高二生物下学期期中真题重组卷（新教材人教版）

………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2025-2026学年高二下学期期中真题重组卷 生 物 （满分100分，考试用时75分钟） 注意事项： 1．答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的准考证号、姓名、考场号和座位号填写在答题卡上。用2B铅笔在“考场号”和“座位号”栏相应位置填涂自己的考场号和座位号。将条形码粘贴在答题卡“条形码粘贴处”。 2．作答选择题时，选出每小题答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案，答案不能答在试卷上。 3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答的答案无效。 4．考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，将试卷和答题卡一并交回。 5．测试范围：教版高中选择性必修3全部。 6. 难度系数：0.65。 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（膜过滤法检测水质）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL水样不得检出大肠杆菌或者1000mL水样检出不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．该方法的原理可能是利用滤膜截留水中的大肠杆菌，从而实现富集与分离 B．完成过滤后应将滤膜的B面朝上放置于培养基上，以利于菌落形成 C．若单独培养空白滤膜（未过滤水样）后长出菌落，说明滤膜存在杂菌污染 D．可用血细胞计数板直接计数替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量 2．（地域特色）（25-26高二下·云南楚雄·期中）我国自古就有青梅泡酒的习俗。如图为制作青梅酒的简易装置图。下列叙述正确的是（　　） A．图中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是防止酒精挥发 B．青梅泡酒是利用青梅中有机物能溶解在酒精中，青梅酿酒是利用微生物发酵产生酒精 C．若酒精发酵成功，则从图中出料口取样后可用溴麝香草酚蓝溶液鉴定 D．青梅酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 3．（工业应用）（25-26高二下·山东济宁·期中）利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的流程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A．米曲霉分泌的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 B．发酵池中乳酸菌和酵母菌存在种间竞争关系 C．发酵池中出现气泡与乳酸菌无氧呼吸产生的CO2有关 D．发酵池发酵过程中，搅拌可缩短发酵时间 4．（实验探究）（24-25高二下·山东聊城·期中）变色圈法是将潜在的目标微生物样本接种到含有特定底物的培养基上，随着微生物在培养基上生长和繁殖，它们会分泌相应的酶来分解这些底物，该过程中产生的可溶性小分子化合物扩散会引起特定区域指示剂的颜色变化。下列相关分析错误的是（　　） A．变色圈法可以直接用于大规模工业发酵过程中的微生物筛选 B．变色圈法中使用的指示剂能够与酶分解底物产生的产物发生反应，从而引起颜色变化 C．基于微型化培养及多种检测技术可实现微生物的高通量筛选 D．变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标 5．（传统文化）（24-25高二下·山东聊城·期中）苏轼的《超然台记》中提到“撷园蔬，取池鱼，酿秫（谷物）酒，瀹（煮）脱粟而食之，曰：‘乐哉游乎！’”下列有关利用秫酿造酒的叙述，不正确的是（　　） A．秫酿造酒后期密封不严可能会促进醋酸菌发酵产生醋酸 B．秫酿造酒过程中需要前期通入无菌空气，后期制造无氧环境，以利于酒精发酵 C．秫酿造酒前要对酿酒器具和秫进行严格灭菌处理 D．黄酒酿造过程中发酵液出现的气体在酵母菌细胞质基质和线粒体中产生 6．（23-24高二下·安徽合肥·期中）《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（    ） A．“酒一斗，用水三斗，合瓮盛”是为避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 B．“置日中曝之”可以提高发酵液温度，有利于醋酸发酵，缩短发酵时间 C．“衣（指菌膜）”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D．“挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶液中的溶解氧 7．（25-26高三上·贵州·期中）A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌（Sau，其适宜生长温度约为37℃）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d（分别对应A、B、C、D四种抗生素）置于Sau均匀分布的平板上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述正确的是（    ） A．倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理 B．四种抗生素中，抗生素C治疗 Sau感染引起的肺炎效果最好 C．滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强 D．接种后的培养皿倒置于37 ℃的恒温箱中培养 8．（25-26高二下·云南楚雄·期中）“天下名兰、花香大理”，2025年中国第十五届国际兰花、茶花博览会在云南大理举行。博览会中大多数兰花的种苗都是通过组织培养生产的。用蝴蝶兰的茎尖进行植物组织培养可培育出试管苗。下列叙述错误的是（　　） A．对茎尖消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强 C．若直接将无根的蝴蝶兰幼苗接种到无植物激素的基本培养基上进行适宜条件的培养，也可以产生生根苗 D．试管苗移栽入土前常采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 9．（24-25高二下·山东聊城·期中）珍稀中草药蛇足石杉的有效成分为石杉碱甲，但含量较低。研究人员发现共生真菌可与植物细胞共用酶系统，将蛇足石杉细胞与真菌进行共生培养可促进石杉碱甲的生成。图甲、图乙分别表示共生培养过程中蛇足石杉细胞数量及石杉碱甲含量随时间的变化。下列叙述正确的是（　　） A．利用植物细胞培养生产石杉碱甲需将外植体培育到完整植物体阶段 B．石杉碱甲属于次生代谢产物，一般认为次生代谢产物不是植物基本的生命活动所必需的 C．图甲实验结果可以确定第4天为传代培养和收集代谢物的最佳时间 D．图乙实验结果证明共生真菌利用了蛇足石杉细胞的酶系统 10．（25-26高二下·河北邢台·月考）间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A．培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B．SRC增殖时若出现细胞贴壁生长特性，则应定期用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C．间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D．若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 11．（24-25高二下·山东聊城·期中）有研究者利用捐献的人类胚胎，在体外构建了人类胚胎甲状腺类器官（hFTO）培养系统，如图所示。在体外培养体系中通过激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，从而模拟甲状腺的关键发育事件。下列叙述正确的是（　　） A．可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞进行培养 B．甲状腺细胞应置于95%O2和5%CO2的混合气体环境中培养 C．hMTO与hFTO相比，细胞中的DNA、RNA和蛋白质都发生了改变 D．甲状腺类器官的培养过程中体现了细胞的全能性 12．（25-26高二下·湖北黄冈·期中）重组人抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体药物可用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎及银屑病等。如图为利用小鼠制备该单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是（　　） A．图中的“抗原”应为肿瘤坏死因子-α B．细胞1为 B细胞，一般取自脾脏且种类繁多 C．融合处理可以使所有收集的细胞发生两两融合 D．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞大规模培养或注射到小鼠腹腔增殖 13．（25-26高三上·河北石家庄·期中）我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的嵌合体猴。如图所示，研究人员将可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A．嵌合体猴仅部分位置发出绿色荧光的现象是染色体变异的结果 B．嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关激素促使其同期发情 D．嵌合囊胚中的滋养层细胞将来会发育成嵌合体猴的胎盘和胎膜 14．（25-26高二下·山东济宁·期中）科学家利用AI预测了某种致病病毒的关键蛋白（X蛋白）的三维结构，并基于此设计了一种能特异性抑制X蛋白的药物分子。下列相关叙述错误的是（　　） A．AI预测蛋白质结构可加速药物靶点的筛选，缩短药物研发周期 B．可利用蛋白质工程直接对X蛋白的氨基酸序列进行改造，增强其稳定性 C．若将编码X蛋白的基因导入大肠杆菌中并让其表达，须使用能在大肠杆菌中发挥作用的启动子 D．该药物分子与X蛋白结合后，可能改变X蛋白的空间结构，从而抑制其功能 15．（25-26高二下·山东济宁·期中）为了追踪小鼠的Gata3基因在小鼠细胞中的表达过程，实验人员通过基因工程的方法，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因的一端，实现两个基因融合表达，构建的融合基因如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码起始密码子对应的序列 B．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码终止密码子对应的序列 C．整合前，须除去Gata3基因中的终止子和GFP基因中的启动子 D．转录时，先转录Gata3基因，后转录GFP基因；翻译时，先合成GFP蛋白，后合成Gata3蛋白 16．（25-26高二下·山东济宁·期中）PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A．a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B．c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C．高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D．若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 17．（24-25高二下·山东聊城·期中）T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，温度较高易失去活性。研究发现若将T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为更易形成二硫键的半胱氨酸，可在保证酶活性的前提下有效提高其耐热性。科研人员用大肠杆菌作为受体菌，利用定点诱变技术对编码T4溶菌酶的基因进行改造，成功生产出了耐高温的T4溶菌酶。