专题一 发酵工程（黑吉辽蒙专用）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期末真题分类汇编（黑吉辽蒙专用）

专题一 发酵工程 一、单选题 1．(23-24高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)平板接种常用在微生物培养中。下列叙述错误的是（    ） A．不含氮源的平板不能用于微生物培养 B．平板划线时接种环使用前必须进行灭菌 C．培养基先调节pH再进行高压蒸汽灭菌 D．从第一次划线的末端开始进行第二次划线 2．(23-24高二下·内蒙古赤峰·期末)近年来，微生物肥料、微生物农药和微生物饲料在农业生产上得到广泛使用。下列关于微生物肥料、微生物农药和微生物饲料的说法，错误的是（    ） A．微生物肥料中的物质有可能会增进土壤肥力，但不可能抑制土壤病原微生物生长 B．微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，如可用白僵菌防松毛虫等 C．微生物饲料主要是利用细菌、酵母菌等微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体制成的 D．使用的微生物肥料、微生物农药和微生物饲料并不一定都是利用微生物的活细胞 3．(23-24高二下·辽宁辽阳·期末)我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如腐乳、果酒、果醋和泡菜等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，正确的是（　　） A．醋酸菌能将酒精转化成乙酸 B．家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌 C．腐乳制作中起作用的微生物主要是曲霉 D．泡菜制作时需要保持有氧环境 4．(23-24高二下·吉林吉林·期末)鱼茶味酸而微咸、甘香可口，是海南黎族的一种传统发酵食品，其发酵菌种主要是乳酸菌。下列叙述错误的是（    ） A．鱼茶发酵初期和结束时发酵液中均只有乳酸菌 B．鱼茶味酸与乳酸菌无氧呼吸产生乳酸有关 C．乳酸菌还可以用于制作酸奶、泡菜等食品 D．制作鱼茶时所用发酵装置的充气口应关闭 5．(23-24高二下·吉林部分名校·)山楂醋中富含多种维生素、黄酮、果酸、矿物质、三萜类物质等营养物质。利用山楂制作果醋的大致流程为先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵10天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵12～15天。下列有关叙述错误的是（    ） A．酵母菌在缺氧条件下进行发酵，将山楂中的糖类转化为酒精和二氧化碳 B．醋酸杆菌在有氧条件下将酵母菌产生的酒精氧化为醋酸 C．发酵过程中，酵母菌和醋酸杆菌的代谢产物都对山楂醋的风味有重要影响 D．在整个发酵过程中，酵母菌发酵时的温度一般要高于醋酸杆菌发酵时的温度 6．(23-24高二下·辽宁实验中学·期末)微生物的实验室培养有较高的技术要求，下列操作不符合规范的是（    ） A．浸泡在酒精中的玻璃涂布器无需再灼烧灭菌 B．配制培养基时，应先调节 pH，再进行灭菌处理 C．倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置 D．用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环 7．(23-24高二下·黑龙江哈尔滨六校·期末)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术主要包括消毒和灭菌。下列相关叙述正确的是（    ） A．微生物培养所用的培养基通常用干热灭菌法进行灭菌 B．利用干热灭菌法进行灭菌的物品需要有耐高温的特点 C．加入培养基中的指示剂和染料不需要进行灭菌 D．巴氏消毒法能彻底杀死牛奶中所有微生物，包括芽孢和孢子 二、多选题 8．(23-24高二下·吉林辽源五校·期末)微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（    ） A．果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃ B．制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸 C．多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等 D．制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳 9．(23-24高二下·黑龙江大庆第四中学·)目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。下列叙述错误的是（    ） A．乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物 B．果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源 C．果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染 D．醋酸菌发酵在有氧条件下进行，其有氧呼吸的主要场所是线粒体 三、解答题 10．(23-24高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)结核杆菌是引起结核病的病原体。结核病患者的利福平（一种抗生素）耐药率不断上升给结核病治疗带来较大的困难。为了筛选新的抗结核药物，科研人员进行了如图所示的研究。已知罗氏固体培养基中有抑制杂菌生长的物质。回答下列问题： (1)利福平是一种广谱抗生素药物，对结核杆菌有较强抗菌作用。结核病患者的利福平耐药率不断上升，原因是在利福平的长期选择下，结核杆菌种群中 。 (2)筛选结核杆菌时，培养基中的牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和 ，培养基的酸碱性要调至 。 (3)实验中，步骤①的目的是 ，步骤②的目的是 。步骤③使用的接种工具是 。 (4)步骤④中鉴定细菌时，可观察菌落的 （答出2点）。 一、单选题 1．(23-24高二下·吉林松原·期末)味精是常用的食品添加剂，主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌等发酵可以得到谷氨酸。谷氨酸发酵的培养基成分有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图所示，发酵过程中要不断通入空气，并通过搅拌形成细小的气泡，当培养基中碳氮比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少：当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量增大。在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌的代谢物是乳酸或琥珀酸。下列分析正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌的细胞结构和代谢类型都类似于酵母菌的 B．谷氨酸的分离、提纯是利用发酵工程生产谷氨酸的中心环节 C．发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH D．谷氨酸棒状杆菌的代谢物会抑制杂菌的生长，通入的空气无须灭菌 2．(23-24高二下·吉林部分名校·)生物固氮在农业生产中具有十分重要的作用，某研究团队想对土壤固氮菌进行选择培养和计数。下列相关说法错误的是（    ） A．从土壤中筛选固氮菌时，培养基中不加入氮源 B．用稀释涂布平板法对固氮菌进行计数时，统计结果一般比实际的活菌数偏高 C．进行平板划线接种时，第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始 D．平板划线法和稀释涂布平板法都可以获得土壤固氮菌的纯培养物 3．(23-24高二下·黑龙江大庆龙凤区大庆第四中学·期末)下列有关微生物的培养技术及应用的叙述，错误的是（    ） A．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质 B．利用以尿素为唯一氮源的培养基能分离出合成脲酶的微生物 C．用紫外灯对密闭教室消毒前，适量喷洒消毒液可强化消毒效果 D．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 4．(23-24高二下·黑龙江哈尔滨道里区哈尔滨第三中学校·期末)尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH₃ B．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 C．取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 5．(23-24高二下·黑龙江哈师大附中和大庆铁人中学·期末)发酵工程在工业生产上得到广泛应用，如图表示谷氨酸的生产流程，下列说法错误的是（    ） A．①为诱变育种，②为扩大培养，目的是增加菌种数量 B．发酵过程需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等 C．发酵罐中pH的改变，会影响菌种的生长繁殖以及谷氨酸的形成 D．发酵工程的中心环节是培养基配制后的灭菌过程，灭菌要彻底 二、多选题 6．(23-24高二下·吉林白山盟校·期末)微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料。研究人员进行产油脂芽孢杆菌的筛选，从a平板初筛后得到b平板中的菌落1~5，通过原位影印到c平板并进行染色，结果如d所示，将b平板上的目标菌株接种到e平板上。已知苏丹黑B能使脂类物质呈黑色，下列分析正确的是（    ）    A．a平板和b平板都需要以油脂作为唯一的碳源 B．土壤菌液经过系列稀释的目的是提高产油脂芽孢杆菌的数量 C．图示的实验结果可用作产油脂芽孢杆菌鉴定 D．可挑选b平板上的菌落2或4接种到e平板上进一步纯化培养 7．(23-24高二下·黑龙江七台河某校·期末)酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，科研人员进行了如图所示改良酵母菌种实验。下列叙述错误的是（    ） A．可用纤维素酶和果胶酶处理以获得酵母原生质体 B．用酿酒酵母酿酒时，要对谷物原料进行糖化处理 C．在培养基X接种融合酵母菌的方法是平板划线法 D．以产生酒精的能力作为最终鉴定目的菌的指标 三、解答题 8．(23-24高二下·吉林吉林·期末)滚管培养法是分离厌氧微生物的常用方法，其过程为：先将样品稀释液注入盛有50℃左右培养基的密封试管中，然后将试管平放于盛有冰块的盘中迅速滚动，带菌的培养基会在试管内壁凝固成薄层，培养一段时间后即可获得单菌落。研究小组按照如图所示流程分离反刍动物瘤胃中的纤维素分解菌。回答下列问题：    (1)实验中所用到的培养皿、试管和培养基等均需要进行灭菌处理。其中必须用湿热灭菌法进行灭菌的是 ，其不能使用干热灭菌法灭菌的原因有 （答两点）。 (2)Ⅰ过程所用培养基中 （填“需要”或“不需要”）添加凝固剂。为了筛选可分解纤维素的微生物，在配制Ⅱ过程所用培养基时，应注意 （从培养基成分角度分析）。Ⅲ过程可根据菌落特征来初步区分不同种类的纤维素分解菌，原因是 。 (3)科研小组利用分离得到的3株纤维素分解菌，在适宜条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。 菌株 秸秆总量（g） 秸秆残量（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） 甲 2.00 1.51 24.50 16.14 乙 2.00 1.53 23.50 14.92 丙 2.00 1.42 29.00 23.32 ①该实验应在 （填“有氧”或“无氧”）条件下进行，实验的自变量是 。 ②据表分析，纤维素酶活力最高的是菌株 ，理由是 。 四、解答题组 9．(23-24高二下·黑龙江大庆龙凤区大庆第四中学·期末)Ⅰ．酒文化在中国源远流长，北魏贾思勰所著的《齐民要术》酿酒篇，记载了完整的酿酒工序。下图为传统白酒酿造工艺流程，回答相关问题：    (1)糖化主要是利用酒曲中的微生物将 ，形成糖浆。 (2)密坛发酵温度控制在 。发酵过程中，每隔一定时间需将坛盖拧松，原因是 。 Ⅱ．一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效讲解一次性口罩的细菌，请回答下列问题： (3)选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度 的土壤用于分离目标菌株，在该环境中筛选的原理是 。 (4)欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用 法。根据下图操作能计算出1g该土壤中约有 个高效降解一次性口罩的目的菌。    (5)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是 。 五、实验题 10．(23-24高二下·黑龙江大庆第四中学·)研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌(目标菌)，并对其进行研究。回答下列问题： (1)在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培养基上进行培养，为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌，培养基的常规灭菌方法是 ,调pH 应在灭菌 (填“前”或“后”)。 (2)从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B 和C 三种菌落(如图所示)。如果要得到淀粉酶活性最高的菌株, 应该选择 (填“A”“B”或“C”)菌落进一步纯化。 (3)通过平板划线法获取单菌落时，每次划线都要从上次划线的末端开始，原因是 。 1 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题一 发酵工程 一、单选题 1．(23-24高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)平板接种常用在微生物培养中。下列叙述错误的是（    ） A．不含氮源的平板不能用于微生物培养 B．平板划线时接种环使用前必须进行灭菌 C．培养基先调节pH再进行高压蒸汽灭菌 D．从第一次划线的末端开始进行第二次划线 【答案】A 【来源】内蒙古自治区巴彦淖尔市2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】平板划线法：①将接种环放到火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。②在火焰旁冷却接种环。同时，拔出试管的棉塞。③将试管口通过火焰。④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线，注意不要将最后一次划线与第一次的相连。 【详解】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误； B、进行平板划线时，接种环使用前必须进行灼烧灭菌，冷却后用于接种，B正确； C、培养基先调节pH再进行高压蒸汽灭菌，C正确； D、平板划线法接种微生物时，从第一次划线的末端开始进行第二次划线，将菌体逐渐分散，D正确。 故选A。 2．(23-24高二下·内蒙古赤峰·期末)近年来，微生物肥料、微生物农药和微生物饲料在农业生产上得到广泛使用。下列关于微生物肥料、微生物农药和微生物饲料的说法，错误的是（    ） A．微生物肥料中的物质有可能会增进土壤肥力，但不可能抑制土壤病原微生物生长 B．微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，如可用白僵菌防松毛虫等 C．微生物饲料主要是利用细菌、酵母菌等微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体制成的 D．使用的微生物肥料、微生物农药和微生物饲料并不一定都是利用微生物的活细胞 【答案】A 【来源】内蒙古自治区赤峰市2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，常见的有根瘤菌肥、固氮菌肥等。 【详解】A、发酵生产的微生物肥料中的微生物通过自身生命活动产生丰富的活性物质，这些活性物质可以刺激和调节植物生长发育，改善土壤结构，增加土壤肥力，改善植物营养环境，还可以分解土壤中的有机物质，促进土壤中难溶性物质的溶解，抑制病原微生物的生长和繁殖提高农作物的产量和品质，A错误； B、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害，将成为重要的生物防治手段，以达到防治的效果和减少环境污染的目的，B正确； C、微生物饲料主要是利用微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体来生产饲料的，能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高，C正确； D、使用的微生物肥料、微生物农药和微生物饲料并不一定都是利用微生物的活细胞，也可以是其代谢产物，D正确。 故选A。 3．(23-24高二下·辽宁辽阳·期末)我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如腐乳、果酒、果醋和泡菜等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，正确的是（　　） A．醋酸菌能将酒精转化成乙酸 B．家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌 C．腐乳制作中起作用的微生物主要是曲霉 D．泡菜制作时需要保持有氧环境 【答案】A 【来源】辽宁省辽阳市2023-2024学年高二下学期期末生物试卷 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧气充足，醋酸菌将乙醇变为乙醛，乙醛变为醋酸。 【详解】A、在氧气充足、糖源不足时，醋酸菌能将酒精转化成乙酸，A正确； B、家庭制作果酒时菌种来自原料表面的酵母菌，不需要额外添加酵母菌，B错误； C、腐乳制作中起作用的微生物主要是毛霉，C错误； D、泡菜腌制过程中起作用的主要是乳酸菌，乳酸菌为厌氧菌，因此泡菜制作时需要保持无氧环境，D错误。 