测抗虫蛋白的存在，D正确。 15. 根据图示判断下列有关显微镜操作的实验的叙述，错误的是（ ） A. 若将图②中的细胞移到视野中央，应将装片向右下方移动 B. 若图①镜头由a转换成b，则视野中观察到的细胞数目增多 C. 若将图④中图像再放大4倍，则最多只能看到2个完整细胞 D. 高倍镜下观察到的图③中细胞质实际流动方向也是逆时针 【答案】B 【解析】 【详解】A、显微镜成倒像，物像位置与实物位置完全相反，物像在视野右下方，说明实物实际在装片左上方，因此向右下方移动装片可将细胞移到视野中央，A正确； B、图①为带螺纹的物镜，物镜越长放大倍数越大，镜头由a转换为b后放大倍数升高，视野范围缩小，观察到的细胞数目减少，B错误； C、显微镜放大倍数是长度/宽度的放大倍数，放大倍数提升4倍后，一行细胞的观察数目为原来的1/4，原有8个细胞，8÷4=2，因此最多能看到2个完整细胞，C正确； D、显微镜下物像是实物旋转180°得到的，旋转180°不会改变环形流动的方向，因此视野中细胞质逆时针流动，实际流动方向也为逆时针，D正确。 二．不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 《选择健康》一书中提出：“人类并无成百上千种疾病，人类的疾病只有一种，那就是细胞病。”从细胞学说角度来理解这一观点，说法不正确的是（ ） A. 细胞学说使千变万化的生物界通过细胞这一共同结构统一起来，体现了细胞多样性 B. 细胞学说揭示了动物与植物的统一性，使人们认识到细胞是动植物生命活动的基本单位 C. 细胞学说认为细胞分为原核细胞与真核细胞 D. 一切生物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、细胞学说使生物界通过细胞这一共同结构统一起来，体现的是生物界的统一性，未体现细胞多样性，A错误； B、细胞学说提出一切动植物都由细胞发育而来，揭示了动物和植物的统一性，使人们认识到细胞是动植物生命活动的基本单位，B正确； C、细胞学说没有提出细胞分为原核细胞与真核细胞，该分类是后续生物学研究得出的结论，C错误； D、细胞学说的内容是一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成，并非一切生物，病毒没有细胞结构，不属于该表述的适用范围，D错误。 17. 支原体肺炎是由肺炎支原体引起的急性肺部感染性疾病。青霉素和头孢菌素类抗生素作为广谱抗菌药通过抑制病原体细胞壁的形成达到杀菌效果。下列叙述正确的是（ ） A. 支原体自身的蛋白质均在宿主细胞的核糖体上合成 B. 支原体与流感病毒最本质的区别在于有无细胞结构 C. 支原体在生命系统的结构层次中属于两个结构层次 D. 临床上可以用青霉素和头孢菌素来治疗支原体肺炎 【答案】BC 【解析】 【详解】A、支原体是具有细胞结构的原核生物，自身含有核糖体，可在自身核糖体上合成蛋白质，不需要利用宿主细胞的核糖体，A错误； B、支原体有细胞结构，流感病毒没有细胞结构，有无细胞结构是二者最本质的区别，B正确； C、支原体是单细胞生物，一个细胞就是一个完整的个体，因此支原体既属于生命系统的细胞层次，又属于个体层次，共两个结构层次，C正确； D、青霉素和头孢菌素的作用机理是抑制病原体细胞壁的形成，而支原体没有细胞壁，因此这类药物对支原体无作用，不能用于治疗支原体肺炎，D错误。 18. 为解决农业玉米秸秆资源化利用问题，科研人员从农田土壤中筛选高效纤维素降解菌（属于细菌），下列叙述不正确的是（ ） A. 培养基以纤维素为唯一碳源，属于鉴别培养基，可直接筛选区分降解菌与杂菌 B. 为加速菌株筛选，可将培养基pH调至酸性，促进纤维素分解菌的快速繁殖 C. 培养基加入刚果红染液后灭菌倒平板，纤维素降解菌落周围会出现透明圈 D. 接种操作在超净工作台上进行，应完全打开培养皿盖，快速完成接种 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、以纤维素为唯一碳源的培养基属于选择培养基，仅允许能分解利用纤维素的微生物生长，抑制其他杂菌生长，不属于鉴别培养基，A错误； B、题干明确纤维素降解菌属于细菌，培养细菌需将培养基pH调至中性或微碱性，调至酸性会抑制细菌繁殖，B错误； C、刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被降解菌分解后，红色复合物无法形成，菌落周围就会出现透明圈，可将刚果红加入培养基一同灭菌后倒平板，C正确； D、接种时为防止杂菌污染，仅需将培养皿盖打开一条缝隙操作，完全打开培养皿盖会增加杂菌污染概率，D错误。 19. 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种对猪群具有高度传染性的病毒。GP3蛋白是PRRSV的重要抗原之一，能够诱导宿主产生特异性的免疫应答。为了对PRRSV进行快速检测，科研人员制备了PRRSV-GP3蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列分析不正确的是（ ） A. 将GP3蛋白注射到小鼠体内是为了获取能分泌抗GP3蛋白抗体的B细胞 B. 培养细胞乙的培养基通常是加入了血清等天然成分和糖类、氨基酸等的固体培养基 C. 细胞丙中有融合的具有同种核的细胞和能合成抗GP3蛋白抗体的杂交瘤细胞 D. 第2次筛选可用多孔板对单个的杂交瘤细胞进行培养及抗体检测 【答案】BC 【解析】 【详解】A、将GP3蛋白作为抗原注射到小鼠体内，可诱导小鼠发生特异性免疫，获得能分泌抗GP3蛋白抗体的B淋巴细胞，A正确； B、动物细胞培养使用的是添加了血清、糖类、氨基酸等成分的液体培养基，并非固体培养基，B错误； C、细胞丙是第一次筛选的产物，该次筛选用选择培养基淘汰了未融合细胞、同种核融合的细胞，仅保留杂交瘤细胞，因此细胞丙中不存在融合的具有同种核的细胞，且其中的杂交瘤细胞并非都能合成抗GP3蛋白抗体，C错误； D、第2次筛选的目的是获得能产生特异性抗GP3抗体的杂交瘤细胞，可通过多孔板对单个杂交瘤细胞进行克隆化培养，再进行抗体检测实现筛选，D正确。 20. 