下列说法错误的是（　　） A．引起T4溶菌酶分子结构改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化 B．导入定点诱变后的T4溶菌酶基因前，需先用Ca2+处理受体菌细胞 C．T₄溶菌酶的改造属于基因工程，耐热性提高可能与其分子内部二硫键的数量有关 D．从大肠杆菌细胞中获取的T4溶菌酶用于生产实践时，还需要明确催化反应的最适温度等 18．（24-25高二下·山东聊城·期中）从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A．若选用鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，进行吸水涨破，进而破碎细胞 B．若以新鲜菜花为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 C．DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精，利用这一原理，可初步分离DNA和蛋白质 D．DNA溶液加入二苯胺试剂后就可呈蓝色 19．（23-24高二下·辽宁鞍山·期末）小麦和水稻是我国主要粮食作物，其中赖氨酸含量很低，科研人员通过以下操作，将辣椒中的含赖氨酸较高的某蛋白基因转入小麦，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．逆转录合成DNA的过程需要DNA聚合酶催化 B．通过逆转录获得的cDNA有多种 C．目的基因直接导入小麦就能表达高赖氨酸蛋白 D．T0代转基因植株一定可培育出纯合含高赖氨酸蛋白的植株 20．（24-25高二下·广东肇庆·期中）基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的酶切位点。下列叙述错误的是（　　） A．Sau3AⅠ可切割BamHⅠ和Bcl Ⅰ的识别序列，其具有专一性 B．质粒被BamHⅠ和Bcl Ⅰ切割后，并在DNA连接酶的作用下，会发生环化 C．构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶只能是BamHⅠ D．分别用Sau3AⅠ和BamHⅠ切割目的基因和质粒，形成的重组质粒能被Sau3A Ⅰ切成4个片段 21．（21-22高二下·安徽芜湖·期中）下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D．④→⑤经过了脱分化和再分化的过程 22．（25-26高三上·广东·期中）人工智能（Artificial Intelligence，英文缩写为AI）是研究、开发用于模拟、延伸和扩展人的智能的理论、方法、技术及应用系统的一门新技术科学。利用人工智能模型（AI）预测蛋白质的结构和功能，极大地加速了人类对蛋白质的了解。下列叙述错误的是（　　） A．利用AI设计蛋白质可提高预测效率和精度 B．利用AI设计蛋白质可推动生物学和医学发展 C．AI分析氨基酸的差异不能用于进化亲缘关系比较 D．AI可能对理解疾病发生机制有一定帮助 23．（25-26高二下·山东济宁·期中）基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法正确的是（　　） A．大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B．用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C．含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用植物组织培养技术 D．将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入乳腺细胞后可获得乳腺生物反应器 24．（24-25高二下·江苏徐州·期末）生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述错误的是（    ） A．转基因生物引发安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位不唯一 B．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”均利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C．我国禁止生殖性克隆人的实验，对治疗性克隆实验也严格审查 D．生物武器是利用致病微生物或毒素等生物活性物质来形成杀伤力 25．（24-25高二下·四川绵阳·期末）水稻根部一般没有根瘤菌，在种植时常需要施加氮肥。科学家想利用基因工程技术减少施用氮肥的生产成本及可能造成的环境污染，提出了以下2种方案： ①把根瘤菌的固氮相关基因导入水稻根系微生物中，使微生物能在根系处固氮； ②将固氮相关基因导入水稻细胞中，建立水稻的“小型化肥厂”，让水稻直接固氮。 下列对2种方案的评价，错误的是（　　） A．从亲缘关系的远近来看，方案①更易成功 B．从便捷性角度看，能固氮的水稻新品种更值得推广 C．从转基因安全性角度看，能固氮的水稻根系微生物更值得推广 D．从育种年限看，通过杂交育种获得稳定遗传的转基因水稻新品种，所需周期短 二、非选择题：本题共5小题，共50分。 26．（11分，除标注外每空1分）（25-26高二下·河南开封·期中）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是菌T可分泌_______酶，将秸秆中的纤维素分解为_______。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入______等营养成分，该营养成分的作用是______。通常可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有______（2分）（答出2点即可）。 (3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是______。发酵液中的乙醇可用______溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是______。（2分） 27．（8分，除标注外每空1分）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为培育“高产耐盐碱”的水稻植株，某研究小组利用植物体细胞杂交技术设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受植株甲（2N＝18）细胞质基因和植株乙（2N＝24）细胞核基因控制。回答下列问题： 注：失活处理后相应结构将被降解。 (1)过程①需用_______处理，两者处理时间不同的原因可能是_______。（2分） (2)过程②对植物细胞进行失活处理目的是促使原生质体甲2的________失活和原生质体乙2的________失活。 (3)过程③的实现依赖细胞膜具有_______这一结构特点，常用化学试剂________处理；过程④指的是_______。 28．（8分，除标注外每空1分）（24-25高二下·天津·期中）单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： (1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有__________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。 (2)仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 (3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_______________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________，（2分）筛选②的目的是筛选出____________________。（2分） (4)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 29．（11分，除标注外每空1分）（24-25高二下·浙江杭州·期中）土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，Kanr为卡那霉素抗性基因。请分析回答： 限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindⅢ SacⅠ 识别序列和切割位点 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C (1)过程①需要模板DNA、_____（同时提供原料和能量）、酶、2种引物、Mg2+等。在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是_____；若PCR产物中出现非特异性条带，可通过_____（写出一种方法）来优化结果。 (2)过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是_____和_____，限制酶识别序列应该添加在引物的_____端。 5'-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3' 5'-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3' (3)花椰菜病毒启动子的作用是_____。（2分）本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是_____。（2分） (4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用HindⅢ完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有_____。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明HindⅢ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 30．（12分，除标注外每空1分）（25-26高三上·河北·期中）研究人员将人胰岛素基因（hINS）转入山羊体内，以获得动物乳腺生物反应器。下图所示为hINS基因的部分序列和构建基因表达载体所需质粒的结构。EcoR V、XbaⅠ为两种识别序列不同的限制酶，箭头所指为它们在质粒上的切点。回答下列问题： (1)获得基因工程所用的hINS基因，需先从胰岛B细胞的细胞质中获得________，经逆转录获得cDNA，再利用PCR技术扩增胰岛素基因，扩增hINS基因的前提是________，以便合成引物，扩增时，用________的方法使DNA变性。 (2)hINS基因转录的模板是________（填“a”或“b”）链。在扩增hINS基因时，应在引物的________（填“3＇”或“5＇”）端添加限制酶识别序列，其中基因上游添加________酶的识别序列。在保证质粒结构完整性的前提下，为使HSA基因能在乳腺细胞中表达，应将该基因与________的基因的启动子重组在一起。 (3)利用山羊乳腺生物反应器来生产胰岛素时，要将基因表达载体导入山羊的________（填“受精卵”或“乳腺细胞”）中。 (4)有人尝试让水稻细胞产生胰岛素，在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将hINS基因插入________片段中，该片段的作用是_________。（2分）检测水稻胚乳细胞中胰岛素基因是否成功表达可采用的方法是________。 试题 第3页（共6页） 试题 第4页（共6页） 试题 第1页（共6页） 试题 第2页（共6页） 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期期中真题重组卷 生 物·参考答案 一、单项选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D B C A C C D D B B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A C A B C D C A B D 题号 21 22 23 24 25 答案 D C C B D 二、非选择题（5小题，共50分） 26．