精品解析：山东阳信县第一中学等校2025-2026学年高二下学期5月阶段性检测卷生物试题

山东高二5月阶段性检测卷 生物试题 考试时间为90分钟，满分100分 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 《尚书·说命》中有“若作酒醴，尔惟曲蘖”的记载，其中的“曲”指含有酵母菌等菌种的谷物。下列关于果酒制作的叙述，正确的是（ ） A. 酵母菌的酒精发酵过程中，需要不断通入无菌空气 B. 温度一旦低于18℃，酵母菌的呼吸作用就会停止 C. 发酵时，应定时将发酵器皿的瓶盖拧松以排放CO2 D. 暴露于空气中的果酒会变酸，这可能与空气中的乳酸菌有关 【答案】C 【解析】 【详解】A、酵母菌的酒精发酵依靠无氧呼吸产生酒精，若不断通入无菌空气会抑制酵母菌的无氧呼吸，无法生成酒精，A错误； B、酵母菌酒精发酵的最适温度为18～30℃，温度低于18℃时，与酵母菌呼吸相关的酶活性会降低，呼吸作用受到抑制，但不会直接停止，B错误； C、发酵过程排放CO2时仅需拧松瓶盖即可，若直接取下瓶盖会导致杂菌进入污染发酵液，C正确； D、醋酸菌为好氧菌，在有氧条件下可将果酒中的酒精转化为醋酸，因此暴露在空气中的果酒变酸可能与空气中的醋酸菌有关，D错误。 2. 消毒和灭菌是微生物培养的必要措施。下列关于培养基配制及接种室的叙述，错误的是（ ） A. 灭菌和消毒对微生物的杀伤程度是不同的 B. 对操作者的衣着和手进行灭菌处理 C. 培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长 D. 喷洒石炭酸（苯酚）的同时配合紫外线照射可提高对接种室的消毒效果 【答案】B 【解析】 【详解】A、消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包含芽孢和孢子），灭菌可杀灭全部微生物，二者对微生物的杀伤程度不同，A正确； B、灭菌是指杀灭物体上所有微生物（包括芽孢和孢子）的措施，操作者的衣着和手仅能进行消毒处理，B错误； C、培养基中营养物质浓度过高会使外界渗透压高于微生物细胞内渗透压，导致微生物失水抑制其生长，因此浓度过高不利于微生物的生长，C正确； D、紫外线照射可通过破坏微生物的核酸结构起到消毒作用，喷洒石炭酸可使微生物蛋白质变性失活，二者配合使用能有效提升对接种室的消毒效果，D正确。 3. 为了调查某河流的水质情况，学习小组利用两种不同方法对该河流水样中的细菌进行分离，结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是（ ） A. 图甲对应平板划线法，连续划线操作将聚集的菌种稀释 B. 图乙对应涂布平板法，若想要获得图乙所示结果，一般要对水样进行稀释 C. 采用图乙对应方法对细菌进行计数，应选择菌落数为30～300的平板进行统计 D. 图乙中的一个菌落由一个活菌生长发育而来，统计结果用活菌数表示 【答案】D 【解析】 【详解】A、平板划线法的原理就是通过连续划线，逐步将聚集的菌种稀释，最终得到单菌落，该操作实现了菌种的稀释，A正确； B、涂布平板法（图乙）接种前，需要对高浓度的水样进行梯度稀释，才能得到分散均匀的单菌落，B正确； C、平板划线法（图甲）只能分离纯化菌种，不能用于细菌计数，稀释涂布平板法（图乙）可用于计数，计数时需要选择菌落数为30～300的平板统计，C正确； D、稀释涂布平板法中，可能多个活菌聚集在一起，最终只形成一个菌落，因此图乙的一个菌落不一定由一个活菌生长发育而来，统计结果往往比实际活菌数偏低，D错误。 4. 现有一培养基的配方如下：去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15 g，蒸馏水1000 mL。下列有关该培养基的叙述错误的是（ ） A. 该培养基属于固体培养基 B. 该培养基中提供碳源的物质只有葡萄糖 C. 为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板 D. 若该培养基是用于培养毛霉，则需要将培养基调至酸性 【答案】B 【解析】 【详解】A、该培养基配方中添加了琼脂作为凝固剂，属于固体培养基，A正确； B、碳源是为微生物提供碳元素的营养物质，马铃薯中含有的淀粉等有机物也可作为碳源，因此该培养基的碳源包括葡萄糖和马铃薯，并非只有葡萄糖，B错误； C、培养基需先完成灭菌操作后再倒平板，若倒好平板后再灭菌会导致琼脂熔化、破坏培养基成分，不符合无菌操作逻辑，C正确； D、毛霉属于霉菌（真菌），培养霉菌时需要将培养基调至酸性，培养细菌时需调至中性或弱碱性，D正确。 5. 下列关于植物细胞工程中各项技术的说法正确的是（ ） A. 植物体细胞杂交技术与植物细胞融合技术均体现了细胞的全能性 B. 制备原生质体和诱导原生质体融合都需要在低渗溶液中操作完成 C. 植物体细胞杂交技术与植物组织培养技术均使用了固体培养基 D. 外植体需要用适宜浓度的酒精和次氯酸钠混合液进行消毒 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交技术将杂种细胞培育成了新植物体，体现了植物细胞的全能性；植物细胞融合技术使两个或多个植物细胞结合形成一个细胞，没有体现细胞的全能性，A错误； B、等渗溶液可维持去除细胞壁后的原生质体的正常形态，所以制备原生质体和诱导原生质体融合都需要在等渗溶液中操作完成，B错误； C、植物体细胞杂交技术与植物组织培养技术均需要使用固体培养基，C正确； D、外植体先用70%的酒精消毒，后用无菌水清洗，再用次氯酸钠溶液处理，最后再用无菌水清洗，而不能用混合液处理，D错误。 6. 细胞培养技术是细胞工程中必不可少的一个过程，下列说法错误的是（ ） A. 培养动物细胞一般使用添加血清的液体培养基 B. 植物细胞培养技术经历了脱分化、再分化的过程 C. 体外培养杂交瘤细胞时，不会发生接触抑制现象 D. 培养动物细胞时，为保证环境是无毒的，需要定期更换培养液 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物细胞培养一般使用液体培养基，且需要添加血清（含细胞生长必需的未知天然营养成分），A正确； B、植物细胞培养技术是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术，培养到愈伤组织阶段即可，无需再分化过程，B错误； C、杂交瘤细胞是B细胞和骨髓瘤细胞（癌细胞）融合得到的，继承了癌细胞无限增殖、无接触抑制的特点，体外培养时不会发生接触抑制，C正确； D、动物细胞培养时，培养液需要定期更换，以便清除代谢物，从而保证无毒的环境，D正确。 7. 中医常说“百病从肝治，养肝如养命”。近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（　　） A. 切取雪莲茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗，使产量明显提升 B. 从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的 C. 经射线处理①后可能获得雪莲培养物高产的细胞 D. 培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基 【答案】B 【解析】 【详解】A、茎尖中带毒少或无毒，因而切取雪莲茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗，使产量明显提升，A正确； B、次生代谢物是植物在长期进化中产生的，并非植物生长发育所必需的物质，仅对植物适应环境等有辅助作用，B错误； C、可用射线处理①愈伤组织，促使其发生突变，从中筛选雪莲培养物高产的细胞，C正确； D、植物细胞悬浮培养（用于生产次生代谢物）时，使用的是液体培养基，D正确。 8. 我国牵头制定并发布了四项与干细胞相关的国际标准，表明我国在干细胞和再生医学领域的原创研发和临床试验居于国际前沿。