1.1微生物的培养需要适宜条件-第2课时（教学课件）-2025--2026学年高中生物学浙科版（2019）选择性必修三

第一节 微生物的培养需要适宜条件 第一章 发酵工程 第2课时 本章学习目标 1.阐明使用无菌技术可获得纯净的微生物培养物。 2.概述分离和纯化微生物的平板划线法和稀释涂布平板法。 3.举例说明通过调整培养基的配方，可有目的地培养某种微生物。 4.概述测定微生物数量的稀释涂布平板法和显微镜计数法。 5.举例说明发酵工程在医药、食品及其他工农业生产上有重要的应用价值。 纯培养物： 纯培养： 培养物： 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为培养物。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。 获得纯培养物的过程就是纯培养。 配制培养基 灭菌 接种 分离 培养 1 概念 2 纯培养的步骤： 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 配制液体培养基和固体培养基。 目的要求 材料用具 马铃薯，蔗糖，琼脂，天平，试管，烧杯，三角瓶，培养皿，封口膜（或纱布），牛皮纸或报纸，橡皮筋，小刀，高压灭菌锅，玻璃漏斗，移液器等。 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 1.计算：根据配方计算出配制培养基所需的马铃薯、蔗糖和琼脂的用量。 ☆20%马铃薯蔗糖培养基的配方：去皮马铃薯丝（或小块）20g，蔗糖2g，琼脂1.5~2g，水100mL（自然pH）。 方法步骤 酵母菌培养液 提供接种用的酵母菌 配制酵母菌固体培养基 马铃薯 葡萄糖（或蔗糖） 蒸馏水 琼脂 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 2.配制20%马铃薯浸汁：取马铃薯去皮，称取所需量，切成丝或小块，加水至所需量。用酒精灯加热煮沸10min后，用纱布过滤到500mL三角瓶中，按所需量加入蔗糖，待其溶化后补足水至所需体积，摇匀。 方法步骤 去皮 切块 加水 (100mL) 加热煮沸 软烂 马铃薯 纱布过滤 酵母菌 培养基 加水定容(100mL) 称取马铃薯 (20g) 马铃薯块 滤液 加葡萄糖/蔗糖 （2g） 调pH ① ② 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 3.制备斜面、固体和液体培养基。 液体培养基：将部分上述马铃薯浸汁分装到2个50L三角瓶中，每瓶约20mL，封口。 方法步骤 马铃薯浸汁 分装到三角瓶 灭菌 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 斜面培养基：按需要量称取琼脂，将其加入上述500L的三角瓶中，加热熔化后，用玻璃漏斗将培养基分装到2支18mm×180mm的试管中，每支5~8mL。 操作提示：①注意控制好温度，防止培养基提前凝固。②不要让培养基粘在试管口。③试管中的液体量约为试管长度的1/4.试管加棉塞后，用牛皮纸包好。 方法步骤 酵母菌 培养基 琼脂 加热 分装 灭菌、摆成斜面 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 固体培养基：将用于制备斜面培养基后剩余的培养基分装到250L三角瓶中，封口。 将上述固体、液体和斜面培养基放入高压灭菌锅，在1kg/cm2、121℃条件下灭菌20min，灭菌后将斜面培养基摆成斜面。 方法步骤 转移 灭菌15~30min 皮筋勒紧 包牛皮纸 放入高压蒸汽灭菌锅中（100kPa、121℃） 酵母菌培养基 锥形瓶 加棉塞 高压蒸汽灭菌锅 1. 避免因水蒸气凝结而浸湿棉塞。 2. 避免再次污染 4.制作棉塞。 用棉花制作试管棉塞时，要先确定棉塞的长度和粗细。棉塞长度要保证既塞住瓶口（进入瓶口约3~4cm），在瓶口外又要留有-定的长度（约2cm），方便在接种时用无名指、小拇指取下来；棉塞粗细也要适当，以不易脱落为度。 通常的做法：将棉花铺成一个一定厚度的棉花片，其直径是棉塞所需长度的3倍，然后沿直径的平行线对折-一次，转90度后再向上折卷至形成一个棉塞。 方法步骤 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 若放入试管口感觉松，就需要打开已卷好的棉塞，向折叠处再添加棉花。做好的棉塞应上大下小，放入试管口后，周围应有皱褶和缝隙，且容易拔出，但用手提棉塞时，试管又不能掉下来。值得注意的是，由于脱脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞应该使用普通棉花，而不能使用医用的脱脂棉。 方法步骤 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 方法步骤 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 归纳总结配置培养基的一般流程图： 计算、称量 混合溶解 定容 调节PH 分装 灭菌 倒平板等 课堂小结 随堂小测 1.做微生物的纯培养实验时，既要配制适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列说法正确的是(   ) A.培养基上获得的菌落是由单个微生物繁殖形成的 B.培养霉菌时，一般需将培养基的pH调至酸性 C.不含氮源的培养基不能用于微生物培养 D.配制好的培养基采用干热灭菌，以防止杂菌污染 答案：B 解析：微生物培养。做微生物的纯培养实验时，培养基上获得的菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，但是有的菌落可能是由两个或多个细胞连在一起繁殖形成的，A错误；培养霉菌时，一般需将培养基的pH调至酸性，B正确；不含氮源的培养基可以用于固氮微生物的培养，C错误；配制好的培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌，干热灭菌常用于对玻璃器皿、金属用具等耐高温的和需要保持干燥的物品灭菌，D错误。 随堂小测 2.马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯去皮切块，加水煮沸至其软烂，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是(   ) A.应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长 B.除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐 C.氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质 D.加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶 答案：D 解析：马铃薯琼脂培养基用于真菌筛选，加入链霉素可抑制细菌生长，避免细菌干扰真菌筛选，A正确；马铃薯浸出液中除淀粉(碳源)外，还含有蛋白质(提供氮源)、矿物质(提供无机盐)等，B正确；氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸(含氮碱基)、蛋白质(氨基酸)等含氮物质，C正确；能产生淀粉酶的菌落会分解周围的淀粉，加入碘液后，该区域因淀粉被分解不会变蓝，周围未分解区域呈蓝色，因此周围为蓝色的菌落不能产生淀粉酶，D错误。故选D。 随堂小测 3.娄底市某中学为宣传正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险进行了相关实验。实验中将牛肉膏蛋白胨培养基置于距正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，再进行微生物培养和观察。下列叙述错误的是(   ) A.实验中牛肉膏蛋白胨应为固体培养基，并进行严格灭菌 B.实验者对培养基进行处理后，放入20℃恒温培养箱中培养1～2d C.实验中还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照 D.培养结束后可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步区分不同种的微生物 答案：B 解析：实验中牛肉膏蛋白胨培养基应为固体培养基，为了防止其他微生物的干扰，应进行严格灭菌处理，A正确；分析题意可知，本实验是为了确定正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，而人体的体温约为37℃，因此应设置与人体体温基本相同的温度，即在37℃恒温培养箱中培养1～2d，B错误；为宣传正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，本实验的实验组为佩戴口罩对着培养基讲话1min或咳嗽2次，实验中还应该设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照，C正确；不同微生物的菌落具有其特殊的特征，在实验培养结束后，可根据菌落的形状、大小、色泽等特征初步区分不同种的微生物，D正确。故选B。 Multimedia Cloud Transcode (cloud.baidu.com) $