山东枣庄市薛城区2025-2026学年高二下学期期中生物试题

**基本信息** 聚焦微生物工程、基因工程等核心模块，以流感疫苗生产、微塑料降解等科技前沿情境和固氮菌计数、双抗制备等实验探究为载体，实现基础与能力的梯度考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择题|15/30|微生物培养、细胞工程、胚胎工程|基础概念与情境结合，如果醋制作流程分析（第1题）| |不定项选择题|5/15|微塑料降解、原生质体培养、DNA测序|图表分析与实验设计，如混合菌种降解效率比较（第16题）| |非选择题|5/55|固氮菌分离、核移植、基因工程|实验探究与工程应用，如双特异性抗体制备流程（第23题）|

试卷类型:A 高 二 生 物 2026．4 一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 某同学利用蓝莓果实制作果醋，图示其操作的简易流程。下列相关叙述正确的是（ ） A．果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同 B．过程①中添加适量果胶酶，有利于提高出汁率 C．过程②中，为使菌种充分吸收营养物质，需每日多次开盖搅拌 D．过程③发酵时会产生大量气泡，需拧松瓶盖放气 2. 微生物相关实验中需要进行灭菌或消毒操作。实验操作者的双手、培养基、接种环、超净工作台、牛奶，分别采用的灭菌或消毒方法依次是（ ） ①化学药物消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法 A.④⑤②③⑥ B.⑥⑤②④⑥ C.①⑤②③⑥ D.①⑤②④⑥ 3. 在分离、纯化酵母菌实验中进行的两种接种方法的培养结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是（　　） 甲 乙 A.甲需要使用接种环，乙需要使用涂布器 B.甲结果不能用于计数，乙结果可以用于计数 C.甲接种后需要将培养皿倒置，乙不需要 D.甲、乙接种目的都是获得单个细胞形成的菌落 4. 猕猴桃醋生产的基本工艺流程如下，其中①②③表示发酵的三个环节，糖化是将淀粉转化为葡萄糖的过程。下列叙述错误的是（ ） A.通过蒸煮可以杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物 B.麸曲中曲霉的主要作用是对糖类进行氧化分解 C.环节③需要通入无菌空气 D.①②③都需要控制温度、pH 等条件 5. 青霉素可采取液体发酵方式以青霉菌（一种需氧、多细胞丝状真菌）为生产菌株进行生产，过程中操作不当的是（ ） A. 用诱变或基因工程等途径得到的菌种进行接种 B. 监控pH、温度、溶解氧等参数 C. 用血细胞计数板实时监测活菌数量 D. 用大肠杆菌为指示菌监测青霉素产量 6. 下图是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程。下列叙述正确的是（　　） A．去除细胞壁产生原生质体需要纤维素酶和胶原蛋白酶 B．促进原生质体融合可以使用灭活的病毒 C．杂种细胞再生出细胞壁是融合成功的标志 D．愈伤组织发育成杂种植株需要经过脱分化和再分化 7. 下列关于干细胞的叙述，正确的是（ ） A.已分化的T细胞能被诱导为iPS细胞 B.造血干细胞可以分化为各种细胞 C.干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 D.向人体移植iPS细胞不会产生免疫排斥反应 8. 利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞—XF06。下列叙述错误的是（　　） A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B.细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D.采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 9. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，正确的是（ ） A.卵裂期细胞数量和胚胎的总体积都在增加 B.桑葚胚阶段细胞开始分化，细胞失去全能性 C.囊胚的内细胞团将来发育成胎膜和胎盘 D.囊胚经过孵化阶段后，将发育形成原肠胚 10. 下列关于胚胎移植的叙述，错误的是（ ） A.“受体”的性别不受限制，但是需要进行同期发情处理 B.可以通过转基因、核移植或体外受精等方式获得“供体”的胚胎 C.