专题03 动物细胞工程和胚胎工程（江苏专用）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期末真题分类汇编（江苏专用）

专题03 动物细胞工程和胚胎工程 一、单选题 1．（23-24高二下·江苏无锡·期末）等渗溶液对维持细胞形态、结构和功能有重要意义。下列实验不是在等渗溶液中进行的是（    ） A．观察植物组织细胞的有丝分裂和减数分裂 B．用叶绿体悬浮液研究光合作用过程和条件 C．动物细胞的原代培养、传代培养及制备杂交瘤细胞 D．研究红细胞对不同溶质分子的通透性 2．（23-24高二下·江苏苏州·期末）96孔板是现代生物技术与工程中常用的多孔板。相关叙述错误的是（    ） A．克隆化培养时将细胞悬液稀释到3-10个细胞/mL，每孔加入稀释液1mL B．培养杂交瘤细胞时需将96孔板置于含有95%空气和5%CO₂的培养箱中 C．借助抗原-抗体杂交技术检测培养孔中的杂交瘤细胞是否能产生所需抗体 D．96孔板还可应用于微生物菌种的高通量筛选和微生物药物的筛选等方面 3．（23-24高二下·江苏苏州·期末）应用动物细胞培养技术进行人造肉生产逐渐走向商业化，其基本流程如图所示。相关叙述正确的是（    ） A．过程甲选择幼龄组织的原因是其全能性更易表达 B．过程乙添加的动物血清需先用高压蒸汽进行灭菌 C．过程丙应采用开放式培养以减少培养基pH波动 D．人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞吸附 4．（23-24高二下·江苏南通·期末）下列关于细胞工程的叙述，正确的是（    ） A．利用植物组织培养技术培养茎尖可获得抗病毒植株 B．植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术都可产生异源多倍体 C．利用植物细胞培养技术可获得某些难以通过化学合成途径得到的产物 D．培养动物细胞的第一代（即第一次细胞增殖）被称为原代培养 5．（23-24高二下·江苏徐州·期末）下列关于猪输卵管上皮细胞体外培养及应用的叙述错误的是（    ） A．实验开始前，实验器械和培养液都必须经过高压蒸汽灭菌处理 B．细胞培养需要含有95%空气和5%二氧化碳的气体条件 C．定期更换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 D．进行传代培养时，贴壁输卵管上皮细胞需用胰蛋白酶等处理 6．（23-24高二上·江苏盐城·期末）科研人员在制备杂交瘤细胞的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细胞。BsAb可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所示。下列说法正确的是（    ）    A．制备双杂交瘤细胞所依据的原理是抗原抗体反应的特异性 B．BsAb能与T细胞表面抗原CD3结合，激活T细胞发挥体液免疫 C．若利用培养液体外培养杂交瘤细胞，需要定期添加新的培养液 D．一种抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效 7．（23-24高二下·江苏无锡·期末）下列有关细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（    ） A．利用茎尖进行植物组织培养可以增强植物体对病毒的抵抗能力 B．植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术均可催生出异源多倍体 C．胚胎移植前需对早期胚胎进行质量检查和对受体进行免疫检查 D．在胚胎分割移植前可用分割针取囊胚滋养层细胞进行性别鉴定 8．（23-24高二下·江苏无锡·期末）下列关于体细胞克隆猴的相关叙述错误的是（    ） A．在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，必须先对卵母细胞进行去核操作 B．需用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C．用遗传背景相同的克隆猴进行比对分析致病基因，可减少干扰因素 D．体细胞核移植的理论研究较为透彻，技术研究较为滞后 9．（23-24高二下·江苏宿迁·期末）将胚胎干细胞（ES）注射到一个发育中的桑葚胚内，可发育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体。2023年，中国科学家培育出世界上首只高比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”，其多种组织中含有供体干细胞来源的细胞。下列叙述正确的是（　　） A．嵌合食蟹猴中来源于ES细胞的遗传信息都能传递给后代 B．移植之前需要对供体胚胎和受体母猴同时饲喂促性腺激素 C．为了能直观检验嵌合体猴的嵌合率，往往需要对嵌合细胞进行荧光蛋白标记 D．嵌合体猴的遗传物质来自三个亲本，分别是干细胞供体、桑葚胚供体和胚胎移植受体 10．（23-24高二下·江苏南通·期末）肉羊养殖具有投资少、周转快、效益稳的特点。肉羊快速繁殖生产的主要流程如图，相关叙述正确的是（    ） A．雄羊A、雌羊B、雌羊C都是产肉多的优良肉羊 B．集中同期发情处理可实现繁育生产过程同步化 C．用性激素处理雌羊B可以获得更多的受精卵 D．雌羊C对植入的胚胎会发生免疫排斥反应 11．（23-24高二下·江苏徐州·期末）北方白犀牛目前仅剩两头雌性个体，在此之前，研究人员设法保存了少量白犀牛精子用于拯救该物种。下列相关叙述正确的是（    ） A．可利用人工授精、胚胎移植等无性繁殖技术培育北方白犀牛 B．可通过内细胞团的均等分割以获得同卵双胎或多胎的北方白犀牛 C．可利用雌性北方白犀牛体细胞核移植技术进行克隆，得到多头子代后让其自行繁衍 D．可利用两头雌性个体的体细胞两两融合，再将融合细胞培育成新个体 12．（22-23高二下·江苏无锡·期末）2017年，我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，培育流程如图。下列叙述错误的（    ）    A．过程①是将成纤维细胞注入去核的卵母细胞 B．过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分 C．图中过程需用到体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植等技术 D．克隆猴比鼠更适合用作研究人类疾病和进行药物实验的模型动物 13．（22-23高二下·江苏淮安·期末）下列有关胚胎移植的叙述正确的是（　　） A．胚胎移植的受体必须要进行免疫学检查，防止发生对胚胎的免疫排斥 B．胚胎移植的受体必须先用促性腺激素处理，达到同期发情的效果 C．在胚胎移植给受体之后，必须对受体进行妊娠检查，确定其是否受孕 D．受体的遗传物质会影响胚胎遗传特性，因此必须选择遗传特性优良的个体作为受体 14．（22-23高二下·江苏徐州·期末）下图为人体受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是（　　）    A．雄原核和雌原核相互融合是①过程完成的标志 B．a、b分别是原肠胚和囊胚时期 C．①②③过程细胞只分裂不分化 D．b时期可分离获得胚胎干细胞 15．（22-23高二下·江苏常州·期末）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（    ） A．进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查 B．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施 C．早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育 D．胚胎分割时可以分离内细胞团细胞做DNA分析用于性别鉴定 16．（22-23高二下·江苏泰州·期末）下列有关单克隆抗体制备的说法，错误的是（    ） A．一般将抗原注射给和骨髓瘤细胞来源同一品系的动物 B．从脾脏中获取B淋巴细胞是因其为淋巴细胞富集场所 C．获取的杂交瘤细胞并非都能产生目的抗体故仍需筛选 D．杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔可大规模生产单克隆抗体 17．（22-23高二下·江苏淮安·期末）下图所示是动物细胞培养的部分操作流程，下列有关叙述错误的是（　　）    A．动物细胞培养液中可添加抗生素，防止杂菌污染 B．图中分装之后的培养，称为传代培养 C．消化液中应含有胰蛋白酶或胶原蛋白酶，可使细胞分散 D．细胞分装之后可以继续增殖，体现了动物细胞的全能性 18．（22-23高二下·江苏南京·期末）科学家将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞功能的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为iPS细胞用于治疗糖尿病的示意图，下列相关叙述错误的是（    ） A．干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B．诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性 C．除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞 D．将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应 二、多选题 19．（23-24高二上·江苏盐城·期末）小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．进行胚胎分割时，取a细胞做性别鉴定 B．卵裂期有机物总量变少，每个细胞相对表面积变小 C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 20．（22-23高二下·江苏盐城·期末）下列有关胚胎工程的叙述，正确的是（    ） A．通过注射促性腺激素可促进雌性供体超数排卵 B．从卵巢中采集的卵母细胞与刚采集的精子无需处理，直接进行体外受精 C．为提高胚胎分割后移植的成功率，需将囊胚的滋养层均等分割 D．通过胚胎移植能发挥优良母畜的繁殖能力，加速优良畜种的推广应用 21．（22-23高二下·江苏泰州·期末）植物组织培养、单克隆抗体的制备、微生物培养过程都需要进行的是（    ） A．制备细胞悬液 B．培养基灭菌 C．严格无菌操作 D．抗原抗体检测 一、单选题 1．（23-24高二下·江苏淮安·期末）下列关于生物技术操作或应用的叙述错误的是（　　） A．动物细胞培养时常拧松培养瓶瓶盖，以避免杂菌污染并确保细胞所需的气体供应 B．核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，此操作需刺穿透明带 C．克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植 D．胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率 2．（23-24高二下·江苏连云港·期末）科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子 B．与植物原生质体融合相比，步骤①可用灭活的病毒诱导细胞融合 C．步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％O2和5％CO2的气体环境 D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 3．（23-24高二下·江苏泰州·期末）无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（    ） A．不同来源的血清成分存在一定差异 B．血清的质量稳定性和储存时间有限 C．无血清培养液利于无关变量的控制 D．无血清培养液能满足细胞所有需求 4．（23-24高二下·江苏·期末）下列关于细胞工程的叙述，正确的是（    ） A．提高酒精浓度和处理时间可提高外植体消毒效果 B．再分化过程中向生芽培养基中加入细胞分裂素可诱导生根 C．灭活的新冠病毒通常不能用于诱导人和鼠体细胞的融合 D．染色体端粒缺乏导致成年动物的体细胞难以实现全能性 5．（23-24高二上·江苏南通·期末）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，相关叙述正确的是（　　） A．过程①常用聚乙二醇诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 B．过程②筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体 C．过程③采用抗原-抗体杂交反应进行特定杂交瘤细胞的筛选 D．需要给小鼠注射免疫抑制剂，抑制B细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥 6．（22-23高二下·江苏徐州·期末）Transwell实验可模拟肿瘤细胞侵袭过程。取用无血清培养液制成的细胞悬液加入上室中，下室为有血清培养液，上下层培养液以一层具有一定孔径的聚碳酸酯膜（膜上铺有基质胶）分隔开，放入培养箱中培养，通过计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力。下列说法错误的是（　　）        A．进入下室的肿瘤细胞数量越多，说明肿瘤细胞的分裂能力越强 B．可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理使肿瘤细胞分散开 C．肿瘤细胞可分泌水解酶将基质胶中的成分分解后进入下室 D．血清培养液中含有某些因子促使肿瘤细胞向下室移动 7．（23-24高二下·江苏扬州·期末）下图为我国科学家利用体细胞克隆技术，获得了两只猕猴“中中”和“华华”的简要流程。相关叙述正确的是（    ） A．图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等 B．这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎 C．C猴会对移入子宫的外来胚胎产生一定程度的免疫排斥反应 D．利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些 8．（23-24高二下·江苏南通·期末）研究发现Oct4、Nanog和SMYD3基因能影响体细胞克隆猪早期胚胎发育。Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，过表达SMYD3基因能促进Nanog和Oct4基因表达，并显著提高克隆猪的囊胚发育率。相关叙述正确的是（    ） A．获得体细胞克隆猪主要涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术 B．选用去核的卵母细胞作为核受体是因为其分裂能力强，代谢旺盛 C．可采用电刺激法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 D．Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，且在囊胚期发挥相同的作用 9．（23-24高二下·江苏连云港·期末）下列关于生物技术的相关叙述正确的是（    ） A．利用植物细胞培养技术生产紫杉醇，可提高单个细胞中紫杉醇的产量 B．植物体细胞杂交之前需在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁 C．克隆牛的培育涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术 D．胚胎分割技术属于无性繁殖，可提高胚胎移植的成功率 10．（23-24高二下·江苏盐城·期末）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得多能干细胞，继而利用多能干细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下图所示，下列叙述正确的是（　　） A．对克隆鼠 X 进行性别鉴定时应从滋养层处取样 B．将克隆鼠的肝脏移植给灰鼠一定可避免免疫排斥反应 C．黑鼠和白鼠不需要进行同期发情处理 D．胚胎早期发育时，桑葚（椹）胚内部开始出现含液体的腔 11．（23-24高二下·江苏淮安·期末）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（　　） A．①过程需要将未成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理得到成熟的精子 B．②采用体外受精技术，受精卵中的遗传信息仅来自于父母双方 C．②③的培养液成分相同，且图中转基因鼠与克隆鼠的生殖方式相同 D．上述过程中，可对提供卵细胞的母体使用促性腺激素使其超数排卵，对代孕母体使用相关激素使其同期发情 12．（23-24高二下·江苏泰州·期末）普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（    ）    A．克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A B．因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响 C．克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似 D．融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达 13．（23-24高二上·江苏盐城·期末）目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（    ）    A．受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段 B．排卵是指卵泡从卵巢中排出，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期 C．若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成为MP2 D．这对双胞胎来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的染色体不一定不同 14．（23-24高二下·江苏泰州·期末）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（    ） A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核 B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞 C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 15．