单元检测(十五) 基因工程(含生物技术安全性和伦理问题)-【衡水真题密卷】2025年高考生物单元过关检测（贵甘滇晋豫陕川青宁蒙新藏A版）

·生物学· 20.(1)C酶、Cx酶和葡萄糖苷酶刚果红染色法 (2)选择培养（增加纤维素分解菌的数量）能 利用刚果红的微生物也能出现透明圈（能利用 淀粉的微生物也能出现透明圈，因为淀粉也能 与刚果红形成红色复合物》 (3)纤维素葡萄糖能被细菌利用，影响实验 结果 (4)增加土壤肥力，提高肥效，减少环境污染 【解析】(1)纤维素分解菌可以合成和分泌纤雄 素酶，纤维素酶是一种复合酶，其组分至少有C 酶、CX酶和萄萄糖苷酶。对纤维素分解菌进行 初步筛选后，可通过刚果红柒色法进行进一步 鉴定，菌落周围出现透明图的即为纤维素分 解蓝。 (2)培养基A中含有的滤纸作为唯一碳源，滤纸 的主要成分是纤雏素，用该培养基培养的目的 是增加纤雏素分解菌的数量，相当于选择培养。 培养基C中长出的葡落不一定都能分解纤雏 素，能利用刚果红的微生物也能出现透明图（能 利用淀粉的微生物也能出现透明圈，因为淀粉 也能与刚果红形成红色复合物)， (3)为了比较几种纤维素分解菌的分解能力，检 测每种菌种的发酵液中“纤维素”含量的变化比 较准确，因为纤维素分解过程中会产生很多中 间产物，未必都是终产物葡萄糖，因此检测纤维 素含量较准确，且葡萄糖会被纤维素分解菌利 用，进而影响检测效果。 (4)筛选出的菌株用于堆肥后，肥料可用于还 2024一2025学年度单元过关检 (含生物技术安 一、选择题 l.D【解析】Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形 成复合体，复合体中的sgRNA与目的基因按照 碱基互补配对原则特异性结合，Cas9蛋白相当于 限制酶，Cs9蛋白结合到相应位置并剪切DNA, 最终实现对靶基因序列的编辑；复合体在sgRNA 引导下结合目的基因，Cs9蛋白切割目的基因造 成双链断裂，细胞在修复断裂的DNA时会随机 插入、副除或替换部分碱基对：通过基因编辑技 术引起的变异属于基因突变。 *1 参考答案及解析 田，其意义是增加土壤肥力，提高了肥效，减少 了环境污染。 21.(1)获得能产生特定（治疗乳腺癌的）抗体的B 淋巴细胞 (2)动物细胞的融合一定的流动性 (3)筛选杂交瘤细胞能大量增殖，又能产生特 定抗体 (4)单克隆抗体能使药物精准地作用于乳腺癌 (靶)细胞，避免其他细胞受损 (5)由单一B淋巴（或杂交瘤）细胞克隆产生的、 只识别某一特定抗原的特异性抗体（或由一种B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的单一杂交瘤 细胞产生的特异性抗体) 【解析】(1)向小鼠注射特定的抗原应取自人的 乳腺癌细胞，目的是使小鼠体内能产生获得能 产生特定（治疗乳腺癌的）抗体的B淋巴细胞。 (2)步骤①是指动物细胞的融合，实现该过程依 赖于细胞膜具有一定的流动性的结构特点。 (3)步骤②是指筛选杂交瘤细胞，经步骤③筛选 得到的杂交瘤细胞具有的特点是能大量增殖， 又能产生特定抗体。 (4)ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因 是单克隆抗体能使药物精准地作用于乳腺癌 (靶)细胞，避免其他细胞受损。 (5)单克隆抗体是指由单一B淋巴（或杂交瘤） 细胞克隆产生的、只识别某一特定抗原的特异 性抗体（或由一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 合得到的单一杂交瘤细胞产生的特异性抗体。 测（十五）生物学·基因工程 性和伦理问题)】 2.A【解析】PCR是一项体外扩增DNA分子的技 术，可用于目的基因的获取及扩增，故可通过 PCR的方法获取GM-CSF基因；构建GM-CSF 基因表达载体是基因工程的核心，该过程需要限 制酶和DNA连接酶：基因表达栽体上的复制原 点可以启动复制过程，启动子和终止子可以调控 GM-CSF基因的表达：大肠杆蓝属于原核生物， 将目的基因导入原核生物的方法是Ca+处理法 (感受态细胞法)，将目的基因导入动物细胞最有 效的方法是显微注射法。 1A 衡水真题密卷 3.A【解析】编码链中含有非编码区，转录后的 mRNA序列短于图中DNA序列；若目的蛋白中 只保留组氨酸标签，选择酶切位点时优先考虑 NdeI和XhoI(或AaI),以去除T7标签 的基因序列，同时保留NdeI识别序列中对应的 起始密码：标簦下游TGA对应的密码子为 UGA,为终止密码子，不编码氯基酸：扩增导入成 功的日的基因时，以组氨酸标签的基因序列为模 板设计下游引物，由于组氨酸标签由6个连续的 组氨酸构成，引物可能和图中组氨酸标签左侧基 因序列结合，导致获得的序列可能比预期的序 列短。 4,B【解析】DNA粗提取与鉴定的实验中，应选择 富含DNA的材料，洋葱、莱花、香蕉、藏莱和猪肝 均可作为提取DNA的材料：离心研磨液的目的是 加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大 杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA:过 滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA 降解；去杂质时离心转速为1500r/min析出时离 r心转速为100000r/min,故析出时的离心转速明 显高于去杂质时。 