第1章 第4节 发酵工程及其应用-【新课程学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程教师用书word（苏教版）

第四节 发酵工程及其应用 学习目标 1.阐述微生物的特定功能及其在发酵工程中的应用。　 2.概述发酵工程的一般过程。　　 3.举例说出发酵工程的主要产品和应用领域。 知识点(一)　发酵工程利用了微生物的特定功能及其一般过程 [教材知识梳理] 　　(一)发酵工程利用了微生物的特定功能 特点或功能 发酵工程中的利用 实例 生长旺盛、繁殖快 快速获得大量菌种 扩大培养 吸收多、转化快 为发酵工程产生大量代谢产物提供了保障 产朊假丝酵母合成蛋白质的能力要比大豆强100倍 适应性强、易变异 为通过育种大幅度地提高菌种的生产性能提供了保障 1943年时,每毫升青霉素发酵液由仅能生产约20单位青霉素,到目前已能产出超过5万单位的青霉素 种类多(物种多、生理代谢类型多)、分布广 能生产多种多样的产品,且应用范围不断扩大 仅利用大肠杆菌即可生产2 000~3 000种蛋白质;人类发现的抗生素已经超过9 000种 　　(二)发酵工程的一般过程 　　1.常用微生物:主要有细菌(如大肠杆菌、醋酸杆菌、乳酸杆菌)、放线菌(如链霉菌)和真菌(如青霉菌)。 2.发酵工程的概念:采用现代工程技术手段,利用微生物或动植物细胞的特定功能,在人工控制的环境下生产满足人类需求的特定产品等的工程技术。 3.发酵工程的一般过程:包括发酵原料的预处理、发酵培养基的配制、菌种选育和扩大培养、发酵生产和产物的分离与提纯等主要步骤。 (1)发酵原料的预处理:对原料进行粉碎、蒸煮,水解成葡萄糖等供微生物利用。 (2)发酵培养基的配制:添加水、无机盐等营养物质,调节碳氮比和pH等。 (3)菌种选育:性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。 (4)扩大培养:制备大量菌种后再转入大型发酵罐中生产。 (5)发酵生产:发酵分为厌氧发酵和需氧发酵两种。酒精、啤酒、乳酸等为厌氧发酵产品,味精、赤霉素等的生产属于需氧发酵。 (6)产物的分离与提纯:发酵产品包括微生物的代谢产物或菌体。通过过滤发酵液,离心去除固体杂质,采用蒸馏法等进一步纯化目标产品。 4.工业发酵类型:根据发酵过程的操作方式不同,可分为分批发酵和连续发酵等。 [核心要点点拨] 　　(一)分批发酵与连续发酵的比较 项目 分批发酵 连续发酵 含义 一次投料、一次接种、一次收获的间歇发酵方式 在一个培养基可流动的装置(如发酵罐)中,以一定的速率不断地放出老的培养基和代谢产物,同时不断添加新的培养基和调节相关发酵条件(如pH),使发酵过程保持相对稳定 菌种生 长周期 一般经历延滞期、对数期、稳定期和衰亡期等 尽量维持在稳定期 优点 对设备的要求低,工艺操作简单;对营养物质的利用效率较高,产物浓度较高 简化了发酵罐的多次灭菌、清洗、出料等步骤,缩短了发酵周期,提高了设备的利用率和单位时间产量等 缺点 人力、物力等消耗大,生产周期短,设备利用率和生产效率低 对设备的合理性和加料设备的精确性要求甚高;营养成分的利用率和产物浓度较低,杂菌污染的机会较多等 　　(二)分批发酵过程中微生物经历的时期及特征 时期 特征 延滞期 微生物一般不增殖 对数期 细胞分裂增殖旺盛,活微生物数量增长速率最高,微生物的代谢活性高、生命力强 稳定期 微生物的生长速率维持相对稳定 衰亡期 微生物生长速率降低,死亡速率逐步增加,活的微生物量逐步减少 [微提醒] 　　“衰亡期”细菌数量下降是由于培养基中的营养物质被消耗,代谢产物积累,pH等环境条件的改变,导致其产生速率降低,死亡速率逐步增加。 　　[典例]　(2025·启东高二月考)某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究,下列叙述错误的是 (　　) A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理 B.酒精为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大 C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压 D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵 [解析]　果酒发酵的适宜温度为18~25 ℃,因此夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理,A正确;酒精是酵母菌无氧呼吸的产物,因此发酵过程中不需要通入空气,B错误;正常发酵过程中,酵母菌进行无氧呼吸产生了二氧化碳,但是没有消耗氧气,因此发酵罐中的气压不会低于大气压,C正确;葡萄酒发酵的原料是糖类(葡萄糖),因此可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵,D正确。 [答案]　B [层级训练评价] (一)澄清概念 1.判断下列叙述的正误 (1)发酵工程利用的菌种都是从自然界中筛选出来的。 (×) (2)发酵工程的中心环节是选育菌种。 (×) (3)发酵工程中要对培养基进行灭菌,发酵设备不用灭菌。 (×) (4)谷氨酸发酵罐的监测装置要检测培养液中的细菌数目、产物浓度、代谢产物类型等。 (√) (5)在发酵工程的发酵环节中,发酵条件会影响微生物的生长繁殖,但是不影响微生物的代谢途径。 (×) (6)微生物适应性强、易变异的特定功能为发酵工程产生大量代谢产物提供了保障。 (×) (7)酒精、啤酒等为厌氧发酵产品,味精、赤霉素、乳酸等的生产属于需氧发酵。 (×) (8)在生产上常选择稳定期的微生物作为“种子”。 (×) (二)落实知能 2.下列有关发酵过程的做法,符合生产实际的是 (　　) A.通过人工诱变、杂交和基因工程选育菌种 B.生产过程中排出的废弃物可直接排入附近农田作肥料 C.分离单细胞蛋白时,通常采用萃取、离子交换等方法 D.在连续培养过程中补充的同种培养液和空气须先灭菌 解析:选D　一般通过从自然界中筛选、人工诱变和基因工程选育菌种,而杂交育种进行的是有性生殖,不适用于发酵工程选育菌种,A不符合生产实际;生产过程中排出的废弃物中,可能含有有毒重金属等有害物质,不能直接排入附近农田,B不符合生产实际;单细胞蛋白是微生物菌体,分离单细胞蛋白时,通常采用过滤、沉淀等方法,C不符合生产实际;由于连续培养是培养的同种生物,因此在培养过程中补充同种培养液,并且为防止杂菌污染,培养液和空气须先灭菌,D符合生产实际。 3.(2025·陕晋宁青高考)我国是世界上最大的柠檬酸生产国。利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸,流程如下图。下列叙述错误的是 (　　) A.淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源 B.扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种 C.培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同 D.通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累 解析:选C　淀粉水解糖作为含碳有机物可以为微生物发酵提供碳源和能源,A正确。通过扩大培养可以获取足量的黑曲霉菌种,B正确。常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌;发酵罐灭菌主要采用湿热灭菌法(高温高压蒸汽);对空气灭菌一般不用高压蒸汽灭菌法,常用紫外线照射法和过滤除菌法,C错误。通气、搅拌可以增大溶解氧量,促进黑曲霉发酵,即促进柠檬酸积累,D正确。 4.下列关于分批发酵和连续发酵的叙述错误的是 (　　) A.分批发酵即一次投料、一次接种、一次收获的间歇发酵方式 B.处于稳定期的微生物不再增殖 C.对数期的微生物因代谢活性高、生命力强,故常作为“种子” D.连续发酵具有简化发酵罐多次灭菌、清洗、出料等步骤,缩短发酵周期等优点 解析:选B　处于稳定期的微生物仍可以增殖,只是其增殖速率与死亡速率达到平衡。 (三)迁移应用 5.(2025·常州高二阶段考)发酵工程在医药上的应用非常广泛,其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。青霉素是产黄青霉菌在有氧条件下产生的一种非常重要的抗菌药物,生产青霉素的发酵工程流程如下图所示。 (1)图示生产青霉素的发酵过程中,对产黄青霉菌进行分离纯化采用了　　　　　　法,其可以用来计数的原理为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (2)分离得到菌种后“摇瓶”培养的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(至少答2点)。  (3)发酵过程中,为了解某时刻产黄青霉菌的数量,取10 mL菌液加入到90 mL无菌水中,混匀,依次进行一系列梯度稀释,将0.1 mL稀释液接种于培养基上。105倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为68、76和78,则每毫升菌液中产黄青霉菌数量为　　　　　个。待完全发酵结束后,采用　　　　　等方法将菌体分离。  (4)若“纯化分离”的平板上混入了一些乳酸菌,请依据其代谢类型设计一个简单实验区分乳酸菌和产黄青霉菌,写出实验思路和预期结果。 实验思路: 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 。 预期结果: 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　。 解析:(1)图示生产青霉素的发酵过程中,根据平板中菌落的分布可知,对产黄青霉菌进行分离纯化采用了稀释涂布平板法,该方法还可以用来计数,因为该接种方法中当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,因此可根据菌落数确定菌体的数目。 (2)分离得到菌种后,需要进行“摇瓶”培养,这是因为产黄青霉菌是需氧型微生物,而摇瓶能提高培养液中氧含量;使产黄青霉菌充分接触营养物质,提高营养物质利用率,从而达到高产的目的。 (3)根据题干信息,105倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为68、76和78,则每毫升菌液中产黄青霉菌数量为(68+76+78)÷3÷0.1×105=7.4×107(个)。待完全发酵结束后,可采用过滤、沉淀等方法获得微生物菌体。 (4)若“分离纯化”的平板上混入了一些乳酸菌,乳酸菌是厌氧微生物,而产黄青霉菌为需氧型微生物,据此可将两者分开,相应的实验思路和预期结果见答案。 答案:(1)稀释涂布平板　当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌　(2)提高培养液中氧含量;使产黄青霉菌充分接触营养物质,提高营养物质利用率　(3)7.4×107　过滤、沉淀　(4)将平板置于无氧环境中继续培养,观察菌落形态、大小的变化　若菌落继续生长,则为乳酸菌;若菌落不能继续生长,则为产黄青霉菌 知识点(二)　发酵工程应用广泛 [教材知识梳理] 　　(一)发酵工程主要产品 产品类型 主要产物 微生物菌 体细胞 酵母菌、食用菌、微生物农药 微生物酶类 各种酶、酶制剂和各种曲类 微生物 代谢产物 初级代谢产物,如氨基酸、有机酸、有机溶剂、核苷酸、蛋白质、核酸和维生素;次级代谢产物,如抗生素、生物碱和植物激素类似物 微生物 转化产物 利用微生物代谢过程中的某种酶或酶系,将一种化合物转化成含有特殊功能基团的产物。例如,将甘油转化为二羟基丙酮,将葡萄糖转化为葡萄糖酸,将甾体转化成甾体激素 工程菌 发酵产物 通过基因工程和细胞工程创造出许多具有特殊功能的“工程菌”,用发酵技术生产更多更好的产品,发挥更大的经济效益 动植物 细胞的产物 通过大规模培养木瓜细胞,生产木瓜蛋白酶;利用植物细胞培养技术生产天然食用色素等 　　(二)发酵工程的应用领域及成果 　　1.医药业 具体应用 成果实例 抗生素 青霉素、卡拉霉素、红霉素、链霉素等 酶 纤维素酶、葡聚糖酶、纤溶酶 氨基酸 治疗高氨血症的精氨酸 激素 糖皮质激素类的氢化可的松 生物制品 菌体、代谢产物及免疫制剂、酶抑制剂等 基因 工程药物 胰岛素、抗肿瘤的干扰素、乙肝疫苗等 　　2.食品业 具体应用 成果实例 传统发酵产品 酒、醋、酱油、腐乳等 调味品、食品 添加剂 利用谷氨酸棒状杆菌生产味精、红曲霉生产红曲色素等 食品加工 生产各种单细胞蛋白 　　3.农业 具体应用 成果实例 生物农药 真菌杀虫剂(如白僵菌杀虫剂) 细菌杀虫剂(如苏云金杆菌Bt杀虫剂) 生物 增产剂 微生物肥料:接种固氮菌增加土壤氮肥的肥力 微生物饲料:发酵饲料、青贮饲料和单细胞蛋白 饲料 添加剂 发酵生产的氨基酸、维生素、调味剂等 生物 除草剂 专门寄生于菟丝子的真菌制成防治菟丝子的除草剂 　　4.其他领域 具体应用 成果实例 造纸、皮革制造 和纺织等 淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、纤维素酶 环境保护 污水处理 能源 沼气发酵 [层级训练评价] (一)澄清概念 1.判断下列叙述的正误 (1)利用微生物农药防治农林虫害属于化学防治。 (×) (2)微生物种类多、分布广的特点为发酵工程产生大量代谢产物提供了保障。 (×) (3)用诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养。 (√) (4)氨基酸、核苷酸、蛋白质等属于初级代谢产物。 (√) (5)单细胞蛋白既可用于食品加工,也可用于微生物饲料。 (√) (6)发酵工程在纺织、皮革制造和污水处理等方面都发挥着重要作用。 (√) (二)落实知能 2.发酵工程广泛应用于多个行业,下列有关叙述错误的是 (　　) A.酵母菌可以作为酿制酱油、生产啤酒的菌种 B.接种固氮菌可增加土壤氮肥的肥力 C.用纤维废料发酵得到酒精,可减少环境污染、减缓能源短缺问题 D.用液体培养基可大规模生产某种病毒减毒疫苗 解析:选D　病毒减毒疫苗是病毒经过减毒处理得到的,需用特定的动物细胞进行培养,病毒不能在液体培养基中生长繁殖,D错误。 3.下列有关发酵工程应用的说法错误的是 (　　) A.发酵工程可以生产酱油、泡菜等传统发酵食品 B.柠檬酸、乳酸等食品添加剂可以通过发酵工程生产 C.发酵工程可以生产抗生素,但是不能生产免疫制剂 D.发酵工程生产的单细胞蛋白可以制作成微生物饲料 解析:选C　发酵工程可以生产抗生素、免疫制剂等产品,C错误。 4.(2025·淮安月考)味精是谷氨酸的钠盐,利用谷氨酸棒状杆菌经过发酵可以生产谷氨酸,进而获得味精。在利用发酵罐生产味精的过程中,需要不停地进行搅拌,并严格控制发酵条件,以提高谷氨酸的产量和品质。下列关于谷氨酸生产的说法,正确的是 (　　) A.性状优良的谷氨酸棒状杆菌只能通过诱变育种获得 B.发酵过程中的搅拌可满足菌体对氧气和养分的需求 C.发酵过程中应控制pH,酸性条件下利于谷氨酸的生产 D.发酵过程中添加新的营养液会改变培养条件,不利于增产 解析:选B　性状优良的谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选出来,也可以通过基因工程育种或诱变育种获得,A错误;发酵过程中的搅拌会使营养物质和菌种充分接触且能增加溶解氧的量,故可满足菌体对氧气和养分的需求,B正确;中性和弱碱性条件下利于谷氨酸的积累,酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺,C错误;发酵过程中添加新的营养液有利于持续高效地获得发酵产品,D错误。 (三)迁移应用 5.[多选]科研人员以裙带菜下脚料根茎为原料,以粮食加工副产品为辅料,通过微生物发酵技术开发裙带菜酱油,下图是其生产工艺流程,相关叙述正确的是 (　　) A.裙带菜茎、麸皮、豆粕和小麦混合物中的淀粉均可为米曲霉提供碳源和氮源 B.蒸料可以杀死原料中的杂菌,蒸料后冷却的目的是防止高温杀死菌种 C.通风培养有利于黑曲霉和米曲霉快速生长繁殖、分泌多种水解酶 D.盐浓度过低容易引起酸醅腐败,浓度过高会抑制蛋白酶活性 解析:选BCD　淀粉只含C、H、O,不能提供氮源,A错误。蒸料在高温下进行,可以杀死杂菌;由题图可知,蒸料后要接种菌种,因此蒸料后要先冷却,防止高温杀死菌种,B正确。黑曲霉和米曲霉是好氧微生物,通风培养有利于黑曲霉和米曲霉快速生长繁殖、分泌多种水解酶,C正确。适宜浓度食盐有抑制微生物繁殖的作用,盐浓度过低抑制作用弱,容易引起酸醅腐败,浓度过高会抑制蛋白酶活性,D正确。 /课堂小结与随堂训练/ 一、知识体系构建 二、关键语句必背 1.发酵工程是采用现代工程技术手段,利用微生物或动植物细胞的特定功能,在人工控制的环境下生产满足人类需求的特定产品等的工程技术。 2.发酵工程利用微生物的特定功能包括:①生长旺盛、繁殖快;②吸收多、转化快;③适应性强、易变异;④种类多、分布广等。 3.发酵工程一般包括发酵原料的预处理、发酵培养基的配制、菌种选育和扩大培养、发酵生产和产物的分离与提纯等主要步骤。　 三、素养好题训练 1.某同学搜索“水果酵素”得到下面的信息:①酵素本义是酶的别称。②《酵素产品分类导则》中将酵素定义为以动物、植物、菌类等为原料,经微生物发酵制得的含有特定生物活性的产品。③把水果小块和水按比例放入容器,密封,注意容器内留下20%空间;置于阴凉处6个月后,过滤得到的滤液即为“酵素”。有关叙述合理的是 (　　) A.由于水果酵素富含蛋白酶、脂肪酶,因此酵素被人体吸收后具有减肥功能 B.发酵前需要对蔬果进行煮沸消毒,确保发酵过程无杂菌污染 C.将酵素添加进洗衣粉中配合沸水浸泡,可以帮助分解衣物上的油渍 D.酵素具有降低反应活化能的作用 解析:选D　酵素本义是酶的别称,是大分子物质,不能被人体细胞直接吸收,酵素进入消化道后会被消化酶水解,失去活性,无法起到减肥的作用,A错误;发酵过程中利用的是附着在蔬果表面的天然菌种,若发酵前对蔬果进行煮沸消毒,会杀死菌种,将不能发酵,B错误;沸水可以使酵素和洗衣粉中的活性物质失活,会降低洗涤效果,C错误;酵素本义是酶的别称,酶的作用机理是降低化学反应的活化能,因此酵素具有降低反应活化能的作用,D正确。 2.青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法错误的是 (　　) A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B.可用深层通气液体发酵技术提高产量 C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌 解析:选D　提供相同含量的碳源,葡萄糖溶液单位体积中溶质微粒较多,会导致细胞失水,发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖,乳糖是二糖,可被水解为半乳糖和葡萄糖,是青霉菌生长的最佳碳源,可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件,A正确;青霉菌的代谢类型为异养需氧型,可用深层通气液体发酵技术提高产量,B正确;选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后,才可接种到发酵罐中进行工业化生产,C正确;为了防止其他真菌等微生物的污染,获得纯净的青霉素,发酵罐仍需严格灭菌,D错误。 3.嗜盐单胞菌可利用海水合成聚羟基脂肪酸酯(PHA,一种新型生物塑料),在细胞内形成由膜包裹的不溶性颗粒。科研人员从海水中分离得到一株嗜盐单胞菌,在非灭菌、高盐、高pH的发酵液中连续发酵生产PHA,其流程如下图所示。下列相关叙述不正确的是 (　　) A.利用含PHA的选择培养基筛选嗜盐单胞菌 B.高盐、高pH的发酵液抑制了杂菌生长 C.上清液循环利用,有利于节约物质和能量 D.发酵完成后收集沉淀的菌体以得到PHA 解析:选A　嗜盐单胞菌可利用海水合成PHA,不能用含PHA的选择培养基筛选嗜盐单胞菌,A错误;高盐、高pH的发酵液使杂菌因失水过多或蛋白质变性而死亡,故可抑制杂菌生长,B正确;上清液可以循环利用,可避免物质和能量的浪费,C正确;嗜盐单胞菌可利用海水合成PHA,在细胞内形成由膜包裹的不溶性颗粒,因此发酵完成后收集沉淀的菌体以得到PHA,D正确。 4.(2025·山东高考)[多选]酿造某大曲白酒的过程中,微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物,制曲过程需经堆积培养,培养时温度可达60 ℃左右;将大曲和酿酒原料混合,初步发酵后放入窖池;窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是 (　　) A.堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 B.大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 C.窖池发酵过程中,酵母菌以无氧呼吸为主 D.窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 解析:选BC　酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃,60 ℃左右的高温会使其失活,A错误;由题意可知,大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物,糖化过程中淀粉分解,形成糖浆,故大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物,B正确。酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵(无氧呼吸),将葡萄糖转化为酒精和CO2,窖池发酵是酒精生成的关键阶段,需密封创造厌氧环境,C正确。酒变酸的主要原因是醋酸菌在有氧条件下将乙醇转化为乙酸,并非乳酸积累,D错误。 5.微生物肥料是以微生物的生命活动为核心,使农作物获得特定的肥料效应的一类肥料制品。某研究小组利用玉米秸秆发酵制备微生物肥料,并进行了一系列实验。 (1)固氮菌是微生物肥料中常见的菌剂,从植物根系土壤中筛选出高效固氮菌株,需选用的培养基类型为下表中的　　　。培养基中加入葡萄糖可为目的菌的生长提供　　　　。  类型 组成 甲 葡萄糖、NaCl、MgSO4、CaSO4、CaCO3、KH2PO4,pH7.0 乙 葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、植酸钙,pH7.0 丙 葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、Ca3(PO4)2,pH7.0 (2)从不同土壤中分离固氮菌时,采用的稀释度不同,原因是　　　　　　　　　　　　　　　。  (3)将粉碎后的玉米秸秆进行　　　　　灭菌,冷却后接种一定浓度的里氏木霉菌悬液。发酵一定时间后,再接种等量的固氮菌悬液。继续发酵一定时间后,称取10 g固态发酵物,梯度稀释后,用　　　　法统计有效活菌数。推测加入里氏木霉菌悬液的用途是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  解析:(1)固氮菌可以利用空气中的氮气,因此用于筛选出高效固氮菌株的培养基中不需要氮源,需选用的培养基类型为甲。在培养基中加入葡萄糖可为目的菌的生长提供碳源。 (2)不同土壤条件下目的菌的数量不同,密度有差异,所以从不同土壤中分离固氮菌时要采取不同的稀释度。 (3)粉碎后的玉米秸秆要进行灭菌处理,防止杂菌污染,一般采用高压蒸汽灭菌法。统计有效活菌数,可用稀释涂布平板法,先对菌液进行梯度稀释后,再用涂布平板法将菌液涂布到平板上。在粉碎的秸秆溶液中先加入里氏木霉菌悬液,后加入目的菌,加入里氏木霉菌悬液的作用可能是该菌初步分解玉米秸秆中的物质,使其容易被目的菌吸收利用。 答案:(1)甲　碳源　(2)不同土壤条件下目的菌的数量不同　(3)高压蒸汽　涂布平板　初步分解玉米秸秆中的物质,使其容易被目的菌吸收利用 名师推荐:课题活动(一)　立足生产实践,深研微生物技术应用 　　紧扣新高考生物学“重实践、强应用”的脉搏,一帆融媒图书特邀名师匠心打造系列“主题式探究课题活动”。本活动深度践行新课标理念,以“鲜活课题”为引领,“有机串联核心知识”,“浸润学科核心素养”。设计突出“动手实践”与“创新思维”培养,模拟真实科研情境,引导学生亲历探究全过程。告别纸上谈兵,助力学生“融会贯通知识、锤炼关键能力”,有效应对高考命题新趋势,是提升生物学科综合竞争力的生动实践课堂。 　　本资源属自主选择有偿使用栏目,敬请进入微信小程序“一帆书匠馆”在线学习。 学科网（北京）股份有限公司 $