（23-24高二下·江苏·期末）鲫鱼是一种淡水湖泊中的常见经济鱼类，其早期胚胎发育经历受精卵→卵裂期→囊胚期→原肠胚期→神经胚期。下列相关叙述正确的是（    ） A．卵裂期卵黄不断减少，胚胎从外界吸收的营养不断增加 B．原肠胚期开始胚层分化，其中外胚层来自囊胚的滋养层细胞 C．体外受精得到的鲫鱼受精卵在胚胎移植时不需添加免疫抑制剂 D．鲫鱼与人具有相似的胚胎发育阶段，为共同由来学说提供了证据 二、多选题 16．（23-24高二下·江苏南通·期末）研究发现，在肿瘤微环境中细胞毒性T细胞高表达抑制性受体（TIGIT），该受体与肿瘤细胞表面的CD155结合后，细胞毒性T细胞活性被抑制，从而使肿瘤细胞处于免疫耐受状态，不被细胞毒性T细胞杀伤。相关叙述错误的是（    ） A．细胞毒性T细胞对肿瘤细胞的杀伤体现了免疫系统的防御功能 B．细胞毒性T细胞与肿瘤细胞表面抗原特异性结合后即被活化 C．肿瘤微环境使细胞毒性T细胞发生基因突变从而高表达TIGIT D．使用TIGIT的单克隆抗体可解除肿瘤细胞的免疫耐受状态 17．（23-24高二下·江苏淮安·期末）骨关节炎是犬类常见的疾病，导致软骨损伤和疼痛。神经生长因子（NGF）通过与细胞表面受体（NGFRs）的相互作用，调节骨关节炎的疼痛感知。科研人员利用杂交瘤细胞技术，开发出能结合NGF 并阻断其与受体结合的单克隆抗体（mAb）。下列相关叙述正确的有（　　） A．制备单克隆抗体（mAb）的过程中至少要经过两次筛选，其原理和目的均不同 B．杂交瘤细胞无需识别 NGF 就能产生mAb C．体外扩大培养能产生 mAb的杂交瘤细胞需要用胰蛋白酶处理以防止发生接触抑制 D．在实际应用中还应对 mAb 进行一定程度的改造以减轻可能对犬产生的副作用 18．（23-24高二下·江苏·期末）细胞内分子伴侣可识别并结合含有短肽序列KFERQ的目标蛋白形成复合体，该复合体与溶酶体膜上的受体L结合后，目标蛋白进入溶酶体被降解。该过程可通过降解α-酮戊二酸合成酶，调控细胞内α-酮戊二酸的含量，从而促进胚胎干细胞分化。下列说法正确的有（    ） A．α-酮戊二酸合成酶的降解产物能被细胞再利用 B．若在体外培养胚胎干细胞，需要定期更换培养液 C．抑制受体L合成有利于胚胎干细胞的分化 D．复合体与溶酶体膜上的受体L结合体现了生物膜信息交流的功能 19．（23-24高二上·江苏南京·期末）敲除大鼠心肌细胞H的T基因，对照组与敲除组的H细胞在培养瓶中贴壁生长，检测两组细胞的数量变化，结果如图所示。下列相关叙述合理的是（    ） A．体外培养H细胞需要添加动物血清 B．可用胰蛋白酶处理H细胞便于计数 C．敲除T基因的H细胞失去了分裂能力 D．提高T基因表达可能促进心脏损伤修复 20．（23-24高二下·江苏徐州·期末）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列相关叙述正确的有（    ） A．①过程中精子获能后膜流动性增加 B．②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质不都来自于父母双方 C．③过程形成的早期胚胎需要发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D．④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 21．（23-24高二下·江苏南京·期末）下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（    ） A．移入子宫的外来胚胎，在受体体内会发生免疫排斥反应 B．早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育 C．受精过程中，透明带处会出现阻止多精入卵的生理反应 D．对桑椹胚进行胚胎分割移植时，应将内细胞团均等分割 22．（23-24高二上·江苏盐城·期末）胚胎工程的发展，实现了优良家畜的大量繁殖。下列有关叙述错误的是（    ） A．试管牛、试管羊的产生属于无性繁殖 B．利用胚胎分割技术可获得多个基因型相同的胚胎 C．饲喂促性腺激素有助于供体母牛排出比自然情况下更多的次级卵母细胞 D．用Ca2+载体法可以促进皮肤细胞与去核卵母细胞融合 23．（23-24高二上·江苏南通·期末）医学和农业生产上经常应用胚胎工程技术，相关叙述错误的是（　　） A．为使雌性动物超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．可以使用雄性动物新鲜的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用 C．早期胚胎中初次发生分化的细胞一部分形成内细胞团，将来发育成胎盘和胎膜 D．为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割等无性繁殖技术 三、解答题 24．（23-24高二下·江苏宿迁·期末）5-氟尿嘧啶 （5-FU）是一种抗肿瘤药物，广泛应用于肿瘤的治疗。研究人员将5-FU与宫颈癌细胞膜抗原（CA125）的特异性抗体（OC125）结合制备抗体偶联药物，生产OC125过程如下图所示。回答下列问题。 (1)小鼠免疫时，需将CA125先后多次接种于小鼠体内，目的是 。 (2)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加 等天然成分。同时，为了维持培养液的pH和供细胞代谢利用，需要提供的气体分别是 。 (3)研究发现获得的单克隆抗体能够检测含量很低的CA125，说明单克隆抗体具有 的特点，与直接对患者使用细胞毒性药物相比，抗体偶联药物的优点是 。 (4)与植物体细胞杂交相比，图中特有的诱导融合的方法是 。该实验过程中需进行两次筛选，对筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。选出特定的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养，最终从 中获取大量的单克隆抗体。 25．（23-24高二下·江苏扬州·期末）肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)是人体心肌细胞中的肌钙蛋白的一种亚基，其在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：    (1)细胞培养中，可采用 的方法防止有害代谢物的积累。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，3次注射后的第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗体阳性检测，之后经稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：    据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的 结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是 ，另一方面 从而通过测定产物量来判断待测抗原量。 (4)杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为 (填“合成培养基”或“天然培养基”)，但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入 等成分。 (5)杂交瘤细胞与普通的动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有 的特点，因此后者进一步传代培养时，需要定期用 处理。 26．（23-24高二下·江苏徐州·期末）牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题： (1)以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的 ，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上， 细胞不能生长，从而筛选获得杂交瘤细胞。 (2)杂交瘤细胞 （填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体 （填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。 (3)将上述筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种 个杂交瘤细胞以实现 ，然后通过ELISA法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与 结合的培养孔为阳性孔。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，最终从 中获取大量抗VspX抗体。 (4)将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示 ，表明抗VspX抗体具有 。    27．（23-24高二下·江苏盐城·期末）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图1所示。单克隆抗体的制备流程如图2所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体 （填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是 。 (2)图2中制备抗EV71单克隆抗体时，选用 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。 (3)相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是 ，经诱导融合后，在融合体系中会出现未融合的细胞以及多种融合的细胞，其原因是 。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交瘤细胞。将其接种到96孔板，进行 培养和 。 (4)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： ①固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 。 ②研究人员获得三种抗EV71单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行 组实验，检测并比较各组实验的产物量。 (5)烟草具有生长周期短、生长环境要求低、叶片生物量大等优点，是良好的植物生物反应器。与动物细胞培养相比，利用烟草生物反应器生产抗体的优点有 。 ①可利用生物膜系统对蛋白质进行加工 ②需要无菌、无毒环境 ③不需要较复杂的培养基 ④抗体易分离提纯 28．（23-24高二下·江苏无锡·期末）雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。请回答下列问题： (1)为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采集小鼠卵母细胞，与经过 处理的成年健康公鼠精子在适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 （填“单”“双”或“三”）亲的遗传物质。 (2)研究人员对体外受精胚胎性别进行鉴定，显示雄性胚胎/雌性胚胎的比例高于自然生产（IVO）胚胎。为进一步揭示体外受精的胚胎性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。 ①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， 。 ②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 （选填“高于”、“等于”或“低于”）IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。 (3)已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。 结果显示 。 (4)综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发 ，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 29．（23-24高二下·江苏徐州·期末）癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。    (1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1.PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。单克隆抗体的优点在于 。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是 。然后取小鼠的脾脏细胞用 试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 (2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如图2。    ①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成 ，并加入多孔板培养槽中的 （填“细胞”或“上清液”），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表 。 (3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞以产生双特异性抗体PSMA×CD28，可诱导T细胞定向杀伤肿瘤细胞，如图3。    ①制备双杂交瘤细胞过程：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 ②双特异性抗体还可以携带抗肿瘤药物应用于肿瘤治疗，其优势是 。 30．（23-24高二上·江苏盐城·期末）癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。      (1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1,如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于 。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是 。然后取小鼠的脾脏细胞用 试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 (2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如上图。 ①在检测时需要将PD-1蛋白固定于周相载体表面制成 ,并加入多孔板培养槽中的 （细胞、上清液），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表 。 (3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA,还能结合CD28的双特异性抗体PSMAXCD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图2。制备过程为：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会 。因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。    (4)在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，除了单克隆抗体治疗外，还可以进行过继性细胞治疗，过继性细胞治疗相关过程如图所示过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有 （答出2点），培养过程中出现接触抑制现象时，可用 酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。    31．（23-24高二下·江苏泰州·期末）在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题： (1)为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射 ，以期获得更多 的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为 的CO₂培养箱。 (2)图1中可运用 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜的 功能。图中筛选2运用 等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 (3)根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是 ，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。 (4)治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量) 由图2可知，PD-L1的抗体对 肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是 。β-action基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-action基因表达量的目的是 。 32．（23-24高二上·江苏南京·期末）雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。 (1)为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采用超数排卵方法采集小鼠 期卵母细胞，另一方面，将成年健康公鼠的精子在体外条件下进行 处理，将二者置于适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 （单/双/三）亲的遗传物质。 (2)研究人员对体外受精胎儿性别进行鉴定，表中结果显示胎儿性别比例（雄/雌） （选填“高于”、“等于”或“低于”）自然生产（IVO）胎儿的性别比例。 组别 胚胎数 活仔率（%） 雄/雌 IVO 81 56.25 1.08 IVF 82 45.58 1.48 (3)为进一步揭示体外受精的胎儿性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。 ①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， 。 ②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 （选填“高于”、“等于”或“低于”）IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。 ③已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。 结果显示 。 (4)综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎 ，引发 ，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 33．（23-24高二上·江苏南通·期末）人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：    (1)人参与西洋参杂交存在花期不遇、F1代结实率低及难获得F2代的现象，说明两者之间存在 ，是两个不同的物种。人参和西洋参含有人参皂苷，可以作为药物，体现了生物多样性的 价值。 (2)过程①称为 。过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是 。 (3)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见下图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。杂种胚中的大多数种类的皂苷的含量均高于其他两种，这体现了 。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。    (4)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果： ①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是 。培养条件为5%CO2，作用是 、饱和湿度，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式： 。根据实验结果可以得出的结论有 。    34．（23-24高二上·江苏盐城·期末）I.供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。 (1)核移植的受体是 细胞，核移植后的重构胚发育至 阶段可利用 技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的 可用于医学研究。 (2)RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高， 越低。    II.兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎的结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题： (3)从盆兰花获取茎尖，对其进行 处理后接种于培养基，茎尖通过 后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。 (4)将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中 和 的含量存在差异。 (5)某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸； ;脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是： 。 35．（23-24高二下·江苏无锡·期末）纳米酶是一类蕴含酶学特性的纳米材料，具有催化活性高、稳定、低成本和易于大规模生产等特点，在生化检测、环境管理、疾病诊断等许多领域显示出了巨大的应用潜力。研究人员人工制备了能催化H2O2分解的纳米酶，对其作用特性展开一系列实验，下图1、2表示相关实验结果，图中“△DO”表示加入H2O25min后反应体系中溶氧量的变化。请回答下列问题：    (1)与无机催化剂相比，纳米酶的催化效率更高，原因是 。实验测得的△DO值反映了 。 (2)图1为探究 的实验结果，实验中需控制的无关变量有 （写出三个），由此图可得出的结论是 。 (3)图2为探究草甘膦（GLY）对纳米酶作用的影响的实验结果，由此图可知GLY （填“促进”或“抑制”或“不影响”） 纳米酶的作用。使用该实验体系测得某土壤样品△DO比值为0．2，则该土壤样品的草甘膦浓度约为 ，该探究结果可应用于环境中草甘膦浓度的定量测定。 (4)纳米酶试纸条可用于食品中病原体（如金黄色葡萄球菌的生物标志物蛋白A）的快速检出，图3为试纸层析技术检测原理示意图。 ①制备检测试纸上的单克隆抗体时，需将 注入小鼠体内进行免疫并分离出 细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合，获得的细胞至少需经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是 、 。 ②检测结束后，T线不显色，C线显色，说明检测结果为 （填“阳性”“阴性”或“无效”）。 / 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题03 动物细胞工程和胚胎工程 一、单选题 1．（23-24高二下·江苏无锡·期末）等渗溶液对维持细胞形态、结构和功能有重要意义。下列实验不是在等渗溶液中进行的是（    ） A．观察植物组织细胞的有丝分裂和减数分裂 B．用叶绿体悬浮液研究光合作用过程和条件 C．动物细胞的原代培养、传代培养及制备杂交瘤细胞 D．研究红细胞对不同溶质分子的通透性 【答案】A 【分析】植物组织培养的原理是细胞的全能性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。 【详解】A、观察植物组织细胞的有丝分裂和减数分裂时经过制作装片的过程细胞已经死亡，因此不需要在等渗溶液中进行，A正确； B、为维持叶绿体正常的形态，用叶绿体悬浮液研究光合作用过程和条件需要在等渗溶液中进行，B错误； C、在低渗溶液中动物细胞会吸水可能涨破，在高渗溶液中动物细胞会失水皱缩，因此为维持动物细胞正常的形态和功能，动物细胞的原代培养、传代培养及制备杂交瘤细胞需要在等渗溶液中进行，C错误； D、研究红细胞对不同溶质分子的通透性，需要保证细胞正常的形态和功能，需要等渗溶液，D错误； 故选A。 2．（23-24高二下·江苏苏州·期末）96孔板是现代生物技术与工程中常用的多孔板。相关叙述错误的是（    ） A．克隆化培养时将细胞悬液稀释到3-10个细胞/mL，每孔加入稀释液1mL B．培养杂交瘤细胞时需将96孔板置于含有95%空气和5%CO₂的培养箱中 C．借助抗原-抗体杂交技术检测培养孔中的杂交瘤细胞是否能产生所需抗体 D．96孔板还可应用于微生物菌种的高通量筛选和微生物药物的筛选等方面 【答案】A 【分析】在制备单克隆抗体的过程中，需要进行两次筛选。第一次用选择培养基进行筛选，目的是获得杂交瘤细胞；第二次筛选利用克隆化培养和抗体检测，目的是获得产生所需抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、克隆化培养时将细胞悬液稀释到3-10个细胞/mL，每孔加入稀释液0.1mL，使每个孔内不多于一个细胞，A错误； B、动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必须的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，培养杂交瘤细胞时需将96孔板置于含有95%空气和5%CO2的培养箱中，B正确； C、在制备单克隆抗体的过程中，在第二次筛选中利用克隆化培养和抗体检测，获得产生所需抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、96孔板还可应用于微生物菌种的高通量筛选和微生物药物的筛选等方面，D正确。 故选A。 3．（23-24高二下·江苏苏州·期末）应用动物细胞培养技术进行人造肉生产逐渐走向商业化，其基本流程如图所示。相关叙述正确的是（    ） A．过程甲选择幼龄组织的原因是其全能性更易表达 B．过程乙添加的动物血清需先用高压蒸汽进行灭菌 C．过程丙应采用开放式培养以减少培养基pH波动 D．人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞吸附 【答案】D 【分析】体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。 【详解】A 、动物细胞培养的原理是细胞增殖，没有体现全能性，A错误； B、高压蒸汽灭菌会破坏动物血清中的营养成分，故动物血清不能高压蒸汽灭菌，B错误； C、动物细胞培养应避免杂菌污染，开放式培养很可能被空气中的杂菌感染，C错误； D、动物细胞培养时会有细胞出现贴壁生长的特点，故人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞吸附，D正确。 故选D。 4．（23-24高二下·江苏南通·期末）下列关于细胞工程的叙述，正确的是（    ） A．利用植物组织培养技术培养茎尖可获得抗病毒植株 B．植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术都可产生异源多倍体 C．利用植物细胞培养技术可获得某些难以通过化学合成途径得到的产物 D．培养动物细胞的第一代（即第一次细胞增殖）被称为原代培养 【答案】C 【分析】植物组织培养是指将离体的植 物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给 予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。 【详解】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的 病毒极少，甚至无病毒，利用植物组织培养技术培养茎尖可获得脱毒植株，A错误； B、植物体细胞杂交技术可产生异源多倍体，而动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术，没有获得完整生物体，B错误； C、化学合成某种物质可能需要特殊的底物或者特别的条件，因而无法在体外实现，而利用植物细胞培养技术可能获得某些无法通过化学合成途径得到的产物，C正确； D、动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，D错误。 故选C。 5．（23-24高二下·江苏徐州·期末）下列关于猪输卵管上皮细胞体外培养及应用的叙述错误的是（    ） A．实验开始前，实验器械和培养液都必须经过高压蒸汽灭菌处理 B．细胞培养需要含有95%空气和5%二氧化碳的气体条件 C．定期更换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 D．进行传代培养时，贴壁输卵管上皮细胞需用胰蛋白酶等处理 【答案】A 【分析】动物细胞培养技术是指从动物体内获得相关组织，分散成单个细胞后，模拟体内环境，在温度适宜、营养充足、无菌等条件下培养，使其继续生长，增殖的技术。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 【详解】A、实验开始前，不同的实验器械要用不同的灭菌方法，如：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具需要采用干热灭菌法，A错误； B、细胞培养需要含有95%空气和5%CO2的气体条件，95%空气是细胞代谢必需的，5%的CO2能维持培养液的pH，B正确； C、动物细胞培养过程中，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染，此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，C正确； D、在进行传代培养时，贴壁输卵管上皮细胞需用胰蛋白酶等处理，分散为单个细胞制成细胞悬液，然后分瓶培养，D正确。 故选A。 6．（23-24高二上·江苏盐城·期末）科研人员在制备杂交瘤细胞的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细胞。BsAb可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所示。下列说法正确的是（    ）    A．制备双杂交瘤细胞所依据的原理是抗原抗体反应的特异性 B．BsAb能与T细胞表面抗原CD3结合，激活T细胞发挥体液免疫 C．若利用培养液体外培养杂交瘤细胞，需要定期添加新的培养液 D．一种抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效 【答案】D 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备双杂交瘤细胞所依据的基本原理有动物细胞增殖和细胞膜的流动性，筛选过程利用了抗原抗体反应的特异性原理及培养基的选择，A错误； B、据图可知，BsAb能与T细胞表面抗原CD3结合，同时能与肿瘤细胞的EGFR结合，该过程会激活T细胞，释放颗粒酶穿孔素，使肿瘤细胞凋亡，发挥了细胞免疫作用，B错误； C、细胞生长增殖过程中会产生大量的代谢产物，代谢产物的大量积累会对细胞自身造成伤害，因此需要定期更换培养液，C错误； D、抗原和抗体可特异性结合，抗原的部分结构改变后，可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效而另一种单抗仍有效应的情况，D正确。 故选D。 7．（23-24高二下·江苏无锡·期末）下列有关细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（    ） A．利用茎尖进行植物组织培养可以增强植物体对病毒的抵抗能力 B．植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术均可催生出异源多倍体 C．胚胎移植前需对早期胚胎进行质量检查和对受体进行免疫检查 D．在胚胎分割移植前可用分割针取囊胚滋养层细胞进行性别鉴定 【答案】D 【分析】动物细胞融合技术只能得到杂种细胞，不能得到杂交动物体，因此，它的原理只有细胞膜的流动性，而没有细胞全能性。 【详解】A、利用茎尖进行植物组织培养可以获得脱毒苗，使植物不含病毒，但不能增强植物体对病毒的抵抗能力，A错误； B、植物体细胞杂交技术可产生异源多倍体，但动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术，没有获得完整动物体，B错误； C、胚胎移植前需要对早期胚胎进行质量检查，但不需要对受体进行免疫检查，C错误； D、在胚胎分割前，可用分割针取囊胚滋养层细胞进行性别鉴定，D正确。 故选D。 8．（23-24高二下·江苏无锡·期末）下列关于体细胞克隆猴的相关叙述错误的是（    ） A．在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，必须先对卵母细胞进行去核操作 B．需用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C．用遗传背景相同的克隆猴进行比对分析致病基因，可减少干扰因素 D．体细胞核移植的理论研究较为透彻，技术研究较为滞后 【答案】D 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、为了使使克隆出的动物个体的核遗传物质全部来自供体细胞，核移植时必须先对卵母细胞进行去核操作，A正确； B、重组胚胎(重构胚)需要用物理或化学的方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程，然后将其移植到同种的、生理状态相 同的其他雌性受体体内，使之继续发育，B正确； C、遗传背景相同的克隆猴，能够保证实验过程中选取材料的一致性，使实验结果更具有说服力，C正确； D、相对于技术研究，核移植的理论研究较为滞后，需要与发育生物学、细胞生物学和分子遗传学等学科更深层次的理论研究 相结合，D错误。 故选D。 9．（23-24高二下·江苏宿迁·期末）将胚胎干细胞（ES）注射到一个发育中的桑葚胚内，可发育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体。2023年，中国科学家培育出世界上首只高比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”，其多种组织中含有供体干细胞来源的细胞。下列叙述正确的是（　　） A．嵌合食蟹猴中来源于ES细胞的遗传信息都能传递给后代 B．移植之前需要对供体胚胎和受体母猴同时饲喂促性腺激素 C．为了能直观检验嵌合体猴的嵌合率，往往需要对嵌合细胞进行荧光蛋白标记 D．嵌合体猴的遗传物质来自三个亲本，分别是干细胞供体、桑葚胚供体和胚胎移植受体 【答案】C 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、嵌合幼猴中来源于ES细胞的遗传信息是否遗传给后代，取决于基因的表达状况和存在位置，基因在不同的细胞中表达状况不同，若ES存在于体细胞中，则不会遗传给后代，所以，来源于ES细胞的遗传信息不一定能传给后代，A错误； B、促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能饲喂，B错误； C、对嵌合细胞进行荧光蛋白标记，根据荧光的颜色变化情况就能直观检验嵌合体猴的嵌合率，C正确； D、嵌合体猴的遗传物质来自两个亲本，分别是干细胞供体、桑葚胚供体，而胚胎移植受体是提供孕育环境，D错误。 故选C。 10．（23-24高二下·江苏南通·期末）肉羊养殖具有投资少、周转快、效益稳的特点。肉羊快速繁殖生产的主要流程如图，相关叙述正确的是（    ） A．雄羊A、雌羊B、雌羊C都是产肉多的优良肉羊 B．集中同期发情处理可实现繁育生产过程同步化 C．用性激素处理雌羊B可以获得更多的受精卵 D．雌羊C对植入的胚胎会发生免疫排斥反应 【答案】B 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、雌羊C作为代孕个体，不一定是产肉多的优良肉羊，A错误； B、集中同期发情处理可保证胚胎同步着床，实现繁育生产过程同步化，B正确； C、可用促性腺激素处理，使雌羊B排出更多的卵子，即超数排卵处理，C错误； D、雌羊C对植入的胚胎不会发生免疫排斥反应，D错误。 故选B。 11．（23-24高二下·江苏徐州·期末）北方白犀牛目前仅剩两头雌性个体，在此之前，研究人员设法保存了少量白犀牛精子用于拯救该物种。下列相关叙述正确的是（    ） A．可利用人工授精、胚胎移植等无性繁殖技术培育北方白犀牛 B．