专题25 发酵工程-【创新大课堂系列】高三生物全国名校名卷168优化重组卷

的古 海 喂 袋 的 炮 樱格 燥 出其 到 系 尔 牧以 P 学 K 数 多 安 D( 钟林 炮 尔 加削4具) 兴 经 古降！ 出 郴 河 州 器 型 水 味 似 炮 炮 炮 城 + 品 ( 用 款() 中 数 田+ 博市 架 数 K ) ) 架 的 用) 专题25 发酵工程 D 2.A3.B4.D5.B6.B 7.D8.A9.B10.B11.C 13.C14.C 解析(1)①啤酒的工业化生产过程中，焙烤的主要目的是加热杀死 种子，防止种子细胞呼吸消耗过多的有机物：②糖化过程的目的是使 淀粉分解，形成糖浆，因此该过程中发挥作用的酶主要是淀粉酶」 (2)根据题目信息可知，样品经2次10倍稀释，再加入等体积的台盼 蓝溶液染色后，在25×16型血细胞计数板上计数，其中由于细胞膜 具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞，因此5个中格中的细胞数 为200个，呈蓝色的酵母细胞数为80个，可得活细胞数目为120个， 则该样品中活酵母细胞的密度为120÷5×25÷0.1×2×102×103= 1.2×10"个/mL (3)①根据题目信息可知，图中序列为PEP4基因转录的非模板序列， 因此其模板序列左侧为3'端，转录过程中子链的合成方向为5'端到 3'端，需要以模板链的3端为起点，且mRNA上密码子的读取方向为 到 5 >3',综上所述可得，编码该酶的mRNA的起始密码子对 PEP4基因的碱基序列位于图中左端；②③根据题目信息可知，Cs9 蛋白可在人工合成的RNA序列(SgRNA)引导下，在选定位，点切断相 应的DNA链 ,且DNA序列中含NGG的位，点具有较高的鳊辑效率 (N为任意碱基)，观察PEP4序列虚线框中的碱基序列，其中GG有2 处，CC有3处，而CC序列的互补序列为GG,由此可得上述PEP4序 列中共有5处可作为Cas9的优选剪切位，点：观察图中信息可得，Casg 的剪切位点在其NGG识别位点的3'侧：④根据题目信息“野生型酵 母可以水解酪蛋白，从而在菌落周围形成透明圈”，可将Cs9蛋白 gRNA等处理的酵母菌接种在以酪蛋白为唯一氮源（或含酪蛋白）的 固体培养基上：⑤由于处理过的酵母菌细胞内水解酪蛋白相关的酶 基因产生突变，导致酵母菌失去水解酪蛋白的能力（或水解酪蛋白的 能力下降)，因此接种培养后，无透明图（或透明圈较小）的菌落符合 生产要求 答案(1)杀死种子，防止种子细胞呼吸消耗过多的有机物淀粉酶 (2)1.2×10°(3)①左 952 ③酪蛋白为唯一氨源（或含酪蛋 白) 无透明圈（或透明圈较小）》 解析(1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭荫，微生物生长所 需要的营养物质包括各种无机盐、碳源、氦源，为获得高效降解PHE 的降解菌，配制的培养基必须以PHE为唯一碳源 (2)经富集培养得到的菌液用稀释涂布平板法进行分离后，通过比较 降解圈大小判断不同微生物的降解能力，降解圈大的，降解能力强。 (3)根据表中数据可知，B2对PHE的降解率最高，且降解时间最短 因此，在实验条件下降解效果景好的菌群是B2 (4)与B1和B3相比，B2在20~40℃内，各组生物量相差不大，且都 有较高的生物量，说明B2对温度耐受性最好。要测定B2的最适生 长pH的范围，可以配制七组培养基，将培养基的pH分别调整为5 6、7、8、9、10、11(或配制pH为5一11内的一系列pH梯度的培养 基)，在各组培养基上分别接种等量的B2,在相同且适宜的条件下培 一段时间，测定各组培养基中B2的吸光值(OD0,吸光值(D最 大的一组的相邻两组对应的pH范图即为B2生长的最佳pH范围 答 (1)高压蒸汽灭菌PHE(2)稀释涂布平板降解圈 3)2 B2对PHE的降解率最高，且降解时间最短 (4)B2 配制七组培养 基，将培养基的pH分别调整为5、6、7、8、9、10、11（或配制pH为5 11内的一系列pH梯度的培养基)，在各组培养基上分别接种等量的 B2,在相同且适宜的条件下培养 一段时间，测定各组培养基中B2的 吸光值ODo,吸光值(OD最大的一组的相邻两组对应的pH范围 即为B2生长的最佳pH范围 解析 (1)制备土壤浸出液时需将浸出液进行稀释处理，是为了降低 培养液中萌体的浓度，以便获得单菌落和计数，从而避免菌体浓度过 高，难以得到单菌落。 (2)该实验的目的是从土壤中分离出能够降解该除草剂（含氮有机 物，可以作为氯源)的细谊，故在选育过程中，应将土壤漫出液接种于 以该除草剂为唯一氣源的固体培养基上（需要加琼脂），结合培养基 的基本成分（水、无机盐、碳源和氮源），分析可知，其他需要选择的成 分包括ABEFG,所以无需含有CD。 (3)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，则需要用稀释涂 布平板法进行接种，因为该方法不仅可以获得单菌落，而且可以完成 计数。将101倍的稀释液分别涂布到3个平板上培养，每个平板均接 种了0.1mL样品。培养后平板的菌落数分别是210、230190，则每 毫升土壤溶液中活菌数的理论值为(210十230十190)÷3÷0.1× 101=2.1×107个 在用该方法进行接种时，当两个或多个细菌连在 一起时，平板上观察到的只是一个落，因此该方法统计结果应该低 于活菌的实际数目 (4)在固体培养基上形成的菌落中，单菌落周围的透明带越大，其降 解除草剂的能力越强。但该培养基中出现了少数无透明带菌落，由 于该培养基中的除草剂是唯一的氮源，而且该菌体周围没有透明圈 出现，说明除草剂（含氮有机物，可以作为氮源）没有被该菌体使用 则这些微生物只能利用空气中的氮气完成自身的生长，因此可推测 这些菌体能固氨（能够利用空气的气）。 答案(1)过高(2)CD(3)稀释涂布平板法2.1×107 (4)固氮 (利用空气的氮气) 解析(1)腐乳制作中有多种微生物参与发酵，其中主要是毛霉，其 生长的适宜温度为15~18℃ (2)“味咸”是因为加了盐，加盐的目 的除了调味以外，还有析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬和抑制微生 物生长的作用：酒的含量一般控制在]2%左右，日的是抑制微生物的 生长，同时使腐乳具有独特的香味。(3)“甘心”是指在多种微生物的 协同作用下，普通豆腐转变成风味独特的腐乳，其原因是毛霉等微生 物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸：脂！ 肪酶将脂肪水解为脂肪酸和甘油。(4)培养基的营养成分 一般包括 水、碳源、源和无机盐等 分析题图可知，两实验组均采用稀释涂 布平板法接种。(5)可以通过将未接种的培养基在适宜条件下培养 ·段时问，看是否有菌落产生来判断培养基是否被污染。(6)根据实 验结果，结合灭菌和消毒的应用范围，为了保证健康，每隔一段时间， 应该对手机进行消毒处理。 答案 (1)毛霉 15-18 (2)抑制微生物的生长 12% 抑制微生 物的生长(3)蛋白酶和脂肪酶 (4)氮源和无机盐稀释涂布平板 118 (5)观察培养基上是否有菌落产生，若无菌落产生 (6)消毒 19.解析 (1)空气过滤器能对通入的空气进行无酋过滤，从而对发酵罐 中的培养液实现无菌换气：发酵罐中并不装满发酵液，而是留出约 1/3的空间，是为了使酵母菌在初期进行有氧呼吸而大量繁殖，同时 防止发酵液溢出：利用该装置一般先进行果酒发酵再进行果酷发酵 原因是采酒发酵产生的酒精可作为果醋发酵的原料，而果醋发酵户 生的醋酸并不能作为果酒发酵的原料 (2)利用图1中装置进行果酒发酵时，需要的是无氧条件，因此软管 夹应关闭，防止空气进入：果酒发酵时，酒精是无氧呼吸的产物，是在 酵母菌细胞质基质中产生：酵母菌发酵的最适温度为18~30℃，醋 酸荫景适宜的生长温度为30~35℃，比酵母菌酒精发酵时的温度 高：醋酸菌是好氧菌，氧气必须充足才能发酵产生醋酸，因此由果酒 转变成果酷的制作时，需要升高温度和打开软管夹和充氧系，通入氧 气（保持通氧）。 (3)整个发酵过程中酵母菌细胞呼吸会产生C()2,使培养液的pH逐 渐降低，因此图2中能表示整个发酵过程中H变化情况的是曲线 19 ②：道体代谢过程中的产物使发酵液H改变至菌体耐受极限后，即 使营养充足，菌体的生长也会受到抑制，此时可进行的处理是调节培 养液pH、及时排出代谢产物等 答案 (1)为通入的空气进行无菌过滤 使酵母菌在初期进行有氧 呼吸而大量繁殖，同时防止发酵液溢出 果酒发酵产生的酒精可作 为果醋发酵的原料，而果醋发酵产生的醋酸并不能作为果酒发酵的 原料 (2)关闭细胞质基质 升高 打开软管夹和充氧泵，（保持 用)(3)2》 调节培养液pH、及时排出代谢产物等 专题26细胞工程 1.C2.D3.C4.D5.B6,B7.B8.A9.C10.C11.C 12.D 13.C 14.C 15,解析(1)该实验的自变量血清中抗原和抗体的种类，因变量是抗原 与抗体结合程度。以抗原为自变量，看第]组血清与其结合情况，第 1组血清能结合多种抗原，因此EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一 抗体，依据是，用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原 的结合强度都较高。 (2)观察实验结果，第1、2组血清能结合EV71和VP1且强度接近 而第3组血清仅能结合VP2,对EV71没有作用。根据第一小问推测 EV71刺激小鼠产生的抗体种类更多，为了减轻单克隆杂交瘤细胞箭 选的工作量，选用VP]免疫小鼠效果最佳 (3)相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是灭活病毒诱导 法 用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交璃细 胞，在该种培养基上未融合、同种融合的细胞均不能存活。将其接种 15 到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测，目的是为了获得足够量的 能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 (4)图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗 除此之外还可以使用的方法是注入小鼠腹腔培养（体内培养）。 单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备，所以该单克 隆抗体具有的优点是：能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生 特异性识别，并且可大量制备 答案 (1)不是 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗 原的结合强度都较 (2)VPI (3)灭活病毒诱导法 克隆化 抗 体检测 足够量的既能大量增殖又能产生大量特异性抗体的杂交瘤 细胞 (4)细胞培养液 16.解析 (1)用促性腺激素对雌性小鼠进行超敦排卵处理可得到大量 卵母细胞，而卵母细胞需要培养到MⅡ期才能受精：(2)体外培养动 物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质 、温度等 条件外，还需要控制的气体条件是95%空气与5%C()2的混合气体， 其中C)2的主要作用是雏持培养液的pH:(3)为了获得更多甲的后 代，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将其移入盛有操作 液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割 在分割我 胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢 和并 ·步发育：(4)卵细胞、精子分别转化为 phESC、ahESC ,它们 类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何 种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚 至 个体的潜 能 不考虑致死情况，弧雌小鼠具有双母亲来源，因此其性染色体组 成为XX,而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子 ,精子 的 性染色体为X或Y,所以孤雄小鼠的性染色体组成可能是XX X 或 YY:(5)结合题图可知，只依赖雄性小鼠不能得到弧摊小鼠，这是因 为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另 个精子 起注 个去核卵 细胞中，而卵细胞来自雌性小鼠，另外获得的重构胚必须移植到雌性 小鼠体内才能发育为个体，可见离开雌性小鼠不能获得孤雄小鼠 答案 (1)促性腺激素 (2)95%空气和5%C()2的混合气体 (3)桑 甚胚 将内细胞团均等分割(4)分化为成年动物体内的任何一种 类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体 XX. XY或YY(5)需要将ahESC和另一个精子一起注入 一个去核卵细 胞中：重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体 17.解析 (1)根据图示信息可知，该三亲婴儿从受卵到三亲婴儿的孕 育过程中依次使用了核移植、体外受特、早期胚胎培养和胚胎移植等 242 技术。(2)重组的卵细胞获取的是卵母细胞A中的细胞质，说明A 的细胞质基因是正常的，因此代表健康女性的卵母细胞是A:取卵之 前，该女性需要注射促性腺激素，进行超数排卵。