科学家对某质粒用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶进行酶切后，再利用琼脂糖凝胶电泳得到下图所示图谱（其中1号泳道是标准DNA样品的电泳结果，2号、3号、4号泳道分别是用EcoRⅠ单独处理SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果）。下列说法正确的是（ ） A. DNA片段的扩增及电泳鉴定时，接通电源后，看到DNA条带迁移至凝胶边缘时，停止电泳 B. 在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 C. 由图可知该载体DNA分子中两种限制酶的酶切位点共有两个 D. 在凝胶中DNA分子迁移的速率与凝胶浓度和DNA分子大小有关 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、DNA 电泳时不能等到条带跑到凝胶边缘再停止，若 DNA 迁移到凝胶边缘会跑出胶块，无法观察条带、判断片段大小；应在条带分离清晰、未跑出凝胶时断电，A 错误； B、在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换，避免试剂交叉污染，B 正确； C、质粒是环状 DNA，已知2 号（EcoRI 单酶切）有1 条条带，说明 EcoRI 在质粒上1 个酶切位点（环状切 1 处变成 1 条线性片段）；3 号（SmaI 单酶切）有1 条条带，说明 SmaI 在质粒上1 个酶切位点，4 号（双酶切）有2 条条带（800bp、200bp），总长度 1000bp，印证两种酶各 1 个切点，总共有 2 个酶切位点，C正确； D、琼脂糖凝胶中 DNA 迁移速率的影响因素有DNA 分子大小（片段越小，阻力越小，迁移越快）、凝胶浓度（凝胶浓度越高，孔径越小，大分子 DNA 迁移越慢）； 此外还受 DNA 构象、电压等影响。因此迁移速率与凝胶浓度、DNA 分子大小均有关。D 正确。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 尿素含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题： 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 含量（g） 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 操作将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升 （1）上表是尿素分解菌的选择培养基配方，选择培养基是指______。本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板。设置前一组的平板上如果______，说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果______，可以说明选择培养基具有选择作用。 （2）将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释104倍，按图[    ]______（填数字及名称）接种方式将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出每克土壤中的尿素分解菌活菌数约为______个。 （3）分解尿素的细菌能合成脲酶，催化尿素分解产生的可以作为细菌生长的氮源。如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，根据功能划分该培养基属于______培养基。 （4）土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，如圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为，请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否是固氮菌。（写出简要思路及预期结果）______。 【答案】（1） ①. 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基    ②. 没有菌落生长 ③. 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数显著多于选择培养基 （2） ①. 1 稀释涂布平板法  ②. 1.34×108 （3）鉴别 （4）将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上培养一段时间后，观察是否有出现菌落。若能长出菌落，说明该菌为固氮菌，否则不是固氮菌    【解析】 【小问1详解】 根据分析，选择培养基是指在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基；本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，可证明灭菌是否彻底；另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板。前一组的平板上如果没有菌落生长，可以说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数显著多于选择培养基，可以说明选择培养基具有选择作用。 【小问2详解】 稀释涂布平板法计数时需要统计菌落数在30-300之间的平板，统计菌落数目一般使用稀释涂布平板法，将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释104倍，按图[1]稀释涂布平板法接种方式，将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出每克土壤中的尿素分解菌活菌数约为（ 134+131+137）÷3÷0.1×10×104=1.34×108 个。 