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 11. DNA分子中腺嘌呤可能会被甲基化酶修饰。不同的限制酶对识别序列中腺嘌呤的甲基化前后的切割的影响如表所示。下列叙述正确的是（    ） 限制酶 识别序列 腺嘌呤甲基化前 腺嘌呤甲基化后 TaqⅠ 5'-T↓CGA-3' 切割 不切割 DpnⅠ 5'-GA↓TC-3' 不切割 切割 ClaⅠ 5'-AT↓CGAT-3' 切割 不切割 BamHⅠ 5'-G↓GATCC-3' 切割 切割 A．DNA腺嘌呤的甲基化不会影响基因的表达 B．ClaⅠ所识别的序列，都能被TaqⅠ识别并切割 C．含有5'-G↓GATCC-3'序列的DNA片段中各碱基是否甲基化不影响BamHⅠ对其切割 D．用不同限制酶切同一DNA片段，甲基化前后可被切割的位点数可能相同 12. 载体是基因进入受体细胞的“分子运输车”，下列叙述错误的是（ ） A.可作为载体的质粒只能是来自原核细胞的拟核外的环状DNA B.载体上的限制酶切割位点用来插入外源DNA片段 C.噬菌体和动植物病毒都可以作为载体，但是受体细胞有差异 D.载体上的复制原点能够结合解旋酶和DNA聚合酶 13. 科研人员构建的某重组质粒如图所示，甲、乙、丙表示3条引物及其在重组质粒中的相应位置，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因。下列叙述错误的是（ ） A.构建成功的重组质粒还应该包含启动子、终止子和复制原点等组件 B.使用引物乙、丙进行PCR扩增，能够检测目的基因是否正向连接 C.若受体菌在含有氨苄青霉素的培养基中正常生长，可确定目的基因已转化成功 D.若目的基因未导入，使用引物甲、丙进行PCR扩增，也会有扩增产物 14. 下图是某兴趣小组PCR产物琼脂糖凝胶电泳的结果。下列分析错误的是（　） A．凝胶加样孔应在A端，且A端应连接电源的负极 B．1号和2号泳道的DNA片段具有相同的碱基排列顺序 C．凝胶中的DNA分子被染色后可在波长300nm的紫外灯下被检测出来 D．制备凝胶时，核酸染料需要在琼脂糖熔化冷却后、倒胶凝固前加入 15.下列关于生物技术安全和伦理问题的叙述，错误的是（ ） A.反对设计完美婴儿 B.反对人的生殖性克隆 C.禁止生物武器的使用 D.禁止转基因技术的应用 二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错的得0分。 16.微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（ ） A．用平板划线法能测定x菌组中的活菌数 B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 17.科研人员研究某种红豆杉的细胞悬浮培养和原生质体培养方式对合成紫杉醇的影响，甲组为细胞悬浮培养，乙组为原生质体的液体静置培养，丙组为琼脂糖包埋后的原生质体悬浮培养。三组的培养基相同，其中乙、丙两组另加细胞壁合成抑制剂等，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A.比较甲和丙，丙组的培养方式有利于原生质体的增殖、从而提高紫杉醇总产量 B.比较乙和丙，丙组的培养方式有利于应用到发酵罐进行紫杉醇的生产 C.丙组中琼脂糖凝胶的作用是持续为原生质体供应碳源 D.上述实验表明细胞壁完整有助于紫杉醇的合成与积累 18.为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是（ ） A.克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B.体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精 C.滋养层细胞可影响内细胞团的发育 D.滋养层可用于做DNA分子鉴定胚胎性别 19.下面有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ） A.新鲜的洋葱、香蕉、菠菜、猪血、猪肝都是理想的实验材料 B.洋葱研磨液用纱布过滤后可以经离心后去取上清液 C.向上清液中加入预冷的体积分数为95%的酒精是为了析出DNA D.向收集的丝状物中直接加入二苯胺试剂，溶液会呈现出蓝色 20.ddNTP（N代表A、T、C、G）表示四种双脱氧核苷三磷酸，其组成结构中脱氧核糖的3’位无羟基，无法形成磷酸二酯键，当以该物质作为DNA复制的原料时，会导致 DNA 链延伸终止。科学家可依据此原理进行DNA的测序。DNA测序时，先将待测单链DNA模板、引物、有关酶、4种脱氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G）均加入4个试管中，再分别加入ddNTP。ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸，从而形成不同长度的DNA片段，分离4支试管中所有DNA片段，分泳道进行电泳，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A.ddNTP不能形成氢键，dNTP可以形成氢键 B.该PCR反应体系中需要加入2种引物、1种酶 C.电泳过程中，DNA片段越小迁移速率越快 D.待测模板链的碱基序列为5’-CTATGCATA-3’ 三、非选择题：本题共5题，共55分。 21.（11分）自生圆褐固氮菌是异养需氧型微生物，能够利用大气中的N2，并将其还原为氨。某生物兴趣小组进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力的鉴定研究。 （1）想获得圆褐固氮菌的菌种最好选择________（填“表层”或“深层”）的土壤。自生固氮菌利用氮元素可合成体内的化合物有___________（写出2种）。 （2）某同学将获得的某固氮菌液进行梯度稀释，吸取104稀释倍数的菌液各0.1mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为10、15、20，该同学以平均菌落数15进行计数，求得原菌液固氮菌的浓度为___________个/mL。老师认为该同学的计数方法不正确，原因是__________________________。 （4）为了进一步筛选高效固氮菌，不同小组将获得初步筛选得到的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，利用细菌计数板对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下： 甲菌 乙菌 丙菌 丁菌 菌量（个/mL） 6.1×105 1.5×105 7.4×105 2.0×105 含氮量（K） 3.32 5.34 4.38 5.36 利用上述方法对固氮菌进行计数时，统计的结果往往比活菌的实际数目偏_____（填“大”“小”或“无法确定”）。依据上表中的结果分析，_________菌的固氮效率最高。 22.（11分）我国科学家经过多年反复试验，可以在10S之内对卵母细胞进行操作，在15S之内将体细胞核注入去核的卵母细胞里，成功培育体细胞核移植食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示相关过程，回答下列问题： （1）科学家可以利用胚胎工程培育试管猴和克隆猴，前者的生殖方式属于_____（填“有性”或“无性”）生殖。体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是 _____________________________________。 （2）过程①通常置于含有_____________的混合气体的CO2培养箱中进行培养，期间需要定期更换培养液，目的是___________。 （3）激活重构胚分化潜能调控基因A的表达，是克隆成功的关键。为了激活基因A的表达，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理重构胚。据此分析，组蛋白脱乙酰酶可以______（填“促进”或“抑制”）基因A的表达。向重构胚注入Kdm4d的mRNA，其发挥作用的机理是____________________________________________________。 23.（11分）肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3是T细胞表面的标志性抗原。科研人员制备双特异性抗体EGFR/CD3，可招募T细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如图1所示。 图1 （1）细胞A表示___________。细胞B与细胞A融合前，___________（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞B数量。若步骤②可以使用化学试剂_____________促进细胞融合。 （2）核苷酸合成有两个途径，如图2所示。骨髓瘤细胞只能利用全合成途径进行无限增殖，B淋巴细胞两种途径都能进行。 图2 现利用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”对图1中的细胞进行筛选，能够在“HAT 培养基”上正常增殖的细胞是______________________。