5.B【解析】将重组DNA分子导入细菌B之前， 一般要先用氯化钙处理细胞，农杆菌转化法是将 重组DNA分子导入植物细胞时常用的方法，由 于重组质粒中的抗四环素基因被破坏，所以能在 含有四环素的培养基上生长的是导入普通质粒 A的细菌；质粒A中含有抗四环素基因和抗氨苄 青霉素基因，而重组质粒中含抗氨苄青霉素基 因，则含有氨苄青霉素的培养基上能生长的是导 入了质粒A或重组质粒的细菌，而其他的细菌则 不能生长：人的生长激素基因成功表达的标志是 受体细胞能产生出人的生长激素。 6.C【解析】相对分子质量大小会影响物质在电泳 时的迁移速率，DNA片段相对分子质量越大，迁 移就越慢，分子量越小，迁移速度越快：为了便于 对分离后的DNA片段进行检测，在凝胶制备中 加入核酸染料，能够与DNA分子结合：将电泳缓 冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1mm 为宜；琼脂糖凝股电泳可根据DNA分子大小、电 荷等对DNA混合物进行分离、鉴定。 7.B【解析】LTB和ST1基因能够融合的关键是 P2和P3两种引物的部分区域能发生碱基互补 配对，碱基互补配对区城的碱基之间能够重合在 一起，从而将两个基因融合在一起：DNA的合成 1A 来 单元过关检测 方向是从子链的5端自3'端延仲的，因此PCR 扩增时，完整的引物P2、P3应位于子链的5端才 能保证扩增顺利进行：②过程不需要加入引物， 两条母链的起始段位置的碱基序列即为引物，可 以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶提供3 端：电泳时DNA的迁移速率主要受核酸片段长 度影响，核酸片段长度越长迁移速率越慢， LTB一ST1融合基因相对LTB,ST1基因核酸片 段长度大，故最可能是图2中的条带3。 8.B【解析】进行PCR扩增需要的酶是耐高温的 DNA聚合酶，不需要解旋酶：欲将某功能蛋白的 结构改变，应设计诱变引物，该过程属于蛋白质 工程：在PCR1中获得的大引物是指以诱变引物 延仲得到的DNA链为模板：PCR子链的延仲过 程都是从5开始的，引物与产物互补配对，因此 都从引物的3'端开始的。 9.D【解析】要想获得抗褐变的转基因苹果，可选 抑制PPO表达的基因作为目的基因，而卡那雾 素抗性基因为标记基因：过程①是目的基因表达 载体的构建，是基因工程的核心步骤，该过程中 至少需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶的参 与；在步骤②之前，需要用次氯酸钠溶液对苹果 撒叶碎片进行消毒处理，从而保证脱分化过程正 常进行：为了评估目的基因对抑制苹果褐变的效 采，可与导入不含目的基因质粒的植株作对照， 本实验设计的目的是排除质粒导入本身对实验 结果的影响，同时也能检测导入目的基因的 效果。 10.A【解析】蛋白质工程的目的是根据人们对蛋 白质的功能需求改造或制造蛋白质，理论基础 是蛋白质的结构与功能相适应；比较半胱氨酸 和丝氨酸的密码子，若第二个碱基由G替换为 C,就可引起氨基酸的替换，所以基因上发生定 点突变(CG),可实现基因的改造；该蛋白质工 程的技术思路与中心法则相反：改造后的干扰 素由于氨基酸序列改变，导致结构改变，从而延 长体外保存时间，但其仍具有干扰病毒复制的 功能，即政造后的干扰素与天然干扰素的功能 不是完全不同。 11.B【解析】DNA子链合成的方向为5'端到3 端，因此要通过已知序列设计引物对未知序列 进行扩增应选择引物1和引物4进行PCR扩 增；GC碱基含量越高，碱基对间氢键的含量越 多，退火的温度越高：PCR产物是包含所有已知 序列和未知序列的链状DNA分子，整个过程需 用到限制酶，DNA连接酶和耐高温DNA聚合 酶，不需要逆转录酶。 ·生物学· 12.C【解析】当温度超过90℃时，DNA分子发生 变性，双链DNA解聚为单链，PCR时，一般热 变性温度设置在94℃：在分子杂交时，形成杂 合双链区的部位越多，DNA碱基序列的一致性 越高，说明在生物进化过程中，DNA碱基序列 发生的变化越小，因此亲镣关系越近。所以两 个近缘物种生物的DNA分子之间进行杂交，形 成的杂合双链区较多，要扩增出目的基因，需要 根据DNA的两条链分别设计引物，所以设计两 种DNA引物分别与DNA的两条链结合，经 PCR技术可大量扩增目的基因：DNA分子杂交 后，杂合双链区（碱基互补配对）一条链的序列 是5'-GCATCT-3',另一条链的序列是3 CGTAGA-5 13.B【解析】由图可知，当仅用一种限制酶切割载 体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载 体最有可能为0.8kb或0.8kb倍数的环状 DNA分子：当用一种限制酶切割栽体时，严生 的DNA片段等长，而用两种限制酶同时切割 时，产生两种长度的DNA片段，所以两种限制 酶在该载体上都有酶切位，点：用两种限制酶同 时切割载体时，产生0.6kb和0,2kb两种长度 的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点最短 相距0.2kb:限制酶切割载体时直接破坏的是 作用位，点上两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二 酯键。 