可通过内细胞团的均等分割以获得同卵双胎或多胎的北方白犀牛 C．可利用雌性北方白犀牛体细胞核移植技术进行克隆，得到多头子代后让其自行繁衍 D．可利用两头雌性个体的体细胞两两融合，再将融合细胞培育成新个体 【答案】B 【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【详解】A、人工授精有精卵结合形成受精卵的过程，为有性繁殖技术，A错误； B、可在体视显微镜下进行内细胞团的均等分割以获得同卵双胎或多胎的北方白犀牛，B正确； C、利用雌性北方白犀牛体细胞核移植技术进行克隆，得到的子代均为雌性，无法相互交配繁殖，C错误； D、由于动物细胞全能性的限制，目前仍无法利用动物细胞融合技术培育动物新个体，D错误。 故选B。 12．（22-23高二下·江苏无锡·期末）2017年，我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，培育流程如图。下列叙述错误的（    ）    A．过程①是将成纤维细胞注入去核的卵母细胞 B．过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分 C．图中过程需用到体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植等技术 D．克隆猴比鼠更适合用作研究人类疾病和进行药物实验的模型动物 【答案】C 【分析】图示的是动物细胞核移植技术，①代表利用显微注射将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②代表体外早期胚胎培养，③代表胚胎移植。 【详解】A、过程①是利用显微注射将成纤维细胞注入到去核的卵母细胞中，A正确； B、过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分，以满足动物细胞生长所需的特殊营养物质，B正确； C、图中过程需用到细胞培养、胚胎移植等技术，没用到体外受精技术，C错误； D、因为猴的亲缘关系与人更为接近，与人类基因更为相近，所以克隆猴比鼠更适合用作研究人类疾病和进行药物实验的模型动物，D正确。 故选C。 13．（22-23高二下·江苏淮安·期末）下列有关胚胎移植的叙述正确的是（　　） A．胚胎移植的受体必须要进行免疫学检查，防止发生对胚胎的免疫排斥 B．胚胎移植的受体必须先用促性腺激素处理，达到同期发情的效果 C．在胚胎移植给受体之后，必须对受体进行妊娠检查，确定其是否受孕 D．受体的遗传物质会影响胚胎遗传特性，因此必须选择遗传特性优良的个体作为受体 【答案】C 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、胚胎移植的生理学基础之一是母体子宫对植入胚胎基本无免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，能保证胚胎正常发育，故移植前不需要进行免疫学检查，A错误； B、需要对供体用促性腺处理促使其超数排卵，受体不需要此处理方法，B错误； C、胚胎移植入子宫不代表妊娠成功，故需对其进行是否妊娠检查，确定其是否受孕，C正确； D、供体胚胎的遗传物质来自供体母牛和供体公牛，胚胎遗传特性不受受体影响，D错误。 故选C。 14．（22-23高二下·江苏徐州·期末）下图为人体受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是（　　）    A．雄原核和雌原核相互融合是①过程完成的标志 B．a、b分别是原肠胚和囊胚时期 C．①②③过程细胞只分裂不分化 D．b时期可分离获得胚胎干细胞 【答案】A 【分析】胚胎发育过程： （1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加； （2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]； （3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]； （4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。[细胞分化在胚胎期达到最大限度] 2、分析图解：图为受精作用和胚胎发育过程。图中a为囊胚，b为原肠胚。 【详解】A、受精完成的标志是雌雄原核融合，因此，雄原核和雌原核相互融合是①过程（受精）完成的标志，A正确； B、a、b分别是囊胚和原肠胚时期，B错误； C、a表示囊胚期，囊胚期细胞开始出现分化，C错误； D、a表示囊胚期，b为原肠胚，囊胚期的内细胞团细胞为胚胎干细胞，D错误。 故选A。 15．（22-23高二下·江苏常州·期末）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（    ） A．进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查 B．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施 C．早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育 D．胚胎分割时可以分离内细胞团细胞做DNA分析用于性别鉴定 【答案】D 【分析】胚胎移植是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、由于经过同期发情等处理，代孕母体对移植的胚胎不会发生排斥反应，不需要进行免疫检查，A正确； B、体外受精能提高繁殖能力，因此体外受精技术是提高动物品种繁殖能力的有效措施，B正确； C、在胚胎移植时，需要对代孕母体进行同期发情处理，使之与供体处于相同的生理状态，有利于移植后的胚胎发育，C正确； D、胚胎分割时可以分离滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，而由于内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，取内细胞团的细胞对胚胎的影响较大，不利于以后的胚胎发育，D错误。 故选D。 16．（22-23高二下·江苏泰州·期末）下列有关单克隆抗体制备的说法，错误的是（    ） A．一般将抗原注射给和骨髓瘤细胞来源同一品系的动物 B．从脾脏中获取B淋巴细胞是因其为淋巴细胞富集场所 C．获取的杂交瘤细胞并非都能产生目的抗体故仍需筛选 D．杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔可大规模生产单克隆抗体 【答案】D 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、单克隆抗体制备过程中，应选定适当的动物品系。由于免疫动物品系与所采用的骨髓瘤细胞差异越远，产生的杂交瘤细胞稳定性越差，在实际单克隆抗体制备过程中一般采用与骨髓瘤细胞供体来源同一品系的动物进行免疫，A正确； B、骨髓、脾脏和淋巴结等淋巴器官是B淋巴细胞生成、成熟或集中分布的场所，B正确； C、获取的杂交瘤细胞并非都能产生目的抗体，原因：①经抗原处理过的机体脾脏中提取的细胞不一定都是效应B细胞，因而杂交瘤细胞不一定都能产生抗体；②由于一种抗原刺激机体可使机体中存在多种浆细胞，所以杂交瘤细胞中有多种类型，它们产生的抗体不一定是所需的抗体，也不是单一的抗体。因此必须从多种杂交瘤细胞中筛选出能产生针对某一特定抗原决定簇的杂交瘤细胞，C正确； D、将产生特定抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，从小鼠腹水中，就可以获得大量的单克隆抗体，D错误。 故选D。 17．（22-23高二下·江苏淮安·期末）下图所示是动物细胞培养的部分操作流程，下列有关叙述错误的是（　　）    A．动物细胞培养液中可添加抗生素，防止杂菌污染 B．图中分装之后的培养，称为传代培养 C．消化液中应含有胰蛋白酶或胶原蛋白酶，可使细胞分散 D．细胞分装之后可以继续增殖，体现了动物细胞的全能性 【答案】D 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、抗生素能杀死细菌，动物细胞培养液中应添加一定量的抗生素，以防培养过程中杂菌的污染，A正确； B、通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养，将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养，因此图中分装之后的培养，称为传代培养，B正确； C、胰蛋白酶或胶原蛋白酶可使动物组织分散成单个细胞，因此消化液中应含有胰蛋白酶或胶原蛋白酶，可使细胞分散，C正确； D、细胞分装之后可以继续增殖，使得细胞数目增多，没有获得动物个体，因此不能体现动物细胞的全能性，D错误。 故选D。 18．（22-23高二下·江苏南京·期末）科学家将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞功能的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为iPS细胞用于治疗糖尿病的示意图，下列相关叙述错误的是（    ） A．干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B．诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性 C．除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞 D．将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应 【答案】B 【分析】分析题图：将4个关键基因植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞功能的诱导多能干细胞（iPS细胞）。细胞分化的实质是基因的选择性表达，使细胞的形态、结构和功能发生稳定性差异。 【详解】A、动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确； B、诱导iPS细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，B错误； C、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞，C正确； D、用患者自己的体细胞通过体外诱导成胰岛细胞，并将胰岛细胞细胞移植回病人体内，由于移植的细胞是由病人自身细胞得到的，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。 故选B。 二、多选题 19．（23-24高二上·江苏盐城·期末）小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．进行胚胎分割时，取a细胞做性别鉴定 B．卵裂期有机物总量变少，每个细胞相对表面积变小 C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 【答案】ABC 【分析】分析题图：图中a为内细胞团细胞，b为滋养层细胞，其中内细胞团细胞具有发育的全能性，属于胚胎干细胞。 【详解】A、进行胚胎分割时，需要对a内细胞团进行均等分割，进行性别鉴定时，取b滋养层细胞进行，A错误； B、卵裂期是在透明带内进行的分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，故有机物总量减少，每个细胞相对表面积变大，B错误； C、获得胚胎干细胞，首先需要用胰蛋白酶对内细胞团细胞进行处理，使细胞间的胶原蛋白等物质被分解掉，从而使内细胞团分解为单个细胞，并不会分解膜蛋白，C错误； D、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，以维持培养液的酸碱平衡，D正确。 故选ABC。 20．（22-23高二下·江苏盐城·期末）下列有关胚胎工程的叙述，正确的是（    ） A．通过注射促性腺激素可促进雌性供体超数排卵 B．从卵巢中采集的卵母细胞与刚采集的精子无需处理，直接进行体外受精 C．为提高胚胎分割后移植的成功率，需将囊胚的滋养层均等分割 D．通过胚胎移植能发挥优良母畜的繁殖能力，加速优良畜种的推广应用 【答案】AD 【分析】下丘脑分泌促性腺激素释放激素作用于垂体，垂体分泌促性腺激素作用于卵巢，促使卵巢分泌雌激素和孕激素，当血液中的雌激素和孕激素达到一定水平时，雌激素和孕激素通过反馈作用于下丘脑和垂体，抑制下丘脑和垂体的分泌活动。 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。 【详解】A、注射促性腺激素可促进雌性动物性激素的分泌，进而促进生殖细胞的产生，表现为排卵增多，故通过注射促性腺激素可促进雌性供体超数排卵，A正确； B、刚采集的精子需要进行获能处理，从卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养成熟后才能与获能的精子进行体外受精，B错误； C、为提高胚胎分割后移植的成功率，需将囊胚的内细胞团均等分割，C错误； D、通过胚胎移植能发挥优良母畜的繁殖能力，迅速扩大优良畜种的数量，加速优良畜种的推广应用，D正确。 故选AD。 21．（22-23高二下·江苏泰州·期末）植物组织培养、单克隆抗体的制备、微生物培养过程都需要进行的是（    ） A．制备细胞悬液 B．培养基灭菌 C．严格无菌操作 D．抗原抗体检测 【答案】BC 【分析】为了避免污染，植物组织培养、单克隆抗体的制备、微生物培养过程都需要进行灭菌和无菌操作。 【详解】A、植物组织培养无需制备细胞悬液，A错误； BC、三者培养基都需要进行灭菌，和进行严格的无菌操作，以避免污染，BC正确； D、只有单克隆抗体的制备需要进行抗原抗体检测，D错误。 故选BC。 一、单选题 1．（23-24高二下·江苏淮安·期末）下列关于生物技术操作或应用的叙述错误的是（　　） A．动物细胞培养时常拧松培养瓶瓶盖，以避免杂菌污染并确保细胞所需的气体供应 B．核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，此操作需刺穿透明带 C．克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植 D．胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率 【答案】D 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，这与培养箱内的气体可以进入细胞培养皿或培养瓶中，保证细胞对气体的需求,同时避免杂菌污染，A正确； B、核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，显微操作去核法是在刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除卵母细胞核，B正确； C、克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植，C正确； D、胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D错误。 故选D。 2．（23-24高二下·江苏连云港·期末）科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子 B．与植物原生质体融合相比，步骤①可用灭活的病毒诱导细胞融合 C．步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％O2和5％CO2的气体环境 D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、题意显示，科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，据此可推测，该单抗制备过程中需要注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子，A错误； B、步骤①为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导细胞融，是动物细胞特有的方法，B正确； C. 步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％空气和5％CO2的气体环境，C错误； D、抗体—肺癌药物偶联物中b代表肺癌药物，a代表抗体，所以能杀伤肿瘤细胞的为b，D错误。 故选B。 3．（23-24高二下·江苏泰州·期末）无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（    ） A．不同来源的血清成分存在一定差异 B．血清的质量稳定性和储存时间有限 C．无血清培养液利于无关变量的控制 D．无血清培养液能满足细胞所有需求 【答案】D 【分析】血清是成分不完全明确的复杂混合物，且不同批次的血清在质量上存在很大差异，增加了含血清培养基无关比变量的控制难度，无血清培养液利于无关变量的控制。 【详解】AC、不同个体基因不同，所以不同来源的血清成分存在一定差异，无血清培养液利于无关变量的控制，AC正确； B、由于环境的影响，血清的质量稳定性和储存时间有限，B正确； D、血清是成分不完全明确的复杂混合物，无血清培养液能满足细胞基本需求，但不能满足所有需求，D错误。 故选D。 4．（23-24高二下·江苏·期末）下列关于细胞工程的叙述，正确的是（    ） A．提高酒精浓度和处理时间可提高外植体消毒效果 B．再分化过程中向生芽培养基中加入细胞分裂素可诱导生根 C．灭活的新冠病毒通常不能用于诱导人和鼠体细胞的融合 D．染色体端粒缺乏导致成年动物的体细胞难以实现全能性 【答案】D 【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、外植体消毒一般采用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液处理，但处理既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力，提高酒精浓度和处理时间不一定提高外植体消毒效果，A错误； B、在诱导生根时，培养基中应提高生长素的比例和用量；在诱导生芽时，培养基中应提高细胞分裂素的比例和用量，B错误； C、灭活的新冠病毒，能够诱导人和鼠体细胞融合的原理是可以使细胞膜上的分子重新排布，细胞膜打开，相互融合，C错误； D、染色体端粒可保证每条染色体的完整性，控制细胞生长与分裂周期，端粒缺乏会导致成年动物的体细胞难以实现全能性，D正确。 故选D。 5．（23-24高二上·江苏南通·期末）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，相关叙述正确的是（　　） A．过程①常用聚乙二醇诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 B．