下列叙述错误的是（ ） A. 干细胞培养时，需要放在含有5%CO2和95%O2的培养箱中 B. 造血干细胞主要存在于骨髓、外周血和脐带血中 C. 胚胎干细胞具有分化为人体各类细胞、组织和器官的潜能 D. 干细胞技术在临床上具备一定的安全性与有效性 【答案】A 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的气体环境为95%空气和5%CO₂，并非95%O₂，高浓度O₂会对细胞产生毒性损伤，A错误； B、造血干细胞属于成体干细胞，主要存在于骨髓、外周血和脐带血中，可分化形成各类血细胞，B正确； C、胚胎干细胞分化程度低、全能性较高，具备分化为人体各类细胞、组织和器官的潜能，C正确； D、我国已有干细胞相关的临床试验应用，且出台了相关国际标准，说明干细胞技术在临床上具备一定的安全性与有效性，D正确。 9. 一对夫妇结婚多年未育，经检查发现男方患有严重的少弱精症，自然受孕困难。医生建议他们通过“第二代试管婴儿”技术（卵胞浆内单精子注射）辅助生育。在治疗过程中，女方经过促排卵治疗后，获取了多枚卵子，与男方精子结合形成胚胎，最终选择优质胚胎移植入子宫，成功妊娠并诞下一名健康婴儿。下列叙述错误的是（ ） A. 获取的精子需经过获能处理，才能获得受精能力 B. 进行胚胎移植时，应选择原肠胚阶段进行移植 C. 为获取更多卵子，可注射适宜浓度的促性腺激素 D. 胚胎移植前，可对胚胎进行遗传学筛查，通常选用囊胚阶段的滋养层细胞 【答案】B 【解析】 【详解】A、试管婴儿的大致培育过程，通过体外受精获得受精卵，在体外继续培养发育为早期胚胎后，移植到母亲体内，最终产生新个体。获取的精子需经过获能处理，才能获得受精能力，A正确； B、胚胎移植通常选择桑葚胚或囊胚阶段，B错误； C、为获得更多的卵子，应注射适宜浓度的促性腺激素以促进排卵，C正确； D、遗传学检测时，可选用囊胚阶段的滋养层细胞，滋养层细胞发育成胎盘和胎膜，只为胎儿提供营养，不会对胎儿产生影响，D正确。 10. 在制备单克隆抗体过程中，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，在培养体系中会存在多种细胞，常使用HAT培养基筛选所需的杂交瘤细胞，其原理如图（已知哺乳动物细胞中有两条途径可以合成DNA，一条途径会被HAT培养基中的氨基喋呤阻断，另一条途径需要关键酶HGPRT的参与）。下列分析正确的是（ ） 注：+/−分别代表存在和缺失。 A. 诱导融合后只存在未融合的亲本细胞、融合同种核的细胞和产生同种抗体的杂交瘤细胞 B. B淋巴细胞的DNA合成过程被HAT培养基中的氨基喋呤阻断，从而不能在体外无限增殖 C. 实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，不具备无限增殖的能力 D. 融合成功的杂交瘤细胞在HAT培养基中能够存活并无限增殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、诱导融合后会产生三种类型的细胞：未融合的亲本细胞、融合同种核的细胞和杂交瘤细胞，但杂交瘤细胞有多种类型，能够产生多种类型的抗体，A错误； B、B淋巴细胞是高度分化的细胞，本身就不具备无限增殖能力，B错误； C、实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，缺乏关键酶HGPRT，但仍具备通过另一条途径进行DNA合成实现无限增殖的能力，C错误； D、融合成功的杂交瘤细胞在HAT培养基（含有氨基喋呤）中会阻断一条DNA合成的途径，但由于具有关键酶HGPRT，可进行另一条途径进行DNA的合成，因此依然能够存活并无限增殖，D正确。 11. 在利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关操作正确的是（　　） A. 利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度 B. 研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA C. 该实验利用了DNA可溶于酒精而某些蛋白质不溶于酒精的原理 D. 将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应 【答案】B 【解析】 【详解】A、定性滤纸的孔径较小，过滤时可能导致DNA被截留，无法有效提高DNA的含量和纯度。实验中通常使用纱布或多层纱布过滤细胞碎片，A错误； B、研磨洋葱时加入的研磨液（含洗涤剂和食盐），可瓦解细胞膜，溶解细胞质中的物质，从而释放核DNA，B正确； C、实验中利用的是DNA不溶于高浓度酒精（体积分数95%的冷酒精），而某些蛋白质可溶的原理，通过离心或沉淀分离DNA，C错误； D、DNA的鉴定需先将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液，再与二苯胺试剂混合后沸水浴显蓝色。若直接将丝状物加入二苯胺试剂，DNA未充分溶解，无法有效显色，D错误。 故选B。 12. 利用PCR获得目的基因后，用限制酶Eco RⅠ同时处理目的基因与质粒，拼接后可得到重组基因表达载体，其部分DNA片段如图所示。下列有关引物的分析，正确的是（ ） A. 通过PCR获取目的基因时，所选的引物可为引物2和引物3 B. 若设计的引物与模板不完全配对，可适当提高PCR复性的温度 C. 以1个DNA为模板，经3次循环需消耗7个引物 D. DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的5'端连接脱氧核苷酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、引物结合在模板链的3'端，通过PCR获取目的基因时，所选的引物可为引物2和引物3，A正确； B、若设计的引物与模板链不完全配对，可适当降低PCR复性温度，B错误； C、以1个DNA为模板，经3次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗引物的数目为（8×2—2）=14个，C错误； D、DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的3'端连接脱氧核苷酸，D错误。 13. 某细菌DNA分子上有4个Sau3AⅠ的酶切位点，经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用Bam HⅠ处理，则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和Bam HⅠ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列及切割位点 Bam HⅠ G↓GATCC Sau3AⅠ ↓GATC A. 该细菌的DNA分子呈链状结构 B. Bam HⅠ切割后产生的是黏性末端，Sau3AⅠ切割后产生的是平末端 C. 该DNA分子上有2个Bam HⅠ不能识别、但Sau3AⅠ能识别的酶切位点 D. 若用两种酶共同处理，会形成6个大小不同的DNA片段 【答案】C 【解析】 【详解】A、若为链状（线性）DNA，n个酶切位点会切割得到n+1个片段；该细菌DNA被有4个Sau3AⅠ酶切位点切割后得到4个片段，符合环状DNA（n个酶切位点得n个片段）的特点，因此该细菌DNA为环状，A错误； B、Bam HⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点在中轴线两侧，切割后产生的都是黏性末端，B错误； C、BamHⅠ的识别序列GGATCC中包含Sau3AⅠ的识别序列GATC，因此所有BamHⅠ能识别的位点，Sau3AⅠ都能识别。