图1中能够分泌双特异性抗体的细胞是经步骤__________（填序号）筛选获得的细胞。双特异性抗体治疗肿瘤的效果往往优于EGFR抗体和CD3抗体的联合使用，原因是_________________________________。 24.（11分）限制酶被称为基因工程的“分子手术刀”。下图为三种限制酶及其识别的序列，回答下列问题： （1）DNA分子经限制酶切割可产生两种形式的DNA片段末端，经图中限制酶切割后产生平末端的限制酶是__________。经限制酶BamHⅠ切割后产生的黏性末端序列是5’-_______________-3’。 （2）某质粒的两个位点上分别含有1个限制酶BamHⅠ和1个限制酶Sau3AⅠ的酶切位点，若用Sau3AⅠ对该质粒进行完全酶切，会产生________个DNA片段，将产生的片段重新连接成新的质粒，则该质粒____________（填“能”、“不能”或“不一定能”）被限制酶BamHⅠ重新切开。 （4）限制酶BsmBⅠ具有偏移剪切特性（切割位点在识别序列之外），利用BsmBⅠ可以实现多DNA片段的无缝连接。下图表示利用BsmBⅠ将M基因和N基因连接形成融合基因的过程，F1、F2、R1、R2表示引物。 若用BsmBⅠ切割DNA片段，理论上可产生的黏性末端最多有__________种。若M基因两端的碱基序列为5’-CATCGGACT……TTGTACTCG-3’，已知引物R1的碱基序列为5’-CGTCTCNcgagTACAA…-3’（小写字母表示接头序列），则引物F1的序列可以设计为5’-______-3’（写出所有已知序列）。 25.（11分）大豆中转录调控因子Y蛋白可以和某些基因启动子序列结合，促进其表达。研究人员通过逆转录PCR获得Y基因并与改造后的Ti质粒上的绿色荧光蛋白基因（GFP）进行拼接获得融合基因。成功表达的Y—GFP融合蛋白可用于Y蛋白调控机理的研究，回答下列问题： （1）图中的Y基因中___________（填“含有”或“不含有”）启动子和终止子序列。研究中首先要对Y基因进行PCR扩增。PCR反应要在一定的缓冲液中进行，缓冲液中一般需要加入Mg2+，其作用是_________________。 （2）为将扩增后的产物定向插入载体，切割Ti质粒应该选择的限制酶是___________。为使Y基因正确接入载体并成功表达出Y—GFP融合蛋白，PCR扩增Y基因时应通过设计引物去除_______________对应的序列。为了使目的基因在酶切后能够与载体正确连接，需要在引物的5’端添加限制酶________________的识别序列。 （3）将初步构建的Y—GFP基因表达载体导入大豆细胞后，在加入___________的培养基中筛选得到三个不同细胞系，对这三个细胞系的总蛋白进行抗体检测，电泳结果如图2所示。其中细胞系___________最可能成功表达出Y—GFP融合蛋白。 高二生物试题 第5页 共8页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物试题参考答案 2026.04 一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1-5 BDCBC 6-10 CABDA 11-15 DACBD 二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错的得0分。 16.C 17.ACD 18.CD 19.BC 20.CD 三、非选择题，共5道题，共55分。 21.（11分） （1）表层（1分） 蛋白质、核酸、磷脂等（其他合理亦可）（2分） （2）1.5×106 （2分） 所选稀释倍数的平板的菌落数不在30-300之间（2分） （3）大（2分） 乙（2分） 22.（11分） （1）有性（1分） 胚胎细胞的分化程度低，细胞核的全能性更高（或体细胞核分化程度高细胞核的全能性低）（2分） （2）95%空气和5%CO2 （2分） 清除代谢废物（2分） （3） 抑制（2分） mRNA翻译合成Kdm4d，Kdm4d促进基因A的表达（2分） 23.（11分） （1）骨髓瘤细胞（1分） 不需要（2分） 聚乙二醇（PEG）（2分） （2）单克隆杂交瘤细胞、双杂交瘤细胞（2分） ⑤（2分） 双特异性抗体可以同时结合EGFR和CD3，促进癌细胞与T细胞的聚集与结合（2分） 24.（11分） （1） SmaⅠ（1分） GATC （2分） （2） 2（2分） 不一定能（2分） （3）256（2分） CGTCTCNcatcGGACT（2分） 25.（11分） （1）不含有（1分） 激活耐高温的DNA聚合酶（1分） （2）Sau3AⅠ、EcoRⅠ（2分） 终止密码子（2分） MunⅠ、BamHⅠ（2分） （3）潮霉素 （1分） 1（2分） 学科网（北京）股份有限公司 $