(3)动物细胞培养 需要加入动物血清等一些天然物质：当人的体外受精卵在培养液中 分裂至8一16个细胞阶段，即可进行移植 答案 (1)核移植体外受精 (2)A 促性腺 (3)动物血清 胚胎 移植(4)没有因为受精卵的细胞质由健康女性提供，无论胚胎是 男性还是女性，其线粒体都不携带致病基因，所以都不会患病 解析(])卵子（卵细胞）含有较多的营养物质，图中的单倍体襄胚1 最可能是由小鼠的卵子（卵细胞）发育而来，所采用的技术应为早期 还怡拉装技术。这表时程中使用的这表液冷有一此开.机盐和有玩 盐外，还需添加雏生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等 物质 (2)囊胚的内细胞团细胞属于胚胎千细胞，图中的单倍体ES应取自 囊胚的内细胞团细胞，ES在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁 明显。 (3)由于物种间存在生殖隔离，因此自然情况下哺乳动物远亲物种间 的配子往往无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育。但是 人们为了生物学研究的便利，创造出了各类远亲物种间的杂合细胞， 如小鼠 大鼠、人 鼠等杂交细胞，由于这些细胞都是由体细胞融合 产生，因此杂交细胞中通常含有4个染色体组。 答案(1)卵子（卵细胞）早期胚胎培养技术 氨基酸、核苷酸 (2)内细胞团体积小、细胞核大、核仁明显(3)生殖隔离受精 解析(1)人工抗原的有效成分是TSH,用人工抗原对小鼠进行免疫 处理的目的是诱亭小鼠产生能够分泌抗TSH抗体的B淋巴细胞：陵 蛋白酶能催化蛋白质的水解，则用胰蛋白酶处理免疫小鼠的脾组织 可使其分散成单个细胞，加入培养液可以制成细胞悬液 (2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合依賴于细胞膜的流动性：添加脂溶 性物质PEG可促进动物细胞合，PEG诱导动物细胞融合的原理是 使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 (3)在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胸 都会死亡，只有融合的杂交璃细胞才能生长，故箭选后的结果是只有 杂交璃细胞能够生存。 (4)对获得的杂交瘤细胞接种到96孔板要进行克隆化培养和抗体检 测，抗体检测的原理是抗原与抗体的反应具有特异性，筛选既能产生 抗TSH抗体，又能大量增殖的单克隆杂交细胞株，经体外扩大培 养，收集细胞培养液，提取抗TSH单克隆抗体 答案 (I)诱导小鼠产生能够分泌抗TSH抗体的B淋巴细胞 分散 成单个细胞(2)流动性使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞 膜打开，细胞发生融合 (3)只有杂交瘤细胞能够生存 (4)抗原与 抗体的反应具有特异性既能产生抗TSH抗体，又能大量增殖细 胞培养液 专题27 基因工程及生物技术的 安全性与伦理问题 2.D3.D4.C5.B6.B7.B8.C9.C10.A11.A D 13.A14.C 解析 (I)GenBank是日前国际上广泛使用的序列数据库之 它的 致据主要是各国的实验室、测序机构等发布的序列信息 利用这个 数据库，我们可以便捷地检索到基因和蛋白质的序列信息：故可从序 列数据库或基因数据库中查询基因、的编码序列，设计特定引物 保证基因N与质粒pYL正确连接，需要使用双酶切法，为了目的基 因能正确表达，目的基因需要插入质粒的启动子和终止子之间，且质 粒和目的基因需要使用相同的酶或能产生相同黏性末端的酶：分析 图1可 知，质粒pYL应该选用Spe 和XhoI酶切，由于目的基 因 含有SpeI识别序列，故N基因不能使用SpeI酶切，但Xba I与其 有相同的黏性末端，基因N酶切时可以用XbaI替换 Spe 即 基因两端应该含有XbaI和XhoI识别序列： 题千信息 为转录模板链，才有引物1和引物2扩增N基因，则扩增后模板链的 5'端含有引物1序列，而编 码链的5'端含有引物2 序列 质粒 YL上的启动子和终止子方向，可知应该在引物 端 加 Xba I 、引物 5'端添加XhoI识别序列。PCR扩增基因N,特异性 酶切后，利用DNA连接酶连接DNA片段，构建重组质粒，大小约 9.5kb(kb为千碱基对)，假设构建重组质粒前后，质粒pYL对应部 分大小基本不变 (2)构建重组质粒，大小约9.5kb(kb为千碱基对)，假设构建重组质 粒前后，质粒pYL对应部分大小基本不变，而质粒pYL本身7.2kb 可知目的基因N大小为2,3kb:分析电泳图可知，初步判断实验组1 的质粒中成功插入了基因N。