过程②筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体 C．过程③采用抗原-抗体杂交反应进行特定杂交瘤细胞的筛选 D．需要给小鼠注射免疫抑制剂，抑制B细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥 【答案】C 【分析】分析题图：给小鼠注射HCG，从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞； ①过程将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合； ②过程为杂交瘤细胞的筛选与培养； ③过程为专一抗体检验并筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞； ④过程为体外培养。 【详解】A、①过程为诱导动物细胞融合，常用的诱导因素有灭活的病毒、聚乙二醇、电激等，利用了细胞膜的流动性，A错误； B、②过程为用特定的选择性培养基筛选杂交瘤细胞，在筛选出的杂交瘤细胞中，有的能产生抗HCG抗体，有的不能产生抗HCG抗体，B错误； C、③过程是对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，进而筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，此过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合，C正确； D、由于B细胞和核骨髓瘤细胞均来自于同一只小鼠。因此不需要给小鼠注射免疫抑制剂，D错误。 故选C。 6．（22-23高二下·江苏徐州·期末）Transwell实验可模拟肿瘤细胞侵袭过程。取用无血清培养液制成的细胞悬液加入上室中，下室为有血清培养液，上下层培养液以一层具有一定孔径的聚碳酸酯膜（膜上铺有基质胶）分隔开，放入培养箱中培养，通过计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力。下列说法错误的是（　　）        A．进入下室的肿瘤细胞数量越多，说明肿瘤细胞的分裂能力越强 B．可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理使肿瘤细胞分散开 C．肿瘤细胞可分泌水解酶将基质胶中的成分分解后进入下室 D．血清培养液中含有某些因子促使肿瘤细胞向下室移动 【答案】A 【分析】分析题意和题图：将待测细胞悬液加入膜上铺有基质胶的上室中，下室为有血清培养液，一段时间后计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力，数量越多，则说明癌细胞的侵袭能力越强。 【详解】A、由题意可知，通过计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力，若进入下室的肿瘤细胞数量越多，说明肿瘤细胞的侵袭能力越强，但不能说明肿瘤细胞的分裂能力越强，A错误； B、获得动物组织块后，可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理使动物细胞分散开，制成细胞悬液，B正确； C、一开始将肿瘤细胞加入膜上铺有基质胶的上室中，一段时间后在下室发现肿瘤细胞，说明肿瘤细胞可分泌水解酶将基质胶中的成分分解后进入下室，C正确； D、上室含无血清培养液，下室含血清培养液，加入上室的肿瘤细胞一段时间后出现在下室中，说明血清培养液中含有某些因子促使肿瘤细胞向营养高的下室移动，D正确。 故选A。 7．（23-24高二下·江苏扬州·期末）下图为我国科学家利用体细胞克隆技术，获得了两只猕猴“中中”和“华华”的简要流程。相关叙述正确的是（    ） A．图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等 B．这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎 C．C猴会对移入子宫的外来胚胎产生一定程度的免疫排斥反应 D．利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些 【答案】D 【分析】1、动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 2、图中A猴提供了细胞核，B猴提供了去核的卵细胞，形成融合细胞，将其移植到C猴中产下了2个个体。 【详解】A、图示过程包括核移植技术和胚胎切割移植技术，没有干细胞移植技术，A错误； B、这两只克隆猕猴是同一个个体提供的细胞核发育而来的，所以不是由同一个受精卵发育而来，B错误； C、C猴不会对移入子宫的外来胚胎产生一定程度的免疫排斥反应，C错误； D、胚胎干细胞的全能性比体细胞的全能性高，所以利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些，D正确。 故选D。 8．（23-24高二下·江苏南通·期末）研究发现Oct4、Nanog和SMYD3基因能影响体细胞克隆猪早期胚胎发育。Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，过表达SMYD3基因能促进Nanog和Oct4基因表达，并显著提高克隆猪的囊胚发育率。相关叙述正确的是（    ） A．获得体细胞克隆猪主要涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术 B．选用去核的卵母细胞作为核受体是因为其分裂能力强，代谢旺盛 C．可采用电刺激法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 D．Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，且在囊胚期发挥相同的作用 【答案】C 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、获得体细胞克隆猪是无性生殖，不涉及体外受精，A错误； B、选用去核的卵母细胞作为核受体是因为含有激活细胞核全能性的物质，B错误； C、可采用电刺激法、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程，C正确； D、Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，但是发挥的作用不同，Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，D错误。 故选C。 9．（23-24高二下·江苏连云港·期末）下列关于生物技术的相关叙述正确的是（    ） A．利用植物细胞培养技术生产紫杉醇，可提高单个细胞中紫杉醇的产量 B．植物体细胞杂交之前需在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁 C．克隆牛的培育涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术 D．胚胎分割技术属于无性繁殖，可提高胚胎移植的成功率 【答案】C 【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。 2、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。 【详解】A、细胞产物的工厂化生产，不能提高单个细胞中次生代谢物的含量，但可以通过培养更多的细胞从而提高次生代谢物的产量，A错误； B、植物体细胞杂交之前必须在等渗溶液中用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，如果在低渗溶液中，去除细胞壁以后，植物细胞容易吸水涨破，B错误； C、克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，该技术可加速家畜遗传改良，C正确； D、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术，俗语无性繁殖，但不能提高胚胎移植的成功率，D错误。 故选C。 10．（23-24高二下·江苏盐城·期末）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得多能干细胞，继而利用多能干细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下图所示，下列叙述正确的是（　　） A．对克隆鼠 X 进行性别鉴定时应从滋养层处取样 B．将克隆鼠的肝脏移植给灰鼠一定可避免免疫排斥反应 C．黑鼠和白鼠不需要进行同期发情处理 D．胚胎早期发育时，桑葚（椹）胚内部开始出现含液体的腔 【答案】C 【分析】据图可知，从黑鼠中提取体细胞诱导形成多能干细胞，然后注入到特殊处理使内细胞团不发育的囊胚中，形成的重组囊胚移入到白鼠（代孕母鼠），最终形成克隆鼠X。 【详解】A、克隆鼠X是由多能干细胞发育形成的，与滋养层细胞中遗传物质并不相同，因此对克隆鼠X进行性别鉴定时不能从滋养层处取样，A错误； B、克隆鼠是由黑鼠体细胞诱导形成的多能干细胞发育形成的，与黑鼠遗传特性相同，因此将克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应，但是若发生基因突变，可能会发生免疫排斥反应，B错误； C、黑鼠提供体细胞诱导形成多能干细胞，黑鼠和白鼠不需要进行同期发情处理，灰鼠提供胚胎，灰鼠和白鼠需要进行同期发情处理，C正确； D、胚胎早期发育时，囊胚内部开始出现含液体的腔，D错误。 故选C。 11．（23-24高二下·江苏淮安·期末）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（　　） A．①过程需要将未成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理得到成熟的精子 B．②采用体外受精技术，受精卵中的遗传信息仅来自于父母双方 C．②③的培养液成分相同，且图中转基因鼠与克隆鼠的生殖方式相同 D．上述过程中，可对提供卵细胞的母体使用促性腺激素使其超数排卵，对代孕母体使用相关激素使其同期发情 【答案】D 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】 A 、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体溶液中，用化学药物诱导精子获能， A 错误； B 、②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自于父母双方和外源基因， B 错误； C 、②为体外受精过程，③为早期胚胎培养过程，前者在获能溶液或专用的受精溶液中进行，后者在发育培养基中进行，这两个过程所用培养液的成分不完全相同，且转基因鼠属于有性生殖，克隆鼠为无性生殖，二者的生殖方式不同，C 错误； D 、胚胎移植时，需对供体和受体使用激素进行同期发情处理，以保证胚胎移植入相同的生理环境，同时对提供卵细胞的母体使用促性腺激素使其超数排卵，D 正确。 故选D。 12．（23-24高二下·江苏泰州·期末）普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（    ）    A．克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A B．因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响 C．克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似 D．融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达 【答案】A 【分析】克隆羊培育的原理：通过将体细胞的核植入去核卵细胞的方式，激活染色组的功能，实现体细胞向多能干细胞的跨越。理论上，这样的多能干细胞就有发育为完整生物个体的潜力。 【详解】A、母羊A提供了细胞质，母羊B提供了细胞核，则克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A，A正确； B、代孕母羊C未提供遗传物质，但是为克隆羊提供了发育场所，克隆羊的性状会受其影响，B错误； C、克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利不同，C错误； D、供核母羊提供了已经分化的细胞，融合细胞发育成桑葚胚的过程中发生了基因选择性表达，D错误。 故选A。 13．（23-24高二上·江苏盐城·期末）目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（    ）    A．受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段 B．排卵是指卵泡从卵巢中排出，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期 C．若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成为MP2 D．这对双胞胎来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的染色体不一定不同 【答案】C 【分析】根据图示，半同卵双胞胎的形成过程有两个精子同时进入到一个卵细胞，受精卵中有三个染色体组；有丝分裂过程中，染色体复制，有丝分裂后期形成6个染色体组，通过三极纺锤体将六个染色体组拉开，每一极2个染色体组，其中有两极的染色体各有一组来自双亲，有一极染色体均来自于父亲。细胞分裂后，其中两个细胞发育成个体。 【详解】A、受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，到囊胚期时，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化，A错误； B、排卵是指卵子从卵泡中排出，此时的卵子通常是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞。卵子发育到减数第二次分裂中期才具备受精的能力，故图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期，B错误； C、来自母系的染色体为M，来自父系的染色体为P1、P2，经过复制后，染色体进行组合，若细胞a的染色体组成为MP1，细胞c的染色体均来自父亲，其染色体组成为P1P2，细胞b的染色体组成为MP2，C正确； D、细胞a的染色体组成为MP1，细胞b的染色体组成为MP2，这对双胞胎发育为姐弟，来源于父亲的性染色体不同，D错误。 故选C。 14．（23-24高二下·江苏泰州·期末）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（    ） A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核 B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞 C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 【答案】C 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 【详解】AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核，AB正确； C、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C错误； D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D正确。 故选C。 15．（23-24高二下·江苏·期末）鲫鱼是一种淡水湖泊中的常见经济鱼类，其早期胚胎发育经历受精卵→卵裂期→囊胚期→原肠胚期→神经胚期。下列相关叙述正确的是（    ） A．卵裂期卵黄不断减少，胚胎从外界吸收的营养不断增加 B．原肠胚期开始胚层分化，其中外胚层来自囊胚的滋养层细胞 C．体外受精得到的鲫鱼受精卵在胚胎移植时不需添加免疫抑制剂 D．鲫鱼与人具有相似的胚胎发育阶段，为共同由来学说提供了证据 【答案】D 【分析】胚胎发育过程： （1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加； （2）桑椹（葚）胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]； （3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]； （4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。[细胞分化在胚胎期达到最大限度] 【详解】A、卵裂是指受精卵的早期分裂，在卵裂期内，一个细胞或细胞核不断地快速分裂，将体积极大的受精卵细胞分割成许多较小的有核细胞的过程，在此过程中,由于受精卵并不从外界吸收营养，A错误； B、原肠胚期开始胚层分化，其中外胚层来自囊胚的内细胞团细胞，B错误； C、胚胎移植针对的是哺乳动物而不是鱼类，C错误； D、鱼与人具有相似的胚胎发育阶段，说明脊椎动物在胚胎发育早期具有彼此相似的阶段，为共同由来学说提供了证据，D正确。 故选D。 二、多选题 16．（23-24高二下·江苏南通·期末）研究发现，在肿瘤微环境中细胞毒性T细胞高表达抑制性受体（TIGIT），该受体与肿瘤细胞表面的CD155结合后，细胞毒性T细胞活性被抑制，从而使肿瘤细胞处于免疫耐受状态，不被细胞毒性T细胞杀伤。相关叙述错误的是（    ） A．细胞毒性T细胞对肿瘤细胞的杀伤体现了免疫系统的防御功能 B．细胞毒性T细胞与肿瘤细胞表面抗原特异性结合后即被活化 C．肿瘤微环境使细胞毒性T细胞发生基因突变从而高表达TIGIT D．使用TIGIT的单克隆抗体可解除肿瘤细胞的免疫耐受状态 【答案】ABC 【分析】骨髓、胸腺、脾、淋巴结等免疫器官，淋巴细胞和树突状细胞、巨噬细胞等免疫细胞，以及体液中的各种抗体和细胞因子等免疫活性物质，共同组成了人体的免疫系统， 这是免疫调节的结构和物质基础。免疫系统的功能是免疫防御、免疫自稳和免疫监视大基本功能。 【详解】A、细胞毒性T细胞对肿瘤细胞的杀伤体现了免疫系统的监视功能，A错误； B、细胞毒性T细胞与肿瘤细胞表面抗原特异性结合，还需要辅助性T细胞分泌的细胞因子，从而被活化，B错误； C、由于基因的选择性表达，肿瘤微环境中细胞毒性T细胞高表达抑制性受体（TIGIT），并不是基因突变导致的高表达，C错误； D、TIGIT的单克隆抗体可与TIGIT特异性结合，从而可解除肿瘤细胞的免疫耐受状态，D正确。 故选ABC。 17．（23-24高二下·江苏淮安·期末）骨关节炎是犬类常见的疾病，导致软骨损伤和疼痛。神经生长因子（NGF）通过与细胞表面受体（NGFRs）的相互作用，调节骨关节炎的疼痛感知。