广东省肇庆市宣卿中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

保密★启用前 肇庆宜卿中学2025-2026学年第二学期期中考试 高二年级生物学科 命题人：袁珊珊 审题人：黄学钊 考试时间：75分钟满分：100分 注意事项： 1答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位阻上。 2回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需 改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选栉题时，将答案写在铬题卡上。写 在本试卷上无效。 一.选择题：本题共16小题，共40分。第1-12小题，每小题2分，第1316小题，每小题 4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合要求的。 1.将纤维素、半纤维紫预处理和酶解后，利用某大肠杆菌菌株无氧发酵产乳酸的过程如图。 阻断该菌株产乙酸（或乙醇）的代谢途径，构建了高产乳酸工程菌。相关叙述错误的是() →葡萄菇一+丙酮酸+乳酸 纤维素、预处理，碎解可发砖糖一 半纤维来 乙秘确政乙欧（或乙醇） ·五碳馆 ,丙酮酸→乳酸 A.敲除乙酸（或乙醇）代谢途径中相关酶的基因 B.可将纤维素酶基因等导入工程菌以简化生产环节 C.葡萄糖可为大肠杆菌提供碳源 D.发酵过程中保证充足的氧气以代谢生产乳酸 2.从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液→分离→纯化→鉴定。 下列叙述正确的是（) A.采集的土壤样品需高压蒸汽灭菌 B.纯化培养应使用液体培养基 C配制培养基时应先灭菌再调节pH D.根据菌落特征初步鉴定致病茵 3.去除植物源饲料中的单宁（含碳有机物）可提高动物对蛋白质和矿物质等营养成分的 利用效率，降低养殖成本。研究发现，家蚕肠道中的微生物可高效降解食物中的单宁，研 究人员欲从家蚕肠道中筛选单宁降解菌，筛选过程如图所示。下列叙述错误的是( ) 家蚕肠递 按种 样品 化 A.培养基甲和乙都应当以单宁作为唯一碳源 B.设置培养基甲的目的是增大单宁降解菌的数址 培诈：甲 拼养搭乙 C.培养基乙的接种方法可对微生物进行分离并计数 D.培养基乙上获得的潮落的形状、颜色和光泽相同 高二年级生物第1页共8页 4.背徭素可采取液体发辩方式以宵霉南（一种需氧、多细胞丝状真菊)为生产菌株进行 生产，过程中操作不当的是(） A.用诱变或基因工程等途径得到的南种进行接种B.监控pH、温度、溶解每等参数 C、用血细胞计数板实时监测活潮数越 ”D.用大肠杆南为指示菌监测青露素产量 5.牧草紫花首蓿富含蛋白，但易道成家音鼓胀病。百脉根富含的单宁可结合蛋白，避免 鼓胀病。科学家以二者为材料培育了抗鼓胀病的牧草新品种，如图所示。下列叙述错误的 是(）「 花首蓿原生质体间R·6C必处理 →诱导融合→杂种细胞团一愈伤组织杂种植株 百咏根原生质体 用IOA处翅 注：10A抑制细胞呼吸第一阶段，R-6G抑制线粒体功能，两者均为不可逆抑制 A.为获得原生质体，带要在含有体细胞的清水中加入适量的纤维素酶和果胺酸 B.PEG诱导原生质体融合后，未触合或同种融合的细胞无法继续生长和增殖 C.愈伤组织在固体培养基和黑暗条件下培养，可发生基因的选择性表达 D.该过程克服了远缘杂交不亲和的障碍，实现了基因组的重组，但不属于有性生殖 6.为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多)进行了如图所示 的研究，下列叙述正确的是（ 移执到子宵 (乙) 传勰用技移拉，太快哪细幽发有 →胚胎死亡 (乙) 養胚① 内细胞团 移入了官（乙） 克座动物 卵母细胞（乙）体外受精、发有 特子（乙） 蕤胚③ 骛压② 滋养层 A.克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B.体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细饱受料 C.囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D.滋养层可影响内细胞团的发育 7.牛的体细胞有两套染色体组，基因组编辑困难且耗时长，严重制约育种效率。我国科 研人员利用牛精子和去核卵母细胞建立了孤雄单倍体干细胞系，其后将干细胞快速“压缩” 成类似精子的结构，导入正常卵母细胞后形成重构胚，最终培育出二倍体健康牛。下列叙 述错误的是（ .单倍体干细胞有分化成多种细胞的潜能B.单倍体平细胞更易进行基因组编辑 C.该有种策略涉及两次显微操作去核 D,该育种策路可缩短牛的南种周期 8.我国自主研发的全球首款“异体通用型”药品，含人异体诱导多能干细胞（PS)再生 的将髓神经祖细胞注射液，可改善脊髓损伤患者的运动功能。该药研发过程不涉及( A.胚胎干细胞的伦理争议 B.细胞的原代和传代培养 C,给药后免疫排斥的监测 ,D.