专题16 细胞工程与胚胎工程 （山东专用）-【好题汇编】5年（2021-2025）高考1年模拟生物真题分类汇编

专题16 细胞工程与胚胎工程 五年考情 考情分析 细胞工程与胚胎工程 2025年山东卷第14题 2024年山东卷第20题 2023年山东卷第14题 2022年山东卷第15题 2021年山东卷第15题 近五年山东高考生物试卷中，细胞工程与胚胎工程考点均有涉及。题型涵盖选择与简答题，分值3-9分。植物组织培养、体细胞杂交，动物细胞培养、核移植，单克隆抗体制备，胚胎发育、移植与分割等是考查重点，常结合科研实例，注重知识运用与分析能力 。 一、单选题 1．（2025·山东·高考真题）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（    ）    A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 2．（2023·山东·高考真题）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（    ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 3．（2022·山东·高考真题）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（    ） A．双抗可同时与2种抗原结合 B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D．同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞 4．（2021·山东·高考真题）一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ） A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗 p72 的单抗 D．p72 部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 二、多选题 5．（2024·山东·高考真题）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 一、单选题 1．（2025·山东潍坊·三模）科研人员诱导A、B两种动物细胞融合并进行培养。A、B两种细胞各自的生活环境如表，目标融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长。下列说法正确的是（    ） A细胞 只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4~6 B细胞 只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长环境的pH为7~8 A．动物细胞培养使用的培养基都是天然培养基 B．PEG融合法和高Ca2+-高pH融合法均可诱导两种细胞融合 C．将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的pH在4~6 D．选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定是目标融合细胞 2．（2025·山东济南·二模）下列有关单克隆抗体的说法错误的是（    ） A．向健康动物体内反复注射某种抗原才能从动物腹水中获得纯度高的抗体 B．抗体检测阳性的杂交瘤细胞分泌的抗体能与特定抗原结合 C．利用有同位素或荧光标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形疾病 D．利用蛋白质工程技术改造后的小鼠单克隆抗体可降低人产生免疫反应 3．（2025·山东泰安·三模）在不同纬度、海拔、气候和不同土质条件下，植物体内次生代谢物含量有很大差异。例如，金鸡纳树皮中产生奎宁，而在雨季土壤湿度高时金鸡纳树皮不产奎宁。若通过植物组织培养技术生产奎宁，下列说法正确的是（    ） A．奎宁是金鸡纳生长和生存所必需的一种代谢活动的产物 B．植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用清水清洗 C．接种了外植体的培养基中会先后发生脱分化和再分化 D．植物组织培养过程中有可能出现奎宁分泌量增多的突变体 4．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（    ）    A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 5．（2025·山东泰安·三模）CTLA4分子（含有多个抗原决定簇）通常表达于T细胞表面，能够与抗原呈递细胞上的受体高亲和力结合，产生抑制T细胞活化的信号，减少细胞因子产生，降低机体抗肿瘤免疫反应。使用CTLA4单克隆抗体可以解除CTLA4对T细胞的抑制作用，提高T淋巴细胞对肿瘤应答水平，增强机体免疫细胞的抗肿瘤效应。下列有关CTLA4单克隆抗体制备的说法，正确的是（    ） A．用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到一种B淋巴细胞 B．用96孔板培养和筛选时，每一个孔中需接种多个杂交瘤细胞 C．将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应 D．体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO₂的目的是刺激细胞呼吸 6．（2025·山东济南·一模）一种类型的分化细胞转变成另一种类型的分化细胞的现象称为转分化，通常是将已分化细胞先诱导成iPS细胞，再诱导形成另一种类型的分化细胞。科学家分别通过2组不同的转录因子（调节基因转录的蛋白质分子），使小鼠成纤维细胞经基因组重编程表达直接转分化为心肌细胞与神经细胞。下列说法错误的是（    ） A．经iPS细胞发生转分化的过程中，细胞的全能性会发生变化 B．转录因子的作用是与基因组中特定部位的调控序列结合，促进相关基因的表达 C．若2组转录因子同时作用于小鼠成纤维细胞，可能无法获得心肌细胞或神经细胞 D．与经iPS细胞发生转分化过程相比，成纤维细胞转分化过程可能会更加便捷 7．（2025·山东青岛·一模）野生大豆的SAMS基因具有提高抗逆性的作用。水稻是一种盐敏感型作物，为提高水稻的抗盐碱胁迫能力，研究者将野生大豆的SAMS基因转入水稻细胞内，从而培养出转基因水稻株系，具体过程如图。下列说法错误的是（    ） A．图示过程中发生了两次转化 B．Ⅰ和Ⅲ都需使用固体培养基 C．Ⅰ中的筛选可使用PCR技术 D．获得的转基因水稻苗都具备抗盐碱能力 8．（2025·山东潍坊·一模）HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白。临床上用靶向HER2的抗体-药物偶联物（T-DM1）治疗癌症时，偶联药物DM1能破坏细胞骨架，T-DM1可通过杂交瘤细胞制备。下列说法错误的是（    ） A．T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成 B．制备杂交瘤细胞需获得产生HER2抗体的B细胞 C．用带标记的HER2抗体对克隆化培养的细胞进行检测 D．T-DM1能特异性识别肿瘤，并抑制肿瘤细胞的增殖 9．（2025·山东枣庄·二模）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（    ） A．紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B．可以利用液体培养基进行工厂化生产 C．紫草宁的工厂化生产需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 D．紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 10．（2025·山东潍坊·二模）赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是（　　） A．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素 B．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种 C．培养外植体先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s D．