在第5组的PCR反应中，使用无菌水 代替实验组的模板DNA,目的是检验PCR反应体系是否存在污染， 即检验PCR反应中是否有试剂污染： (3)编码第240位脯氨酸或第243位苯丙酸的碱基序列替换为编码 丙氨酸的碱基序列，丙氨酸的密码子有GCA:密码子位于mRNA上， mRNA上的序列与编码链序列相似，而a是诱变第240位脯氯酸编 码序列的引物(GCA为诱变序列)，可知a引物廷申后的序列为编码 链：b.c、,d其中一条是诱变第243位苯丙氯酸的引物，其配对模板与a 的配对模板相同，分析题图bcd序列可知c是诱变第243位苯丙氯酸 的引物，且c引物延中后的序列为编码链，根据a引物5'-端首位GCA 为240位，则c引物5'-端GCC为243位，故据此分析，丙氨酸的密码 子除GCA外，还有GCC。 (4)题千研究目的是通过在酵母菌中表达外源香树脂醇合酶基因N, 可高效生产香树脂醇：由此可知，进一步检测转基因酵母荫发酵得到 的香树脂醇含量并进行比较，可以选出最优的香树脂醇合酶基因的 改造方案专题25 (时间：75分钟 一、选择题：本题共14小题，每小题2分，共28 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符 合题目要求的。 1.(2025·黑吉辽蒙卷·高考真题)科研人员通过 稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素 (C22H23C1N2Og)能力强的菌株，旨在解决金霉 素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述 血 错误的是 A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得 高耐受的菌株 C.配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 2.(2025·辽宁瓦房店市高三检测)秸秆还田可增 加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维 素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究 . 人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释 →涂布平板→挑选菌株”的实验流程。下列叙 a 述错误的是 A.配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节pH B.选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源的培 养基 C.进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种 操作 D.挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌 后再丢弃 3.(2025·江苏·高考真题)某同学利用红叶李果 实制作果醋，图示其操作的简易流程。下列相 关叙述正确的是 ( 果实①果汁②果酒⑨果醋 ② A.果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同 B.过程①中添加适量果胶酶，有利于提高出汁率 C.过程②中，为使菌种充分吸收营养物质，需每 日多次开盖搅拌 D.过程③发酵时会产生大量气泡，需拧松瓶盖 放气 4.(2025·天津南开中学高三检测)下表为培养某 种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误 的是 成分 NaNO K2 HPO KCI MgSO1·7H2O 含量 3g 1 g 0.5g 0.5g 成分 FeSO (CH2O) H2O 青霉素 含量 0.01g 30g 1L 0.1万单位 11 发酵工程 分值：100分) A.依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B.依用途划分，该培养基属于选择培养基 C.培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源 是NaNO3 D.若用该培养基培养纤维素分解菌则应除去 (CH2O),仅添加纤维素就可以 5.(2025·江苏·高考真题)从种植草莓的土壤中 分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分 离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是() A.制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B.