BamHⅠ切割环状DNA得到2个片段，说明该DNA上共有2个BamHⅠ位点，这2个都包含在Sau3AⅠ的4个位点中，因此BamHⅠ不能识别、Sau3AⅠ能识别的位点数量为4-2=2个，C正确； D、该DNA分子上有4个Sau3AⅠ的酶切位点，有2个Bam HⅠ的酶切位点，但是Bam HⅠ识别序列中包含Sau3AⅠ的识别序列，所以同时用两种酶共同处理后，总共有4个不同的切割位点，会形成4个大小不同的DNA片段，D错误。 14. 解磷菌可将难溶性磷转化为植物可吸收的形式，常见解磷菌有芽孢杆菌、假单胞杆菌等。某研究组从土壤中分离解磷菌，提取DNA并进行鉴定，随后通过PCR扩增其核糖体基因（多组样本在PCR仪中扩增约1 h），并对产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果见下图。下列叙述错误的是（ ） A. 若DNA带负电，则凝胶加样孔应靠近电泳槽负极侧 B. 提取液用二苯胺试剂沸水浴鉴定，若呈蓝色则可用于PCR C. 根据凝胶电泳的结果，仍然无法准确鉴定解磷菌的类型 D. 样本7和样本11结果异常的原因是PCR循环次数不足 【答案】D 【解析】 【详解】A、靠近加样孔的一端为负极，接通电源，带负电的DNA分子向正极移动而使DNA逐渐分离，A正确； B、提取的DNA可以用二苯胺试剂进行鉴定，在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈蓝色，若呈蓝色则说明提取到了DNA，可用于PCR，B正确； C、仅根据凝胶电泳结果，只能看到PCR扩增产物的条带情况，不同类型的解磷菌（如芽孢杆菌、假单胞杆菌等）在核糖体基因扩增产物上可能存在相似性，所以仍然无法准确鉴定解磷菌的类型，C正确； D、样本7和样本11结果异常，可能是模板问题、引物问题、反应体系问题等多种原因导致，而不一定是PCR循环次数不足造成的，D错误。 15. 当代生物技术迅速发展，安全性问题引发社会的广泛关注，下列叙述正确的有（ ） ①转基因栽培作物可能通过花粉发生基因漂移 ②转基因食品存在引发过敏的风险 ③治疗性克隆都不需要严格监管 ④治疗性克隆的原理是细胞的全能性 ⑤我国禁止进行任何生殖性克隆人实验 ⑥治疗性克隆不会产生道德、伦理问题 ⑦生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂等 ⑧生物武器具有传染性强、危害范围广等特点，各国可根据需要研发储备 A. 7项 B. 6项 C. 5项 D. 4项 【答案】D 【解析】 【详解】①转基因作物的基因可能通过花粉传播到近缘物种（基因漂移），①正确； ②转基因食品可能含有新的蛋白质，存在过敏风险，②正确； ③治疗性克隆涉及胚胎操作，需严格监管以防止滥用，③错误； ④治疗性克隆的原理是细胞核的全能性，而非整个细胞的全能性，④错误； ⑤我国明确禁止任何生殖性克隆人实验，⑤正确； ⑥治疗性克隆因涉及胚胎使用，存在伦理争议，⑥错误； ⑦生物武器包括致病微生物（如细菌、病毒）及生化毒剂，⑦正确； ⑧生物武器（如病原微生物武器）因可能造成大规模生物危害，已被《禁止生物武器公约》明令禁止研发和储备，⑧错误。 综上①②⑤⑦正确，D正确，ABC错误。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 酱油酿造过程中，优良的米曲霉菌株是提升酱油品质和产量的关键，诱变育种是获得高产酶活米曲霉菌株的常用方法，其大致流程为：出发菌株活化→诱变处理→菌株分离纯化→初筛（酶活检测）→复筛（遗传稳定性评估）→优良菌株保存。下列叙述错误的是（ ） 注：复筛时需要对初筛得到的单菌落进行连续传代培养，检测每一代的蛋白酶活性，统计酶活性稳定的菌株比例。 A. 出发菌株活化时，需将菌种接种到液体培养基中振荡培养，以获得对数生长期的菌体 B. 诱变处理时，可采用紫外线诱变方法诱导菌株突变 C. 菌株分离纯化时，可利用稀释涂布平板法将诱变后的菌液涂布在平板上，获得单菌落 D. 复筛评估遗传稳定性时，仅检测单菌落第一代的蛋白酶活性，即可判断菌株的遗传稳定性 【答案】D 【解析】 【详解】A、出发菌株活化时，液体振荡培养可增加菌体与营养液、氧气的接触，使其快速进入对数生长期，为诱变处理提供优质菌体材料，A正确； B、紫外线为物理诱变因子，可通过诱导菌株基因突变获得变异菌株，是诱变育种常用方法，B正确； C、稀释涂布平板法可将诱变菌液稀释后涂布，梯度稀释后涂布于平板，经培养后形成单菌落，实现菌株分离纯化，C正确； D、遗传稳定性评估需对单菌落进行连续传代培养（通常5～10代或更多），检测每一代的蛋白酶活性，统计酶活性稳定的菌株比例。仅检测第一代无法判断突变是否稳定遗传，可能遗漏回复突变或不稳定突变，D错误。 17. 豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法正确的是（ ） A. 荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成 C. 过程Ⅳ、Ⅴ需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 D. 该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、题图显示，两种原生质体分别带有不同的荧光染料，因此可以将荧光染料的颜色作为初步筛选融合原生质体的依据，A正确； B、植物体细胞杂交技术流程完成的标志是形成杂种植株，杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成，B正确； C、过程Ⅳ脱分化形成的愈伤组织是一团不定形的薄壁组织团块，该过程不需要照光培养，而V过程为脱分化过程，该过程中需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用，C错误； D、该技术为植物体细胞杂交技术，打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 18. 嵌合体动物是指由两种或两种以上具有不同遗传特性的细胞组成的聚合胚发育而成的个体，如图表示采用注射法获得小鼠胚胎嵌合体（即黑白花仔鼠）的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不随之增加 B. 图中②不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分 C. 丁的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 黑白花仔鼠的任意一个细胞中同时含有黑鼠和白鼠的基因 【答案】AC 【解析】 【详解】A、卵裂期的细胞数目不断增加，胚胎总体积并不增加，A正确； B、图中①为黑色小鼠囊胚中的滋养层细胞，不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分，②为内细胞团，将来发育为胎儿的各种组织，B错误； C、丁为胚胎移植，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确； D、黑白花仔鼠为小鼠胚胎嵌合体，有的细胞含有黑鼠的基因，有的细胞含有白鼠的基因，不是同时含有黑鼠和白鼠的基因，D错误。 19. 女性怀孕后会合成分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗HCG单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断出是否怀孕。图1表示试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体。抗体2和抗体3分别固定在试纸条的T线和C线，抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。图2是运用早早孕诊断试剂盒检测三位女性的结果。下列相关分析错误的是（ ） A. 通过体外培养单个B细胞不能大量获得针对HCG的单克隆抗体 B. 