调控基因的选择性表达 高“年级生物第2页共8页 9,关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”（实验II)的实 验操作，下列相关叙述正确的是（) A.实验1中，PC实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等须进行高压灭菌处理 B.实验I中，将扩增得到的P℃R产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C.实验Ⅱ中，取洋葱研摩液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D.实验IⅡ中，将白色丝状物直搂加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴DNA 1O.在DNA高通量测序中，通常要在目标DNA片段上添加一段人工合成的特定核苷酸序列， 用于为测序引物提供结合位点。该人工合成序列一般连接在目的DNA片段的() A.两端的5'B.两端的3 C.一端的5'和3' D.两端的5'和3 11.发根农杆菌能够快速将自身含有的Ri质粒上T-DNA片段（含生长素合成基因）转移 至植物细胞中，诱导植物产生毛状根。利用发根农杆菌介导法侵染植物下胚轴，可高效导 入目的基因（见图）。下列说法错误的是( 胚 ● a.切下胚触 b.侵染 c.脱茵培养 A.细胞内生长素浓度改变有利于下胚轴细胞形成毛状根 B.侵染处理时应设置只含发根农杆菌的侵染液作为对照 C.傻染处理后转移至含抗生素的培养基杀死残留农杆菌 D.利用毛状根诱导植株再生获得稳定遗传的转基因植株 12为制备抗甲肝抗原的人源单克隆抗体，从病鸯携带者的淋巴细胞获取抗体基因，通过 基因工程使抗体展示在噬菌体表面，从中筛选携带目标抗体的噬菌体克隆。此过程中不器 要的步骤是( A.设计物，通过PCR获取抗体基因 B.将分腐的B细胞与骨髓瘤细胞融合并節选 C,构建抗体基因一噬南体表面蛋白基因融合基因 D.通过抗原一抗体杂交对噬菌体抗体库进行筛选 13.科技社同学为证明细菌耐药性突变是产生在接触抗生紫之前而非抗生崇诱导产生的， 设计如图的实验技术路线并得到下表结果。下列叙述正确的是( 一半放入大 恒 分别接种等： 试管中 嫩到培养基， 夹取含抗生寮 活化的 一半分装至 培 的圆纸片翼于 养 菌液 若干小试管 00- 培养基中央 测金®（抑崩图）的直径 图2 高二年级生物第3贝共8贝 大试管结果（I) 小试管结果(I1) 抑菌圈直径方差 c d 注：方差可反映数据的波动程度。方差越大，数据波动越大。 A.本实验可以采用平板划线法将细菌接种到培养基上 B.a中细菌较早产生耐药性变异造成抑菌圈的直径a>b C.耐药性突变同步发生造成I中的抑菌圈直径儿乎相同 D.c<d可说明细菌耐药性突变是在接触抗生素前产生的 14.下图为PM蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是( 空质粒 含A沿華因 的重组质粒 w细胞⊙ ○髓瘤细胞 步骤1 !提取蛋白 C 步骤2 28品 高纯匿 总蛋白 ML蛋白 2 步骤3 函 分故稀培来 注：表示该孔中存在对应蛋白的抗体，~表示设有对应抗体 A.应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B.W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C.步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D.应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 15.双脱氧核苷酸(dNTP)的分子结构与脱氧核苷酸(dNTP)高度相似（如图所示)。 ddNTP在DNA复制过程中子链延伸时会随机地插入，进而导致子链合成终止。现有ddATP 和4种dNTP为原料，以一定量的“5'-ATAGGCCTAGA-3'”为模板链进行一轮DNA复制。 有关说法错误的是（) 碱基 (A/G/C/T X在ddNTP中表示H X在dNTP中表示OH A,ddNTP和dNTP都可脱去两分子磷酸为反应体系提供能拴和原料 B.ddNTP的3'C位置上缺少-O1,因此复制中不能与下一个核苷酸连接 C.该过程需要具有DNA聚合酶，其沿着模板移动的方向为5'→3' D.在该反应体系中，该轮复制生成的产物有3种，最短的是5'-TCTA-3 高二年级生物第4页共8页 16.研究表明，C0X-2基因与肿瘤细胞的迁移有关，科研人员通过构建C0X-2基因表达载 体（如图)，用于进一步研究C0X-2基因表达产物对肿瘤细胞迁移的作用机制。图中1链 为转录的模板链，Bamll I、Sac】为限制酶识别序列，LacZ基因表达产物可使显色剂X-gaI 变蓝。下列说法正确的是( 启动子 LU1基因 Sac 1 1每 ◆C0X-2并因· 终止子 质粒 2 虹羊青霉素 抗性基因 A.通过P℃R扩增C0X-2基因片段，箭要1入引物A和引物D B.为构建C0X-2表达载体，箭在与1链结合的引物的5'端添加BamH【识别序列 C.