将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液 加入平板并涂布 C.连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D.鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并 在室温下长期保存 6.(2025·辽宁实验中学模拟预测)关于微生物的 培养，下列叙述错误的是 A.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯 培养物 B.消毒的对象有操作的空间、操作者的衣着和 手、培养基 C.纯培养可采用平板划线法或稀释涂布平板 法，有时还需要借助选择性培养基 D.平板划线法不能用于微生物的计数，稀释涂 布平板法可用于统计样品中活菌的数目 7.(2025·山东·高考真题)深海淤泥中含有某种 能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细 菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的 生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及 结果如表所示。下列说法正确的是 ( 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 ③ 常压 + ③ 高压 ④ 高压 注：“十”表示有；“一”表示无 A.可用平板划线法对该菌计数 B.制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高 压蒸汽灭菌 C由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培 养基上，该菌可在常压下生长 D.由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为 唯一碳源的培养基上生长 8.(2025·浙江嘉兴·统考二模)在工业发酵中广 泛应用补料分批发酵。补料分批发酵是指在微 生物发酵罐补加新鲜培养基的发酵方式。下列 叙述正确的是 A.与分批发酵相比，补料分批发酵过程中微生 物体内的酶种类变化较小 B.与分批发酵相比，补料分批发酵杂菌污染的 概率更小 C.若采用补料分批发酵生产抗生素，补料量和 补料频率越大，则产量越高 D.由于发酵罐中可以补料，发酵初期只需加入 不经扩大培养的菌种 9.(2025·福建泉州·模拟预测)酸笋是一种以新 鲜竹笋为原料，主要由乳酸菌通过传统发酵制 成的调味品。下列叙述正确的是 () A.竹笋中的纤维素可以作为乳酸菌的主要碳源 B.发酵过程中乳酸积累使发酵液pH先降低后 保持稳定 C.可利用平板划线法对发酵液中的乳酸菌数量 进行检测 D.竹笋经过高压蒸汽灭菌后接种乳酸菌进行发 酵，获得的酸笋品质更高 10.(2025·重庆·三模)为探究某种抗生素对细 菌的选择作用，实验人员在接种了大肠杆菌的 培养基中1号区放置不含抗生素的圆形纸片， 在2、3、4号区放置大小相等且含等量该抗生素 的圆形纸片，如图1所示。培养一段时间后观察 并测量抑菌圈的直径，然后从适宜位置挑取细 菌，并重复上述步骤培养3代，结果如图2所示。 下列有关叙述错误的是 叫 8 43 第一代 0 第一代第二代 第三代 图1 图2 A.培养过程中抑菌圈越大说明大肠杆菌的抗 药性越弱 B.探究抗生素对细菌的选择作用时，宜用平板 划线法接种细菌 C.抗生素的使用导致抗药基因频率升高 D.每代都需计算2、3、4区抑菌圈的平均值，重 复培养时应从抑菌圈边缘挑取细菌 11.(2025·江西新余·模拟预测)以柑橘副产 品一柑橘皮为原料制作果醋，经过液态发酵 工艺制成保健果醋。其制备过程如下：柑橘 皮→清洗→热烫→榨汁→酶解→调整糖度→ 酵母活化→酒精发酵→醋酸发酵→陈酿→过 滤→调配→灭菌→成品，下列相关叙述错误 的是 118 A.将柑橘皮清洗后进行热烫1~2min是为了 除去有害杂菌 B.酵母活化是使酵母菌在氧气充足的条件下 进行大量增殖 C.酒精发酵时，酵母菌的线粒体基质产生了大 量酒精和CO2 D.接种醋酸菌后，应该向发酵体系通入空气， 酒精可转化为醋酸 2.(2025·辽宁沈阳·三模)果醋是一种通过发 酵水果制成的醋类饮品，它不仅保留了水果的 营养价值，还具有独特的风味和保健功能。酿 造果醋可在酿造果酒的基础上进行，这样做的 原因之一是 A.两者所需的微生物相同 B.两者最适发酵温度相同 C.果酒能抑制杂菌污染，提高了果醋产出率 D.果酒发酵后反应条件不变，不用更换装置 3.