故选A。 4．(23-24高二下·吉林吉林·期末)鱼茶味酸而微咸、甘香可口，是海南黎族的一种传统发酵食品，其发酵菌种主要是乳酸菌。下列叙述错误的是（    ） A．鱼茶发酵初期和结束时发酵液中均只有乳酸菌 B．鱼茶味酸与乳酸菌无氧呼吸产生乳酸有关 C．乳酸菌还可以用于制作酸奶、泡菜等食品 D．制作鱼茶时所用发酵装置的充气口应关闭 【答案】A 【来源】吉林省吉林市2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将葡萄糖氧化为乳酸。 【详解】A、鱼茶发酵初期的发酵菌群有乳酸菌、醋酸菌、酵母菌和丝状真菌等，发酵结束时由于氧气已耗尽，好氧菌消失，除主要菌群乳酸菌外，还有酵母菌等可以进行无氧呼吸的菌群，A错误； BC、微生物发酵在食品制作中具有重要作用，如制作酸奶和泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，使得奶、菜、鱼茶味酸呈现一种特殊的风味，还不改变其品质，BC正确； D、乳酸菌是厌氧菌，制作鱼茶时发酵装置的充气口应关闭，D正确。 故选A。 5．(23-24高二下·吉林部分名校·)山楂醋中富含多种维生素、黄酮、果酸、矿物质、三萜类物质等营养物质。利用山楂制作果醋的大致流程为先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵10天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵12～15天。下列有关叙述错误的是（    ） A．酵母菌在缺氧条件下进行发酵，将山楂中的糖类转化为酒精和二氧化碳 B．醋酸杆菌在有氧条件下将酵母菌产生的酒精氧化为醋酸 C．发酵过程中，酵母菌和醋酸杆菌的代谢产物都对山楂醋的风味有重要影响 D．在整个发酵过程中，酵母菌发酵时的温度一般要高于醋酸杆菌发酵时的温度 【答案】D 【来源】吉林省部分名校2023-2024学年高二下学期联合考试生物试题 【分析】果酒制作的原理是：在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。 【详解】A、酵母菌在缺氧条件下进行无氧呼吸，将山楂中的糖类转化为酒精和二氧化碳，A正确； B、醋酸杆菌在有氧、糖源不足的条件下将酵母菌产生的酒精氧化为醋酸，B正确； C、发酵过程中，酵母菌和醋酸杆菌的代谢产物都对山楂醋的风味有重要影响，C正确； D、果酒发酵的适宜温度为18～30℃，果醋发酵为30～35℃，故在整个发酵过程中，酵母菌发酵时的温度一般要低于醋酸杆菌发酵时的温度，D错误。 故选D。 6．(23-24高二下·辽宁实验中学·期末)微生物的实验室培养有较高的技术要求，下列操作不符合规范的是（    ） A．浸泡在酒精中的玻璃涂布器无需再灼烧灭菌 B．配制培养基时，应先调节 pH，再进行灭菌处理 C．倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置 D．用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环 【答案】A 【来源】辽宁省实验中学2023-2024学年高二下学期7月期末考试生物试题 【分析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）计算；（2）称量；（3）溶化；（4）调pH；（5）灭菌；（6）倒平板。 【详解】A、为防止杂菌污染，浸泡在酒精中的玻璃涂布器也需再灼烧灭菌，A符合题意； B、配置培养基的过程中，为了防止调pH时造成对培养基的污染，应先调节 pH，再进行灭菌处理，B不符合题意； C、倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置，防止水珠落到培养基上，C不符合题意； D、用平板划线法分离大肠杆菌时，第一次划线前和每次划线后，都要对接种环进行灼烧灭菌，D不符合题意。 故选A。 7．(23-24高二下·黑龙江哈尔滨六校·期末)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术主要包括消毒和灭菌。下列相关叙述正确的是（    ） A．微生物培养所用的培养基通常用干热灭菌法进行灭菌 B．利用干热灭菌法进行灭菌的物品需要有耐高温的特点 C．加入培养基中的指示剂和染料不需要进行灭菌 D．巴氏消毒法能彻底杀死牛奶中所有微生物，包括芽孢和孢子 【答案】B 【来源】黑龙江省哈尔滨市六校2023-2024学年高二下学期期末联考生物试卷 【分析】1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 2、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用干微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 【详解】A、微生物培养所用的培养基需要保持水分，通常用高压蒸汽进行灭菌，A错误； B、耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃制品和金属用具，可用干热灭菌法进行灭菌，B正确； C、加入培养基中的指示剂和染料需要进行灭菌，C错误； D、巴氏消毒法是在62~65℃消毒30min或80~90℃处理30s~1 min，可消灭牛奶中大多数微生物，不包括芽孢和孢子，但基本不破坏其营养，D错误。 故选B。 二、多选题 8．(23-24高二下·吉林辽源五校·期末)微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（    ） A．果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃ B．制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸 C．多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等 D．制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳 【答案】ABD 【来源】吉林省辽源市五校2023-2024学年高二下学期期末联考生物试题 【分析】发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。