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上 11．（2025·山东潍坊·二模）科研人员分别利用两种抗原获得了能产生单克隆抗体的两种杂交瘤细胞，将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞。该双杂交瘤细胞可产生能识别上述两种抗原的双特异性抗体。下列说法错误的是（　　） A．获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合、动物细胞培养 B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO₂维持培养液的pH C．获得的双杂交瘤细胞需要两种相应的抗原刺激后才能产生双特异性抗体 D．筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原 12．（2025·山东青岛·一模）酶联免疫吸附测定是一种灵敏的免疫检测技术，过程如图。下列说法错误的是（    ） A．该技术可以用来检测特定抗原的浓度 B．两种抗体与特定抗原的同一区域结合 C．第二种抗体可以用蛋白质工程来制备 D．加入底物前需要漂洗掉未结合的抗体 13．（2025·山东枣庄·一模）下列关于细胞工程的说法正确的是（　　） A．体外培养的动物细胞形态相比体内正常细胞可能会发生改变 B．作物脱毒苗培养时先诱导愈伤组织生根，再诱导生芽 C．iPS细胞都是通过将外源基因导入体细胞获得的 D．离心法收集细胞只能用于传代培养细胞的收集 14．（2025·江西·一模）由于花椰菜杂种优势在提高花椰菜产量方面发挥着巨大的作用，而利用细胞质雄性不育系生产杂交种子，可以简化制种程序。利用原生质体非对称融合技术比较容易实现胞质雄性不育基因的转移，某研究利用该技术成功获得了含有胞质雄性不育基因的花椰菜植株，制作流程如下，下列说法错误的是（    ）    注：UV处理可以随机破坏染色体结构，使其发生断裂、丢失等，使细胞不再分裂 A．原生质体非对称融合技术使得杂种植株性状更接近于供体植株 B．②过程的原理是细胞膜具有一定的流动性，常用PEG融合法 C．培养一段时间后可通过观察叶绿体初步判断是否为异源原生质体 D．为鉴定再生植株成功获得细胞质雄性不育基因，可利用PCR进行鉴定 15．（2025·山东济南·一模）下列有关于干细胞的说法错误的是（    ） A．胚胎干细胞具有自我更新能力和分化潜能 B．使用小分子化合物诱导得到的诱导多能干细胞又被称为化学诱导多能干细胞 C．使用他人来源的诱导多能干细胞移植后，理论上可避免免疫排斥反应 D．干细胞移植中未分化的细胞可能异常增殖形成肿瘤 16．（2025·山东临沂·三模）大熊猫繁育研究基地利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系 （iPSCs），这些iPSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖传代，还能在体内和体外分化条件下，产生三个胚层各种不同类型的细胞，展现出很好发育潜能。利用大熊猫iPSC细胞进一步在体外获取全能干细胞、原始态多能干细胞、原始生殖细胞和生殖细胞甚至类囊胚等，为大熊猫的繁育提供重要的“种子细胞”来源。下列说法错误的是（　　） A．诱导多能干细胞系 （iPSCs）的实质是基因的选择性表达 B．已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞 C．诱导多能干细胞系 （PSCs）理论上可以避免免疫排斥反应 D．iPSC 细胞与原始态多能干细胞、原始生殖细胞和生殖细胞染色体组成相同 二、多选题 17．（2025·山东菏泽·二模）树突状细胞可迁移到抗原所在部位，受抗原刺激后，可在抗原所在部位增殖后大部分形成活化的树突状细胞，为探究该过程是否有记忆树突状细胞（可迁移到特异性抗原所在部位增殖分化）产生，研究人员将B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠分为甲、乙、丙三组进行相关实验，实验过程和结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 项目 甲组 乙组 丙组 步骤① 腹腔注射生理盐水 腹腔注射B品系小鼠的肝细胞 腹腔注射C品系小鼠的肝细胞 步骤② 28天后去除骨髓，移植C品系小鼠的骨髓 步骤③ 7天后检测骨髓中活化的树突状细胞数量 树突状细胞数量 + + ++++ 注：同一品系小鼠不同细胞的抗原相同，用于移植的骨髓经过处理后只含抗原成分，其中的细胞不产生免疫应答，“+”的多少表示数量的多少。 A．注射B．C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆T细胞和记忆B细胞 B．用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰 C．步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响 D．结果表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生 18．（2025·山东泰安·二模）已知番茄是二倍体植物，马铃薯是四倍体植物，如图为马铃薯和番茄的体细胞杂交过程图。下列分析正确的是（    ） A．过程①应置于等渗溶液中，利用果胶酶和胶原蛋白酶处理细胞 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．过程⑤升高细胞分裂素和生长素的比值，可促进愈伤组织形成丛芽 D．植株A7细胞中具有来自亲本的2个细胞核 19．（2025·山东潍坊·三模）番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮技术培养胡萝卜细胞来获取，实验流程和培养装置如图。下列说法正确的是（    ） A．过程②用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织 B．通过加料口来保证培养液中营养物质处于较高浓度 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 20．（2025·山东潍坊·一模）科研人员诱导依赖维生素B5的植物细胞和叶绿体缺陷型植物细胞融合，再利用选择培养基筛选出了杂种细胞。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导融合之前需先用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除 B．诱导融合产生杂种细胞的过程体现了细胞的全能性 C．该选择培养基需加入碳源、氮源、水和无机盐 D．该选择培养基中不加入维生素B5 21．（2025·山东日照·二模）过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗。过继性治疗相关过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A．过继性细胞治疗中，需从健康人体内获得能特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 B．筛选时；需要加入肿瘤细胞表面抗原筛选出特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 C．扩大培养时，细胞会因有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等出现分裂受阻 D．过继性治疗过程中不会产生免疫排斥反应，同时具有特异性强、毒副作用小等优点 22．（2025·山东济南·二模）哺乳动物早期胚胎为维持其可塑性，在受到实验性干预时其细胞发育会发生改变。内细胞团包括上胚层(Epi)和原始内胚层(PrE)。分别用FGF4或MEK抑制剂处理早期松散的细胞团，处理得到的细胞团转化为PrE或Epi，然后通过免疫手术去除滋养层。FGF4处理后，76.9%的胚胎为PrE标志物单阳性，其余23.1%的胚胎含有少量表达高水平PrE标志物和低水平Epi标志物的细胞；在MEK抑制剂处理的胚胎中，81.2%的胚胎呈Epi标志物单阳性。去除滋养层48小时后，FGF4处理的胚胎中63.6%发生了滋养层从头重建，但用MEK抑制剂处理的胚胎只有29%发生滋养层重建。下列有关说法错误的是（    ） A．用FGF4或MEK抑制剂处理早期胚胎通常为桑葚胚或囊胚 B．