内容正文:
19世纪中期,法国酿酒业曾一度遭到毁灭性打击,葡萄酒出现了变酸变味的怪事...
[法国]巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了微生物。
细菌、真菌、病毒、原生动物等
由于制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制酸奶,但成功率低,食用后导致肠胃不适的事件屡见不鲜。
原因分析:
制作过程中有杂菌混入
怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物?
制作工具和原料灭菌
接种纯的菌种
控制发酵条件
避免杂菌进入
微生物的基本培养技术
♣微生物概述
微生物的概念:
________________________________的统称。
所有形体微小、肉眼不可见的生物
禽流感病毒
SARS病毒
第一节 微生物的培养需要适宜条件
大型真菌
微生物
原核类:
真核类
非细胞类生物——病毒
细菌、支原体、放线菌、蓝藻
酵母菌、霉菌
真 菌:
原生生物
本章中提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
♣微生物概述
♣微生物培养要求
1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
——培养基的配制
3)确保其它微生物无法混入
——无菌技术
高压蒸汽灭菌
固体培养基
2)将需要的微生物分离出来
——微生物的纯培养
2.培养基成分
1.培养基概念及作用:
物质和能量
一、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
①满足微生物生长繁殖的需求
②积累代谢产物
成分 作用 主要来源
碳源
氮源 N2,NH3,铵,硝酸盐
尿素,牛肉膏,蛋白胨
无机盐
水 溶解营养物质
生长因子 有特殊需求,调节促生长
自养微生物
异养微生物
固氮菌
硝化细菌
与细胞的化学组成及其在细胞代谢中的作用有关
(最多)
①合成有机物②能量来源
①影响微生物吸水能力
②影响微生物代谢及生长
调节渗透压
必需元素
合成含N化合物
无机碳(CO2)或有机碳(糖类)
特定维生素,氨基酸,嘌呤和嘧啶(碱基)
细菌喜荤(蛋白质:较高的有机氮) 霉菌喜素(糖类)
思考:LB培养基中提供碳源的是___________。提供氮源的是___________。
NaCl的作用是________。
酵母提取物
蛋白胨
维持渗透压
蛋白胨
酵母提取物
2.培养基成分
只有满足目标微生物的代谢需求,才能使其快速生长
可溶性淀粉+无机物
培养的微生物 需要满足的其他要求
霉菌 将pH调至_____
细菌 将pH调至_______
厌氧微生物 需要提供_____条件
需氧微生物
中性偏酸
中性偏碱
无氧
3.培养基理化特征
一、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
静置/加液体石蜡
液体培养+振荡培养
溶解氧、pH
4.培养基分类
固体培养基
液体培养基
(应用:扩大培养)
长有酵母菌菌落的固体培养基
是否含凝固剂
(如琼脂)
无
有
注:琼脂仅作为凝固剂不为微生物生长提供能量和碳源。98 ℃以上熔化,44 ℃以下凝固。
一、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
①根据培养基的物理特征分
Q:微生物在液体培养基和固体培养基中的繁殖速度是否相同?
液体培养基
大规模快速繁殖某种微生物,工业生产
平板
斜面
固体培养基
细胞与固体培养基的接触面积较小,细胞与环境间物质交换速度相对较慢,固体培养基表面的微生物生长速度比在液体培养基中慢。
菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体。
一个种群
不同菌落的形状、大小、颜色、边缘或表面光滑与否不同
固体平面培养基应用:
菌种分离、鉴定、计数
菌落
菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
不同的细菌的菌落特征不同菌落是鉴定菌种的重要依据。如菌落的大小、形状、边缘、光泽度、颜色、透明度等。
大肠杆菌菌落
乳白色,光滑,湿润
白色,粗糙,干燥
放线菌菌落
红色,光滑,湿润
原因:①开口小,不易污染
②培养基厚,营养丰富,不易干燥
③体积小,不占空间
固体斜面培养基应用:菌种保存
选择培养基:在培养基中添加/减去某种化学成分,使得只有某些特定的微生物能够生长,其他微生物均不能生长。
Q:怎样选择出抗青霉素能力的细菌?
通用培养基
所有的细菌都能生长
培养基中加青霉素
没有抗青霉素能力的菌落被淘汰
培养基+青霉素
【易错】病毒为非细胞结构生物,只能在活细胞中营寄生生活,不能直接利用培养基来培养病毒。
选择培养基、鉴别培养基
4.培养基分类
②根据培养基的功能分
具有抗青霉素能力的菌落
选择培养基
选出自养细菌?选出固氮菌?选出能利用淀粉的细菌?
以淀粉为唯一碳源
鉴别培养基:
加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂,让目的菌显现出特征现象。
选择培养基、鉴别培养基
4.培养基分类
②根据培养基