人们可以通过传统发酵技术或发酵工程来进行发酵生产。传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主。发酵工程一般包括菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等环节。 【详解】A、果酒发酵过程温度控制在18-30℃，果醋发酵过程温度控制在30 〜35 ℃，A错误； B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，可利用葡萄中的糖（或乙醇）生成醋酸，B错误； C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确； D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，乳酸菌的无氧呼吸不会产生二氧化碳，D错误。 故选ABD。 9．(23-24高二下·黑龙江大庆第四中学·)目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。下列叙述错误的是（    ） A．乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物 B．果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源 C．果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染 D．醋酸菌发酵在有氧条件下进行，其有氧呼吸的主要场所是线粒体 【答案】BC 【来源】黑龙江省大庆市第四中学2023-2024学年高二下学期第二次检测生物试题 【分析】原核生物没有以核膜为界限的细胞核，只有拟核；原核生物除了支原体都具有细胞壁，成分主要是肽聚糖；原核生物具有细胞膜、细胞质和核糖体；原核生物遗传物质是DNA，DNA为环状裸露的，不构成染色体。 【详解】A、酵母菌属于真核生物，A错误； B、果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源，B正确； C、果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染，杂菌污染不但影响口味，还可能产生有害物质，C正确； D、醋酸菌是好氧菌，发酵在有氧条件下进行，但是它是原核生物，没有线粒体，D错误。 故选BC。 三、解答题 10．(23-24高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)结核杆菌是引起结核病的病原体。结核病患者的利福平（一种抗生素）耐药率不断上升给结核病治疗带来较大的困难。为了筛选新的抗结核药物，科研人员进行了如图所示的研究。已知罗氏固体培养基中有抑制杂菌生长的物质。回答下列问题： (1)利福平是一种广谱抗生素药物，对结核杆菌有较强抗菌作用。结核病患者的利福平耐药率不断上升，原因是在利福平的长期选择下，结核杆菌种群中 。 (2)筛选结核杆菌时，培养基中的牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和 ，培养基的酸碱性要调至 。 (3)实验中，步骤①的目的是 ，步骤②的目的是 。步骤③使用的接种工具是 。 (4)步骤④中鉴定细菌时，可观察菌落的 （答出2点）。 【答案】(1)不具抗性个体比例降低，抗利福平的基因频率增加，抗利福平个体的比例升高 (2) 维生素 中性或弱碱性 (3) 目的是扩大培养目的菌 筛选目的菌株 接种针或接种环 (4)形态、大小 【来源】内蒙古自治区巴彦淖尔市2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】图中①是将细菌接种在基本培养基上，目的是扩大培养目的菌，②是将扩繁后的菌种接种到选择培养基上，筛选目的菌株，③是挑选菌落，④是对菌落进行观察鉴定。 【详解】（1）结核病患者的利福平耐药率不断上升，原因是在利福平的长期选择下，结核杆菌种群中不具抗性个体比例降低，抗利福平的基因频率增加，抗利福平个体的比例升高。 （2）培养基中的牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素，结核杆菌是细菌，培养细菌需要调节pH至中性或弱碱性。 （3）①是将细菌接种在基本培养基上，目的是扩大培养目的菌，②是将扩繁后的菌种接种到选择培养基上，筛选目的菌株，③是挑选菌落，可以采用的工具是接种针或接种环。 （4）鉴定细菌可以观察菌落的形态、大小等特征。 一、单选题 1．(23-24高二下·吉林松原·期末)味精是常用的食品添加剂，主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌等发酵可以得到谷氨酸。谷氨酸发酵的培养基成分有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图所示，发酵过程中要不断通入空气，并通过搅拌形成细小的气泡，当培养基中碳氮比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少：当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量增大。在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌的代谢物是乳酸或琥珀酸。下列分析正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌的细胞结构和代谢类型都类似于酵母菌的 B．谷氨酸的分离、提纯是利用发酵工程生产谷氨酸的中心环节 C．发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH D．谷氨酸棒状杆菌的代谢物会抑制杂菌的生长，通入的空气无须灭菌 【答案】C 【来源】吉林省松原市2023—2024学年高二下学期期末测生物试卷 【分析】分析题图：图示表示连续培养的方法，以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，此工艺流程可以大大提高生产效率。