14.A【解析】利用PCR技术扩增目的基因需依 次经过高温变性、低温复性、中温延伸阶段：构 建重组质粒时用两种限制性核酸内切酶进行酶 切，可以防止目的基因的反向连接和质粒的自 身环化：常用农杆菌作为受体细胞，原因是繁殖 速度快、基因组结构简单：农杆菌中Ti质粒上 的TDNA能转移到植物细胞，并将目的基周整 合到宿主细胞染色体的DNA上，所以农杆菌中 的Ti质粒可作为基因工程的载体。 15.A【解析】蛋白质工程的基本途径是：从预期 的蛋白质功能出发·设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列·找到相对应的脱氧核 苷酸序列（基固）：通过基因定点突变技术可对 LIMK1蛋白基因进行碱基的替换；设计蛋白质 LIMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新 的蛋白质；蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白 质工程是一项难度很大的工程。 1 参考答案及解析 16.D【解析】转基因产品是指利用基因工程技术 而获得的生物制品，故道过转基因育种，按照人 们的需要，可增加或消除原有生物品种的某些 性状；在基因表达载体上，除了有目的基因、启 动子、终止子等外，还需要标记基因，故转基因 食品风险评估时还需考虑标记基因的安全性问 题：转基因作物所携带的外源基因在使得作物 高产的同时，也可能会向自然界扩散，从而打破 自然界原有的物种平衡，严格选择种植区城可 减少转基因作物发生外源基因扩散的可能性： 若有证据表明某种转基因食品是有害的，可以 禁止相关食品生产，但也可以利用该转基因食 品进行进一步的科学研究，而不是全面禁止。 二、非选择题 17.(1)引物EcoR I、HindⅢ (2)③④⑥ (3)RNA聚合IPTG (4)(1一实验组细胞数/对照组细胞数)×100% 不同乳腺癌细胞Her2基因的表达水平不同，进 人癌细胞的Dim-endo(m)融合蛋白的数量有差 异；Dim-endo(m)融合蛋白中的endo(m)对不 同乳腺癌细胞的杀伤力不同) (5)穿透力强，作用持久，免疫原性弱 【解析】(I)DNA聚合酶要廷仲DNA链，必须 要有一个3'端的羟基，没有这个结构，DNA聚 合酶无法合成DNA。引物为DNA聚合酶提供 3'端羟基，使得PCR继续，因此必须选用不同的 引物，保证它们能够复制：要从含有endo(m)基 因的DNA分子中获得endo(m)基因并保留突 变位，点，只能选用EcoR I、HindⅢ来切割，同 时将endo(m)基因椅入质粒时需要保留KanR、 LacI等，所以选用EcoR I、HindⅢ这两种限 制酶来处理DNA分子和质粒； (2)根据引物的作用及特点，如果突变1F为引 物①，则突变1R、突变2F、突变2R的引物分别 为③、④、⑥； (3)由题千可知，当调节基因LacI的表达产物 能和操纵基因Lac0结合抑制Dim-endo(m)的 转录，而转录过程需要RNA聚合酶来催化，因 此LacI的表达产物能和操纵基因Lac0结合， 阻止RNA聚合酶的移动而阻止转录过程；由题 千可知，IPTG能与LacI的表达产物结合，诱 导目的基因的表达，因此当菌株扩大培养到一 定数量后在培养基中加入IPTG能促进Dim- endo(m)持续表达； 1A 衡水真题密卷 (4)抑制率一（对照组平均细胞数一实脸组平 均细胞数)/对照组平均知胞数×100%，即抑 制率=(1一实验组平均细胞数/对照组平均细 胞数)×100%： 由题意可知，不同乳腺癌细胞的Her2基因表达 有差异，因此用不同浓度的Dim-emdo(m)融合 蛋白处理乳腺癌细胞后融合的知胞数量不相 同，从而对不同乳腺癌知胞的抑制率不同： (5)纳米抗体内部存在更多的二硫键，其结构更 稳定，作用的时间更长：钠米抗体是传统抗体的 重链可变区片段，意味着钠米抗体与传统抗体 同源性比较近，它的免疫原性比较低：钠米抗体 只有传统抗体的1/10，分子更小，具有较强的穿 透力：钠米抗体可以在摄生物系统（如细菌、酵 母菌、真菌)中大量表达，并且可以通过展示文 库中快速筛选，使得钠米抗体具备更低的生产 成本优势。 18.(1)SalI和NotI显微注射法 (2)维持pH值胰蛋白酶 (3)MⅡ/减数第二次分裂中细胞融合 (4)超数排卵同期发情 (5)①正常羊乳清②差/弱 (6)ABC 【解析】(1)对目的基因进行切割时，通常选用 两种不同的限制酶，分析题图所给的hLF乳腺 表达载体，从中获取目的基因并使之成功表达 生产hLF,使用的限制酶最佳是SalI和NotI, XhoI和NheI这两种限制酶具有两处可以作 用的切割位点，不宜选用。