PrE可能具有重建滋养层的潜能，而Epi细胞的可塑性较低 C．内细胞团可塑性可依赖于FGF4和滋养层的缺失 D．PrE可以通过脱分化和再分化产生Epi和滋养层 三、解答题 23．（2025·山东潍坊·二模）研究表明，糖皮质激素（GC）可调节细胞凋亡。PC12细胞来源于大鼠肾上腺髓质细胞瘤，被广泛用作细胞凋亡研究的模型系统。 (1)GC的分泌受 轴的分级调节，分级调节的意义是 。 (2)AnnexinV/PI双染法是检测细胞凋亡情况的常用方法。在健康细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜内侧；凋亡早期，PS会移到膜外侧而与AnnexinV结合。PI可以进入凋亡晚期细胞。科研人员用0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的GC分别处理PC12细胞，检测每个细胞AnnexinV和PI的量，得到结果如图，其中每个点代表着一个细胞，依据细胞AnnexinV和PI的量分为Q1～Q4四个区。 凋亡早期细胞位于图中的 区，GC对PC12细胞凋亡的调节作用是 。 (3)蛋白质CC-3和BMP-7在细胞凋亡调控中起关键作用。科研人员用50μmol/L的GC分别处理正常、高表达BMP-7和低表达BMP-7的PC12细胞，分别记为1、2、3组，第4组为未经GC处理的正常PC12细胞，测得四组细胞中CC-3蛋白含量如图。推测CC-3和BMP-7参与GC调节细胞凋亡的机理是 。 学科网（北京）股份有限公司1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题16 细胞工程与胚胎工程 五年考情 考情分析 细胞工程与胚胎工程 2025年山东卷第14题 2024年山东卷第20题 2023年山东卷第14题 2022年山东卷第15题 2021年山东卷第15题 近五年山东高考生物试卷中，细胞工程与胚胎工程考点均有涉及。题型涵盖选择与简答题，分值3-9分。植物组织培养、体细胞杂交，动物细胞培养、核移植，单克隆抗体制备，胚胎发育、移植与分割等是考查重点，常结合科研实例，注重知识运用与分析能力 。 一、单选题 1．（2025·山东·高考真题）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（    ）    A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 【答案】B 【难度】0.65 【知识点】PCR扩增的原理与过程、动物细胞培养技术、克隆 【分析】动物细胞培养的条件（1）营养条件。（2）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具灭菌处理、无菌环境下操作、定期更换培养液。（3）适宜的温度、pH和渗透压。（4）气体环境：95%空气和5%CO2。 【详解】A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移植操作，A正确； B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误； C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C正确； D、PCR技术可以扩增特定的DNA片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA片段，就可以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。 故选B。 2．（2023·山东·高考真题）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（    ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 【答案】A 【难度】0.85 【知识点】植物细胞工程的实际应用 【分析】由于植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、有些产物不能或难以通过化学合成途径得到，故可利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物，A正确； B、利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物，故可通过该技术进行植物细胞产物的工厂化生产，B错误； C、次生代谢物不是植物生长所必需的，其含量少，可以通过增加细胞的数量来增加次生代谢产物的产量，C错误； D、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞分裂的培养条件，提高了多个细胞中次生代谢物的含量，不能提高单个细胞中次生代谢物的含量，D错误。 故选A。 3．（2022·山东·高考真题）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（    ） A．双抗可同时与2种抗原结合 B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D．同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确； B、 根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确； C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确； D、 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。 故选D。 4．（2021·山东·高考真题）一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ） A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗 p72 的单抗 D．p72 部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体”，非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多个抗原决定簇，所以可以刺激机体产生多种抗体。每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗。 【详解】A、单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误； B、单抗制备过程中通常将经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B错误； C、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72 后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误； D、p72 部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。 故选D。 二、多选题 5．（2024·山东·高考真题）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 【答案】BD 【难度】0.85 【知识点】植物体细胞杂交技术、植物细胞工程的实际应用 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，A错误； B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确； C、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，C错误； D、通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于植物的组织培养，从繁殖看属于无性繁殖，D正确。 故选BD。 一、单选题 1．（2025·山东潍坊·三模）科研人员诱导A、B两种动物细胞融合并进行培养。A、B两种细胞各自的生活环境如表，目标融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长。下列说法正确的是（    ） A细胞 只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4~6 B细胞 只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长环境的pH为7~8 A．