【小问3详解】 如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物 NH3 会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，根据功能划分该培养基属于鉴别培养基。 【小问4详解】 土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，设计实验时用到的是无氮源培养基，然后检测是否有固氮菌即可：将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上培养一段时间后，观察是否有出现菌落。若能长出菌落，说明该菌为固氮菌，否则不是固氮菌。    22. Ⅰ、下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。 Ⅱ、银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。 请回答下列相关问题： 外植体愈伤组织试管苗植株 （1）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是________。 （2）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括PEG融合法和_________。 （3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种细胞融合成功的标志是_______，植物体细胞杂交技术的重要意义是______。 （4）外植体的选择不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在___________（灭菌/消毒）时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用___________多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。为获得银杏的次生代谢产物，________（需要/不需要）走完上述流程图的全过程。 （5）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是___________胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （6）学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是_______。不过其生根数量较少且根长较短，可能的原因是_________。 【答案】（1）矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质 （2）高Ca2+-高pH融合法 （3） ①. 再生出细胞壁 ②. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 （4） ①. 消毒 ②. 无菌水 ③. 不需要 （5）低氧 （6） ①. 植物体内可以产生内源生长素 ②. 植物体内可以产生的内源生长素较少 【解析】 【小问1详解】 利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株，这体现植物细胞的全能性，而细胞具有全能性的原因是矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质。 【小问2详解】 人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类，物理法和化学法，其中化学法主要使用PEG(或聚乙二醇)和高Ca2+-高pH融合法促融。 【小问3详解】 植物细胞有细胞壁后结构才完整，“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种细胞融合成功的标志是再生出细胞壁；植物体细胞杂交是指将不同种、属或科植物通过人工诱导原生质体融合并离体培养再生杂种植株的技术，能够打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。 【小问4详解】 外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用无菌水多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 为获得银杏的次生代谢产物，只需要培养到愈伤组织阶段就可以，故不需要走完如上述流程图的全过程。 【小问5详解】 研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是在低氧胁迫条件下，细胞诱导产生次生代谢物。 【小问6详解】 在未添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物）的培养基中，菊花幼苗也有生根，可能是因为植物体内可以产生内源生长素，内源生长素促进植物生根；其生根数量较少且根长较短，可能是植物体内产生的内源性生长素较少，不足以维持植物正常生根。 23. 单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体的缺点是____________。 （2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出__________，筛选出的细胞具有的特点是____________________，筛选②的目的是筛选出____________________ （4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 【答案】（1） ①. Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 ②. 产量低、纯度低 （2）3##三 （3） ①. 杂交瘤细胞 ②. 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 ③. 