将目的基因导入成 纤雏细胞（动物细胞中一般应用的技术是显微 注射法。 (2)成纤雏细胞培养液中添加HPO,、HPO 和HCO?的作用是雏持pH值。在导入目的基 因之前，成纤维细胞需用胰蛋白酶（或胶原蛋白 酶)处理使之分散成单个细胞。 (3)在核移植过程中，先将采集到的卵母细胞体 外培养到MⅡ（减数第二次分裂中）期后去核， 再将成纤雏细胞从切口注射到卵周隙内，使用 电刺激或化学方法促进细胞融合，形成重构胚。 (4)在获取卵母细胞和胚胎移枝前要注射促卵 泡生成激素或氣前列烯醇等性激素。对供卵母 羊注射促卵泡生成激素等激素，其目的是超数 排卵，获得更多的卵细胞：对受体母羊（代孕羊） 注射氯前列烯醇，其目的是同期发情，使得受供 体处于相同的生理状态。 1A 单元过关检测 (5)①为检脸乳腺生物反应器是否成功，组别4 滤纸上的物质是正常羊乳清（浓缩20倍）。 ②从表格数据可知，与人的hLF相比，转基因 羊乳清（浓缩20倍）实验组的抑菌图直径更 小，说明乳腺生物反应器生产的LF抑菌效 采差（弱）。 (6)为确保转基因产品的安全性，该食品公司后 阶段应进行的工作是实施转基因产品标识、进 行食用安全性评估以及检测转基围羊乳成分， 由于羊乳为外分泌液，鉴定基因是否稳定透传 不影响其产品，ABC正确，D错误。 19.(1)需要能量、需要载体 (2)D逆转录②47③SpeI、EcoR I XbaI、EcoR I (3)将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内 Na+浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白SOS1含量 增多，SOS1通过SOS信号通路将胞质内的 Na过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na 的利用 【解析】(1)由题千信息“在高于胞内Na浓度 的环境下，SOS1通过SOS信号通路与胞质内 Na+结合并将其排出细胞外”可知，植物利用 SOS信号通路将Nat排出细胞外是逆浓度梯度 的运输，因此运输方式为主动运输，特点是需要 转运蛋白，需要能量。 (2)①为获得编码SOS1蛋白的基因，可提取野 生型水稻总RNA,通过递转录获得模板DNA, 再经PCR获得SOS1基因片段. ②SOS1基因编码序列中A十T含量占53%，则 G+C含量为47%。 ③由图可知，荧光蛋白基因内部存在SI和 BamH I两种限制酶切序列，因此对载体酶切 时不能选择这两种酶，并且不能选择限制酶 SmaI,否则会导致载体中SOS1基因和绿色 荧光蛋白基因不能正确表达，故选择XbaI和 EcoR I两种限制酶对栽体酶切，由于SOS】基 因内部有XbaI的识别序列，故不能选择限制 酶XbaI对目的基因酶切，但需要目的基因有 与载体相同的黏性末端，故可在SOS1基因两 端分别添加SpeI和EcoR I两种限制酶的识 别序列。 (3)鉴定水稻抗盐能力是否增强，采取的操作是 将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内Na 浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 ·生物学· (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白S0S1含量 增多，SOS1通过SOS信号通路与胞质内的 Na过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na 的利用。 20.(1)限制酶切割位点便于重组DNA分子的 筛选（重组质粒，重组载体、目的基因都对）能 将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞， 并且将其整合到该细胞的染色体DNA上 (2)保证OsBIK1基因编码的蛋白和NLuc基因 片段编码的蛋白形成融合蛋白3'端 (3)HA OsBIK1+HA+NLuc (4)OsBIK1蛋白和OsXLG2蛋白有相互作用 【解析】(1)质粒戴体有一至多个限制酶切制位 点，供外源DNA片较梅入其中：表达载体1和2 上含有的卡那霉素抗性基因是标记基因，可便 于重组DNA分子的筛选。农杆菌侵柒烟草后， 其Ti质粒上的T-DNA能转移到被侵染的细 胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上， 使其随着染色体的复制而复制。 (2)构建表达载体1的目的是将OsBIK1-HA NLuC三个基因连在一起共同表达，因此需要使 其共同受到相同的启动子和终止子的调控，所 以构建重组质粒1时，需要把OsBIK1基因的对 应终止密码子的3个碱基去除，以保证OsBIK1 基因编码的蛋白和NLuC基因片段编码的蛋白 形成融合蛋白。