精品解析：山东省枣庄市薛城区山东省枣庄市第八中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

高二生物试题 2025.4 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 家庭自制酸奶、自酿果酒等过程通常都不是纯种发酵 B. 酿制米醋时表面的一层白色菌膜主要是由酵母菌组成 C. 用白萝卜制作泡菜时，添加已经腌制过的泡菜汁可缩短腌制时间 D. 自制腐乳时，多种微生物参与了发酵过程，其中毛霉起主要作用 【答案】B 【解析】 【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。 2、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。 3、腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是异养需氧型。毛霉生长的最佳温度是15～18℃，保持一定湿度。 【详解】A、家庭自制酸奶、自酿米酒等过程都没有进行严格的灭菌，因此通常都不是纯种发酵，A正确； B、酿制米醋时表面的一层白色菌膜主要是由醋酸菌组成，B错误； C、泡菜汁中含有一定量的乳酸菌菌种，在腌制过程中，加入一些已经腌制过的泡菜汁可增加乳酸菌的含量，从而缩短腌制时间，C正确； D、自制腐乳时，多种微生物参与了发酵过程，其中毛霉起主要作用，D正确。 故选B。 2. 将两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌（菌株a和b）进行如图所示实验。下列叙述正确的是（ ） A. 实验中接种至基本培养基方法是平板划线法 B. 基本培养基上出现的少量菌落一定是单菌落 C. 基本培养基中包含菌株a和b的特殊营养物质 D. 菌株a和b需要的特殊营养物质有所不同 【答案】D 【解析】 【分析】单独培养菌株a和b时，培养基中均无法生长菌落，而当a和b共同培养时，培养基中有少量菌落产生，a和b混合培养能生长，说明它们能够相互提供相应的特殊营养物质，因此它们生长所需要的特殊营养物质一定有所不同。 【详解】A、根据菌株a和菌株b混合后菌落的分布情况可知，接种至基本培养基时宜用稀释涂布平板法，A错误； B、基本培养基出现的少量菌落不一定都为单菌落，也有可能是重叠的菌落，B错误； C、单独培养菌株a和b时，培养基中均无法生长菌落，而当a和b共同培养时，培养基中有少量菌落产生，因此培养基中无法提供它们单独生长的特殊营养物质，C错误； D、a单独培养和b单独培养均不能生长，a和b混合培养能生长，说明它们能够相互提供相应的特殊营养物质，而无法独立生长，因此它们所需要特殊营养物质有所不同，D正确。 故选D。 3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（　　） A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数 C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料 D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、微生物的纯培养物就是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，A错误； B、平板划线法可以用于微生物的纯培养，不可用于微生物计数，B错误； C、利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于微生物菌体，可制成微生物饲料，C错误； D、在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物，D正确。 故选D。 4. 消毒、灭菌是生物学实验中常见的操作。下列有关说法正确的是（ ） A. 培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染 B. 植物组织培养时，外植体分别用酒精和次氯酸钠溶液处理30min即可 C. 用接种环接种时，取菌种前和接种后都需将接种环进行干热灭菌处理 D. 培养乳酸菌时，需在培养基中添加维生素，配制好的培养基需先灭菌后调节pH 【答案】A 【解析】 【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。 【详解】A、培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染，A正确； B、植物组织培养时需将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30s，后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，B错误； C、每次使用接种环前、后都要进行灼烧灭菌处理，并要注意待接种环冷却后才能使用，C错误； D、培养乳酸菌时，需要在培养基中添加维生素，配制好的培养基需先调节pH后灭菌，D错误。 故选A。 5. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成，其主要工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 制麦时需浸泡大麦，加入脱落酸有利于淀粉酶的形成 B. 糖化后煮沸，主要是为了终止酶的作用并对糖浆灭菌 C. 图中发酵阶段，要始终保持严格的无菌、无氧的环境 D. 生产精酿啤酒需对发酵产物进行更彻底的过滤和消毒 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图，啤酒生产需经过制麦、糖化、发酵等主要环节。酵母菌可进行有氧呼吸获得大量能量，从而快速繁殖，又可以进行无氧呼吸产生酒精和CO2。 【详解】A、浸泡大麦的目的是提高自由水/结合水的比例，进而提高细胞代谢速率和淀粉酶的形成，而加入脱落酸促进休眠，不利于淀粉酶的形成，A错误； B、糖化后煮沸，主要是为了终止酶的作用并对糖浆灭菌，B正确； C、为了缩短发酵时间，发酵初期应适当提供氧气，有利于酵母菌有氧呼吸快速繁殖，C错误； D、生产精酿啤酒一般不添加食品添加剂，不进行过滤和消毒处理等，D错误。 故选B。 6. 紫杉醇是存在于红豆杉植物体内的一种次生代谢物，具有独特的抗肿瘤作用。我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。利用植物组织细胞技术生产紫杉醇的两条途径如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图中外植体一般选自红豆杉的茎尖、芽尖分生区细胞 B. ①②过程配制的培养基中生长素/细胞分裂素的值相同有利于细胞分裂分化 C. 进行培养时①过程一般不需要光照，②过程要给予光照以促进叶绿素的合成 D. 从细胞培养物中提取紫杉醇时可采取分离、纯化等措施 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、茎尖、芽尖分生区细胞一般不含病毒或含病毒极少，是外植体的良好选择，A正确； B、①过程是脱分化，配制的培养基中生长素/细胞分裂素的值相同有利于形成愈伤组织，②过程是再分化，配制的培养基中生长素/细胞分裂素的值高有利于根分化，生长素/细胞分裂素的值低有利于芽分化，所以①②过程配制的培养基中生长素/细胞分裂素的值不同，B错误； C、①过程是脱分化，一般不需要光照，②过程是再分化，要给予光照以促进叶绿素的合成，C正确； D、从细胞培养物中提取紫杉醇时，采取分离、纯化等措施可以提高紫杉醇的纯度和产量，D正确。 故选B。 7. 动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术之一。下列叙述错误的是（ ） A. 将动物组织分散成单个细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B. 原代培养和传代培养过程都需要95%空气和5%CO2的气体条件 C. 悬浮培养的动物细胞进行传代培养时不能直接用离心法收集 D. 向培养的体细胞中转入相关因子可能会使其转化为诱导多能干细胞 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的气体条件：95%空气和5%CO2，取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、动物细胞培养时，将动物组织分散成单个细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，因为这些酶可以分解细胞间的蛋白质，使细胞相互分离，A正确； B、原代培养和传代培养过程都需要95%空气和5%CO2的气体条件，95%空气提供细胞代谢所需的氧气，5%CO2维持培养液的pH，B正确； C、悬浮培养的动物细胞进行传代培养时能直接用离心法收集，通过离心可以使细胞沉淀下来，便于后续处理，C错误； D、向培养的体细胞中转入相关因子可能会使其转化为诱导多能干细胞，这是诱导多能干细胞获取的一种常见方法，D正确。 故选C。 8. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下列说法错误的是（ ） A. ①②③均通过有性生殖的方式产生 B. 胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别 C. 受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其 他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、①③一般通过有性生殖的方式产生，②通过无性繁殖的方式生产，A错误； B、滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别，B正确； C、为保证移植的胚胎正常发育，受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物，C正确； D、过程②克隆技术可得到大量同种个体，为过程③提供了量产方式；过程③是利用转基因技术导入外源优良基因，为过程①、②提供了改良性状的方式，D正确。 故选A。 9. 下列关于胚胎工程技术的叙述，错误的是（ ） A. 体外受精时，卵母细胞需培养至减数分裂Ⅱ中期才可受精 B. 胚胎移植前需要对供体母畜和受体母畜进行同期发情处理 C. 接受胚胎的受体母牛也必须具备相应的优良性状才行 D. 用胚胎分割移植技术可获得多头遗传背景相同的犊牛 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、体外受精时，卵母细胞需培养至减数分裂Ⅱ中期才可进行受精作用，A正确； B、胚胎移植前需要用促性腺激素对供体母畜和受体母畜进行同期发情处理，B正确； C、接受胚胎的受体母牛不需要具备相应的优良性状，只需要健康，生殖能力正常即可，C错误； D、用胚胎分割移植技术可获得多头遗传背景相同的犊牛，因为都是由同一个受精卵发育而来的，D正确。 故选C。 10. 下列有关基因工程工具的叙述，正确的是（ ） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列 B. T4DNA连接酶只能将具有平末端的DNA片段连接 C. 限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶 D. RNA病毒一般不可以作为基因工程的载体 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：根据酶的来源不同分为两类：E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端和平末端。（3）载体：常用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。 2、作为载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 【详解】A、每种限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点进行切割，体现了酶的专一性，A错误； B、根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类：E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端核和平末端，B错误； C、限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程常用的工具，其中限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，C错误； D、常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等，但RNA病毒为遗传物质是RNA，为单链结构，一般不作为基因工程的载体，D正确。 故选D。 11. 玉米的阔叶和窄叶受一对等位基因控制，其中阔叶基因为显性，叶基因内部没有限制酶A的酶切位点，与阔叶基因相比，窄叶基因有一个碱基对发生了改变，从而出现一个限制酶A的酶切位点。为鉴定某阔叶玉米的基因型，提取其DNA进行了PCR和电冰，下列叙述错误的是（ ） A. 需设计能与目的基因结合的单链DNA作为PCR引物 B. 应在PCR扩增体系中添加Mg2+，以激活DNA聚合酶 C. 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，第n次循环共需要引物2n个 D. PCR产物DNA用酶A充分作用后进行电泳，杂合子出现2条条带 【答案】D 【解析】 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、PCR引物一般是单链DNA，故需设计能与目的基因结合的单链DNA作为PCR引物，A正确； B、PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+，用于激活DNA聚合酶，B正确； C、DNA分子进行第n次复制是以第n-1次复制为模板，第n-1次复制共产生2n-1个DNA分子，每个DNA分子的每条链做模板都需要一个引物，故需要引物为2×2n-1=2n，C正确； D、阔叶基因没有限制酶A的酶切位点，用酶A作用后只1个片段，窄叶基因上有1个酶A的酶切位点，酶切后得到2个片段，所以杂合子出现3条条带，D错误。 故选D。 12. 某真菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（ ） A. Y→X→Z B. Z→Y→X C X→Y→Z D. Z→X→Y 【答案】A 【解析】 【分析】由图可知，接种时，相当于在培养基表面划了一个三角形的三条边。左边那条边线是用trpX突变型菌液划线接种的，右边那个边是用trpY突变型菌液接种的，最下面那个边是用trpZ突变型菌液划线接种的。最终结果是，trpX那条接种线左下方出现了又黑又粗的明显的菌落，trpY那条接种线两头出现了明显的菌落，而trpZ那条接种线，没有长出明显的菌落。 【详解】ABCD、①trpY在靠近 trpX区域一侧、trpZ 区域一侧均能生长，说明 trpY 可以利用 trpX、trpZ 色氨酸合成途径中分泌到胞外的中间产物合成色氨酸；②trpX 在靠近trpZ 区域一侧可以生长，说明trpX 可以利用trpZ 色氨酸合成途径中分泌到胞外的中间产物合成色氨酸；③trpZ 不能生长。由①②分析可知，trpY、trpX均可合成色氨酸合成途径所需的最后一种酶，又因为trpY能合成酶X和酶Z，trpX 能合成酶Y和酶 Z，故trpX、trpY均可合成的酶为酶Z；由①分析可知，trpX、trpZ均能合成色氨酸合成途径的中间产物，故trpX、trpZ均可合成色氨酸合成途径所需的第一种酶，又因为trpX 能合成酶X和酶Z，trpZ 能合成酶X 和酶 Y，故trpX、trpZ 均可合成的酶为酶Y。综上，酶Y为色氨酸合成途径所需的第一种酶，酶Z为色氨酸合成途径所需的最后一种酶，则酶X为色氨酸合成途径所需的第二种酶，即3种酶在该合成途径中的作用顺序为 Y→X→Z，A正确，BCD错误。 故选A。 13. 某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列叙述错误的是（ ） A. 也可以选择菜花、香蕉、鸡血等作为实验材料，提取方法可能稍有不同 B. 向DNA提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为粗提取的DNA C. 将洋葱研磨液过滤后，置于4℃冰箱中几分钟后，DNA出现在沉淀物中 D. 鉴定时，先将丝状物溶于2molLNaCl溶液，再加入二苯胺并进行沸水浴加热 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是： ①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的； ②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离； ③在沸水浴条件下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色； 【详解】A、不同类型的生物材料（如菜花、香蕉、鸡血等）中DNA的提取过程虽有相似之处，但也存在差异。例如，使用鸡血作为实验材料时，通常利用红细胞破裂释放出的DNA进行提取，而不需要研磨和去除细胞壁的过程，A正确； B、在DNA提取过程中，加入体积分数为95%的冷酒精后，DNA会因不溶于酒精而析出，形成白色的絮状或丝状沉淀，这就是粗提取得到的DNA，B正确； C、将洋葱研磨液过滤后，置于4℃冰箱中几分钟后，DNA出现在上清液中，C错误； D、鉴定DNA时，常用的方法之一就是二苯胺试剂显色反应，先将丝状物溶于2molLNaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热，反应液会变为蓝色，D正确。 故选C。 14. 组织纤维溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。临床使用发现t-PA有诱发颅内出血的副作用，为此研究人员利用重叠延伸PCR技术对t-PA基因进行改造，过程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. PCR1和PCR2不能在同一体系中同时进行 B. 至少需要经过3轮PCR2扩增才能得到产物2 C. PCR3需要利用引物a和引物d D. 产物1上链和产物2下链形成产物3不需要引物 【答案】B 【解析】 【分析】PCR过程每次循环可分为变性、复性和延伸三步，且需要耐高温的DNA聚合酶来催化。 【详解】A、PCR1和PCR2不能在同一体系中同时进行，因为诱变引物b和c会发生碱基互补配对，A正确； B、由于引物d与模板DNA的一端相配对，第一轮PCR扩增能得到含有引物c的DNA片段，第二轮PCR扩增以含有引物c的DNA片段为模板就能得到产物2，B错误； C、PCR3过程需要获得带有定点突变的目标DNA，因而需要利用的引物是引物a和引物d，C正确； D、产物1上链和产物2下链存在互补关系，能重叠延伸（即复制），因而在形成产物3的过程中不需要引物，D正确。 故选B。 15. Sau3AI和BamHI的识别序列及切割位点如表所示。某DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ分别切割以后，可形成4个和2个大小不同的片段。下列有关叙述正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC Sau3AI ↓GATC A. 两种限制酶切割后形成的黏性末端不相同 B. 能被Sau3AI识别的DNA位点均能被BamHI识别 C. 该DNA分子上有2个BamHⅠ不能识别但Sau3AⅠ能识别的酶切位点 D. 该DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ共同切割后可形成6个片段 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。 【详解】A、BamHI和Sau3AI两种限制酶切割后形成的黏性末端均为GATC，A错误； B、分析表格可知，BamHI的识别序列为GGATCC，Sau3AI的识别序列为GATC，由此可知，能被BamHⅠ识别的序列中包含了被Sau3AI识别的序列，所以能被BamHⅠ识别的序列也一定能被Sau3AI识别，但能被Sau3AI识别的DNA位点不一定能被BamHI识别，B错误； C、分析题意，某DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ分别切割以后，可形成4个和2个大小不同的片段，由此可知，该DNA分子上有2个BamHⅠ不能识别但Sau3AⅠ能识别的酶切位点，C正确； D、该DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点，有2个BamHI的酶切位点，但是BamHI识别序列中包含Sau3AI的识别序列，所以同时用两种酶共同处理，不会形成6个大小不同的DNA片段，D错误。 故选C。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 下图表示纯化培养X菌的部分操作步骤，下列说法错误的是（ ） A. 倒平板要在培养基冷却至大约50℃时进行 B. 接种应在酒精灯火焰附近将培养皿打开一条缝隙 C. 区域①更可能获得单菌落 D. 接种过程需要对接种环进行5次灼烧灭菌 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、由于温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固，所以倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，防止杂菌污染，A正确； B、接种操作应在酒精灯火焰附近将培养皿打开一条缝隙进行，因为酒精灯火焰旁为无菌区，B正确； C、区域①X均数目更多，因而该区域不可能获得单菌落，随着逐步划线操作可以获得单菌落，即区域④更可能获得单菌落，C错误； D、图中用平板划线法分离菌种，划线四个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成也需要灼烧灭菌，共5次，D正确。 故选C。 17. 已知愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过A基因和W基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体a和野生型的愈伤组织分别置于CK与生长素比例为X的培养基中诱导生芽，结果如图1。采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在上述相同的培养基中培养，结果如图2。下列说法正确的是（ ） A. 在高CK诱导下A基因抑制W基因表达 B. 缺失A基因，W基因表达不能促进生芽 C. 过量表达W基因可使生芽时间提前 D. 实验中CK与生长素比例X的值一般大于1 【答案】CD 【解析】 【分析】1、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求，在再分化过程中，生长素比例高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化； 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、由图1分析可知，野生型的W基因表达量与高CK诱导时间的关系是随着处理时间的延长，W基因的表达量显著升高，突变体的W基因的表达量明显少于对照组，说明在高CK诱导下A基因促进W基因表达，A错误； B、通过材料甲和突变体a进行对比，缺失A基因时W基因过量表达可以促进生芽，B错误； C、由材料甲曲线和野生型曲线比较可知，过量表达W基因可使生芽时间提前，C正确； D、实验中的培养基为诱导生芽培养基，故X的值一般大于1，D正确。 故选CD。 18. 科学家用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵母细胞融合，然后将重构胚移植到代孕母羊的体内，最终培育出了克隆羊多莉。下表是科学家获得的部分实验数据，有关说法正确的（ ） 实验组 核供体细胞 融合成功细胞数 早期发育成功胚胎数 移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数 出生并成活羔羊数 1 6岁母羊的乳腺上皮细胞 277 29 1/13 1（多莉） 2 发育到第26天的胚胎成纤维细胞 172 34 4/10 2 3 发育到第9天的早期胚胎细胞 385 90 14/27 4 A. 第1组实验说明已经分化的体细胞可以恢复全能性 B. 克隆羊多莉的培育利用了体外受精、胚胎移植等技术 C. 综合评价第3组的成功率最高，表明胚胎细胞分化程度越低，恢复全能性越容易 D. 克隆羊多莉的培育成功说明克隆人也不存在任何障碍 【答案】AC 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括: ①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理)；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段)；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、第1组实验结果说明已经分化的体细胞可以恢复全能性状，即6岁母羊的乳腺上皮细胞提供的细胞核经过核移植培养后成功获得了胚胎，A正确； B、克隆羊多莉的培育利用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，B错误； C、结合表中实验数据综合评价可知第3组的成功率最高，且第3组所用的供核材料为发育到第9天的早期胚胎细胞，结合前两组的数据可推测，胚胎细胞分化程度越低（早期胚胎细胞分化最低，发育成功胚胎数更对，出生并成活羔羊数更多），恢复全能性越容易，C正确； D、我国禁止克隆人实验，因为克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系，可能引发一系列社会伦理、道德和法律问题，D错误。 故选AC。 19. 和牛肉质鲜嫩、营养丰富。我国科学家利用本地黄牛代孕来繁育和牛，主要步骤如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 收集到的精液应放入ATP溶液中获得大量能量 B. 促进母牛超数排卵通常需要饲喂促性腺激素 C. 步骤乙表示胚胎移植，通常在桑葚胚或囊胚阶段移植 D. 利用该技术获得的和牛部分遗传物质来自本地黄牛 【答案】ABD 【解析】 【分析】分析题图：步骤甲为受精作用，步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素。 【详解】A、收集到的精液应放入特殊的培养液使其获能，获能是获得受精的能力，不是获得受精的能量，A错误； B、促性腺激素的本质是蛋白质（多肽），饲喂会使其分解而失去作用，B错误； C、步骤乙为胚胎移植，胚胎移植是胚胎工程的最后一道“技术工序”，通常在桑葚胚或囊胚阶段移植，C正确； D、本地黄牛是代孕母牛，利用该技术获得的和牛部分遗传物质不会来自本地黄牛，D错误。 故选ABD。 20. 下图表示某基因表达载体中的潮霉素抗性基因和psy基因，有关叙述正确的是（ ） A. 潮霉素抗性基因可以作为标记基因用于筛选 B. 启动子的转录产物为mRNA的起始密码子 C. 转录过程RNA聚合酶沿3'→5'方向读取模板链的碱基序列 D. 潮霉素抗性基因和psy基因以同一条链为模板进行转录 【答案】AC 【解析】 【分析】转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要RNA聚合酶参与。 【详解】A、潮霉素抗性基因可以作为标记基因用于筛选，筛选出含有目的基因的受体细胞，A正确； B、启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，使转录开始，启动子不对应mRNA的起始密码子，B错误； C、转录过程RNA聚合酶沿3'→5'方向读取模板链的碱基序列，而子链的延伸方向为5'→3'，C正确； D、根据图中潮霉素抗性基因和psy基因启动子和终止子的位置可知，潮霉素抗性基因转录方向向左，psy基因转录方向向右，二者以不同的子链为模板进行转录，D错误。 故选AC。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌。将作物种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高作物产量并降低化肥的使用量。科研人员进行筛选和分离土壤中自生固氮菌的部分实验流程如下图。 （1）下表为两种培养基的配方，步骤④应选择培养基______（填“甲”或“乙”），对该培养基进行灭菌应采用______法，平板冷凝后，将平板倒置的目的是______。 培养基类型 培养基组分 培养基甲 甘露醇（C6H14O4）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂 培养基乙 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸馏水、琼脂 （2）纯化培养时应同时培养未接种的培养基，目的是________，接种时使用的工具是_________。 （3）若在步骤④中获得的3个平板的菌落数的平均值为198，则每克土壤中的自生固氮菌的数量为_______个。这种方法统计的菌体数目往往较真实值偏低，原因是_________。 【答案】（1） ①. 甲 ②. 湿热（或高压蒸汽灭菌） ③. 抑制培养基中的水分过快挥发，防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染 （2） ①. 作为对照检测培养基是否被污染 ②. 涂布器 （3） ①. 1.98×107 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只观察到一个菌落 【解析】 【分析】释涂布平板计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。统计平板上的菌落数，就能推测样品中大约含有多少活菌。其计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M（C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。 【小问1详解】 ①步骤④使用的是用于稀释涂布平板法接种的固体选择培养基，用于筛选自生固氮菌，不应含有氮素，根据表中信息可知，培养基甲中含有琼脂，为固体培养基，没有氮素，可选择固氮菌，而培养基乙中蛋白胨、酵母提取物中含有氮素，不能用于筛选固氮菌，因此步骤④应选其中的培养基甲； ②培养基需要使用高压蒸汽灭菌的方式来消灭其中可能残留的各种类型的微生物； ③平板冷凝后倒置，其目的是一方面抑制培养基中的水分过快挥发，另一方面防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。 【小问2详解】 ①进行纯化培养时，要将一个未接种的培养基也放入恒温箱中，目的是检验培养基是否灭菌合格或检测培养过程中培养基是否被杂菌污染，若未接种的培养基上没有菌落形成，说明灭菌合格； ②根据图中信息可知，科研人员进行筛选和分离土壤中自生固氮菌采用的是稀释涂布平板法，因此接种时使用的工具是涂布器。 【小问3详解】 ①根据图中信息可知，稀释过程共稀释了104倍，因此每克土壤中的自生固氮菌的数量为198÷0.1×104=1.98×107个； ②运用这种方法统计的结果往往较真实值偏低，可能原因是有的菌落可能由两个或多个菌体连在一起繁殖形成。 22. “不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。依据该原理，将抗黑胫病的黑芥与不抗黑胫病的甘蓝型油菜进行体细胞杂交获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜新品种，过程如下图所示。 （1）步骤①利用酶分解甘蓝型油菜细胞的_______成分。步骤③的化学方法有______，经过该步骤获得的融合的原生质体不能在清水中培养，原因是______。 （2）步骤④表示_________过程，该过程中细胞分裂素：生长素的值_____（填“>”、“<”或“=”）1，会促进生根。 （3）植物体细胞杂交技术的优势是__________。“不对称体细胞杂交”技术应用的生物学原理有______（答出2点）。 【答案】（1） ①. 纤维素和果胶 ②. 聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法 ③. 无细胞壁会吸水涨破 （2） ①. 脱分化、再分化 ②. < （3） ①. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 ②. 植物细胞的全能性、细胞膜的流动性、染色体变异 【解析】 【分析】题图分析：①表示去壁过程，常用酶解法；②表示用紫外线照射使染色体断裂；③表示原生质体融合形成杂种细胞；④表示植物组织培养。 【小问1详解】 步骤①利用酶分解甘蓝型油菜细胞的细胞壁成分，即纤维素和果胶，因而用到的酶是果胶酶和纤维素酶。步骤③为促进原生质体融合的过程，常用的化学方法有聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法，经过该步骤获得的融合的原生质体不能在清水中培养，这是因为无细胞壁的保护，原生质体在清水中会吸水涨破，导致实验失败。 【小问2详解】 步骤④表示植物组织培养过程，该过程包括脱分化和再分化两步，其原理是植物细胞的全能性，该过程中细胞分裂素：生长素的值“<”1，会促进生根，即培养基中细胞分裂素和生长素的比值能影响分化的方向。 【小问3详解】 植物体细胞杂交技术包括细胞融合和植物组织培养两个主要步骤，其原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，该技术的优势是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，即克服了远缘杂交不亲和的障碍。“不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株，该技术应用的生物学原理植物细胞的全能性、细胞膜的流动性、染色体变异。 23. 抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”具有诊断早、准确率高的特点。下图表示抗HCG单克隆抗体制备流程的示意图。 （1）注射的物质X为________。该技术主要利用了Y细胞_______的特点。为了得到融合细胞采用不同于植物体细胞杂交的融合方法是______。 （2）正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，而瘤细胞只有D途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。在HAT培养基中加入了氨基嘌呤可以从多种融合细胞中筛选获得能连续增殖的杂交瘤细胞，原因是______。 （3）Z处理包括_______，所获得的杂交瘤细胞的特点是________。 【答案】（1） ①. HCG（或人绒毛膜促性腺激素） ②. 无限增殖 ③. 灭活病毒 （2）杂交瘤细胞具有S途径可以进行DNA合成，瘤细胞的DNA合成被阻断，B淋巴细胞不能连续增殖 （3） ①. 克隆化培养、抗体检测 ②. 既能大量增殖又能分泌所需抗体（或HCG抗体） 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 在抗HCG单克隆抗体制备过程中，注射物质X的目的是获得能产生抗HCG抗体的B淋巴细胞，因此物质X是HCG（或人绒毛膜促性腺激素）。Y细胞是骨髓瘤细胞，该技术主要利用了Y细胞无限增殖的特点。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，其中，不同于植物体细胞杂交的融合方法是灭活病毒诱导法。 【小问2详解】 氨基嘌呤能阻断D途径，在HAT培养基中加入氨基嘌呤后，B细胞只存在S途径，但不能连续增殖，因此B淋巴细胞和B淋巴细胞的融合细胞在培养基存活一段时间后死亡；骨髓瘤细胞的DNA合成途径被阻断，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞因无法合成DNA，也不能存活。而杂交瘤细胞既有B淋巴细胞的S途径进行DNA合成，又有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，因此可以在培养基中存活下来。 【小问3详解】 在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选：第一次筛选是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次培养是通过克隆化培养和抗体检测，筛选出既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 24. 人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。图1为HSA基因（仅列出部分序列），图2为构建的基因表达载体，甲、乙、丙表示引物，其碱基分别与相近的核苷酸链互补配对。 （1）利用PCR扩增技术获取HSA基因，需要的酶是________，该技术每次循环需要_______三步。在PCR扩增仪中完成反应后，常采用_________来鉴定PCR的产物。 （2）根据HSA基因的已知序列，应选用引物________进行PCR扩增。 A．5'-CTGTATGCG-3' B．5'-TACGCGTTA-3' C．5'-GACATACGC-3' D．5′-ATGCGCAAT-3' 经过4轮扩增，扩增产物中含有的符合要求的HSA基因的数量为________。 （3）为了检测HSA基因是否正确连接在质粒上，应选择图2中的引物_______对构建的载体进行PCR扩增，理论上出现________bp的条带表明HSA正确连接在了载体上。 【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶） ②. 变性、复性、延伸 ③. 琼脂糖凝胶电泳 （2） ①. AD ②. 8 （3） ①. 乙、丙 ②. 350 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： 1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； 2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； 3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； 4、目的基因的检测与鉴定： （1）分子水平上的检测： ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术； ②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术； ③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术； （2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，由于该过程在较高温度下进行，所以需要耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；PCR每次循环一般可以分为变性、复性、延伸三步。变性是指在高温下，DNA双链解开成为单链；复性是指当温度降低时，引物与单链DNA模板结合；延伸是指在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，从引物的3'端开始延伸合成新的DNA链；在PCR扩增仪中完成反应后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。不同大小的DNA片段在凝胶中的迁移速率不同，通过与标准DNA分子量进行比较，可以判断PCR产物的大小和纯度等。 【小问2详解】 PCR扩增时，引物应与模板链的3'端互补配对，根据图1中HSA基因的序列，应选用引物A（5'-CTGTATGCG-3'）和D（5'-ATGCGCAAT-3'），因为它们的碱基序列与HSA基因两端的部分序列互补；PCR技术的原理是DNA的半保留复制。第一轮扩增得到2个DNA分子；第二轮扩增得到22 =4个DNA分子；第三轮扩增得到23=8个DNA分子；第四轮扩增得到24=16个DNA分子。其中，前两轮扩增得到的DNA分子一端是引物，另一端是原始模板的延伸，不符合两端都是引物的要求；从第三轮开始出现符合要求的HSA基因（即两端都是引物的DNA分子），第三轮产生2个，第四轮产生22= 4个，所以经过4轮扩增，扩增产物中含有的符合要求的HSA基因的数量为8个。 【小问3详解】 为了检测HSA基因是否正确连接在质粒上，应选择图2中的引物乙和丙对构建的载体进行PCR扩增。因为乙和丙分别位于HSA基因插入位点的两侧，若HSA基因正确连接，以重组质粒为模板能扩增出相应片段。由图可知，HSA基因长度为300bp，加上引物丙结合区域的长度（假设引物结合区域长度忽略不计），理论上出现350bp的条带表明HSA正确连接在了载体上。 25. 幽门螺杆菌（Hp）可导致慢性胃炎等疾病，该菌的Ipp20基因编码其特有的抗原蛋白质，研究者欲利用基因工程制备Hp疫苗，用于预防幽门螺杆菌感染。如图表示基本操作流程，如表表示所用质粒上4种限制酶的识别序列及切割位点。 限制酶 BamHI XhoI SphI XbaI 识别序列切割位点 G↓CTAGC ↓TCGAG GCATG↓C C↓CATGG （1）质粒的基本组成单位是______，其中终止子的作用是________。 （2）限制酶SphI切割其识别序列产生的黏性末端是5'-_________-3'。构建基因表达载体时，为了确保将Ipp20基因正确连接在质粒上，最好选用_______酶切割Ipp20基因和质粒。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌常用Ca2+处理，使其处于________的生理状态。后续采用影印法筛选出含有目的基因的大肠杆菌。用无菌毡布压在培养基A的菌落上，带出菌种，平移并压在培养基B上，培养一段时间后的结果，其中数字表示不同的菌落。根据以上步骤分析，培养基A中添加的抗生素是________，培养基A中的菌落中含有Ipp20基因的大肠杆菌形成的菌落是________（填数字）。 【答案】（1） ①. 脱氧核苷酸 ②. 基因转录停止的区域（或终止转录） （2） ①. CATG ②. XhoI、XbaI （3） ①. 能吸收周围环境中DNA ②. 潮霉素 ③. 3、5 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用 PCR 技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是钙离子处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的 DNA 是否插入目的基因−−PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−PCR技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质−−抗原−抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 质粒的化学本质是环状DNA，质粒的基本组成单位是脱氧（核糖）核苷酸，构建的重组表达载体中终止子的作用是终止转录。 【小问2详解】 据表可知限制酶SphI可识别CCATGG序列，且在CC之间切割，所以产生的黏性末端为CATG。基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等，选择的限制酶应在质粒中存在识别位点，根据图示，筛选菌落时利用含有不同抗生素的选择培养基，据此可知应选择的限制酶是XbaI、XhoI，图中质粒上XhoI和XbaI酶切后会去掉一个标记基因，且黏性末端不同，可避免质粒的自身环化和随意连接，故适合做载体的质粒。 【小问3详解】 将重组质粒导入大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞壁的通透性增大，使之容易吸收周围环境中DNA分子。据图可知，目的基因的插入会破坏氯霉素抗性基因，但不会破坏潮霉素抗性基因，因此可将受体细胞接种到含有潮霉素的培养基A上，据图可知，符合要求的为3、5，依据是XhoI和XbaI酶切后切除掉了氯霉素抗性基因。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 高二生物试题 2025.4 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 家庭自制酸奶、自酿果酒等过程通常都不是纯种发酵 B. 酿制米醋时表面的一层白色菌膜主要是由酵母菌组成 C. 用白萝卜制作泡菜时，添加已经腌制过的泡菜汁可缩短腌制时间 D. 自制腐乳时，多种微生物参与了发酵过程，其中毛霉起主要作用 2. 将两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌（菌株a和b）进行如图所示实验。下列叙述正确的是（ ） A. 实验中接种至基本培养基方法是平板划线法 B. 基本培养基上出现的少量菌落一定是单菌落 C. 基本培养基中包含菌株a和b的特殊营养物质 D. 菌株a和b需要的特殊营养物质有所不同 3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（　　） A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数 C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料 D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物 4. 消毒、灭菌是生物学实验中常见的操作。下列有关说法正确的是（ ） A. 培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染 B. 植物组织培养时，外植体分别用酒精和次氯酸钠溶液处理30min即可 C 用接种环接种时，取菌种前和接种后都需将接种环进行干热灭菌处理 D. 培养乳酸菌时，需在培养基中添加维生素，配制好的培养基需先灭菌后调节pH 5. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成，其主要工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 制麦时需浸泡大麦，加入脱落酸有利于淀粉酶的形成 B. 糖化后煮沸，主要是为了终止酶的作用并对糖浆灭菌 C. 图中发酵阶段，要始终保持严格的无菌、无氧的环境 D. 生产精酿啤酒需对发酵产物进行更彻底的过滤和消毒 6. 紫杉醇是存在于红豆杉植物体内的一种次生代谢物，具有独特的抗肿瘤作用。我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。利用植物组织细胞技术生产紫杉醇的两条途径如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图中外植体一般选自红豆杉的茎尖、芽尖分生区细胞 B. ①②过程配制的培养基中生长素/细胞分裂素的值相同有利于细胞分裂分化 C. 进行培养时①过程一般不需要光照，②过程要给予光照以促进叶绿素的合成 D. 从细胞培养物中提取紫杉醇时可采取分离、纯化等措施 7. 动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术之一。下列叙述错误的是（ ） A. 将动物组织分散成单个细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B. 原代培养和传代培养过程都需要95%空气和5%CO2的气体条件 C. 悬浮培养的动物细胞进行传代培养时不能直接用离心法收集 D. 向培养的体细胞中转入相关因子可能会使其转化为诱导多能干细胞 8. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下列说法错误的是（ ） A. ①②③均通过有性生殖的方式产生 B. 胚胎移植前可取滋养层细胞鉴定性别 C. 受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 9. 下列关于胚胎工程技术的叙述，错误的是（ ） A. 体外受精时，卵母细胞需培养至减数分裂Ⅱ中期才可受精 B. 胚胎移植前需要对供体母畜和受体母畜进行同期发情处理 C. 接受胚胎的受体母牛也必须具备相应的优良性状才行 D. 用胚胎分割移植技术可获得多头遗传背景相同的犊牛 10. 下列有关基因工程工具的叙述，正确的是（ ） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列 B. T4DNA连接酶只能将具有平末端的DNA片段连接 C. 限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶 D. RNA病毒一般不可以作为基因工程的载体 11. 玉米的阔叶和窄叶受一对等位基因控制，其中阔叶基因为显性，叶基因内部没有限制酶A的酶切位点，与阔叶基因相比，窄叶基因有一个碱基对发生了改变，从而出现一个限制酶A的酶切位点。为鉴定某阔叶玉米的基因型，提取其DNA进行了PCR和电冰，下列叙述错误的是（ ） A. 需设计能与目的基因结合的单链DNA作为PCR引物 B. 应在PCR扩增体系中添加Mg2+，以激活DNA聚合酶 C. 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，第n次循环共需要引物2n个 D. PCR产物DNA用酶A充分作用后进行电泳，杂合子出现2条条带 12. 某真菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（ ） A. Y→X→Z B. Z→Y→X C. X→Y→Z D. Z→X→Y 13. 某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列叙述错误的是（ ） A. 也可以选择菜花、香蕉、鸡血等作为实验材料，提取方法可能稍有不同 B. 向DNA提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为粗提取的DNA C. 将洋葱研磨液过滤后，置于4℃冰箱中几分钟后，DNA出现在沉淀物中 D. 鉴定时，先将丝状物溶于2molLNaCl溶液，再加入二苯胺并进行沸水浴加热 14. 组织纤维溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。临床使用发现t-PA有诱发颅内出血的副作用，为此研究人员利用重叠延伸PCR技术对t-PA基因进行改造，过程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. PCR1和PCR2不能在同一体系中同时进行 B 至少需要经过3轮PCR2扩增才能得到产物2 C. PCR3需要利用引物a和引物d D. 产物1上链和产物2下链形成产物3不需要引物 15. Sau3AI和BamHI的识别序列及切割位点如表所示。某DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ分别切割以后，可形成4个和2个大小不同的片段。下列有关叙述正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC Sau3AI ↓GATC A. 两种限制酶切割后形成的黏性末端不相同 B. 能被Sau3AI识别的DNA位点均能被BamHI识别 C. 该DNA分子上有2个BamHⅠ不能识别但Sau3AⅠ能识别的酶切位点 D. 该DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ共同切割后可形成6个片段 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 下图表示纯化培养X菌的部分操作步骤，下列说法错误的是（ ） A. 倒平板要在培养基冷却至大约50℃时进行 B. 接种应在酒精灯火焰附近将培养皿打开一条缝隙 C. 区域①更可能获得单菌落 D. 接种过程需要对接种环进行5次灼烧灭菌 17. 已知愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过A基因和W基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体a和野生型的愈伤组织分别置于CK与生长素比例为X的培养基中诱导生芽，结果如图1。采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在上述相同的培养基中培养，结果如图2。下列说法正确的是（ ） A. 在高CK诱导下A基因抑制W基因表达 B. 缺失A基因，W基因表达不能促进生芽 C. 过量表达W基因可使生芽时间提前 D. 实验中CK与生长素比例X的值一般大于1 18. 科学家用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵母细胞融合，然后将重构胚移植到代孕母羊的体内，最终培育出了克隆羊多莉。下表是科学家获得的部分实验数据，有关说法正确的（ ） 实验组 核供体细胞 融合成功细胞数 早期发育成功胚胎数 移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数 出生并成活羔羊数 1 6岁母羊的乳腺上皮细胞 277 29 1/13 1（多莉） 2 发育到第26天的胚胎成纤维细胞 172 34 4/10 2 3 发育到第9天的早期胚胎细胞 385 90 14/27 4 A. 第1组实验说明已经分化体细胞可以恢复全能性 B. 克隆羊多莉的培育利用了体外受精、胚胎移植等技术 C. 综合评价第3组的成功率最高，表明胚胎细胞分化程度越低，恢复全能性越容易 D. 克隆羊多莉的培育成功说明克隆人也不存在任何障碍 19. 和牛肉质鲜嫩、营养丰富。我国科学家利用本地黄牛代孕来繁育和牛，主要步骤如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 收集到的精液应放入ATP溶液中获得大量能量 B. 促进母牛超数排卵通常需要饲喂促性腺激素 C. 步骤乙表示胚胎移植，通常在桑葚胚或囊胚阶段移植 D. 利用该技术获得的和牛部分遗传物质来自本地黄牛 20. 下图表示某基因表达载体中潮霉素抗性基因和psy基因，有关叙述正确的是（ ） A. 潮霉素抗性基因可以作为标记基因用于筛选 B. 启动子的转录产物为mRNA的起始密码子 C. 转录过程RNA聚合酶沿3'→5'方向读取模板链的碱基序列 D. 潮霉素抗性基因和psy基因以同一条链为模板进行转录 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌。将作物种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高作物产量并降低化肥的使用量。科研人员进行筛选和分离土壤中自生固氮菌的部分实验流程如下图。 （1）下表为两种培养基的配方，步骤④应选择培养基______（填“甲”或“乙”），对该培养基进行灭菌应采用______法，平板冷凝后，将平板倒置的目的是______。 培养基类型 培养基组分 培养基甲 甘露醇（C6H14O4）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂 培养基乙 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸馏水、琼脂 （2）纯化培养时应同时培养未接种的培养基，目的是________，接种时使用的工具是_________。 （3）若在步骤④中获得的3个平板的菌落数的平均值为198，则每克土壤中的自生固氮菌的数量为_______个。这种方法统计的菌体数目往往较真实值偏低，原因是_________。 22. “不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。依据该原理，将抗黑胫病的黑芥与不抗黑胫病的甘蓝型油菜进行体细胞杂交获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜新品种，过程如下图所示。 （1）步骤①利用酶分解甘蓝型油菜细胞的_______成分。步骤③的化学方法有______，经过该步骤获得的融合的原生质体不能在清水中培养，原因是______。 （2）步骤④表示_________过程，该过程中细胞分裂素：生长素的值_____（填“>”、“<”或“=”）1，会促进生根。 （3）植物体细胞杂交技术的优势是__________。“不对称体细胞杂交”技术应用的生物学原理有______（答出2点）。 23. 抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”具有诊断早、准确率高的特点。下图表示抗HCG单克隆抗体制备流程的示意图。 （1）注射的物质X为________。该技术主要利用了Y细胞_______的特点。为了得到融合细胞采用不同于植物体细胞杂交的融合方法是______。 （2）正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，而瘤细胞只有D途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。在HAT培养基中加入了氨基嘌呤可以从多种融合细胞中筛选获得能连续增殖的杂交瘤细胞，原因是______。 （3）Z处理包括_______，所获得的杂交瘤细胞的特点是________。 24. 人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。图1为HSA基因（仅列出部分序列），图2为构建的基因表达载体，甲、乙、丙表示引物，其碱基分别与相近的核苷酸链互补配对。 （1）利用PCR扩增技术获取HSA基因，需要的酶是________，该技术每次循环需要_______三步。在PCR扩增仪中完成反应后，常采用_________来鉴定PCR的产物。 （2）根据HSA基因的已知序列，应选用引物________进行PCR扩增。 A．5'-CTGTATGCG-3' B．5'-TACGCGTTA-3' C．5'-GACATACGC-3' D．5′-ATGCGCAAT-3' 经过4轮扩增，扩增产物中含有的符合要求的HSA基因的数量为________。 （3）为了检测HSA基因是否正确连接在质粒上，应选择图2中的引物_______对构建的载体进行PCR扩增，理论上出现________bp的条带表明HSA正确连接在了载体上。 25. 幽门螺杆菌（Hp）可导致慢性胃炎等疾病，该菌的Ipp20基因编码其特有的抗原蛋白质，研究者欲利用基因工程制备Hp疫苗，用于预防幽门螺杆菌感染。如图表示基本操作流程，如表表示所用质粒上4种限制酶的识别序列及切割位点。 限制酶 BamHI XhoI SphI XbaI 识别序列切割位点 G↓CTAGC ↓TCGAG GCATG↓C C↓CATGG （1）质粒的基本组成单位是______，其中终止子的作用是________。 （2）限制酶SphI切割其识别序列产生的黏性末端是5'-_________-3'。构建基因表达载体时，为了确保将Ipp20基因正确连接在质粒上，最好选用_______酶切割Ipp20基因和质粒。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌常用Ca2+处理，使其处于________的生理状态。后续采用影印法筛选出含有目的基因的大肠杆菌。用无菌毡布压在培养基A的菌落上，带出菌种，平移并压在培养基B上，培养一段时间后的结果，其中数字表示不同的菌落。根据以上步骤分析，培养基A中添加的抗生素是________，培养基A中的菌落中含有Ipp20基因的大肠杆菌形成的菌落是________（填数字）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$