科研人员利用杂交瘤细胞技术，开发出能结合NGF 并阻断其与受体结合的单克隆抗体（mAb）。下列相关叙述正确的有（　　） A．制备单克隆抗体（mAb）的过程中至少要经过两次筛选，其原理和目的均不同 B．杂交瘤细胞无需识别 NGF 就能产生mAb C．体外扩大培养能产生 mAb的杂交瘤细胞需要用胰蛋白酶处理以防止发生接触抑制 D．在实际应用中还应对 mAb 进行一定程度的改造以减轻可能对犬产生的副作用 【答案】ABD 【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程，第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A正确； B、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生特异性抗体，B正确； C、杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C错误； D、在实际应用中还应对 mAb 进行一定程度的改造以减轻可能对犬产生的副作用，D正确。 故选ABD。 18．（23-24高二下·江苏·期末）细胞内分子伴侣可识别并结合含有短肽序列KFERQ的目标蛋白形成复合体，该复合体与溶酶体膜上的受体L结合后，目标蛋白进入溶酶体被降解。该过程可通过降解α-酮戊二酸合成酶，调控细胞内α-酮戊二酸的含量，从而促进胚胎干细胞分化。下列说法正确的有（    ） A．α-酮戊二酸合成酶的降解产物能被细胞再利用 B．若在体外培养胚胎干细胞，需要定期更换培养液 C．抑制受体L合成有利于胚胎干细胞的分化 D．复合体与溶酶体膜上的受体L结合体现了生物膜信息交流的功能 【答案】ABD 【分析】根据题干信息“该复合体与溶酶体膜上的受体L结合后，目标蛋白进入溶酶体被降解。该过程可 通过降解α-酮戊二酸合成酶，调控细胞内α-酮戊二酸的含量，从而促进胚胎干细胞分化”，可 以得出相应的过程：α-酮戊二酸合成酶先形成复合体，与受体L结合，进入溶酶体被降解，导 致α-酮戊二酸含量降低，促进细胞分化。 【详解】A、α-酮戊二酸合成酶被溶酶体降解，其降解产物可被细胞再利用，A正确； B、若在体外培养胚胎干细胞，需要定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，B正确； C、根据题干信息“该复合体与溶酶体膜上的受体L结合后，目标蛋白进入溶酶体被降解”可知，如果抑制受体L合成，则复合体不能与受体L结合，不利于降解α-酮戊二酸合成酶，细胞中α-酮戊二酸的含量会升高，抑制细胞分化，C错误； D、复合体与溶酶体膜上的受体L结合体现了生物膜信息交流的功能，D正确。 故选ABD。 19．（23-24高二上·江苏南京·期末）敲除大鼠心肌细胞H的T基因，对照组与敲除组的H细胞在培养瓶中贴壁生长，检测两组细胞的数量变化，结果如图所示。下列相关叙述合理的是（    ） A．体外培养H细胞需要添加动物血清 B．可用胰蛋白酶处理H细胞便于计数 C．敲除T基因的H细胞失去了分裂能力 D．提高T基因表达可能促进心脏损伤修复 【答案】ABD 【分析】对照组与敲除组的区别是有无T基因，相同培养时间内，对照组的H细胞数量多于敲除组，说明T基因的存在能促进细胞的分裂。 【详解】A、动物细胞培养时常加入动物血清，因此体外培养H细胞需要添加动物血清，A正确； B、可用胰蛋白酶处理H细胞使其分离为单细胞，便于计数，B正确； C、随着时间的延长，敲除组的H细胞数量依然增加了，说明敲除T基因的H细胞仍然有分裂能力，C错误； D、对照组含有T基因，相同培养时间内，对照组的细胞数量多于敲除组，说明T基因能促进细胞分裂，因此提高T基因表达可能促进心脏损伤修复，D正确。 故选ABD。 20．（23-24高二下·江苏徐州·期末）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列相关叙述正确的有（    ） A．①过程中精子获能后膜流动性增加 B．②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质不都来自于父母双方 C．③过程形成的早期胚胎需要发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D．④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 【答案】AB 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、①是精子获能过程，获能后精子运动加速，能够迅速的游向卵子，膜流动性增加，A正确； B、②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自于父母双方和外源基因，不都来自于父母双方，B正确； C、胚胎移植前要检查胚胎质量并在桑葚胚或囊胚阶段移植，C错误； D、④是胚胎移植过程，应选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，进行胚胎移植前无需对供体和受体进行超数排卵处理，D错误。 故选AB。 21．（23-24高二下·江苏南京·期末）下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（    ） A．移入子宫的外来胚胎，在受体体内会发生免疫排斥反应 B．早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育 C．受精过程中，透明带处会出现阻止多精入卵的生理反应 D．对桑椹胚进行胚胎分割移植时，应将内细胞团均等分割 【答案】AD 【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术；经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。理论基础：哺乳动物的体内受精和早期胚胎发育规律。 【详解】A、受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎在受体内能够存活的生理基础，A错误； B、胚胎移植是将良种雌性动物配种后的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育成为新个体，因此早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育，B正确； C、受精作用过程中，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵黄膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障，C正确； D、胚胎分割的对象是桑椹胚或囊胚，在对囊胚分割时，应注意将内细胞团均等分割，D错误。 故选AD。 22．（23-24高二上·江苏盐城·期末）胚胎工程的发展，实现了优良家畜的大量繁殖。下列有关叙述错误的是（    ） A．试管牛、试管羊的产生属于无性繁殖 B．利用胚胎分割技术可获得多个基因型相同的胚胎 C．饲喂促性腺激素有助于供体母牛排出比自然情况下更多的次级卵母细胞 D．用Ca2+载体法可以促进皮肤细胞与去核卵母细胞融合 【答案】ACD 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、试管牛、试管羊的产生过程经过了两性生殖细胞的融合，因而属于有性繁殖，A错误； B、利用胚胎分割技术可获得多个基因型相同的胚胎，这些胚胎获得属于无性繁殖，B正确； C、注射促性腺激素有助于供体母牛排出比自然情况下更多的次级卵母细胞，该操作为超数排卵技术，促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能饲喂，否则被消化导致无效，C错误； D、用Ca2+载体法可以激活皮肤细胞与去核卵母细胞融合形成的重构胚，促使其完成细胞分裂和发育的进程，D错误。 故选ACD。 23．（23-24高二上·江苏南通·期末）医学和农业生产上经常应用胚胎工程技术，相关叙述错误的是（　　） A．为使雌性动物超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．可以使用雄性动物新鲜的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用 C．早期胚胎中初次发生分化的细胞一部分形成内细胞团，将来发育成胎盘和胎膜 D．为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割等无性繁殖技术 【答案】ABC 【分析】囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层的细胞将来发育成胎盘和胎膜。促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能口服。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹（葚）胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，在饲料中添加的促性腺激素，因在动物的消化道中被分解而失去促进超数排卵的作用，A错误； B、雄性动物新鲜的精子获能后才具备受精能力，B错误； C、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘,C错误； D、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，D正确。 故选ABC。 三、解答题 24．（23-24高二下·江苏宿迁·期末）5-氟尿嘧啶 （5-FU）是一种抗肿瘤药物，广泛应用于肿瘤的治疗。研究人员将5-FU与宫颈癌细胞膜抗原（CA125）的特异性抗体（OC125）结合制备抗体偶联药物，生产OC125过程如下图所示。回答下列问题。 (1)小鼠免疫时，需将CA125先后多次接种于小鼠体内，目的是 。 (2)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加 等天然成分。同时，为了维持培养液的pH和供细胞代谢利用，需要提供的气体分别是 。 (3)研究发现获得的单克隆抗体能够检测含量很低的CA125，说明单克隆抗体具有 的特点，与直接对患者使用细胞毒性药物相比，抗体偶联药物的优点是 。 (4)与植物体细胞杂交相比，图中特有的诱导融合的方法是 。该实验过程中需进行两次筛选，对筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。选出特定的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养，最终从 中获取大量的单克隆抗体。 【答案】(1)加强免疫，诱导小鼠产生更多能够分泌抗CA125的B淋巴细胞 (2) 血清 二氧化碳和氧气 (3) 特异性强，灵敏度高 能选择性的杀伤癌细胞，对正常细胞影响小 (4) 灭活的病毒 克隆化培养 （专一）抗体检测 培养液或小鼠腹水 【分析】单克隆抗体制备流程：（1） 对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2） 得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。 【详解】（1）CA125作为抗原来使用，小鼠免疫时，需将CA125先后多次接种于小鼠体内，目的是加强免疫，诱导小鼠产生能够分泌抗CA125的B淋巴细胞。 （2）在体外进行动物细胞培养时，通常需要在合成培养基的基础上添加血清（或血浆）等一些天然成分。 为了维持培养液的 pH 和供细胞代谢利用，通常需要提供二氧化碳（CO₂）和氧气（O₂）。 二氧化碳（CO₂）：细胞培养时，培养液中需要一定浓度的 CO₂ 来维持其 pH 的稳定。CO₂ 溶于水会形成碳酸，碳酸在水中会解离出氢离子（H⁺）和碳酸氢根离子（HCO₃⁻），从而形成一个缓冲体系，有助于稳定培养液的 pH。 氧气（O₂）：细胞在代谢过程中需要氧气进行有氧呼吸，从而产生能量（ATP）以维持细胞的生命活动和功能。 （3）单克隆抗体具有以下特点和优势： 特异性强：能够高度特异性地识别和结合特定的抗原表位，准确性极高。与直接对患者使用细胞毒性药物相比，抗体偶联药物具有以下优点： 靶向性更强：抗体偶联药物中的抗体部分能够特异性地识别肿瘤细胞表面的抗原，将药物精准地输送到肿瘤部位，减少对正常组织的损伤。 （4）与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合特有的诱导融合的方法是用灭活的病毒诱导。 常用于诱导动物细胞融合的病毒中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须事先用紫外线或β-丙内酯灭活，使病毒的感染活性丧失而保留病毒的融合活性。对筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测。 克隆化培养的目的是获得大量遗传性状相同的细胞，以保证所产生抗体的均一性和稳定性。 抗体检测则是为了进一步确认这些细胞所产生抗体的特异性、亲和力等性能。选出特定的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养，最终从培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 25．（23-24高二下·江苏扬州·期末）肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)是人体心肌细胞中的肌钙蛋白的一种亚基，其在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：    (1)细胞培养中，可采用 的方法防止有害代谢物的积累。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，3次注射后的第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗体阳性检测，之后经稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：    据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的 结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是 ，另一方面 从而通过测定产物量来判断待测抗原量。 (4)杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为 (填“合成培养基”或“天然培养基”)，但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入 等成分。 (5)杂交瘤细胞与普通的动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有 的特点，因此后者进一步传代培养时，需要定期用 处理。 【答案】(1) 定期更换培养液 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 聚乙二醇(PEG) (2) 乙和丙 能产生(特异性强、灵敏度高的)抗 cTnI抗体的杂交瘤细胞 (3) 不同抗原决定簇(部位) 抗体与待测抗原结合 酶催化特定底物反应产生相应产物 (4) 合成培养基 动物血清 (5) 贴壁生长和接触抑制 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）在动物细胞培养的过程中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液；为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体形成更多能产生抗cTnI抗体的B淋巴细胞，一般通过多次注射相同抗原实现；取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，一般采用的化学诱导因素为聚乙二醇（PEG）。 （2）据图可知，杂交瘤细胞需要对甲筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞；其中①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的细胞，该类细胞的特点是既能大量增殖又能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体。 （3）固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同抗原决定簇(部位)结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是抗体与待测抗原结合，另一方面酶催化特定底物反应产生相应产物从而通过测定产物量来判断待测抗原量。 （4）杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为合成培养基。但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入动物血清等成分。 （5）杂交瘤细胞与普通的动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和接触抑制的特点，因此后者进一步传代培养时，需要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。 26．（23-24高二下·江苏徐州·期末）牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题： (1)以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的 ，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上， 细胞不能生长，从而筛选获得杂交瘤细胞。 (2)杂交瘤细胞 （填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体 （填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。 (3)将上述筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种 个杂交瘤细胞以实现 ，然后通过ELISA法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与 结合的培养孔为阳性孔。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，最终从 中获取大量抗VspX抗体。 (4)将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示 ，表明抗VspX抗体具有 。    