已知编码链为转录时所用模板 链的互补链，编码链和模板链反向螺旋在一起， 而转录时RNA聚合酶是从DNA模板链的3'端 向5'端移动，因此图中HA编码序列插入到 OsBIK1基固编码链的3'端，才能使转录时 OsBIK1-HA两个基因同时转录， (3)根据图2可知，用抗Luc蛋白抗体分别检测 表达载体1和2融合蛋白表达情况，会出现条带 1和条带2，图2中最后一幅图出现的是条带1， 且已知图中HA为标签蛋白的编码序列，可用 于目的蛋白的检测、示踪等，因此可优先选用抗 HA蛋白抗体进一步区分条带1为OsBIK1+ ·19 参考答案及解析 HA十NLuc融合蛋白。 (4)将分别含有表达载体1和2的农杆菌菌液共 同注射到含有荧光素的烟草叶片后可检测到荧 光，说明OsBIK1蛋白和OsXLG2蛋白有相互 作用，使其组装形成了荧光素酶并分解荧光素 发出荧光。 21.(1)b-COOH (2)DC@Bam HI、NotI③引物2引物 1不含有Bam H I酶切位点、引物3方向错误 无法扩增、引物4后面6个碱基无法与模板 链配对15 (3)在光敏色素作用下A系植株选择启动子1 表达出蛋白质X① 【解析】(1)分析题图可知，X①和X②蛋白质b 末端的氨基酸序列是相同，由于肽链的合成方 向为氨基端到骏基端，故b末端对应的是蛋白 质的一COOH末端。 (2)①分析题图1可知，GFP基因片段应插入到 基因X内启动子②的下游，即字母C表示的特 定位置，从而经过转录、翻译得到目的产物。 ②限制酶能识别DNA分子中特定核苷酸序列， 并使每一条链中特定部位的磷酸二酯健断开， 分析题图2可知，应选择表中的Bam HI和 NotI将GFP基因从染色体上切割下来。 ③引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序 列互补配对的短单链核酸。由于引物1不含有 Bam H I酶切位，点、引物3方向错误无法扩增、 引物4后面6个碱基无法与模板链配对，故应选 择引物2用于a侧进行PCR扩增；每次PCR循 环后，目的基因的量可以增加一倍，故在PCR仪 中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数 为15。 (3)分析袁中数据可知，与去除产生光敏色素的 基因后得到B系植株相比，A系植物能对红光 刺激作出应答被激活，原因为在光敏色素作用 下A系植株选择启动子1表达出蛋白质X①。 1A2024一2025学年度单元过关检测（十五）】 生物学·基因工程 (含生物技术安全性和伦理问题】 (考试时同75分钟，总分100分) 一、速择题：本题共16小题，每小题3分，共棒分。每小只有一个选项符合题日要求。 周号12845678910111218141516 容案 1,C求1P惯/9是一种基因编辑技术，C9蛋白能与人工设计 的RNA形成复合体（如图》.利用度技术可以附DNA连行 一系列的定向攻造，下列叙述错视的是 亚亚 机复 ACa以蛋白属于限制牌，能切剂日的基因 延 B绥RNA具有围与口的基因发生就琴互补配对的结构 C基因编楫技术能够定点精人，刚障或替换部分碱基对 D,通过基因编朝技术引起的变异属于基因重组 2.粒细家一旦厚细鼠落荆徽因子(GMC3F)可以增加白卸酸的数量。某料研团风将人 的GM-CSP基因导人大肠杆萧可大量生产GM-CSP,并用于临家上化较骨之日的肿帽 治疗。下列复连正确的是 t> A.可通过PC求的方法获取人的GC3F某因 且构建GM-CSF表达载体著要限制阵和DNA黎合隔 G,基因表达载体上的复制氟点可焉控GMC5F基因的表达 D.可道过是微注射的方达算GM-CSF基因导人大新杆 3.为方腰韩化蛋白质，构建表送载体时可将日的基因序列与标签基因序列连接，表达含有 标签的盈合蛋白。如图为某质粒编码醚（转录时的非模服链）的郑分序列。下列额述相 误的是 T作复：d十量划短构硬n念，满标与可现情合P就体，用十垂山言生成地先 单元过关检测{十玉】生物学第1面（热12页引 衡水真 A,转漆后的mRNA序列与图中DNA序列一数，仪于替换为U 且，若日韵蛋白中只保霸组氨酸标签，选释衡切位点时优先考虑N山I和X加（或AaD C,若目的蛋白中保图了组氨酸标签，附译时标鉴下静的基因序列不编码氨基酸 山以组氯酸标签的基因序列授计下游引将，扩端时我裂的序列可健比预期的序列园 4,“DNA屈靓取与整定”约实验梦深是：研密·去象质·析尚·鉴定。下列说法铅误 的是 A,洋怎，桌花，香属，覆来和然肝购可作为提章DNA的材料 B.对研路液进行高心是为了知速DNA的沉淀 C,注德液沉浸过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 D析出时韵离心转速明显高于去杂霞时的离心转违 5,如图是育人的生长素基因导人细画B内削各“工程菌的过程。下列说法正确的是《) 人的长国 佳：■环家调 天面动一伍化面经和圆 A,将重组质粒导入蟹窗B常用的方法是农杆菌转化法 B.将完成导人后的国菌涂布在含有国环常的培零基上，能生长约只有导人了废粒A的阳菌 C.贝有导入了重组质粒的留西在常有氢苄青霉素的培养基上生长 D.人的生长敬常基西成功表达的标志是受体解胞中合有人的生长融素基因 (NA琼听铸质胶电袜的分予溶效应是指作为支持介质的琼西德，具有网络结构，使大分子物 质在通过时受群较大用力，情此分离不同大小的DNA片段。