该过程中需要通入无菌空气以及添加培养液，说明微生物的新陈代谢的方式是异养需氧型。 【详解】A、谷氨酸棒状杆菌是细菌，是原核生物，而酵母菌是真核细胞，因此两者的细胞结构不同，而代谢类型两者都是兼性厌氧下型，因此两者比较类似，A错误； B、利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵是发酵工程的中心环节，B错误； C、谷氨酸棒状杆菌发酵的过程需要适宜的条件，因此发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH，C正确； D、由于空气会带入杂菌，因此通入的空气必修灭菌，以防杂菌的污染，因为有些杂菌能以谷氨酸棒状杆菌的生长产生的次级代谢物作为营养物质生长，D错误。 故选C。 2．(23-24高二下·吉林部分名校·)生物固氮在农业生产中具有十分重要的作用，某研究团队想对土壤固氮菌进行选择培养和计数。下列相关说法错误的是（    ） A．从土壤中筛选固氮菌时，培养基中不加入氮源 B．用稀释涂布平板法对固氮菌进行计数时，统计结果一般比实际的活菌数偏高 C．进行平板划线接种时，第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始 D．平板划线法和稀释涂布平板法都可以获得土壤固氮菌的纯培养物 【答案】B 【来源】吉林省部分名校2023-2024学年高二下学期联合考试生物试题 【分析】 微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。 （2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 【详解】A、固氮细菌能够自身固氮，从土壤中筛选固氮菌时，培养基中不加入氮源，A正确； B、用稀释涂布平板法对固氮菌进行计数时，由于一个菌落可能是由两个或多个细菌长成，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，B错误； C、进行平板划线接种时，第二次及以后的划线，都要从上一次划线的末端引线，使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落，C正确； D、对微生物进行分离、纯化可用平板划线法或稀释涂布法，因此平板划线法和稀释涂布平板法都可以获得土壤固氮菌的纯培养物，D正确。 故选B。 3．(23-24高二下·黑龙江大庆龙凤区大庆第四中学·期末)下列有关微生物的培养技术及应用的叙述，错误的是（    ） A．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质 B．利用以尿素为唯一氮源的培养基能分离出合成脲酶的微生物 C．用紫外灯对密闭教室消毒前，适量喷洒消毒液可强化消毒效果 D．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 【答案】D 【来源】黑龙江省大庆市龙凤区大庆市第四中学2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】实验室常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。 【详解】A、培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质，A正确； B、可合成尿酶的微生物能以尿素为氮源，故利用以尿素为唯一氮源的培养基能分离出合成脲酶的微生物，B正确； C、用紫外线照射30 min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果，C正确； D、为了防止污染，接种环经酒精灯火焰灭菌，但是需要冷却后再挑取菌落，以防杀死接种的微生物，D错误。 故选D。 4．(23-24高二下·黑龙江哈尔滨道里区哈尔滨第三中学校·期末)尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH₃ B．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 C．取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 【答案】D 【来源】黑龙江省哈尔滨市道里区哈尔滨市第三中学校2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、分解尿素的细菌能合成脲酶，在脲酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A正确； B、稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，一般情况下该方法统计的活菌数目比实际值偏低，B正确； C、为防止其他杂菌污染以及防止对土壤中分解尿素的细菌分离与计数造成实验结果的影响，因此取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌，C正确； D、图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D错误。 故选D。 5．(23-24高二下·黑龙江哈师大附中和大庆铁人中学·期末)发酵工程在工业生产上得到广泛应用，如图表示谷氨酸的生产流程，下列说法错误的是（    ） A．①为诱变育种，②为扩大培养，目的是增加菌种数量 B．发酵过程需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等 C．发酵罐中pH的改变，会影响菌种的生长繁殖以及谷氨酸的形成 D．发酵工程的中心环节是培养基配制后的灭菌过程，灭菌要彻底 【答案】D 【来源】黑龙江省哈师大附中和大庆铁人中学2023—2024学年高二下学期期末联考生物试题 【分析】题图分析：生产用菌种可以用基因工程、细胞工程以及诱变育种的方式获得，因此①为诱变育种；当发酵生产的产品是代谢产物时，还要采用萃取（或蒸馏或离子交换等）等分离提纯的方法进行提取，因此②为萃取（或蒸馏或离子交换等），连续培养是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。 