内容正文:
第3章 基因的本质
第1节 DNA是主要的遗传物质
一、对遗传物质的早期推测
早期认识:人们认为蛋白质是生物的遗传物质。
原因:当时人们对蛋白质已有一定的研究,蛋白质中氨基酸的种类、数量和排列顺序是千变万化的,可能蕴含遗传信息。而那时对其他生物大分子的研究较少,特别是对DNA的研究。
提示:现代研究及观点:蛋白质不能作为遗传物质。理由:蛋白质不能自我复制。
二、肺炎链球菌的转化实验
(一)格里菲思的肺炎链球菌(体内)转化实验
1.实验材料:两种肺炎链球菌
类型
有无荚膜
菌落特征
有无毒性
R型
无
粗糙
无
S型
有
光滑
有
2.实验过程、结果及结论:
实验过程
现 象
结 论
结论
将R型活细菌注射到小鼠体内
小鼠不死亡
R型活细菌无毒
在第四组实验中,已经被加热杀死的S型菌中必然含有某种促成这一转化的物质―“转化因子”。
将S型活细菌注射到小鼠体内
小鼠患败血症死亡
S型活细菌有毒性
将加热杀死后的S型细菌注射到小鼠体内
小鼠不死亡
加热杀死后的S型细菌无毒性
将无毒性的R型细菌与加热杀死后的S型菌混合后注射到小鼠体内
小鼠患败血症死亡并分离出S型菌,且能遗传
加热杀死后的S型细菌能够使R型细菌转化成S型细菌。
[小资料]——R型细菌转化为S型细菌的现代解释:
1.从形态上区分:R型细菌与S型细菌的差别就在于R型细菌没有荚膜,而S型细菌有。
2.形态差别的根本原因在于S型细菌的DNA上具有控制荚膜形成的相关基因,而R型菌没有。
3.将S型菌加热杀死时,高温使细菌蛋白质变性,DNA断裂形成许多片段,其中有控制荚膜形成的片段因为某种原因而进入了R型细菌的细胞内,并得到了表达,使R型菌长出了荚膜,而转变为S型细菌。
4.细菌转化:一种细菌接受了另一种细菌的遗传物质,性状发生改变的过程。细菌转化是基因重组的结果。提示:不是因为基因突变,也不是因为染色体变异。
(二)艾弗里的肺炎链球菌的体外转化实验:
1.实验思路: 设法逐步去除S型细菌的各组分后分别与R型活细菌混合培养,观察是否具有转化活性。
2.方法、步骤和结果:
组别
S型细菌细胞提取物的处理方法
实验结果
1 组
不做处理
将细胞提取物加入有R型活细菌的培养基
R型+S型
2 组
蛋白酶
R型+S型
3 组
RNA酶
R型+S型
4 组
酯酶
R型+S型
5 组
DNA酶
R型
3.结论: DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质,即肺炎双球菌的遗传物质是DNA。(不是蛋白质、RNA。更不是糖类、脂类等其它物质,也不是DNA的水解物——脱氧核苷酸)。
▼科学方法:自变量控制中的“加法定理”和“减法定理”
1.加法原理:
①与常态比较,人为增加某种影响因素的称为加法原理。
②例如在必修一酶一节中“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验中,与对照组相比,实验组分别做了加温、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液的处理,利用了“加法原理”。
2.减数原理:
①与常态相比,人为去除某种影响因素的称为减法原理。
②例如在艾弗里的肺炎链球菌转化实验中,每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质,这利用了“减法原理”。
三、T2噬菌侵染细菌的实验:
1.实验方法:放射性同位素标记法。
2.实验材料:T2噬菌体: ①成分只有蛋白质和DNA;②专一性寄生在能在大肠杆菌体内;③繁殖时,仅将遗传物质DNA注入大肠杆菌,其他物质保留在体外。自身仅提供DNA,繁殖所需原料( 核苷酸、氨基酸)、酶和能量等均由大肠杆菌提供。
3.实验步骤:
(1)放射性同位素标记:用35S标记一部分噬菌体的蛋白质(第1组);用32P标记另一部分噬菌体的DNA(第2组)。
(2)培养噬菌体——用标记的噬菌体分别去侵染大肠细菌;
(3)培养一定时间(噬菌体大量繁殖)后,搅拌、离心。
(4)对上清液和沉淀物的放射性进行检测。
4.结果与结论:
5.有关问题:
(1)为什么用35S标记蛋白质,32P标记DNA;而不能用15N或14C、3H、18O等?
提示:因为硫仅存在于T2噬菌体的蛋白质组分中,而磷则主要(99%)存在于 DNA的组分中。用14C和18O等元素是不可行的,因为 T2噬菌体的蛋白质和DNA分子的组分中都含有这两种元素。
(2)为什么标记的不是同一部分噬菌体?提示:因为在噬菌体中,S只存在于蛋白质中,而99%的都P存在于DNA中。
如果标记同一部分的噬菌体,侵染细菌后,在细菌体内出现放射性,无法确定是35S-蛋白质,还是32P-DNA进入了细菌。
(3)从培养噬菌体到离心分离的时间不能过长,为什么?提示:如果培养噬菌体的时间过长,噬菌体在细菌内增殖后释放出来,经离心分离后分布于上清液中,会使上清液放射性升高。
(4)从理论上讲,第1组(35S标记组)的结果应该是放射性全都在上清液,而沉淀物没有放射性,而实验的实际结果是沉淀物有很低的放射性,最可能的原因是什么?
第2组(32P标记组)的实验结果应该是放射性全都在沉淀中,上清液没有放射性,而实际结果上清液有很低的放射性?最可能的原因是什么?
提示:35S标记的噬菌体吸附于细菌,因为搅拌、离心不充分而没有与细菌分离,随离心进入沉淀物中。
原因:部分32P标记的噬菌体没有侵染细菌,或部分标记的噬菌体在细菌体内增殖后释放出来,它们经离心后分布于上清液中。
(4)如何实现对噬菌体的标记?简要说明实验的设计方法和这样设计的理由。
◇设计方法:(1)先分别将细菌在32P、35S的培养基上培养;
(2)然后,用噬菌体去侵染分别被32P或35S标记的细菌。
◇理由:因为噬菌体是营寄生生活,噬菌体DNA在细菌体内利用细菌的化学成分来指导合成自身的DNA和蛋白质外壳。
[知识拓展]
1. 噬菌体侵染细菌的大致过程——即噬菌体的增殖过程
吸附(借尾丝或刺突)→注入(注入的是DNA,蛋白质没有进入)→合成(DNA复制和蛋白质合成)→装配(组装形成子代噬菌体)→释放。
说明:在整个过程中,病毒只提供了自身的核酸,其增殖过程中所需的设备(如核糖体等),原料(如核苷酸、氨基酸等)、酶、能量等都是由宿主细胞提供。
2.细菌和病毒作为证明DNA是遗传物质的实验材料,其具有的优点是:①个体很小,结构简单,容易看出因遗传物质改变导致的结构和功能的变化。细菌是单细胞生物,病毒无细胞结构,只有核酸和蛋白质外壳。
②繁殖快。细菌20~30 min就可繁殖一代,病毒短时间内可大量繁殖。
3.为什么不能在人工培养基上培养病毒呢?
病毒是过寄生生活的,只能在宿主的活细胞内进行增殖,是不能在人工的培养基上生长繁殖的,因为其没有细胞结构,没有产能系统,没有酶系统,无独立的代谢能力。
4.作为遗传物质必须具备下列特点:
①分子结构具有相对稳定性。②能够自我复制,前后代保持一定的连续性。③能够指导蛋白质的合成,从而控制生物的性状。④能够引起可遗传的变异。
四、DNA是主要的遗传物质
1.因为绝大多数生物的遗传物质是DNA,而不是RNA,只有极少数病毒的遗传物质才是RNA。所以说DNA是主要的遗传物质。
绝大多数生物——所有真核生物、原核生物、DNA病毒(如噬菌体、乙肝病毒)。
极少数生物——极少数病毒(即RNA病毒)。
2.病毒的遗传物质是DNA或RNA。
举例:烟草花叶病毒、车前草病毒、HIV、流感病毒、SARS病毒等RNA病毒的遗传物质是RNA;而噬菌体、乙肝病毒等DNA病毒的遗传物质是DNA。
提示:原核生物和真核生物的遗传物质都是DNA,不是RNA。细胞质和细胞核的遗传物质都是DNA,而不是RNA。
3.核酸是一切生物的遗传物质。
第2节 DNA分子的结构
一、DNA双螺旋结构模型的构建
1.主要构建者:沃森和克里克
2.资料1:当时,科学界对DNA的认识(发展):DNA分子是以脱氧核苷酸为单位连接而成的长链,这4种脱氧核苷酸分别含有A、T、C、G四种碱基。
资料2:威尔金斯和其同事富兰克林提供的DNA衍射图谱。——推算出DNA呈螺旋结构。
3.资料3:腺嘌呤(A)的量总是等于胸腺嘧啶(T)的量,鸟嘌呤(G)的量总是等于胞嘧啶(C)的量。
——提出DNA是有规则的双螺旋结构。
4.1953年撰写论文发表,1962年获诺贝尔奖。
二、DNA分子的结构
DNA双螺旋结构模型的基本观点主要有:
1.DNA分子是由两条脱氧核苷酸长链组成,这两条链按反向平行方式盘旋而成有规则的双螺旋结构。
2.DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧。
3.DNA分子中两条链上的碱基通过氢键按照碱基配对原则连接成碱基对。
碱基互补配对原则:A(腺嘌呤)一定与T(胸腺嘧啶)配对,G(鸟嘌呤)一定与C(胞嘧啶)配对。
DNA双螺旋结构表解:
主链(骨架)
碱基对
构成方式
1.脱氧核糖与磷酸交替排列;
2.两条主链呈反向平行;
3.盘绕成规则的双螺旋。
主链上对应碱基以氢键连结成对;
碱基互补配对原则:(A—T,G—C);
位置
双螺旋外侧
双螺旋内侧
[知识拓展]
1.两条链上的碱基为什么不是嘌呤与嘌呤,嘧啶与嘧啶之间配对呢?
其原因是,两条链之间的空间一定,两条链之间距离不变,其距离是2nm(20Ǻ),如果是嘌呤与嘌呤配对,则所占空间太大,容纳不下,若两条链上嘧啶与嘧啶相配对,则相距太远,无法形成氢键。
提示:嘌呤是双环化合物,而嘧啶是单环化合物。4种碱基的结构简式见下图:
2.互补碱基对A和T之间形成两个氢键,而C和G之间形成三个氢键。所以含C—G碱基对多的DNA稳定性相对较高、较耐热等。
3.在一个DNA分子中,一条链上的上下两个脱氧核苷酸是通过3,5磷酸二酯键连接的,两条链对应位置上的两个脱氧核苷酸是通过氢键相连的。
三、DNA分子的特点
1.稳定性——指DNA分子双螺旋结构的相对稳定性
原因在于:①磷酸与五碳糖交替排列,稳定不变;②内侧碱基对通过氢键形成碱基对,使两条脱氧核苷酸长链稳固在连在一起;③碱基堆积力。
2.多样性:虽然组成DNA只有四种碱基(A、T、C、G),并且碱基配对有严格的规律性,配对方式只有两种(A-T,G-C),但碱基对的数量成千上万,特别是碱基对的排列顺序是千变万化的,这种千变万化的碱基对的排列顺序构成了DNA的多样性。
规律性:有n个碱基对的DNA,其碱基对的排列顺序可能的种类有4n。有n个碱基的DNA分子,其碱基对排列顺序可能的种类有2n。
不同DNA分子中脱氧核苷酸的数目不同,参与构成的每种脱氧核苷酸数目也不同。不同生物的DNA的不同主要是指脱氧核苷酸(即碱基对)排列顺序的变化。
▼提示:蛋白质的多样性决定于组成每种蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不同;空间结构不同。
DNA分子中碱基对排列顺序的千变万化决定了DNA分子结构的多样性
DNA分子结构的多样性决定了蛋白质分子结构的多样性,从而决定了生物种类的多样性。这样从分子水平上说明了生物的多样性和特异性。
3.特异性:每一个特定DNA分子都有特定的碱基对排列顺序,蕴含了特定的遗传信息。这种特定的碱基排列顺序就构成了DNA分子的特异性。
不同种的生物DNA分子不同,同一种生物不同的生物个体DNA也不同。
第3节 DNA分子的复制
一、对DNA分子复制的推测
1.半保留复制——沃森和克里克的推测:
在复制过程中,原来双螺旋的两条链并没有被破坏,它们分成单独的链,每一条旧链作为模板再合成一条新链,这样在新合成的两个双螺旋分子中,一条链是旧的而另外一条链是新的,因此这种复制方式被称为半保留复制。
2.全保留复制——母链DNA分开,分别复制形成两条子链DNA,此后两条母链DNA彼此结合,恢复原状,新合成的两条子链彼此互补结合形成一条新的双链DNA分子。
半保留复制图示: 全保留复制图示:
二、DNA半保留复制的实验证据
——1958年,美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔以大肠杆菌为实验材料的实验:
1.实验方法:同位素标记法和密度梯度离心法。
2.实验过程:以含15NH4Cl的培养液来培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖几代。
再将大肠杆菌转移到14N的普通培养液中。
然后,在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,进行密度梯度离心,记录不同质量的DNA在离心管中的位置及比例。
3.实验分析:如果是半保留复制, 那么离心后应该出现三条DNA带:重带(15N/15N)-在试管底部位置、中带(14N/15N)-在试管中部位置和轻带(14N/14N)-在试管上部位置。
如果是全保留复制,那么离心后应该出现两条DNA带:重带(15N/15N)和轻带(14N/14N)。
4、实验结果:在试管中出现了DNA的这三条带。
5.结论:DNA的复制是以半保留的方式进行的。
三、DNA分子复制的过程
1.概念:以亲代DNA分子为模板,合成子代DNA的过程。(即1个DNA→2DNA分子)
2.时期:有丝分裂前的间期或减数第一次分裂前的间期。
▼提示:无丝分裂和二均分裂等任何类型的细胞分裂都有DNA分子的复制。
3.场所:主要在细胞核,其次在线粒体、叶绿体中也会发生。
4.大致过程:
①解旋:在细胞提供能量的驱动下,DNA解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开(即碱基之间的氢键断裂),形成两条单链。
▼提示:解旋酶的作用对象:氢键;作用结果:氢键断裂,双螺旋解开。
②合成子链:以解开的每一条母链为模板,在DNA聚合酶等酶的作用下,利用游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。随着模板链解旋过程的进行,新合成的子链也不断延伸。
③形成子代DNA分子(复旋):每条新链与其对应模板链盘绕成双螺旋结构。形成各含一条母链和一条子链的2个DNA分子。
结果,一个DNA分子形成两个完全相同的子代DNA分子。
▼提示:形成的子代DNA与亲代DNA完全相同,指的是碱基对的排列顺序——包含的遗传信息完全相同。
5.条件:⑴模板:亲代DNA的两条脱氧核苷酸长链(母链);
⑵原料:细胞核中四种游离的脱氧核苷酸;
⑶能量:来自细胞呼吸产生的能量(ATP);(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)
⑷有关酶:如解旋酶、DNA聚合酶、(DNA连接酶)等。
6.特点:⑴边解旋,边复制;⑵半保留复制;⑶多个复制起点且双向复制。
7.DNA能精确复制的原因:
⑴有规则的双螺旋结构——精确的模板。⑵碱基互补配对原则——使复制准确无误。
8.意义:DNA分子通过复制,将遗传信息从亲代传给子代,从而保持了遗传信息的连续性。即通过复制能准确地传递遗传信息。
第4节 基因通常是有遗传效应的DNA片段
一、基因的概念(本质)
基因通常是有遗传效应的DNA片段。
1.基因与DNA的关系
(1)基因通常是有遗传效应的DNA片段。(注:无遗传效应的DNA片段不能称之为基因)。
(2)每个DNA分子包含许多个基因。
2.基因与染色体的关系
(1)基因在染色体上呈线性排列。
(2)染色体是基因的主要载体,
3.基因与性状的关系:
(1)性状:是指生物体的形态、结构和生理特性等的总和;
(2)基因是决定生物性状的基本单位。不同的性状由不同的基因控制的。
二、DNA片段中的遗传信息
1.遗传信息:指基因中4种脱氧核苷酸特定的排列顺序。
2.DNA分子的多样性:DNA分子中碱基对排列顺序的千变万化,构成了DNA分子的多样性。
3.DNA分子的特异性:每一个DNA具有特定的碱基对的排列顺序,构成了DNA的特异性。
▼DNA分子具有多样性和特异性,这是生物体多样性和特异性的物质基础。
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