(2025·江西新余·模拟预测)酱油是一种营 养丰富、风味独特的传统调味品，初见记载于 南宋时期。下面是古法酿造酱油的主要流程， 下列有关黑曲霉和发酵过程的叙述中不正确 的是 ( 黄豆→浸泡清洗→蒸煮→加入黑曲霉发酵→ 发酵池发酵→提取酱油 A.浸泡清洗可以洗去泥沙，蒸煮可以使部分大 豆蛋白变性，有利于发酵 B.酱油制作的原理是蛋白酶将大豆中蛋白质 分解成小分子肽和氨基酸 C.为了防止杂菌污染，蒸煮后的大豆需要立即 加入黑曲霉进行发酵 D.利用产酸量高的黑曲霉还可以通过发酵工 程生产食品添加剂—柠檬酸 4.(2025·安徽合肥·三模)柠檬酸是一种应用 广泛的食品酸度调节剂，工业生产上可通过黑 曲霉的发酵制得，其发酵环节包括：①选育菌 种；②扩大培养；③配制培养基；④灭菌；⑤接 种；⑥发酵等。下列有关说法错误的是() A.①可通过诱变育种获得产酸量高的黑曲霉 B.②可为⑤提供大量的菌种以缩短发酵时间 C.④过程主要依靠添加抗生素提供无菌的 环境 D.⑥过程要及时添加必需的营养成分、控制发 酵条件 二、非选择题：本题共5小题，共72分。 5.(14分)(2025·湖南长沙·模拟预测)啤酒生产 需经过发芽、焙烤、糖化、发酵等主要环节。糖化 主要是将麦芽中的淀粉等有机物水解的过程。 主要工艺流程如图所示，请回答下列问题： :酵母菌种 活化 大麦发芽焙烤一糖化煮沸日接种发酵过滤+包装 (1)焙烤的主要目的是 后续糖化过程发挥作用的酶主要是 (2)啤酒发酵时具有活力的酵母需达到一定数 量，故在菌种活化的过程中，需定时取样，检测 酵母的生长状况。某样品经2次10倍稀释， 再加入等体积的台盼蓝溶液染色后，在25×16 型（每个大方格有25个中方格，每个中方格有 16个小方格，大方格体积为0.1mm3)血细胞 计数板上计数，5个中方格共有200个酵母细 胞，其中呈蓝色的酵母细胞数为80个。则该 样品中活酵母细胞的密度为 个/ml。 (3)改变蛋白酶基因碱基序列，可减少发酵液 中蛋白质的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定 性，从而改善啤酒的品质。以下是某科研小组 的实验： ①已知编码酵母菌蛋白酶A的PEP4基因转 录的非模板链序列如下： 5ATGTTCAGCTTGAAAGCATTATTGCCATTGGCCTTGTTGTGGTCAGCGCCCAATTTGA-3' 编码该酶的RNA的起始密码子对应PEP4 基因的碱基序列位于图中 (填“左”或 “右”)端。 ②Cas9蛋白可在人工合成的RNA序列 (SgRNA)引导下，在选定位点切断相应的 DNA链（如图），在DNA自我连接的修复过程 中产生突变。DNA序列中含NGG(N为任意 碱基)的位点具有较高的编辑效率。 Cas9 ERNA GGN g Immmmmmmr 5' ffffmmm 基因组DNA 上述PEP4序列虚线框中共有 处可 作为Cas9的优选剪切位点。Cas9的剪切位点 在其NGG识别位点的 (填“5”或 “3”)侧。 ③野生型酵母可以水解酪蛋白，从而在菌落周： 围形成透明圈。将Cas9蛋白gRNA等处理的 酵母菌接种在 的固体培养基以初步 筛选PEP4基因突变体，经培养后 的 菌落符合生产要求。 16.(14分)(2025·山西晋城·三模)三环芳 烃—菲(PHE)是一种典型的疏水性有机污染 物，广泛存在于沉积物、水体、土壤和大气中，因 其具有潜在致癌性、致畸性及致突变性，受到人 类广泛关注。实验人员从长期受污染的内河河 流采集表层沉积物，经富集筛选后得到一组 PHE高效降解菌群，并测试其在不同环境条件 下降解PHE的能力。回答下列问题： 119 (1)实验人员先制备富集培养基，然后采用 法灭菌，冷却后再接入沉积物样品。 富集培养基中除含微生物生长所必需的各种 无机盐外，还需要加入氮源，并以 作 为唯一碳源。 (2)经富集培养得到的菌液用 法进行 分离后，实验人员通过比较 的大小来 判断不同菌种的降解能力。 (3)实验人员统计了3种不同种类菌群对PHE 的降解效果，在实验条件下降解效果最好的菌 群是 ,依据是 菌群 PHE浓度/ (mg·L1) 降解率/% 降解时间/d 种类 B1 100 85.48 7.0 B2 100 95.78 2.5 B3 100 87.40 9.0 (4)实验人员进一步测定了不同培养温度下三 种菌群的吸光值OD6(吸光值越大，菌体生物 量越多)，结果如图所示。在图中培养条件下， 三种菌群中对温度耐受性最好的菌群是 。 进一步研究发现，B2在pH为5~ 11时都能够生长，若要测定B2的最适生长 pH的范围，则实验的设计思路是 2.5 2.0 □BI 31.5 ☑B2 1.0 田B3 0.5 20 25 35 40 温度/℃ 17.