【答案】(1) 分泌抗VspX抗体的B淋巴细胞 同种细胞融合的细胞和未融合的 (2) 能 不一定 (3) 1 克隆化培养 VspX蛋白 小鼠腹水 (4) 抗 VspX单克隆抗体不能与 3、4 结合 特异性 【分析】单克隆抗体的制备过程： 首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。 利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。 单克隆抗体制备过程中的两次筛选： 第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞； 第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）依据题干信息，制备以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，首先需要用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是为了刺激机体产生更多的分泌抗VspX抗体的B淋巴细胞（浆细胞），然后利用细胞融合技术，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上，淘汰掉同种细胞融合的细胞和未融合的B细胞和瘤细胞，从而筛选获得杂交瘤细胞。 （2）一种浆细胞只能产生一种抗体，故杂交瘤细胞能产生专一抗体，筛选出来的杂交瘤细胞有多种，不一定能产生抗VspX蛋白的抗体，故杂交瘤细胞所产生的抗体不一定能抗VspX蛋白。 （3）将筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种1个杂交瘤细胞以实现克隆化培养，然后通过ELISA法检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与VspX蛋白结合的培养孔为阳性孔。然后将抗原-抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射小鼠腹腔内增殖，最终从小鼠的腹水中获取抗VspX抗体。 （4）据图可知，抗VspX抗体不能与3、4结合，也说明了抗VspX抗体具有特异性。 27．（23-24高二下·江苏盐城·期末）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图1所示。单克隆抗体的制备流程如图2所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体 （填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是 。 (2)图2中制备抗EV71单克隆抗体时，选用 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。 (3)相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是 ，经诱导融合后，在融合体系中会出现未融合的细胞以及多种融合的细胞，其原因是 。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交瘤细胞。将其接种到96孔板，进行 培养和 。 (4)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： ①固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 。 ②研究人员获得三种抗EV71单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行 组实验，检测并比较各组实验的产物量。 (5)烟草具有生长周期短、生长环境要求低、叶片生物量大等优点，是良好的植物生物反应器。与动物细胞培养相比，利用烟草生物反应器生产抗体的优点有 。 ①可利用生物膜系统对蛋白质进行加工 ②需要无菌、无毒环境 ③不需要较复杂的培养基 ④抗体易分离提纯 【答案】(1) 不是 EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原 (2)VP1 (3) 灭活病毒诱导法 细胞融合是随机的，且细胞融合不是自发的 克隆化 抗体检测 (4) 与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 6 (5)③ 【分析】能够引发机体发生特异性免疫反应的物质称为抗原，一般来说病毒的外壳蛋白就属于抗原，当抗原进入机体内环境，首先引发机体发生体液免疫。制备单克隆抗体抗体实际上利用的是动物细胞融合技术，从而获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）分析柱形图可知，EV71免疫的小鼠血清可以与EV71、VP1和VP2多种抗原相结合，由此说明EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。 （2）①②制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2。 （3）相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是灭活病毒诱导法，由于细胞融合是随机的，所以在融合体系中会出现未融合的细胞以及多种融合的细胞，用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交瘤细胞。将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测，可以筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞。 （4）①分析题干可知双抗体夹心法是常用的定量检测抗原的方法，从图中可以发现固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，由此可见在该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，另外通过酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。 ②分析可知双抗体夹心法需要任意选择两种抗体，现有A、B、C三种抗体，即可有以下几种组合，AB、AC、AA、BB、BC、CC，总共有6种组合方式，因此科研人员需要进行6组实验，检测并比较各组实验的产物量。 （5）动物细胞需要配置培养基进行培养，而烟草作为生产者，种植之后可利用土壤、空气等自然环境中的物质，无需配置较复杂的培养基，也不需要无菌无毒环境。与动物细胞培养相比，利用烟草生物反应器生产抗体的优点有③不需要较复杂的培养基。 故选③。 28．（23-24高二下·江苏无锡·期末）雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。请回答下列问题： (1)为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采集小鼠卵母细胞，与经过 处理的成年健康公鼠精子在适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 （填“单”“双”或“三”）亲的遗传物质。 (2)研究人员对体外受精胚胎性别进行鉴定，显示雄性胚胎/雌性胚胎的比例高于自然生产（IVO）胚胎。为进一步揭示体外受精的胚胎性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。 ①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， 。 ②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 （选填“高于”、“等于”或“低于”）IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。 (3)已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。 结果显示 。 (4)综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发 ，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 【答案】(1) 获能 同期发情 双 (2) 雌性形态异常胚胎的比例显著高于雄性形态异常胚胎 高于 (3)IVF（在4细胞、8细胞及桑葚胚时期）RNF12蛋白表达显著低于IVO (4)小鼠部分雌性胚胎RNF12表达量低 ，XCI下降 【分析】胚胎移植是指将雌性动物体内的早期胚胎，或通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】（1）为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采集小鼠卵母细胞，与经过获能处理的成年健康公鼠精子在适当的培养液中完成体外受精。受精卵在体外培养成早期胚胎，移植到经过同期发情处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有提供卵细胞和精子双亲的遗传物质。 （2）①根据图1数据显示，IVF组中雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿；②依题意，“非逃逸”基因起作用，即基因转录活性被抑制，表现出X染色体失活（XCI），因而从结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著高于IVO雌性胚胎。 （3）根据图2可知，IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO。 （4）综上所述，体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发X染色体失活（XCI）下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 29．（23-24高二下·江苏徐州·期末）癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。    (1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1.PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。单克隆抗体的优点在于 。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是 。然后取小鼠的脾脏细胞用 试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 (2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如图2。    ①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成 ，并加入多孔板培养槽中的 （填“细胞”或“上清液”），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表 。 (3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞以产生双特异性抗体PSMA×CD28，可诱导T细胞定向杀伤肿瘤细胞，如图3。    ①制备双杂交瘤细胞过程：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 ②双特异性抗体还可以携带抗肿瘤药物应用于肿瘤治疗，其优势是 。 【答案】(1) 特异性强、灵敏度高、可大量制备 刺激机体产生更多免疫过的B细胞（浆细胞） PEG (2) 固相抗原 上清液 抗PD-1抗体 抗PD-1抗体的量 (3) PSMA、CD28 既能与肿瘤细胞特异性结合，又能与抗肿瘤药物特异性结合，从而降低了抗肿瘤药物的副作用（提高了抗肿瘤药物的靶向性） 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1） 某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。单克隆抗体是由单个杂交瘤细胞经过增殖产生的细胞器合成并分泌的，因而其最主要的优点在于特异性强、灵敏度高、可大量制备。 将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是刺激机体产生更多免疫过的B细胞（浆细胞）。然后取小鼠的脾脏细胞用PEG试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，而后用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，再通过进一步筛选获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 （2）①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原，并加入多孔板培养槽中的“上清液”（其中含有是相应的抗体），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去，在载体上留下的是带有酶标抗体的抗原-抗体复合物。 ③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表抗PD-1抗体的量，颜色越深说明待测样液中抗体含量越多。 （3）①结合题意可知，制备双杂交瘤细胞过程：先将PSMA、 CD28分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 ②双特异性抗体还可以携带抗肿瘤药物应用于肿瘤治疗，其表现的优势为既能与肿瘤细胞特异性结合，又能与抗肿瘤药物特异性结合，从而降低了抗肿瘤药物的副作用，同时也能提高药效。 30．（23-24高二上·江苏盐城·期末）癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。      (1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1,如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于 。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是 。然后取小鼠的脾脏细胞用 试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 (2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如上图。 ①在检测时需要将PD-1蛋白固定于周相载体表面制成 ,并加入多孔板培养槽中的 （细胞、上清液），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表 。 (3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA,还能结合CD28的双特异性抗体PSMAXCD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图2。制备过程为：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会 。因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。    (4)在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，除了单克隆抗体治疗外，还可以进行过继性细胞治疗，过继性细胞治疗相关过程如图所示过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有 （答出2点），培养过程中出现接触抑制现象时，可用 酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。    【答案】(1) 特异性强、灵敏度高、可大量制备 刺激机体产生更多的浆细胞 PEG (2) 固相抗原 上清液 抗PD-1抗体 抗PD-1抗体的量 (3) PSMA、CD28 产生多种抗体 (4) 细胞密度大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏 胰蛋白酶、胶原蛋白 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点。加强免疫可刺激机体产生更多的浆细胞，产生更多的抗体。可用PEG试剂诱导小鼠的脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 （2）①在检测时需要将PD-1蛋白固定于周相载体表面制成固相抗原。单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去。 ③PD-1蛋白与抗PD-1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表与抗PD-1抗体的量。 （3）抗体具有特异性，所以为了获取既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMAXCD28，则需要先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会产生多种抗体，但所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。 （4）在动物细胞的培养时，由于细胞密度大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏,则培养过程中出现接触抑制现象时，可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理贴壁细胞，使之分散成单个细胞进行传代培养。 31．（23-24高二下·江苏泰州·期末）在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题： (1)为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射 ，以期获得更多 的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为 的CO₂培养箱。 (2)图1中可运用 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜的 功能。图中筛选2运用 等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 (3)根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是 ，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。 (4)治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量) 由图2可知，PD-L1的抗体对 肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是 。β-action基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-action基因表达量的目的是 。 【答案】(1) 人PD-L1抗原 能够分泌抗人 PD-L1抗体 95%空气+5%CO2 (2) 灭活的病毒 流动性 多孔的细胞培养板（抗原-抗体杂交） (3)针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，使肿瘤细胞不能逃避T细胞的攻击 (4) C13 C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳 证明细胞的翻译功能是正常的 【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测：（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 2、单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于治疗疾病和运载药物：抗体上带有药物，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物一并带进靶细胞，引起靶细胞凋亡。 【详解】（1）上述实验前必须给小鼠甲多次注射人PD-L1抗原，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗人 PD-L1抗体的B淋巴细胞。动物细胞培养时，需将细胞置于气体条件为95%空气+5%CO2的CO2培养箱。 （2）诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，采用的诱导方法有灭活的病毒、电刺激融合、聚乙二醇等方法，其中灭活的病毒诱导融合为动物细胞特有的方法，不适用于植物原生质体融合。细胞融合利用细胞膜具有一定流动性的功能。筛选2是筛选出既能产生特定抗体又能无线增殖的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，利用抗体可与特定抗原结合的原理来检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。 （3）抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，不能逃避T细胞的攻击，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。 （4）由图2可知，C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳，所以PD-L1的抗体对C13肿瘤细胞杀伤效果较低。β-action基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-action基因表达量的目的是证明细胞的翻译功能是正常的。 32．（23-24高二上·江苏南京·期末）雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。 (1)为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采用超数排卵方法采集小鼠 期卵母细胞，另一方面，将成年健康公鼠的精子在体外条件下进行 处理，将二者置于适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 （单/双/三）亲的遗传物质。 (2)研究人员对体外受精胎儿性别进行鉴定，表中结果显示胎儿性别比例（雄/雌） （选填“高于”、“等于”或“低于”）自然生产（IVO）胎儿的性别比例。 组别 胚胎数 活仔率（%） 雄/雌 IVO 81 56.25 1.08 IVF 82 45.58 1.48 (3)为进一步揭示体外受精的胎儿性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。 ①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， 。 ②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 （选填“高于”、“等于”或“低于”）IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。 ③已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。 结果显示 。 (4)综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎 ，引发 ，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 【答案】(1) MII 获能 同期发情 双 (2)高于 (3) 雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿 高于 IVF（在4细胞、8细胞及桑葚胚时期）RNF12蛋白表达显著低于IVO (4) RNF12低表达 XCI下降 【分析】胚胎移植是指将雌性动物体内的早期胚胎，或通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的 技术。 【详解】（1）通常用促性腺激素处理雌性哺乳动物，使其超数排卵，采集小鼠MII期卵母细胞，此时的卵母细胞已经发育成熟；另一方面，获得的精子在体外进行获能处理，将二者置于适当的培养液中完成体外受精。受精卵在体外培养成早期胚胎，移植到经过同期发情处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有提供卵细胞和精子双亲的遗传物质。 （2）依据表格数据可知，表中结果显示体外受精（IVF）胎儿性别比例（雄/雌）高于自然生产（IVO）胎儿的性别比例。 （3）①根据图1数据显示，IVF组中雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿； ②依题意，“非逃逸”基因起作用，即基因转录活性被抑制，表现出X染色体失活（XCI），因而从结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著高于IVO雌性胚胎。 ③根据图2可知，IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO。 （4）综上所述，体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发X染色体失活（XCI）下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。 33．（23-24高二上·江苏南通·期末）人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：    (1)人参与西洋参杂交存在花期不遇、F1代结实率低及难获得F2代的现象，说明两者之间存在 ，是两个不同的物种。人参和西洋参含有人参皂苷，可以作为药物，体现了生物多样性的 价值。 (2)过程①称为 。过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是 。 (3)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见下图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。杂种胚中的大多数种类的皂苷的含量均高于其他两种，这体现了 。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。    (4)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果： ①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是 。培养条件为5%CO2，作用是 、饱和湿度，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式： 。根据实验结果可以得出的结论有 。    【答案】(1) 生殖隔离 直接 (2) 脱分化 蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成渗透压过高细胞失水死亡 (3) 杂种优势 人参（种子胚） (4) 补充未知的营养物质 维持培养液的pH 给药后肿瘤体积/给药前肿瘤的体积 5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好 【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。 【详解】（1）人参与西洋参杂交存在花期不遇、F1代结实率低及难获得F2代的现象，说明两者之间存在生殖隔离；人参和西洋参含有人参皂苷，可以作为药物，体现了生物多样性的直接价值。 （2）过程①脱分化形成愈伤组织，过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成渗透压过高细胞失水死亡。 （3）杂种胚中的大多数种类的皂苷的含量均高于其他两种，这体现了杂种优势；图中可知，Rg3具有抗癌作用若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择人参（种子胚）的愈伤组织。 （4）①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是补充未知的营养物质。培养条件为5%CO2，作用是维持培养液的pH、饱和湿度，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。根据图3计算肿瘤体积变化的公式：给药后肿瘤体积/给药前肿瘤的体积。根据实验结果，分析图像，可以得出的结论有-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好。 34．（23-24高二上·江苏盐城·期末）I.供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。 (1)核移植的受体是 细胞，核移植后的重构胚发育至 阶段可利用 技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的 可用于医学研究。 (2)RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高， 越低。    II.兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎的结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题： (3)从盆兰花获取茎尖，对其进行 处理后接种于培养基，茎尖通过 后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。 (4)将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中 和 的含量存在差异。 (5)某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸； ;脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是： 。 【答案】(1) 去核的卵母 桑葚胚或囊胚 胚胎移植 胚胎干细胞 (2)RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率 (3) 消毒 脱分化 (4) 营养物质 激素 (5) 脱落酸促进休眠 人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸 【分析】 植物组织培养： （1）幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。 （2）对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。 （3）植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。 （4）诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素配比及浓度。 【详解】（1）核移植的受体一般是去核的卵母细胞，当胚胎发育到桑葚胚或囊胚时，可以进行胚胎移植。另外，从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，由于具有自我更新和分化潜能，可用于医学研究。 （2）猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞，前者分化程度比后者低，由图1和图2分析可知，核供体细胞的分化程度越高，RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。 （3）进行植物组织培养时，需要进行无菌操作，即对外植体进行消毒，对培养基及其他器械进行灭菌等；将消毒后的外植体接种在培养基上，通过控制培养基中各种激素的比例来控制细胞的分裂分化，先诱导茎尖脱分化形成原球茎，再转移至发芽培养基上诱导其发芽，然后转移至生根培养基上诱导其生根。 （4）由于椰子水中含有营养物质和激素，故增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满，但由于不同成熟度椰子的椰子水中营养物质和激素的含量存在差异，故对原球茎生长的促进效果不同。 （5）脱落酸主要由根冠和萎蔫的叶片合成，作用是抑制细胞分裂、促进气孔关闭、促进叶和果实衰老和脱落、维持种子休眠。高压蒸汽灭菌法处理的椰子水（B 组）使原球茎的休眠时间短于过滤除菌法处理的椰子水（A），由于椰子水中有脱落酸、脱落酸促进休眠、 脱落酸不耐高温，可推测B 组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。可增加一组实验：人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸，若原球茎的休眠时间比B组长，即可验证推测。 35．（23-24高二下·江苏无锡·期末）纳米酶是一类蕴含酶学特性的纳米材料，具有催化活性高、稳定、低成本和易于大规模生产等特点，在生化检测、环境管理、疾病诊断等许多领域显示出了巨大的应用潜力。研究人员人工制备了能催化H2O2分解的纳米酶，对其作用特性展开一系列实验，下图1、2表示相关实验结果，图中“△DO”表示加入H2O25min后反应体系中溶氧量的变化。请回答下列问题：    (1)与无机催化剂相比，纳米酶的催化效率更高，原因是 。实验测得的△DO值反映了 。 (2)图1为探究 的实验结果，实验中需控制的无关变量有 （写出三个），由此图可得出的结论是 。 (3)图2为探究草甘膦（GLY）对纳米酶作用的影响的实验结果，由此图可知GLY （填“促进”或“抑制”或“不影响”） 纳米酶的作用。使用该实验体系测得某土壤样品△DO比值为0．2，则该土壤样品的草甘膦浓度约为 ，该探究结果可应用于环境中草甘膦浓度的定量测定。 (4)纳米酶试纸条可用于食品中病原体（如金黄色葡萄球菌的生物标志物蛋白A）的快速检出，图3为试纸层析技术检测原理示意图。 ①制备检测试纸上的单克隆抗体时，需将 注入小鼠体内进行免疫并分离出 细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合，获得的细胞至少需经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是 、 。 ②检测结束后，T线不显色，C线显色，说明检测结果为 （填“阳性”“阴性”或“无效”）。 【答案】(1) 纳米酶降低反应活化能的作用更显著 纳米酶活性（大小） (2) 纳米酶在不同pH下的活性（pH对纳米酶活性的影响） H2O2溶液的浓度和用量、纳米酶的用量、温度 纳米酶在pH偏碱性条件下活性高 (3) 抑制 10μmol/L (4) 蛋白A B 筛选出杂交瘤细胞 筛选出能分泌针对蛋白A的特异性抗体的杂交瘤细胞 阳性 【分析】酶 （1）概念：酶是活细胞(来源)所产生的具有催化作用(作用机理：降低化学反应活化能，提高化学反应速率)的有机物。 （2）本质：大多数酶的化学本质是蛋白质，也有少数是RNA。 （3）特性：高效性、专一性、酶需要较温和的作用条件 【详解】（1）与无机催化剂相比，纳米酶的催化效率更高，原因是纳米酶降低反应活化能的作用更显著；△DO”表示加入H2O25min后反应体系中溶氧量的变化，即生成物的量变化，与酶活性相关，所以可以实验测得的△DO值反映了纳米酶活性（大小）。 （2）由图1可知，图1为探究纳米酶在不同pH下的活性（pH对纳米酶活性的影响），由图可以看出，实验的自变量为不同的PH，因变量是△DO值，实验需要控制的无关变量有H2O2溶液的浓度和用量、纳米酶的用量、温度，看图可以得出，随着PH的升高，△DO值越大，酶活性越高，由此图可得出的结论是纳米酶在pH偏碱性条件下活性高； （3）根据图二结果可知，随着除草剂草甘膦（GLY）的浓度增大，添加草甘膦的△DO(△DO(GLY) ) 与不添加草甘膦的△DO(△DO(0) ) 的比值减小，说明草甘膦对纳米酶活性具有抑制作用。分析图中数据可知，△DO比值为0.2时，草甘膦浓度约为10μmol/L。 （4）纳米酶试纸条可用于食品中病原体（如金黄色葡萄球菌的生物标志物蛋白A）的快速检出,所以蛋白A可以作为抗原，制备检测试纸上的单克隆抗体时，需将蛋白A注入小鼠体内进行免疫并分离出B细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合，获得的细胞至少需经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是筛选出杂交瘤细胞；筛选出能分泌针对蛋白A的特异性抗体的杂交瘤细胞； 纳米酶垫上包被的纳米酶标记抗体和待测物与T线处包被的抗原进行竞争性结合。当待测物为阳性样本时，待测物中的抗原与T线包被的抗原可竞争性结合纳米酶标记抗体，导至T线上包被的抗原无法和纳米酶标记抗原结合，则T线无法显色。T线和C线均显色为阴性，T线不显色C线显色为阳性，T线和C线均不显色为无效结果。 / 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$