能产生所需（特定）抗体的杂交瘤细胞  （4）95%空气和5%CO2 【解析】 【小问1详解】 据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物；这种方法制备的抗体的缺点是抗体不仅产量低，而且纯度低。 【小问2详解】 用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有B细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合、杂交瘤细胞3种类型。 【小问3详解】 图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的方法是用特定的选择培养基，去除同种核融合的细胞以及未融合的单核细胞，筛选出杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体；筛选②是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问4详解】 动物细胞培养时需要提供95％空气和5％的CO2条件，以保证细胞的有氧呼吸和维持培养液的pH。 24. Ⅰ.科研人员为获得可用于生产基因工程的疫苗，将病毒外壳蛋白基因导入猪体细胞中，然后通过核移植技术培育转基因猪，具体操作过程如图所示。回答下列问题： （1）在收集A细胞时需要用_________处理1号猪，在体外培养到_________时期。为了使胚胎能够成功移植到2号猪子宫内，需要对2号猪进行_________处理。 （2）该转基因猪的培育过程运用了动物细胞培养、_______和__________等技术。 （3）若想要对移植的胚胎进行分割，应选择_______期进行操作。 （4）随着试管婴儿技术的发展，世界各地诞生的试管婴儿数量迅速增长，试管婴儿技术中有时需要对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效、准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个_________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎性别为_________。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 减数第二次分裂中（MⅡ中） ③. 同期发情 （2） ①. （动物）体细胞核移植技术 ②. 胚胎移植技术 （3） 桑椹胚或囊胚 （4） ①. 滋养层 ②. 男性（雄性） 【解析】 【小问1详解】 图中A细胞是卵母细胞，对供体1号猪注射促性腺激素可实现超数排卵，获得更多卵母细胞；卵母细胞需体外培养到减数第二次分裂中期，才具备作为核移植受体的能力。胚胎移植前对受体2号猪做同期发情处理，可保证供、受体生殖器官生理状态一致，为胚胎移入提供相同的生理环境，提高移植成功率。 【小问2详解】 该培育过程中，导入病毒外壳蛋白基因用到转基因技术，将体细胞的细胞核移入去核卵母细胞用到体细胞核移植技术，将早期胚胎移入受体子宫用到胚胎移植技术，题干已给出动物细胞培养技术，任选未提及的两项即可。 【小问3详解】 桑椹胚和囊胚期的胚胎细胞分化程度低、全能性高，分割后更容易发育为完整个体，是胚胎分割的适宜时期。 【小问4详解】 囊胚的滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，取该部分细胞做鉴定不会损伤发育为胎儿本体的内细胞团；SRY是Y染色体特有的性别决定基因，出现阳性反应说明胚胎细胞含Y染色体，性别为雄性（男性）。 25. 研究发现，双斑蟋蟀中的Gbdsx基因对雄性发育至关重要，且只在雄性中表达。为验证Gbdsx基因在雄性中的特异性表达与其启动子受雄性中存在的物质X的调控，科研人员构建了含有Gbdsx-RFP融合基因的转基因大肠杆菌，Gbdsx基因和质粒部分结构如图所示。 （1）可利用PCR特异性地快速扩增Gbdsx基因，据图分析，需选择________作为本实验的引物，引物的作用是________。 （2）为目的基因能够与质粒正确相连，需要在引物的________（填“3’端”或“5’端”）添加限制酶识别序列，在F引物添加的序列所对应的限制酶是________，在R引物添加的序列所对应的限制酶是________。 （3）将重组质粒转入大肠杆菌过程中，一般选用________处理大肠杆菌。科研人员用含有氨苄青霉素的培养基接种处理后的大肠杆菌，________（填“能”或“不能”）筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。若要证明实验目的，还应进行的操作和实验结果分别是：________。 【答案】（1） ①. F1和R2 ②. 使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸 （2） ①. 5’端 ②. Xho Ⅰ  ③. Bg Ⅲ （3） ①. Ca2+ ②. 不能 ③. 在培养基中加入物质X；导入重组质粒的大肠杆菌发出红色荧光 【解析】 【小问1详解】 分析题意，该实验目的是验证Gbdsx基因在雄性中的特异性表达与其启动子受雄性中存在的物质X的调控，所以利用PCR特异性地快速扩增Gbdsx基因，必须包含启动子，不包含Gbdsx自身终止子（保证后续RFP能融合表达）的目的片段，需选用F1、R2作为本实验的引物；引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。 【小问2详解】 PCR扩增时子链的延伸方向是5'→3'，则限制酶识别序列需要添加在引物的5'端，不影响引物3'端与模板结合、DNA链延伸；根据质粒酶切位点的位置，由于Sau3AⅠ的识别序列会破坏BamHⅠ和BgⅢ的识别序列，所以不可选用限制酶Sau3AⅠ，目的基因需要插入到RFP上游的Xho I和Bg III位点，因此F（上游正向）引物添加Xho I识别序列，R（下游反向）引物添加Bg III识别序列。 【小问3详解】 将重组质粒转入大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，即处于易于吸收环境DNA分子的状态；由于无论空质粒还是重组质粒都保留完整的氨苄青霉素抗性基因，因此氨苄培养基只能筛选出导入质粒的大肠杆菌，不能区分重组质粒和空质粒；实验目的是验证X调控Gbdsx基因的启动子，因此分组处理，观察RFP的表达（RFP表达会出现红色荧光）即可，具体操作为在培养基中加入物质X，导入重组质粒的大肠杆菌会发出红色荧光。