下列说法情误的是《) A.DNA片经相对分子质量越大，迁移就越慢 B.餐胶制脊中加人核酸果料能与DNA分子结合，用于分离品DNA片程的检测 C将电泳缓冲液缸入电沫情中，电沫缓冲液不能没过凝胶 D.琼所核凝胶电沫可用于分离，鉴定DNA分千的混合物 花卷 单元过关松测（十五）生物学第2蓝（共12西） IA 7,重组求枝术是将两个不同的DNA在接成为一个新DNA分子，某科研小里从猪源大 畅杆商中扩州算到LTB和sT两个基因片段，利用重组CR技术构建了1TB一STI融 合基国，制备过程如图1，R扩增后的电袜结是如图2，下列说法错误的是 111 20p 2 住一有进孩L.s城得的BNA片日 11 2 A.LTB和ST1基因能第雅合的关城是引物P2,P3的部分区域能进行碱基五补配对 头R扩增时，凳整的引物P2,P招应位于子链的3增才能保证节增顺利进行 C图1中②过程的反应体系中不用氯外帮人引物 D.LB一T1融合基因最可能是图2中的条带3 8.瑰典科学家斯万特·帕博凭督对已灭施古人类甚因组和人类迷化的发现荣获2022年 诺见尔奖生理学或医竿奖。德在所究过程中使用了大引物 每物动密线引自 P心深构健定点爽安，其过程如图。下列氢述正确约是《)和 诗要物子 A进行PC求扩增需要的南有解旋南和耐高图的DNA聚合南 大物 弘利用诚技术将某功能蛋白的结构皮变属手蛋白重工程 2 C,在PCRI中获得的大引物是瘤以引物1延伸得到的DNA 链为模板 D,PCR子链的随伸过程布是从引物的5'帽开始的 马，留通零果警满全同，草果初开后不久顾色便会加深，这种观象称为“褐变“。湖变是南位下 细胞的多衡氧化隔(O)解化收于液泡中的多卧类物质生反榨色色素所致，温此，科罚 人场货有出了抗帽变的转基因草果，其工作速程如图。下列叙述正确的是 转用插叶 韩某网学丰同苗 止：A内水卡等着素瓦行某因 1A 单元过关检测{十玉】坐物学第3面（热12面1 衡水直 A,如若想获视抗湖变的转基因半果，则日的据因可选卡那霉素抗性燕阴成即制PPO表 齿的基国 且，过程①是慧因工程的核心多深，至少需要限制酶和DNA黎合衡的参与 C.在步章色之前，需要用次氯酿钠溶液对苹果嫩叶碎片进行灭薰处理 D为了泽结目的基因对抑制撑暴畅变的效果，可与导人不含目的基因质粒的植棒作对蝇 10,干就素是一种其有干找病毒复制作用的附蛋白，在陆床上被广泛用于治疗病毒感桑性恢病。 如果将于扰素分子上的一个率能复酸《密码子：UGU,C)变域盆氢酸（密明子：U汇U、 .CA,U),就可以廷长干抚素的体外限存时同。下列叙述蜡误的是 A.对干扰素的设计和皮壶，以其因的结构和功能的关系为基 B,对干扰素赫因进行定点突变{C-一G》米实现就基的替换 C.核蛋白面工程的技术惑路与中心法则相反 D改壶后的干优素的功能与天然干扰素不是完全不同 11,反向P℃R是一种看过已加序列设计引物对来知序列进行扩增的被术，其过程如图 下列叙述正确的是 五树物 未国序到 已知甲判 本序刺 +家P 与4TN长如鲜料 经最I前环冒的NA登子 开化的N4分子 ,1件分与鱼压给NA陆互补尼行 A.应选择明物2和明物3进行PR扩增 B.设计的引物中GC碱基含量越高，退火的皇度越高 C.CR产物是包含所有已知如序列和未如序列的环秋DNA分子 D整个过整用到限割南.DNA盗接南，耐高面DNA聚合南及遂转梁南 12,在NA分子输交的过程中，两种生物DNA单链的互补城基会结合在一起，形成条合 双卧区：在段有互补碱基序列的图位，仍然是再条游离约单篮，如国新承。下列叙迷正 确的是 A.在DNA分子杂交之，可在50℃的条 料下使DNA变生解聚为单链 有种A的NA B.丙个近缘物种生物的DNA分予之间进 行杂交，彩成的意合双甚区较少 加合气的队 C,酒过设计两种DNA引物分剩与DNA 的两条甚结合，经PCR技术可大量扩墙目的基国 D象合夏：区一条链的序列是5'GCATCT-3',另一条德的序列是3'CGUAGA-5 密卷 单元过关松测（十五）生物学第4蓝（共12西） 13,基因工程中需使用特定的限制，切制基因候体，以复其与耳的禁因连接形成基因表达 载体。研究人员将相同的基因载体分组并进行相应翻切处理（如表），其中凤制酶H 和H2讯期序列不同。各组基因载体经南切处理后，进行琼翻德凝胶电这检测，实验结 果如图所示。下兴说法正病的是 (Y 分里附应角切处理 M 甲 限制制精1 恩刻侧H2 内表副隋H1+H竖 02h A.该基因载体为0,8kb的环状DNA分子 品限制酶H1与H2在该程体上都有识别和切剂位点 C限割酶H1与H2在宽载体上的前句位点最显相胞0.4kb D.限制南作用于该我体时会直接导政氢镭和磷程二陆健的断器 14,如图是利用基两工程找术培育新品种水屑 青川的林利 的廊分该程，序号代表操作过程。下列氧 ONA片度 述带误的是 (》 含者情 A.利用CR技术扩增日的基国需依次轻 价议 过变性.延神复性阶卧夏 民为防止日的基国自身环化，过程心最好使用同种限制南 C.常用农杆薰作为受体细惠，原因是紫殖魂度快，基因组结构简单 D重里质乾上的T-DNA能将目的基齿整合到宿主细禁色体上 15.榨经科学家授计了一种合成蛋白质MK1(结合AP并璃酸化其起标的蛋白版)，电 改兽老年认知思化人群的记起功能。下列叙述储误的是 A.设计蛋白质1MK1时，先设计找基因的戴基序列再推测其功能 以通过基因定点澳度技术可对LMK1蛋白基因进行碱基的替换 C.设计蛋白质1山MK1科用的枝术是质白爱工程，其可制意新的蛋白质 D蛋白质的高贤结构十分复杂，故蛋白质工程晶一项度很大的工程 单元过关检测{十五】集物学第3面（热12页」 衡水直 ]6,转蒸因产品是指科用燕因工程技术我得的生物制品，其安全性同圆一直是大众美往和 争论的热点，下列叙述墙误的是 A,通过转蒸因育种可增加或消除原有生物品种的某些性状 B.转基因食品风整评估时还委考虑标记基因的安全性问匙 C,严格这择种植区域可碳少转辑因作物发生外源基因扩赋韵可能性 D只鬟有证据表明某种转基因食品有害，就成全面禁止转基因找术在食品上的庭用 二，非进泽丽：本愿黄5小愿，黄52分。 17,(11分)重叠廷伸CR定点突变过程分为两步，如图1。内皮抑素能适过排翻血管内皮 艇脑的增确和座管的生成限制种牌细购的生长，研究人员利用重叠延伸CR定点突 交技求将内皮抑索基因®0改查为雀迁人游细粗并有较备物磨作用的突交基因d0 (w),并再与抗2《人表发生长国子受体2)的纳米抗体基因Dm形成融合基因 Dmmo(m),导人大肠仟调并表达，主要过程如图2，其中KumR表示常那需素抗性 某圆，调节甚因L21的表坊产物能和操线基因L@0结合抑解帮因的表达，PTG能 与11的表达产物结合，诱导日的基因的表达，何答下列问赐， A笑量直 空 Anl I ▣ 安边 m-euh (ar) 批保某风 月动子a 网梦精因云上 面 题密卷 单元过关检测（十五）生物学第6露（共12面） 1A (1)图1中CR和风R2配制反应体系时需加入不同的，图2中构重雄 爱粒时使用的限制偶是 (2)下列①一⑤是相关引物，其中突变1F为引物①，则突变1R、臭变2F,突变2R分别 为 D5-GCGGCATGOGGGOCGATOGOGTGACTGCCAGTGCTGTCC-3 2s-COGGAATTCCATATGOGOCGOCGCCCCCGCCGCCGCCGCCGC-3 S-GGACAGCACTGGCAGTCACGCGATOGCOCCGCATGOCGC-3 O5-GTGGCATGGCTCGGACGCAAACGGGOGCAGGCTG-3' 5'-ATTTCTCGAGTTACTTGGAGGCAGTCATGAAGCTG-3 O5'-CAGOCTGCGCCOGTTTGCGTCCGAGCCATGCCAC-3 《3》导入重组质粒的大函杆商由于到节基因L1的表站产物能和领线基因La0结 合：阻止南的移动，每制Dmd加(m)的转来。当黄株扩大培养到一定登 量后在培养基中想人便Dd和(m)持按表达。 ()研究表明，乳服墙常出残比2甚因的高表达（不同乳藤墙用胞的表达有差异），因此 r2藏认为是乳取腐校测和前疗的重要那点，研究人员用不同浓度Dmb(出) 融合蛋白处理乳腺陪蟹胞KB吸3，MDA231,MCF?和正常乳腺衡家HB以100作为 实验组，选取正常婚养的乳腔您氧盟和正骨乳腺细腹作为对眼组，一段时间后分割 测定对顺组和实龄组的箱胞数并计算用制率，结果如图所示，韩刺率的计算公式是 。Dmme(裤)地合置白对不同乳粮隔细相的排制卡不同，其 可能氟因是 =skU 251 335* (5)然米坑体是传统坑体的重甚可变区片段，只有传烧抗体的1/10，但内部存在更多的 二硫健，结构更稳定。与传烧航体相比，馆米抗体韵优点是 1A 单元过关检测{十五】生物学第7面（热12面1 衡水真 18,〔]1分)人乳候蛋白(h)具有多种生理功能，被认为是一静服具开爱潘力的食品泽知 剂。如图为某食品公司利用乳蒙生物反度荐生产LF的过程。回容以下可思： 动子 ①产口，整卫林网童车将植胸印，快韩植 目。o【。I,xI阳制府.四为原指线西。m宜核杭性某两时细 (们)要从hL.P乳墨表达线体中获意目的某圆并使之成功表达生产LF,使用的限刚酶 最佳是 将目的基因导人成纤推帽粒中一般应用的挂术是 (2)成纤雄阳煞培养液中烟加H,F0,”,HPO,和HCD,的作用是 在导人目的基因之闻，域维细腹需用 处理使之分散成单个蟹臨 (3)在核移植过程中，先将梁集到的用母帽嘘体外坊系到 期后去核，再成纤炬 细胞从切口注射到联周象内，使用电刺餐成化学方法促进 ,居我原构所。 (4)在夜取甲酵阳彩和胚胎移植前要注射促即泡生成激素或氯前列烯际等性衡素，对 供帛每单注射促帘泡生成藏素等董素，其日的是 :对受体每单 (代孕第)生射复们列场修，其目的是 (5)为检验乳粮生物反应器是否成功研究人员进行了抑紫实验，其结果知下： 1 4 位4万U青蓄素 人乳情 转感因羊我清 健保上物质 ?(缩勿倍 0,5万U桂瑞素 (浓增9督) (皮留句倍) 摔菌烟直径(m》 2.2 19 1.7 ①图别4战低上的物质是 ②与人的hLF相比，乳跟生物反成器生产的hLF韩葡效果 ()为确保转基因产品的安全性，该食品公同后阶段应进行的工作是 A,实烧转基因产品标识 我进行食用安全性评估 C检测转基国单乳成分 D.泰定基园是否稳定电传 密鞋 单元过关松测（十置）生物学第8露其12面) 1以，(10分)植物在高于胞内N■藤发的环境下，53和905？