动物细胞培养使用的培养基都是天然培养基 B．PEG融合法和高Ca2+-高pH融合法均可诱导两种细胞融合 C．将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的pH在4~6 D．选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定是目标融合细胞 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】培养基的类型及其应用、动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物细胞培养技术 【分析】细胞工程是根据细胞生物学和分子生物学原理，采用细胞培养技术，在细胞水平进行的遗传操作。 【详解】A、动物细胞培养使用的培养基是合成培养基，A错误； B、A细胞只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4~6，不能用高Ca2+-高pH融合法诱导两种细胞融合，B错误； C、目标融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长。将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的pH在7~8，C错误； D、选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定是目标融合细胞，有可能是B细胞与B细胞的融合细胞，D正确。 故选D。 2．（2025·山东济南·二模）下列有关单克隆抗体的说法错误的是（    ） A．向健康动物体内反复注射某种抗原才能从动物腹水中获得纯度高的抗体 B．抗体检测阳性的杂交瘤细胞分泌的抗体能与特定抗原结合 C．利用有同位素或荧光标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形疾病 D．利用蛋白质工程技术改造后的小鼠单克隆抗体可降低人产生免疫反应 【答案】A 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】克隆抗体的制备过程： 1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限增殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限增殖； 2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体； 3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），②筛选出能够产生特异性抗体的细胞； 4、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 【详解】A、单克隆抗体制备过程先获取杂交瘤细胞，再进行克隆化培养和抗体检测，筛选抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，最终从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体，向健康动物体内反复注射某种抗原不能得到单克隆抗体，A错误； B、通过抗体检测筛选出阳性的杂交瘤细胞，这些细胞分泌的抗体能特异性结合特定抗原，用于后续生产，B正确； C、利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，该过程是利用抗原-抗体特异性结合原理实现的，C正确； D、小鼠单克隆抗体为鼠源性，直接用于人体可能引发产生免疫反应。通过蛋白质工程，改造小鼠抗体的结构，可降低免疫原性，减少人体免疫反应，D正确。 故选A。 3．（2025·山东泰安·三模）在不同纬度、海拔、气候和不同土质条件下，植物体内次生代谢物含量有很大差异。例如，金鸡纳树皮中产生奎宁，而在雨季土壤湿度高时金鸡纳树皮不产奎宁。若通过植物组织培养技术生产奎宁，下列说法正确的是（    ） A．奎宁是金鸡纳生长和生存所必需的一种代谢活动的产物 B．植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用清水清洗 C．接种了外植体的培养基中会先后发生脱分化和再分化 D．植物组织培养过程中有可能出现奎宁分泌量增多的突变体 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】植物组织培养技术综合、植物细胞工程的实际应用 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，诱导其生成完整植株的技术。 【详解】A、由题意可知，奎宁属于次生代谢物，不是金鸡纳生长和生存所必需的，A错误； B、植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用无菌水清洗，B错误； C、接种外植体的培养基中发生脱分化后，需要更换培养基进行再分化，C错误； D、基因突变具有不定向性，植物组织培养过程中细胞不断分裂，有可能发生基因突变而出现奎宁分泌量增多的突变体，D正确。 故选D。 4．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（    ）    A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 【答案】C 【难度】0.85 【知识点】克隆、胚胎移植技术 【分析】据图分析，图示核移植技术培育转基因克隆猪培育过程涉及的技术手段有基因工程技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因(目的基因)导入B猪的体细胞核中，然后将B猪的体细胞核移植到A猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到一定阶段并移植到C猪的子宫中去，最后分娩产生了D转基因克隆猪。 【详解】A、分析可知，获得D猪设计去核卵母细胞与含有目的基因的细胞的融合，基础技术是动物细胞培养技术，A错误； B、步骤①通常通过电融合法使两细胞融合，B错误； C、通常用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、步骤③表示将早期胚胎移植给C猪，其技术手段为胚胎移植，D错误。 故选C。 5．（2025·山东泰安·三模）CTLA4分子（含有多个抗原决定簇）通常表达于T细胞表面，能够与抗原呈递细胞上的受体高亲和力结合，产生抑制T细胞活化的信号，减少细胞因子产生，降低机体抗肿瘤免疫反应。使用CTLA4单克隆抗体可以解除CTLA4对T细胞的抑制作用，提高T淋巴细胞对肿瘤应答水平，增强机体免疫细胞的抗肿瘤效应。下列有关CTLA4单克隆抗体制备的说法，正确的是（    ） A．用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到一种B淋巴细胞 B．用96孔板培养和筛选时，每一个孔中需接种多个杂交瘤细胞 C．将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应 D．体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO₂的目的是刺激细胞呼吸 【答案】C 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物细胞培养技术 【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、CTLA4分子含有多个抗原决定簇，用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到多种B淋巴细胞，A错误； B、用96孔板培养和筛选时，每一个孔中尽量接种一个杂交瘤细胞，B错误； C、细胞因子可促进细胞毒性T细胞增殖分化，将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应，C正确； D、体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO2的目的是维持培养液的PH，D错误。 故选C。 6．（2025·山东济南·一模）一种类型的分化细胞转变成另一种类型的分化细胞的现象称为转分化，通常是将已分化细胞先诱导成iPS细胞，再诱导形成另一种类型的分化细胞。