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024级高二下学期期中考试 生物试题 考试时间：75分钟 满分：100分 一、单项选择题：共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求 1. 食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（ ） A. 醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵 B. 食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C. 以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有pH下降和气体产生 D. 使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 2. 幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（ ） A. 配制鉴别幽门螺杆菌的培养基应采用干热灭菌法进行灭菌 B. 若空白对照组长出了菌落，则应将实验组的菌落数减去空白对照组的菌落数 C. 对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 D. 分离纯化幽门螺杆菌时可以使用以尿素为唯一氮源的培养基 3. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白，用来生产微生物饲料 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成 C. 主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在高温，密闭的环境下储存一段时间后进行发酵 D. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件 4. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（ ） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 5. 下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 B. 动物细胞培养需要CO₂，CO₂的主要作用是刺激细胞呼吸 C. iPS细胞可在适当诱导条件下定向分化，iPS细胞类似胚胎干细胞 D. 人体内的干细胞有ES细胞、成体干细胞、iPS细胞三类 6. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 B. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 C. 用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞 7. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得的早期胚胎，经胚胎移植给受体甲后可以产生后代。下列叙述正确的是（　　） A. 经胚胎移植产生的后代，其遗传特性都与受体甲保持一致 B. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的生殖方式都属于无性生殖 C. 不同方法获得的早期胚胎，都需要MⅡ期的去核卵母细胞 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 8. 下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是（ ） A. 在透明带内的卵裂过程，细胞数目不断增多，但胚胎总体积基本不变 B. 孵化是指原肠胚细胞突破卵细胞的过程 C. 胚胎分割时通常分离内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 D. 囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 9. 实验中常用碱裂解法提取质粒DNA，在碱性条件下，拟核DNA与质粒DNA均会变性；在中性条件下，质粒DNA可以复性，而拟核DNA不能复性并会聚集成不可溶的网状聚合物，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 碱性试剂2可使细胞膜中的某些蛋白质变性 B. 大肠杆菌中拟核DNA的主要载体为染色体 C. DNA不溶于酒精，用冷酒精处理可使DNA析出 D. 质粒DNA的变性和复性涉及氢键的断裂与形成 10. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖熔化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解 C. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶 D. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 11. 基因PCR定点突变是蛋白质工程的重要技术，该技术需要设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过PCR将突变位点引入到产物中。重叠延伸PCR是发展最早的定点突变技术，其操作流程如下图所示。下列分析错误的是（ ） A. 步骤⑤中如果完成6轮循环一共需要消耗63个引物1 B. 蛋白质工程可以创造新的、自然界中不存在的蛋白质 C. 步骤④使用DNA聚合酶可对杂交分子甲和乙进行延伸 D. 