抗体3制备的过程中，需向小鼠注射HCG的α亚基作为抗原 C. 在样品垫滴加的样品会向右扩散经过T线和C线，C线显色即表明该女性怀孕 D. 图2检测结果显示怀孕的是甲和乙 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、B细胞分裂次数有限，因此在体外培养单个B细胞不能获得大量针对HCG的单克隆抗体，A正确； B、根据题干信息，抗体3是针对抗体1的抗体，因此其制备过程中需要反复向小鼠注射抗体1作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B细胞，B错误； CD、图2乙中C线显色，T线未显色，表示所采样品中没有HCG，说明没有怀孕。丙中C线不显色，说明带金标的抗体1不能正常移动至C线与抗体3结合，说明试纸失效或者检测的样品异常，检测结果无效。甲样品中的HCG与抗体1结合后形成的复合物移动至T线，又可以与抗体2结合，然后被固定在T线并显色，部分复合物继续移动至C线，抗体1与抗体3结合，然后被固定在C线并显色，最终呈现出甲结果，说明甲怀孕，CD错误。 20. HIV通过细胞膜上的A蛋白侵染人体细胞。欧洲人群中存在A基因的一种突变形式（记为a），其缺失了32个碱基对导致A蛋白异常，aa个体天然免疫HIV。为了快速辨别甲、乙、丙个体的基因型，用引物F和R分别对甲、乙、丙个体的基因组进行PCR，每组PCR产物都分为两份，一份直接电泳，一份用限制酶ApoⅠ切割后电泳，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 甲、丙个体的1号加样孔中的样品被ApoⅠ处理过 B. 测序比对3和4号条带可获得a基因缺失的序列 C. 乙个体两个加样孔条带一致，可能是ApoⅠ失活导致 D. PCR产物直接电泳可区分基因型为AA、Aa和aa的个体 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、A基因和a基因碱基对数量不同，电泳形成两种条带，根据图示可知，A基因具有限制酶ApoⅠ酶切位点，A基因被酶切后经过电泳会形成两个条带，a基因不能被酶切，经过电泳会形成一个条带。因此PCR产物直接电泳最多有两个条带，用ApoⅠ切割后电泳最多有三个条带，而甲的1号加样孔有三个条带，说明1号加样孔是用ApoⅠ切割后电泳结果，2号加样孔是直接电泳的结果，即甲、丙个体的1号加样孔中的样品被ApoⅠ处理过，A正确； B、相比A基因，a基因缺失了32个碱基对，因此4是a基因，3是A基因，测序比对3和4号条带可获得a基因缺失的序列，B正确； C、根据乙的1号加样孔可知，该个体的基因型为aa，由于a基因不能被ApoⅠ酶切，因此出现乙个体两个加样孔条带一致的情况，C错误； D、AA直接电泳的结果是只有条带3，aa直接电泳的结果是只有条带4，Aa直接电泳的结果是同时有条带3和4，因此PCR产物直接电泳可以区分基因型为AA、Aa和aa的个体，D正确。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 长期秸秆还田的农田土壤中，富集了可分泌纤维素酶的微生物类群，其中部分菌株可产生次生代谢产物抑制小麦根腐病病原菌的繁殖。科研人员拟从该类农田土壤中分离筛选兼具高效纤维素降解能力和病原菌拮抗活性的功能菌株，相关操作流程如图所示。回答下列问题： （1）微生物培养基常用的灭菌方法为______，为避免杂菌污染，接种相关的无菌操作均需在______附近进行。 （2）步骤②为富集培养，该过程配制的培养基需以______为唯一碳源。从功能上说，该培养基属于______培养基，富集培养的目的是______。 （3）梯度稀释后进行涂布培养时，为使实验结果更准确，每个梯度至少需要涂布______个平板。步骤③稀释涂布平板后，为鉴定单菌落的纤维素分解能力，可向培养基中加入______染料，根据菌落周围______的大小，可初步判断菌株降解纤维素的能力强弱。 （4）步骤⑤为菌株的拮抗活性检测，需将牛津杯竖直立在已经凝固的不含营养物质的琼脂凝胶平板上，再向牛津杯周围倒入混有______的培养基，待培养基凝固后将牛津杯取出，再将待检菌株的无菌发酵液滴加至A、B、C、D四个牛津杯制造的小孔中，适宜条件培养后，可通过观察______的有无及大小，判断菌株的抑菌活性强弱。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法 ②. 酒精灯火焰 （2） ①. 纤维素 ②. 选择 ③. 增大目的菌的浓度（或数量） （3） ①. 3 ②. 刚果红 ③. 透明圈（或水解圈） （4） ①. 小麦根腐病病原菌菌液 ②. 抑菌圈 【解析】 【小问1详解】 微生物培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法，为避免环境中的杂菌污染，接种相关的无菌操作均需在酒精灯火焰附近的无菌区域进行。 【小问2详解】 筛选纤维素分解菌时，富集培养的培养基需以纤维素为唯一碳源，仅能利用纤维素的微生物可正常生长繁殖，以此增加目的菌株的相对数量，降低后续分离筛选的难度。 【小问3详解】 梯度稀释后进行涂布培养时，为使实验结果更准确，每个梯度至少需要涂布3个平板，遵循平行重复原则，避免实验偶然性。刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被菌株分泌的纤维素酶分解后，复合物无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈，因此可通过观察透明圈的大小，初步判断菌株降解纤维素的能力强弱，透明圈越大说明菌株的纤维素分解能力越强。 【小问4详解】 检测菌株的病原菌拮抗活性时，需先在固体平板上均匀涂布小麦根腐病病原菌菌液，再将待检菌株的无菌发酵液滴加至牛津杯制造的小孔中，若菌株可产生抑菌物质，病原菌的生长会被抑制，小孔周围会出现无菌的抑菌圈，因此可通过观察抑菌圈的有无及大小，判断菌株抑菌活性的强弱。 22. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字代表处理或生理过程。回答下列问题： （1）②过程形成的愈伤组织是不定形的______团块。______是②③过程的关键。 （2）图中②过程培养获得植株乙的优点有______（答出1点）。生产上，为防止病毒在作物体内逐年积累，可选择茎尖为材料，原因是______。 （3）图中④过程中，相较于幼苗，选择愈伤组织作为实验材料的原因是______。 （4）⑤过程中，需要用______处理愈伤组织获得原生质体；除图中PEG外，促进原生质体融合的方法还有______（写出1个）等。 （5）黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的少量的次生代谢物。某同学认为，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物，主要是利用了促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞产生黄酮类化合物的产量，你______（填“同意”或“不同意”）该同学的观点，理由是：______。 【答案】（1） ①. 薄壁组织 ②. 生长素和细胞分裂素的比值（或浓度、配比、含量） （2） ①. 可以高效、快速地实现种苗的大量增殖；保持优良品种的遗传特性 ②. 茎尖的病毒极少，甚至无病毒 （3）愈伤组织细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变 （4） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 离心法、电融合法、高Ca2+—高pH融合法 （5） ①. 不同意 ②. 植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量，从而增加黄酮类化合物的含量 【解析】 【小问1详解】 ②脱分化是由外植体形成愈伤组织的过程，该过程中细胞不断分裂增殖，产生不定形的薄壁（无组织结构、松散的薄壁）组织团块，称为愈伤组织。