科学家分别通过2组不同的转录因子（调节基因转录的蛋白质分子），使小鼠成纤维细胞经基因组重编程表达直接转分化为心肌细胞与神经细胞。下列说法错误的是（    ） A．经iPS细胞发生转分化的过程中，细胞的全能性会发生变化 B．转录因子的作用是与基因组中特定部位的调控序列结合，促进相关基因的表达 C．若2组转录因子同时作用于小鼠成纤维细胞，可能无法获得心肌细胞或神经细胞 D．与经iPS细胞发生转分化过程相比，成纤维细胞转分化过程可能会更加便捷 【答案】B 【难度】0.65 【知识点】细胞的分化、动物细胞培养技术 【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。 2、细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。 【详解】A、一般细胞的分化程度越高，全能性越低，所以经iPS细胞发生转分化的过程中，细胞的全能性会发生变化，A正确； B、依据题干信息，转录因子是调节基因转录的蛋白质分子，所以转录因子的作用是与基因组中特定部位的调控序列结合，调节相关基因的转录，B错误； C、依据题干信息，通过2组不同的转录因子，可使小鼠成纤维细胞经基因组重编程表达直接转分化为心肌细胞与神经细胞，所以，若2组转录因子同时作用于小鼠成纤维细胞，可能无法获得心肌细胞或神经细胞，C正确； D、经iPS细胞的转分化过程需要经过两个步骤，先转分化为iPS细胞，在转分化为其他细胞，而成纤维细胞可以直接转化为其他细胞，所以与经iPS细胞发生转分化过程相比较，成纤维细胞转分化过程可能会更加便捷，D正确。 故选B。 7．（2025·山东青岛·一模）野生大豆的SAMS基因具有提高抗逆性的作用。水稻是一种盐敏感型作物，为提高水稻的抗盐碱胁迫能力，研究者将野生大豆的SAMS基因转入水稻细胞内，从而培养出转基因水稻株系，具体过程如图。下列说法错误的是（    ） A．图示过程中发生了两次转化 B．Ⅰ和Ⅲ都需使用固体培养基 C．Ⅰ中的筛选可使用PCR技术 D．获得的转基因水稻苗都具备抗盐碱能力 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】植物组织的培养及基本过程、PCR扩增的原理与过程、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 【分析】将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。 【详解】A、转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，图示过程需要两次转化，分别为，一是将目的基因（SAMS基因）转化质粒的T-DNA分子上，二是指被插入目的基因的T-DNA转化到受体细胞的染色体DNA分子上，A正确； B、Ⅰ筛选含目的基因的农杆菌，需使用固体培养基，Ⅲ为植物组织培养的再分化过程，需要使用固体培养基，B正确； C、PCR技术可用于目的基因和基因表达载体的筛选，C正确； D、SAMS基因具有提高抗逆性的作用，获得的转基因水稻幼苗不一定都具有抗盐碱的能力，所以需要将转基因水稻置于盐碱的环境中，进行筛选与鉴定，D错误。 故选D。 8．（2025·山东潍坊·一模）HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白。临床上用靶向HER2的抗体-药物偶联物（T-DM1）治疗癌症时，偶联药物DM1能破坏细胞骨架，T-DM1可通过杂交瘤细胞制备。下列说法错误的是（    ） A．T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成 B．制备杂交瘤细胞需获得产生HER2抗体的B细胞 C．用带标记的HER2抗体对克隆化培养的细胞进行检测 D．T-DM1能特异性识别肿瘤，并抑制肿瘤细胞的增殖 【答案】C 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物细胞培养技术 【分析】单克隆抗体的制备过程：用特定抗原对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，从产生免疫反应小鼠的脾脏细胞中，得到了抗特定抗原的抗体，这说明在小鼠的脾细胞中形成了相应的B淋巴细胞。将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选。在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。对上述经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。 【详解】A、T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成，其中抗体的作用是将药物定向运输到病灶部位，降低药物的副作用，A正确； B、HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白，为了让药物通过抗体作用与肿瘤细胞，在制备杂交瘤细胞时需获得产生HER2抗体的B细胞，因而需要首先将HER2作为抗原注射到小鼠体内产生免疫反应，B正确； C、用带标记的HER2蛋白对克隆化培养的细胞进行检测，进而筛选出能产生特定抗体，即HER2抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、T-DM1能特异性识别肿瘤，因为其上连接的抗体能与肿瘤细胞表面的特定蛋白结合，进而抑制肿瘤细胞的增殖，D正确。 故选C。 9．（2025·山东枣庄·二模）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（    ） A．紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B．可以利用液体培养基进行工厂化生产 C．紫草宁的工厂化生产需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 D．紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 【答案】C 【难度】0.85 【知识点】植物细胞工程的实际应用 【分析】植物组织培养的条件：细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)，一定的营养(无机、有机成分)和植物激素。 【详解】A、紫草宁是紫草细胞培养过程中产生的次生代谢物，不是紫草细胞生长和生存所必需的，A正确； B、进行工厂化生产需要植物细胞增殖，利用液体培养基，B正确； C、紫草宁的工厂化生产不需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获取产物时再使用，C错误； D、紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义，D正确。 故选C。 10．（2025·山东潍坊·二模）赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是（　　） A．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素 B．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种 C．培养外植体先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s D．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上 【答案】B 【难度】0.65 【知识点】植物组织培养技术综合 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，诱导其生成完整植株的技术。 【详解】A、植物的次生代谢产物是植物在长期进化中对生态环境适应的结果，许多次生代谢产物具有抵御病菌侵害等作用，小麦主要依靠其次生代谢物来抵抗赤霉菌毒素，而不是初生代谢物。初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢过程，其产物如糖类、蛋白质等主要用于植物的基本生命活动，与抵抗病菌毒素关系不大，A错误； B、筛选抗赤霉病植株时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种，这样的品种在受到赤霉菌毒素影响时，受伤害程度相对较小，更有可能筛选出具有抗赤霉病能力的植株。如果选择对赤霉菌毒素敏感度高的品种，这些植株在培养过程中很容易受到毒素影响而死亡，不利于筛选出抗毒植株，B正确； C、培养外植体时，先用体积分数为70%的酒精处理30 - 60s，再用次氯酸钠处理10 - 30min，而不是先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s。酒精处理时间过长会对外植体造成伤害，次氯酸钠处理时间过短则可能无法达到很好的消毒效果，C错误； D、在植物组织培养中，一般先将愈伤组织接到生芽培养基上，诱导生芽，然后将生出芽的组织再接到生根培养基上，诱导生根。如果先接到生根培养基上，可能不利于芽的分化和生长，D错误。 故选B。 11．（2025·山东潍坊·二模）科研人员分别利用两种抗原获得了能产生单克隆抗体的两种杂交瘤细胞，将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞。该双杂交瘤细胞可产生能识别上述两种抗原的双特异性抗体。下列说法错误的是（　　） A．获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合、动物细胞培养 B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO₂维持培养液的pH C．获得的双杂交瘤细胞需要两种相应的抗原刺激后才能产生双特异性抗体 D．筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原 【答案】C 【难度】0.65 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合（B细胞与骨髓瘤细胞的融合、杂交瘤细胞融合）、动物细胞培养，A正确； B、动物细胞培养需要氧气，需要气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值），B正确； C、获得的双杂交瘤细胞不需要抗原刺激就能产生双特异性抗体，C错误； D、将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞，筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原，D正确。 故选C。 12．（2025·山东青岛·一模）酶联免疫吸附测定是一种灵敏的免疫检测技术，过程如图。下列说法错误的是（    ） A．该技术可以用来检测特定抗原的浓度 B．两种抗体与特定抗原的同一区域结合 C．第二种抗体可以用蛋白质工程来制备 D．加入底物前需要漂洗掉未结合的抗体 【答案】B 【难度】0.65 【知识点】蛋白质工程原理及操作流程、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】据图分析，抗体和抗原特异性结合，再与酶标抗体结合，催化特定底物形成检测产物。 【详解】A、由图可知，加入酶标抗体的目的是酶催化检测底物反应，通过测定单位时间有色产物生成量来推测待测检测特定抗原的浓度，A正确； B、由图可知，两种抗体与特定抗原的不同区域结合，B错误； C、第二种抗体可以用蛋白质工程来制备，C正确； D、由图可知，第二种抗体具有蛋白酶可催化无色底物转变为有色底物，因此加入底物前需要漂洗掉未结合的抗体，D正确。 故选B。 13．（2025·山东枣庄·一模）下列关于细胞工程的说法正确的是（　　） A．体外培养的动物细胞形态相比体内正常细胞可能会发生改变 B．作物脱毒苗培养时先诱导愈伤组织生根，再诱导生芽 C．iPS细胞都是通过将外源基因导入体细胞获得的 D．离心法收集细胞只能用于传代培养细胞的收集 【答案】A 【难度】0.65 【知识点】植物组织培养技术综合、植物细胞工程的实际应用、动物细胞培养技术 【分析】1、动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4。④气体环境：95%空气+5%CO2。 2、物组织培养技术过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。原理：植物细胞的全能性。条件：（1）细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；（2）一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、体外培养的动物细胞由于缺少体内环境稳定的生理和生化条件，可能形态、功能发生改变，如变扁平或失去特异性等，比体内正常细胞可能会发生改变，A正确； B、作物脱毒苗培养过程中，通常是先诱导愈伤组织形成芽，然后再诱导生根。这是因为在植物组织培养过程中，愈伤组织的再分化通常是先进行芽的诱导，再进行生根的诱导，两者的顺序不能颠倒。因此，题干中的说法是错误的，B错误； C、iPS细胞（诱导多能干细胞）并不一定都需要通过外源基因导入体细胞获得。除了通过引入特定外源基因来诱导体细胞去分化外，还有一些非基因导入的方法，如使用小分子化合物或通过蛋白质转染等手段，同样可以将体细胞诱导为多能干细胞，C错误； D、在传代培养时可用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，悬浮培养的细胞也可直接用离心法收集，离心法收集细胞不是只能用于传代培养细胞的收集，也可用于收集药物处理过的细胞等，D错误； 故选A。 14．（2025·江西·一模）由于花椰菜杂种优势在提高花椰菜产量方面发挥着巨大的作用，而利用细胞质雄性不育系生产杂交种子，可以简化制种程序。利用原生质体非对称融合技术比较容易实现胞质雄性不育基因的转移，某研究利用该技术成功获得了含有胞质雄性不育基因的花椰菜植株，制作流程如下，下列说法错误的是（    ）    注：UV处理可以随机破坏染色体结构，使其发生断裂、丢失等，使细胞不再分裂 A．原生质体非对称融合技术使得杂种植株性状更接近于供体植株 B．②过程的原理是细胞膜具有一定的流动性，常用PEG融合法 C．培养一段时间后可通过观察叶绿体初步判断是否为异源原生质体 D．为鉴定再生植株成功获得细胞质雄性不育基因，可利用PCR进行鉴定 【答案】A 【难度】0.65 【知识点】植物组织的培养及基本过程、目的基因的检测与鉴定、植物体细胞杂交技术 【分析】植物组织培养的条件：（1）细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；（2）一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、供体细胞经UV处理失去了部分遗传物质，而受体细胞遗传物质完整，因此杂种植株性状更接近于受体植株，A错误； B、②过程为原生质体融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性，常用方法有PEG融合法、电融合法等，B正确； C、供体细胞有叶绿体，受体细胞无叶绿体，供体细胞经UV处理，一段时间后失去活性，融合细胞具有叶绿体，且能保持活性，故可通过观察叶绿体初步判断是否为异源原生质体，C正确； D、提取再生植株基因组，针对细胞质雄性不育基因设计引物进行PCR，结合电泳技术观察有无目的条带判断是否获得目的基因，D正确。 故选A。 15．（2025·山东济南·一模）下列有关于干细胞的说法错误的是（    ） A．胚胎干细胞具有自我更新能力和分化潜能 B．使用小分子化合物诱导得到的诱导多能干细胞又被称为化学诱导多能干细胞 C．使用他人来源的诱导多能干细胞移植后，理论上可避免免疫排斥反应 D．干细胞移植中未分化的细胞可能异常增殖形成肿瘤 【答案】C 【难度】0.94 【知识点】细胞的分化、胚胎干细胞技术 【分析】科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。 【详解】A、胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有自我更新能力，能够不断分裂产生新的细胞，同时还具有分化潜能，可以分化为各种不同类型的细胞，A正确； B、通过使用小分子化合物等方式诱导得到的诱导多能干细胞，确实又被称为化学诱导多能干细胞，这是基于诱导方式命名的，B正确； C、使用自身来源的诱导多能干细胞移植后，理论上可避免免疫排斥反应，因为自身细胞携带相同的抗原信息，免疫系统不会将其识别为外来异物进行攻击。而使用他人来源的诱导多能干细胞，其细胞表面抗原与患者自身不同，移植后会引发免疫排斥反应，C错误； D、干细胞移植中，如果未分化的细胞不受控制地异常增殖，就有可能形成肿瘤，这是干细胞移植过程中需要关注和防范的风险之一，D正确。 