应将引物1、2与引物3、4置于两个独立的反应体系中 12. 对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。下列有关蛋白质工程的说法，正确的是（ ） A. 基本思路首先是推测氨基酸序列，再设计预期蛋白质的结构 B. 需要在分子水平对蛋白质中的氨基酸进行操作 C. 需充分考虑蛋白质的空间结构，确保改造后能正确折叠 D. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 13. 下列关于生物技术的安全性与伦理问题的说法，正确的是（　　） A. 可导入α-淀粉酶基因使花粉失去活性，防止基因污染 B. 只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用 C. 治疗性克隆主要用于治疗疾病，不存在伦理问题 D. 为维持人类和平，可在一定程度上发展生物武器 14. Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因，筛选Bt基因后可以利用PCR技术对其进行大量扩增，下图为抗虫棉的培育过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. Bt基因的筛选与获取是基因工程的核心步骤 B. 以上导入目的基因的方法是农杆菌转化法，农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可转移 C. 如果把目的基因整合到线粒体DNA或叶绿体DNA上，可能导致后代目的基因丢失 D. 检测目的基因是否成功表达所用的分子水平上的方法可以为抗原—抗体杂交 15. 根据图示判断下列有关显微镜操作的实验的叙述，错误的是（ ） A. 若将图②中的细胞移到视野中央，应将装片向右下方移动 B. 若图①镜头由a转换成b，则视野中观察到的细胞数目增多 C. 若将图④中图像再放大4倍，则最多只能看到2个完整细胞 D. 高倍镜下观察到的图③中细胞质实际流动方向也是逆时针 二．不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 《选择健康》一书中提出：“人类并无成百上千种疾病，人类的疾病只有一种，那就是细胞病。”从细胞学说角度来理解这一观点，说法不正确的是（ ） A. 细胞学说使千变万化的生物界通过细胞这一共同结构统一起来，体现了细胞多样性 B. 细胞学说揭示了动物与植物的统一性，使人们认识到细胞是动植物生命活动的基本单位 C. 细胞学说认为细胞分为原核细胞与真核细胞 D. 一切生物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成 17. 支原体肺炎是由肺炎支原体引起的急性肺部感染性疾病。青霉素和头孢菌素类抗生素作为广谱抗菌药通过抑制病原体细胞壁的形成达到杀菌效果。下列叙述正确的是（ ） A. 支原体自身的蛋白质均在宿主细胞的核糖体上合成 B. 支原体与流感病毒最本质的区别在于有无细胞结构 C. 支原体在生命系统的结构层次中属于两个结构层次 D. 临床上可以用青霉素和头孢菌素来治疗支原体肺炎 18. 为解决农业玉米秸秆资源化利用问题，科研人员从农田土壤中筛选高效纤维素降解菌（属于细菌），下列叙述不正确的是（ ） A. 培养基以纤维素为唯一碳源，属于鉴别培养基，可直接筛选区分降解菌与杂菌 B. 为加速菌株筛选，可将培养基pH调至酸性，促进纤维素分解菌的快速繁殖 C. 培养基加入刚果红染液后灭菌倒平板，纤维素降解菌落周围会出现透明圈 D. 接种操作在超净工作台上进行，应完全打开培养皿盖，快速完成接种 19. 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种对猪群具有高度传染性的病毒。GP3蛋白是PRRSV的重要抗原之一，能够诱导宿主产生特异性的免疫应答。为了对PRRSV进行快速检测，科研人员制备了PRRSV-GP3蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列分析不正确的是（ ） A. 将GP3蛋白注射到小鼠体内是为了获取能分泌抗GP3蛋白抗体的B细胞 B. 培养细胞乙的培养基通常是加入了血清等天然成分和糖类、氨基酸等的固体培养基 C. 细胞丙中有融合的具有同种核的细胞和能合成抗GP3蛋白抗体的杂交瘤细胞 D. 第2次筛选可用多孔板对单个的杂交瘤细胞进行培养及抗体检测 20. 科学家对某质粒用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶进行酶切后，再利用琼脂糖凝胶电泳得到下图所示图谱（其中1号泳道是标准DNA样品的电泳结果，2号、3号、4号泳道分别是用EcoRⅠ单独处理SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果）。下列说法正确的是（ ） A. DNA片段的扩增及电泳鉴定时，接通电源后，看到DNA条带迁移至凝胶边缘时，停止电泳 B. 在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 C. 由图可知该载体DNA分子中两种限制酶的酶切位点共有两个 D. 在凝胶中DNA分子迁移的速率与凝胶浓度和DNA分子大小有关 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 尿素含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题： 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 含量（g） 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 操作将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升 （1）上表是尿素分解菌的选择培养基配方，选择培养基是指______。本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板。