在含氨苄青霉券的培养基中能生长的是含重组质粒的菌落 D.在含X-gal培养基中长出的蓝色菌落含重组质粒 二.非选择题：本题共5小题，共60分。 17.(16分)基因递送是植物遗传改良的重要技术之一，我国多个实验室合作开发 了一种新型基因递送系统（切一浸一生芽Cut-Dip-Budding,简称CDB法)。图I 与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。 杭株B 植株A 切断根茎 连接处 外杭困 植株上米部分侵入含 ®伤纽红 里组载体的农杆菌茵液 盆栽 愈伤组织与含重组载 梢株长出毛状根 休的农杆闲共培养 筛选剪切 生芽、生根 性毛状根段 筛选 生芽盆栽 刨函 幼笛 转化植状A 转化植株B 回答下列问题。 图1 图2 (1)图】中，从外植体转变成愈伤组织的过程属于 从愈伤组织到幼苗 的培养过程需要的激素有生长素和 该过程还带要光照，其作用是 (2)图1中的愈伤组织，若不经过共挤养环节，直接诱导培养得到的植株可以保持植 株A的 一--。图1巾，含有外源基因的转化植株A若用于生产种子，其包装 湍标注」 (3)图1与图2中，农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因 是 裕年级生物第5页共8页 (4)已知某酶(PDS)缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS基因的 CRISPR/Cas9基因编辑载体（含有绿色荧光蛋白标记基因），利用图2中的CDB法将 该重组载体导入植株B,长出毛状根，成功获得转化楨株B。据此分析，从毛状根中 获得阳性毛状根段的方法是 -，图2中，鉴定导入幼 苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是.…一… 依据是 (⑤)与常规转化法相比，采用CDB法进行基因递送的优点是 一 (答出2点即可)。 18.(12分)赖氨酸是人体不能合成的必箭氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含 量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含魁。回答下列问题： (1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性， 导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于 。根据 这种调节方式，在培养基中添加 ,用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞， 可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。 (2)随着转基因技术与动物细胞工.程结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细 胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为： ①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因 (目的基因)，可通过检索基因数据库获取其编码序列，用化学合成法制备得到。 再将获得的且的基因与含有 等调控元件 的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。 ②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞(BEF)。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体 内，与BEF膜发生 ,表达载体最终进入细胞核，发生转化。 ③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养 及去核后作为 -。将两种细胞进行电融合，电融合的 作用除了促进细胞融合，同时起到了 重组细胞发育的作用。 ④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至 植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。 ⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以 为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA 水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因 牛耳组织细胞，提取总RNA,对总RNA进行一-一-一- 处理，以去除DNA污染，再 经逆转录形成cDNA,并以此为 ,利用特定引物扩增目的基因片 段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞 内表达，原因是 高二年级生物第6页共8质 19.