【详解】A、结合图示可知，图中①为诱变育种，②为扩大培养，目的是增加菌种数量，为接种做准备，A正确； B、发酵过程需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以便对发酵条件和进程适时调整，B正确； C、发酵罐中pH的改变，会影响菌种的生长繁殖以及谷氨酸的形成，且还会对发酵产物的种类造成影响，C正确； D、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，此过程需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，D错误。 故选D。 二、多选题 6．(23-24高二下·吉林白山盟校·期末)微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料。研究人员进行产油脂芽孢杆菌的筛选，从a平板初筛后得到b平板中的菌落1~5，通过原位影印到c平板并进行染色，结果如d所示，将b平板上的目标菌株接种到e平板上。已知苏丹黑B能使脂类物质呈黑色，下列分析正确的是（    ）    A．a平板和b平板都需要以油脂作为唯一的碳源 B．土壤菌液经过系列稀释的目的是提高产油脂芽孢杆菌的数量 C．图示的实验结果可用作产油脂芽孢杆菌鉴定 D．可挑选b平板上的菌落2或4接种到e平板上进一步纯化培养 【答案】CD 【来源】吉林省白山市盟校2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】1、灭菌是指在强烈的理化因素条件下，杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。 2、灭菌的常用方法（1）灼烧灭菌法，例如：接种工具；（2）干热灭菌法，例如：玻璃器皿、金属用具（3）高压蒸汽灭菌法，例如：培养基及容器。 【详解】A、实验目的是筛选产油盐芽孢杆菌，a平板需要以油脂为唯一的碳源，但b平板不需要，A错误； B、土壤菌液经过系列稀释的目的是降低产油脂芽孢杆菌的数量，B错误； C、题干信息：苏丹黑B能使脂类物质呈黑色，可见图示的实验结果可用作产油脂芽孢杆菌鉴定，C正确； D、b平板中的菌落1~5是初筛获得的产油盐芽孢杆菌，可挑选b平板上的菌落2或4接种到e平板上进一步纯化培养，D正确。 故选CD。 7．(23-24高二下·黑龙江七台河某校·期末)酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，科研人员进行了如图所示改良酵母菌种实验。下列叙述错误的是（    ） A．可用纤维素酶和果胶酶处理以获得酵母原生质体 B．用酿酒酵母酿酒时，要对谷物原料进行糖化处理 C．在培养基X接种融合酵母菌的方法是平板划线法 D．以产生酒精的能力作为最终鉴定目的菌的指标 【答案】AC 【来源】黑龙江省七台河市某校2023-2024学年高二下学期期末考试生物试卷 【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物。 【详解】A、酵母菌的细胞壁成分是几丁质，不能用纤维素酶和果胶酶处理以获得酵母原生质体，A错误； B、酿酒酵母产酒精能力强，但没有水解淀粉酶的能力，因此用酿酒酵母酿酒时，要对谷物原料进行糖化处理，B正确； C、据图所示，菌种M在培养基中均匀分布，说明在培养基X接种融合酵母菌的方法是稀释涂布平板法，C错误； D、科研目的是实现以谷物为原料高效生产酒精，因此以产生酒精的能力作为最终鉴定目的菌的指标，D正确。 故选AC。 三、解答题 8．(23-24高二下·吉林吉林·期末)滚管培养法是分离厌氧微生物的常用方法，其过程为：先将样品稀释液注入盛有50℃左右培养基的密封试管中，然后将试管平放于盛有冰块的盘中迅速滚动，带菌的培养基会在试管内壁凝固成薄层，培养一段时间后即可获得单菌落。研究小组按照如图所示流程分离反刍动物瘤胃中的纤维素分解菌。回答下列问题：    (1)实验中所用到的培养皿、试管和培养基等均需要进行灭菌处理。其中必须用湿热灭菌法进行灭菌的是 ，其不能使用干热灭菌法灭菌的原因有 （答两点）。 (2)Ⅰ过程所用培养基中 （填“需要”或“不需要”）添加凝固剂。为了筛选可分解纤维素的微生物，在配制Ⅱ过程所用培养基时，应注意 （从培养基成分角度分析）。Ⅲ过程可根据菌落特征来初步区分不同种类的纤维素分解菌，原因是 。 (3)科研小组利用分离得到的3株纤维素分解菌，在适宜条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。 菌株 秸秆总量（g） 秸秆残量（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） 甲 2.00 1.51 24.50 16.14 乙 2.00 1.53 23.50 14.92 丙 2.00 1.42 29.00 23.32 ①该实验应在 （填“有氧”或“无氧”）条件下进行，实验的自变量是 。 ②据表分析，纤维素酶活力最高的是菌株 ，理由是 。 【答案】(1) 培养基 干热灭菌的温度要高且时间比较久，会致使培养基内的营养物资被破坏殆尽，而且干热灭菌对培养基的灭菌很难透彻 (2) 需要 以纤维素为唯一的碳源 在一定的培养条件下,不同微生物表现出各自稳定的菌落特征 (3) 无氧 不同的菌株 丙 丙菌株的秸秆残量最少、丙菌株的纤维素降解率最高 【来源】吉林省吉林市2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】1、纤维素酶是一类复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 2、分解纤维素的微生物分离的实验原理：（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；（2）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。 【详解】（1）由于干热灭菌的温度要高且时间比较久，会致使培养基内的营养物资被破坏殆尽，而且干热灭菌对培养基的灭菌很难透彻，所以用湿热灭菌法对培养基进行灭菌。 （2）Ⅰ过程滚管培养是固体培养基需要加入凝固剂。为了筛选可分解纤维素的微生物，则配制Ⅱ过程所用培养基时，应该以纤维素为唯一的碳源。由于在一定的培养条件下,不同微生物表现出各自稳定的菌落特征，所以Ⅲ过程可根据菌落特征来初步区分不同种类的纤维素分解菌。 （3）①滚管培养法是分离厌氧微生物的常用方法，所以纤维素分解菌是厌氧菌，则该实验应在无氧条件下进行，本实验利用得到的3株纤维素分解菌，在适宜条件下进行玉米秸秆降解实验，则实验的自变量是不同的菌株。 ②根据表中数据，丙菌株的秸秆残量为1.42g，比甲和乙菌株的低；纤维素降解率为23.32%，比甲和乙菌株的高，所以纤维素酶活力最高的是菌株丙。 四、解答题组 9．(23-24高二下·黑龙江大庆龙凤区大庆第四中学·期末)Ⅰ．酒文化在中国源远流长，北魏贾思勰所著的《齐民要术》酿酒篇，记载了完整的酿酒工序。下图为传统白酒酿造工艺流程，回答相关问题：    (1)糖化主要是利用酒曲中的微生物将 ，形成糖浆。 (2)密坛发酵温度控制在 。发酵过程中，每隔一定时间需将坛盖拧松，原因是 。 Ⅱ．一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效讲解一次性口罩的细菌，请回答下列问题： (3)选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度 的土壤用于分离目标菌株，在该环境中筛选的原理是 。 (4)欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用 法。根据下图操作能计算出1g该土壤中约有 个高效降解一次性口罩的目的菌。    (5)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是 。 【答案】(1)淀粉分解 (2) 18～30℃ 排出酵母菌无氧呼吸产生的CO2，（防止发酵坛炸裂） (3) 大 根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中筛选 (4) 稀释涂布平板 6．8×107 (5)杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染 【来源】黑龙江省大庆市龙凤区大庆市第四中学2023-2024学年高二下学期7月期末生物试题 【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。 【详解】（1）淀粉属于多糖，是植物细胞的主要储能物质，糖化主要是利用酒曲中的微生物将淀粉分解，形成糖浆。 （2）果酒发酵所需菌种是酵母菌，密坛发酵温度控制在18～30℃；果酒发酵是酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸，产物有二氧化碳，发酵过程中，每隔一定时间需将坛盖拧松，原因是排出酵母菌无氧呼吸产生的CO2，防止发酵坛炸裂。 （3）培养微生物时，根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中筛选，分析题意，本实验目的是筛选出能高效降解一次性口罩，应从富含该微生物的环境中进行筛选，故选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度高（大）的土壤用于分离目标菌株。 （4）微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中能够用于计数的是稀释涂布平板法；计数时应选择菌落数在30-300之间的进行统计，据图可知，符合要求的菌落数有62、 68、 74，且共稀释了105倍，则1g该土壤中约有（62＋ 68＋ 74）/0.1×105=6.8×107个。 （5）菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布，灼烧的目的是杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染。 五、实验题 10．(23-24高二下·黑龙江大庆第四中学·)研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌(目标菌)，并对其进行研究。回答下列问题： (1)在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培养基上进行培养，为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌，培养基的常规灭菌方法是 ,调pH 应在灭菌 (填“前”或“后”)。 (2)从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B 和C 三种菌落(如图所示)。如果要得到淀粉酶活性最高的菌株, 应该选择 (填“A”“B”或“C”)菌落进一步纯化。 (3)通过平板划线法获取单菌落时，每次划线都要从上次划线的末端开始，原因是 。 【答案】(1) 淀粉 高压蒸汽灭菌/湿热灭菌 前 (2)B (3)线条末端细菌的数目较少，最终可得到由单个细胞繁殖而成的菌落 【来源】黑龙江省大庆市第四中学2023-2024学年高二下学期第二次检测生物试题 【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生 长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】（1）分析题意可知，该实验目的是欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，故在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培养基上进行培养，这样能分泌淀粉酶的细菌才能利用培养基中的碳源，不能分泌淀粉酶的细菌不能利用培养基中的碳源；培养基的灭菌方法是湿热灭菌，通常是高压蒸汽灭菌；为避免杂菌污染，应先调pH后灭菌。 （2）淀粉遇碘液变蓝，若细菌产生淀粉酶，那么培养基中的淀粉被分解，会出现透明圈，而且细菌周围的透明圈越大，产生的淀粉酶活性越强。分析题图可知，从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上B菌落的透明圈最大，说明B菌产生的淀粉酶活力最高，故应该选择B菌落进一步纯化。 （3）通过平板划线法获取单菌落时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是线条末端细菌的数目较少，最终可得到由单个细胞繁殖而成的菌落。 1 学科网（北京）股份有限公司 $$