（11分，除标注外每空1分） (1)纤维素 葡萄糖 (2)氮源 为合成微生物细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂） ①把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30 min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时间不少于10—12分钟（2分） (3)制造无氧环境 放出二氧化碳 酸性重铬酸钾 (4)节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等（2分） 27．（8分，除标注外每空1分） (1)纤维素酶和果胶酶 两者细胞壁结构和组成成分的含量可能存在差异（2分） (2)细胞核（或细胞核基因或染色体） 细胞质（或细胞质基因） (3)一定的流动性 聚乙二醇（PEG）（或高Ca2+-高pH试剂） 原生质体形成新的细胞壁（再生出细胞壁） 28.（8分，除标注外每空1分） (1)Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 (2)3 (3)杂交瘤细胞 既能无限增殖，又能产生特异性抗体（2分） 能产生所需（特定）抗体的杂交瘤细胞（2分） (4)95%空气和5%CO2 29．（11分，除标注外每空1分） (1) dNTP 使反应成分集中沉降到离心管底部，保证PCR反应进行 适当提高复性温度（调整引物浓度、Mg²⁺浓度等） (2)BamHI SacI 5’ (3)RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录（2分） 依据bar表达推测目的基因同时表达（2分） (4)①②④ 30．（12分，除标注外每空1分） (1)mRNA（RNA） 要有一段已知目的基因（hINS基因）的核苷酸序列 （高温）加热 (2)b 5' Xba l 乳腺中特异性表达 (3)受精卵 (4)T-DNA 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上（2分） 抗原-抗体杂交 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期期中真题重组卷 生 物 （满分100分，考试用时75分钟） 注意事项： 1．答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的准考证号、姓名、考场号和座位号填写在答题卡上。用2B铅笔在“考场号”和“座位号”栏相应位置填涂自己的考场号和座位号。将条形码粘贴在答题卡“条形码粘贴处”。 2．作答选择题时，选出每小题答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案，答案不能答在试卷上。 3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答的答案无效。 4．考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，将试卷和答题卡一并交回。 5．测试范围：人教版高中选择性必修3全部。 6. 难度系数：0.65。 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（膜过滤法检测水质）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL水样不得检出大肠杆菌或者1000mL水样检出不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．该方法的原理可能是利用滤膜截留水中的大肠杆菌，从而实现富集与分离 B．完成过滤后应将滤膜的B面朝上放置于培养基上，以利于菌落形成 C．若单独培养空白滤膜（未过滤水样）后长出菌落，说明滤膜存在杂菌污染 D．可用血细胞计数板直接计数替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量 【答案】D 【详解】A、图示方法的原理可能是利用滤膜截留水中的大肠杆菌，从而实现富集与分离，为后续步骤做准备，A正确； B、完成过滤后应将滤膜的B面朝上放置于培养基上，因为可能存在的大肠杆菌在A面，从而有利于菌落形成，B正确； C、若单独培养空白滤膜（未过滤水样）后长出菌落，说明滤膜存在杂菌污染，则实验结果不可靠，C正确； D、对于细菌计数需要可用细菌计数板直接计数，但该方法不能判断菌体的活性，膜过滤法可检测饮用水中的大肠杆菌活菌的数量，D错误。 2．（地域特色）（25-26高二下·云南楚雄·期中）我国自古就有青梅泡酒的习俗。如图为制作青梅酒的简易装置图。下列叙述正确的是（　　） A．图中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是防止酒精挥发 B．青梅泡酒是利用青梅中有机物能溶解在酒精中，青梅酿酒是利用微生物发酵产生酒精 C．若酒精发酵成功，则从图中出料口取样后可用溴麝香草酚蓝溶液鉴定 D．青梅酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 【答案】B 【详解】A、图中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是防止杂菌污染，A错误； B、青梅泡酒是利用青梅中有机物能溶解在酒精中，青梅酿酒是利用微生物发酵产生酒精，酒精发酵过程中的主要菌种是酵母菌，B正确； C、若酒精发酵成功，则从图中出料口取样后可用酸性重铬酸钾溶液鉴定，若出现灰绿色可证明酒精的产生，C错误； D、青梅酒发酵过程中，微生物繁殖越快消耗的能量越多，则发酵产物产率越低，D错误。 3．（工业应用）（25-26高二下·山东济宁·期中）利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的流程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A．米曲霉分泌的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 B．发酵池中乳酸菌和酵母菌存在种间竞争关系 C．发酵池中出现气泡与乳酸菌无氧呼吸产生的CO2有关 D．发酵池发酵过程中，搅拌可缩短发酵时间 【答案】C 【详解】A、米曲霉发酵时可分泌蛋白酶，能将大豆等原料中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，A正确； B、乳酸菌和酵母菌共同生活在发酵池中，会争夺营养物质和生存空间，存在竞争关系，B正确； C、乳酸菌为厌氧微生物，无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生CO₂，发酵池中的气泡是酵母菌无氧呼吸产生CO₂导致的，C错误； D、发酵过程中搅拌能使微生物与营养物质充分接触，还可适当增加溶氧量，促进微生物的代谢繁殖，缩短发酵时间，D正确。 4．（实验探究）（24-25高二下·山东聊城·期中）变色圈法是将潜在的目标微生物样本接种到含有特定底物的培养基上，随着微生物在培养基上生长和繁殖，它们会分泌相应的酶来分解这些底物，该过程中产生的可溶性小分子化合物扩散会引起特定区域指示剂的颜色变化。下列相关分析错误的是（　　） A．变色圈法可以直接用于大规模工业发酵过程中的微生物筛选 B．变色圈法中使用的指示剂能够与酶分解底物产生的产物发生反应，从而引起颜色变化 C．基于微型化培养及多种检测技术可实现微生物的高通量筛选 D．变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标 【答案】A 【详解】A、变色圈法仅能初步筛选出可分泌相应酶分解底物的菌株，而大规模工业发酵的微生物筛选还需要评估菌株的发酵耐受性、产物产率、后续提取难度等多方面指标，因此变色圈法不能直接用于大规模工业发酵的微生物筛选，A错误； B、由题干可知，酶分解底物产生的可溶性小分子扩散后会引起指示剂颜色变化，说明指示剂可与分解产物发生显色反应，B正确； C、微型化培养可同时对大量菌株进行独立培养，结合多种检测技术可同时完成多组菌株的筛选，能够实现微生物的高通量筛选，C正确； D、变色圈越大，说明微生物分泌的相关酶活性越高、分解底物产生的产物扩散范围越广，因此变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标，D正确。 5．（传统文化）（24-25高二下·山东聊城·期中）苏轼的《超然台记》中提到“撷园蔬，取池鱼，酿秫（谷物）酒，瀹（煮）脱粟而食之，曰：‘乐哉游乎！’”下列有关利用秫酿造酒的叙述，不正确的是（　　） A．秫酿造酒后期密封不严可能会促进醋酸菌发酵产生醋酸 B．秫酿造酒过程中需要前期通入无菌空气，后期制造无氧环境，以利于酒精发酵 C．秫酿造酒前要对酿酒器具和秫进行严格灭菌处理 D．黄酒酿造过程中发酵液出现的气体在酵母菌细胞质基质和线粒体中产生 【答案】C 【详解】A、醋酸菌是好氧生物，可利用酒精生成醋酸，秫酿造酒后期密封不严会促进醋酸菌发酵产生醋酸，A正确； B、酿酒的核心菌种是酵母菌，前期通入无菌空气，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，增加菌种数量，后期密封制造无氧环境，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B正确； C、秫酿造酒前要对酿酒器具进行严格灭菌处理，但秫不能进行灭菌处理，因为秫上有酿酒所需的微生物，C错误； D、黄酒酿造过程中，酵母菌先进行有氧呼吸，有氧呼吸的第二阶段在线粒体中产生二氧化碳，之后进行无氧呼吸，无氧呼吸的第二阶段在细胞质基质中产生二氧化碳，所以发酵液出现的气体在酵母菌细胞质基质和线粒体中产生，D正确。 6．（23-24高二下·安徽合肥·期中）《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（    ） A．“酒一斗，用水三斗，合瓮盛”是为避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 B．“置日中曝之”可以提高发酵液温度，有利于醋酸发酵，缩短发酵时间 C．“衣（指菌膜）”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D．“挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶液中的溶解氧 【答案】C 【详解】A、酒一斗，用水三斗，合瓮盛通过稀释降低酒精浓度，避免高浓度酒精抑制醋酸菌等微生物的生长繁殖（醋酸发酵需适宜酒精浓度），A正确； B、置日中曝之利用日光提高发酵液温度，因醋酸菌的最适生长温度为30~35℃，升温可促进其代谢，缩短发酵周期，B正确； C、衣（菌膜）是醋酸发酵过程中醋酸菌在液面大量繁殖形成的菌膜，而非酵母菌（酵母菌在酒精发酵阶段作用，且高酒精环境下活性受抑制），C错误； D、挠搅通过搅拌使微生物与营养物充分接触，同时增加发酵液中的溶解氧，满足醋酸菌（需氧型）的代谢需求，D正确。 故选C。 7．（25-26高三上·贵州·期中）A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌（Sau，其适宜生长温度约为37℃）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d（分别对应A、B、C、D四种抗生素）置于Sau均匀分布的平板上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述正确的是（    ） A．倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理 B．四种抗生素中，抗生素C治疗 Sau感染引起的肺炎效果最好 C．滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强 D．接种后的培养皿倒置于37 ℃的恒温箱中培养 【答案】D 【详解】A、培养基和培养皿应该在倒平板之前进行灭菌，A错误； B、抑菌圈直径和菌落直径的比值大小代表了抑菌效果的大小，所以抗生素A抑菌效果最好，则治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，B错误； C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远，药性变弱，说明菌落抗药性越弱，C错误； D、接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养，防止冷凝水滴落引发杂菌污染，D正确。 故选D。 8．（25-26高二下·云南楚雄·期中）“天下名兰、花香大理”，2025年中国第十五届国际兰花、茶花博览会在云南大理举行。博览会中大多数兰花的种苗都是通过组织培养生产的。用蝴蝶兰的茎尖进行植物组织培养可培育出试管苗。下列叙述错误的是（　　） A．对茎尖消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强 C．若直接将无根的蝴蝶兰幼苗接种到无植物激素的基本培养基上进行适宜条件的培养，也可以产生生根苗 D．试管苗移栽入土前常采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 【答案】D 【详解】A、对外植体消毒时，若消毒过度会损伤茎尖活细胞，消毒不足会残留杂菌造成培养污染，因此消毒原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害，A正确； B、愈伤组织是外植体经脱分化形成的未分化薄壁组织，没有特定的结构和功能，分化程度低、全能性强，B正确； C、无根的蝴蝶兰幼苗的芽等器官可以合成生长素等内源植物激素，生长素可促进生根，因此即使接种到无外源植物激素的基本培养基中，也能产生生根苗，C正确； D、蛭石属于无机基质，特点是透气性好、保水性强、带菌量低，但本身并不含有丰富的营养物质，D错误。 9．（24-25高二下·山东聊城·期中）珍稀中草药蛇足石杉的有效成分为石杉碱甲，但含量较低。研究人员发现共生真菌可与植物细胞共用酶系统，将蛇足石杉细胞与真菌进行共生培养可促进石杉碱甲的生成。图甲、图乙分别表示共生培养过程中蛇足石杉细胞数量及石杉碱甲含量随时间的变化。下列叙述正确的是（　　） A．利用植物细胞培养生产石杉碱甲需将外植体培育到完整植物体阶段 B．石杉碱甲属于次生代谢产物，一般认为次生代谢产物不是植物基本的生命活动所必需的 C．图甲实验结果可以确定第4天为传代培养和收集代谢物的最佳时间 D．图乙实验结果证明共生真菌利用了蛇足石杉细胞的酶系统 【答案】B 【详解】A、利用植物细胞培养生产石杉碱甲等次生代谢产物，不需要将外植体培育成完整植物体，培养到愈伤组织阶段即可，A错误； B、石杉碱甲属于植物次生代谢产物，次生代谢产物一般不是植物基本生命活动必需的，B正确； C、图甲仅能显示不同时间的细胞数量，无法确定收集代谢产物的最佳时间（收集代谢物需要结合产物含量判断），C错误； D、图乙仅展示了培养时间对石杉碱甲含量的影响，没有设置对照实验，无法证明“共生真菌利用蛇足石杉细胞的酶系统”这一结论，D错误。 10．（25-26高二下·河北邢台·月考）间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A．培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B．SRC增殖时若出现细胞贴壁生长特性，则应定期用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C．间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D．若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 【答案】B 【详解】A、培养SRC时添加血清可补充细胞所需的未知营养因子，通入CO₂的作用是维持培养液的pH，并非刺激细胞呼吸，A错误； B、SRC属于动物细胞，增殖时出现贴壁生长特性，当细胞接触产生接触抑制后，需用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁脱离并分散为单个细胞，再用离心法收集进行传代培养，B正确； C、间充质祖细胞是成体干细胞，全能性受到限制，不具有发育成完整个体的能力，仅全能干细胞（如受精卵）具备该能力，C错误； D、即使是悬浮生长的细胞，随着培养时间延长，也会出现营养消耗、代谢废物积累、细胞密度过大的问题，仍需要进行传代培养，D错误。 11．（24-25高二下·山东聊城·期中）有研究者利用捐献的人类胚胎，在体外构建了人类胚胎甲状腺类器官（hFTO）培养系统，如图所示。在体外培养体系中通过激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，从而模拟甲状腺的关键发育事件。下列叙述正确的是（　　） A．可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞进行培养 B．甲状腺细胞应置于95%O2和5%CO2的混合气体环境中培养 C．hMTO与hFTO相比，细胞中的DNA、RNA和蛋白质都发生了改变 D．甲状腺类器官的培养过程中体现了细胞的全能性 【答案】A 【详解】A、可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞制成细胞悬液进行培养，A正确； B、甲状腺细胞应置于95%空气和5%CO₂的混合气体环境中培养，B错误； C、激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，hMTO与hFTO相比，细胞中的RNA和蛋白质发生改变，遗传物质DNA未改变，C错误； D、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，甲状腺类器官的培养过程中没有体现细胞的全能性，D错误。 12．（25-26高二下·湖北黄冈·期中）重组人抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体药物可用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎及银屑病等。如图为利用小鼠制备该单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是（　　） A．图中的“抗原”应为肿瘤坏死因子-α B．细胞1为 B细胞，一般取自脾脏且种类繁多 C．融合处理可以使所有收集的细胞发生两两融合 D．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞大规模培养或注射到小鼠腹腔增殖 【答案】C 【详解】A、本实验目的是制备抗肿瘤坏死因子 -α 单克隆抗体，因此注射的抗原应为肿瘤坏死因子 -α，A正确； B、细胞 1 是经抗原免疫的小鼠B 淋巴细胞，通常取自脾脏，且脾脏中 B 细胞种类繁多，B正确； C、细胞融合是随机且概率性的过程，融合处理只能提高融合概率，无法使所有收集的细胞发生两两融合，还会存在未融合细胞，C错误； D、抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，可通过体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖的方式获取大量单克隆抗体，D正确。 故选C。 13．（25-26高三上·河北石家庄·期中）我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的嵌合体猴。如图所示，研究人员将可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A．嵌合体猴仅部分位置发出绿色荧光的现象是染色体变异的结果 B．嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关激素促使其同期发情 D．嵌合囊胚中的滋养层细胞将来会发育成嵌合体猴的胎盘和胎膜 【答案】A 【详解】A、4CL胚胎干细胞与桑葚胚细胞嵌合发育成内细胞团，进而共同发育成幼猴的各种组织，故嵌合体猴体内绿色荧光散乱分布，未发生染色体变异，A错误； B、如果来源于4CL干细胞的遗传信息位于生殖细胞中，则遗传信息能遗传给后代；如果位于体细胞中，则遗传信息一般不能遗传给后代，B正确； C、嵌合胚胎移植前，需要对代孕母猴注射孕激素，进行同期发情处理，C正确； D、嵌合囊胚中的滋养层细胞将来会发育成个体的胎盘和胎膜，内细胞团细胞将来会发育成个体（嵌合体猴）的各种组织，D正确。 14．（25-26高二下·山东济宁·期中）科学家利用AI预测了某种致病病毒的关键蛋白（X蛋白）的三维结构，并基于此设计了一种能特异性抑制X蛋白的药物分子。下列相关叙述错误的是（　　） A．AI预测蛋白质结构可加速药物靶点的筛选，缩短药物研发周期 B．可利用蛋白质工程直接对X蛋白的氨基酸序列进行改造，增强其稳定性 C．若将编码X蛋白的基因导入大肠杆菌中并让其表达，须使用能在大肠杆菌中发挥作用的启动子 D．该药物分子与X蛋白结合后，可能改变X蛋白的空间结构，从而抑制其功能 【答案】B 【详解】A、AI预测蛋白质三维结构可直接明确药物靶点的结构特征，无需耗费大量时间解析蛋白结构，能够加速药物靶点筛选，缩短药物研发周期，A正确； B、蛋白质工程的操作对象是基因，无法直接对蛋白质的氨基酸序列进行改造，需通过改造或合成编码X蛋白的基因，再经基因表达获得改造后的X蛋白，B错误； C、启动子是RNA聚合酶识别结合、启动转录的序列，不同物种的启动子具有特异性，要让编码X蛋白的基因在大肠杆菌中表达，必须使用可被大肠杆菌RNA聚合酶识别的启动子，C正确； D、蛋白质的功能由其空间结构决定，药物分子与X蛋白结合后若改变其空间结构，就会导致X蛋白功能异常，实现抑制效果，D正确。 15．（25-26高二下·山东济宁·期中）为了追踪小鼠的Gata3基因在小鼠细胞中的表达过程，实验人员通过基因工程的方法，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因的一端，实现两个基因融合表达，构建的融合基因如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码起始密码子对应的序列 B．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码终止密码子对应的序列 C．整合前，须除去Gata3基因中的终止子和GFP基因中的启动子 D．转录时，先转录Gata3基因，后转录GFP基因；翻译时，先合成GFP蛋白，后合成Gata3蛋白 【答案】C 【详解】A、起始密码子对应的序列是翻译的起点，两个基因融合表达需要保留Gata3基因的起始密码子（作为整个融合基因的翻译起点），GFP基因的起始密码子需要除去，否则会影响融合蛋白的合成，A错误； B、融合基因需要翻译出一条完整的融合蛋白，所以Gata3基因的终止密码子要除去（否则翻译会提前终止，无法合成GFP），但GFP基因的终止密码子需要保留（作为整个融合基因的翻译终点），B错误； C、启动子是转录的起点，终止子是转录的终点，融合基因只需要一个启动子（图中Gata3前的启动子）和一个终止子（GFP后的终止子），所以整合前需要除去Gata3基因中的终止子（否则转录会在Gata3后终止，无法转录GFP）和GFP基因中的启动子（否则会出现额外的转录起点），C正确； D、转录的方向是从启动子到终止子，即从左到右，所以先转录Gata3，后转录GFP，翻译的方向也是从左到右，对应先合成Gata3蛋白，后合成GFP蛋白，D错误。 16．（25-26高二下·山东济宁·期中）PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A．a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B．c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C．高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D．若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 【答案】D 【详解】A、PCR的3个步骤依次是a变性（高温，95℃左右，双链解旋）、b复性（退火，55℃左右，引物结合模板）、c延伸（72℃左右，Taq酶合成DNA），对应温度是先升高、再降低、再升高，不是依次降低，A错误； B、c是延伸过程，DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸DNA链，B错误； C、TaqDNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶，在PCR反应体系中需要加入Mg2+来激活该酶的活性，C错误； D、1个DNA进行n轮循环，最终得到2ⁿ个DNA分子，每个DNA复制时都需要2个引物（引物Ⅰ和引物Ⅱ），若1个DNA进行6轮循环，共合成26=64个DNA分子，其中只有最初的模板DNA分子不需要引物Ⅰ和引物Ⅱ，所以需要消耗引物Ⅰ和引物Ⅱ的数量都是64-1=63，D正确。 17．（24-25高二下·山东聊城·期中）T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，温度较高易失去活性。研究发现若将T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为更易形成二硫键的半胱氨酸，可在保证酶活性的前提下有效提高其耐热性。科研人员用大肠杆菌作为受体菌，利用定点诱变技术对编码T4溶菌酶的基因进行改造，成功生产出了耐高温的T4溶菌酶。下列说法错误的是（　　） A．引起T4溶菌酶分子结构改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化 B．导入定点诱变后的T4溶菌酶基因前，需先用Ca2+处理受体菌细胞 C．T₄溶菌酶的改造属于基因工程，耐热性提高可能与其分子内部二硫键的数量有关 D．从大肠杆菌细胞中获取的T4溶菌酶用于生产实践时，还需要明确催化反应的最适温度等 【答案】C 【详解】A、此项研究利用基因的定点诱变技术，成功地将T4溶菌酶中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，说明引起T4溶菌酶分子结构改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化，A正确； B、因为受体菌是大肠杆菌，为使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，导入定点诱变后的T4溶菌酶基因前，需先用Ca2+处理受体菌细胞，B正确； C、T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程（通过改造基因来改造蛋白质的结构和功能），将T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为更易形成二硫键的半胱氨酸，可在保证酶活性的前提下有效提高其耐热性，说明T4溶菌酶耐热性提高可能与其分子内部二硫键的数量有关，C错误； D、从大肠杆菌中获取的T4溶菌酶，在生产实践中需要明确其最适温度、最适pH等参数，以保证催化效率，D正确。 18．（24-25高二下·山东聊城·期中）从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A．若选用鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，进行吸水涨破，进而破碎细胞 B．若以新鲜菜花为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 C．DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精，利用这一原理，可初步分离DNA和蛋白质 D．DNA溶液加入二苯胺试剂后就可呈蓝色 【答案】A 【详解】A、鸡的成熟红细胞含有细胞核和DNA，将其放入蒸馏水中，细胞会因吸水涨破，从而释放出DNA，A正确； B、以新鲜菜花为实验材料时，研磨液过滤后应保留滤液（DNA溶解在滤液中），B错误； C、DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以初步分离DNA和蛋白质，C错误； D、DNA溶液加入二苯胺试剂后，需要沸水浴加热才能呈现蓝色，D错误。 19．（23-24高二下·辽宁鞍山·期末）小麦和水稻是我国主要粮食作物，其中赖氨酸含量很低，科研人员通过以下操作，将辣椒中的含赖氨酸较高的某蛋白基因转入小麦，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．逆转录合成DNA的过程需要DNA聚合酶催化 B．通过逆转录获得的cDNA有多种 C．目的基因直接导入小麦就能表达高赖氨酸蛋白 D．T0代转基因植株一定可培育出纯合含高赖氨酸蛋白的植株 【答案】B 【详解】A、逆转录是RNA→DNA的过程，该过程合成DNA的过程需要逆转录酶来催化，A错误； B、逆转录是以RNA为模板，在逆转录酶催化作用下合成DNA的过程，因此可能会得到多种cDNA，B正确； C、目的基因需要与载体结合构建基因表达载体才能导入小麦细胞，C错误； D、T0代转基因植株不一定能培育出纯合含高赖氨酸蛋白的植株，还需要经过分子水平和个体水平的检测，D错误。 20．（24-25高二下·广东肇庆·期中）基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的酶切位点。下列叙述错误的是（　　） A．Sau3AⅠ可切割BamHⅠ和Bcl Ⅰ的识别序列，其具有专一性 B．质粒被BamHⅠ和Bcl Ⅰ切割后，并在DNA连接酶的作用下，会发生环化 C．构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶只能是BamHⅠ D．分别用Sau3AⅠ和BamHⅠ切割目的基因和质粒，形成的重组质粒能被Sau3A Ⅰ切成4个片段 【答案】D 【详解】A、Sau3AⅠ可切割BamHⅠ和BclⅠ的识别序列，但其仍是识别特定的序列进行切割，具有专一性，A正确； B、BamHⅠ和BclⅠ切割质粒后，会切出相同且互补的黏性末端，加入DNA连接酶其会发生环化，B正确； C、构建重组质粒时，目的基因要插入在启动子和终止子之间，则可选择BamHⅠ、Sau3AⅠ和HindⅢ三种限制酶，切割该质粒的限制酶如果用Sau3AⅠ则会在质粒上切出多个切口，如果用HindⅢ则会切坏X抗生素的抗性基因，所以只能用BamHⅠ，C正确； D、用Sau3AⅠ切割目的基因，用BamHⅠ切割质粒，则重组质粒能被Sau3AⅠ酶切成5个片段，D错误。 21．（21-22高二下·安徽芜湖·期中）下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D．④→⑤经过了脱分化和再分化的过程 【答案】D 【详解】A、②是基因表达载体的构建，需要限制酶和DNA连接酶的参与，A错误； B、③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到④的染色体上，B错误； C、④的染色体上若含抗虫基因，如果不能成功转录或翻译，不一定能表现出抗虫性状，不代表抗虫植物培育成功，C错误； D、④→⑤是植物组织培养，经过了脱分化和再分化，D正确。 22．（25-26高三上·广东·期中）人工智能（Artificial Intelligence，英文缩写为AI）是研究、开发用于模拟、延伸和扩展人的智能的理论、方法、技术及应用系统的一门新技术科学。利用人工智能模型（AI）预测蛋白质的结构和功能，极大地加速了人类对蛋白质的了解。下列叙述错误的是（　　） A．利用AI设计蛋白质可提高预测效率和精度 B．利用AI设计蛋白质可推动生物学和医学发展 C．AI分析氨基酸的差异不能用于进化亲缘关系比较 D．AI可能对理解疾病发生机制有一定帮助 【答案】C 【详解】A、利用AI强大的数据处理和模型预测能力，可高效模拟蛋白质结构，显著提升设计蛋白质的效率和精度，A正确； B、AI辅助的蛋白质设计能够加速新药研发、酶工程等应用，推动生物学和医学领域的技术进步，B正确； C、不同物种间同源蛋白质的氨基酸序列差异可反映进化距离，AI分析此类差异数据（如分子钟）是研究生物亲缘关系的有效手段，C错误； D、AI通过预测异常蛋白质结构或功能变异，可辅助解析蛋白质异常导致的疾病机制（如阿尔茨海默病与β-淀粉样蛋白），D正确。 23．（25-26高二下·山东济宁·期中）基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法正确的是（　　） A．大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B．用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C．含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用植物组织培养技术 D．将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入乳腺细胞后可获得乳腺生物反应器 【答案】C 【详解】A、限制酶的化学本质是蛋白质，基本组成单位是氨基酸，大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，A错误； B、质粒是独立于细胞拟核或细胞核DNA之外的环状DNA分子，不仅原核细胞中有质粒，酵母菌等真核生物中也存在质粒，B错误； C、花粉管通道法中，含目的基因的DNA进入胚囊后可转化受精卵或早期胚细胞，这类细胞可直接发育为完整植株，无需额外进行植物组织培养，C正确； D、制备乳腺生物反应器时，需将重组载体导入动物受精卵，使其发育为完整个体，雌性个体的乳腺才能特异性表达药用蛋白，仅导入高度分化的乳腺细胞无法获得能稳定生产药用蛋白的动物个体，D错误。 24．（24-25高二下·江苏徐州·期末）生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述错误的是（    ） A．转基因生物引发安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位不唯一 B．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”均利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C．我国禁止生殖性克隆人的实验，对治疗性克隆实验也严格审查 D．生物武器是利用致病微生物或毒素等生物活性物质来形成杀伤力 【答案】B 【详解】A、外源基因插入宿主基因组的位置具有随机性，可能导致宿主基因突变或表达异常，这是转基因生物潜在风险之一，A正确； B、“试管婴儿”通过体外受精和胚胎移植实现，通常无需遗传学诊断；而“设计试管婴儿”需在胚胎移植前进行遗传学筛查，B错误； C、我国明确禁止生殖性克隆人，但对治疗性克隆（如干细胞研究）在严格监管下允许开展，C正确； D、生物武器的核心是致病微生物、毒素等生物活性物质，来形成杀伤力，D正确。 25．（24-25高二下·四川绵阳·期末）水稻根部一般没有根瘤菌，在种植时常需要施加氮肥。科学家想利用基因工程技术减少施用氮肥的生产成本及可能造成的环境污染，提出了以下2种方案： ①把根瘤菌的固氮相关基因导入水稻根系微生物中，使微生物能在根系处固氮； ②将固氮相关基因导入水稻细胞中，建立水稻的“小型化肥厂”，让水稻直接固氮。 下列对2种方案的评价，错误的是（　　） A．从亲缘关系的远近来看，方案①更易成功 B．从便捷性角度看，能固氮的水稻新品种更值得推广 C．从转基因安全性角度看，能固氮的水稻根系微生物更值得推广 D．从育种年限看，通过杂交育种获得稳定遗传的转基因水稻新品种，所需周期短 【答案】D 【详解】A、根瘤菌与水稻根系微生物均为原核生物，亲缘关系较近，基因表达调控机制更相似，因此方案①更易成功，A正确； B、能自主固氮的水稻无需依赖微生物或额外施肥，使用更为便捷，B正确； C、转基因微生物可能通过基因水平转移扩散至其他微生物，导致生态风险，而水稻作为高等植物，基因扩散风险较低，因此方案②更安全，C正确； D、转基因水稻新品种不能通过杂交育种获得稳定遗传，因为杂交育种不能将外源基因稳定遗传，且获得稳定遗传的转基因水稻需多代筛选，周期长，D错误。 二、非选择题：本题共5小题，共50分。 26．（11分，除标注外每空1分）（25-26高二下·河南开封·期中）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是菌T可分泌_______酶，将秸秆中的纤维素分解为_______。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入______等营养成分，该营养成分的作用是______。通常可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有______（答出2点即可）。（2分） (3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是______。发酵液中的乙醇可用______溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是______。（2分） 【答案】(1)纤维素 葡萄糖 (2)氮源 为合成微生物细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂） ①把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30 min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时间不少于10—12分钟 (3)制造无氧环境 放出二氧化碳 酸性重铬酸钾 (4)节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等 【详解】（1）菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌 T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。 （2）培养基的主要成分：水、碳源、氮源、无机盐，淋洗液中有纤维素分解产生的葡萄糖，可提供碳源，还需要加入氮源，氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂）。 高压蒸汽灭菌法的注意的事项有①把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能达到饱和，蒸汽的温度未达到要求的高度，结果导致灭菌的失败；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30 min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸汽压力缓慢降低，排气时间不少于10至12分钟，否则锅内蒸气压力突然降低，液体突然沸腾，冲走瓶盖，使液体喷出或使容器破裂。 （3）果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，酒精可用酸性重铬酸钾溶液来检测，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 （4）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，利用纤维素为原料生产乙醇具有节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等优点。 27．（8分，除标注外每空1分）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为培育“高产耐盐碱”的水稻植株，某研究小组利用植物体细胞杂交技术设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受植株甲（2N＝18）细胞质基因和植株乙（2N＝24）细胞核基因控制。回答下列问题： 注：失活处理后相应结构将被降解。 (1)过程①需用_______处理，两者处理时间不同的原因可能是_______。（2分） (2)过程②对植物细胞进行失活处理目的是促使原生质体甲2的________失活和原生质体乙2的________失活。 (3)过程③的实现依赖细胞膜具有_______这一结构特点，常用化学试剂________处理；过程④指的是_______。 【答案】(1)纤维素酶和果胶酶 两者细胞壁结构和组成成分的含量可能存在差异 (2)细胞核（或细胞核基因或染色体） 细胞质（或细胞质基因） (3)一定的流动性 聚乙二醇（PEG）（或高Ca2+-高pH试剂） 原生质体形成新的细胞壁（再生出细胞壁） 【详解】（1）过程①的目的是去除植物细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，因此用纤维素酶和果胶酶处理；由于植株甲的叶肉细胞和植株乙的根细胞属于不同植物、不同部位的细胞，细胞壁的结构和组成成分的含量存在差异，因此去除细胞壁所需的酶解时间不同。 （2）根据题干信息：耐盐性状由植株甲的细胞质基因控制，高产性状由植株乙的细胞核基因控制，因此需要对原生质体做针对性失活处理：保留甲2的细胞质（耐盐基因），使甲2的细胞核失活；保留乙2的细胞核（高产基因），使乙2的细胞质失活，保证融合后杂种细胞同时获得两种目标基因。 （3）过程③是原生质体融合，该过程依赖细胞膜具有一定流动性的结构特点；诱导原生质体融合常用的化学试剂是聚乙二醇（PEG）（或高Ca2+-高pH试剂）；融合后的杂种原生质体需要重新生成细胞壁，才能形成完整的杂种细胞，因此过程④是再生出细胞壁。 28．（8分，除标注外每空1分）（24-25高二下·天津·期中）单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： (1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有__________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。 (2)仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 (3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_______________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________，（2分）筛选②的目的是筛选出____________________。（2分） (4)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 【答案】(1)Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 (2)3 (3)杂交瘤细胞 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 能产生所需（特定）抗体的杂交瘤细胞 (4)95%空气和5%CO2 【详解】（1）据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物。 （2）用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有B细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合、杂交瘤细胞3种类型。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的方法是用特定的选择培养基，去除同种核融合的细胞以及未融合的单核细胞，筛选出杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。筛选②是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 （4）动物细胞培养时需要提供95％空气和5％的CO2条件，以保证细胞的有氧呼吸和维持培养液的pH。 29．（11分，除标注外每空1分）（24-25高二下·浙江杭州·期中）土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，Kanr为卡那霉素抗性基因。请分析回答： 限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindⅢ SacⅠ 识别序列和切割位点 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C (1)过程①需要模板DNA、_____（同时提供原料和能量）、酶、2种引物、Mg2+等。在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是_____；若PCR产物中出现非特异性条带，可通过_____（写出一种方法）来优化结果。 (2)过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是_____和_____，限制酶识别序列应该添加在引物的_____端。 5'-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3' 5'-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3' (3)花椰菜病毒启动子的作用是_____。（2分）本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是_____。（2分） (4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用HindⅢ完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有_____。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明HindⅢ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 【答案】(1) dNTP 使反应成分集中沉降到离心管底部，保证PCR反应进行 适当提高复性温度（调整引物浓度、Mg²⁺浓度等） (2)BamHI SacI 5’ (3)RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录 依据bar表达推测目的基因同时表达 (4)①②④ 【详解】（1）过程①是PCR扩增目的基因，PCR技术需要模板DNA、dNTP（同时提供原料和能量）、耐高温的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶 ）、2种引物、Mg2+等。PCR反应加样后离心的目的是使所有反应成分沉降到离心管底部，保证反应体系浓度，使反应正常进行。若PCR出现非特异性条带，可通过适当提高复性温度，提高引物结合的特异性，减少非特异性扩增，也可调整引物浓度、Mg²⁺浓度等优化结果。 （2）观察一对引物5'端会发现有BamHI的识别序列GATCC和Sac I的识别序列GAGCTC，故过程②使用的限制酶是BamHI和SacI。在引物设计时，限制酶识别序列应该添加在引物的5'端，因为DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。 （3）启动子又叫RNA聚合酶结合位点，故其含有RNA聚合酶识别、结合的核苷酸序列，有了启动子才能驱动基因的转录，最终获得相关表达产物，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是依据bar表达推测目的基因同时表达 （4）①酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，不含目的基因的DNA条带在图中没有显示，①正确； ②杂交带位置不同说明Hind Ⅲ消化形成的DNA片段长度不同，因为不同长度的DNA片段在电泳中的迁移速率不同，②正确； ③相同位置上杂交带对应DNA片段长度相同，脱氧核苷酸序列不一定相同，③错误； ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的，所以不同植株的实验结果中杂交带数目不同，④正确。 故选①②④。 30．（12分，除标注外每空1分）（25-26高三上·河北·期中）研究人员将人胰岛素基因（hINS）转入山羊体内，以获得动物乳腺生物反应器。下图所示为hINS基因的部分序列和构建基因表达载体所需质粒的结构。EcoR V、XbaⅠ为两种识别序列不同的限制酶，箭头所指为它们在质粒上的切点。回答下列问题： (1)获得基因工程所用的hINS基因，需先从胰岛B细胞的细胞质中获得________，经逆转录获得cDNA，再利用PCR技术扩增胰岛素基因，扩增hINS基因的前提是________，以便合成引物，扩增时，用________的方法使DNA变性。 (2)hINS基因转录的模板是________（填“a”或“b”）链。在扩增hINS基因时，应在引物的________（填“3＇”或“5＇”）端添加限制酶识别序列，其中基因上游添加________酶的识别序列。在保证质粒结构完整性的前提下，为使HSA基因能在乳腺细胞中表达，应将该基因与________的基因的启动子重组在一起。 (3)利用山羊乳腺生物反应器来生产胰岛素时，要将基因表达载体导入山羊的________（填“受精卵”或“乳腺细胞”）中。 (4)有人尝试让水稻细胞产生胰岛素，在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将hINS基因插入________片段中，该片段的作用是_________。（2分）检测水稻胚乳细胞中胰岛素基因是否成功表达可采用的方法是________。 【答案】(1)mRNA（RNA） 要有一段已知目的基因（hINS基因）的核苷酸序列 （高温）加热 (2)b 5' Xba l 乳腺中特异性表达 (3)受精卵 (4)T-DNA 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上 抗原-抗体杂交 【分析】基因工程的步骤包括：获取目的基因、构建基因表达载体（最核心的操作步骤）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）hINS基因在胰岛B细胞中选择性表达，因此需先从该细胞的细胞质中获得mRNA，经逆转录获得cDNA，利用PCR技术扩增胰岛素基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，扩增时，用（高温）加热的方法使DNA变性。 （2）基因转录时RNA聚合酶沿着模板3'到5'方向合成RNA，因此b链是转录的模板。在扩增hINS基因时，应在两种引物的5'添加限制酶，因为DNA聚合酶只能在3端延伸子链，为使hINS基因正向插入质粒，模板链即b链的3'端应靠近启动子，因此应在基因上游添加Xba l的识别序列。为使hINS基因能在乳腺细胞中表达，应将该基因与乳腺中特异表达的基因的启动子重组在一起。 （3）利用山羊乳腺生物反应器来生产胰岛素时，需要将基因表达载体导入具有全能性的细胞即山羊的受精卵中。 （4）用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将目的基因插入T-DNA片段内，利用Ti质粒上T-DNA的作用，可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上，从而将目的基因也整合到受体细胞的染色体DNA上。检测胰岛素基因是否成功表达需采用抗原-抗体杂交的方法。 2 / 2 学科网（北京）股份 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期期中真题重组卷 生 物 （满分100分，考试用时75分钟） 注意事项： 1．答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的准考证号、姓名、考场号和座位号填写在答题卡上。用2B铅笔在“考场号”和“座位号”栏相应位置填涂自己的考场号和座位号。将条形码粘贴在答题卡“条形码粘贴处”。 2．作答选择题时，选出每小题答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案，答案不能答在试卷上。 3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答的答案无效。 4．考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，将试卷和答题卡一并交回。 5．测试范围：人教版高中选择性必修3全部。 6. 难度系数：0.65。 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（膜过滤法检测水质）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL水样不得检出大肠杆菌或者1000mL水样检出不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．该方法的原理可能是利用滤膜截留水中的大肠杆菌，从而实现富集与分离 B．完成过滤后应将滤膜的B面朝上放置于培养基上，以利于菌落形成 C．若单独培养空白滤膜（未过滤水样）后长出菌落，说明滤膜存在杂菌污染 D．可用血细胞计数板直接计数替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量 2．（地域特色）（25-26高二下·云南楚雄·期中）我国自古就有青梅泡酒的习俗。如图为制作青梅酒的简易装置图。下列叙述正确的是（　　） A．图中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是防止酒精挥发 B．青梅泡酒是利用青梅中有机物能溶解在酒精中，青梅酿酒是利用微生物发酵产生酒精 C．若酒精发酵成功，则从图中出料口取样后可用溴麝香草酚蓝溶液鉴定 D．青梅酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 3．（工业应用）（25-26高二下·山东济宁·期中）利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的流程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A．米曲霉分泌的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 B．发酵池中乳酸菌和酵母菌存在种间竞争关系 C．发酵池中出现气泡与乳酸菌无氧呼吸产生的CO2有关 D．发酵池发酵过程中，搅拌可缩短发酵时间 4．（实验探究）（24-25高二下·山东聊城·期中）变色圈法是将潜在的目标微生物样本接种到含有特定底物的培养基上，随着微生物在培养基上生长和繁殖，它们会分泌相应的酶来分解这些底物，该过程中产生的可溶性小分子化合物扩散会引起特定区域指示剂的颜色变化。下列相关分析错误的是（　　） A．变色圈法可以直接用于大规模工业发酵过程中的微生物筛选 B．变色圈法中使用的指示剂能够与酶分解底物产生的产物发生反应，从而引起颜色变化 C．基于微型化培养及多种检测技术可实现微生物的高通量筛选 D．变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标 5．（传统文化）（24-25高二下·山东聊城·期中）苏轼的《超然台记》中提到“撷园蔬，取池鱼，酿秫（谷物）酒，瀹（煮）脱粟而食之，曰：‘乐哉游乎！’”下列有关利用秫酿造酒的叙述，不正确的是（　　） A．秫酿造酒后期密封不严可能会促进醋酸菌发酵产生醋酸 B．秫酿造酒过程中需要前期通入无菌空气，后期制造无氧环境，以利于酒精发酵 C．秫酿造酒前要对酿酒器具和秫进行严格灭菌处理 D．黄酒酿造过程中发酵液出现的气体在酵母菌细胞质基质和线粒体中产生 6．（23-24高二下·安徽合肥·期中）《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（    ） A．“酒一斗，用水三斗，合瓮盛”是为避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 B．“置日中曝之”可以提高发酵液温度，有利于醋酸发酵，缩短发酵时间 C．“衣（指菌膜）”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D．“挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶液中的溶解氧 7．（25-26高三上·贵州·期中）A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌（Sau，其适宜生长温度约为37℃）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d（分别对应A、B、C、D四种抗生素）置于Sau均匀分布的平板上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述正确的是（    ） A．倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理 B．四种抗生素中，抗生素C治疗 Sau感染引起的肺炎效果最好 C．滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强 D．接种后的培养皿倒置于37 ℃的恒温箱中培养 8．（25-26高二下·云南楚雄·期中）“天下名兰、花香大理”，2025年中国第十五届国际兰花、茶花博览会在云南大理举行。博览会中大多数兰花的种苗都是通过组织培养生产的。用蝴蝶兰的茎尖进行植物组织培养可培育出试管苗。下列叙述错误的是（　　） A．对茎尖消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．愈伤组织是未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强 C．若直接将无根的蝴蝶兰幼苗接种到无植物激素的基本培养基上进行适宜条件的培养，也可以产生生根苗 D．试管苗移栽入土前常采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 9．（24-25高二下·山东聊城·期中）珍稀中草药蛇足石杉的有效成分为石杉碱甲，但含量较低。研究人员发现共生真菌可与植物细胞共用酶系统，将蛇足石杉细胞与真菌进行共生培养可促进石杉碱甲的生成。图甲、图乙分别表示共生培养过程中蛇足石杉细胞数量及石杉碱甲含量随时间的变化。下列叙述正确的是（　　） A．利用植物细胞培养生产石杉碱甲需将外植体培育到完整植物体阶段 B．石杉碱甲属于次生代谢产物，一般认为次生代谢产物不是植物基本的生命活动所必需的 C．图甲实验结果可以确定第4天为传代培养和收集代谢物的最佳时间 D．图乙实验结果证明共生真菌利用了蛇足石杉细胞的酶系统 10．（25-26高二下·河北邢台·月考）间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A．培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B．SRC增殖时若出现细胞贴壁生长特性，则应定期用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C．间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D．若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 11．（24-25高二下·山东聊城·期中）有研究者利用捐献的人类胚胎，在体外构建了人类胚胎甲状腺类器官（hFTO）培养系统，如图所示。在体外培养体系中通过激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，从而模拟甲状腺的关键发育事件。下列叙述正确的是（　　） A．可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞进行培养 B．甲状腺细胞应置于95%O2和5%CO2的混合气体环境中培养 C．hMTO与hFTO相比，细胞中的DNA、RNA和蛋白质都发生了改变 D．甲状腺类器官的培养过程中体现了细胞的全能性 12．（25-26高二下·湖北黄冈·期中）重组人抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体药物可用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎及银屑病等。如图为利用小鼠制备该单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是（　　） A．图中的“抗原”应为肿瘤坏死因子-α B．细胞1为 B细胞，一般取自脾脏且种类繁多 C．融合处理可以使所有收集的细胞发生两两融合 D．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞大规模培养或注射到小鼠腹腔增殖 13．（25-26高三上·河北石家庄·期中）我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的嵌合体猴。如图所示，研究人员将可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A．嵌合体猴仅部分位置发出绿色荧光的现象是染色体变异的结果 B．嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关激素促使其同期发情 D．嵌合囊胚中的滋养层细胞将来会发育成嵌合体猴的胎盘和胎膜 14．（25-26高二下·山东济宁·期中）科学家利用AI预测了某种致病病毒的关键蛋白（X蛋白）的三维结构，并基于此设计了一种能特异性抑制X蛋白的药物分子。下列相关叙述错误的是（　　） A．AI预测蛋白质结构可加速药物靶点的筛选，缩短药物研发周期 B．可利用蛋白质工程直接对X蛋白的氨基酸序列进行改造，增强其稳定性 C．若将编码X蛋白的基因导入大肠杆菌中并让其表达，须使用能在大肠杆菌中发挥作用的启动子 D．该药物分子与X蛋白结合后，可能改变X蛋白的空间结构，从而抑制其功能 15．（25-26高二下·山东济宁·期中）为了追踪小鼠的Gata3基因在小鼠细胞中的表达过程，实验人员通过基因工程的方法，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因的一端，实现两个基因融合表达，构建的融合基因如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码起始密码子对应的序列 B．整合前，须除去Gata3基因和GFP基因中编码终止密码子对应的序列 C．整合前，须除去Gata3基因中的终止子和GFP基因中的启动子 D．转录时，先转录Gata3基因，后转录GFP基因；翻译时，先合成GFP蛋白，后合成Gata3蛋白 16．（25-26高二下·山东济宁·期中）PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A．a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B．c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C．高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D．若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 17．（24-25高二下·山东聊城·期中）T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，温度较高易失去活性。研究发现若将T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为更易形成二硫键的半胱氨酸，可在保证酶活性的前提下有效提高其耐热性。科研人员用大肠杆菌作为受体菌，利用定点诱变技术对编码T4溶菌酶的基因进行改造，成功生产出了耐高温的T4溶菌酶。下列说法错误的是（　　） A．引起T4溶菌酶分子结构改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化 B．导入定点诱变后的T4溶菌酶基因前，需先用Ca2+处理受体菌细胞 C．T₄溶菌酶的改造属于基因工程，耐热性提高可能与其分子内部二硫键的数量有关 D．从大肠杆菌细胞中获取的T4溶菌酶用于生产实践时，还需要明确催化反应的最适温度等 18．（24-25高二下·山东聊城·期中）从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A．若选用鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，进行吸水涨破，进而破碎细胞 B．若以新鲜菜花为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 C．DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精，利用这一原理，可初步分离DNA和蛋白质 D．DNA溶液加入二苯胺试剂后就可呈蓝色 19．（23-24高二下·辽宁鞍山·期末）小麦和水稻是我国主要粮食作物，其中赖氨酸含量很低，科研人员通过以下操作，将辣椒中的含赖氨酸较高的某蛋白基因转入小麦，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．逆转录合成DNA的过程需要DNA聚合酶催化 B．通过逆转录获得的cDNA有多种 C．目的基因直接导入小麦就能表达高赖氨酸蛋白 D．T0代转基因植株一定可培育出纯合含高赖氨酸蛋白的植株 20．（24-25高二下·广东肇庆·期中）基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的酶切位点。下列叙述错误的是（　　） A．Sau3AⅠ可切割BamHⅠ和Bcl Ⅰ的识别序列，其具有专一性 B．质粒被BamHⅠ和Bcl Ⅰ切割后，并在DNA连接酶的作用下，会发生环化 C．构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶只能是BamHⅠ D．分别用Sau3AⅠ和BamHⅠ切割目的基因和质粒，形成的重组质粒能被Sau3A Ⅰ切成4个片段 21．（21-22高二下·安徽芜湖·期中）下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D．④→⑤经过了脱分化和再分化的过程 22．（25-26高三上·广东·期中）人工智能（Artificial Intelligence，英文缩写为AI）是研究、开发用于模拟、延伸和扩展人的智能的理论、方法、技术及应用系统的一门新技术科学。利用人工智能模型（AI）预测蛋白质的结构和功能，极大地加速了人类对蛋白质的了解。下列叙述错误的是（　　） A．利用AI设计蛋白质可提高预测效率和精度 B．利用AI设计蛋白质可推动生物学和医学发展 C．AI分析氨基酸的差异不能用于进化亲缘关系比较 D．AI可能对理解疾病发生机制有一定帮助 23．（25-26高二下·山东济宁·期中）基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法正确的是（　　） A．大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B．用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C．含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用植物组织培养技术 D．将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入乳腺细胞后可获得乳腺生物反应器 24．（24-25高二下·江苏徐州·期末）生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述错误的是（    ） A．转基因生物引发安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位不唯一 B．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”均利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C．我国禁止生殖性克隆人的实验，对治疗性克隆实验也严格审查 D．生物武器是利用致病微生物或毒素等生物活性物质来形成杀伤力 25．（24-25高二下·四川绵阳·期末）水稻根部一般没有根瘤菌，在种植时常需要施加氮肥。科学家想利用基因工程技术减少施用氮肥的生产成本及可能造成的环境污染，提出了以下2种方案： ①把根瘤菌的固氮相关基因导入水稻根系微生物中，使微生物能在根系处固氮； ②将固氮相关基因导入水稻细胞中，建立水稻的“小型化肥厂”，让水稻直接固氮。 下列对2种方案的评价，错误的是（　　） A．从亲缘关系的远近来看，方案①更易成功 B．从便捷性角度看，能固氮的水稻新品种更值得推广 C．从转基因安全性角度看，能固氮的水稻根系微生物更值得推广 D．从育种年限看，通过杂交育种获得稳定遗传的转基因水稻新品种，所需周期短 二、非选择题：本题共5小题，共50分。 26．（11分，除标注外每空1分）（25-26高二下·河南开封·期中）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是菌T可分泌_______酶，将秸秆中的纤维素分解为_______。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入______等营养成分，该营养成分的作用是______。通常可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有______（2分）（答出2点即可）。 (3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是______。发酵液中的乙醇可用______溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是______。（2分） 27．（8分，除标注外每空1分）（25-26高二下·云南楚雄·期中）为培育“高产耐盐碱”的水稻植株，某研究小组利用植物体细胞杂交技术设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受植株甲（2N＝18）细胞质基因和植株乙（2N＝24）细胞核基因控制。回答下列问题： 注：失活处理后相应结构将被降解。 (1)过程①需用_______处理，两者处理时间不同的原因可能是_______。（2分） (2)过程②对植物细胞进行失活处理目的是促使原生质体甲2的________失活和原生质体乙2的________失活。 (3)过程③的实现依赖细胞膜具有_______这一结构特点，常用化学试剂________处理；过程④指的是_______。 28．（8分，除标注外每空1分）（24-25高二下·天津·期中）单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： (1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有__________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。 (2)仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 (3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_______________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________，（2分）筛选②的目的是筛选出____________________。（2分） (4)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 29．（11分，除标注外每空1分）（24-25高二下·浙江杭州·期中）土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，Kanr为卡那霉素抗性基因。请分析回答： 限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindⅢ SacⅠ 识别序列和切割位点 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C (1)过程①需要模板DNA、_____（同时提供原料和能量）、酶、2种引物、Mg2+等。在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是_____；若PCR产物中出现非特异性条带，可通过_____（写出一种方法）来优化结果。 (2)过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是_____和_____，限制酶识别序列应该添加在引物的_____端。 5'-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3' 5'-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3' (3)花椰菜病毒启动子的作用是_____。（2分）本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是_____。（2分） (4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用HindⅢ完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有_____。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明HindⅢ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 30．（12分，除标注外每空1分）（25-26高三上·河北·期中）研究人员将人胰岛素基因（hINS）转入山羊体内，以获得动物乳腺生物反应器。下图所示为hINS基因的部分序列和构建基因表达载体所需质粒的结构。EcoR V、XbaⅠ为两种识别序列不同的限制酶，箭头所指为它们在质粒上的切点。回答下列问题： (1)获得基因工程所用的hINS基因，需先从胰岛B细胞的细胞质中获得________，经逆转录获得cDNA，再利用PCR技术扩增胰岛素基因，扩增hINS基因的前提是________，以便合成引物，扩增时，用________的方法使DNA变性。 (2)hINS基因转录的模板是________（填“a”或“b”）链。在扩增hINS基因时，应在引物的________（填“3＇”或“5＇”）端添加限制酶识别序列，其中基因上游添加________酶的识别序列。在保证质粒结构完整性的前提下，为使HSA基因能在乳腺细胞中表达，应将该基因与________的基因的启动子重组在一起。 (3)利用山羊乳腺生物反应器来生产胰岛素时，要将基因表达载体导入山羊的________（填“受精卵”或“乳腺细胞”）中。 (4)有人尝试让水稻细胞产生胰岛素，在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将hINS基因插入________片段中，该片段的作用是_________。（2分）检测水稻胚乳细胞中胰岛素基因是否成功表达可采用的方法是________。 2 / 2 学科网（北京）股份 学科网（北京）股份有限公司 $