设置前一组的平板上如果______，说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果______，可以说明选择培养基具有选择作用。 （2）将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释104倍，按图[    ]______（填数字及名称）接种方式将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出每克土壤中的尿素分解菌活菌数约为______个。 （3）分解尿素的细菌能合成脲酶，催化尿素分解产生的可以作为细菌生长的氮源。如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，根据功能划分该培养基属于______培养基。 （4）土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，如圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为，请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否是固氮菌。（写出简要思路及预期结果）______。 22. Ⅰ、下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。 Ⅱ、银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。 请回答下列相关问题： 外植体愈伤组织试管苗植株 （1）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是________。 （2）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括PEG融合法和_________。 （3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种细胞融合成功的标志是_______，植物体细胞杂交技术的重要意义是______。 （4）外植体的选择不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在___________（灭菌/消毒）时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用___________多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。为获得银杏的次生代谢产物，________（需要/不需要）走完上述流程图的全过程。 （5）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是___________胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （6）学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是_______。不过其生根数量较少且根长较短，可能的原因是_________。 23. 单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体的缺点是____________。 （2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出__________，筛选出的细胞具有的特点是____________________，筛选②的目的是筛选出____________________ （4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 24. Ⅰ.科研人员为获得可用于生产基因工程的疫苗，将病毒外壳蛋白基因导入猪体细胞中，然后通过核移植技术培育转基因猪，具体操作过程如图所示。回答下列问题： （1）在收集A细胞时需要用_________处理1号猪，在体外培养到_________时期。为了使胚胎能够成功移植到2号猪子宫内，需要对2号猪进行_________处理。 （2）该转基因猪的培育过程运用了动物细胞培养、_______和__________等技术。 （3）若想要对移植的胚胎进行分割，应选择_______期进行操作。 （4）随着试管婴儿技术的发展，世界各地诞生的试管婴儿数量迅速增长，试管婴儿技术中有时需要对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效、准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个_________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎性别为_________。 25. 研究发现，双斑蟋蟀中的Gbdsx基因对雄性发育至关重要，且只在雄性中表达。为验证Gbdsx基因在雄性中的特异性表达与其启动子受雄性中存在的物质X的调控，科研人员构建了含有Gbdsx-RFP融合基因的转基因大肠杆菌，Gbdsx基因和质粒部分结构如图所示。 （1）可利用PCR特异性地快速扩增Gbdsx基因，据图分析，需选择________作为本实验的引物，引物的作用是________。 （2）为目的基因能够与质粒正确相连，需要在引物的________（填“3’端”或“5’端”）添加限制酶识别序列，在F引物添加的序列所对应的限制酶是________，在R引物添加的序列所对应的限制酶是________。 （3）将重组质粒转入大肠杆菌过程中，一般选用________处理大肠杆菌。科研人员用含有氨苄青霉素的培养基接种处理后的大肠杆菌，________（填“能”或“不能”）筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。若要证明实验目的，还应进行的操作和实验结果分别是：________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $