第2章 第1节 植物细胞工程-【新课程学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程教师用书word（苏教版）

第二章　细胞工程 　生命观念 　科学思维 　科学探究 　社会责任 　运用结构与功能观、物质与能量观、稳态与平衡观理解细胞工程及其相关技术。 　通过细胞工程和胚胎工程的原理和操作过程,逐渐建立细胞工程的技术思维和工程思维。 　通过“天竺葵的组织培养”实践活动,培养学生的实践能力和创新能力。 　学会利用细胞工程技术解决生产、环境保护及人类健康问题,建立科学技术观,认识到社会的进步离不开科学技术的发展。 第一节 植物细胞工程 学习目标 1.概述植物组织培养的原理和过程。　 2.概述植物体细胞杂交技术的原理和过程。　　 3.尝试进行植物组织培养。 知识点(一)　植物组织培养技术 [教材知识梳理] 　　(一)植物组织培养技术 1.概念分析 原理 细胞全能性 对象 离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等 条件 无菌条件,在适宜的培养基上培养 结果 使其发育成部分或完整植株 　　2.主要步骤 　　(二)天竺葵的组织培养 1.实验原理 (1)植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的基因组。当其处于离体状态时,经过适当处理后,它们在适宜的培养基上,经过脱分化、再分化,可发育成完整的植株。 (2)组织培养得到的试管苗是非常幼嫩的植株。其表面蜡质和角质层等保护组织不发达,气孔数目少,有叶绿体但光合作用能力差。这样的试管苗一般要经过炼苗,以逐渐适应自然环境下的生长条件。 　　2.实验步骤 [微提醒] 　　诱导愈伤组织、诱导生芽和诱导生根的培养基不同,它们之间最大的差别是生长素和细胞分裂素的相对浓度的不同。 [核心要点点拨] 　　(一)从不同角度归纳细胞全能性 1.全能性大小 (1)体细胞全能性:分化程度低的>分化程度高的,细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的。 (2)不同细胞的全能性:受精卵>生殖细胞>体细胞。 (3)不同生物的细胞全能性:植物细胞>动物细胞。 2.全能性与细胞分化的关系:随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低。 3.植物体细胞表现细胞全能性的条件 材料 离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等 培养基 种类齐全、比例合适的营养物质及一定比例的植物激素 外界 条件 ①无菌操作;②光照:诱导愈伤组织时一般不需要光照,再分化时需要光照 　　(二)图示法理解植物组织培养的过程 植物组织培养过程中应注意的问题 (1)接种时注意外植体的方向,天竺葵叶片不能放反。 (2)天竺葵的组织培养中,愈伤组织的形成一般不需要光照,而在后续的培养过程中,需要给予适当时间和强度的光照。 (3)试管苗一般在高湿、弱光、恒温等条件下培养生长,出瓶后一定要注意保温、保湿。 (4)试管苗的光合作用能力弱,在移栽前应给予较强光照闭瓶炼苗,以促进幼苗向自养苗转化。 　　(三)植物组织培养技术的几个易错点 1.外植体的选择与制备 选择 外植体脱分化的难易程度因植物种类、器官来源及生理状况的不同而不同。一般来说,植物的花药和幼嫩的组织脱分化相对比较容易,而植物的茎、叶和成熟的组织脱分化较难 制备 制备外植体首先要消毒,其次要选取有形成层的部分,因为形成层细胞易脱分化 2.无菌操作 植物组织培养成功的关键是避免微生物的污染,所有实验用具要严格灭菌,接种过程要进行严格的无菌操作。 3.光照的控制 对于植物组织培养来说,光照条件非常重要。在愈伤组织的诱导阶段往往要避光培养,有利于细胞脱分化产生愈伤组织(如果是在光照条件下,容易分化产生维管等组织,不利于产生大量的愈伤组织)。当愈伤组织分化出芽和叶时,一定要有光照,有利于叶片内叶绿素的合成。 4.植物激素的使用 (1)由愈伤组织进行细胞分化时,一般要先诱导其生芽,然后诱导其生根,可通过控制培养基中生长素和细胞分裂素用量的比例来实现。 (2)生长素和细胞分裂素用量的比例影响植物细胞的发育方向。 生长素用量/ 细胞分裂素用量 结果 比值高 有利于根的分化,抑制芽的形成 比值低 有利于芽的分化,抑制根的形成 比值适中 促进愈伤组织的形成 　　[典例]　甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题: (1)以该种植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (2)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是　　　　　　　　　。A中的愈伤组织是叶肉细胞经　　　　　　　　形成的。  (3)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,　　　　(填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  [解析]　(1)因该种植物的绿色叶片和白色花瓣的细胞包含了个体发育所需的全部遗传信息,细胞具有全能性,所以在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗。 (2)图中A、B、C所示的不同结果的出现,主要是培养基中细胞分裂素和生长素用量不同造成的。A中的愈伤组织是叶肉细胞经过脱分化形成的。 (3)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,不能采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体,因为对杂合体的植株来说,由减数分裂形成的花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同,用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株。 [答案]　(1)该种植物的绿色叶片和白色花瓣的细胞具有个体发育所需的全部遗传信息,细胞具有全能性　(2)细胞分裂素、生长素　脱分化　(3)不能　对杂合体的植株来说,由减数分裂形成的花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同,用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株 [层级训练评价] (一)澄清概念 1.判断下列叙述的正误 (1)脱分化和再分化是植物组织培养的重要过程。 (√) (2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。 (×) (3)诱导生芽的培养基和诱导生根的培养基完全一样。 (×) (4)脱分化过程一般不需要光照,再分化过程需要光照。 (√) (5)在植物组织培养过程中,细胞的遗传物质一般都发生改变。 (×) (6)植物组织培养消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 (√) (二)落实知能 2.不同细胞的全能性高低不同,下列有关细胞全能性大小的比较,正确的是 (　　) A.一般细胞分裂能力越弱,细胞全能性越高 B.一般情况下,干细胞的全能性高于体细胞 C.韧皮部细胞的全能性高于形成层细胞 D.衰老细胞的全能性高于幼嫩细胞　 解析:选B　一般细胞分裂能力越强,其全能性越高,A错误;韧皮部细胞属于成熟细胞,形成层细胞为幼嫩细胞,因此,韧皮部细胞的全能性低于形成层细胞,C错误;一般情况下,干细胞的全能性高于体细胞,幼嫩细胞的全能性高于衰老细胞,B正确、D错误。 3.下列有关天竺葵组织培养的叙述,错误的是 (　　) A.外植体一般选自于未开花植株的茎上部新萌生的嫩叶 B.为充分利用培养条件,每个锥形瓶可接种多个外植体 C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株 D.外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施　 解析:选C　天竺葵未开花植株的茎上部新萌生的嫩叶是最为常用的外植体,因为该处细胞分裂能力强、分化程度低,全能性容易表达,A正确;为充分利用培养条件,每个锥形瓶可接种6~8个外植体,接种后,将封口膜重新扎好,B正确;培养形成的愈伤组织需要转移到分化培养基中才能再分化形成植株,C错误;外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施,最后为了避免消毒液的危害,需要用无菌水清洗多次,D正确。 4.(2025·江苏高考)图示一种植物组织培养周期,①~③表示相应过程。下列相关叙述错误的是 (　　) A.过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 B.过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞 C.过程②③所用培养基的成分、浓度相同 D.培养基中糖类既能作为碳源,又与维持渗透压有关 解析:选C　根据题图可知,过程①是脱分化,该过程中细胞会进行有丝分裂,A正确;过程②是再分化,愈伤组织细胞经再分化形成不同种类的细胞(如根、芽等器官的细胞),B正确;过程②(再分化)和过程③(胚状体发育)中,诱导的方向不同(②是诱导愈伤组织再分化形成根、芽等,③是胚状体进一步发育生长),所用培养基的成分、浓度等不同,C错误;培养基中的糖类可作为植物细胞培养的碳源,为细胞提供能量,同时糖类能参与维持培养基的渗透压,保持细胞的正常形态和生理功能,D正确。 (三)迁移应用 5.下表为研究人员利用某植物茎段,研究在不同的激素浓度下,进行组织培养形成愈伤组织的情况。茎段外植体的生理特性基本相同,接种数均为21,培养时的光照、温度等条件基本相同。 编号 激素浓度/ (mg/L) 茎段 形成愈伤组 织的茎段数 愈伤组织 形成率/% ① KT1.0 0 0 ② KT2.0 1 4.8 ③ KT4.0 2 9.5 ④ KT2.0+NAA0.02 2 9.5 ⑤ KT2.0+NAA0.2 11 52.4 ⑥ KT2.0+NAA2.0 17 81.0 回答下列问题: (1)配制的MS培养基中含有蔗糖、大量元素、微量元素、　　　　和植物激素的母液等,为了固定外植体,培养基中还需要加入的成分是　　　。  (2)表中的KT相当于植物体内的　　　　　。  (3)由表中①②③④可知,在一定的浓度范围内,适当提高KT的浓度,可以替代　　　在诱导愈伤组织形成中的作用;④⑤⑥三组实验形成了相互对照,其中的自变量是　　　　　。  (4)形成的愈伤组织如果要再分化形成植株,需要换瓶培养,换瓶的主要目的是　　　　　　　　 　　。  (5)形成的愈伤组织在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,原因是植物茎段细胞具有该植物的全套　　　　　。  解析:(1)配制的MS培养基中含有蔗糖、大量元素、微量元素以及有机物等,为了固定外植体,需要用固体培养基,需向培养基中加入琼脂。 (2)NAA为萘乙酸,属于生长素类生长调节剂,当KT与NAA浓度适中时利于形成愈伤组织,说明KT相当于细胞分裂素。 (3)由①②③④组实验可知,在一定的浓度范围内,适当提高KT的浓度,可以替代NAA在诱导愈伤组织形成中的作用。④⑤⑥三组实验中,KT浓度相同,但NAA浓度不同,因此该实验的自变量是NAA的浓度。 (4)形成的愈伤组织如果要再分化形成植株,需要更换营养物质,改变激素的浓度比例,故需要换瓶培养。 (5)离体的细胞能够培养形成完整的植株,说明细胞具有全能性,即植物茎段细胞具有该植物的全套遗传信息。 答案:(1)有机物　琼脂　(2)细胞分裂素　(3)NAA　NAA的浓度　(4)更换营养物质,改变激素的浓度比例　(5)遗传信息 知识点(二)　植物体细胞杂交技术 [教材知识梳理] 　　(一)植物体细胞杂交技术的概念、过程和原理 　　1.概念 将自发或人工融合的杂种细胞培育成新品种植物体的技术。 2.过程 (1)去壁:用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁,然后用低速离心等方法分离纯化得到原生质体。 　　(2)诱导原生质体融合的常用方法 ①物理法:电融合法。 ②化学法:聚乙二醇法(PEG)。 3.原理 (1)原生质体融合的过程利用了细胞质膜的流动性。 (2)杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (二)植物体细胞杂交技术的意义和实例 1.意义:应用于植物育种,可以克服不同种植物之间杂交的不亲和障碍,打破生殖隔离,实现远缘物种之间的核质融合,再通过培养便可获得新品种植株。 2.实例:白菜—甘蓝、马铃薯—番茄等。 [微提醒] 植物体细胞杂交的易错点 (1)原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁。 (2)植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株。 (3)植物体细胞杂交的培养基中要添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度,不仅能为原生质体提供营养,而且还能维持一定的渗透压,使原生质体保持正常的形态。 [核心要点点拨] 　　(一)植物组织培养和植物体细胞杂交的比较 名称 植物组织培养 植物体细胞杂交 原理 植物细胞的全能性 细胞质膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性 过程 选材 选取根尖、茎尖、幼嫩的叶片、花药等部位容易诱导脱分化 不同植物细胞融合形成杂种细胞 技术 操作 脱分化、再分化等 除脱分化、再分化外,还要用酶解法去除细胞壁,用一定的方法诱导细胞融合 关系 植物组织培养是植物体细胞杂交的基础,植物体细胞杂交所用的技术更复杂 　　(二)植物体细胞杂交过程中产生细胞的类型及检测方法的分析 1.诱导结果(设杂交的两种植物细胞分别为A、B) (1)未融合的细胞:A和B。 (2)两两融合的细胞:AA、BB和AB。 (3)多细胞融合体。 　　2.检测方法:对诱导产物中的细胞进行植物组织培养,然后根据得到的植物性状进行判断。 植物性状 结论 若只表现出一种植物的性状 未融合细胞 若得到的是具有两种亲本性状的植物 杂种植株 若得到的是两种亲本性状的植物,且一种植物的性状得到加强 多细胞融合体 若得到的是一种植物的性状,但是效果得到加强 同种细胞融合 　　[典例]　(2024·湖北高考)植物甲抗旱、抗病性强,植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙,过程如图所示。下列叙述错误的是 (　　) A.过程①中酶处理的时间差异,原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D.可通过分析植物丙的染色体,来鉴定其是否为杂种植株 [解析]　利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁时,可能因植物细胞壁结构差异而调整酶处理的时间,A正确;灭活的仙台病毒不能诱导(植物)原生质体融合,B错误;植物组织培养过程中的脱分化(④)和再分化(⑤)过程均需要添加生长素和细胞分裂素,但过程④和⑤中两者比例不同,C正确;可对植物丙的染色体进行分析,来鉴定其是否为杂种植株,D正确。 [答案]　B [方法规律] 　　体细胞杂交后细胞内染色体数目、染色体组数及基因型的判断 体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管染色体数目、基因型还是染色体组数都是两亲本之和。若一植物细胞含有2x条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb,另一植物细胞含有2y条染色体,2个染色体组,基因型为ccDd,则新植株应为异源四倍体,其体细胞中染色体为(2x+2y)条,4个染色体组,基因型为AabbccDd。 [层级训练评价] (一)澄清概念 1.判断下列叙述的正误 (1)植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是细胞壁阻碍了原生质体的融合。 (√) (2)植物体细胞杂交过程中,细胞融合成功的标志是产生新的细胞壁。 (√) (3)植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞。 (×) (4)植物体细胞杂交过程利用了植物组织培养技术。 (√) (5)植物原生质体融合的原理是植物细胞的全能性。 (×) (6)若原生质体均为两两融合,则融合后的细胞有3种类型。 (√) (7)将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种,可用聚乙二醇法和电融合法诱导原生质体融合。 (√) (二)落实知能 2.(2023·江苏高考)研究者通过体细胞杂交技术,探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。下列相关叙述正确的是 (　　) A.从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶,用于去除细胞壁 B.原生质体需在低渗溶液中长期保存,以防止过度失水而死亡 C.检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理,活的原生质体被染色 D.聚乙二醇促进原生质体融合后,以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞 解析:选D　植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,因此,去除植物细胞细胞壁需要使用纤维素酶和果胶酶,A错误;原生质体无细胞壁的支持和保护,若将其置于低渗溶液中,则会导致原生质体吸水涨破,B错误;改良苯酚品红染液和甲紫溶液均可使染色体着色,检测原生质体活力时可用台盼蓝染液进行染色,活的原生质体不能被染色,死的原生质体可被染色,C错误;不同种细胞的叶绿体颜色有差异,聚乙二醇促进原生质体融合后,以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞,D正确。 3.(2025·无锡期中)红豆杉(2n=24)生长缓慢且紫杉醇(可制作抗癌药物)含量非常低。红豆杉和柴胡(2n=12)的亲缘关系较远,研究人员尝试运用体细胞杂交技术培育产生紫杉醇的柴胡。先用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体,破坏部分染色体,再将其与未经紫外线照射的柴胡原生质体融合,得到两两融合的细胞,然后筛选杂种细胞,杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显。下列说法错误的是 (　　) A.融合前需将红豆杉细胞和柴胡细胞用纤维素酶和果胶酶处理 B.可以用化学诱导剂PEG诱导红豆杉原生质体与柴胡原生质体融合 C.融合细胞中染色体数为13~23的为杂种细胞,24条的可能不是杂种细胞 D.应在能合成紫杉醇的杂种细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养 解析:选C　植物细胞有细胞壁,阻碍细胞间杂交,所以在两种植物细胞融合前,需要用纤维素酶和果胶酶处理,A正确;诱导植物细胞原生质体融合的方法有电融合法、PEG融合法等,B正确;由题意可知,融合细胞中染色体数为13~36的为杂种细胞,24条的可能是杂种细胞,C错误;杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显,所以应在能合成紫杉醇的杂种细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养,这样染色体间的排斥较弱,D正确。 (三)迁移应用 4.科学家用植物体细胞杂交方法,将番茄叶肉细胞的原生质体和马铃薯块茎细胞的原生质体融合,成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株,如图1所示,其中①~⑤表示过程,英文字母表示细胞、组织、原生质体或植株。育种工作者还利用番茄进行了三组实验如图2。据图回答下列问题: (1)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有　　　　存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为六倍体,则此杂种植株　　　　　(填“可育”或“不可育”)。(已知番茄为二倍体、马铃薯为四倍体)  (2)如果形成c的a、b原生质体都来自番茄细胞,那么更简单地得到多倍体番茄植株的处理方法是　　　　　　　　　　　　　　　。  (3)用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验,则Ⅱ过程中,培育植物体B的育种方法(Ⅱ)称为　　　　　。植物体C的基因型有　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(细胞A为两两融合细胞,写出具体的基因型)  解析:(1)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有叶绿体存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。“番茄—马铃薯”细胞是由番茄叶肉细胞和马铃薯块茎细胞经过融合而成的,因此具有番茄和马铃薯的全部遗传物质,由于番茄为二倍体、马铃薯为四倍体,则杂种植株细胞内有2+4=6个染色体组,存在各自的同源染色体,能够进行减数分裂产生正常的配子,因此杂种植株是可育的。 (2)如果形成c细胞的a、b原生质体都来自番茄细胞,则c细胞内具有番茄细胞两倍的染色体,即发生了染色体数目的加倍。那么更简单的得到多倍体番茄植株的处理方法是可以用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,可以使细胞中染色体数目加倍。 (3)花粉经组织培养直接长成的幼苗是单倍体,再用秋水仙素处理幼苗,得纯合的植物体B,该过程(Ⅱ过程)属于单倍体育种。植物体C利用基因型为Yymm的植株的花粉两两融合后形成的细胞A,以植物组织培养技术得到。依据基因分离定律可知,亲本为 Yymm的植物的花粉基因型为Ym、ym。这样融合细胞A可能是Ym与Ym的花粉融合得到,也可能是ym与ym的花粉融合得到,还可能是Ym与ym的花粉融合得到。即融合细胞A的基因型可能是YYmm、 yymm、Yymm,植物组织培养技术得到的植物体C是细胞A全能性的体现,故植物体C的基因型取决于细胞A,所以植物体C的基因型是YYmm或yymm或Yymm。 答案:(1)叶绿体　可育　(2)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗　(3)单倍体育种　YYmm或Yymm或yymm /课堂小结与随堂训练/ 一、知识体系构建 二、关键语句必背 1.植物组织培养技术是利用细胞全能性,在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等,在培养基上培养,使其发育成部分或完整植株的技术。 2.植物体细胞杂交技术是指将自发或人工融合的杂种细胞培育成新品种植物体的技术。 3.植物体细胞杂交技术克服了远缘杂交不亲和的障碍,是培育植物新品种的一种有效途径。 三、素养好题训练 1.百合中含有甾体皂苷等多种药用成分。以兰州百合不同部位进行组织培养,探究外植体对丛芽诱导的影响(如表)。下列叙述正确的是 (　　) 外植体 外植体数/个 诱导数/个 鳞茎 100 83 茎 100 1 叶片 100 0 A.配制植物组织培养的培养基应先灭菌再倒平板 B.在外植体接种和培养过程中都要预防杂菌污染 C.外植体用75%酒精消毒后需用蒸馏水漂洗多次 D.表中数据表明兰州百合叶片细胞不具有全能性 解析:选B　配制好的培养基用锥形瓶分装后再灭菌,植物组织培养不用培养皿,A错误;植物组织培养过程应注意无菌操作,故在外植体接种和培养过程中都要预防杂菌污染,B正确;外植体用70%酒精消毒后需用无菌水冲洗2~3次,C错误;全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的能力,表中数据不能确定兰州百合叶片细胞是否具有全能性,D错误。 2.(2024·江苏高考)图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是 (　　) A.步骤①添加盐酸以去除细胞壁 B.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D.台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 解析:选C　步骤①需添加纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,其原理是酶的专一性,而盐酸会使细胞死亡,A错误;步骤②吸取原生质体放入等渗液中清洗,放入无菌水会导致原生质体吸水涨破,B错误;结合图示可知,经密度梯度离心后的原生质体处于0.6 mol·L-1甘露醇和0.75 mol·L-1蔗糖溶液之间,因而可推测原生质体的密度介于题图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间,C正确;台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养,被染成蓝色的原生质体活性差或已死亡,D错误。 3.为拓宽白菜育种的基因资源,改良白菜品质,研究人员以白菜(2n=20,AA)和甘蓝(2n=18,CC)为材料进行植物体细胞杂交,得到杂种植物。对两种亲本和某融合植株进行细胞DNA含量的检测,结果如图。下列说法错误的是 (　　) A.DNA相对含量为50的白菜细胞可能为间期细胞 B.只能用PEG诱导原生质体融合 C.由图中DNA相对含量推测甘蓝的细胞分裂期可能比白菜的短 D.待检测植株可能为融合的甘蓝—甘蓝植株或白菜—甘蓝植株 解析:选B　DNA相对含量为50的白菜细胞可能为间期细胞,A正确;诱导植物细胞融合可以采用物理法和化学法,B错误;根据不同时期的细胞数目可以推测每个时期的相对时间,据图分析可知,甘蓝分裂期(DNA含量150)占比比白菜(DNA含量100)的少,因此推测甘蓝的细胞分裂期可能比白菜的短,C正确;待检测植株DNA含量为150~200,可能为融合的甘蓝—甘蓝植株或白菜—甘蓝植株,D正确。 4.(2025·徐州期中)[多选]为获得利福平和链霉素双抗的黄色短杆菌菌株,科研人员用现有的甲、乙两种菌株进行细菌细胞融合(基本过程与植物体细胞杂交一致)。菌株甲抗利福平(Rifr)但对链霉素敏感(StrS),菌株乙抗链霉素(Strr)但对利福平敏感(RifS)。下列叙述正确的是 (　　) A.过程①中需要用纤维素酶和果胶酶处理细菌甲和细菌乙 B.为避免原生质体失水而影响融合,应将制备好的原生质体置于低渗环境中 C.若只考虑两两融合,融合子有3种,可用含利福平和链霉素的固体培养基进行筛选 D.过程②体现了细胞膜的流动性,PEG可以诱导植物细胞融合 解析:选CD　细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖,不能使用纤维素酶和果胶酶来处理细菌甲和细菌乙,A错误;失去细胞壁保护的原生质体在低渗环境中很容易吸水涨破,B错误;形成的两两融合的融合子共有3种,分别是菌株甲互融、菌株乙互融、菌株甲与菌株乙互融,其中只有菌株甲与菌株乙互融形成的融合子才是所需要的双抗菌株,可用含有利福平和链霉素的固体培养基进行筛选,C正确;过程②是原生质体甲、乙相互融合的过程,该过程体现了细胞膜的流动性,PEG是常用的细胞融合诱导剂,可诱导植物细胞的融合,D正确。 5.研究人员利用植物组织培养技术提高甜叶菊的繁殖效率,请回答有关问题: (1)选用甜叶菊芽尖细胞组织培养的核心步骤包括　　　　　　和　　　　　　两步,前者就是让已经分化的细胞经过诱导后,失去其特定的　　　　　　　　　从而转变为具有分生能力的细胞的过程。  (2)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是　　　　　　　　,另外,植物生长调节剂在培养基中的用量要考虑组织中　　　　的含量,才能有效地操作组织培养中的“激素杠杆”。  解析:(1)植物组织培养的核心步骤包括脱分化和再分化两步。已经分化的细胞经过诱导后,失去其特定的结构和功能而转变成具有分生能力的细胞的过程叫作脱分化。 (2)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是细胞分裂素和生长素。另外,植物生长调节剂在培养基中的用量要考虑组织中内源激素的含量。 答案:(1)脱分化　再分化　结构和功能　(2)生长素和细胞分裂素　内源激素 学科网（北京）股份有限公司 $