(12分)用化学方法激活小鼠成熟的卵母细胞得到phESC（孤雌单倍体干细胞)， 然后通过基因编辑技术使phESC中的3个基因沉猷，phESC的细胞核状态便可接近精 子细胞核的状态，如下图1所示。用化学方法激活小鼠的精子得到ahESC(孤雄单倍 体干细胞)，然后对ahESC中的8个基因进行编辑，ahESC的细胞核便具有卵细胞 核的特点，如下图2所示。根据以上资料回答下列问题： 孤雄 孤雕 去核卵细胞。小鼠 培养 基因 小解 培养 转化 转化 暴因广）3 卵母 phESC 具有榜子细胞核 精子 ahESC 具有卵细胞核 细胞 特点的phESC 特点的ahESC 图1 图2 (1)体内受精过程中，防止多精入卵的两道屏障是： 精子入卵后被激活的卵子完成 ,排出 后，形成 (2)用 对雌性小鼠进行处理可得到大量卵母细胞，将这些卵母细胞转化 为phESC的过程相当于植物组织培养中的 过程。 (3)ahSC与精子和去核卵细胞触合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是 (4)据图1和图2分析可知，只依赖雌性小鼠就可以得到孤雌小鼠，而只依赖雄性小 鼠是不能得到孤雄小鼠的，理由是 20.（10分)农杆菌能侵染真菌，介导真菌细胞的转基因。3-磷酸甘油脱氢酶是假 丝酵母中甘油合成代谢途径的关键酶，将3-磷酸甘油脱氢酶基因（G印d)构建到表达 载体上，如图1所示。通过农杆菌介导法，转化假丝酵母野生型菌株，获得钟Gd 的重组菌株。野生型菌株与某重组菌株分别进行发酵实验，生产甘油的结果如图2 所示 HlndⅢ 一爵一查组过株 底 ◇一野生型菌株 Hnd oR a00-00 Kan 时间 图1 图2 注：Zeo"是腐草疆素抗性基因，Kan是卡那釋素抗性基因 回答下列问题： (1)表达载体导入农杆菌细胞：用CaC2浴液处理农杆菌，制备 再用电击法将表达载体导入农杆菌细胞，经筛选获得阳性克隆。为验证阳性克隆是 高二年级生物第7页共8页 否为转化成功的农杆菌，从繁殖后的前株细胞中提取质粒，经 限制酶 酶切后电泳，若出现4条DNA条带，则表明转化成功。 (2)假丝酵母重组蘭株的获得：在 中的酒精灯火焰旁，取野生型假丝酵 母菌种，采用 方法接种在周体培养基上培养，适时挑选 再接种到液体培养基进行培养。取适量的假丝酵母与农杆菌进行共培养一段时间后， 杀灭农杆菌，然后在含有 的选择培养基巾筛选，敬终获得重组菌株。 (3)重组菌株生产甘油能力的分析：根据图2可知，与野生型菌株相比，该重组菌株 用于发酵生产甘油的2个优点是 。 若某生长正常的重组菌株 发酵液中甘油的含盘显著低于野生型菌株，从引起变异的因素分析，可能的原因有： 在培养过程中重组菌株发生了突变，或 ，导致甘油合成代谢受阻。 21.（10分)大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。 我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN(种子较大)中的表达量高于品种TL（种 子较小)，然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序 列，并开展相关研究。 ①表达载体 限制酶识别位点 ②启动子D+基因S (HindIll,Spel,EcoRI,Xhal) 5C…TAGAATTCCA…3 终止子 3'…ATCTTAAGGT…5 T-DNA ③四种限制酶识别序列及切割位点 HindIII: Spe I: EcoRI: Xbal: S'AAGCTT3'S'ACTAGT3'5'GAATTC3'STCTAGA3 3TTCGAAS'3TGATCAS'3'CTTAAGS'3'AGATCTS' 注：箭头表示酶的切割位置 (1)基因S启动子的基本组成单位是 (2)通过基因工程方法，将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大 豆品种YZ。根据题图所示信息（不考虑未标明序列)判断构建重组表达载体时，为 保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是 -一一；此外，不宜同时选用 酶SpeI,和XbaI,原因是 (3)为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体.上，可用限制酶对重组表达载体 酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有 经验证的重组表达载体器转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是 (4)用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克 隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ,所得再生植株Y2-2的种子也变大，但小 于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是 高二年级生物第8页共8页