植物生长素和细胞分裂素是植物组织培养不可缺少的两种调节物质，两者的浓度和配比在脱分化和再分化中起着关键作用。 【小问2详解】 植物组织培养技术为图中②③过程，该技术不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，从生殖方式上来说，植物组织培养技术属于无性生殖，因此还可以保持优良品种的遗传特性。作物脱毒选择茎尖作为材料，是因为茎尖（顶端分生区）的病毒极少，甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。 【小问3详解】 图中④过程中，相较于幼苗，选择愈伤组织作为实验材料的原因是愈伤组织细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变。 【小问4详解】 ⑤过程中，需要用纤维素酶、果胶酶处理愈伤组织，进而获得原生质体，为后续原生质体融合做准备。诱导原生质体融合的化学法有PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法，物理法有离心法、电融合法等。 【小问5详解】 不同意该同学的观点，黄酮类化合物属于植物的次生代谢物，植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量，从而增加黄酮类化合物的含量。 23. 肺癌是目前全球发病率和死亡率均排名第一的癌症。治疗已转移肺癌的主要方法是化疗，但化疗是对全身用药，副作用较大。科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）来对肺癌患者进行治疗，过程如图1所示。回答下列问题： （1）在体外进行动物细胞培养时将细胞置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是______。 （2）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自人的______细胞。①过程诱导融合时，与植物体细胞杂交相比特有的诱导方法是______。单克隆抗体的制备过程中需要进行两次筛选，步骤②是利用______进行筛选；步骤③将步骤②筛选得到的细胞，进行多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用______原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，检测结果为______（填“阳性”或“阴性”）的细胞即为杂交瘤细胞，其具有______的特点。 （3）特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，再从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体的优点是______。 （4）通过步骤④将获得的单克隆抗体和化疗药物通过接头结合在一起，获得ADC。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。ADC能降低化疗的副作用，原因是______。 【答案】（1）维持培养液pH （2） ①. 肺癌 ②. 灭活的病毒诱导法 ③. 特定的选择培养基 ④. 抗原—抗体杂交 ⑤. 阳性 ⑥. 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 （3）能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（或特异性强，灵敏度高，可大量制备） （4）ADC能准确识别并定位癌细胞，减少对正常细胞的杀伤 【解析】 【小问1详解】 动物细胞培养需要一定的气体环境，即在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行，CO2的主要作用是维持培养液pH。 【小问2详解】 要生产肺癌的单克隆抗体，应该选择肺癌细胞上特定的抗原对小鼠进行免疫处理，使小鼠产生针对肺癌细胞特异抗原的B淋巴细胞。在诱导细胞融合时不同于诱导植物原生质体融合的诱导方法是灭活的病毒诱导法。两次筛选，第一次利用的是特定的选择培养基，第二次进行克隆化培养、抗体检测，检测抗体利用的是抗原—抗体杂交原理，检测结果为阳性的细胞即为杂交瘤细胞。经两次筛选可以得到既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有：能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。 【小问4详解】 ADC中的单克隆抗体能精确地定位肺癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以减少对正常细胞的杀伤，降低肺癌治疗药物的副作用。 24. 干扰素具有抑制细胞增殖、调节免疫以及抗病毒等作用，但是干扰素在体外保存困难，若将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，则可在—70℃条件下保存半年。科学家通过重叠延伸PCR技术实现了干扰素基因的定点突变，部分操作如图所示。请回答下列问题： （1）PCR过程中添加引物的作用是______。PCR扩增过程中，温度下降到50℃左右的目的是______。 （2）4次PCR对引物的使用不完全相同，PCR1选择引物A和B，PCR2选择引物C和D，PCR3______（填“需要”或“不需要”）引物，PCR4选择引物______。 （3）PCR3过程中，选择杂交物______（填“1”或“2”）作模板，理由是______。 （4）与X射线诱变相比，写出该突变技术的一条优点______。 （5）将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基因的启动子等调控元件重组在一起，导入牛的______中，获得转基因小牛，在其进入泌乳期即可获得改造后的干扰素。 【答案】（1） ①. 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 ②. 使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合（或使引物与单链的互补序列结合） （2） ①. 不需要 ②. A和D （3） ①. 1 ②. 子链的延伸方向只能从5'→3'，以杂交物2作模板时子链不能延伸 （4）可以诱导定向变异，目的性强，突变概率高等 （5）受精卵 【解析】 【小问1详解】 DNA聚合酶不能从头合成DNA链，只能催化脱氧核苷酸连接到已有的核苷酸片段（引物）的3'端羟基上延伸DNA链，而引物能使DNA聚合酶从其3'端开始连接脱氧核苷酸。PCR过程包含变性（高温使DNA双链解旋）、复性（温度下降到50℃左右，让引物与互补的模板单链通过碱基互补配对结合）、延伸（耐高温DNA聚合酶催化子链合成）三步。 【小问2详解】 PCR3是让杂交物1和杂交物2依据碱基互补配对原则，以自身末端为起点延伸形成完整双链，无需额外引物引导，故不需要引物。PCR4要扩增出完整的改造后目的基因，需要能结合目的基因两端序列的引物，引物A可结合基因一端，引物D可结合另一端，所以选引物A和D，保证扩增出全长基因。 【小问3详解】 DNA子链的延伸方向为5'→3'，杂交物1的3'端为游离状态，能作为引物延伸的起点，使子链顺利延伸，而杂交物2的3'端因方向限制，无法启动子链延伸，所以选杂交物1作模板。 【小问4详解】 X射线诱变属于随机诱变，突变方向不可控，且大多是无用或有害突变，而重叠延伸PCR是定点突变技术，能精准针对干扰素基因特定碱基进行替换，实现定向变异，只改变目标位点，目的性强，且通过设计引物可高效引入突变，突变概率高，避免了随机诱变的盲目性。 【小问5详解】 要让干扰素基因在牛的泌乳期特异性表达，需将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基因的启动子重组，导入牛的受精卵中获得转基因小牛，在其进入泌乳期后即可获得改造后的干扰素。 25. 蚕丝蛋白与人体的角质和胶原结构十分相近，临床实验表明蚕丝人造血管在体内不会引起过敏或致癌作用，可以与活体血肉相连，长成与真血管一样的外壁和内膜，在医药领域有良好的应用前景。Fib—H基因是编码蚕丝蛋白的关键基因，科研人员将Fib—H基因导入大肠杆菌，用于高效生产蚕丝蛋白，图1表示的是转运Fib—H基因的大肠杆菌和Fib—H基因的结构，图2列举的是4种限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题： （1）利用PCR技术扩增Fib—H基因，需根据Fib—H基因设计两种引物，引物长度越短，扩增得到的DNA片段种类越______（填“简单”或“复杂”）。 （2）构建基因表达载体应用______限制酶处理质粒，为了使Fib—H基因能够正确连接在图中所示质粒上，需要在Fib—H基因左侧和右侧分别添加的DNA序列为______。 （3）经检测转基因大肠杆菌内含有Fib—H基因的mRNA，能否确定Fib—H基因成功表达，并说明原因______。 （4）利用大肠杆菌得到的蚕丝蛋白需要进一步加工和修饰，才能获得生物活性，原因是______。 （5）科研人员发现，若将Fib—H基因28号位的酪氨酸替换为色氨酸，家蚕的蚕丝蛋白的产量可提高20%，根据这一研究结果，可通过______工程对家蚕的Fib—H基因进行改造，请用文字和箭头写出基本思路：______。 【答案】（1）复杂 （2） ①. AluⅠ、HindⅢ ②. 5'-AGCT-3'、3'-TCGA-5'；3'-TTCGAA-5'、5'-AAGCTT-3' （3）不能，转基因大肠杆菌内含有Fib—H基因的mRNA说明Fib—H基因成功转录，并不能说明能成功翻译出蚕丝蛋白 （4）大肠杆菌属于原核生物，细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对核糖体合成的肽链进行加工 （5） ①. 蛋白质 ②. 预期Fib—H功能（或提高蚕丝蛋白产量）→设计预期的Fib—H蛋白结构（或将28号位的酪氨酸替换为色氨酸）→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（或合成新的基因）→导入家蚕细胞并培育产量更高的家蚕 【解析】 【小问1详解】 引物越短，和DNA结合位点越多，扩增得到的DNA片段种类越复杂。 【小问2详解】 构建基因表达载体时常选用双酶切，以保证目的基因和载体正确连接，基因A需插在启动子和终止子之间，由于EcoRⅠ在复制原点也有酶切位点，故选取的限制酶是AluⅠ和HindⅢ。根据目的基因转录方向，左侧应该连接启动子一侧，所以左侧需要添加限制酶AluⅠ的识别序列5'-AGCT-3'、3'-TCGA-5'、右侧添加HindⅢ的识别序列3'-TTCGAA-5'、5'-AAGCTT-3'。 【小问3详解】 转基因大肠杆菌内含有Fib—H基因的mRNA，不能确定Fib—H基因成功表达，只能说明Fib—H基因成功转录，并不能说明能成功翻译出蚕丝蛋白。 【小问4详解】 蚕丝蛋白是真核生物产生的蛋白质，而大肠杆菌属于原核生物，细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对核糖体合成的肽链进行加工，故利用大肠杆菌得到的蚕丝蛋白需要进一步加工和修饰，才能获得生物活性。 【小问5详解】 若将Fib—H基因28号位的酪氨酸替换为色氨酸，家蚕的蚕丝蛋白的产量可提高20%，根据这一研究结果，这属于对蛋白质结构的改造，可通过蛋白质工程对家蚕的Fib—H基因进行改造，并培育生产产丝量更高的家蚕。预期Fib—H功能（提高蚕丝蛋白产量）→设计预期的Fib—H蛋白结构（或将28号位的酪氨酸替换为色氨酸）→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（或合成新的基因）→导入家蚕细胞并培育产量更高的家蚕。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 山东高二5月阶段性检测卷 生物试题 考试时间为90分钟，满分100分 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 《尚书·说命》中有“若作酒醴，尔惟曲蘖”的记载，其中的“曲”指含有酵母菌等菌种的谷物。下列关于果酒制作的叙述，正确的是（ ） A. 酵母菌的酒精发酵过程中，需要不断通入无菌空气 B. 温度一旦低于18℃，酵母菌的呼吸作用就会停止 C. 发酵时，应定时将发酵器皿的瓶盖拧松以排放CO2 D. 暴露于空气中的果酒会变酸，这可能与空气中的乳酸菌有关 2. 消毒和灭菌是微生物培养的必要措施。下列关于培养基配制及接种室的叙述，错误的是（ ） A. 灭菌和消毒对微生物的杀伤程度是不同的 B. 对操作者的衣着和手进行灭菌处理 C. 培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长 D. 喷洒石炭酸（苯酚）的同时配合紫外线照射可提高对接种室的消毒效果 3. 为了调查某河流的水质情况，学习小组利用两种不同方法对该河流水样中的细菌进行分离，结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是（ ） A. 图甲对应平板划线法，连续划线操作将聚集的菌种稀释 B. 图乙对应涂布平板法，若想要获得图乙所示结果，一般要对水样进行稀释 C. 采用图乙对应方法对细菌进行计数，应选择菌落数为30～300的平板进行统计 D. 图乙中的一个菌落由一个活菌生长发育而来，统计结果用活菌数表示 4. 现有一培养基的配方如下：去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15 g，蒸馏水1000 mL。下列有关该培养基的叙述错误的是（ ） A. 该培养基属于固体培养基 B. 该培养基中提供碳源的物质只有葡萄糖 C. 为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板 D. 若该培养基是用于培养毛霉，则需要将培养基调至酸性 5. 下列关于植物细胞工程中各项技术的说法正确的是（ ） A. 植物体细胞杂交技术与植物细胞融合技术均体现了细胞的全能性 B. 制备原生质体和诱导原生质体融合都需要在低渗溶液中操作完成 C. 植物体细胞杂交技术与植物组织培养技术均使用了固体培养基 D. 外植体需要用适宜浓度的酒精和次氯酸钠混合液进行消毒 6. 细胞培养技术是细胞工程中必不可少的一个过程，下列说法错误的是（ ） A. 培养动物细胞一般使用添加血清的液体培养基 B. 植物细胞培养技术经历了脱分化、再分化的过程 C. 体外培养杂交瘤细胞时，不会发生接触抑制现象 D. 培养动物细胞时，为保证环境是无毒的，需要定期更换培养液 7. 中医常说“百病从肝治，养肝如养命”。近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（　　） A. 切取雪莲茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗，使产量明显提升 B. 从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的 C. 经射线处理①后可能获得雪莲培养物高产的细胞 D. 培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基 8. 我国牵头制定并发布了四项与干细胞相关的国际标准，表明我国在干细胞和再生医学领域的原创研发和临床试验居于国际前沿。下列叙述错误的是（ ） A. 干细胞培养时，需要放在含有5%CO2和95%O2的培养箱中 B. 造血干细胞主要存在于骨髓、外周血和脐带血中 C. 胚胎干细胞具有分化为人体各类细胞、组织和器官的潜能 D. 干细胞技术在临床上具备一定的安全性与有效性 9. 一对夫妇结婚多年未育，经检查发现男方患有严重的少弱精症，自然受孕困难。医生建议他们通过“第二代试管婴儿”技术（卵胞浆内单精子注射）辅助生育。在治疗过程中，女方经过促排卵治疗后，获取了多枚卵子，与男方精子结合形成胚胎，最终选择优质胚胎移植入子宫，成功妊娠并诞下一名健康婴儿。下列叙述错误的是（ ） A. 获取的精子需经过获能处理，才能获得受精能力 B. 进行胚胎移植时，应选择原肠胚阶段进行移植 C. 为获取更多卵子，可注射适宜浓度的促性腺激素 D. 胚胎移植前，可对胚胎进行遗传学筛查，通常选用囊胚阶段的滋养层细胞 10. 在制备单克隆抗体过程中，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，在培养体系中会存在多种细胞，常使用HAT培养基筛选所需的杂交瘤细胞，其原理如图（已知哺乳动物细胞中有两条途径可以合成DNA，一条途径会被HAT培养基中的氨基喋呤阻断，另一条途径需要关键酶HGPRT的参与）。下列分析正确的是（ ） 注：+/−分别代表存在和缺失。 A. 诱导融合后只存在未融合的亲本细胞、融合同种核的细胞和产生同种抗体的杂交瘤细胞 B. B淋巴细胞的DNA合成过程被HAT培养基中的氨基喋呤阻断，从而不能在体外无限增殖 C. 实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，不具备无限增殖的能力 D. 融合成功的杂交瘤细胞在HAT培养基中能够存活并无限增殖 11. 在利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关操作正确的是（　　） A. 利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度 B. 研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA C. 该实验利用了DNA可溶于酒精而某些蛋白质不溶于酒精的原理 D. 将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应 12. 利用PCR获得目的基因后，用限制酶Eco RⅠ同时处理目的基因与质粒，拼接后可得到重组基因表达载体，其部分DNA片段如图所示。下列有关引物的分析，正确的是（ ） A. 通过PCR获取目的基因时，所选的引物可为引物2和引物3 B. 若设计的引物与模板不完全配对，可适当提高PCR复性的温度 C. 以1个DNA为模板，经3次循环需消耗7个引物 D. DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的5'端连接脱氧核苷酸 13. 某细菌DNA分子上有4个Sau3AⅠ的酶切位点，经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用Bam HⅠ处理，则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和Bam HⅠ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列及切割位点 Bam HⅠ G↓GATCC Sau3AⅠ ↓GATC A. 该细菌的DNA分子呈链状结构 B. Bam HⅠ切割后产生的是黏性末端，Sau3AⅠ切割后产生的是平末端 C. 该DNA分子上有2个Bam HⅠ不能识别、但Sau3AⅠ能识别的酶切位点 D. 若用两种酶共同处理，会形成6个大小不同的DNA片段 14. 解磷菌可将难溶性磷转化为植物可吸收的形式，常见解磷菌有芽孢杆菌、假单胞杆菌等。某研究组从土壤中分离解磷菌，提取DNA并进行鉴定，随后通过PCR扩增其核糖体基因（多组样本在PCR仪中扩增约1 h），并对产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果见下图。下列叙述错误的是（ ） A. 若DNA带负电，则凝胶加样孔应靠近电泳槽负极侧 B. 提取液用二苯胺试剂沸水浴鉴定，若呈蓝色则可用于PCR C. 根据凝胶电泳的结果，仍然无法准确鉴定解磷菌的类型 D. 样本7和样本11结果异常的原因是PCR循环次数不足 15. 当代生物技术迅速发展，安全性问题引发社会的广泛关注，下列叙述正确的有（ ） ①转基因栽培作物可能通过花粉发生基因漂移 ②转基因食品存在引发过敏的风险 ③治疗性克隆都不需要严格监管 ④治疗性克隆的原理是细胞的全能性 ⑤我国禁止进行任何生殖性克隆人实验 ⑥治疗性克隆不会产生道德、伦理问题 ⑦生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂等 ⑧生物武器具有传染性强、危害范围广等特点，各国可根据需要研发储备 A. 7项 B. 6项 C. 5项 D. 4项 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 酱油酿造过程中，优良的米曲霉菌株是提升酱油品质和产量的关键，诱变育种是获得高产酶活米曲霉菌株的常用方法，其大致流程为：出发菌株活化→诱变处理→菌株分离纯化→初筛（酶活检测）→复筛（遗传稳定性评估）→优良菌株保存。下列叙述错误的是（ ） 注：复筛时需要对初筛得到的单菌落进行连续传代培养，检测每一代的蛋白酶活性，统计酶活性稳定的菌株比例。 A. 出发菌株活化时，需将菌种接种到液体培养基中振荡培养，以获得对数生长期的菌体 B. 诱变处理时，可采用紫外线诱变方法诱导菌株突变 C. 菌株分离纯化时，可利用稀释涂布平板法将诱变后的菌液涂布在平板上，获得单菌落 D. 复筛评估遗传稳定性时，仅检测单菌落第一代的蛋白酶活性，即可判断菌株的遗传稳定性 17. 豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法正确的是（ ） A. 荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成 C. 过程Ⅳ、Ⅴ需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 D. 该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 18. 嵌合体动物是指由两种或两种以上具有不同遗传特性的细胞组成的聚合胚发育而成的个体，如图表示采用注射法获得小鼠胚胎嵌合体（即黑白花仔鼠）的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不随之增加 B. 图中②不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分 C. 丁的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 黑白花仔鼠的任意一个细胞中同时含有黑鼠和白鼠的基因 19. 女性怀孕后会合成分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗HCG单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断出是否怀孕。图1表示试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体。抗体2和抗体3分别固定在试纸条的T线和C线，抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。图2是运用早早孕诊断试剂盒检测三位女性的结果。下列相关分析错误的是（ ） A. 通过体外培养单个B细胞不能大量获得针对HCG的单克隆抗体 B. 