(14分)(2025·辽宁葫芦岛·一模)农业生产 上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被 降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的 土壤，可按下图示程序选育出能降解该除草剂 的细菌。已知该除草剂（含氮有机物）在水中 溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透 明。请回答下列问题： 无透明 带菌落 长期使用 有透明 该除草剂 带菌落 的土壤 0 (1)制备土壤浸出液时需将浸出液进行稀释处 理，原因是避免菌体浓度 ,难以得到 单菌落。 (2)选育能降解该除草剂细菌的培养基配方无！ 需含有 (选两项)。 A.葡萄糖B.除草剂C.氮源D.刚果红 E.琼脂F.无机盐G.蒸馏水 (3)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并 计数，可采用的接种方法是 将104倍的稀释液分别涂布到3个平板上培 养，每个平板均接种了0.1mL样品。培养后 平板的菌落数分别是210、230、190，则每毫升 土壤溶液中活菌数的理论值为 个。 该统计结果应该低于活菌的实际数目，原因是 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到 的只有 个菌落。 (4)在固体培养基上形成的菌落中，单菌落周 围的透明带越大，其降解除草剂的能力越强。 但该培养基中出现了少数无透明带菌落，据此 可推测这部分微生物具有 能力。 18.(14分)(2025·湖南怀化模拟)资料1据史 料记载，早在公元5世纪魏代古籍中，就有腐 乳生产工艺的记载，到了明代我国就大量加工 腐乳，而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵 食品。清代医学家赵学敏编著的《本草纲目拾 遗》中记述：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟 或酱制者，味咸甘心。” 5 cm 买验 A 特殊处理制成 手机屏蒂马桶按钮 组B 10mL菌悬液 固定面积，用无菌棉取样 手机屏幕马桶按钮 资料2手机现在已经成为人们离不开的通信 和娱乐工具，据传言手机屏幕上的细菌比马桶 按钮上的还要多。某生物兴趣小组为了验证 这一传言是否正确，进行如图所示实验并展示 调查的结果。 请回答下列问题： 据资料1： (1)腐乳制作中有多种微生物参与发酵，其中 主要是 ,其生长的适宜温度为 ℃ (2)“味咸”是因为加了盐，加盐的目的除了调 味以外，还有析出豆腐中的水分，使豆腐块变 硬和 的作用；酒的含量一般控制在 左右，目的是 ,同时使腐乳 具有独特的香味 (3)“甘心”是指在多种微生物的协同作用下， 普通豆腐转变成风味独特的腐乳，其原因是毛 霉等微生物产生的 将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基 酸，将脂肪水解为脂肪酸和甘油。 120 据资料2： (4)该实验需制备培养基，培养基的营养成分 一般包括水、碳源、 等。据图，两实验 组均采用 法接种。 (5)在接种前需要检测培养基是否被污染，对 于固体培养基常采用的检测方法是，将未接种 的培养基在适宜温度下放置适宜的时间， ,则培养基未被污染； 反之，则培养基被污染。 (6)结果表明，手机屏幕和马桶按钮上都存在 多种微生物。虽然两组实验操作均正确且完 全一致，但实验结果截然不同，但是为了保证 健康，手机使用一段时间后，应对手机进行 处理。 9.(16分)(2025·陕西西安·模拟预测)某研究 小组用玻璃发酵罐、充氧泵、回旋式单向阀等 组装了一种果酒、果醋两用发酵装置，如下图1 所示。图2是发酵过程中培养液pH可能的变 化情况。回答下列问题： 排气 软管夹 充气硅胶管 回旋式单向阀 出料口 瓶盖 空气过滤器 发酵罐 充氧泵 0p 不锈钢气泡石 图1 ② 时间 图2 (1)图1中空气过滤器的作用是 ,发酵罐中并不装满发酵液，而是留出约 1/3的空间，是为了 。 利用该装置一般先进行果酒发酵再 进行果醋发酵，原因是 (2)利用图1中装置进行果酒发酵时，软管夹 应 (填“打开”或“关闭”)，每隔一段时 间打开单向阀排气。果酒发酵时，酒精在酵母 菌的 产生。由果酒发酵转 为果醋发酵时，有些方面需要做出调整，例如， 需要 (填“升高”或“降低”)发酵温度， 还需要 (3)图2中，能表示整个发酵过程中pH变化情 况的是曲线 。 菌体代谢过程中的产 物使发酵液pH改变至菌体耐受极限后，即使 营养充足，菌体的生长也会受到抑制，此时可 进行的处理是 (答两点)。