颜搭位予重腹上的转运蛋 白S以51,5以1通过5S信号通路与触用内Na结合并将其裤出细胞外，维持其正常 生命香动。风答下列问墨： (1》植物利用08信号通路将N排出强胞外，这种运输方式的特点是 (2)通过基因工程在水稻中过盐表达5S蛋白，以用增强水稻杭盐能力。 ①为获得编码S8】蛋白的基因，可圆取野生用水留总RNA,通过获得视 板DNA,再经PCR获得5OS基因片段， ②酒序表明，051基因码序列含有344个枚什酸，其中A+T含景古53%，模 板陆中C含量为26%，那么8O5某国双链序列中G十C的含量为 ③构建表达程体到，在下图所示我体含有的限制衡识别位点荫人7基因。序列分相 发观SS基因内都有X】的识期序列，为使载体中SS基国和绿色茂凳蛋白基因 正确表站，成在S57某因两端分别稀知 两种风制脚的识期序列： 将基因桶人象体甫，应选用 两种限制酶对载体酶切。 西西A L Hiscc-Am w 流平 《3》重饥断粒转化水稻后，透取可发绿色荧光的植林，整定其抗盐能力是杏增强，采意 的操作是 (《》若发理水稻中过量表达OS引事因并不能明暴舞高其抗盐能力，从官号通路角度 分析，可管的氟因是 单元过关检测{十玉】生物学第9面（热12页1 衡水真 20,(10分)卖光素刷(L蛋白)出550个氨基酸矩成.分为N端和C端2个动能片段，眼 NLuC蛋白(2418复某酸)和Cx蛋白(398-550氢其酸)，两常分不能白动意组井发 挥作用：将月标爱白OHK1蛋白和OXL,G2蛋白分则与NLue蛋白和C1F蛋白服 合，若2个日标蛋白相互作用，则Lue蛋白和CL心蚕白能成功组装为荧光素膺并分 解实光素发齿费光，科研人员构硅了可表达OsBIK1HANL,ue胜合蛋白的表达载锈 1和可表达CLuc-Os灯G2融合董白的表达载体2并进行了检测，如图1所示，图中 HA为标签蛋白（用于且的蛋白的检到、示落等）的编码序列。 子 。Ae 剂经杖囊非影分位根 秀行 能本自的集 山白故体 (1)质粒霞体有一至多个 ,铁外第DA片段桥人其中：已知 表站载体1和？上均含有卡常看素拉性基因，目的是 短草 是双子叶植物，将重姐爱粮异人闲草叶片常用的方法是农杆面传化法，设染解真叶 片氧脑后的农杆菌在转化过中表现出的特点是 (2)构建厦组周校1时，需要把K1基因的对应终止密码子的3个就基去兼，原因 是 :图中HA编码序列插人到OBK1基四 编码链的 (填”5端”该”3'猿)，编码链为转录时所用模板链的互补链 (3)如果用扰1此蛋白抗体分划检西表达镜体1和2影合蛋白表达情况，结果加图2断 示，可优先进用航 置白杭体进一步区分，条带1为 照合蛋白 (4)将分群合有表达载体1和2的表任菌的被兵同连射到含有奖光素的闲草叶片后可 检测到变充，说明 花鞋 单元过关检海（十置】生物学第10面（其12西） 1,(10分)拟南芥体内的基因X具有多个启动子，通过一种凳敏色素作为受体，对光制微 进行应答，由此这择不同的启动子并转欢出长度不同的mRNA,从商表达出存在于相 蜜内不同位置的不同蛋自面，由意使双南芥禁现出不同的生长状志。其相美蛋白的合 战过馨知图断示 培储于 月动子2 ● ● m柱NAX ■ 起的千中》 nRNAX N上阴千 本增同保有信指与一 )h水顺资白横X印 h本筑资仓境X 《1)两种置白质 填“：或“b“)末端的氢基酸序列相可，该末端对应的是蛋白 质的 (一NH:”或“一COOH”)末湘.a末端是引导蛋白置被运输进人叶 绿体的信号肽段， (2》研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白(G下P)的基因片段情人到基因X的特定 位置，使表达出的蛋自面X①、X能带有体色荧光置白，以实观它们在细蜜内的可 锐化，由此得到A系植林，(GFP某因不含启动子和终止子) ①根据图1，GFP基四片程应超人列基围X内字每 表示约特定位置 ②GFP基因来白于水母等动将的阳飞中，需先这择合适的限制得将其从果色体 DNA上初料下来。GP基因两到的戴基序列如图2所示，根据城基序列应选择下 表中的 进行粉测。 限制酸 职南序列 BawHI G+GATO CCTAG+G Hmd目 A￥AGCTT TTCGA”A I G·CCCCC0 COCOGGC+G EcoR I GAATTO CTTAA↑G 1A 单元过关检测{中五}生物学第11而（共12页） 衡水真疑 ③角切们需对GFP基因进行PCR扩增，b侧所用引物已经端定a侧引物需在以 下4种中进行选择。根出侧序列成选择 ,不选其也3种的用由是 在PCR?中完4个循环后， 含有该引物的NA片段数为 个 引物1：s'ATCCTGCTA 引物2，'TATGGATCC3 引物3：5'GGATCCATA3' I物4：5'GGAAGGATA3 (3)研究人员在A系植航的甚上，去除产生光敏色素韵基因后得到B系植株。随后， 分割在侧暗条件和红光条件下培养A、已两系植株，培养条件及观测到荧允的部位 如表所京。 F印麦光的局落常位 爱育条件 脑储条作虹光条特 A第植物厘型质基质 叶绿体 B系校物能包质基期数质林质 复据以上质究结果，A系植候对红光有酸作出度答被整话的原因是 卷 单元过关检料（十鉴】生物学第12页[其12页）