抗体3制备的过程中，需向小鼠注射HCG的α亚基作为抗原 C. 在样品垫滴加的样品会向右扩散经过T线和C线，C线显色即表明该女性怀孕 D. 图2检测结果显示怀孕的是甲和乙 20. HIV通过细胞膜上的A蛋白侵染人体细胞。欧洲人群中存在A基因的一种突变形式（记为a），其缺失了32个碱基对导致A蛋白异常，aa个体天然免疫HIV。为了快速辨别甲、乙、丙个体的基因型，用引物F和R分别对甲、乙、丙个体的基因组进行PCR，每组PCR产物都分为两份，一份直接电泳，一份用限制酶ApoⅠ切割后电泳，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 甲、丙个体的1号加样孔中的样品被ApoⅠ处理过 B. 测序比对3和4号条带可获得a基因缺失的序列 C. 乙个体两个加样孔条带一致，可能是ApoⅠ失活导致 D. PCR产物直接电泳可区分基因型为AA、Aa和aa的个体 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 长期秸秆还田的农田土壤中，富集了可分泌纤维素酶的微生物类群，其中部分菌株可产生次生代谢产物抑制小麦根腐病病原菌的繁殖。科研人员拟从该类农田土壤中分离筛选兼具高效纤维素降解能力和病原菌拮抗活性的功能菌株，相关操作流程如图所示。回答下列问题： （1）微生物培养基常用的灭菌方法为______，为避免杂菌污染，接种相关的无菌操作均需在______附近进行。 （2）步骤②为富集培养，该过程配制的培养基需以______为唯一碳源。从功能上说，该培养基属于______培养基，富集培养的目的是______。 （3）梯度稀释后进行涂布培养时，为使实验结果更准确，每个梯度至少需要涂布______个平板。步骤③稀释涂布平板后，为鉴定单菌落的纤维素分解能力，可向培养基中加入______染料，根据菌落周围______的大小，可初步判断菌株降解纤维素的能力强弱。 （4）步骤⑤为菌株的拮抗活性检测，需将牛津杯竖直立在已经凝固的不含营养物质的琼脂凝胶平板上，再向牛津杯周围倒入混有______的培养基，待培养基凝固后将牛津杯取出，再将待检菌株的无菌发酵液滴加至A、B、C、D四个牛津杯制造的小孔中，适宜条件培养后，可通过观察______的有无及大小，判断菌株的抑菌活性强弱。 22. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字代表处理或生理过程。回答下列问题： （1）②过程形成的愈伤组织是不定形的______团块。______是②③过程的关键。 （2）图中②过程培养获得植株乙的优点有______（答出1点）。生产上，为防止病毒在作物体内逐年积累，可选择茎尖为材料，原因是______。 （3）图中④过程中，相较于幼苗，选择愈伤组织作为实验材料的原因是______。 （4）⑤过程中，需要用______处理愈伤组织获得原生质体；除图中PEG外，促进原生质体融合的方法还有______（写出1个）等。 （5）黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的少量的次生代谢物。某同学认为，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物，主要是利用了促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞产生黄酮类化合物的产量，你______（填“同意”或“不同意”）该同学的观点，理由是：______。 23. 肺癌是目前全球发病率和死亡率均排名第一的癌症。治疗已转移肺癌的主要方法是化疗，但化疗是对全身用药，副作用较大。科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）来对肺癌患者进行治疗，过程如图1所示。回答下列问题： （1）在体外进行动物细胞培养时将细胞置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是______。 （2）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自人的______细胞。①过程诱导融合时，与植物体细胞杂交相比特有的诱导方法是______。单克隆抗体的制备过程中需要进行两次筛选，步骤②是利用______进行筛选；步骤③将步骤②筛选得到的细胞，进行多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用______原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，检测结果为______（填“阳性”或“阴性”）的细胞即为杂交瘤细胞，其具有______的特点。 （3）特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，再从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体的优点是______。 （4）通过步骤④将获得的单克隆抗体和化疗药物通过接头结合在一起，获得ADC。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。ADC能降低化疗的副作用，原因是______。 24. 干扰素具有抑制细胞增殖、调节免疫以及抗病毒等作用，但是干扰素在体外保存困难，若将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，则可在—70℃条件下保存半年。科学家通过重叠延伸PCR技术实现了干扰素基因的定点突变，部分操作如图所示。请回答下列问题： （1）PCR过程中添加引物的作用是______。PCR扩增过程中，温度下降到50℃左右的目的是______。 （2）4次PCR对引物的使用不完全相同，PCR1选择引物A和B，PCR2选择引物C和D，PCR3______（填“需要”或“不需要”）引物，PCR4选择引物______。 （3）PCR3过程中，选择杂交物______（填“1”或“2”）作模板，理由是______。 （4）与X射线诱变相比，写出该突变技术的一条优点______。 （5）将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基因的启动子等调控元件重组在一起，导入牛的______中，获得转基因小牛，在其进入泌乳期即可获得改造后的干扰素。 25. 蚕丝蛋白与人体的角质和胶原结构十分相近，临床实验表明蚕丝人造血管在体内不会引起过敏或致癌作用，可以与活体血肉相连，长成与真血管一样的外壁和内膜，在医药领域有良好的应用前景。Fib—H基因是编码蚕丝蛋白的关键基因，科研人员将Fib—H基因导入大肠杆菌，用于高效生产蚕丝蛋白，图1表示的是转运Fib—H基因的大肠杆菌和Fib—H基因的结构，图2列举的是4种限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题： （1）利用PCR技术扩增Fib—H基因，需根据Fib—H基因设计两种引物，引物长度越短，扩增得到的DNA片段种类越______（填“简单”或“复杂”）。 （2）构建基因表达载体应用______限制酶处理质粒，为了使Fib—H基因能够正确连接在图中所示质粒上，需要在Fib—H基因左侧和右侧分别添加的DNA序列为______。 （3）经检测转基因大肠杆菌内含有Fib—H基因的mRNA，能否确定Fib—H基因成功表达，并说明原因______。 （4）利用大肠杆菌得到的蚕丝蛋白需要进一步加工和修饰，才能获得生物活性，原因是______。 （5）科研人员发现，若将Fib—H基因28号位的酪氨酸替换为色氨酸，家蚕的蚕丝蛋白的产量可提高20%，根据这一研究结果，可通过______工程对家蚕的Fib—H基因进行改造，请用文字和箭头写出基本思路：______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $