内容正文:
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实验 2.1 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
一、实验目的
学会植物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质和淀粉的鉴定。
二、实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中有关有机物产生特定颜色反应,可以根据特定的颜色反应,鉴定生
物组织中还原性糖、脂肪、淀粉和蛋白质的存在。
1. 班氏试剂鉴定还原糖原理:班氏试剂(也称斐林试剂)由质量浓度为 0.1g/mL 的氢氧化钠溶液和
质量浓度为 0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,两者混合后,立即生成淡蓝色的 Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与
加入的还原糖(如葡萄糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的 Cu2O沉淀,而葡萄糖本身被氧化成葡萄
糖酸。溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
2. 苏丹Ⅲ鉴定脂肪原理:苏丹Ⅲ与脂肪有强烈的亲和力,能使脂肪染成橘黄色。
3. 双缩脲试剂鉴定蛋白质原理:双缩脲试剂的成分是质量浓度为 0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓
度为 0.01g/mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与 Cu
2+
作用,形成
紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽
键,因此蛋白质都可以与双缩脲试剂发生颜色反应。
4. 班氏试剂与双缩脲试剂的比较
班氏试剂 双缩脲试剂
甲液 乙液 A液 B液
成分
1柠檬酸钠和无水碳酸钠溶于水中。再
将结晶硫酸铜溶解在水中,将此溶液加入
上述溶液中,最后稀释得到
0.1 g/mL
NaOH溶液
0.01 g/mL
CuSO4溶液
鉴定物质 还原糖 蛋白质
添加顺序 甲、乙两液等量混合后立即使用
先加入 A液 1 mL,摇匀,
再加入 B液 4滴,摇匀
反应条件 50~65℃温水加热 不需加热,摇匀即可
原理 新配制的 Cu(OH)2溶液 碱性环境下的 Cu
2+
反应现象 浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 浅蓝色→紫色
三、材料
1%可溶性淀粉、1%葡萄糖溶液、10%鸡蛋清溶液、植物油、鸡蛋、梨、马铃薯、结球甘蓝。
四、仪器和试剂
榨汁机、量筒、小试管、试管架、酒精灯、滴管、漏斗、火柴、纱布、班氏试剂、双缩脲试剂、碘液、
苏丹Ⅲ染液、蒸馏水。
五、实验过程
1. 已知成分的鉴定(预备实验)
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材料 加法与试剂 现象 结论
1%淀粉糊
在试管中加 1%淀粉糊(多
糖)2mL,滴加碘液 2滴
蓝色 淀粉糊中有大量淀粉存在(多糖鉴定法)
1%葡萄
糖溶液
在试管中加葡萄糖溶液 2 mL,滴
加 2滴班氏试剂,均匀加热至沸腾
砖红色 葡萄糖属于还原性糖(还原性糖鉴定法)
10%鸡蛋
清溶液
在试管中加鸡蛋清溶液 2mL,然后
加入 2mL5%NaOH溶液震荡,再滴加
2~3滴 1%CuSO4 溶液(双缩脲试剂)
紫色 蛋清中含有蛋白质(蛋白质鉴定法)
植物油
在试管中加入植物油 2 mL,
逐步滴加苏丹Ⅲ染液几滴
橘红色 植物油属于脂肪(脂肪鉴定法)
2. 未知样品成分的鉴定(正式试验)
(1)制作样品匀浆:将样品(鸡蛋、梨、马铃薯、结球甘蓝)剪碎、研磨、过滤后滤液分别装入四
支试管中待用。
(2)检测:分别向上述四支试管中加入对应的检测试剂,检测待测样品,观察并将实验结果写入实验
报告。
六、实验注意点
1. 在鉴定可溶性糖的实验中:试管中的溶液进行加热时,试管底部不要触及烧杯底部,另外,试管
口不要朝向实验者,以免沸腾的溶液冲出试管,造成烫伤。应该用试管夹夹住试管上部,放入盛 50~
65℃温水的大烧杯中加热。
2. 其他注意事项:若用蛋白作实验材料,必须稀释,以免实验后黏住试管,不易洗刷。还原糖、蛋
白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,要留出一部分组织样液,以便与鉴定后的样液颜色作对
比,增强实验的说服力。
例 1 在鉴定可溶性糖的实验中,对试管中的溶液进行加热时,下列操作中不正确的是( )。
A. 将这支试管放进盛开水的大烧杯中
B. 试管底部不要触及烧杯底部
C. 试管口不要朝向实验者
D. 试管底部紧贴烧杯底部
例 2 在过氧化氢酶溶液中加入双缩脲试剂,其结果应该是( )。
A. 产生气泡 B. 溶液呈紫色
C. 溶液呈蓝色 D. 产生砖红色沉淀
例 3 下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是( )。
A. 用于鉴定还原糖的试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定
B. 脂肪的鉴定需要显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴
C. 鉴定还原糖时,要加入试剂甲液摇匀后,再加入乙液
D. 用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂 A液与 B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现
用
例 4 班氏试剂是一种能与可溶性还原糖发生颜色反应的试剂,在医院中常用。现有一瓶配好的试剂,
可能用它来鉴定的疾病是( )。
A. 白血病 B. 感冒发烧 C. 糖尿病 D. 甲亢
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例 5 下列物质中,与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应最明显的是( )。
A. 苹果组织样液 B. 豆浆 C. 浸软的油葵种子 D. 土豆组织样液
例 6 某商场所卖的脱脂奶粉被怀疑为假冒伪劣产品,某生物研究性学习小组的同学想把调查脱脂奶粉
的合格率作为研究性课题。假如你是课题组成员,交给你的任务是鉴定真假奶粉。(相关资料:①全脂奶粉
含有蛋白质、脂肪和蔗糖等成分;脱脂奶粉含有高蛋白、低脂肪和糖类。②假冒脱脂奶粉有两种:一是用
全脂奶粉冒充脱脂奶粉;二是用淀粉冒充)我们可选择以下哪种药品加以鉴定?( )。
A. 苏丹 Ⅲ和碘液 B. 试剂和碘液 C. 双缩脲试剂和苏丹Ⅲ D. 碘液
例 7 现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶,请你通过实验将它们分开。提供的试
剂有:双缩脲试剂、班氏试剂和淀粉溶液。下列相关说法中错误的是( )。
A. 用双缩脲试剂可将 4瓶溶液分成 2组:显色的一组和不显色的一组
B. 用淀粉溶液可以鉴定稀蛋清和淀粉酶
C. 用班氏试剂可以鉴定葡萄糖和淀粉
D. 本实验只使用班氏试剂一次
例 8 生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是( )。
A.可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀
B.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
C.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D.使用班氏试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
例 9 下列关于实验的描述中,正确的是( )。
A.将在蔗糖溶液中已发生质壁分离的洋葱表皮细胞转到更高浓度的蔗糖溶液中,则发生质壁分离复
原
B.将班氏试剂加入到蔗糖溶液中,加热后出现砖红色沉淀
C.将肝脏研磨液煮沸冷却后,加入到过氧化氢溶液中立即出现大量气泡
D.将双缩脲试剂加入到蛋清稀释液中,溶液变成紫色
例 10 下列健康人的 4种液体样本中,能与双缩脲试剂发生紫色反应的是( )。
①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液
A.①③ B.①④ C.②③ D.②④
例 11 甲乙两溶液中的溶质为单一物质,根据下表可推得( )。
溶液 双缩脲试剂 碘液 班氏试剂
甲 + - -
乙 - ++ -
甲、乙混合 + + +
注:“+”显色,“++”显色更深;“-”不显色
A.甲溶液含有淀粉 B.乙溶液含有还原性糖
C.混合溶液不含淀粉 D.混合溶液含有淀粉酶
例 12 青苹果汁遇碘溶液显蓝色,熟苹果汁能还原试剂溶液,这说明( )。
A. 青苹果汁只含淀粉不含糖类 B. 苹果转熟时只含糖类不含淀粉
C. 苹果转熟时淀粉水解为单糖 D. 苹果转熟时单糖聚合成淀粉
例 13 将发芽小麦研磨后装入一透析袋内,然后此袋放入装有蒸馏水的大烧杯中,一段时间后,再从烧
杯液体中取样,分装于试管中。分别加入不同试剂进行相应的测试,下列叙述中正确的是( )。
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选项 取样时间 检测试剂 检测结果
A 第 10天 班氏试剂 不显色
B 第 20天 双缩脲试剂 不显色
C 第 30天 苏丹Ⅲ试剂 橘黄色
D 第 40天 碘液 蓝色
A. 加入适量的班氏试剂,隔水煮沸,有砖红色沉淀
B. 加入适量的双缩脲试剂,摇匀,溶液变紫色
C. 加入适量的龙胆紫溶液,隔水加热,溶液变蓝紫色
D. 加入适量的碘液,摇匀,溶液变为深蓝色
例 14 在 1、3、5号试管中分别加入 2 mL蒸馏水,2、4、6号试管中分别加入 2 mL 发芽的小麦种子
匀浆样液,然后在 1~4号试管中适量滴加班氏试剂,5、6号试管中适量滴加双缩脲试剂,摇匀。预期观
察到的实验现象是( )。
①呈蓝色的是 1、2、3、5号
②三组实验中甲组和乙组的实验结果相同
③2、4号呈紫色,6号呈红黄色
④4号呈红黄色,6号呈紫色
A. ①④ B. ①③ C. ②③ D. ②④
例 15 油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如下图所示,将不同成熟阶段的种子匀浆后检测,结果
正确的是( )。
例 16 下表中关于食物中营养物质的鉴定,其中材料、试剂和显色结果均正确的是( )。
选项 鉴定成分 材料 试剂 显色结果
A 还原性糖 红心火龙果 班氏试剂加热 砖红色
B 蛋白质 鸡蛋清 双缩脲试剂 蓝色
C 淀粉 大米 碘液 黑色
D 脂肪 大豆油 苏丹 III试剂 橘红色
例 17 实验测得甲、乙、丙三种植物的干种子中三大类有机物颜色反应如下表,下列有关说法中正确
的是( )。
试剂
种类
碘液 苏丹Ⅲ 双缩脲
甲 ++++ ++ +
乙 ++ ++++ ++
丙 + ++ ++++
注:“++++”表示颜色反应较深,“++”表示颜色反应中等,“+”表示颜色反应较低
A. 三类有机物都可以作为细胞内的能源物质
B. 种子中三类有机物来源与光合作用无关
C. 形成同等质量的种子,甲需要矿质元素的量最多
D. 同等质量种子萌发,丙吸水能力最弱
例 18 在下列四个试管中分别加入一些物质,甲试管:经高温煮沸冷却后的豆浆;乙试管:人体必需的
8 种氨基酸溶液;丙试管:蛋清和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水。则上述四个试管中加入
甲组(室温) 乙组(100℃水浴) 丙组(室温)
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双缩脲试剂振荡后,都有紫色反应的是( )。
A.甲、丙、丁 B.乙、丙、丁 C.甲、乙、丙 D.甲、乙、丁
例 19 下列关于食品安全问题的探究实验设计,其中正确的是( )。
选项 探究主题 实验试剂 预期实验结果 结论
A 某“色拉油”是否含有脂肪 苏丹Ⅲ染液
被检测液体
出现橘黄色
不含有脂肪,
但可能含有固醇
B 某“早餐奶”是否含有蛋白质 双缩脲试剂
被检测液体
出现砖红色
含有蛋白质,
但含量少于淀粉
C 某“奶片”是否添加淀粉 碘液
被检测液
体出现蓝色
含有淀粉,
不含有蛋白质
D 某“无糖” 饮料中是否含有葡萄糖 班氏试剂
被检测液体
出现砖红色
一定含有还原糖,
但不一定是葡萄糖
例 20 香蕉果实成熟过程中会逐渐变甜,如果取成熟到第 2天和第 4天的等量香蕉果肉,分别加等量
的蒸馏水制成提取液,然后如下图,在 a、c试管中各加 5mL第 2天的提取液,在 b、d试管中各加 5mL
第 4天的提取液。在 a、b试管中各加入等量碘液,在 c、d试管中加入等量的班氏试剂,煮沸,观察比
较颜色,结果是( )。
A.a、b试管呈蓝色,且 a比 b颜色浅;c、d试管呈砖红色,且 c比 d颜色浅
B.a、b试管呈蓝色,且 a比 b颜色深;c、d试管呈砖红色,且 c比 d颜色浅
C.a、b试管呈蓝色,且 a比 b颜色浅;c、d试管呈砖红色,且 c比 d颜色深
D.a、b试管呈蓝色,且 a比 b颜色深;c、d试管呈砖红色,且 c比 d颜色深
例 21 现有四种样品:水、淀粉溶液、蛋白质溶液、淀粉酶溶液,某学生用三氯乙酸(一种蛋白质变性
剂)和碘液正确鉴定出这四种样品,其实验步骤和结果见下表,根据上述实验结果,下列判断中正确的是
( )。
步骤 样品号 1 2 3 4
第一步 加三氯乙酸 无变化 浑浊 无变化 浑浊
第二步 加碘液 不变蓝 不变蓝 变蓝 不变蓝
第三步
取 2号样品与 3号样品混合,37℃保温 10分钟,加碘液变蓝;
取 4号样品与 3号样品混合,37℃保温 10分钟,加碘液不变蓝
A.1水、2淀粉酶、3淀粉、4蛋白质
B.1淀粉、2蛋白质、3淀粉酶、4水
C.1水、2蛋白质、3淀粉、4淀粉酶
D.1蛋白质、2淀粉酶、3淀粉、4水
水浴加热
碘液 班氏试剂
第 4 天
的提取液
第 2 天
的提取液
第 2 天
的提取液
第 4 天
的提取液
a b c d
a b c d