故选C。 16．（2025·山东临沂·三模）大熊猫繁育研究基地利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系 （iPSCs），这些iPSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖传代，还能在体内和体外分化条件下，产生三个胚层各种不同类型的细胞，展现出很好发育潜能。利用大熊猫iPSC细胞进一步在体外获取全能干细胞、原始态多能干细胞、原始生殖细胞和生殖细胞甚至类囊胚等，为大熊猫的繁育提供重要的“种子细胞”来源。下列说法错误的是（　　） A．诱导多能干细胞系 （iPSCs）的实质是基因的选择性表达 B．已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞 C．诱导多能干细胞系 （PSCs）理论上可以避免免疫排斥反应 D．iPSC 细胞与原始态多能干细胞、原始生殖细胞和生殖细胞染色体组成相同 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】胚胎干细胞技术 【分析】1、细胞分化：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，叫做细胞分化。细胞分化的实质是基因选择性表达； 2、科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称之为诱导多能干细胞，简称iPS细胞。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。 【详解】A、诱导多能干细胞系与成纤维细胞相比，遗传物质相同，功能不同，因此诱导多能干细胞系 （iPSCs）的实质是基因的选择性表达，A正确； B、已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，B正确； C、诱导多能干细胞系 （PSCs）来源于大熊猫自身的体细胞，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确； D、生殖细胞是经过减数分裂后的细胞，染色体数目减半，与iPSC细胞染色体组成不同，D错误。 故选D。 二、多选题 17．（2025·山东菏泽·二模）树突状细胞可迁移到抗原所在部位，受抗原刺激后，可在抗原所在部位增殖后大部分形成活化的树突状细胞，为探究该过程是否有记忆树突状细胞（可迁移到特异性抗原所在部位增殖分化）产生，研究人员将B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠分为甲、乙、丙三组进行相关实验，实验过程和结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 项目 甲组 乙组 丙组 步骤① 腹腔注射生理盐水 腹腔注射B品系小鼠的肝细胞 腹腔注射C品系小鼠的肝细胞 步骤② 28天后去除骨髓，移植C品系小鼠的骨髓 步骤③ 7天后检测骨髓中活化的树突状细胞数量 树突状细胞数量 + + ++++ 注：同一品系小鼠不同细胞的抗原相同，用于移植的骨髓经过处理后只含抗原成分，其中的细胞不产生免疫应答，“+”的多少表示数量的多少。 A．注射B．C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆T细胞和记忆B细胞 B．用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰 C．步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响 D．结果表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生 【答案】BCD 【难度】0.65 【知识点】体液免疫、细胞免疫、动物细胞培养技术 【分析】树突状细胞的功能是摄取、处理病原体使之暴露出特有的抗原，然后将抗原呈递给辅助性T细胞，激发机体的特异性免疫过程。 【详解】A、注射B、C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆树突状细胞，A错误； B、B细胞和T细胞参与特异性免疫，故用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰，B正确； C、骨髓中的造血干细胞会分化形成各种免疫细胞，步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响，C正确； D、树突状细胞的免疫记忆体现在Ⅲ组注射了C鼠的肝细胞后移植C的骨髓后活化的树突状细胞的数量多，Ⅱ组和Ⅰ组未注射C品系小鼠肝细胞，故移植C的骨髓后，两组检测到的活化树突状细胞数量少而且相近，因此可表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生，D正确。 故选BCD。 18．（2025·山东泰安·二模）已知番茄是二倍体植物，马铃薯是四倍体植物，如图为马铃薯和番茄的体细胞杂交过程图。下列分析正确的是（    ） A．过程①应置于等渗溶液中，利用果胶酶和胶原蛋白酶处理细胞 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．过程⑤升高细胞分裂素和生长素的比值，可促进愈伤组织形成丛芽 D．植株A7细胞中具有来自亲本的2个细胞核 【答案】BC 【难度】0.65 【知识点】植物体细胞杂交技术 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，过程①应置于较高渗溶液中，使其处于微弱的质壁分离状态，A错误； B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确； C、细胞分裂素与生长素比值高时有利于芽的分化，C正确； D、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，D错误。 故选BC。 19．（2025·山东潍坊·三模）番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮技术培养胡萝卜细胞来获取，实验流程和培养装置如图。下列说法正确的是（    ） A．过程②用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织 B．通过加料口来保证培养液中营养物质处于较高浓度 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 【答案】ACD 【难度】0.65 【知识点】植物组织培养技术综合、发酵工程的基本环节 【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、过程②是将愈伤组织分散成单个细胞，而植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织，可去除细胞壁，将细胞分散开来，A正确； B、加料口的作用是补充培养液中的营养物质，但并不是要保证培养液中营养物质处于较高浓度，培养液中营养物质浓度过高，可能会导致细胞失水，影响细胞的正常生长，B错误； C、充气口增设无菌过滤器，可防止杂菌污染，加料口加入原料要进行灭菌处理，这样才能保证整个培养过程不受杂菌干扰，维持细胞培养的无菌环境，C正确； D、细胞培养需要适宜的温度条件，增设温度监测和控制设备可以实时监测和调节装置内的温度，维持装置适宜温度，有利于细胞的正常生长和代谢，D正确。 故选ACD。 20．（2025·山东潍坊·一模）科研人员诱导依赖维生素B5的植物细胞和叶绿体缺陷型植物细胞融合，再利用选择培养基筛选出了杂种细胞。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导融合之前需先用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除 B．诱导融合产生杂种细胞的过程体现了细胞的全能性 C．该选择培养基需加入碳源、氮源、水和无机盐 D．该选择培养基中不加入维生素B5 【答案】AD 【难度】0.65 【知识点】植物体细胞杂交技术 【分析】植物体细胞杂交其实质为植物原生质体的融合，在融合前需要使用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除植物的细胞壁，再用化学法（聚乙二醇）或物理法（振动、离心、电刺激）诱导原生质体融合；细胞融合完成的标志是融合细胞再生出新的细胞壁；获得融合细胞后需利用植物的组织培养技术将细胞培育成植株，故植物体细胞杂交技术的最终目的是培育具有优良性状的植物新品种。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在进行植物细胞融合之前，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除，获得原生质体，这样才能促进细胞的融合，A正确； B、细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。诱导融合产生杂种细胞只是细胞之间的融合过程，并没有发育成完整的个体，没有体现细胞的全能性，B错误； C、该选择培养基筛选的是融合后的杂种细胞，杂种细胞既能利用自身光合作用产生有机物（因为融合了叶绿体缺陷型植物细胞，另一种细胞可能含有叶绿体可进行光合作用相关过程或者杂种细胞融合后可能有相关功能），又依赖维生素B5，所以培养基中不需要额外加入碳源、氮源等供能物质，C错误； D、由于是诱导依赖维生素B5的植物细胞和叶绿体缺陷型植物细胞融合，融合后的杂种细胞依赖维生素B5，而普通细胞可能不依赖，为了筛选出杂种细胞，在选择培养基中不加维生素B5，这样不能合成维生素B5又依赖它的普通细胞就无法生长，从而筛选出杂种细胞，D正确。 故选AD。 21．（2025·山东日照·二模）过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗。过继性治疗相关过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A．过继性细胞治疗中，需从健康人体内获得能特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 B．筛选时；需要加入肿瘤细胞表面抗原筛选出特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 C．扩大培养时，细胞会因有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等出现分裂受阻 D．过继性治疗过程中不会产生免疫排斥反应，同时具有特异性强、毒副作用小等优点 【答案】BCD 【难度】0.65 【知识点】细胞免疫、动物细胞培养技术 【分析】细胞毒性T淋巴细胞对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用，与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。 【详解】A、过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，因此过继性治疗通常采用患者自身的细胞，以避免免疫排斥反应，A错误； B、筛选过程中需加入肿瘤细胞表面抗原，以筛选出能够特异性识别并杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞，确保其靶向性，B正确； C、在体外扩大培养时，动物细胞会因接触抑制（贴壁生长停止）、代谢废物积累和营养不足导致分裂受阻，这是细胞培养的常见限制因素，C正确； D、若使用自体细胞，过继性治疗不会引发免疫排斥；同时，特异性靶向肿瘤细胞的特性使其毒副作用相对较小，D正确。 故选BCD。 22．（2025·山东济南·二模）哺乳动物早期胚胎为维持其可塑性，在受到实验性干预时其细胞发育会发生改变。内细胞团包括上胚层(Epi)和原始内胚层(PrE)。分别用FGF4或MEK抑制剂处理早期松散的细胞团，处理得到的细胞团转化为PrE或Epi，然后通过免疫手术去除滋养层。FGF4处理后，76.9%的胚胎为PrE标志物单阳性，其余23.1%的胚胎含有少量表达高水平PrE标志物和低水平Epi标志物的细胞；在MEK抑制剂处理的胚胎中，81.2%的胚胎呈Epi标志物单阳性。去除滋养层48小时后，FGF4处理的胚胎中63.6%发生了滋养层从头重建，但用MEK抑制剂处理的胚胎只有29%发生滋养层重建。下列有关说法错误的是（    ） A．用FGF4或MEK抑制剂处理早期胚胎通常为桑葚胚或囊胚 B．PrE可能具有重建滋养层的潜能，而Epi细胞的可塑性较低 C．内细胞团可塑性可依赖于FGF4和滋养层的缺失 D．PrE可以通过脱分化和再分化产生Epi和滋养层 【答案】AD 【难度】0.65 【知识点】胚胎的体外培养 【分析】囊胚包括了滋养层和内细胞团细胞，滋养层将发育成胚胎的附属结构或胚外结构。 【详解】A、题干信息用FGF4或MEK抑制剂处理早期松散的细胞团，内细胞团存在于囊胚期，因此用FGF4或MEK抑制剂处理早期胚胎通常为囊胚，A错误； B、FGF4处理后，76.9%的胚胎为PrE标志物单阳性，其余23.1%的胚胎含有少量表达高水平PrE标志物和低水平Epi标志物的细胞，去除滋养层48小时后，FGF4处理的胚胎中63.6%发生了滋养层从头重建，说明PrE可能具有重建滋养层的潜能；在MEK抑制剂处理的胚胎中，81.2%的胚胎呈Epi标志物单阳性，用MEK抑制剂处理的胚胎只有29%发生滋养层重建，说明Epi细胞的可塑性较低，B正确； C、去除滋养层48小时后，FGF4处理的胚胎中63.6%发生了滋养层从头重建，说明内细胞团可塑性可依赖于FGF4和滋养层的缺失，C正确； D、通过题干信息分析可知PrE可能具有重建滋养层的潜能，但不能确定PrE可以通过脱分化和再分化产生Epi和滋养层，D错误。 故选AD。 三、解答题 23．（2025·山东潍坊·二模）研究表明，糖皮质激素（GC）可调节细胞凋亡。PC12细胞来源于大鼠肾上腺髓质细胞瘤，被广泛用作细胞凋亡研究的模型系统。 (1)GC的分泌受 轴的分级调节，分级调节的意义是 。 (2)AnnexinV/PI双染法是检测细胞凋亡情况的常用方法。在健康细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜内侧；凋亡早期，PS会移到膜外侧而与AnnexinV结合。PI可以进入凋亡晚期细胞。科研人员用0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的GC分别处理PC12细胞，检测每个细胞AnnexinV和PI的量，得到结果如图，其中每个点代表着一个细胞，依据细胞AnnexinV和PI的量分为Q1～Q4四个区。 凋亡早期细胞位于图中的 区，GC对PC12细胞凋亡的调节作用是 。 (3)蛋白质CC-3和BMP-7在细胞凋亡调控中起关键作用。科研人员用50μmol/L的GC分别处理正常、高表达BMP-7和低表达BMP-7的PC12细胞，分别记为1、2、3组，第4组为未经GC处理的正常PC12细胞，测得四组细胞中CC-3蛋白含量如图。推测CC-3和BMP-7参与GC调节细胞凋亡的机理是 。 【答案】(1) 下丘脑-垂体-肾上腺皮质 放大激素的调节效应；形成多级反馈调节，有利于精细调控 (2) Q1 GC诱导PCI2细胞凋亡；一定范围内随着GC浓度升高，诱导效果增强 (3)GC通过促进CC-3蛋白表达诱导细胞凋亡；BMP-7通过抑制CC-3蛋白表达，减缓GC诱导的凋亡 【难度】0.15 【知识点】激素分泌的分级调节、动物细胞培养技术、细胞凋亡、电泳鉴定 【分析】糖皮质激素（GC）是机体内极为重要的一类调节分子，它对机体的发育、生长、代谢以及免疫功能等起着重要调节作用，是机体应激反应最重要的调节激素，也是临床上使用最为广泛而有效的抗炎和免疫抑制剂。 【详解】（1）糖皮质激素的分泌，受“下丘脑－垂体－肾上腺轴”的分级调节，即下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素，作用于垂体，使其分泌促肾上腺皮质激素，作用于肾上腺皮质，使其分泌糖皮质激素。分级调节可以放大激素的调节效应；形成多级反调节，有利于精细调控。 （2）凋亡早期，PS会移到膜外侧而与AnnexinV结合，Q1区AnnexinV浓度较高，存在凋亡早期细胞。GC诱导PCI2细胞凋亡；一定范围内随着GC浓度升高，诱导效果增强。 （3）1组为50μmol/L的GC+正常PC12细胞，2组为50μmol/L的GC+高表达BMP-7GC的PC12细胞，3组为50μmol/L的GC+低表达BMP-7的PC12细胞，4组为未经GC处理的正常PC12细胞，测得四组细胞中CC-3蛋白，仅1组和3组有条带，说明1组和3组CC-3蛋白含量较高，推测通过促进CC-3蛋白表达诱导细胞凋亡；BMP-7通过抑制CC-3蛋白表达，减缓GC诱导的凋亡。 学科网（北京）股份有限公司1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$